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芫根總黃酮制備減肥降血脂藥物的用途的制作方法

文檔序號:993827閱讀:297來源:國知局

專利名稱::芫根總黃酮制備減肥降血脂藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
:本發(fā)明涉及從芫根植株中提取得到的芫根總黃酮制備減肥降血脂藥物的用途,屬于藥用天然產(chǎn)物領(lǐng)域。
背景技術(shù)
:肥胖本身就是一種威脅人類健康的慢性疾病,同時也會伴隨高血脂癥、心腦血管疾病的發(fā)生,目前肥胖癥已經(jīng)成為全球關(guān)注的健康問題之一,因此研究開發(fā)出安全有效的減肥降血脂藥物具有極大的臨床和社會意義。芫根(BrassicarapaL.),又名蔓菁,二年生草本,現(xiàn)廣泛栽種于青藏高原。芫根生長在海拔高、溫差大、日照強的高原環(huán)境中,適應能力強,產(chǎn)量高,營養(yǎng)豐富,通常作為飼料應用于畜牧業(yè),其肉質(zhì)根還可以作為蔬菜或果品供人食用,具有清熱解毒、滋補增氧的功效。目前開發(fā)利用芫根已公開的方法中,尚未見關(guān)于芫根總黃酮減肥降血脂功效方面的報道。黃酮類化合物指化學結(jié)構(gòu)上屬于黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、花色素類、黃烷醇類、雙苯吡酮類、異黃酮類等化合物及其與單糖或寡糖形成的糖苷或其他形式的衍生物。它們廣泛存在于自然界,尤其是高等植物和羊齒類植物中,是一類重要的天然有機化合物,其生理活性多種多樣。大量研究表明黃酮類化合物具有防治高血壓、治療冠心病、抑制血栓形成、抗肝毒、抗炎、瀉下、降血脂、雌激素樣作用等功效。因此,開發(fā)利用植物黃酮具有巨大的生物學、醫(yī)學意義。本發(fā)明通過提取芫根總黃酮并對其進行減肥降血脂活性檢測,拓寬了芫根綜合開發(fā)的途徑,為探索天然的、有效的減肥降血脂藥物提供了理論依據(jù),符合高原植物資源的有效利用和藏藥新藥開發(fā)的需要,有利于推動民族地區(qū)經(jīng)濟的發(fā)展。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一是提供以黃酮類化合物為主要成分的芫根總黃酮提取物;本發(fā)明還提供上述芫根總黃酮提取物的制備方法;本發(fā)明還提供上述芫根總黃酮提取物在治療和/預防肥胖癥、高血脂癥的藥物制備中的用途。為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案為從芫根根塊中提取到總黃酮,得率為0.51重量%,呈固態(tài)淡黃色,易溶于乙醇,易溶于水。以高脂飼料飼養(yǎng)的營養(yǎng)性肥胖大鼠作為模型對芫根總黃酮進行體內(nèi)減肥降血脂活性檢測;以大鼠前提脂肪細胞培養(yǎng)為模型對芫根總黃酮進行體外減肥活性檢測,除非另有說明,本發(fā)明中的%為重量百分比。本發(fā)明芫根總黃酮的制備方法具體為方法A:(1)將芫根原料用515倍體積的蒸餾水煮沸;(2)攪拌的同時緩慢加入石灰乳或者NaOH堿性溶液,調(diào)pH至810,持續(xù)煮沸2060min,趁熱用4層紗布抽濾,濾液用中速濾紙進行再次過濾;(3)濾渣再用515倍體積蒸餾水煎煮,趁熱抽濾,重復提取13次,(4)合并兩次濾液,在6080°C條件下,用濃鹽酸調(diào)pH至46,攪勻后靜置24h,抽濾;(5)用蒸餾水將沉淀物洗至中性,干燥后得到粗制總黃酮,(6)用沸水重結(jié)晶,干燥后得到精制總黃酮,得率為0.10.4重量%,純度為60%75%。方法B:(1)用515倍體積的5095%乙醇或甲醇作為溶劑,于5080°C對芫根原料進行回流提取14h,進行14次重復提?。?2)用中速濾紙過濾提取液,合并濾液,減壓濃縮至濾液無醇味;(3)在濾液中,按113體積加入石油醚萃取35次,60°C水浴揮發(fā)掉溶液中的石油醚,又按113體積加入乙酸乙酯對濃縮液進行萃取35次,將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥,得到粗總黃酮浸膏;(4)將粗總黃酮浸膏溶于少量5095%乙醇,得到總黃酮上柱液,利用大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為12.5ml/min,用28倍柱體積的2095%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液,將洗脫液5080°C減壓濃縮、干燥得到精制的總黃酮,得率為0.30.7重量%,純度為75%95%。