專利名稱：口服生物利用的基于脂質的結構的制作方法
口服生物利用的基于脂質的結構
背景技術：
輸送藥物至對象的最優(yōu)選方式之一是以口服制劑的方式。然而，許多藥物化合物 的口服制劑經(jīng)常不可用，這是由于藥物與消化道苛刻環(huán)境的不相容性。這對于藥物化合物 如肽、蛋白、某些小分子和核酸尤其如此。蛋白如胰島素的口服制劑將是非常期望的。目前使I型和II型糖尿病患者中血 液葡萄糖水平正?；牟呗岳昧烁鞣N延時釋放制劑中胰島素的皮下給藥，諸如超長效胰 島素和蛇麻素NPH胰島素。這些制劑的應用通過調節(jié)藥物向組織的釋放延遲并隨后控制胰 島素的生物分布。胰島素的持續(xù)操縱導致疾病過程中較好的葡萄糖控制和較少的注入需 要。不幸地，仍需要多次疼痛注入，因為這些制劑不能在患有糖尿病的對象中提供持續(xù)不變 的胰島素水平。其它許多重要藥物目前以口服制劑的方式也不可用。實例包括降鈣素、血清素、甲 狀旁腺激素、GLP-1、促紅細胞生成素、各種類型的干擾素、人生長激素、單克隆抗體等，其效 用已經(jīng)在文獻中進行廣泛地評論?？诜幬镙斔皖I域需要的是能口服輸送寬范圍的藥物產(chǎn)品和其它治療劑的組合 物。本發(fā)明滿足且解決了這種需要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明包括組合物，其促進和/或能夠吸收一般口服不可生物利用的治療劑。在 一種實施方式中，本發(fā)明組合物通過與治療劑締合并且陪伴治療劑通過腸腔進入門脈血流 最后進入系統(tǒng)循環(huán)而發(fā)揮作用。在某些實施方式中，本發(fā)明組合物具有許多獨特且有利的 性質。這些性質之一是插入細胞間隙并且穿過哺乳動物腸進入門脈循環(huán)的能力。在某些實 施方式中，本發(fā)明組合物可通過一種或多種靶向試劑靶向特定細胞或細胞外受體。在典型的實施方式中，本發(fā)明的口服生物利用組合物包括明膠和另外的組分。另 外的組分包括動態(tài)分級的(sized)脂質體、脂質體片段和脂質顆粒，其中所述脂質顆粒包 括至少一種脂質成分并且所述脂質體或脂質體片段包括至少兩種脂質成分。組合物還包括 至少一種治療劑或診斷劑以及任選地至少一種靶向試劑。明膠與本發(fā)明組合物中一種或多 種組分積極可逆地相互作用。在某些實施方式中，脂質成分選自MPB-PEU，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸 膽堿、1，2_ 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘油基-3-磷 酸膽堿、膽固醇、膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸 酯、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘油基_3_磷酸酯、 1,2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基_3_磷酸乙醇 胺-N-(琥珀酰)、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-[磷酸-rac- (1-甘油)](鈉鹽)和2， 3-二乙酰氧基丙基2-(5-((3aS，6aR)-2-氧代六氫-IH-噻吩并[3，4_d]咪唑-4-基)五酰 胺)己基磷酸三乙銨。在某些實施方式中，治療劑選自胰島素、干擾素、促紅細胞生成素、甲狀旁腺激素、降鈣素、血清素、利妥普單抗(rituximab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、尿酸酶、組 織纖溶酶原激活物、抗胸腺細胞球蛋白(Thymoglobulin)、疫苗、肝素或肝素類似物、抗 凝血酶III、非格司亭(filgrastin)、醋酸普蘭林肽(pramilitide acetate)、艾塞那肽 (exanatide)、埃替非巴肽(印ifibatide)、抗蛇毒素、IgG, IgM、HGH、甲狀腺素、GLP-1、凝血 因子VII和VIII、單克隆抗體和作為治療劑的糖脂。在優(yōu)選的實施方式中，治療劑是胰島素。在某些實施方式中，靶向試劑包括金屬衍生的靶向試劑或生物素衍生的靶向試 劑。在一子實施方式中，金屬衍生的靶向試劑包括金屬和至少一種絡合劑。優(yōu)選地，金 屬衍生的靶向試劑中的金屬選自過渡金屬、內(nèi)過渡金屬和該過渡金的鄰近金屬，并且所述 至少一種絡合劑選自N-(2，6_ 二異丙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2，6_ 二乙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2，6_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(4_異丙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(4_ 丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2，3_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(2，4_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(2，5_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(3，4_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(3，5_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(3-丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2-丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(4_叔丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(3_ 丁氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(2-己氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸N-(4-己氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸氨基吡咯基亞氨基二乙酸；N-(3_溴-2，4，6_三甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；苯并咪唑甲基亞氨基二乙酸；N-(3-氰基-4，5-二甲基-2-吡咯基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(3-氰基-4-甲基-5-芐基-2-吡咯基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；和N-(3-氰基-4-甲基-2-吡咯基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸。在一實施方式中，金屬是鉻。在本發(fā)明的另一實施方式中，金屬衍生的靶向試劑是聚[Cr-雙(N-2，6_二異丙基 苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]。在又一實施方式中，靶向試劑是生物素衍生的靶向試劑，其選自N-羥基琥珀酰 亞胺(NHS)生物素；硫代-NHS-生物素；N-羥基琥珀酰亞胺長鏈生物素；硫代-N-羥基 琥珀酰亞胺長鏈生物素；D-生物素；生物胞素；硫代-N-羥基琥珀酰亞胺-S-S-生物素；
8生物素-BMCC ；生物素-HPDP ；碘代乙?；?LC-生物素；生物素-酰胼；生物素-LC-酰 胼；生物胞素酰胼；生物素尸胺；羧基生物素；光生物素；對氨基苯甲酰生物胞素三氟醋 酸鹽；對重氮基苯甲酰生物胞素；生物素DHPE ；生物素-X-DHPE ； 12-((生物素基)氨基) 十二酸；12-((生物素基)氨基)十二酸珀酰亞胺酯；S-生物素基高半胱氨酸；生物胞 素-X ；生物胞素χ-酰胼；生物素乙二胺；生物素-XL ；生物素-X-乙二胺；生物素-XX酰 胼；生物素-XX-SE ；生物素-XX，SSE ；生物素-X-尸胺；α -(t-BOC)生物胞素；N_(生物 素基)N' _(碘代乙?；?乙二胺；DNP-X-生物胞素-X-SE ；生物素-X-酰胼；鹽酸降 生物素；3-(N-馬來酰亞胺基丙酰基)生物胞素；ARP ；生物素-1-亞砜；生物素甲酯；生 物素-馬來酰亞胺；生物素-聚(乙二醇)胺；(+)生物素4-酰氨基苯甲酸鈉鹽；生物 素2-N-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷；生物素-a-D-N-乙?；窠?jīng)氨酸苷 (acetylneuraminide)；生物素-α -L-巖藻糖苷；生物素乳-N-二糖苷；生物素-Lewis-A三 糖；生物素-Lewis-Y四糖；生物素-α -D-吡喃甘露糖苷；生物素6_0_磷酰-α -D-吡喃甘 露糖苷；和1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺N-(生物素基)、前述化合物的亞 胺基生物素衍生及其混合物。在本發(fā)明的另一子實施方式中，靶向試劑是聚[Cr-雙(N-2，6_二異丙基苯氨基甲 酰甲基亞氨基二乙酸)]并且治療劑是胰島素。在又一子實施方式中，靶向試劑是生物素DHPE或生物素-X-DHPE并且治療劑是胰島素。本發(fā)明還描述一種制備口服生物利用組合物的方法，所述口服生物利用組合物包 括明膠和另外的組分，其中所述組分包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段和顆粒，其中所述 脂質體、脂質體片段和顆粒產(chǎn)生自脂質成分的混合物，所述組合物還包括至少一種治療劑 或診斷劑以及任選地至少一種靶向試劑，其中所述明膠與一種或多種組分積極可逆地相互 作用。所述方法包括下列步驟在含水介質中混合脂質成分和任選地至少一種靶向試劑以 形成第一混合物；向所述第一混合物中加入所述治療劑或診斷劑以形成第二混合物；向明 膠中加入所述第二混合物以形成明膠締合的混合物；和干燥所述明膠締合的混合物。在所述方法的子實施方式中，所述脂質成分選自MPB-PE、1，2_ 二硬脂?；?sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻酰基_sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘 油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻?；?sn-甘油 基-3-磷酸酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油 基-3-磷酸乙醇胺-N-(琥珀酰)、1，2-棕櫚?；?sn-甘油基-3-[磷酸-rac- (1-甘油)] (鈉鹽)和2，3-二乙酰氧基丙基2-(5-((3aS，6aR)-2-氧代六氫-IH-噻吩并[3，4_d]咪 唑-4-基)五酰胺)己基磷酸三乙銨；并且當存在時，任選的靶向試劑是金屬衍生的靶向試 劑或生物素衍生的靶向試劑；并且所述治療劑選自胰島素、干擾素、促紅細胞生成素、甲狀 旁腺激素、降鈣素、血清素、利妥普單抗、曲妥珠單抗、尿酸酶、組織纖溶酶原激活物、抗胸腺 細胞球蛋白、疫苗、肝素或肝素類似物、抗凝血酶III、非格司亭、醋酸普蘭林肽、艾塞那肽、 埃替非巴肽、抗蛇毒素、IgG, IgM、HGH、甲狀腺素、GLP-1、凝血因子VII和VIII、單克隆抗體 和作為治療劑的糖脂。在所述制備本發(fā)明的口服生物利用組合物的方法的另一子實施方式中，所述金屬衍生的靶向試劑是聚[Cr-雙(N-2，6_ 二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]。在所述制備本發(fā)明的口服生物利用組合物的方法的另一子實施方式中，所述生物 素衍生的靶向試劑選自生物素DHPE和生物素-X-DHPE。根據(jù)本發(fā)明的另一子實施方式，所述治療劑是胰島素。