專利名稱：：一種高分子脂質(zhì)體及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種新的高分子脂質(zhì)體的制備和應(yīng)用。屬于脂質(zhì)體的制備及應(yīng)用技術(shù)。
背景技術(shù)：
：脂質(zhì)體(Liposome)是磷脂依靠疏水締合作用在水中自發(fā)形成的一種分子有序組合體，為多層囊泡結(jié)構(gòu)，每層均為類脂雙分子膜，層間和脂質(zhì)體內(nèi)核為水相，雙分子膜間為油相。脂質(zhì)體應(yīng)用非常廣泛，制備工藝簡(jiǎn)單、方法多樣，其粒子大小處于納米級(jí)的介觀范圍，有許多獨(dú)特的物理、化學(xué)性質(zhì)，粒徑還可根據(jù)需要進(jìn)行控制；可用于納米粒子的制備、臨床檢驗(yàn)和診斷、催化反應(yīng)的控制、模擬膜研究及在體內(nèi)外將基因或其它物質(zhì)向細(xì)胞內(nèi)傳遞等。脂質(zhì)體自20世紀(jì)70年代開(kāi)始作為藥物載體應(yīng)用以來(lái)，由于具有制備簡(jiǎn)單，對(duì)人體無(wú)害，無(wú)免疫原性反應(yīng)，易實(shí)現(xiàn)靶向性，可提高和延長(zhǎng)藥物療效，緩和毒性，避免耐藥性和改變給藥途徑等優(yōu)點(diǎn)備受重視；它對(duì)所載藥物有廣泛的適應(yīng)性，水溶性藥物被包于水相中，油溶性藥物溶于雙分子膜內(nèi)，兩親性藥物插入雙分子膜。1988年，第一個(gè)脂質(zhì)體藥物在美國(guó)進(jìn)入臨床試驗(yàn)，至今已有多種藥物(如阿霉素脂質(zhì)體)在幾十個(gè)國(guó)家上市。脂質(zhì)體進(jìn)入體內(nèi)后迅速被單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)(MPS)清除，半衰期很短，而且只有小于300nm的脂質(zhì)體粒子才能穿過(guò)竇狀型毛細(xì)血管離開(kāi)循環(huán)系統(tǒng)到相關(guān)組織(肝、脾、骨髓和實(shí)質(zhì)性腫瘤等)；且由于血中的白蛋白、調(diào)理素、抗體等各種物質(zhì)的作用，脂質(zhì)體可能發(fā)生破裂，致使包封藥物快速滲漏，很快被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識(shí)別、吸收，從體循環(huán)中清除，不能很好發(fā)揮"導(dǎo)彈"功能。脂質(zhì)體在儲(chǔ)存期間，磷脂易氧化水解，雙分子膜易相變，小粒徑脂質(zhì)體易相互聚集融合，包裹其中的藥物因而也發(fā)生滲漏；嚴(yán)重影響其性能。因此，研制穩(wěn)定的多功能脂質(zhì)體是走向?qū)嵱玫那疤幔兄匾默F(xiàn)實(shí)意義和應(yīng)用價(jià)值。而且，各國(guó)學(xué)者也都試圖用廉價(jià)的合成高分子材料替代合成磷脂，制備類脂泡囊，以降低成本，增加實(shí)用性，但經(jīng)體外試驗(yàn)證明，這類高分子類脂小囊受到生物相容性和生物可降解性的限制。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種新型高分子脂質(zhì)體，它具有脂質(zhì)體的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)具有高分子物質(zhì)特有的多功能和穩(wěn)定性，可滿足上述應(yīng)用對(duì)脂質(zhì)體的要求。本發(fā)明的一種高分子脂質(zhì)體，其結(jié)構(gòu)中含有雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽和小分子磷脂的具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡。所述的雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈垸基季銨鹽的重均分子量大于2000，可溶于有機(jī)溶劑氯仿或二氯甲烷。