方法C(1)將芫根原料用1030倍體積的6095%乙醇浸泡13h;(2)在常壓下,以微波功率500900w,微波輻射2060s,間歇輻射25次,進行微波輔助浸??;(3)過濾收集濾液,將濾液濃縮成無醇味的浸膏;(4)將浸膏溶于少量熱水中,按113體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對浸膏液進行萃取,收集乙酸乙酯部分,減壓回收溶劑,干燥后得到粗總黃酮浸膏;(5)將粗總黃酮浸膏溶于少量5095%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為12.5ml/min,用28倍柱體積的2095%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液5080°C減壓濃縮、干燥得到精制的芫根總黃酮。得率為0.30.9重量%。芫根總黃酮含量為65%75%。所述制備方法中的芫根原料均為芫根的塊根,經(jīng)切片后自然風干,然后粉碎得到粉狀物,粉碎細度達到40200目;上述方法B中所用的大孔吸附樹脂為DlOl或AB-8;所述干燥方法為減壓真空干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。將芫根總黃酮制備成各種,例如粉劑、片齊IJ、膠囊、顆粒齊IJ、緩釋片、緩釋膠囊、滴丸或液體制劑。所述制劑應用于臨床治療肥胖癥、高血脂癥及制成含芫根總黃酮減肥降脂保健品。本發(fā)明用鹽酸-鎂粉反應檢測所提的芫根總黃酮,泡沫處呈現(xiàn)紫紅色;取樣品的60%乙醇溶液滴在濾紙上后,與1%AlCl3乙醇溶液反應在可見光下呈現(xiàn)灰黃色,在紫外光下呈現(xiàn)黃色熒光斑點;取樣品乙醇的60%溶液滴在濾紙上,用濃氨水熏過后,在紫外光下呈現(xiàn)黃褐色熒光斑點,說明提取物確實為黃酮。芫根總黃酮的定量測定是利用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法,以蘆丁為標準品繪制標準曲線,利用紫外分光光度法測定芫根總黃酮含量。通過上述方法制備的芫根總黃酮在減肥降血脂方面有顯著的效果。在營養(yǎng)性肥胖大鼠體內(nèi)實驗中,當芫根總黃酮的劑量>0.8g/kg·d時,大鼠體重、lee's指數(shù)、睪丸周圍脂肪系數(shù)及血脂指標均顯示出顯著減肥降血脂效果。在大鼠前體脂肪細胞培養(yǎng)實驗中,當芫根總黃酮的劑量>200μg/ml時,芫根總黃酮顯示出顯著的抑制大鼠前體脂肪細胞增殖與分化的作用。本發(fā)明方法得到的芫根總黃酮原料易得,方法簡單,生產(chǎn)成本低,產(chǎn)品中總黃酮含量較高,質(zhì)量穩(wěn)定、易于控制。具體實施例方式實施例1采用方法A,取曬干芫根塊根粉碎至100目,用5倍體積的蒸餾水煮沸,煮沸后不停攪拌的同時,緩緩加入NaOH,將溶液PH調(diào)至10。繼續(xù)保持煮沸20min。趁熱用四層紗布墊在布氏漏斗上進行抽濾,抽濾完畢用中速濾紙對濾液再次過濾。收集濾液。將濾渣用5倍體積的蒸餾水再次煎煮20min,抽濾、過濾,這樣對濾渣重復提取3次,合并濾液。將濾液加熱到60°C,緩緩加入濃鹽酸,將溶液PH調(diào)至4,攪拌均勻后,靜置24h后,抽濾,收集沉淀物。用大量蒸餾水沖洗沉淀物,直至PH為7,60°C減壓真空干燥沉淀物,得到粗總黃酮。用沸水將得到的粗總黃酮重結(jié)晶,60°C減壓真空干燥結(jié)晶,得到淡黃色的精制芫根總黃酮,得率為0.22%,純度為63%。實施例2采用方法A,取曬干芫根塊根粉碎至40目,用15倍體積的蒸餾水煮沸,煮沸后不停攪拌的同時,緩緩加入石灰乳,將溶液PH調(diào)至9。繼續(xù)保持煮沸60min。趁熱用四層紗布墊在布氏漏斗上進行抽濾,抽濾完畢用中速濾紙對濾液再次過濾。收集濾液。將濾渣用15倍體積的蒸餾水再次煎煮60min,抽濾、過濾,這樣對濾渣重復提取1次,合并濾液。將濾液加熱到80°C,緩緩加入濃鹽酸,將溶液PH調(diào)至4,攪拌均勻后,靜置24h后,抽濾,收集沉淀物。用大量蒸餾水沖洗沉淀物,直至PH為7,80°C干燥沉淀物,得到粗總黃酮。