專(zhuān)利名稱(chēng)：：3-芳基取代的喹唑啉酮及其用途的制作方法3-芳基取代的喹唑啉酮及其用途相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)要求2005年12月22日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/753,801和2006年7月27日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/833,855的優(yōu)先權(quán)，所述文獻(xiàn)全文并入本文作為參考。
背景技術(shù)：
：許多用于治療疾病的藥物是以疾病細(xì)胞和正常細(xì)胞間的普遍差異作為靶標(biāo)。例如，用于治療卵巢癌和乳腺癌并抑制微管功能的紫杉醇，被認(rèn)為基于腫瘤細(xì)胞相對(duì)正常細(xì)胞更高的增殖率而顯示對(duì)腫瘤細(xì)胞的特異性(Miller和Ojima,Chem.Rec.1:195-211,2002)。然而，盡管這是一致的觀點(diǎn)，但是紫杉醇的體外活性在不同腫瘤細(xì)胞系間差別很大(Weinstein等人，Science275:343-349,1997)，表明遺傳因子可以調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞對(duì)紫杉醇的敏感性，并且腫瘤細(xì)胞的反應(yīng)性不是簡(jiǎn)單的決定于其增殖率。分子靶向治療代表了抗癌藥物開(kāi)發(fā)的一種有前途的新方法(Shawver等人，CancerCell1:117-23,2002)。利用這個(gè)方法，設(shè)計(jì)小分子用于直接抑制特定腫瘤細(xì)胞類(lèi)型中突變或者過(guò)表達(dá)的癌蛋白。通過(guò)靶向于腫瘤細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的特定分子缺陷，這種方法最終可以產(chǎn)生適于特定治療各種腫瘤遺傳組成的方法。近來(lái)成功的兩個(gè)分子耙向抗癌治療劑的例子是格列衛(wèi)(Gleevec)(甲磺酸伊馬替尼)，一種在費(fèi)城染色體陽(yáng)性慢性髓性白血病中發(fā)現(xiàn)的斷裂點(diǎn)簇集區(qū)-abelsen激酶(BCR-ABL)癌蛋白的抑制劑(Capdeville等人，NatRevDrugDiscov1:493-502,2002)，和赫賽汀(Herceptin)(曲妥單抗)，一種耙向在轉(zhuǎn)移性乳腺癌中發(fā)現(xiàn)的HER2/NEU癌蛋白的單克隆抗體(Mokbel和Hassanally，CurrMedResOpin17:51-9，2001)。一種互補(bǔ)的策略涉及尋找基因型選擇性的抗腫瘤試劑，所述試劑只有在特定癌蛋白存在或者特定腫瘤抑制物缺失的條件下對(duì)腫瘤細(xì)胞才是致死性的。這種基因型選擇性化合物可以直接靶向癌蛋白，或者它們可以靶向其他參與癌蛋白相聯(lián)信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵蛋白。已報(bào)道的顯示合成致死性的化合物包括(i)雷帕霉素類(lèi)似物CCI-779在缺少PTEN的骨髓瘤細(xì)胞中(Shi等人，CancerRes62:5027-34，2002)，(ii)格列衛(wèi)在BCR-ABL-轉(zhuǎn)化細(xì)胞中(Druker等人，NatMed2:561-6，1996)，和(iii)大量未充分表征的化合物(Stockwell等人，ChemBiol6:71-83,1999;Torrance等人，NatBiotechnol19:940-5，2001)。盡管有上述研究，仍然非常需要開(kāi)發(fā)和/或鑒定能夠選擇性靶向腫瘤細(xì)胞的化合物。發(fā)明簡(jiǎn)述已經(jīng)鑒定了許多在需要治療或預(yù)防的個(gè)體如人中可用于治療或預(yù)防癌(特征在于特別是作為BRAF、HRAS、NRAS或KRAS突變結(jié)果的Ras途徑活化的腫瘤或白血病)化合物/試劑/藥物。此處使用的術(shù)語(yǔ)"試劑"和"藥物"可以互換使用；它們可以是化合物或者分子。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了由結(jié)構(gòu)式(I)表示的化合物(R2)jv(1)，或其可藥用鹽，其中Ra為鹵素，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基-o-，被取代或未被取代的垸基-O-，被取代或未被取代的烯基-O-或被取代或未被取代的炔基-O-，其中垸基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)n間斷；每個(gè)R2獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-NRC(O)R，-S02N(R)2，-N(R)2，-N02，-OH和-OR，；每個(gè)R3獨(dú)立地選自囪素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-NRC(O)R,-S02N(R)2，-N(R)2，-N02，-OH和-OR，；R4和Rs獨(dú)立地選自-H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)和被取代或未被取代的芳基，其中烷基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)J司斷；或者R4和R5—起形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；V為-NH-L-A-Q或環(huán)C為被取代或未被取代的雜環(huán)的芳香或非芳香環(huán)；A為NR或O;或者A為共價(jià)鍵；L為被取代或未被取代的烴基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S的雜原子間斷；Q選自-R，-C(O)R，，-C(0)N(R)2，-C(0)OlHS(0)2R，；每個(gè)R獨(dú)立地為-H，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)；每個(gè)R'獨(dú)立地為被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)或被取代或未被取代的芳基；j為0-4的整數(shù)；k為0-4的整數(shù)，條件是j和k至少之一是l-4的整數(shù)；和每個(gè)n獨(dú)立地為0、l或2。