-所述的雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽的結(jié)構(gòu)式如下nhch2ch(oh)ch2—n+'ch3x-(|h2)17ch3其中X為I，Br或Cl;n為241242;本發(fā)明中用于制備高分子脂質(zhì)體的殼聚糖長(zhǎng)鏈垸基季銨鹽為中國(guó)發(fā)明專利200710056993.4公開(kāi)的一類雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈垸基季銨鹽。所述的小分子磷脂包括通常使用的用于制備脂質(zhì)體的膽固醇、二油酰脂酰乙醇胺、葡萄糖苷、大豆甾醇、中性磷脂、負(fù)電荷磷脂和正電荷磷脂。所述的高分子脂質(zhì)體為正電性陽(yáng)離子高分子脂質(zhì)體；并具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，殼聚糖長(zhǎng)鏈垸基季銨鹽為膜的主體，小分子磷脂膽固醇鑲嵌其中起穩(wěn)定作用。所述的高分子脂質(zhì)體用于分別或同時(shí)包載水溶性物質(zhì)、油溶性物質(zhì)和兩親性物質(zhì)；其中水溶性物質(zhì)被包于水相中，油溶性物質(zhì)分布于雙分子膜內(nèi)，兩親性物質(zhì)插入雙分子膜內(nèi)。所述的高分子脂質(zhì)體用于包載磁性物質(zhì)制備磁性高分子脂質(zhì)體，磁性高分子脂質(zhì)體具有以下特征水溶液中穩(wěn)定、分散性好、粒徑均勻、不易團(tuán)聚、超順磁、粒徑可小于50nm。所述的高分子脂質(zhì)體用于包載量子點(diǎn)制備量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體，量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體具有以下特征保持了量子點(diǎn)的熒光特性、水溶液中穩(wěn)定、分散性好、粒徑均勻、粒徑可小于50nm。本發(fā)明的一種高分子脂質(zhì)體的制備方法可以采用通常使用的制備方法如a)將殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽和小分子磷脂及油溶性物質(zhì)共溶于有機(jī)溶劑中，混勻；b)將步驟a)中得到的混合溶液通入氮?dú)獠⒊ビ袡C(jī)溶劑使成薄膜，然后加入含有水溶性物質(zhì)的水溶液使脂質(zhì)水化；或?qū)⒑兴苄晕镔|(zhì)的水溶液與步驟a)得到的混合溶液共混超聲乳化，再除去有機(jī)溶劑。所述的水溶性、油溶性或雙親性物質(zhì)包括藥物、蛋白、基因、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、維生素、及磁性物質(zhì)、量子點(diǎn)和Si02等無(wú)機(jī)顆粒。本發(fā)明的一種高分子脂質(zhì)體為一種陽(yáng)離子高分子脂質(zhì)體。由本發(fā)明的高分子脂質(zhì)體包被磁性納米顆粒所制備的磁性高分子脂質(zhì)體具有粒徑均一、分散性好、不易團(tuán)聚和超順磁的特性。本發(fā)明提供的高分子脂質(zhì)體的制備方法為用于制備脂質(zhì)體的所有方法，包括薄膜分散法、反向蒸發(fā)法、復(fù)乳法、離心法、pH梯度法、注入法和混溶法。其中薄膜分散法和反向蒸發(fā)法的基本步驟為先將殼聚糖長(zhǎng)鏈垸基季銨鹽和小分子磷脂及油溶性物質(zhì)共溶于氯仿或其他有機(jī)溶劑中，混勻得溶液I;然后配置含有水溶性物質(zhì)的水溶液II。薄膜分散法為將溶液I通入氮?dú)獠⒊ビ袡C(jī)溶劑使成薄膜；用水溶液II超聲使脂質(zhì)薄膜水化；反向蒸發(fā)法為將溶液I與水溶液II共混超聲乳化，再除去有機(jī)溶劑。最后全部采用柱過(guò)濾法、離心法或透析法進(jìn)行純化。本發(fā)明中制備的羧甲基殼聚糖十八烷基季銨鹽高分子脂質(zhì)體的粒徑分布均勻，按結(jié)構(gòu)分為單室高分子脂質(zhì)體、多室高分子脂質(zhì)體和多囊高分子脂質(zhì)體。高分子脂質(zhì)體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，羧甲基殼聚糖十八烷基季銨鹽為膜的主體，小分子磷脂膽固醇鑲嵌其中起穩(wěn)定作用，其中水溶性物質(zhì)被包于水相中，油溶性物質(zhì)分布于雙分子膜內(nèi)，兩親性物質(zhì)插入雙分子膜。