本發(fā)明還預期一種治療人疾病的方法，所述方法包括給人施用口服生物利用組合 物，所述口服生物利用組合物包括明膠和另外的組分，其中所述組分包括動態(tài)分級的脂質 體、脂質體片段和脂質顆粒，并且其中所述脂質顆粒包括至少一種脂質成分并且所述脂質 體或脂質體片段包括至少兩種脂質成分，并且其中所述組合物還包括至少一種治療劑或診 斷劑以及任選地至少一種靶向試劑，其中所述明膠與一種或多種組分積極可逆地相互作 用。在所述治療疾病的方法的子實施方式中，所述疾病是糖尿病。在另外的子實施方式中，所述脂質成分選自MPB-PE、1，2-二硬脂?；?sn-甘油 基-3-磷酸膽堿、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂酰基-sn-甘 油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘油 基-3-磷酸酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油 基-3-磷酸乙醇胺-N-(琥珀酰)、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-[磷酸-rac- (1-甘油)] (鈉鹽)和2，3-二乙酰氧基丙基2-(5-((3aS，6aR)-2-氧代六氫-IH-噻吩并[3，4_d]咪 唑-4-基)五酰胺)己基磷酸三乙銨；所述至少一種或多種治療劑是胰島素；并且當存在 時，任選的靶向試劑是金屬衍生的靶向試劑或生物素衍生的靶向試劑。在又一子實施方式中，其中所述靶向試劑不是任選的，所述靶向試劑是聚[Cr-雙 (N-2,6- 二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]、生物素DHPE或生物素-X-DHPE。在所述組合物的優(yōu)選實施方式中，所述脂質成分是1，2- 二硬脂?；?sn-甘油 基-3-磷酸膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是聚[Cr-雙 (N-2，6-二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]；并且所述治療劑是胰島素。在另一優(yōu)選實施方式中，所述脂質成分是1，2- 二硬脂酰基-sn-甘油基_3_磷酸 膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是生物素-X-DHPE或生 物素DHPE ；并且所述治療劑是胰島素。在本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方式中，所述脂質成分是1，2- 二硬脂酰基-sn-甘油 基-3-磷酸膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是聚[Cr-雙 (N-2，6-二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]；并且所述治療劑是胰島素。 在本發(fā)明方法的另一優(yōu)選實施方式中，所述脂質成分是1，2- 二硬脂?；?sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是生物 素-X-DHPE或生物素DHPE ；并且所述治療劑是胰島素。 在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明組合物可通過包括下列步驟的方法制備a)在含水 介質中混合至少三種脂質成分和任選地至少一種靶向試劑以形成第一混合物，其中所述脂 質成分選自MPB-PE、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基_3_磷酸膽堿、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、膽固醇油酸酯、 磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2_ 二肉豆蔻酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2_ 二硬脂?；?sn-甘 油基-3-磷酸乙醇胺、1，2-二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-(琥珀酰)、1， 2- 二棕櫚?；?sn-甘油基_3-[磷酸-rac-(l-甘油)](鈉鹽)和2，3- 二乙酰氧基丙基 2-(5-((3aS，6aR)-2-氧代六氫-IH-噻吩并[3，4_d]咪唑-4-基)五酰胺)己基磷酸三乙 銨；b)使所述混合物均勻化以形成脂質體、脂質體片段和顆粒的混合物；c)向所述脂質體、 脂質體片段和顆粒的混合物中加入治療劑或診斷劑以形成第二混合物；c)向明膠中加入 所述第二混合物以形成明膠締合的混合物；d)干燥所述明膠締合的混合物。本發(fā)明還包括一種治療人糖尿病的方法。該方法包括給所述人施用口服生物利用 組合物，所述口服生物利用組合物包括明膠和另外的組分，所述組分包括動態(tài)分級的脂質 體、脂質體片段和脂質顆粒，其中所述脂質顆粒包括至少一種脂質成分并且所述脂質體或 脂質體片段包括至少兩種脂質成分，所述組合物還包括胰島素以及任選地至少一種靶向試 劑，其中所述明膠與一種或多種組分積極可逆地相互作用。該方法進一步包括給所述人共 同施用胰島素。本發(fā)明還包括試劑盒，其包括口服生物利用組合物，所述口服生物利用組合物包 括明膠和另外的組分，其中所述組分包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段和脂質顆粒，并且 其中所述脂質顆粒包括至少一種脂質成分并且所述脂質體或脂質體片段包括至少兩種脂 質成分，所述組合物還包括至少一種治療劑或診斷劑以及任選地至少一種靶向試劑，其中 所述明膠與一種或多種組分積極可逆地相互作用。試劑盒還包括給人施用所述組合物的指 導材料。在本發(fā)明試劑盒的子實施方式中，試劑盒還包括胰島素，用于與所述組合物共同 施用給所述人。


前面的概述以及下面對本發(fā)明優(yōu)選實施方式的詳細描述當與附圖一起閱讀時將 被更好地理解。為了闡明本發(fā)明的目的，在圖中顯示的是目前優(yōu)選的實施方式。然而應當 理解，本發(fā)明不限于所示的準確的布置和手段。圖1是本發(fā)明組合物的示意圖。圖2是一張圖，其描繪在向禁食且麻醉的230克大鼠的十二指腸中注入放射性標 記的組合物后15和30分鐘在股靜脈和門靜脈中發(fā)現(xiàn)的14C放射性標記的磷脂的計數(shù)。圖3是一張柱狀圖，其描繪殺死后圖2大鼠的血液、肝臟和脾中14C放射性標記的 磷脂的分布。圖4是一張圖，其描繪在劑量給藥后15、30和45分鐘放射性標記的組合物從飲用 水中的吸收。圖5是一張柱狀圖，其描繪殺死后圖4大鼠的血液、肝臟和脾中標記的組合物的分布。圖6是一張圖，其描繪以本發(fā)明組合物的形式口服給藥的胰島素的效力。圖7是一張柱狀圖，其描繪本發(fā)明組合物(低劑量下)在門脈葡萄糖負載期間將 2型糖尿病狗從肝葡萄糖輸出轉換成攝取方面的效力。圖8是降鈣素與非靶向的本發(fā)明組合物一起給藥后血液鈣水平曲線。
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圖9是本發(fā)明組合物的組分的大小分布圖。圖10是包含生物素靶向試劑和胰島素的本發(fā)明組合物在減輕人2型糖尿病的效 果上的效力圖。圖11是本發(fā)明組合物的色譜圖，其顯示胰島素負載的效力。圖12是一張圖，其描繪共價連接到本發(fā)明組合物的IgG抗體口服傳遞相對于非締 合(游離)IgG抗體口服吸收的效力。圖13是一張圖，其描繪與本發(fā)明組合物締合的甲狀腺素的口服給藥對小鼠中血 清膽固醇和甘油三酸酯(“TG”)的效果。圖14是一張圖，其描繪與本發(fā)明組合物締合的干擾素的口服給藥對減輕患有丙 型肝炎的人病毒負載的效果。
具體實施例方式本發(fā)明包括組合物，其促進和/或能夠吸收一般口服不可生物利用的治療劑。在 一種實施方式中，本發(fā)明組合物通過與治療劑締合并且陪伴治療劑通過腸腔進入門脈血流 最后進入系統(tǒng)循環(huán)而發(fā)揮作用。在某些實施方式中，本發(fā)明組合物具有許多獨特且有利的 性質。這些性質之一是插入細胞間隙并且穿過哺乳動物腸進入門脈循環(huán)的能力。在某些實 施方式中，本發(fā)明組合物可通過一種或多種靶向試劑靶向特定細胞或細胞外受體。在典型的實施方式中，本發(fā)明的口服生物利用組合物包括明膠和另外的組分。另 外的組分包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段和脂質顆粒，其中所述脂質顆粒包括至少一 種脂質成分并且所述脂質體或脂質體片段包括至少兩種脂質成分。組合物還包括至少一種 治療劑或診斷劑以及任選地至少一種靶向試劑。明膠與本發(fā)明組合物中一種或多種組分積 極可逆地相互作用。定義除非另外定義，本文所用的所有技術和科學術語一般具有與本發(fā)明所屬領域普通 技術人員所通常理解的相同的含義。一般地，本文所用的命名法以及有機化學和蛋白質化 學中的實驗規(guī)程都是本領域熟知且通常使用的那些。冠詞“一 (a)，，和“一 (an)，，在本文被用于指一個或一個以上(即至少一個)的該 冠詞的語法對象。例如“一元素”是指一種元素或一種以上的元素。如本文所用，氨基酸被顯示為其全稱、三字母代碼以及與其對應的一字母代碼，如 下表所示 丙氨酸AlaA亮氨酸LeuL
精氨酸ArgR賴氨酸LysK
天冬酰胺AsnN甲硫氨酸MetM
天冬氨酸AspD苯丙氨酸PheF
半胱氨酸CysC脯氨酸ProP
胱氨酸Cys-CysC-C絲氨酸SerS
谷氨酸GluE蘇氨酸ThrT
谷氨酰胺GlnQ色氨酸TrpW
甘氨酸GlyG酪氨酸TyrY
組氨酸HisH纈氨酸ValV異亮氨酸lie I術語“低級(lower) ”在提及化學結構中使用時描述了包含1至6個碳原子的基團。除非另外表明，術語“烷基”本身或作為另一取代基的部分是指碳原子數(shù)指定的直 鏈、支鏈或環(huán)狀烴(即C1-C6是指1至6個碳)。實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、 異丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、環(huán)己基和環(huán)丙基甲基。最優(yōu)選的是(C1-C3)烷基，尤其 乙基、甲基和異丙基。除非另外表明，術語“亞烷基”本身或作為另一取代基的部分是指具有兩個取代 位點的直鏈、支鏈或環(huán)狀鏈烴，如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CH2-)、亞異丙基(-C(CH3)= CH-)等。除非另外表明，術語“芳基”單獨使用或與其它術語聯(lián)合使用時是指包含一個或多 個環(huán)(一般地一個、兩個或三個環(huán))、飽和或不飽和的碳環(huán)結構，其中所述環(huán)可以以旁側的 方式連接在一起，諸如聯(lián)苯或者可以是稠合的，諸如萘。實例包括苯基、蒽基和萘基。該結 構可任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自鹵素；(C1-C6)烷基；(C1-C6) 鏈烯基；(C1-C6)烷氧基；OH ；NO2 ；C 三 N ;C( = 0)0 (C1-C3)烷基；(C2-C6)亞烷基-OR2 ；膦酸 基(phosphonato) ；NR22 ；NHC( = 0) (C1-C6)烷基；氨磺酰；氨基甲酰；0C( = 0) (C1-C3)烷基； O(C2-C6)亞烷基-M(C1-C6)烷基)2 ；和(C1-C3)全氟烴基。術語“芳基低級烷基”是指這樣的官能團，其中芳基被連接到低級亞烷基， 如-CH2CH2-苯基。除非另外表明，術語“烷氧基”單獨使用或與其它術語聯(lián)合使用時是指通過氧 原子連接到分子的其余部分、具有指定數(shù)目的碳原子的烷基或包含取代基諸如羥基的 烷基，諸如舉例來說-OCH(OH)-、-OCH2OH,甲氧基(-OCH3)、乙氧基(-OCH2CH3)、1-丙氧基 (-OCH2CH2CH3)、2_ 丙氧基(異丙氧基)、丁氧基(-OCH2CH2CH2CH3)、戊氧基(-0CH2CH2CH2CH2CH3) 和高級同系物和同分異構體。術語“?；笔侵竿ㄊ絖C( = 0)-R的官能團，其中-R是氫、烷基、氨基或烷氧基。 實例包括乙?；?