用沸水將得到的粗總黃酮重結(jié)晶,冷凍干燥所得結(jié)晶,得到淡黃色的精制芫根總黃酮,得率為0.12%,純度為61%。實施例3采用方法A,取曬干芫根塊根粉碎至200目,用10倍體積的蒸餾水煮沸,煮沸后不停攪拌的同時,緩緩加入石灰乳,將溶液PH調(diào)至8。繼續(xù)保持煮沸40min。趁熱用四層紗布墊在布氏漏斗上進行抽濾,抽濾完畢用中速濾紙對濾液再次過濾。收集濾液。將濾渣用5倍體積的蒸餾水再次煎煮40min,抽濾、過濾,這樣對濾渣重復提取2次,合并濾液。將濾液加熱到70°C,緩緩加入濃鹽酸,將溶液PH調(diào)至4,攪拌均勻后,靜置24h后,抽濾,收集沉淀物。用大量蒸餾水沖洗沉淀物,直至PH為7,70°C減壓真空干燥沉淀物,得到粗總黃酮。用沸水將得到的粗總黃酮重結(jié)晶,70°C減壓真空干燥結(jié)晶,得到淡黃色的精制芫根總黃酮,得率為0.24%,純度為73%。實施例4采用方法B,用5倍體積的95%乙醇作為溶劑,于50°C對芫根原料進行回流提取lh,進行4次重復提取。用中速濾紙過濾提取液,合并濾液,減壓濃縮至濾液無醇味。在濾液中,按11體積加入石油醚萃取3次,60°C揮去石油醚,又按12體積加入乙酸乙酯對濃縮液進行萃取3次,將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥,得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量95%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用DlOl大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為2.5ml/min,用8倍柱體積的20%、60%、95%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液50°C減壓濃縮、減壓真空干燥得到淡黃色的精制總黃酮,得率為0.33%純度為85%。實施例5采用方法B,用10倍體積的50%乙醇作為溶劑,于60°C對芫根原料進行回流提取lh,進行5次重復提取。用中速濾紙過濾提取液,合并濾液,減壓濃縮至濾液無醇味。在濾液中,按11體積加入石油醚萃取4次,60°C揮去石油醚,又按11體積加入乙酸乙酯對濃縮液進行萃取4次,將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥,得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量60%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用AB-8大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為2ml/min,用4倍柱體積的30%、50%、80%、95%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、冷凍干燥得到淡黃色的精制總黃酮,得率為0.63%,純度為77%。實施例6采用方法B,用15倍體積的70%乙醇作為溶劑,于70°C對芫根原料進行回流提取lh,進行3次重復提取。用中速濾紙過濾提取液,合并濾液,減壓濃縮至濾液無醇味。在濾液中,按11體積加入石油醚萃取4次,60°C揮去石油醚,又按13體積加入乙酸乙酯對濃縮液進行萃取4次,將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥,得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量70%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用AB-8大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為lml/min,用2倍柱體積的30%、60%、95%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、冷凍干燥得到淡黃色的精制總黃酮,得率為0.43%,純度為91%。實施例7采用方法C,將芫根原料用20倍體積的60%乙醇浸泡Ih。在常壓下,以微波功率700w,微波輻射40s,間歇輻射3次,進行微波輔助浸取。過濾收集濾液,將濾液濃縮成無醇味的浸膏。