且高分子脂質(zhì)體在水溶液中具有很好的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，表現(xiàn)在高分子脂質(zhì)體的水溶液經(jīng)冷凍和8(TC的高溫后結(jié)構(gòu)不會(huì)發(fā)生變化，DSC譜圖上12(TC以下沒(méi)有熱量的變化。高分子脂質(zhì)體的Zeta電位可達(dá)+52.72mv;且可以根據(jù)所使用的羧甲基殼聚糖十八垸基季銨鹽中季銨基團(tuán)取代度進(jìn)行調(diào)節(jié)，可以滿足作為基因載體的需要。本發(fā)明中制備的載有長(zhǎng)春新堿的高分子脂質(zhì)體對(duì)長(zhǎng)春新堿的載藥率可達(dá)15.0%，包、,封率在90.0%以上，在Tris-HCl(pH=7.4)緩沖溶液中具有良好的緩控釋功能，緩釋時(shí)間在兩周以上，突釋現(xiàn)象不明顯。本發(fā)明中制備的磁性高分子脂質(zhì)體在水溶液中具有很好的分散性，幾乎不發(fā)生團(tuán)聚現(xiàn)象，粒徑可達(dá)到100nm以下，且分布均勻，高聚物脂質(zhì)體中的磁性粒子保持原Fe304的晶型結(jié)構(gòu)，比飽和磁化強(qiáng)度可達(dá)27.9emu/g，具有超順磁性，可滿足磁靶向性的需要；磁性長(zhǎng)春新堿高分子脂質(zhì)體的包封率可達(dá)93.1%,在Tris-HC1(pH=7.4)緩沖溶液中具有良好的緩控釋功能。本發(fā)明中制備的量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體在水溶液中分散性好，粒徑可達(dá)到100nra以下，分布均勻，被包裹的量子點(diǎn)依然保持很高的熒光特性，不會(huì)發(fā)生熒光淬滅現(xiàn)象，且體系穩(wěn)定，4'C下可保存6個(gè)月以上。本發(fā)明中制備的高分子脂質(zhì)體表面含有羧基和氨基，可以連接多種靶向物質(zhì)，所制備的跨膜肽Tat介導(dǎo)的高分子脂質(zhì)體在PBS緩沖溶液中可穩(wěn)定存在，并可保持小分子多肽Tat的活性，具有跨細(xì)胞膜和跨血腦屏障的功能。與現(xiàn)有產(chǎn)品和技術(shù)相比，本發(fā)明的特點(diǎn)在于1.整個(gè)制備過(guò)程簡(jiǎn)單易行，條件要求不高，適合于工業(yè)化大生產(chǎn)要求。2.使用羧甲基殼聚糖十八烷基季銨鹽為一種多功能的殼聚糖衍生物。其分子量在2000以上，可根據(jù)需要選擇不同的分子量；殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽中長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽的取代度可以進(jìn)行調(diào)節(jié)，從而對(duì)高分子脂質(zhì)體的親水親油性和Zeta電位進(jìn)行控制，滿足不同的需要。3.高分子脂質(zhì)體表面含有羧基和氨基等官能團(tuán)，不用進(jìn)行表面改性就可以連接多種靶向物質(zhì)，省去了傳統(tǒng)脂質(zhì)體必須用含羧基或氨基等制劑進(jìn)行修飾才能連接耙向物質(zhì)的過(guò)程。4.高分子脂質(zhì)體的粒徑可達(dá)100nm以下，并可根據(jù)需要通過(guò)不同的制備方法來(lái)控制粒徑，整個(gè)體系的穩(wěn)定性較高，耐酸堿和高溫；載藥高分子脂質(zhì)體制備簡(jiǎn)單，包封率和載藥率高，緩控釋功能良好，藥物滲漏較少。5.高分子脂質(zhì)體的實(shí)用性強(qiáng)，可包裹不同的水溶、油溶和雙親性物質(zhì)，并可同時(shí)包載兩種或兩種以上的物質(zhì)，包載后的高分子脂質(zhì)體粒徑分布均勻，穩(wěn)定性高，且能發(fā)揮所包載物質(zhì)的功能。圖1為使用反向蒸發(fā)法所制備的高分子脂質(zhì)體的透射電鏡照片，由圖可見(jiàn)其粒徑基本在50nm左右。