在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了由結(jié)構(gòu)式(II)表示的化合物:或其可藥用鹽，其中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>Ri為被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基或被取代或未被取代的炔基，其各自任選地被NR、O或S(O)J司斷；每個(gè)R2獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-NRC(O)R，-S02N(R)2，-N(R)2，-N02，-OH和-OR，；每個(gè)R3獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-NRC(O)R，-S02N(R)2，-N(R)2，-N02，-OH和-OR，；R4和Rs獨(dú)立地選自-H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)和被取代或未被取代的芳基，其中垸基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)n間斷；或者R4和R5—起形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；V為-NH-L-A-Q或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>環(huán)C為被取代或未被取代的雜環(huán)的芳香或非芳香環(huán)；A為NR或O;或者A為共價(jià)鍵；L為被取代或未被取代的烴基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S的雜原子間斷；Q選自-R，-C(0)R，，-C(0)N(R)2，-C(0)OR,-S(0)2R，；每個(gè)R獨(dú)立地為-H，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)；每個(gè)R，獨(dú)立地為被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)或被取代或未被取代的芳基j為0-4的整數(shù)；k為0-4的整數(shù)，條件是j和k至少之一是l-4的整數(shù)；和每個(gè)n獨(dú)立地為0、l或2。本發(fā)明的化合物可以與可藥用載體配制成藥物組合物。在本發(fā)明的其它方面，本發(fā)明涉及本文公開(kāi)的化合物，其選擇性地殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)(對(duì)腫瘤細(xì)胞具有毒性)。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療哺乳動(dòng)物的病況的方法，包括對(duì)哺乳動(dòng)物給用治療有效量的本發(fā)明的化合物。適當(dāng)?shù)脑噭┛梢云洮F(xiàn)有形式或者在完全或部分代謝后具有所述的活性。在某些方面，化合物通過(guò)細(xì)胞凋亡或非細(xì)胞凋亡機(jī)理殺傷細(xì)胞。在某些方面，細(xì)胞有升高的Ras路徑活性(例如RasV12)。在某些方面，所述病況是癌。本發(fā)明的另一方面提供了殺傷細(xì)胞、促進(jìn)細(xì)胞死亡或抑制細(xì)胞增殖的方法，包括對(duì)細(xì)胞給用有效量的本發(fā)明的化合物。適當(dāng)?shù)脑噭┛梢云洮F(xiàn)有形式或者在完全或部分代謝后具有所述的活性。在某些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是癌細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是減少腫瘤生長(zhǎng)率的方法，包括給用足夠減少腫瘤生長(zhǎng)率的量的治療劑，其中所述治療劑是本發(fā)明的化合物。適當(dāng)?shù)脑噭┛梢云洮F(xiàn)有形式或者在完全或部分代謝后具有所述的活性。在一個(gè)方面，本發(fā)明是治療癌患者的方法，包括對(duì)所述患者給用有效量的本發(fā)明的化合物。適當(dāng)?shù)脑噭┛梢云洮F(xiàn)有形式或者在完全或部分代謝后具有所述的活性。在另一方面，本發(fā)明是增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療劑的敏感性的方法(例如加合或協(xié)同方式)，其中腫瘤細(xì)胞與本文公開(kāi)的化合物接觸。在相關(guān)方面，本發(fā)明是減少標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞對(duì)化療劑的敏感性的方法，其中所述正常細(xì)胞與本文公開(kāi)的化合物接觸。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是鑒定可能響應(yīng)用本發(fā)明化合物的治療的方法。