-C( = 0)CH3)、丙?；?-C( = 0)CH2CH3)、苯甲酰基(-C( = 0)C6H5)、苯乙 ?；?C( = 0) CH2C6H5)、乙氧甲?；?-CO2CH2CH3)和二甲基氨基甲?；?C( = 0) N (CH3) 2)。除非另外表明，術語“鹵”或“鹵素”本身或作為另一取代基的部分是指氟、氯、溴 或碘原子。除非另外表明，術語“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”本身或作為另一取代基的部 分是指包含碳原子和至少一個選自N、0和S的雜原子的飽和或不飽和的、穩(wěn)定的、單環(huán)或 多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，并且其中氮和硫雜原子可任選地被氧化，并且氮原子可任選地被季銨化。實 例包括吡啶、吡咯、咪唑、苯并咪唑、酞、吡啶基(pyridenyl)、吡喃基、呋喃基、噻唑、噻吩、噁 唑、吡唑、3-吡咯啉、吡咯烷(pyrrolidene)、嘧啶、嘌呤、喹啉、異喹啉、咔唑等。在取代將產(chǎn) 生穩(wěn)定化合物的情況下，結構可任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自鹵素；(C1-C6)烷基；(C1-C6)鏈烯基；(C1-C6)烷氧基；OH ；NO2 ；C 三 N ;C( = 0)0 (C1-C3)烷基； (C2-C6)亞烷基-OR2 ；膦酸基(phosphonato) ；NR22 ；NHC( = 0) (C1-C6)烷基；氨磺酰；氨基甲 酰；0C( = 0) (C1-C3)烷基；O(C2-C6)亞烷基-M(C1-C6)烷基)2 ；和(C1-C3)全氟烴基。術語“兩親脂質”是指具有極性末端和非極性末端的脂質分子?！敖j合劑”是這樣的化合物，所述化合物能與金屬形成水不溶性配位絡合物，例如 鉻、鋯等的鹽，其在水中基本上不溶并且可溶于有機溶劑?！昂橘|”是指包括水的介質或包括含至少一種緩沖液或鹽的水的介質。術語“締合的(associated)，，或“與……締合的(associated with)，，當提及組合 物或本發(fā)明組合物的組分使用時是指所提及的物質被合并(或插入)到組合物或本發(fā)明組 合物的組分之中、表面上或之內(nèi)。術語“胰島素”是指天然或重組形式的胰島素、合成胰島素以及前述胰島素的衍 生物。胰島素的實例包括但不限于賴脯胰島素(insulin lispro)、門冬胰島素(insulin aspart)、普通胰島素(regular insulin)、甘精胰島素(insulin glargine)、鋅胰島素 (insulin zinc)、長效鋅人胰島素(human insulin zinc extended)、低精蛋白鋅胰島 素、人緩沖普通胰島素(human buffered regular insulin)、格魯辛胰島素(insulin glulisine)、重組人普通月夷島素(recombinant human regular insulin)、超長效月夷島素 (ultralente insulin)、人體單組分胰島素(humulin) ,NPH 胰島素、Levemir、Novolog 和低 精蛋白鋅重組人胰島素(recombinanthuman insulin isophane)。還包括動物胰島素，諸如 牛或豬胰島素。術語“甘精(glargine) ”和“甘精胰島素(insulin glargine) ”兩者都是指重組人 胰島素類似物，其區(qū)別于人胰島素的地方在于位置A21上的氨基酸天冬酰胺被甘氨酸取代 并且兩個精氨酸加入到B-鏈的C-端。化學上，它是21A-Gly-30Ba-L-Arg-30Bb-L-Arg-人 胰島素并且具有經(jīng)驗式C267H4tl4N72O78S6以及6063的分子量。術語“低精蛋白鋅重組人胰島素(recombinant human insulin isophane)”是指 已經(jīng)用魚精蛋白處理的人胰島素。術語“生物利用率”是指藥物試劑諸如但不限于胰島素到達系統(tǒng)循環(huán)并且在其作 用位點可利用的速度和程度的度量。如本文所用，“治療(treat) ”是指減少患者所經(jīng)歷的疾病、病癥或不利狀況等的癥 狀的頻率。如本文所用，術語“藥學上可接受的載體”是指活性成分可與之組合并且組合后可 被用于將活性成分施加給對象的化學組合物。術語“脂質(lipid) ”或“脂質(lipids) ”是指這樣的有機化合物，其特征在于對 于非極性無質子有機溶劑是優(yōu)選的。脂質可以或可以不具有烷基鏈端。根據(jù)本發(fā)明的脂質 包括但不限于本領域中已知的化合物種類，諸如磷脂、膽固醇和磷酸二烷基酯。如本文所用，“膽固醇”是指下列化合物以及該化合物的所有衍生物和類似物 如本文所用，“顆?！卑ㄒ粋€或多個脂質的多個單元的結塊。 如本文所用，“甲狀腺素”是指下列化合物 其中氨基可以處于“D”或“L”構型。如本文所用，“共同施加(co-administration)”或“共同施加 (co-administering)，，以及其變化是指在施加第一治療劑之前、期間或之后施加第二治療 劑。第一或第二治療劑可以是相同的或不同的。如本文所用，“干擾素”是指所有形式的干擾素，其包括但不限于干擾素-α、干擾 素-β、干擾素-Y以及其子單元。描述本發(fā)明的組合物由明膠和一種或多種組分組成，其中所述組分包括脂質體、脂質 體片段和脂質顆粒。傳統(tǒng)上，由兩性物質組成的脂質體、脂質體片段和脂質顆粒已經(jīng)局限于大約40納 米的較小尺寸分布。這種限制被認為是構成膜結構的組分脂質(磷脂、膽固醇、磷酸二烷基 酯等)的總(collective)尺寸的函數(shù)。然而，本發(fā)明組合物的組分論證了至今沒有觀察到的動態(tài)尺寸分級(尺寸調整， sizing)和尺寸彈性。具體地，本發(fā)明組合物的組分在含水介質中存在動態(tài)平衡，其中所述 組分的尺寸平均地在直徑上從大約6納米至大約60納米之間波動。在任何給定的時間，從 大約5%至大約50%的組分的任何地方呈現(xiàn)出大約20納米或更少的平均直徑。由于尺寸 上幾乎恒定的波動，本發(fā)明組合物的組分不可能通過傳統(tǒng)的分級方法物理分離以形成不同 尺寸結構的離散群。本發(fā)明組合物的組分可以是但不限于脂質體、脂質體片段和脂質顆粒。本發(fā)明組合物的組分可與一種或多種治療劑和/或診斷劑締合。不希望被任何特 定理論束縛，應當認為直徑20納米或以下的組分足夠小以穿過細胞間隙，因此能使締合的 治療劑或診斷劑從腸腔轉運至門脈血液。締合的治療劑和/或診斷劑可被共價或非共價地結合到本發(fā)明組合物的一種或 多種組分。在本發(fā)明的實施方式中——其中締合的治療劑或診斷劑被共價結合，締合的治 療劑或診斷劑可被結合到可官能化的化學基團。可官能化的基團的實例包括但不限于羥
基、氨基、羧基和酰氨基團?？膳c本發(fā)明組合物的組分共價結合的治療劑的實例包括多肽和/或蛋白，諸如但不限于GLP-1、胰島素、降鈣素、干擾素、尿酸酶、組織纖溶酶原激活物、抗胸腺細胞球蛋白 (Thymoglobulin)、各種疫苗、肝素、肝素類似物、抗凝血酶III、非格司亭、醋酸普蘭林肽、艾 塞那肽、埃替非巴肽和抗蛇毒素，凝血因子——其包括但不限于因子VII和VIII，各種小分 子諸如，舉例來說，D或L甲狀腺素或血清素、核酸、DNA或RNA序列，免疫球蛋白，諸如但不 限于IgG和IgM，和各種單克隆抗體，諸如但不限于利妥普單抗、曲妥珠單抗和充當治療劑 的糖脂，以及此外，其它較大的蛋白，諸如舉例來說人生長激素(“HGH”)、促紅細胞生成素 和甲狀旁腺激素?？膳c本發(fā)明組合物的組分共價結合的診斷劑的實例包括診斷造影劑諸如，但不限 于金和釓。其它診斷劑包括放射性物質諸如普通原子的放射性同位素，其包括但不限于13c、 68Ge、18F和1251。這些造影試劑和放射性試劑可直接通過共價連接到脂質成分或靶向試劑而 與組合物的組分共價連接?？蛇x地并且在化學上適當?shù)那闆r下，診斷劑可被結合到配體諸 如DAD0(2’ -脫氧腺苷)，其本身被共價連接到脂質成分或靶向試劑?？蛇x地并且在化學上適當?shù)那闆r下，本發(fā)明組合物的組分可通過非共價相互作用 與前述診斷劑或治療劑締合。非共價相互作用能使本發(fā)明組合物的組分與各種各樣的診斷 劑和治療劑相容。脂質本發(fā)明組合物的組分包括一種或多種脂質成分和任選的靶向試劑。包括單一脂質 成分的單個單元或多個單元的實施方式在本文被稱為“脂質顆?！薄８鶕?jù)所得結構的特性， 包括兩種或多種不同脂質成分和任選的靶向試劑的實施方式被分為脂質體或脂質體片段。本發(fā)明的脂質成分選自1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基_3_磷酸膽堿、1，2_ 二棕櫚 ?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、 膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚 酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻?；?sn-甘油基_3_磷酸酯、1，2- 二硬脂酰 基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基_3_磷酸乙醇胺-N-(琥珀 酰)、1，2_ 二棕櫚酰基-sn-甘油基_3-[磷酸-rac-(l-甘油)](鈉鹽)、2，3- 二乙酰氧基 丙基2-(5-((3必，6池)-2-氧代六氫-1!1-噻吩并[3，4_d]咪唑-4-基)五酰胺)己基磷酸 三乙銨、MPB-PE及其衍生物。代表性結構顯示在表1中。表1
16 作為非限制性實例，本發(fā)明組合物的組分可由按照下列混合的脂質成分制成大 約61摩爾百分數(shù)的1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷 酸雙十六烷基酯和大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇。在組分結合靶向試劑的實施方式中，上面 提到的混合物可進一步包括大約1至大約2摩爾百分數(shù)的至少一種靶向試劑，其中其它脂 質成分的量減少以保持上述成分的比例。在另一實施方式中，本發(fā)明的組合物可由按照下列混合的脂質成分制成大約68 摩爾百分數(shù)的1，2_ 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約18摩爾百分數(shù)的磷酸雙 十六烷基酯、大約9摩爾百分數(shù)的膽固醇和大約3百分數(shù)的MPB-PE。在組分結合靶向試劑的實施方式中，上面提到的混合物可進一步包括大約1至大約2摩爾百分數(shù)的至少一種靶 向試劑，其中其它脂質成分的量減少以保持上述成分的比例。制備一般地，當至少一種脂質成分和任選的靶向試劑在含水介質中經(jīng)由微流化或其它 涉及空化的方法被均勻化時，形成了本發(fā)明組合物的組分。在本發(fā)明的實施方式中，脂質成分(或多種)和任選的靶向試劑(或多種)可在 PH大約6. 0至pH大約8. 0的ISmM磷酸鹽緩沖液中被均勻化。磷酸鹽緩沖液中脂質成分濃 度可在大約10至大約200mg/ml的范圍內(nèi)以及其中的任何整數(shù)和所有的全部整數(shù)以及部分 整數(shù)。在一種實施方式中，脂質成分濃度為大約30至大約150mg/ml。在更優(yōu)選的實施方式 中，脂質成分濃度為大約15至大約50mg/ml。在最優(yōu)選的實施方式中，脂質成分濃度為大約 28-30mg/ml。含水介質、脂質成分(或多種)和任選的靶向試劑的均勻化可在適于均勻化的 設備中通過處理而實現(xiàn)。合適的設備的實例包括但不限于Polytron System PT 6100、 M-IIO-EH微流化床、超聲破碎儀(ultrasonic sonicator)、高壓膜過濾裝置和均化擠出機。在使用微流化床的情況中，微流化床優(yōu)選地在高于脂質成分的最高轉化溫度的溫 度下進行操作，并且最優(yōu)選地在高于大約75°C的溫度下操作。因此，高溫使得脂質成分(或 多種)中存在的任何?；屯榛溝蛄黧w一樣地移動以及符合鄰近的烴部分并且與之締 合。這些非共價締合直接導致本發(fā)明組合物的組分的形成。對于微流化方法，為了實現(xiàn)動態(tài)組分分級——其中一些組分具有小于20納米 的半徑，需要在9000psig下高達大約五次獨立的過輥壓煉。