一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種復(fù)合酶提取中藥材中三七總皂苷的方法，屬中藥領(lǐng)域。特別涉及一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，本發(fā)明采用鮮三七為提取原料，經(jīng)過(guò)粉碎制粒，酶解處理，合并濾液濃縮處理，醇沉處理，洗脫處理和脫色處理從而進(jìn)行三七總皂苷的提取，將β-淀粉酶引入酶提取鮮三七中皂苷成分的新工藝中，以鮮三七為原料，縮短傳統(tǒng)生產(chǎn)周期，提高三七總皂苷的質(zhì)量和提取率，本發(fā)明有利于云南三七的市場(chǎng)調(diào)節(jié)、控制能力，實(shí)現(xiàn)對(duì)鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟(jì)效益增長(zhǎng)，從而促進(jìn)三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
【專利說(shuō)明】一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】:
本發(fā)明涉及一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，屬中藥領(lǐng)域。
[0002]【背景技術(shù)】:
三七為五加科人參屬植物，主產(chǎn)于云南，始載于本草綱目，為我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥材，具有活血化瘀，消腫定痛，止血化瘀等功效，三七不同生長(zhǎng)部位含有二十多種皂苷成分，其主要活性成分為三七總皂苷，三七總皂苷具有增加冠脈血流量，保護(hù)腦組織，擴(kuò)血管和降壓等作用。
[0003]目前的三七總皂苷提取工藝主要有水煎醇沉法、乙醇回流法和滲漉法。其中水煎醇沉法在水煎煮過(guò)程中因三七藥材含有大量的淀粉和多糖容易糊化；醇沉后由于沉淀的吸附作用皂苷損失較大，提取率較低，且產(chǎn)品組分的含量不太穩(wěn)定，多用于食品的開(kāi)發(fā)；滲漉法提取率較高，操作簡(jiǎn)單，提取液所含雜質(zhì)少，但是溶劑消耗過(guò)大，主要用于藥品；乙醇回流法方法簡(jiǎn)便，工藝條件易于控制，但提取率較低，并且這幾種提取方法均要求原料選用干燥的三七根莖(剪口)、加工邊角料進(jìn)行提取，明顯使提取周期延長(zhǎng)。
[0004]而新興的酶解法和上述方法如水煎醇沉法相結(jié)合，從而提取鮮三七中的三七總皂苷，有效的縮短了加工周期，增加三七皂苷的產(chǎn)率，提高提取效率，然而在傳統(tǒng)的酶解法中多采用纖維素酶或果膠酶進(jìn)行酶解處理，傳統(tǒng)的酶解法中纖維素酶或果膠酶，無(wú)法有效解決煎醇過(guò)程中的糊化問(wèn)題，卻很少采用β -淀粉酶或草酸青霉胞外糖苷酶進(jìn)行混合酶解處理，其中β_淀粉酶常用于用作果汁加工中的淀粉分解和提高過(guò)濾速度，而草酸青霉胞外糖苷酶常用于糖苷化合物的轉(zhuǎn)化。
[0005]同時(shí)，現(xiàn)在多采用干三七為原料提取三七皂苷，周期長(zhǎng)，成本高，不利于相關(guān)產(chǎn)業(yè)的集約化，也不利于云南三七的市場(chǎng)調(diào)節(jié)、控制能力，對(duì)鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟(jì)效益增長(zhǎng)，對(duì)促進(jìn)三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展產(chǎn)生不利影響。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】
:
本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有提取方法的不足，提供一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，將β_淀粉酶進(jìn)行酶引入提取鮮三七中皂苷成分的新工藝中，以鮮三七為原料，縮短傳統(tǒng)生產(chǎn)周期，提高三七總皂苷的質(zhì)量和提取率，本方法有利于云南三七的市場(chǎng)調(diào)節(jié)、控制能力，實(shí)現(xiàn)對(duì)鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟(jì)效益增長(zhǎng)，促進(jìn)三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
[0007]一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，包括以下步驟:
第一步:粉碎制粒，將原料鮮三七材料進(jìn)行凈選，清洗，陰涼處晾干表面水份后用粉碎機(jī)破碎成10-20目的鮮顆粒；
第二步:酶解處理，將粉碎好的鮮三七10-20目鮮顆粒樣品置提取溶器中，加入復(fù)合酶進(jìn)行酶解處理2-3h，復(fù)合酶由纖維素酶(0.05ml-0.2ml/200g),果膠酶(0.lml-0.3ml/200g)，β -淀粉酶(0.lml-0.2ml/200g)和草酸青霉胞外糖苷酶(0.05ml_0.15ml /200g)構(gòu)成，再加入6-10倍量的50%-90%乙醇進(jìn)行回流提取，過(guò)濾，收集濾液,備用；
第三步:合并濾液，濃縮，真空0.075-0.08帕減壓回收乙醇，溫度70°C，得鮮三七提取
液；第四步:醇沉處理，將鮮三七提取用絮凝劑和醇沉乙醇來(lái)進(jìn)行醇沉處理，醇沉?xí)r間為12-36h，醇沉乙醇濃度為60%-90%，醇沉次數(shù)為1-3次，醇沉濃度與樣液比例為1:1_1: 3，絮凝劑濃度為4%-7% ；
第五步:洗脫處理，將醇沉處理好的鮮三七提取液通過(guò)DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱，樹(shù)脂用量為原料的1.2-1.8倍，先用蒸餾水洗脫，后用60%-90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，備用；第六步:脫色處理，將乙醇洗脫液回收乙醇，濃縮至干，水溶解后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂D-941柱子來(lái)脫色，用65%-80%乙醇洗脫，收集流出液，濃縮至干，即得三七總皂苷。
[0008]進(jìn)一步，在第一步的粉碎過(guò)程中，鮮三七材料破碎成10目的鮮顆粒為最佳。