圖2為使用反向蒸發(fā)法所制備的高分子脂質(zhì)體在水溶液中的粒徑分布圖，由圖可見(jiàn)其平均粒徑為74.lnm,粒徑分布較窄，多分散指數(shù)為0.224。圖3為包載水溶性磁粒子的高分子脂質(zhì)體的透射電鏡照片，由圖可見(jiàn)其粒徑在20nm左右，分布均勻，分散性好。圖4為包載油溶性量子點(diǎn)的高分子脂質(zhì)體的透射電鏡照片，由圖可見(jiàn)其粒徑在50nm左右，且大小均勻。具體實(shí)施方式下面的實(shí)施例中將對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述，但本發(fā)明不限于此。實(shí)施例1:本實(shí)施例探討采用反向蒸發(fā)法時(shí)羧甲基殼聚糖十八垸基季銨鹽(QACMC)和膽固醇的不同配比對(duì)高分子脂質(zhì)體粒徑產(chǎn)生的影響。將不同配比的羧甲基殼聚糖十八垸基季銨鹽(重均分子量為2萬(wàn)，季銨鹽取代度為20.0%)和膽固醇共溶于二氯甲烷中，混勻得溶液I;準(zhǔn)備去離子水溶液II，其中溶液I和溶液II的比例為l:2;將兩種溶液混合后，充分超聲乳化，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾除盡二氯甲垸得高分子脂質(zhì)體溶液。該高分子脂質(zhì)體為正電性的陽(yáng)離子高分子脂質(zhì)體，其表面Zeta電位可達(dá)+52.72mv。由表1可見(jiàn)，調(diào)整QACMC和膽固醇的質(zhì)量配比可以得到不同粒徑大小的高分子脂質(zhì)體，所得的高分子脂質(zhì)體在水溶液中的粒徑大小分布也都比較均勻。表1為不同的羧甲基殼聚糖十八烷基季銨鹽(QACMC)和膽固醇配比下高分子脂質(zhì)體粒徑的大小。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實(shí)施例2:本實(shí)施例為使用不同分子量的羧甲基殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽制備高分子脂質(zhì)體的探討，采用反向蒸發(fā)法。稱取羧甲基殼聚糖十二烷基季銨鹽(重均分子量為1萬(wàn)，季銨鹽取代度為80.0%)20mg，大豆甾醇10mg，溶于3ml二氯甲垸中，振蕩均勻得溶液I;稱取3.Omg牛血清白蛋白(BSA)溶于5mlPBS(pH=7.4)緩沖溶液中，搖勻使BSA充分溶解得水溶液II;然后將上述兩種溶液I和II共混乳化，超聲10min，待形成穩(wěn)定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至二氯甲垸揮發(fā)完全，過(guò)凝膠分離柱分離未包裹的BSA得載BSA的高分子脂質(zhì)體，如圖1所示，所制備的高分子脂質(zhì)體羧甲基殼聚糖十八垸基季銨鹽/膽固醇粒徑在50nm左右，粒徑較小，且對(duì)藥物的包封率在90%以上。其中可以使用重均分子量可以大于2000的羧甲基殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽制備高分子脂質(zhì)體。實(shí)施例3:本實(shí)施例為使用除羧甲基殼聚糖十八烷基季銨鹽外，使用其他種類殼聚糖長(zhǎng)鏈垸基季銨鹽來(lái)制備高分子脂質(zhì)體的實(shí)例。稱取羧甲基殼聚糖辛垸基季銨鹽(重均分子量為2000，季銨鹽取代度為40.0%)15mg，葡萄糖苷12mg,溶于3ml二氯甲烷中，振蕩均勻得溶液I，然后放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，并不時(shí)的通入氮?dú)猓敝炼燃综鶕]發(fā)完全，然后室溫真空干燥24h:稱取3.0mg長(zhǎng)春新堿溶于5ralPBS(PH=7.4)緩沖溶液中，搖勻使長(zhǎng)春新堿充分溶解得水溶液II;然后將上述5.0ml長(zhǎng)春新堿溶液II加入茄形瓶中，在超聲的條件讓脂質(zhì)薄膜充分水化，超聲10min后，過(guò)凝膠分離柱分離游離的藥物得載長(zhǎng)春^堿的高分子脂質(zhì)體，其粒徑分布圖如圖2所示，載藥高分子脂質(zhì)體平均粒徑約為74.lnm,多分散指數(shù)為0.224，粒徑分布較窄。