通過Coulter N-4 Plus Sub-MicronParticle Size Analyzer產(chǎn)生的組分分析數(shù)據(jù)顯示在圖9中并且表現(xiàn)出對同一 樣品當它在 Coulter N-4 Plus Sub-Micron Particle Size Analyzer 中保持不動時 10 次 重復的尺寸分析。該數(shù)據(jù)證實了組分分級的動態(tài)特性以及在含水介質中本發(fā)明組合物的組 分之間相互作用的流體特性。微流化后，所得組分可通過0. 8微米至0. 2微米一套Supor 膜進行無菌過濾。在亞微米顆粒形成過程期間，氫鍵結合、離子鍵結合、范德華相互作用、偶極相互 作用、離子_偶極相互作用和疏水性締合指示了本發(fā)明組合物的組分組合的方式。雖然不 希望受任何特定理論束縛，但是應當認為所有這些力的相互作用在上面所示的條件下不同 程度地變化，產(chǎn)生本發(fā)明動態(tài)分級的組分。靶向試劑的結合在某些實施方式中，本發(fā)明的成分可任選地包括靶向試劑。靶向試劑改變組分的 生物分布并且進一步提高了締合的治療劑的效力。例如，本發(fā)明組合物的組分可結合一種 或多種靶向試劑，其起到將所述組分靶向特定細胞或細胞外受體的作用?？蛇x地，作為非限 制性實例，靶向試劑可掩蔽組分免于網(wǎng)狀內(nèi)皮組織(巨噬細胞)的識別。在一種實施方式中，靶向試劑促使胰島素遞送至肝臟以控制飯后糖原儲存并且包 括一類被稱為“肝細胞靶向分子”(HTM)的分子。HTM實例包括生物素衍生的靶向試劑諸 如1，2_ 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-(生物素基)以及金屬衍生的靶向試 劑諸如聚[Cr-雙(N-2，6-二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]。金屬衍生的靶向 試劑和生物素衍生的靶向試劑在下面進行討論并且充分地描述在美國專利7，169，410和
184，603，044 ；PCT 申請 PCT/US06/19119 ；和美國專利申請 11/384，728 和 11/384，659 中。生 物素衍生的靶向試劑的另外的實例被公開在表2中。 當靶向試劑包括生物素、亞氨基生物素、羧基生物素、生物胞素或亞氨基生物胞素 時，生物素、亞氨基生物素、羧基生物素、生物胞素或亞氨基生物胞素分子可經(jīng)由酰胺鍵結 合到磷脂分子諸如1，2-二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺的氮上。化合物也可通過 酯鍵結合到分子諸如膽固醇。在生物胞素和亞氨基生物胞素的情況中，化合物可經(jīng)由亞氨 基生物胞素的末端氮和苯甲酰硫代乙酰三甘氨酸的末端羰基之間的酰胺鍵結合到苯甲酰 硫代乙酰三甘氨酸。上述那些的可選鍵連接是可能的并且被認為在本發(fā)明的范圍內(nèi)。

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在本發(fā)明的一個實施方式中，金屬衍生的靶向試劑可以是聚合的或單體的。聚合 金屬衍生的靶向試劑被充分描述在U. S. 7，169，410中。單體金屬衍生的靶向試劑被描述在U. S. 4，603，044中。無論是聚合的或者單體的，化合物一般包括金屬(一般地作為無機鹽 購買)，其可選自過渡或內(nèi)過渡金屬或所述過渡金屬的相鄰金屬。所述金屬選自其中的過 渡和內(nèi)過渡金屬包括Sc (鈧)、Y(釔)、La(鑭)、Ac (錒)、錒系元素；Ti (鈦)、Zr (鋯)、 Hf (鉿)、V (釩)、Nb (鈮),Ta(II)、Cr (鉻)、Mo (鉬)、W(鎢)、Mn (錳)、Tc (锝)、Re (錸)、 Fe (鐵)、Co (鈷)、Ni (鎳)、Ru (釕)、Rh (銠)、Pd (鈀)、Os (鋨)、Ir (銥)和 Pt (鉬)。所 述金屬選自其中的過渡金屬的相鄰金屬是Cu(銅)、Ag(銀)、Au(金)、Zn(鋅)、Cd(鎘)、 Hg (汞)、Al (鋁)、Ga (鎵)、In (銦)、Tl (鉈)、Ge (鍺)、Sn (錫)、Pb (鉛)、Sb (銻)和 Bi(鉍)、和Po(釙)。優(yōu)選地，所述金屬是鉻。有用鹽的非限制性實例包括氯化鉻(III)六水合物；氟化鉻(III)四水合物；溴 化鉻(III)六水合物；檸檬酸鋯(IV)銨絡合物；氯化鋯(IV)；氟化鋯(IV)水合物；碘化鋯 (IV)；溴化鉬(III)；氯化鉬(III)；硫化鉬(IV)；鐵(III)水合物；磷酸鐵(III)四水合物、 硫酸鐵(III)五水合物等。除了金屬外，金屬衍生的靶向試劑包括一種或多種絡合劑。絡合劑是能與優(yōu)選的 金屬形成水不溶性配位絡合物的化合物。有幾類合適的絡合劑。絡合劑可選自式(1)的亞氨基二乙酸類，其中R1是低級烷基、芳基、芳基低級烷基
或雜環(huán)取代基。 合適的式(1)化合物包括N-(2，6_ 二異丙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2，6_ 二乙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2，6_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(4-異丙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(4_ 丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N_(2，3-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2，4_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N_(2，5-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(3，4_ 二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N_(3，5-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(3_ 丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2-丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(4-叔丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(3- 丁氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(2-己氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；
N-(4-己氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；氨基吡咯基亞氨基二乙酸；N-(3_溴_2，4，6-三甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；苯并咪唑甲基亞氨基二乙酸；N-(3-氰基-4，5-二甲基-2-吡咯基氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(3-氰基-4-甲基-5-芐基-2-吡咯基氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；和N-(3_氰基-4-甲基-2-吡咯基氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸以及式⑵的 N-(3-氰基-4-甲基-2-吡咯基氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸的其它衍生物，
其中R2和R3為下列
異-C4H9 CH2CH2SCH3 H CH2C6H4-P-OH

CHo CHo
CH3 CH3 CH3 CH3 CH,
異-C4H9 CH2CH2SCH3 C6H5 CH2C6H5
CH2C6H4-對-OCH3
(3)
可選地，絡合劑可選自式(3)的亞氨基二酸衍生物類，其中禮、&和R6在每個情況 下都獨立地進行選擇并且可以是氫、低級烷基、芳基、芳基低級烷基、烷氧基低級烷基和雜環(huán)的。
OO
IlIl
R4一O——C——低級亞烷基--N—低級亞烷基——C——O——R6
R5合適的式(3)化合物包括N' -(2-乙?；粱?亞氨基二乙酸(NAIDA)； N' -(2-萘基甲基)亞氨基二乙酸(匪IDA)；亞氨基二羧甲基-2-萘基酮酞絡合劑；3(3 7a :12a 三羥基-24-降膽烷基_23_亞氨基二乙酸；苯并咪唑甲基亞氨基二乙酸；和N_(5， 娠烯-3-對醇-2-酰甲氨酰甲基)亞氨基二乙酸。絡合劑可選自式⑷的氨基酸類，
40 其中R7是氨基酸側鏈；其中R8可以是低級烷基、芳基和芳基低級烷基；并且其中 R9 是吡哆醛基(pyridoxylidene)。合適的式(4)氨基酸是脂肪族氨基酸，其包括但不限于甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、 亮氨酸、異亮氨酸；羥基氨基酸，其包括絲氨酸和蘇氨酸；二羧基氨基酸及其酰胺，其包括 天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺；具有堿性官能團的氨基酸，其包括賴氨酸、羥基賴 氨酸、組氨酸、精氨酸；芳族氨基酸，其包括苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、甲狀腺素；和含硫氨 基酸，其包括胱氨酸和蛋氨酸。絡合劑也可選自氨基酸衍生物，其包括但不限于(3-丙氨酸-y_氨基)丁酸、0-重 氮基乙?；z氨酸(氮雜絲氨酸)、高絲氨酸、鳥氨酸、瓜氨酸、青霉胺及吡哆醛類化合物的 成員。吡哆醛類化合物包括但不限于吡哆醛谷氨酸；吡哆醛異亮氨酸；吡哆醛苯丙氨酸； 吡哆醛色氨酸；吡哆醛-5-甲基色氨酸；吡哆醛-5-羥基色胺；和吡哆醛-5- 丁基色胺。絡合劑也可選自式(6)的二胺類 其中Rltl是氫、低級烷基或芳基；R11是低級亞烷基或芳基低級烷基；R12和R13在各 個情況下都獨立地進行選擇并且可以是氫、低級烷基、烷基、芳基、芳基低級烷基、?；s環(huán) 的、甲苯、磺?；蚣妆交撬狨ァ：线m的式(6) 二胺類的實例包括但不限于乙二胺-N，N 二乙酸；乙二胺-N，N-雙 (-2-羥基-5-溴代苯基)乙酸酯；N'-乙酰基乙二胺_N，N二乙酸；N'-苯甲酰乙二胺-N， N 二乙酸；N' _(對甲苯磺?；?乙二胺_N，N 二乙酸；N' _(對叔丁基苯甲酰)乙二胺-N， N 二乙酸；N' _(苯磺?；?乙二胺-N，N 二乙酸；N' _(對氯苯磺?；?乙二胺-N，N 二乙 酸；N' _(對乙基苯磺?；叶?N，N 二乙酸；N'-酰基和N'-磺酰基乙二胺-N，N 二 乙酸；N' _(對正丙基苯磺?；?乙二胺-N，N 二乙酸；N' _(萘-2-磺?；?乙二胺-N， N 二乙酸；和N' _(2，5-二甲基苯磺?；?乙二胺-N，N 二乙酸。絡合化合物或試劑的其它非限制性實例包括青霉胺；對巰基異丁酸；二氫硫 辛酸；6-巰基嘌呤；己酯草酸-雙(縮氨基硫脲)；肝膽胺復合物，1-胼基酞嗪(胼 苯噠嗪)；磺?；?；肝膽氨基酸席夫堿復合物Ofepatobiliary Amino Acid Schiff BaseComplexes)；吡哆醛谷氨酸；吡哆醛異亮氨酸；吡哆醛苯丙氨酸；吡哆醛色氨酸；吡哆 醛5-甲基色氨酸；吡哆醛-5-羥基色胺；吡哆醛-5-丁基色胺；四環(huán)素；7-羧基-對羥基喹 啉；酚酞；曙紅I藍；曙紅I黃；verograffin ；3-羥基-4-甲酰-非那吡啶(pyridene)谷氨 酸；偶氮基取代的亞氨基二乙酸；肝膽染料復合物諸如孟加拉玫瑰紅；剛果紅；磺溴酞鈉； 溴苯酚藍；甲苯胺藍；和吲哚菁綠；肝膽造影劑，諸如膽影酸；和甘氨碘苯酸；膽汁鹽，諸如膽紅素；cholgycyliodohistamine ；和甲狀腺素；肝膽硫代復合物，諸如青霉胺；對巰基異 丁酸；二氫硫辛酸；6-巰基嘌呤；和己酯草酸-雙(縮氨基硫脲)；肝膽胺復合物，諸如1-胼 基酞嗪(胼苯噠嗪)；和磺酰基脲；肝膽氨基酸席夫堿復合物，其包括吡哆醛-5-羥基色胺； 和吡哆醛-5- 丁基色胺；肝膽蛋白復合物，諸如魚精蛋白；鐵蛋白；和脫唾液酸血清類粘蛋 白；以及脫唾液酸復合物，諸如乳糖胺化白蛋白(lactosaminated albumin)；免疫球蛋白、 G、IgG ；和血紅蛋白。