使用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)表征方法，可期待被識(shí)別具有顯示以下一種或多種的瘤形成的患者可應(yīng)答以一個(gè)或多個(gè)路徑元件的活化為特征的異常Ras信號(hào)路徑活性(例如磷酸化Erkl/2，磷酸化MEK等)，和/或基因表達(dá)分布和/或相似或相同基因型的細(xì)胞系對(duì)體外或體內(nèi)暴露于本發(fā)明的化合物下的敏感性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是一種進(jìn)行制藥活動(dòng)的方法，包括(a)鑒定抑制細(xì)胞增殖的候選治療劑，其中候選治療劑是本文公開(kāi)的化合物；(b)進(jìn)行在步驟(a)中鑒定的候選治療劑在動(dòng)物中的功效和毒性的治療評(píng)價(jià)；和(c)制備藥物制劑，其包括一種或多種在步驟(b)中鑒定的具有可接受的治療評(píng)價(jià)的候選治療劑。取代步驟(b)和(c)的一步或者兩步或者除了步驟(b)和(c)的一步或者兩步之外，所述方法可以包括將候選治療劑進(jìn)一步開(kāi)發(fā)的權(quán)利許可給第三方。在另一個(gè)實(shí)施方案中，進(jìn)行藥物開(kāi)發(fā)活動(dòng)的方法包括建立用于分配待售藥物制劑的分配系統(tǒng)。任選地，建立銷(xiāo)售團(tuán)隊(duì)用于藥物制劑的市場(chǎng)推廣。本發(fā)明還提供包裝的藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，包裝的藥物包括(i)治療有效量的本文公開(kāi)的化合物；和(ii)用于治療癌癥患者的試劑給藥的說(shuō)明書(shū)和/或標(biāo)簽。說(shuō)明書(shū)或者標(biāo)簽可以?xún)?chǔ)藏在電子介質(zhì)，例如CD、DVD、軟盤(pán)、存儲(chǔ)卡等等，這些可以通過(guò)電腦讀取。本發(fā)明還提供了本文公開(kāi)的化合物用于制備用于治療癌的藥物的用途。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法還包括聯(lián)合給藥一種或多種試劑，諸如通常通過(guò)細(xì)胞凋亡機(jī)理殺傷細(xì)胞的化療劑。適用于降低腫瘤生長(zhǎng)率和治療癌患者的試劑包括但不限于有機(jī)小分子，肽，蛋白質(zhì)，素?cái)M肽，核酸，抗體，及其組合。預(yù)期本發(fā)明的所有的實(shí)施方案可以與一個(gè)或多個(gè)其它實(shí)施方案，甚至是在本發(fā)明的不同方面描述的其它實(shí)施方案組合。圖1表示由化合物25所引起的HT-1080細(xì)胞異種移植物生長(zhǎng)的抑圖2表示由化合物25所引起的HT-1080細(xì)胞異種移植物生長(zhǎng)的抑制。圖3表示由化合物IO所引起的HT-1080細(xì)胞異種移植物生長(zhǎng)的抑制。圖4表示通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法和SDS-PAGE使用固定在Affi-Gel10珠上的化合物4-9使用得自腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞裂解產(chǎn)物從pull-down實(shí)驗(yàn)鑒定的蛋白質(zhì)。發(fā)明詳述本發(fā)明還提供了由結(jié)構(gòu)式(I)表示的化合物，其中該化合物適用于本文公開(kāi)的方法和組合物中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>或其可藥用鹽，其中Ra為鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基-O-，被取代或未被取代的垸基-o-，被取代或未被取代的烯基-o-或被取代或未被取代的炔基-O-，其中垸基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)J司斷；每個(gè)R2獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-NRC(O)R，-S02N(R)2，-N(R)2，-N02，-OH禾口-OR，；每個(gè)R3獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-NRC(O)R，-S02N(R)2，-N(R)2，-N02，-OH和-OR，；R4和Rs獨(dú)立地選自-H，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)和被取代或未被取代的芳基，其中烷基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)n間斷；或者R4和R5—起形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；V為-NH-L-A-Q或環(huán)C為被取代或未被取代的雜環(huán)的芳香或非芳香環(huán)；A為NR或O;或者A為共價(jià)鍵；L為被取代或未被取代的烴基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S的雜原子間斷；Q選自-R，-C(0)R，，-C(0)N(R)2，-C(0)OlHS(0)2R，；每個(gè)R獨(dú)立地為-H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)；每個(gè)R，獨(dú)立地為被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)或被取代或未被取代的芳基；j為0-4的整數(shù)；k為0-4的整數(shù)，條件是j和k至少之一是l-4的整數(shù)；和每個(gè)n獨(dú)立地為0、1或2。對(duì)于本發(fā)明的某些化合物，V是由上述結(jié)構(gòu)包括的V的適當(dāng)?shù)睦影?<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>當(dāng)V由這些結(jié)構(gòu)之一表示時(shí)，A通常是共價(jià)鍵或NR。V的特別適當(dāng)?shù)睦邮?、Q和Q其中A是共價(jià)鍵；和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>其中A是NR。