[0009]進(jìn)一步，在第二步酶解處理中，復(fù)合酶的最佳配比為:纖維素酶(0.1ml /200g)，果膠酶 B (0.2ml/200g), β-淀粉酶(0.lml/200g)，草酸青霉胞外糖苷酶(0.05 ml /200g)。
[0010]用鮮三七為原料提取三七皂苷，是拓寬三七加工，促進(jìn)三七資源的多樣化綜合利用，加強(qiáng)對(duì)產(chǎn)業(yè)鏈結(jié)構(gòu)控制的重要方面。相應(yīng)的提取技術(shù)研發(fā)，是具有共性的關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題。
[0011]本發(fā)明用一種 酶處理提取鮮三七中皂苷，根據(jù)研究結(jié)果，鮮三七的總皂苷含量比干燥三七的含量約高20%，本方法采用鮮三七作為原料進(jìn)行提取，最大程度地保證了三七總皂苷的完整。
[0012]本發(fā)明與其它三七總皂苷提取工藝的比較:
1、本發(fā)明以鮮三七為原料，提取率不低于相應(yīng)的干三七原料，綜合成本低于以干三七為原料提取三七皂苷，周期短，成本低，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，同時(shí)，利用開(kāi)發(fā)以鮮三七為原料提取皂苷的深加工技術(shù)，能使本土企業(yè)充分發(fā)揮利用產(chǎn)地優(yōu)勢(shì)，直接介入三七產(chǎn)業(yè)鏈的中游，提高產(chǎn)品附加值，以鮮三七為原料進(jìn)行產(chǎn)地加工，將有助于相關(guān)產(chǎn)業(yè)的集約化，有助于提高云南三七的市場(chǎng)調(diào)節(jié)、控制能力，對(duì)鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟(jì)效益增長(zhǎng)，對(duì)促進(jìn)三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，具有顯而易見(jiàn)的作用。
[0013]2、利用β_淀粉酶進(jìn)行處理，將β_淀粉酶引入提取工藝中，提高了三七總皂苷的質(zhì)量和提取率，其他提取方法只能達(dá)到12-13%，本方法可使三七總皂苷提取率達(dá)到14%以上，鑒于三七總皂苷昂貴的價(jià)格，兩個(gè)百分點(diǎn)的提高可以帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益；同時(shí)有效的解決了糊化問(wèn)題。
[0014]3、兩種吸附柱進(jìn)行吸附處理，有效提高三七總皂苷的純度，本發(fā)明三個(gè)單體(Rl+Rgl+Rbl)含量能達(dá)到65%以上，高于現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(60%以上)。
[0015]4、本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，有利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制和工業(yè)實(shí)施。
[0016]【具體實(shí)施方式】:
下面結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，以方便技術(shù)人員理，但本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例。
[0017]表1:復(fù)合酶配比正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
【權(quán)利要求】
1.一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，其特征在于:包括以下步驟: 第一步:粉碎制粒，將原料鮮三七材料進(jìn)行凈選，清洗，陰涼處晾干表面水份后用粉碎機(jī)破碎成10-20目的鮮顆粒； 第二步:酶解處理，將粉碎好的鮮三七10-20目鮮顆粒樣品置提取溶器中，加入復(fù)合酶進(jìn)行酶解處理2-3h，復(fù)合酶由纖維素酶(0.05ml-0.2ml /200g),果膠酶(0.lml-0.3ml/200g), β-淀粉酶(0.05ml-(X2ml /200g)，草酸青霉胞外糖苷酶(0.05ml_0.15ml /200g)構(gòu)成，再加入6-10倍量的50%-90%乙醇進(jìn)行回流提取，過(guò)濾，收集濾液,備用； 第三步:合并濾液，濃縮，真空0.075-0.08帕減壓回收乙醇，溫度70°C，得鮮三七提取液； 第四步:醇沉處理，將鮮三七提取用絮凝劑和醇沉乙醇來(lái)進(jìn)行醇沉處理，醇沉?xí)r間為12-36h，醇沉乙醇濃度為60%-90%，醇沉次數(shù)為1-3次，醇沉濃度與樣液比例為1:1_1: 3，絮凝劑濃度為4%-7% ； 第五步:洗脫處理，將醇沉處理好的鮮三七提取液通過(guò)DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱，樹(shù)脂用量為原料的1.2-1.8倍，先用蒸餾水洗脫，后用60%-90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，備用；第六步:脫色處理，將乙醇洗脫液回收乙醇，濃縮至干，水溶解后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂D-941柱子來(lái)脫色，用65%-80%乙醇洗脫，收集流出液，濃縮至干，即得三七總皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，其特征在于:第一步將鮮三七材料破碎成10目的鮮顆粒。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，其特征在于:第二步中將粉碎好的鮮三七顆粒樣品置提取溶器中，加入纖維素酶(0.1ml /200g)，果膠酶B (0.2ml/200g)，β-淀粉酶(0.lml/200g)，草酸青霉胞外糖苷酶(0.05 ml /200g)進(jìn)行酶解處理；再加入6倍量的70%乙醇進(jìn)行回流提取，提取3次，溫度70°C，過(guò)濾，收集濾液，備用。
【文檔編號(hào)】A61K36/258GK103933092SQ201410141879
【公開(kāi)日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年4月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月10日
【發(fā)明者】周家明, 高明菊, 趙愛(ài), 馬妮, 朱琳 申請(qǐng)人:文山學(xué)院文山三七研究院