治療劑的添加如前所示，在某些實施方式中，_種或多種治療劑可與本發(fā)明組合物的組分締合。 治療劑的實例包括但不限于胰島素、干擾素、利妥普單抗、曲妥珠單抗、尿酸酶、組織纖溶酶 原激活物、抗胸腺細胞球蛋白、各種疫苗、肝素、肝素類似物、抗凝血酶III、非格司亭、醋酸 普蘭林肽、艾塞那肽、埃替非巴肽、抗蛇毒素、IgG、IgM、凝血因子VII和VIII、HGH、GLP-1、促 紅細胞生成素、甲狀旁腺激素、血清素、D-或L-甲狀腺素、降鈣素、單克隆抗體以及其它治 療肽。在某些實施方式中，治療劑諸如胰島素與本發(fā)明組合物的組分締合。在一種實施 方式中，締合是通過將低摩爾濃度的胰島素溶液加入組分的含水懸浮液中而實現(xiàn)的。在該 實施方式中，參與組分組裝的脂質分子的數(shù)目遠超過交織和/或結合在組分基質之上或之 內(nèi)的胰島素分子的數(shù)目。組分與胰島素的這種高比例使得胰島素和組分之間分子相互作用 最小化，確保了本發(fā)明組合物的組分的自組裝和自組織過程不受干擾。該高比例促使形成 了穩(wěn)定的組分/胰島素締合。不希望受特定何理論束縛，應當認為與本發(fā)明組合物的組分締合的治療劑(或多 種)的量似乎是加載時間和脂質濃度的函數(shù)。隨著含水介質中脂質成分濃度增加，另外的 治療劑與本發(fā)明組合物的組分締合。加載治療劑所需的時間可以是從幾小時至大約一周的 任何時間。相對于本發(fā)明組合物的組分的濃度，治療劑的低濃度在脂質顆粒輸送系統(tǒng)中是獨 特的。一般地，脂質體或脂質體樣輸送系統(tǒng)已經(jīng)使用了更大量的治療劑。本組合的這種實施 方式的效力表明利用較少的治療劑而仍能在患者中獲得藥理學上期望的結果是可能的。 本發(fā)明的這種實施方式因此提供有利的治療選擇。在其它實施方式中，較高濃度治療劑的加入可能是期望的且有利的。本發(fā)明組合 物的組分成員能與較高摩爾濃度的任何給定治療劑溶液締合并且耐受(tolerate)。本發(fā)明組合物的組分的實施方式的圖示實例被描繪在圖1中。圖1圖解了組分/ HTM/胰島素結構。胰島素分子經(jīng)由非共價靜電相互作用結合到組分表面。血清素象胰島素一樣也可利用根據(jù)本發(fā)明的組分/HTM復合物被輸送至肝臟。在 門脈(口服)葡萄糖裝載期間，血清素在肝臟水平上與胰島素共同作用以激活肝的葡萄糖 貯存。為了達到期望的效果，血清素必須被輸送至肝臟。以藥學上可接受的劑量經(jīng)由注射 或口服輸送導入的非靶向血清素不能有效地誘導期望的活性。因此，包括組分/HTM/血清 素結構的本發(fā)明的實施方式為這種重要的葡萄糖調節(jié)激素提供了高度期望的輸送機理。在 為血清素輸送設計的本發(fā)明的實施方式中，選擇以形成組合物組分的脂質成分包括大約62 摩爾百分數(shù)的1，2- 二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙 十六烷基酯、大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的靶向試劑。
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降鈣素是調節(jié)骨新陳代謝的激素。由于疾病諸如骨質疏松癥的高度流行性，這種 激素的口服制劑是非常期望的。目前降鈣素僅僅是通過注射可輸送的。在為降鈣素輸送設 計的本發(fā)明實施方式中，選擇的以形成包括在降鈣素內(nèi)的組合物組分的脂質成分包括大約 62摩爾百分數(shù)的1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙 十六烷基酯和大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇。GLP-I是在肝臟和胰臟都起作用的肽。在肝臟中，GLP-I在進餐期間起到刺激糖原 積累的作用。然而，其中GLP-I 口服施用的現(xiàn)有技術給藥方法證明差的生物利用率并且口 服劑量給藥后降低的效力。在本發(fā)明的實施方式中，GLP-I與本發(fā)明組合物的組分締合形成 組分/GLP-I結構。組分/GLP-I結構可進一步包括靶向試劑。優(yōu)選地，選擇的以形成包括 GLP-I在內(nèi)的組合物組分的脂質成分包括大約62摩爾百分數(shù)的1，2- 二硬脂?；?sn-甘油 基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯和大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇。甲狀腺素象胰島素一樣一般也是不可口服生物利用的。然而，在本發(fā)明的實施方 式中，甲狀腺素可與本發(fā)明組合物的組分締合，形成組分/甲狀腺素結構。優(yōu)選地，選擇的 以形成包括在甲狀腺素內(nèi)的組合物組分的脂質成分包括大約62摩爾百分數(shù)的1，2-二硬脂 ?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、大約16摩爾百 分數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的生物素DHPE。盡管本發(fā)明已經(jīng)依據(jù)特定的治療劑/組分結構進行了描述，但是本文描述的任何 治療劑可與本發(fā)明的組分締合以形成治療劑/組分結構。共價連接的治療劑在本發(fā)明的某些實施方式中，治療劑可被共價連接到本發(fā)明的脂質成分。然而， 一般地，治療劑與脂質成分的共價連接不是直接的，而是通過形式-c(0) (CH2)nSR的連接體 介導的，其中酰胺、酯或硫代酰胺鍵在治療劑和連接體之間形成。優(yōu)選地，η是1和10之 間的整數(shù)。甚至更優(yōu)選地，η是1、2或3。當連接體被連接到治療劑時，R—般是保護基團 諸如(0) CH3O其它合適的硫醇保護基團可在Green，s Protective Groups in Organic Synthesis, Wuts 等人，4th edition，2007 中找到。在連接體被結合到治療劑之后，保護基團R從連接體上去除以暴露游離的硫醇基 團。優(yōu)選地，保護基團在不干擾目前連接的治療劑的條件下被去除。該硫醇然后可與脂質 成分諸如MPB-PE經(jīng)歷邁克爾加成反應以形成硫醚。優(yōu)選地，脂質成分MPB-PE已經(jīng)被結合 到本發(fā)明化合物的組分中，然而連接體可在其結合本發(fā)明組分之前被結合到MPB-PE。反應 順序將取決于治療劑耐受某些反應條件的能力。在高溫下可能變性的絡合蛋白的情況下， 優(yōu)選的是在MPB-PE已經(jīng)結合至本發(fā)明化合物的組分后進行邁克爾加成反應。在共價相互作用的實例中，IgG被共價連接到本發(fā)明組分的脂質成分以形成組分 /IgG結構。IgG是通常不可口服生物利用的抗體。在本發(fā)明的這種實施方式中，選擇的以 形成組分/IgG結構的組分的脂質成分包括大約68摩爾百分數(shù)的1，2- 二硬脂?；?sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、大約18摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、大約9摩爾百分數(shù)的膽固醇 和大約3摩爾百分數(shù)的MPB-PE。為了形成本發(fā)明的組分，1,2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基_3_磷酸膽堿、磷酸雙十六 烷基酯和膽固醇如本文前述被微流化以形成尺寸限制在50與60納米之間的組分。然后， 這種組分的懸浮液被轉移到已經(jīng)涂布有MPB-PE薄膜的圓底燒瓶。該懸浮液被加熱至大約62°C，其中溫度沒有降至60°C以下或者超過65°C。加熱的懸浮液隨后被攪拌15分鐘直至 所有的MPB-PE已經(jīng)被結合到本發(fā)明的組分中。獨立地，IgG與10倍過量的下面的連接體前體I (R = CH3C(O)，n = 1)反應以形 成II。然后，利用2. 5X 25cm Sephadex G-25柱——用pH 7. 4下的18mM磷酸鹽緩沖液加 上1. OmM EDTA緩沖液平衡——進行化合物II純化。其次，化合物II上的乙?；Ｗo基團通過在環(huán)境溫度下于含有1. OmM EDTA的 ISmM磷酸鈉緩沖液(pH 7. 4)中將化合物II與50mM鹽酸羥胺攪拌2小時而去除。所得游 離硫醇III如化合物II所述在2. 5X25cm Sephadex G-25柱中進行純化。 提純后，200微摩爾的化合物III立即與早先制備的IOml組分溶液混合。反應混 合物被攪拌15分鐘，在這期間化合物III經(jīng)歷邁克爾加成反應，其中MBP-PE的馬來酰亞胺 官能度被結合到本發(fā)明組分中。通過加入50倍摩爾過量的N-乙基馬來酰亞胺，結合反應 停止，并且過量的III被去除。盡管上述實施例關于IgG進行描述，但是它同樣適用于任何具有堿性氮或游離羥 基或者其它能與連接體或連接體前體結合的官能團的治療劑。穩(wěn)定性盡管本發(fā)明組合物的組分成員在含水介質中配制，但是組合物的組分沒有在水中 顯示出長期的穩(wěn)定性。具體地，水有助于組合物組分的任何脂質成分中存在的任何酰基鏈 的水解。水環(huán)境也允許任何脂質成分中存在的任何不飽和酰基鏈迅速氧化。在本發(fā)明的優(yōu) 選實施方式中，本發(fā)明組合物的組分可通過與蛋白聚糖諸如改性膠原——一般被稱為干的 粒狀明膠——的相互作用被保護以進行長期貯存。干的粒狀明膠當與組分的含水懸浮液接 觸時穩(wěn)定了組分并且形成本發(fā)明的組合物。干的粒狀明膠與本發(fā)明組合物的組分的含水懸浮液的反應產(chǎn)生半固體膠狀凝膠， 其屏蔽組分免于與水直接接觸。未與明膠締合的任何水通過在大約2°C至大約8°C下冷凍 儲存而慢慢蒸發(fā)。然而，水可以通過包括但不限于冷凍干燥和噴霧干燥的技術進行去除。這產(chǎn)生小球樣“干的”組分/明膠復合物，其是本發(fā)明組合物。在組合物中，組分 以元素以可逆的方式被部分脫水并且被干的明膠的蛋白質網(wǎng)格鰲合。該鰲合被通過氫鍵結 合、離子鍵結合、范德華相互作用以及脂質成分、水和蛋白質結構即胰島素之間的疏水性結 合而相互作用的結構水、結構脂質和結構明膠所激活。這證實了明膠沒有起到乳化劑或懸 浮劑的作用。因此，“干”的小球適于長期儲存，因為水的活性已經(jīng)被減輕。這些小球可被進 一步加工成粒狀或自由流動的粉末以進行最終的膠囊填充或壓片，同時保持其穩(wěn)定性。在給患者口服給藥后，“干”的小球變得水合并且再一次呈現(xiàn)半固體膠狀凝膠狀 態(tài)。在進一步暴露于胃環(huán)境后，隨著明膠的溶解，凝膠變成液體。明膠完全溶解后，本發(fā)明 組合物的組分成員再水合，導致在胃環(huán)境內(nèi)形成成分的新懸浮液。重構的組分然后可被吸 收入門脈血流中。