在某些實(shí)施方案中，A是共價(jià)鍵并且Q是-R。當(dāng)Q是-R時(shí)，Q通常是-H或被取代或未被取代的烷基(例如甲基，乙基)。在某些這種實(shí)施方案中，V是Q,A是共價(jià)鍵并且Q是-H，甲基或乙基，特別是甲基。在某些實(shí)施方案中，在本發(fā)明的化合物中，特別是其中V如上所示的化合物中，取代基-Q是酰基。?；ǔＳ?C(O)R'表示，其中R'的定義如上所述。在某些實(shí)施方案中，-C(O)R，中的R，為被取代或未被取代的芳基或芳基氧基烷基，特別是被取代或未被取代的苯基或苯基氧基烷基，諸如被取代或未被取代的苯基氧基甲基。苯基的適當(dāng)?shù)娜〈╠-6烷基，CF3，羥基，CM烷氧基，芳基，芳基氧基，鹵素，-N(R)2，硝基，羧酸，羧酸酯，和磺?；１交趸谆倪m當(dāng)?shù)娜〈u素，特別是氯。當(dāng)存在時(shí)，氯優(yōu)選位于苯基環(huán)的4-位，以得到如上所示的-Q基在其中V由-NH-L-A-Q表示的化合物中，L通常是被取代或未被取代的亞烷基或聚(亞垸基二醇)(例如聚(乙二醇)，聚(丙二醇)。適當(dāng)?shù)膩嗃睦佑?(CH2)j-表示，其中j是1-6的整數(shù)，諸如2-4。聚(亞烷基二醇)通常是2聚體或3聚體。R4和Rs通常獨(dú)立地為-H或被取代或未被取代的烷基(例如烷基，垸氧基垸基，單-或二垸基氨基垸基，芳烷基)，特別是當(dāng)V(包括A和Q)具有上述值時(shí)。更通常地，R4和R5獨(dú)立地為被取代或未被取代的Q-C4烷基，特別是甲基。R,通常是被取代或未被取代的烷基，特別是未被取代的d-Q垸基(例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基)。在一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)&、Rs和V具有上述值時(shí)，R,通常是被取代或未被取代的烷基。在某些實(shí)施方案中，j為1，2，3或4，諸如當(dāng)k為0時(shí)。在某些實(shí)施方案中，k為1，2，3或4，諸如當(dāng)j為0時(shí)。在某些實(shí)施方案中，j為1-4的整數(shù)并且k為1-4的整數(shù)。例如，j為1并且k為1，j為1并且k為2，j為l并且k為3，j為l并且k為4，j為2并且k為1,j為2并且k為2，j為2并且k為3，j為2并且k為4，j為3并且k為1，j為3并且k為2，j為3并且k為3，j為3并且k為4，j為4并且k為1，j為4并且k為2，j為4并且k為3，或j為4并且k為4。當(dāng)存在一個(gè)或多個(gè)112和/或R3取代基時(shí)，它們通常獨(dú)立地選自極性取代的烷基，極性取代的垸氧基，極性取代的碳環(huán)芳基，被取代或未被取代的雜芳基(例如含氮雜芳基，諸如咪唑基，嗯唑基，噻唑基，吡啶基，嘧啶基，三唑基)和被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)(例如吡唑基，哌啶基，哌嗪基，嗎啉基，高哌嗪基)。有利地，這些基團(tuán)改善了化合物的水溶性。特別適當(dāng)?shù)臉O性取代基包括氨基，酰胺基，胍基，-S03H，-P03H，-OH和-COOH(包括水解生成-COOH的酯)，包括其鹽。其它適當(dāng)?shù)娜〈ㄏ趸?，鹵素如氯、溴和碘，被鹵素取代的垸基和烷氧基(例如-CF3，-OCF3)。R2和/或R3的另外的適當(dāng)值包括-NRC(O)R和-N(R)2，特別是-NHC(O)R和-NHR。對(duì)于-NHC(O)R和-NHR,R通常是-H或被取代的烷基。這種烷基上的取代基有利地是能夠與其它官能團(tuán)反應(yīng)形成共價(jià)鍵，諸如胺，羧酸，酰鹵，鹵素等的基團(tuán)。優(yōu)選地，當(dāng)&和/或R3是-NHC(O)R或—NHR時(shí)R是氨基垸基(例如其中垸基通常是C3-C6)，或當(dāng)R2和/或R3是-NHR時(shí)R是-H。112和/或R3的例子包括-NH2、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>在某些實(shí)施方案中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物由以下的具體結(jié)構(gòu)表示:在結(jié)構(gòu)式(Ia)中，R2通常是-NHR(例如-NH2)并且&通常是垸氧基(例如甲氧基，乙氧基)。在結(jié)構(gòu)式(Ib)中，R3通常是鹵素或-OCF3并且Ra通常是鹵素或垸氧基(例如甲氧基，乙氧基)。在某些實(shí)施方案中，在結(jié)構(gòu)式(Ia)中R3所在位置與R3在結(jié)構(gòu)式中(Ib)的位置相同。本發(fā)明的特別適當(dāng)?shù)幕衔锞哂幸韵碌囊粋€(gè)或多個(gè)特點(diǎn)(1)V是4-哌嗪基，4-高哌嗪基，4-甲基高哌嗪基或4-(4-氯苯氧基乙?；?哌嗪基，優(yōu)選4-甲基高哌嗪基；(2)&是-H或未被取代的烷基，優(yōu)選-H或甲基；(3)R5是-H或未被取代的垸基，優(yōu)選-H或甲基；(4)Ra是未被取代的烷基-O-基，優(yōu)選乙基-O-(即，乙氧基)；和(5)R2和R3的至少之一是增強(qiáng)水溶性的基團(tuán)(例如，-NH2)，-N02，-0^3和/或鹵素。這種適當(dāng)?shù)幕衔锏睦泳哂刑攸c(diǎn)(l);特點(diǎn)(1)和(2);特點(diǎn)(1)國(guó)(3);特點(diǎn)(l)-(4);或特點(diǎn)(1)-(5)。本發(fā)明還提供了由結(jié)構(gòu)式(II)表示的化合物，其中該化合物適用于本文公開(kāi)的方法和組合物中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>或其可藥用鹽，其中R,為被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基或被取代或未被取代的炔基，其各自任選地被NR、0或S(0)。