使用此方法制備的長(zhǎng)春新堿高分子脂質(zhì)體包封率可達(dá)90.0%以上，且在Tris-HCl(pH=7.4)緩沖溶液中具有良好的緩控釋功能。用類似方法也可使用中國(guó)發(fā)明專利200710056993.4公開(kāi)的一類雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈垸基季銨鹽來(lái)制備高分子脂質(zhì)體。實(shí)施例4:本實(shí)施例提供使用其他小分子磷脂的實(shí)例。稱取殼聚糖十八烷基季銨鹽(重均分子量為1萬(wàn))15.0mg,二油酰脂酰乙醇胺(DOPE)12.0mg共溶于3.0ml二氯甲烷中，振蕩均勻得溶液I，放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，并不時(shí)的通入氮?dú)?，直至二氯甲烷揮發(fā)完全，然后室溫真空干燥24h后再用溶有3.Omg水溶性磁粒子的5.OmlPBS(pH=7.4)緩沖溶液II超聲水化10min;或?qū)⑷芤篒溶液II共混乳化，超聲10min，待形成穩(wěn)定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至二氯甲垸揮發(fā)完全；過(guò)凝膠分離柱分離游離的藥物得磁性高分子脂質(zhì)體(殼聚糖十八烷基季銨鹽/DOPE)。該類脂質(zhì)體的Zeta電位可達(dá)+40.Omv，表面可吸附基因，可作為一種高效的基因轉(zhuǎn)染試劑。類似的可用其他小分子磷脂脂質(zhì)代替DOPE制備其他高分子脂質(zhì)體。實(shí)施例5:本實(shí)施例為利用高分子脂質(zhì)體包載水溶性物質(zhì)的探討。稱取羧甲基殼聚糖雙十二垸基季銨鹽(重均分子量為5000)15mg，卵磷脂12mg，溶于3ml二氯甲垸中，振蕩均勻得溶液I，然后放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，并不時(shí)的通入氮?dú)?，直至二氯甲垸揮發(fā)完全，然后室溫真空干燥24h;稱取3.0mg長(zhǎng)春新堿溶于5mlPBS(pH=7.4)緩沖溶液中，搖勻使長(zhǎng)春新堿充分溶解得水溶液II;然后將上述5.Oml長(zhǎng)春新堿溶液II加入茄形瓶中，在超聲的條件讓脂質(zhì)薄膜充分水化，超聲10min后，過(guò)凝膠分離柱分離游離的藥物得載長(zhǎng)春新堿的高分子脂質(zhì)體。使用此方法制備的長(zhǎng)春新堿高分子脂質(zhì)體包封率可達(dá)90.0%以上，且在Tris-HCl(pH=7.4)緩沖溶液中具有良好的緩控釋功能。用類似方法也可分別制得包載其它水溶性物質(zhì)的高分子脂質(zhì)體，只須將需要的水溶性物質(zhì)溶于相應(yīng)的水溶液II既可。實(shí)施例6:本實(shí)施例為使用高分子脂質(zhì)體包載油溶性物質(zhì)的探討。稱取賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽(重均分子量為5000，季銨鹽取代度為50.0%)15mg，磷脂酸5mg和3.0mg脂溶性維生素E共溶于3ml二氯甲烷中，振蕩均勻，放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，并不時(shí)的通入氮?dú)?，直至二氯甲垸揮發(fā)干凈，然后室溫真空干燥24h后再用5.0mlPBS(pH=7.4)緩沖溶液超聲水化；或?qū)⒍燃淄槿芤号c5.Oml'PBS(pH=7.4)緩沖溶液共混乳化，超聲10min，待形成穩(wěn)定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至二氯甲烷揮發(fā)完全；過(guò)凝膠分離柱分離游離的藥物得載維生素E的高分子脂質(zhì)體。所得維生素E高分子脂質(zhì)體包封率可在80y。以上，粒徑可控，并具有緩釋效果。用類似方法也可分別制得包載其它油溶性物質(zhì)的高分子脂質(zhì)體。實(shí)施例7:本實(shí)施例為使用高分子脂質(zhì)體包載兩種或兩種以上物質(zhì)的探討。