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重要的是認識到明膠在本發(fā)明這方面的作用是作為組合物的活性穩(wěn)定劑，而不是 作為在許多其它藥物組合物的口服制劑中通常發(fā)現(xiàn)的惰性填料。即是，除了上述應用之外， 還預期了明膠作為惰性填料的另外應用。盡管明膠被用于本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，其他類似明膠的化合物也可以使用。 將充當活性穩(wěn)定劑的試劑的實例包括但不限于阿拉伯樹膠(gum arabic)、瓊脂(凍瓊脂 (agar-agar)；植物明膠；瓊脂糖(gelosa)；中國或日本明膠)、褐藻酸、藻酸鈉(褐藻酸; 鈉鹽；褐藻膠；藻酸鹽(Manucol)；藻蛋白酸(Norgine) ；Kelgin)、卡伯姆(羧聚乙烯)、 角叉菜膠、羧甲基纖維素鈉(carbose D ；carboxymethocel S ；CMC ；纖維素樹膠)、粉末狀 纖維素(Degussa)、羥乙基纖維素(纖維素；2-羥基乙基醚；Cellosize;纖維素羧乙基醚 (Natrosol))、羥丙基纖維素(纖維素；2-羥丙基醚；Klucel)、羥丙基甲基纖維素(纖維素； 2_羥丙基甲基醚)、甲基纖維素(纖維素；甲基醚Methocel)、聚維酮(2_吡咯烷酮；1_乙 烯基_ ；均聚物；聚乙烯吡咯烷酮)、黃芪膠(黃芪膠；Hog Gum ；Goat' s Thom)和黃原膠 (Keltrol)。象明膠一樣，并且適當?shù)那闆r下，這些化合物也可被用作惰性填料。MM用于口服給藥的本發(fā)明組合物和治療劑(在靶向試劑存在或不存在下)的制 劑——下文稱“組合物”——可以以分離的固體劑量單位的形式制備、包裝或銷售，其包括 但不限于藥片、硬或軟的膠囊、扁囊藥劑、片劑或錠劑，每個都包含預定量的活性成分。其它 適于口服給藥的制劑包括但不限于粉狀或粒狀制劑、含水懸浮液或乳劑。包括本發(fā)明組合物的藥片例如通過將組合物任選地與一種或多種另外的組分壓 縮或成型而制備。壓縮的藥片可通過在合適的裝置中將任選地與粘合劑、潤滑劑、賦形劑、 表面活性劑和分散劑中一種或多種混合的自由流動形式的組合物諸如粉末狀或粒狀制備 物壓縮而制備。成型的藥片可通過在合適的裝置中將組合物、藥學上可接受的載體和至少 足以潤濕該混合物的液體成型而制備。用于藥片制備的藥學上可接受的賦形劑包括但不限于惰性稀釋劑、粒化和崩解 劑、粘合劑和潤滑劑。已知的分散劑包括但不限于土豆淀粉和羧甲淀粉鈉。已知的表面活 性劑包括但不限于十二烷基硫酸鈉。已知的稀釋劑包括但不限于碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、微 晶纖維素、磷酸鈣、磷酸氫鈣和磷酸鈉。已知的粒化和崩解劑包括但不限于玉米淀粉和褐藻 酸。已知的粘合劑包括但不限于明膠、阿拉伯樹膠、預糊化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和羥 丙基甲基纖維素。已知的潤滑劑包括但不限于硬脂酸鎂、硬脂酸、硅石和滑石。藥片可以是未包被的或者它們采用已知方法進行包被以實現(xiàn)在對象胃腸道的延 時崩解，由此提供組合物的持續(xù)釋放和吸收。例如，物質諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸 甘油酯可被用于包被藥片。另外例如，藥片可采用美國專利號4，256，108 ；4, 160，452 ；和 4，265，874中描述的方法進行包被以形成滲透控制釋放藥片。藥片還可包括甜味劑、調味 劑、著色劑、防腐劑或這些的一些組合，以便提供藥學上美觀且可口的制備物。包含組合物的硬膠囊可用生理學可降解的組合物諸如明膠制成。這樣的硬膠囊包 括活性成分，并且還可包括另外的組分，其包括例如惰性固體稀釋劑諸如碳酸鈣、磷酸鈣、 高嶺土或纖維醋法酉旨(cellulose acetate hydrogen phthalate)。包含組合物的軟明膠膠囊可用生理學可降解的組合物諸如明膠制成。適于口服給藥的組合物的液體制劑可以液體形式或干產(chǎn)物的形式制備、包裝或銷售，所述干產(chǎn)物意欲在使用前用水或另一合適的載體重構，其經(jīng)受早先公開的穩(wěn)定性限制。液體懸浮液可用常規(guī)方法進行制備以實現(xiàn)組分在含水載體中的懸浮。含水載體包 括例如水和等滲壓鹽水。含油載體僅可在這樣的溶劑與本發(fā)明組合物的組分不是不相容的 范圍內(nèi)被使用。在含油懸浮液與本發(fā)明組合物的組分不是不相容的范圍內(nèi)，含油懸浮液還 可包括增稠劑。液體懸浮液還可包括一種或多種另外的組分達到這樣的程度，以致所述組分不干 擾本發(fā)明組合物的組分的結構。另外的組分的實例包括但不限于懸浮劑、分散或潤濕劑、乳 化劑、緩和劑、防腐劑、緩沖劑、鹽、調味劑、著色劑和甜味劑。已知的懸浮劑包括但不限于山梨醇糖漿、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃芪膠、阿拉 伯樹膠和纖維素衍生物諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素。已知的乳化劑包括但不限于阿拉伯樹膠。已知的防腐劑包括但不限于甲基、乙基、 或正丙基-對羥基苯甲酸酯、抗壞血酸和山梨酸。已知的甜味劑包括例如甘油、丙二醇、山 梨醇、蔗糖和糖精。本發(fā)明藥物制劑的粉末狀和粒狀制劑可采用已知的方法制備。這樣的制劑可直接 施加給對象，例如用于形成藥片、填充膠囊或者通過向其中加入含水載體制備含水懸浮液 或溶液。這些制劑中每一種還可包括分散劑或潤濕劑、懸浮劑和防腐劑中一種或多種。另 外的賦形劑諸如填料和甜味劑、調味劑或著色劑也可被包括在這些制劑中。治療疾病的方法疾病諸如糖尿病可通過口服施用本發(fā)明的化合物進行治療，其中胰島素是締合的 治療劑。類似地，糖尿病可通過口服施用本發(fā)明的化合物進行治療，其中胰島素是締合的治 療劑，并且其中另一形式的胰島素被共同給藥。共同給藥的途徑包括但不限于口服給藥、肌 肉內(nèi)注射、吸入、靜脈內(nèi)注射、動脈內(nèi)注射以及任何其它形式的給藥。盡管醫(yī)生將能對于給定患者選擇合適的劑量，但是可在本發(fā)明化合物給定制劑中 輸送的劑量范圍為大約1至大約40單位，但可以是5、10、15、20、25、30或35單位。然而給 定制劑可包含其中任何全部或部分的整數(shù)并且可超過40單位。試劑盒本發(fā)明還包括試劑盒，其包括本發(fā)明組合物和指導材料，指導材料描述了將組合 物施用給哺乳動物。在另一實施方式中，該試劑盒包括本發(fā)明組合物、共同給藥的胰島素， 以及指導材料，指導材料描述了共同給藥方法。如本文所用，“指導材料”包括出版物、唱片、圖表或任何其它表達介質，其可被用 于表達試劑盒中本發(fā)明組合物用于引起本文所述各種疾病或病癥的減輕的益處。任選或者可選地，指導材料可描述一種或多種減輕哺乳動物細胞或組織中疾病或 病癥的方法。試劑盒的指導材料可例如添加到包含本發(fā)明的容器中或者與包含本發(fā)明的容 器一起運送?？蛇x地，指導材料可與容器分別運送，意圖指導材料和化合物可被接受者協(xié)作 地使用。實驗實施例現(xiàn)在將參考下列實施例描述本發(fā)明。這些實施例僅僅是為了例證的目的提供的并 且本發(fā)明絕沒有被解釋為限于這些實施例而應當解釋為包括由于本文提供的教導而變得 顯而易見的任何和全部變化形式。
實驗1-不包含靶向試劑的組合物的給藥組合物——其組分成員產(chǎn)生自包括大約62摩爾百分數(shù)的1，2_ 二硬脂?；?sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇 和無靶向試劑的脂質成分混合物——按照本文一般描述的微流化方法進行制備。已知部分 的脂質成分包括14C標記的磷脂。通過0. 2微米過濾器的過濾后，平均組分尺寸小于lOOnm， 如Coulter亞微米粒度分析儀所測量。10mg/kg體重的組合物樣品(包含85，OOOcpm 14C放射性標記)然后被注射到麻 醉的230克禁食的但其它正常的大鼠的十二指腸中。劑量給藥后15和30分鐘從門靜脈和 股靜脈中取血液用于計數(shù)(圖2)。在劑量給藥30分鐘時，大鼠被處死并且取出血液、肝臟 和脾臟的代表性樣品進行分析(圖3)。如14C所測量，在大鼠的門脈血液和股脈血液中發(fā)現(xiàn)標記的組分。14C標記的組分 的門脈血液水平高于股脈血液水平(圖2)。在劑量給藥后30分鐘時，注射到腸的組分的大 約15%在血液中發(fā)現(xiàn)?？倲?shù)的大約4%在肝臟中發(fā)現(xiàn)并且大約在脾臟中發(fā)現(xiàn)。就肝臟 和脾臟的相對大小而論，按重量計，脾臟吸收大大高于肝臟吸收。實驗2-肝細胞靶向為了證實從腸中吸收組合物，組合物——其包括胰島素和產(chǎn)生自包括大約61摩爾 百分數(shù)的1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷 基酯、大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的聚[Cr-雙(N-2，6-二異丙基苯 氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)](其中已知部分的膦脂成分包括14C標記的膦脂)的脂質成 分混合物的組分——如本文所公開的一般制備方法所述而制備。在將標記的組合物劑量施 用給大鼠之前，大鼠禁食24小時并且禁水4小時。禁食的大鼠然后允許從包含組合物的標 有刻度的水瓶中飲水。15分鐘后從籠子中取出飲水瓶，測量從飲水瓶中攝取的水量，并且計 算攝取的組合物量。在15、30和45分鐘對大鼠的血液進行取樣，并且計數(shù)每種樣品中的放 射性標記(圖4)。在45分鐘大鼠被處死并且計數(shù)肝臟的放射性標記(圖5)。如圖4所示，在水從籠子中取出后15分鐘，大約8%攝取的劑量在大鼠的血液中 發(fā)現(xiàn)。在15與45分鐘之間大鼠血液中組分的量保持恒定。在45分鐘時肝臟吸收為大約 8%。在45分鐘時脾臟吸收為攝取劑量的大約(圖5)?？偽諡榇蠹s17% (包括血 液、肝臟和脾臟)。實驗3-在阿脲_鏈脲霉素處理的小鼠中組合物的肝細胞靶向通過施加鏈脲霉素和阿脲使本試驗中使用的小鼠患上糖尿病。然后將糖尿病動 物分成兩組。對照組(11只小鼠)口服劑量給藥普通胰島素。實驗組(7只小鼠)口服 劑量給藥這樣的組合物，其包括胰島素和產(chǎn)生自包括大約61摩爾百分數(shù)的1，2_ 二硬脂酰 基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、大約16摩爾百分 數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的聚[Cr-雙(N-2，6-二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二 乙酸)](其中已知部分的膦脂成分包括14C標記的膦脂)的脂質成分混合物的組分。劑量 給藥利用實驗2中描述的水瓶劑量給藥方法完成。患上糖尿病后，兩組中的大鼠在7天同等處理，并且進食普通食物和普通水。這7 天后，對照組的大鼠用食物和可得的飲用水中0. lU/ml的普通胰島素處理另外的7天實驗 期間。在相同的7天實驗期間后，實驗組被進食普通食物與可在飲用水中以0. lU/ml得到的本發(fā)明組合物。在各個7天期間結束時，通過Beckman血液葡萄糖分析儀在血液的尾部 靜脈樣品中測量血液葡萄糖。在用上述組合物劑量給藥的組中口服給藥的胰島素的藥理學效力顯示在圖6中。 在7天時，與接受普通胰島素的鼠——其血液葡萄糖基本上沒有變化——相比，接受所述組 合物的小鼠血液葡萄糖具有統(tǒng)計學上顯著的降低(P < 0. 01)。實施例4-血清素的體內(nèi)給藥組合物——其包括血清素和產(chǎn)生自包括大約61摩爾百分數(shù)的1，2_ 二硬脂酰 基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、大約16摩爾百分 數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的聚[Cr-雙(N-2，6-二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二 乙酸)]的脂質成分混合物的組分——的肝臟作用在患2型糖尿病的狗(迷走神經(jīng)干切斷 術)中得到證實。狗被禁食，然后被麻醉。將采血管置于肝靜脈和門靜脈中以能夠同時采 血。將葡萄糖以0.5g/kg/小時的速度輸注到門脈系統(tǒng)。接著，上述組合物以30 μ g/kg體 重的單劑量十二指腸內(nèi)給藥。結果描繪在圖7中并且證實作為本發(fā)明組合物十二指腸內(nèi)給 藥的血清素(也被稱為5-羥基色氨或5-HT)以低劑量在門脈葡萄糖加載期間將2型糖尿 病狗從肝臟葡萄糖輸出轉化成吸收方面是有效的。實施例5-降鈣素的體內(nèi)給藥正常禁食的對照大鼠經(jīng)由皮下注射給予這樣的鮭魚降鈣素劑量，以致于觀察到初 始10%的血液鈣降低。然后注射后測量血液鈣水平六小時。實驗組的大鼠通過口服填喂 法以組合物的形式給予相同有效劑量的降鈣素，所述組合物包括降鈣素和產(chǎn)生自包括大約 61摩爾百分數(shù)的1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙 十六烷基酯和大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇的脂質成分混合物的組分。接著測量血液鈣水 平六小時(圖8)。在非對照大鼠中觀察到高達20%的血液鈣降低。這個差值在統(tǒng)計學意 義上是顯著的(圖8)。實施例6-在2型糖尿病對象中靶向胰島素的臨床試驗制備了包含本發(fā)明組合物的膠囊。組合物包括作為治療劑的胰島素、明膠和產(chǎn)生 自包括大約61摩爾百分數(shù)的1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分 數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的生物素-HDPE 鈉鹽的脂質成分混合物的組分。每個膠囊含有2U的胰島素。六個充分表征的2型糖尿病患者參與了對照研究。患者被保持其慣常的2型口服 抗糖尿病治療。在早飯、午飯和晚飯的60克碳水化合物進餐前30分鐘，研究參與者也被給 予安慰劑膠囊或上述膠囊。對于每個對象，在13小時期間在常見的間隔時間取出血液樣 品，并且計算曲線下的增量面積以得到血液葡萄糖值。以0. lU/kg體重/餐——在給定進餐時胰島素皮下注射所經(jīng)常使用的相同劑量， 對于三餐中每一餐都觀察到統(tǒng)計學意義上顯著的AUC降低。圖10描繪了圖示形式的實驗結果。7- fl夷島素濃It胰島素U-500包含500單位胰島素/ml = 0. 5單位/1 μ 1-向70mlpH7. 01的18_磷酸鹽緩沖液中的組分懸浮液中加入3. 36mlU_500胰島