間斷；每個(gè)R2獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，棚CON(R)2，-NRC(O)R，-S02N(R)2，-N(R)2，-N02，-OH和-OR，(例如鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-S02N(R)2，-OH和-OR，)；每個(gè)R3獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-NRC(O)R，-S02N(R)2，-N(R)2，-N02,-OH和-OR，(例如鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-S02N(R)2，-OH和-OR，)；R4和R5獨(dú)立地選自-H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)和被取代或未被取代的芳基，其中烷基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)n間斷；或者FU和Rs—起形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；V為-NH-L-A-Q或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>環(huán)C為被取代或未被取代的雜環(huán)的芳香或非芳香環(huán)；A為NR或O;或者A為共價(jià)鍵；L為被取代或未被取代的烴基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S的雜原子間斷；Q選自-R，-C(O)R'，-C(0)N(R)2，-(:(0)011，和-3(0)2仗，；每個(gè)R獨(dú)立地為-H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)；每個(gè)R'獨(dú)立地為被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)或被取代或未被取代的芳基；j為0-4的整數(shù)；k為0-4的整數(shù)，條件是j和k至少之一是l-4的整數(shù)；和每個(gè)n獨(dú)立地為0、1或2。對(duì)于本發(fā)明的某些化合物，V是V的特別適當(dāng)?shù)睦邮?Q和Q其中A是共價(jià)鍵；和其中A是NR。在某些實(shí)施方案中，A是共價(jià)鍵并且Q是-R。當(dāng)Q是-R時(shí)，Q通常是-H或被取代或未被取代的垸基(例如甲基，乙基)。在某些這種實(shí)施方案中，V是、Q，A是共價(jià)鍵并且Q是-H，甲基或乙基，特別是甲基。在某些實(shí)施方案中，在本發(fā)明的化合物中，特別是其中V如上所示的化合物中，取代基-Q是?；?。?；ǔＳ?C(O)R'表示，其中R'的定義如上所述。在某些實(shí)施方案中，-C(O)R'中的R，為被取代或未被取代的芳基或芳基氧基烷基，特別是被取代或未被取代的苯基或苯基氧基垸基，諸如被取代或未被取代的苯基氧基甲基。苯基的適當(dāng)?shù)娜〈≦V烷基，CF3，羥基，CM垸氧基，芳基，芳基氧基，鹵素，-N(R)2，硝基，羧酸，羧酸酯，和苯基氧基甲基的適當(dāng)?shù)娜〈u素，特別是氯。當(dāng)存在時(shí)，氯優(yōu)選位于苯基環(huán)的4-位，以得到如上所示的-Q基在其中V由-NH-L-A-Q表示的化合物中，L通常是被取代或未被取代的亞烷基或聚(亞垸基二醇)(例如聚(乙二醇)，聚(丙二醇)。適當(dāng)?shù)膩嗃睦佑?(CH2)j-表示，其中j是l-6的整數(shù)，諸如2-4的整數(shù)。聚(亞垸基二醇)通常是2聚體或3聚體。R4和Rs通常獨(dú)立地為-H或被取代或未被取代的烷基(例如垸基，烷氧基烷基，單-或二垸基氨基垸基，芳垸基)，特別是當(dāng)V(包括A和Q)具有上述值時(shí)。更通常地，R4和Rs獨(dú)立地是-H或被取代或未被取代的C,-C4烷基，特別是甲基。R通常是被取代或未被取代的垸基，特別是未被取代的C,-C4烷基(例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基)。在一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)R4、Rs和V具有上述值時(shí)，R,通常是被取代或未被取代的烷基。在某些實(shí)施方案中，j為1，2，3或4，諸如當(dāng)k為0時(shí)。在某些實(shí)施方案中，k為1，2，3或4，諸如當(dāng)j為0時(shí)。在某些實(shí)施方案中，j為1-4的整數(shù)并且k為1-4的整數(shù)。例如，j為1并且k為1,j為1并且k為2，j為l并且k為3，j為l并且k為4，j為2并且k為1，j為2并且k為2，j為2并且k為3，j為2并且k為4，j為3并且k為1，j為3并且k為2，j為3并且k為3，j為3并且k為4，j為4并且k為1，j為4并且k為2，j為4并且k為3，或j為4并且k為4。當(dāng)存在一個(gè)或多個(gè)R2和/或R3取代基時(shí)，它們通常獨(dú)立地選自極性取代的垸基，極性取代的烷氧基，極性取代的碳環(huán)芳基，被取代或未被取代的雜芳基(例如含氮雜芳基，諸如咪唑基，瞎唑基，噻唑基，吡啶基，嘧啶基，三唑基)和被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)(例如吡唑基，哌啶基，哌嗪基，嗎啉基，高哌嗪基)。有利地，這些基團(tuán)改善了化合物的水溶性。特別適當(dāng)?shù)臉O性取代基包括氨基，酰胺基，胍基，-S03H，-P03H，-OH和-COOH(包括水解生成-COOH的酯)，包括其鹽。其它適當(dāng)?shù)娜〈ㄏ趸?，鹵素諸如氯、溴和碘，和被鹵素取代的垸基和烷氧基(例如-CF3，-OCF3)。R2和/或R3的另外的適當(dāng)值包括-NRC(O)R和-N(R)2，特別是-NHC(O)R和-NHR。對(duì)于-NHC(O)R和-NHR，R通常是-H或被取代的烷基。