將浸膏溶于少量熱水中,按13體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對浸膏液進行萃取,收集乙酸乙酯部分,減壓回收溶劑,干燥后得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量60%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為2ml/min,用5倍柱體積的20%、50%、80%、95%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、干燥得到淡黃色的精制芫根總黃酮,得率為0.83%,純度為65%。實施例8采用方法C,將芫根原料用10倍體積的75%乙醇浸泡3h。在常壓下,以微波功率500w,微波輻射60s,間歇輻射2次,進行微波輔助浸取。過濾收集濾液,將濾液濃縮成無醇味的浸膏。將浸膏溶于少量熱水中,按11體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對浸膏液進行萃取,收集乙酸乙酯部分,減壓回收溶劑,干燥后得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量75%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為lml/min,用3倍柱體積的30%、60%、90%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液60°C減壓濃縮、干燥得到淡黃色的精制芫根總黃酮,得率為0.46%,純度為66%。實施例9采用方法C,將芫根原料用30倍體積的、95%乙醇浸泡2h。在常壓下,以微波功率900w,微波輻射20s,間歇輻射5次,進行微波輔助浸取。過濾收集濾液,將濾液濃縮成無醇味的浸膏。將浸膏溶于少量熱水中,按12體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對浸膏液進行萃取,收集乙酸乙酯部分,減壓回收溶劑,干燥后得到粗總黃酮浸膏。將粗總黃酮浸膏溶于少量95%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為2.5ml/min,用8倍柱體積的30%、60%、90%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液5080°C減壓濃縮、干燥得到淡黃色的精制芫根總黃酮,得率為0.59%,純度為72%。實施例10片劑取芫根總黃酮50g,加入50g可壓淀粉和40g羧甲基淀粉鈉,混合均勻,以70%的乙醇為潤濕劑,制軟材,18目篩制粒,烘干,16目篩整粒,加入3g硬脂酸鎂為潤滑劑,混合均勻,壓片、包衣,制成1000片包衣片。實施例11膠囊取芫根總黃酮50g,加入80g可壓淀粉和20g羧甲基纖維素鈉,混合均勻,以70%的乙醇為濕潤劑,制軟材,24目篩制粒,烘干,20目篩整粒,加入3g硬脂酸鎂,混合均勻,裝膠囊,制成1000粒膠囊。實施例12顆粒劑取芫根總黃酮100g,加入450g蔗糖粉、IOOg梭甲基纖維素鈉、IOOg微晶纖維素和50g檸檬酸,混合均勻,以3%PVP為潤濕劑制軟材,20目篩制粒,烘干,18目篩整粒,分裝,制成粒徑為830880μm的1000袋顆粒劑。每袋重0.720.78g。實施例13粉針劑取芫根總黃酮12g,羥丙基-ρ-環(huán)糊精135g,加注射用水3L,攪成糊狀,再加70°C85°C的注射用水3L,溶解時溫度控制在70°C85°C,加甘露醇450g溶解,再用ImoL/L鹽酸溶液調(diào)pH值至5.6,加入針用炭后室溫攪拌,過濾脫炭,精濾.濾液按每只2ml進行分裝,采用速凍法干燥,將制品取出,進行封口,即得到性狀為白色疏松塊狀物或粉末,即得粉針劑。實施例14滴丸將150g聚乙二醇4000在水浴上加熱得熔融液,趁熱加入芫根總黃酮50g,攪拌均勻,65°C保溫1小時,用滴丸機滴制,滴速120滴/分鐘,滴制溫度6575°C,在15°C左右的液體石蠟中冷卻,制得丸重約60mg,干燥,包衣,即得滴丸。實施例15口服液取蒸餾水適量,加入20g芫根總黃酮、180g蔗糖粉、20g檸檬酸,攪拌溶解,過濾,濾液補充蒸餾水至10000ml,加入香精適量,攪拌均勻,分裝,每支10ml,壓蓋,100°C消毒1小時,檢查合格,即得口服液。