稱取O-羥乙基殼聚糖十八烷基季銨鹽(重均分子量為1萬(wàn)，季銨鹽取代度為60.0%)15rag，硬脂酰胺5mg和3.0mg紫杉醇共溶于3ml二氯甲烷中，振蕩均勻，放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，并不時(shí)的通入氮?dú)?，直至二氯甲烷揮發(fā)完全，然后室溫真空干燥24h;稱取3.Omg阿霉素溶于5mlPBS(pH=7.4)緩沖溶液中，搖勻使阿霉素充分溶解；然后將上述5.0ml阿霉素溶液加入茄形瓶中，在超聲的條件讓含紫杉醇的脂質(zhì)薄膜充分水化，超聲lOmin后，過(guò)凝膠分離柱分離游離的藥物得同載紫杉醇和阿霉素的高分子脂質(zhì)體。用類似方法也可分別制得包載其它兩種或兩種以上藥物的高分子脂質(zhì)體，其中油溶性藥物溶于油相中，水溶性藥物溶于水相中。實(shí)施例8:本實(shí)施例為制備磁性高分子脂質(zhì)體的探討。稱取羧甲基殼聚糖十八垸基季銨鹽(重均分子量為2萬(wàn)，季銨鹽取代度為60.0%)20mg，膽固醇5mg，2.5mg維生素E和2.5mg維生素C共溶于3.0ml二氯甲烷中，振蕩均勻得溶液I，放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，并不時(shí)的通入氮?dú)?，直至二氯甲垸揮發(fā)完全，然后室溫真空干燥24h后再用溶有3.0mg5-氟尿嘧啶和5.Omg水溶性磁粒子的5.0mlPBS(pH=8.0)緩沖溶液II超聲水化；或?qū)⑷芤篒與溶液II共混乳化，超聲10min,待形成穩(wěn)定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至二氯甲垸揮發(fā)完全；過(guò)凝膠分離柱分離游離的藥物得同載維生素和5-氟尿嘧啶的磁性高分子脂質(zhì)體，其透射電鏡照片如圖3所示，該磁性高分子脂質(zhì)體水溶液中的粒徑在20nm左右，可穩(wěn)定存在、分散性好、粒徑均勻、不易團(tuán)聚、并有超順磁性。用類似方法也可制得包載油溶性磁顆粒的磁性高分子脂質(zhì)體。實(shí)施例本實(shí)施例為制備量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體的探討。稱取羧甲基殼聚糖十八烷基季銨鹽(重均分子量為2萬(wàn)，季銨鹽取代度為60.0%)lOmg，膽固醇10mg共溶于3ml二氯甲垸中，再加入含有0.5mgCdSe量子點(diǎn)的二氯甲烷溶液lml，振蕩均勻，放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾，并不時(shí)的通入氮?dú)?，直至二氯甲烷揮發(fā)完全，然后室溫真空干燥24h后再用5.OmlPBS(pH=7.4)緩沖溶液超聲水化；或?qū)⒍燃综芤号c5.0mlPBS(pH=7.4)緩沖溶液共混乳化，超聲10min，待形成穩(wěn)定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至二氯甲垸揮發(fā)干凈；過(guò)凝膠分離柱分離后得量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體，其透射電鏡照片如圖4所示，該量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體水溶液中粒徑大多在50nm以下，分布均勻，分散性好，且保持了量子點(diǎn)的熒光特性。本發(fā)明提出的一種高分子脂質(zhì)體的制備及其應(yīng)用，已通過(guò)實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)技術(shù)人員明顯能在不脫離本發(fā)明的內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的內(nèi)容進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來(lái)實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。特別需要指出的是，所有相類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的，他們都被視為包括在本發(fā)明的精神、范圍和內(nèi)容中。