這種垸基上的取代基有利地是能夠與其它官能團(tuán)反應(yīng)形成共價(jià)鍵，例如胺，羧酸，?；u，鹵素等的基團(tuán)。優(yōu)選地，當(dāng)R2和/或R3是-NHC(O)R或-NHR時(shí)R是氨基垸基(例如其中垸基通常是C3-C6)，或當(dāng)R2和/或R3是-NHR時(shí)R是-H。R2和/或R3的例子包括-NH2，-NHC(0)(CH2)3NH2和-NH(CH2)6NH2。本發(fā)明的特別適當(dāng)?shù)幕衔锞哂幸韵碌囊粋€(gè)或多個(gè)特點(diǎn)(1)V是4-哌嗪基，4-高哌嗪基，4-甲基高哌嗪基或4-(4-氯苯氧基乙?；?哌嗪基；(2)R4是未被取代的烷基，優(yōu)選是甲基；R5是-H或未被取代的垸基，優(yōu)選是-H或甲基；(4)Ri是未被取代的垸基，優(yōu)選是乙基；和(5)R2和R3的至少之一是增強(qiáng)水溶性的基團(tuán)，-OCF3，-N02和/或鹵素。這種適當(dāng)?shù)幕衔锏睦泳哂刑攸c(diǎn)(1);特點(diǎn)(l)-(2);特點(diǎn)(l)-(3);特點(diǎn)(1)-(4);或特點(diǎn)(1)-(5)。示例性的化合物包括化合物(l)、(2)和(3):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>其它的示例性化合物如實(shí)施例所示。本發(fā)明的化合物包括本文公開(kāi)的化合物的對(duì)映體和非對(duì)映體。本發(fā)明還包括本文公開(kāi)的化合物的鹽，特別是可藥用鹽。另外，本發(fā)明包括本文公開(kāi)的化合物的溶劑合物、水合物和多晶型物結(jié)晶形式。預(yù)期本發(fā)明的所有的實(shí)施方案可以與一個(gè)或多個(gè)其它實(shí)施方案，甚至是那些在本發(fā)明的不同方面描述的其它實(shí)施方案組合。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"?；?包括可由通式表示的以下部分o其中適當(dāng)?shù)腞基團(tuán)包括但是不限于H，烷基，烷氧基，芳烷基，芳基氧基，芳基，雜芳基，雜芳烷基，雜芳基氧基，和環(huán)垸基，其中任何這些基團(tuán)可任選地被進(jìn)一步適當(dāng)?shù)厝〈?。術(shù)語(yǔ)"烴基"是指被取代或未被取代的、環(huán)狀或非環(huán)狀的、飽和或不飽和的烴基。當(dāng)被說(shuō)明時(shí)，烴基原子可以被一個(gè)或多個(gè)雜原子例如N、O和S間斷(即，雜原子不位于烴基的末端)。術(shù)語(yǔ)"垸基"是指被取代或未被取代的飽和烴基，包括直鏈垸基和支鏈垸基，包括鹵代烷基諸如三氟甲基和2，2，2-三氟乙基等。Co烷基當(dāng)所述基團(tuán)位于末端時(shí)是指氫，如果所述基團(tuán)位于內(nèi)部時(shí)是指化學(xué)鍵。術(shù)語(yǔ)"烯基"和"炔基"是指被取代或未被取代的不飽和的脂族基團(tuán)，與上面描述的烷基的具有類(lèi)似的可能取代，但是分別包含至少一個(gè)雙鍵或三鍵。術(shù)語(yǔ)"烷氧基"是指連接有垸基的氧。代表性的烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，叔丁氧基等。"醚"是通過(guò)氧以共價(jià)鍵連接的兩個(gè)烴。因此，使烷基成為醚的該烷基的取代基是烷氧基或類(lèi)似垸氧基。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"芳烷基"是指被芳基取代的烷基。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"碳環(huán)"包括被取代或未被取代的、飽和或不飽和的、3-8元單環(huán)環(huán)狀脂族基團(tuán)，其中每個(gè)環(huán)原子是碳。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"雜環(huán)基"包括被取代或未被取代的、3-8元、優(yōu)選4-8元的單環(huán)環(huán)狀基團(tuán)，其中環(huán)中包含l-3個(gè)雜原子。非芳香雜環(huán)基團(tuán)的例子包括吡咯垸、哌啶、哌嗪、四氫呋喃和四氫噻吩。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"芳基"包括被取代或未被取代的5、6和7元的單環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)芳香基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)"芳基"還包括具有兩個(gè)或多個(gè)環(huán)狀環(huán)的多環(huán)體系，其中兩個(gè)或多個(gè)碳為兩個(gè)鄰接環(huán)所共有，其中環(huán)的至少之一是芳香性的，例如另一個(gè)環(huán)狀環(huán)可以是環(huán)烷基，環(huán)烯基，環(huán)炔基，芳基和/或雜環(huán)基。碳環(huán)芳基包括苯，萘，菲，苯酚，苯胺等。術(shù)語(yǔ)"雜芳基"包括被取代或未被取代的芳香的5-7元環(huán)狀結(jié)構(gòu)，更優(yōu)選為5-6元環(huán)，其環(huán)狀結(jié)構(gòu)含有l(wèi)-4個(gè)雜原子。術(shù)語(yǔ)"雜芳基"還包括具有兩個(gè)或多個(gè)環(huán)狀環(huán)的多環(huán)體系，其中兩個(gè)或多個(gè)碳為兩個(gè)鄰接環(huán)所共有，其中環(huán)的至少之一是雜芳香性的，例如，另一個(gè)環(huán)狀環(huán)可以是環(huán)垸基，環(huán)烯基，環(huán)炔基，芳基，和/或雜環(huán)基。雜芳基包括例如吡咯，呋喃，噻吩，咪唑，螺唑，噻唑，三唑，吡唑，吡啶，吡嗪，噠嗪和嘧啶等。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"雜原子"是指任何的不同于碳或氫的元素的原子。