實施例16粉劑取芫根總黃酮30g,粉碎成粒徑為20μm粉狀物,加入500g蔗糖粉、IOOg梭甲基纖維素鈉、IOOg微晶纖維素混合均勻,分裝,制成1000袋粉劑。每袋重0.680.73g。添加量為食品或飼料的0.011%。將上述制備實施例5所得的芫根總黃酮進行如下效果實驗1、營養(yǎng)性肥胖大鼠檢測芫根總黃酮減肥降血脂活性實驗SD大鼠60只(80士20g)隨機分為6組,除空白組喂食基礎(chǔ)飼料以外,每組均給予等量高脂飼料,每只每天20g。4周以后測得體重高于空白組15%,開始灌胃。實驗組每天分別灌胃50mg/kg·d、200mg/kg·d、800mg/kg·d芫根總黃酮??瞻捉M、高脂組灌以等量蒸餾水,陽性對照組灌以鹽酸西布曲明2.5mg/kg·d。給藥3周之后檢測大鼠體重、身長,計算lee’s指數(shù),眼眶靜脈叢采血,用試劑盒測血清中總膽固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白HDL-c、低密度脂蛋白LDL-c值。處死后解剖檢測大鼠睪丸脂肪濕重。結(jié)果見表1、表2、表3、表4。表1.芫根總黃酮對大鼠體重、身長和lee’s指數(shù)的影響體重g身長cmlee's空白組207.4+10.2*21.1+1.1283.7+10.5*~高脂組257.2±50.521.6±1.2306.5±13.3陽性對照205.3±30.121.1±1.1268.5±6.5**50mg/kg·d199.9±18.1*21.1±1.1263.9土3.6**200mg/kg·d206.6士10.9*21.1±0.9281.0±5.3林800mg/kg·d200.1±13.7*21.6±1.9260.8±4.2***表示與高脂組比較,0.01<P<0.05,#表示與高脂組比較ρ<0.01表2、芫根總黃酮對大鼠睪丸周圍脂肪濕重及其脂肪系數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表3、大鼠血清總膽固醇TC、甘油三酯TG_TCmmol/1TGmmol/1_空白組2.001士0.115**0.640士0.063**高脂組3.661士0.4440.997士0.153陽性對照2.601士0.402**0.989士0.18350mg/kg·d3.011士0.8460.698士0.633*200mg/kg·d2.552士0.559**0.703士0.631*800mg/kg·d2.511士0.672**0.699士0.584**表示與高脂組比較,0.01<ρ<0.05,#表示與高脂組比較ρ<0.01表4.大鼠血清高密度脂蛋白HDL-c、低密度脂蛋白LDL_c<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*表示與高脂組比較,0.01<ρ<0.05,#表示與高脂組比較ρ<0.012、大鼠前體脂肪細胞培養(yǎng)將體重為80g的幼年SD大鼠斷頸處死,無菌操作取出睪丸周圍脂肪組織,剪成Imm3左右的碎塊,用I型膠原酶37°C消化Ih2h。用200目尼龍篩過濾后,10001500rpm離心1020min。棄去上清液,加入紅細胞裂解液,室溫放置lOmin,加入10%小牛血清的αMEM,按5XIO4個/cm2密度接種于2個96孔培養(yǎng)板,至于37°C50ml/LC02培養(yǎng)箱培養(yǎng)。1天后如下更換培養(yǎng)液空白組為不含樣品的10%小牛血清的αMEM;含總黃酮分別50μg/ml,100yg/ml,200g/ml的三個劑量的10%小牛血清αMEM培養(yǎng)液,每2天更換一次培養(yǎng)液,8天后用MTT法檢測細胞增殖情況。另一塊96孔板用基礎(chǔ)培養(yǎng)液培養(yǎng)4天后更換為上述含樣品培養(yǎng)液,培養(yǎng)72h,用油紅O染色法檢測細胞分化情況。結(jié)果如表5、表6。表5、MTT法檢測前體脂肪細胞增殖各組OD49tlnm<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*表示與空白組比較,0.01<ρ<0.05,#表示與空白組比較ρ<0.01表6、油紅0染色法檢測前體脂肪細胞分化各組OD5tltlnm<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*表示與空白組比較,0.01<ρ<0.05,#表示與空白組比較ρ<0.01上述實驗結(jié)果表明,本發(fā)明的芫根總黃酮在各劑量,均顯示出顯著的減肥降血脂活性??衫密靖傸S酮制備藥物或者保健食品用于預防或者治療肥胖癥及高血脂癥。本發(fā)明的芫根總黃酮的制備方法和用途已經(jīng)通過具體的實例進行了描述,本領(lǐng)域技術(shù)人員可借鑒本