權(quán)利要求1.一種高分子脂質(zhì)體，其特征在于其結(jié)構(gòu)中含有雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽和小分子磷脂的具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡。2.如權(quán)利要求書1所述的一種高分子脂質(zhì)體，其特征在于所述的雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽的重均分子量大于2000，可溶于有機(jī)溶劑氯仿或二氯甲垸。3.如權(quán)利要求書1或2所述的一種高分子脂質(zhì)體，其特征在于所述的雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽的結(jié)構(gòu)式如下4.如權(quán)利要求書1所述的一種高分子脂質(zhì)體，其特征在于所述的小分子磷脂包括用于制備脂質(zhì)體的膽固醇、二油酰脂酰乙醇胺、葡萄糖苷、大豆甾醇、中性磷脂、負(fù)電荷磷脂和正電荷磷脂。'5.如權(quán)利要求書1所述的一種高分子脂質(zhì)體，其特征在于所述的高分子脂質(zhì)體為正電性陽(yáng)離子高分子脂質(zhì)體；并具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽為膜的主體，小分子磷脂膽固醇鑲嵌其中起穩(wěn)定作用。6.如權(quán)利要求書1所述的一種高分子脂質(zhì)體的應(yīng)用，其特征在于所述的高分子脂質(zhì)體用于分別或同時(shí)包載水溶性物質(zhì)、油溶性物質(zhì)和兩親性物質(zhì)；其中水溶性物質(zhì)被包于水相中，油溶性物質(zhì)分布于雙分子膜內(nèi)，兩親性物質(zhì)插入雙分子膜內(nèi)。7.如權(quán)利要求書1所述的一種高分子脂質(zhì)體的應(yīng)用，其特征是所述的高分子脂質(zhì)體用于包載磁性物質(zhì)制備超順磁性的磁性高分子脂質(zhì)體，磁性高分子脂質(zhì)體粒徑可小于50nm。8.如權(quán)利要求書1所述的一種高分子脂質(zhì)體的應(yīng)用，其特征是所述的高分子脂質(zhì)體用于包載量子點(diǎn)制備量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體，量子點(diǎn)標(biāo)記的高分子脂質(zhì)體粒徑可小于50nm。全文摘要本發(fā)明涉及一種新的高分子脂質(zhì)體的制備和應(yīng)用。其結(jié)構(gòu)為含有雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽和小分子磷脂的具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡。殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽的特征為重均分子量大于2000，可溶于氯仿等有機(jī)溶劑，含有羧基、或氨基或季銨鹽基團(tuán)，具體為中國(guó)發(fā)明專利200710056993.4公開(kāi)的一類雙親性殼聚糖長(zhǎng)鏈烷基季銨鹽。該類高分子脂質(zhì)體表面可連接多種靶向制劑，可同時(shí)和分別包載水溶性、油溶性或雙親性物質(zhì)，包括藥物、蛋白、基因、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、維生素、磁性顆粒和量子點(diǎn)等。該種高分子脂質(zhì)體具有包封率高、操作簡(jiǎn)便、適用性強(qiáng)、成本低的優(yōu)點(diǎn)，包衣后的高分子脂質(zhì)體粒徑分布均勻，最小粒徑可在20nm以下，體系穩(wěn)定，載藥微球緩控釋功能強(qiáng)。文檔編號(hào)A61K9/127GK101239041SQ20081005246公開(kāi)日2008年8月13日申請(qǐng)日期2008年3月18日優(yōu)先權(quán)日2008年3月18日發(fā)明者津常,梁曉飛申請(qǐng)人:天津大學(xué)