優(yōu)選的雜原子是氮、氧、磷和硫。術(shù)語(yǔ)"多環(huán)基"或"多環(huán)的"是指兩個(gè)或多個(gè)環(huán)(例如環(huán)烷基，環(huán)烯基，環(huán)炔基，芳基，雜芳基,和/或雜環(huán)基)其中兩個(gè)或多個(gè)碳為兩個(gè)鄰接的環(huán)所共有，例如所述環(huán)是"稠環(huán)"。多環(huán)中的每個(gè)環(huán)可以是飽和或不飽和的。術(shù)語(yǔ)"取代的"是指具有替換骨架上一個(gè)或多個(gè)碳上的氫的取代基的部分。很清楚"取代"或者"用...取代"包括隱含條件，即這種取代與取代的原子和取代基允許的化合價(jià)一致，并且取代導(dǎo)致穩(wěn)定的化合物，例如，不會(huì)自發(fā)進(jìn)行轉(zhuǎn)化例如通過(guò)重排、環(huán)化、消除等等。此處使用的術(shù)語(yǔ)"取代的"預(yù)期包括有機(jī)化合物所有允許的取代。在較寬范圍，允許的取代基包括有機(jī)化合物的非環(huán)狀的和環(huán)狀的，支鏈和無(wú)支鏈的，碳環(huán)的和雜環(huán)的，芳香族和非芳香族取代基。對(duì)合適的有機(jī)化合物，允許的取代可以是一種或多種，可以是相同或者不同的。對(duì)本發(fā)明來(lái)說(shuō)，雜原子比如氮可以有氫取代基和/或此處描述的任何允許的有機(jī)化合物取代，其滿足雜原子的化合價(jià)。取代基可以包括此處描述的任何取代基，例如鹵素，羥基，羰基(比如羧基，烷氧羰基，甲?；蛘啧；?，硫代羰基(比如硫酯，硫代醋酸酯，或者硫代甲酸酯)，垸氧基，磷?；?，磷酸酯，膦酸酯，次膦酸酯，氨基，酰氨基，脒，亞胺，氰基，硝基，疊氮基，巰基，垸硫基，硫酸酯，磺酸酯，氨磺?；?，磺酰氨基，磺?；?，雜環(huán)，芳烷基，或者芳香族或者雜芳族部分。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道烴鏈上被取代的部分它們自身也是可以被取代的，如果合適的話。術(shù)語(yǔ)"小的有機(jī)分子"是指分子量小于2000amu的非聚合物。通常，這種分子的分子量小于1000amu，比如小于500amu。選擇性細(xì)胞殺傷基因型選擇性化合物作為分子探針的能力基于化學(xué)遺傳學(xué)的前提，即小分子可用于鑒定行使生物學(xué)效果的蛋白和途徑(Schreiber，1998，Bioorg.Med.Chem.6,1127-1152;Stockwell,2000，NatRevGenet1,116-25;Stockwell,2000，TrendsBiotedmol18，449-55)。例如，觀測(cè)到天然產(chǎn)物雷帕霉素阻止細(xì)胞生長(zhǎng)，使發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物的雷帕霉素(mTOR)的靶標(biāo)作為調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)的蛋白成為可能(Brown等人，1994,Nature369，756-758;Sabatini等人，1994，Cell78,35-43)。申請(qǐng)人已經(jīng)加工了一系列具有確定遺傳元件的腫瘤細(xì)胞，用于鑒定那些關(guān)鍵途徑，這些途徑的破壞將導(dǎo)致致瘤表型(Hahn等人，1999,NatMed5,1164-70;Hahn等人，2002，NatRevCancer2，331-41;Lessnick等人，2002,CancerCell1，393-401)。申請(qǐng)人推定這些實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞使得鑒定基因型選擇性試劑成為可能，所述試劑在特定癌癥相關(guān)等位基因存在的情況下顯示合成致死性。具有基因型選擇致死性的化合物可以作為腫瘤細(xì)胞中信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的分子探針，并作為后續(xù)開(kāi)發(fā)具有良好療效指數(shù)的臨床有效藥物的先導(dǎo)物，和/或作為有效藥物。本發(fā)明提供了殺傷癌細(xì)胞，尤其是基因型特異的癌細(xì)胞，比如那些具有升高的Ras信號(hào)活性的癌細(xì)胞的化合物。因此，本發(fā)明的一個(gè)方面提供一種選擇性殺傷癌細(xì)胞，尤其是那些具有升高的Ras活性的癌細(xì)胞的方法，所述方法包括對(duì)需要治療的哺乳動(dòng)物患者給藥治療有效量的本文公開(kāi)的化合物。如本領(lǐng)域公知，Ras的組成性活化是人癌細(xì)胞惡性生長(zhǎng)的重要因素。在20%到30%的人類(lèi)腫瘤中發(fā)現(xiàn)，RAS原癌基因(H-RAS,N-RAS,K-RAS)的突變是頻發(fā)的遺傳畸變，盡管在不同腫瘤類(lèi)型中的發(fā)生率變化很大(Bos，CancerRes.49:4682-4689，1989)。最高的RAS突變率是在胰腺腺癌(90%)，結(jié)腸腺癌(50%)和肺腺癌(30%)中發(fā)現(xiàn)。在甲狀腺的濾泡和未分化癌中，RAS突變的發(fā)生率也是相當(dāng)高的(50%)。最常觀察到的RAS突變出現(xiàn)在Ras調(diào)節(jié)的關(guān)鍵位點(diǎn)--即密碼子12、13和61。這些突變的每一種均導(dǎo)致Ras正常GTPase活性的消除。Ras活化還經(jīng)常在血液惡性腫瘤例如骨髓性白血病和多發(fā)性骨髓瘤中觀察到。在大約三分之一的脊髓發(fā)育不良綜合征(MDS)和急性骨髓性白血病(AML)中，RAS基因被突變活化。RAS突變存在于大約40%新確診的多發(fā)性骨髓瘤患者中，并且頻率隨病程進(jìn)展增加。具有活化Ras途徑的細(xì)胞可被本文公開(kāi)的化合物選擇性的殺傷，諸如通過(guò)細(xì)胞凋亡機(jī)理。因此，在某些實(shí)施方案中，某些特定基因型的癌細(xì)胞可被本發(fā)明的化合物選擇性的殺傷。