ο
- (3，360 μ 1) X (0. 5單位胰島素/ μ 1) = 73. 36ml中1，680單位胰島素總量_(1，680單位胰島素)/(73. 36ml) = 22. 9單位胰島素/ml或34. 35單位胰島素 /1. 5ml-加載胰島素21小時；-加載后，在帶有用pH7.01的18_磷酸鹽緩沖液平衡的S印harose CL-6B凝膠的 1. 5cmX25cm柱上色譜層析1. 5ml樣品-從柱中回收0%游離胰島素；總加載胰島素的0%回收暗示著100%總“加載”胰 島素與組合物的組分締合。34.35單位胰島素X100%= 34. 35單位與本發(fā)明的組分結合或締合的胰島素。圖11描繪了上述色譜層析。顯示游離胰島素洗脫時間的蹤跡是為了比較目的而 被包括在內(nèi)。從色譜層析圖可以看出，胰島素與本發(fā)明的組分締合并且在溶液中沒有游離 的胰島素。包括有胰島素的防腐劑沒有與本發(fā)明組合物的組分締合并且在色譜層析圖中可 以看到。實施例8-GLP-1的口服輸送大鼠被禁食過夜。隨后，各為SOOmg的阿脲和鏈脲霉素被溶解在40mL PBS(pH 7， 0.01M)中。然后立刻用0.5mL IP劑量進行處理禁食的大鼠以引起胰島素不足。然后用水 和食物穩(wěn)定動物過夜。穩(wěn)定后，大鼠被禁食過夜以耗盡肝臟糖原。接著，1.5g葡萄糖/kg體重以及GLP-I/組分結構形式的GLP-I經(jīng)由口服填喂法同 時給藥。組分由包括大約61摩爾百分數(shù)的1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大 約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯和大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇(“締合的GLP-1”) 的脂質成分混合物制備。在獨立的實驗中，締合的GLP-I的量各不相同。在劑量給藥后2 小時經(jīng)化學法測量肝臟糖原。作為對照，填喂的是未締合的GLP-1，代替締合的GLP-1。在獨立對照中，GLP-I以 類似于口服填喂的劑量被腹膜內(nèi)注射。如下面的表3所示，相對于未締合的GLP-1，觀察到 締合的GLP-I具有大大增強的口服效力。表3 *p = 0. 05，相比對照口服 GLP-I實施例9- 口服IgG人IgG抗體被共價連接到本發(fā)明的組分，如本文前面所述(“共價IgG”)。接著，
49準備了八個250克帶有十二指腸內(nèi)導管的實驗大鼠，以便施加共價IgG。過夜禁食后，5ug 的共價IgG被輸注入十二指腸導管。導管隨后用0.5ml緩沖液進行洗滌。在15、30、60和 120分鐘取出血樣以通過ELISA反應分析人IgG抗體的血漿濃度。在對照實驗中，5ug游離IgG被輸注到十二指腸導管。導管隨后用0. 5ml緩沖液進 行洗滌。在15、30、60和120分鐘取出血樣以通過ELISA反應分析人IgG抗體的血漿濃度。 兩項研究的結果顯示在圖12中。從圖12可以看出，與游離IgG相比，共價IgG提供增加的人IgG抗體的血漿濃度 (AUC)。同樣，共價IgG增加了 Tmax-最大濃度的時間，以及Cmax-劑量給藥后觀察到的最 大血漿濃度。與游離IgG相比，共價IgG增加的效力因此證實了本發(fā)明化合物增強非常大 的蛋白口服吸收進入系統(tǒng)循環(huán)的能力。實施例10- 口服甲狀腺素已知甲狀腺素降低血液膽固醇和甘油三酸酯水平。然而，在治療高膽固醇和甘油 三酸酯所必需的劑量下，甲狀腺素引起了不希望的副作用甲狀腺機能亢進。本研究的目標 是證實口服給藥的與本發(fā)明化合物締合的靶向甲狀腺素將在肝臟內(nèi)起作用，產(chǎn)生降低血液 脂質的結果，而沒有引起不希望的甲狀腺機能亢進。正常實驗小鼠在高熱量進食后被給予低口服劑量(0. 2至1. 0 μ g)的組合物形式 的甲狀腺素，所述組合物包括甲狀腺素和產(chǎn)生自包括大約61摩爾百分數(shù)的1，2_ 二硬脂酰 基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、大約16摩爾百分 數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的生物素-HDPE的鈉鹽——肝臟靶向試劑——的脂質成分 混合物的組分。分成4組的小鼠在劑量應答研究中通過口服填喂法每天服藥一周。一周治療后測 量血液膽固醇和甘油三酸酯。對于所有組膽固醇和甘油三酸酯的基線值是相似的。圖13 中顯示的劑量應答證實了 口服給藥的、與本發(fā)明組合物締合的肝靶向甲狀腺素的效力。甲 狀腺激素的血液水平?jīng)]有隨著肝靶向口服甲狀腺素的給予劑量而增加，從而證實了該產(chǎn)品 的安全性。對肝靶向甲狀腺素類似物的其它發(fā)表的研究(Erion，M.等，PNAS Sept 25， 2007vol 104, #39,pp 15490-15495)需要比本文所述劑量高至少10倍的劑量，以便引起類 似的血液膽固醇和甘油三酸酯降低。實施例11- 口服干擾素制備了組合物，其包括作為治療劑的干擾素-α以及產(chǎn)生自包括大約61摩爾百分 數(shù)的1，2_二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、大約22摩爾百分數(shù)的磷酸雙十六烷基酯、 大約16摩爾百分數(shù)的膽固醇和大約1摩爾百分數(shù)的生物素-HDPE的鈉鹽的脂質成分混合 物的組分。六名帶有丙型肝炎——基因3型——的患者用上述組合物和三氮唑核苷 (Ribivirin)的含水懸浮液每天治療進行8周。在該組合物的含水懸浮液中干擾素-α劑 量為60,000單位/天。在研究開始時然后在第1、2、4和8周時測量丙型肝炎病毒載量。參見圖14。數(shù)據(jù) 證實本發(fā)明組合物的含水懸浮液在最小劑量的干擾素下降低病毒載量的能力。副作用被類 似地減至最小。
本文所引用的各個和每個專利、專利申請和出版物的公開內(nèi)容在此以其全部內(nèi)容 通過引用并入本文。盡管本發(fā)明已經(jīng)參考具體實施方式
被公開，但是明顯的是本領域其他技術人員可 以在沒有背離本發(fā)明實質精神和范圍下設計出本發(fā)明的其它實施方式和變化形式。所附權 利要求意圖被解釋為包括所有這樣的實施方式以及等價的變化形式。
權利要求
一種口服生物利用組合物，其包括明膠和另外的組分，所述組分包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段和脂質顆粒，其中所述脂質顆粒包括至少一種脂質成分并且所述脂質體或脂質體片段包括至少兩種脂質成分，所述組合物還包括至少一種治療劑或診斷劑以及任選地至少一種靶向試劑，其中所述明膠與一種或多種所述組分積極可逆地相互作用。
2.權利要求1所述的組合物，其中所述脂質成分選自MPB-PE、1，2-二硬脂?；?sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻酰基_sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂酰基-sn-甘 油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻?；?sn-甘油 基-3-磷酸酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油 基-3-磷酸乙醇胺-N-(琥珀酰)、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基-3-[磷酸-rac- (1-甘油)] (鈉鹽)和2，3-二乙酰氧基丙基2-(5-((3aS，6aR)-2-氧代六氫-IH-噻吩并[3，4_d]咪 唑-4-基)五酰胺)己基磷酸三乙銨。
3.權利要求2所述的組合物，其中所述治療劑選自胰島素、干擾素、促紅細胞生成素、 甲狀旁腺激素、降鈣素、血清素、利妥普單抗、曲妥珠單抗、尿酸酶、組織纖溶酶原激活物、抗 胸腺細胞球蛋白、疫苗、肝素或肝素類似物、抗凝血酶III、非格司亭、醋酸普蘭林肽、艾塞那 肽、埃替非巴肽、抗蛇毒素、IgG、IgM、HGH、甲狀腺素、GLP-1、凝血因子VII和VIII、單克隆抗 體和作為治療劑的糖脂。
4.權利要求3所述的組合物，其中所述治療劑是胰島素。
5.權利要求3所述的組合物，其中所述靶向試劑包括金屬衍生的靶向試劑或生物素衍 生的靶向試劑。
6.權利要求5的組合物，其中所述金屬衍生的靶向試劑包括金屬和至少一種絡合劑， 其中所述金屬衍生的靶向試劑中的所述金屬選自過渡金屬、內(nèi)過渡金屬和所述過渡金屬的 鄰近金屬；并且所述至少一種絡合劑選自N-2，6_ 二異丙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙畫N-2，6-二乙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-2，6-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-4--異丙基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-4--丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸 N-2，3-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-2，4-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-2，5-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-3，4-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-3，5-二甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-3--丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸 N-2--丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸 N-4--叔丁基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-3--丁氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-2--己氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-4--己氧基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；氨基吡咯基亞氨基二乙酸；N-(3-溴-2，4，6-三甲基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；苯并咪唑甲基亞氨基二乙酸；N-(3-氰基-4，5- 二甲基-2-吡咯基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；N-(3-氰基-4-甲基-5-芐基-2-吡咯基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸；和N-(3-氰基-4-甲基-2-吡咯基苯氨基甲酰甲基)亞氨基二乙酸。