發(fā)明內(nèi)容,適當改變原料、工藝條件等環(huán)節(jié)來實現(xiàn)相應的其它目的,其相關(guān)改變都沒有脫離本發(fā)明的內(nèi)容,所有類似的替換和改動對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的,都被視為包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。權(quán)利要求芫根總黃酮用于制備減肥降血脂藥物的用途。2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途,其特征在于,將芫根總黃酮用于制備降低血清中TC、TG和LDL-C含量并升高HDL-C含量的藥物。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途,其中芫根總黃酮是通過如下方法制備得到的(1)將芫根原料用515倍體積的蒸餾水煮沸;(2)攪拌的同時緩慢加入石灰乳或者NaOH堿性溶液,調(diào)pH至810,持續(xù)煮沸2060min,趁熱用4層紗布抽濾,濾液用中速濾紙進行再次過濾;(3)濾渣再用515倍體積蒸餾水煎煮,趁熱抽濾,重復提取13次,(4)合并兩次濾液,在6080°C條件下,用濃鹽酸調(diào)pH至46,攪勻后靜置24h,抽濾;(5)用蒸餾水將沉淀物洗至中性,干燥后得到粗制總黃酮,(6)用沸水重結(jié)晶,干燥后得到精制總黃酮,得率為0.10.4重量%,純度為60%75%。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途,其中芫根總黃酮是通過如下方法制備得到的(1)用515倍體積的5095%乙醇或甲醇作為溶劑,于5080°C對芫根原料進行回流提取14h,進行14次重復提取;(2)用中速濾紙過濾提取液,合并濾液,減壓濃縮至濾液無醇味;(3)在濾液中,按113體積加入石油醚萃取35次,60°C水浴揮發(fā)掉溶液中的石油醚,又按113體積加入乙酸乙酯對濃縮液進行萃取35次,將乙酸乙酯部分的溶液減壓濃縮、干燥,得到粗總黃酮浸膏;(4)將粗總黃酮浸膏溶于少量5095%乙醇,得到總黃酮上柱液,利用大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為12.5ml/min,用28倍柱體積的2095%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液,將洗脫液5080°C減壓濃縮、干燥得到精制的總黃酮,得率為0.30.7重量%,純度為75%95%。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途,其中芫根總黃酮是通過如下方法制備得到的(1)將芫根原料用1030倍體積的6095%乙醇浸泡13h;(2)在常壓下,以微波功率500900w,微波輻射2060s,間歇輻射25次,進行微波輔助浸??;(3)過濾收集濾液,將濾液濃縮成無醇味的浸膏;(4)將浸膏溶于少量熱水中,按113體積比先后用石油醚和乙酸乙酯對浸膏液進行萃取,收集乙酸乙酯部分,減壓回收溶劑,干燥后得到粗總黃酮浸膏;(5)將粗總黃酮浸膏溶于少量5095%乙醇,得到總黃酮上柱液。利用大孔吸附樹脂吸附,用蒸餾水沖洗到流出液無色后,以流速為12.5ml/min,用28倍柱體積的2095%的乙醇進行梯度洗脫至無色,收集洗脫液。將洗脫液5080°C減壓濃縮、干燥得到精制的芫根總黃酮。得率為0.30.9重量%。芫根總黃酮含量為65%75%。全文摘要本發(fā)明涉及從芫根植株中提取得到的芫根總黃酮制備減肥降血脂藥物的用途,尤其是減少體重,達到減肥的目的,同時還能降低血清中TC、TG和LDL-C含量并升高HDL-C水平含量。文檔編號A61P3/04GK101804089SQ201010178040公開日2010年8月18日申請日期2010年5月20日優(yōu)先權(quán)日2010年5月20日發(fā)明者蔣思萍,高平申請人:西藏自治區(qū)高原生物研究所
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