7.權利要求6所述的組合物，其中所述金屬是鉻。
8.權利要求5所述的組合物，其中所述金屬衍生的靶向試劑是聚[Cr-雙(N-2，6-二異 丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]。
9.權利要求5所述的組合物，其中所述靶向試劑是生物素衍生的靶向試劑，其選 自N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)生物素；硫代-NHS-生物素；N-羥基琥珀酰亞胺長鏈生物 素；硫代-N-羥基琥珀酰亞胺長鏈生物素；D-生物素；生物胞素；硫代-N-羥基琥珀酰亞 胺-S-S-生物素；生物素-BMCC ；生物素-HPDP ；碘代乙?；?LC-生物素；生物素-酰胼； 生物素-LC-酰胼；生物胞素酰胼；生物素尸胺；羧基生物素；光生物素；對氨基苯甲酰生 物胞素三氟醋酸鹽；對重氮基苯甲酰生物胞素；生物素DHPE ；生物素-X-DHPE ； 12_((生物 素基)氨基)十二酸；12-((生物素基)氨基)十二酸珀酰亞胺酯；S-生物素基高半胱氨 酸；生物胞素-X ；生物胞素χ-酰胼；生物素乙二胺；生物素-XL ；生物素-X-乙二胺；生物 素-XX酰胼；生物素-XX-SE ；生物素-XX，SSE ；生物素-X-尸胺；α -(t_B0C)生物胞素； N-(生物素基)-N' _(碘代乙?；?乙二胺；DNP-X-生物胞素-X-SE ；生物素-X-酰胼；鹽 酸降生物素；3-(N-馬來酰亞胺基丙?；?生物胞素；ARP ；生物素-1-亞砜；生物素甲酯； 生物素-馬來酰亞胺；生物素-聚(乙二醇)胺；(+)生物素4-酰氨基苯甲酸鈉鹽；生物素 2-N-乙酰氨基-2-脫氧-β -D-吡喃葡萄糖苷；生物素_ α -D-N-乙?；窠?jīng)氨酸苷；生物 素-α -L-巖藻糖苷；生物素乳-N- 二糖苷；生物素-Lewis-A三糖苷；生物素-Lewis-Y四 糖苷；生物素_ α -D-吡喃甘露糖苷；生物素6-0-磷酰-α -D-吡喃甘露糖苷；和1，2_ 二棕 櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-(生物素基)、前述化合物的亞胺基生物素衍生及其 混合物。
10.權利要求6所述的組合物，其中所述靶向試劑是聚[Cr-雙(N-2，6-二異丙基苯氨 基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]并且所述治療劑是胰島素。
11.權利要求9所述的組合物，其中所述靶向試劑是生物素DHPE或生物素-X-DHPE并 且所述治療劑是胰島素。
12.—種制備口服生物利用組合物的方法，所述口服生物利用組合物包括明膠和另外 的組分，所述組分包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段和顆粒，其中所述脂質體、脂質體片 段和顆粒產(chǎn)生自脂質成分的混合物，所述組合物還包括至少一種治療劑或診斷劑以及任選 地至少一種靶向試劑，其中所述明膠與一種或多種所述組分積極可逆地相互作用，所述方 法包括下列步驟a.在含水介質中混合所述脂質成分和任選地所述至少一種靶向試劑以形成第一混合物；b.向所述第一混合物中加入所述治療劑或診斷劑以形成第二混合物；c.向明膠中加入所述第二混合物以形成明膠締合的混合物；和d.干燥所述明膠締合的混合物。
13.權利要求12所述的方法，其中a.所述脂質成分選自MPB-PE、l，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、l，2-二棕 櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、 膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚 ?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻?；?sn-甘油基_3_磷酸酯、1，2- 二硬脂酰 基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基_3_磷酸乙醇胺-N-(琥珀酰 基)、1，2_ 二棕櫚?；?sn-甘油基_3-[磷酸-rac-(l-甘油)](鈉鹽)和2，3- 二乙酰氧 基丙基2-(5-((3必，6池)-2-氧代六氫-1!1-噻吩并[3，4_d]咪唑-4-基)五酰胺)己基磷 酸三乙銨；b.當存在時，所述任選的靶向試劑是金屬衍生的靶向試劑或生物素衍生的靶向試劑；并且e.所述治療劑選自胰島素、干擾素、促紅細胞生成素、甲狀旁腺激素、降鈣素、血清素、 利妥普單抗、曲妥珠單抗、尿酸酶、組織纖溶酶原激活物、抗胸腺細胞球蛋白、疫苗、肝素或 肝素類似物、抗凝血酶III、非格司亭、醋酸普蘭林肽、艾塞那肽、埃替非巴肽、抗蛇毒素、 IgG、IgM、HGH、甲狀腺素、GLP-1、凝血因子VII和VIII、單克隆抗體和作為治療劑的糖脂。
14.權利要求13所述的方法，其中所述金屬衍生的靶向試劑是聚[Cr-雙(N-2，6-二異 丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]。
15.權利要求13所述的方法，其中所述生物素衍生的靶向試劑選自生物素DHPE和生物 素-X-DHPE。
16.權利要求13的方法，其中所述治療劑是胰島素。
17.一種治療人疾病的方法，所述方法包括給所述人施用口服生物利用組合物，所述口 服生物利用組合物包括明膠和另外的組分，所述組分包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段 和脂質顆粒，并且其中所述脂質顆粒包括至少一種脂質成分并且所述脂質體或脂質體片段 包括至少兩種脂質成分，并且其中所述組合物還包括至少一種治療劑以及任選地至少一種 靶向試劑，其中所述明膠與一種或多種所述組分積極可逆地相互作用。
18.權利要求17所述的方法，其中所述疾病是糖尿病。
19.權利要求18的方法，其中所述脂質成分選自MPB-PE、1，2-二硬脂?；?sn-甘油 基-3-磷酸膽堿、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘 油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂酰基-sn-甘 油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘油 基-3-磷酸酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油 基-3-磷酸乙醇胺-N-(琥珀酰)、1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-[磷酸-rac- (1-甘油)] (鈉鹽)和2，3-二乙酰氧基丙基2-(5-((3aS，6aR)-2-氧代六氫-IH-噻吩并[3，4_d]咪 唑-4-基)五酰胺)己基磷酸三乙銨；所述至少一種或多種治療劑是胰島素；并且當存在 時，所述任選的靶向試劑是金屬衍生的靶向試劑或生物素衍生的靶向試劑。
20.權利要求19所述的方法，其中所述靶向試劑不是任選的并且是聚[Cr-雙(N-2， 6- 二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]、生物素DHPE或生物素-X-DHPE。
21.權利要求1所述的組合物，其中所述脂質成分是1，2_二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是聚[Cr-雙 (N-2，6-二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]；并且所述治療劑是胰島素。
22.權利要求1所述的組合物，其中所述脂質成分是1，2_二硬脂?；?sn-甘油 基-3-磷酸膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是生物 素-X-DHPE或生物素DHPE ；并且所述治療劑是胰島素。
23.權利要求17所述的方法，其中所述脂質成分是1，2_二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷 酸膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是聚[Cr-雙(N-2， 6- 二異丙基苯氨基甲酰甲基亞氨基二乙酸)]；并且所述治療劑是胰島素。
24.權利要求17的方法，其中所述脂質成分是1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸 膽堿、磷酸雙十六烷基酯和膽固醇；所述靶向試劑不是任選的并且是生物素-X-DHPE或生 物素DHPE ；并且所述治療劑是胰島素。
25.本發(fā)明組合物，其通過包括下列步驟的方法制備a.在含水介質中混合至少三種脂質成分和任選地至少一種靶向試劑以形成第一混合 物，其中所述脂質成分選自MPB-PE、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基_3_磷酸膽堿、1，2- 二棕 櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1，2- 二肉豆蔻酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、膽固醇、 膽固醇油酸酯、磷酸雙十六烷基酯、1，2- 二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二棕櫚 酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2- 二肉豆蔻?；?sn-甘油基_3_磷酸酯、1，2- 二硬脂酰 基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、1，2- 二棕櫚酰基-sn-甘油基_3_磷酸乙醇胺-N-(琥珀 酰)、1，2_ 二棕櫚?；?sn-甘油基_3-[磷酸-rac-(l-甘油)](鈉鹽)和2，3_ 二乙酰氧 基丙基2-(5-((3必，6池)-2-氧代六氫-1!1-噻吩并[3，4_d]咪唑-4-基)五酰胺)己基磷 酸三乙銨；b.使所述混合物均勻化以形成脂質體、脂質體片段和顆粒的混合物；c.向所述脂質體、脂質體片段和顆粒的混合物中加入治療劑或診斷劑以形成第二混合物；d.向明膠中加入所述第二混合物以形成明膠締合的混合物；和e.干燥所述明膠締合的混合物。
26.一種治療人糖尿病的方法，所述 法包括給所述人施用口服生物利用組合物，所述 口服生物利用組合物包括明膠和另外的組分，所述組分包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段和脂質顆粒，其中所 述脂質顆粒包括至少一種脂質成分并且所述脂質體或脂質體片段包括至少兩種脂質成分， 所述組合物還包括胰島素以及任選地至少一種靶向試劑，其中所述明膠與一種或多種所述 組分積極可逆地相互作用；并且給所述人共同施用胰島素。
27.—種試劑盒，其包括a. 口服生物利用組合物，所述口服生物利用組合物包括明膠和另外的組分，所述組分 包括動態(tài)分級的脂質體、脂質體片段和脂質顆粒，其中所述脂質顆粒包括至少一種脂質成 分并且所述脂質體或脂質體片段包括至少兩種脂質成分，所述組合物還包括至少一種治療 劑或診斷劑以及任選地至少一種靶向試劑，其中所述明膠與一種或多種所述組分積極可逆 地相互作用；和b.給人施用所述組合物的指導材料。
28.根據(jù)權利要求27所述的試劑盒，其還包括胰島素，用于與所述組合物共同施用給 所述人。
全文摘要
本發(fā)明包括組合物，其能陪伴一般非口服利用的治療劑或診斷劑穿過消化道環(huán)境，以使所述治療劑或診斷劑可生物利用。該組合物可以或可以不靶向特定細胞受體，諸如肝細胞。治療劑包括但不限于胰島素、降鈣素、血清素和其它蛋白。用基于生物素或金屬的靶向試劑實現(xiàn)靶向。
文檔編號A61K9/127GK101917971SQ200880117641
公開日2010年12月15日 申請日期2008年9月26日 優(yōu)先權日2007年9月28日
發(fā)明者J·R·勞, W·B·格爾 申請人:Sdg公司