這些可以包括帶有組成活化的Ras突變或者Ras信號(hào)途徑突變和增強(qiáng)的ERK1、MEK1活性的癌癥。在某些其他實(shí)施方案中，靶細(xì)胞的基因型可以被選擇性的改變，這樣的話以前對(duì)本發(fā)明的化合物不敏感的靶細(xì)胞現(xiàn)在對(duì)這種殺傷敏感。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種選擇性殺傷具有升高的Ras途徑活性的癌細(xì)胞而保護(hù)不具有升高的Ras活性的相對(duì)正常細(xì)胞的方法。這可能是有用的，因?yàn)樵S多癌癥帶有體細(xì)胞RasV12或者導(dǎo)致癌細(xì)胞中Ras信號(hào)活性升高的其他類(lèi)似突變，而相同患者/個(gè)體中的正常細(xì)胞通常沒(méi)有相同的RasV12或者其他的Ras途徑突變。本發(fā)明的化合物可以用來(lái)選擇性的殺傷這些癌細(xì)胞。本發(fā)明的方法仍能有效殺傷癌細(xì)胞，因?yàn)檎＜?xì)胞可能沒(méi)有升高的Ras信號(hào)活性。在一些實(shí)施方案中，升高的Ras活性通過(guò)在氨基酸位置12、13和/或61的組成性活化Ras(N-，H-，或者K-Ras)突變而顯示。在一些其它實(shí)施方案中，Ras活性的升高通過(guò)Ras途徑蛋白一種或多種下游組件增強(qiáng)的活性顯示，包括但不限于Raf、MEK、MAPK等等。在其他實(shí)施方案中，細(xì)胞可以通過(guò)一種或多種靶蛋白的導(dǎo)入或表達(dá)對(duì)藥物敏感。表達(dá)可以通過(guò)用載體，諸如表達(dá)靶蛋白的腺病毒或者逆轉(zhuǎn)錄病毒感染耙細(xì)胞來(lái)實(shí)現(xiàn)(見(jiàn)下文)。或者，靶蛋白可以直接地提供給靶細(xì)胞。例如，靶蛋白可利用本領(lǐng)域已知的各種方法導(dǎo)入靶細(xì)胞(參見(jiàn)下文細(xì)節(jié))。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白可以通過(guò)捕獲在表面上帶有正電荷的脂質(zhì)體(例如lipofectins)中而提供給靶細(xì)胞，任選可用抗耙組織細(xì)胞表面抗原的抗體，例如，抗癌細(xì)胞表面抗原的抗體標(biāo)記。在另一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白可以通過(guò)胞轉(zhuǎn)(transcytosis)作用提供給靶細(xì)胞，利用任何能夠調(diào)節(jié)這種功效的"內(nèi)化肽"，包括但不限于HIV蛋白Tat的N端結(jié)構(gòu)域(例如，Tat的殘基l-72或者其能夠促進(jìn)胞轉(zhuǎn)作用的更小片段)，果蠅antenopediaIII蛋白的全部或者部分，黃峰毒素(mastoparan)的足夠部分等等(見(jiàn)下文)。在其他實(shí)施方案中，通過(guò)輸送抗體、RNAi(siRNA，短發(fā)夾RNA,等等)、反義序列或者對(duì)這種靶蛋白特異的小分子抑制劑可獲得減少的蛋白質(zhì)(和/或其它的靶蛋白)。這種靶細(xì)胞蛋白拮抗劑的輸送是本領(lǐng)域公知的。參見(jiàn)，例如，WO0術(shù)8940A2，EP1439227A1,WO04048545A2,US20040029275A1,WO03076592A2，WO04076674Al，W09746671A1，在此全部引入作為參考。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供一種利用本發(fā)明的化合物和一種或多種通過(guò)細(xì)胞凋亡機(jī)理殺傷細(xì)胞的試劑或者療法(例如放療)的聯(lián)合療法。這種試劑包括如下所述的多種化療藥物。據(jù)信某些蛋白在對(duì)本發(fā)明化合物敏感的細(xì)胞中表達(dá)水平升高。在某些實(shí)施方案中，靶細(xì)胞被調(diào)控表達(dá)更高水平的靶蛋白，這樣通過(guò)本發(fā)明的化合物增強(qiáng)殺傷或者降低增殖率的敏感性。例如，靶蛋白可利用本領(lǐng)域已知的各種方法被導(dǎo)入靶細(xì)胞(參見(jiàn)下面詳述)。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白可以通過(guò)被捕獲在表面上帶有正電荷表面的脂質(zhì)體(例如lipofectins)中而提供給耙細(xì)胞，該脂質(zhì)體可選地用抗靶組織的細(xì)胞表面抗原的抗體，例如，抗癌細(xì)胞表面抗原的抗體進(jìn)行標(biāo)記。此外，編碼功能性靶標(biāo)的核酸可被導(dǎo)入這種靶細(xì)胞，利用例如腺病毒或者逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。此外，內(nèi)源靶蛋白活性可以被試劑刺激，所述試劑刺激靶蛋白的表達(dá)，或者抑制靶蛋白抑制劑(轉(zhuǎn)錄或者翻譯抑制劑，或者促進(jìn)靶蛋白在細(xì)胞中轉(zhuǎn)換的抑制劑)的活性。在某些方面，本發(fā)明的方法還涉及給藥一種增加細(xì)胞中靶蛋白豐度的試劑。用于增加靶蛋白豐度的試劑可以，例如，包括適合運(yùn)輸進(jìn)細(xì)胞靶蛋白的編碼靶蛋白的多核苷酸，例如，與異源內(nèi)化結(jié)構(gòu)域融合或者制備成脂質(zhì)體制劑。在某些方面，本發(fā)明的方法還涉及給藥一種降低細(xì)胞中耙蛋白豐度的試劑。用于降低靶蛋白豐度的試劑能夠，例如，抑制內(nèi)源靶蛋白表達(dá)，抑制(suppress)蛋白質(zhì)表達(dá)或者增強(qiáng)蛋白質(zhì)抑制劑的功能。下面章節(jié)描述本發(fā)明的某些示范性的實(shí)施方案，它們預(yù)期能夠彼此結(jié)合。此外，所述實(shí)施方案只用于說(shuō)明目的，不是用于在任何方面進(jìn)行限制。細(xì)胞系之前的報(bào)告已經(jīng)表明，通過(guò)引入表達(dá)hTERT和致癌RAS蛋白以及其他破壞p53、RB和PP2A功能的載體，有可能將原代人細(xì)胞轉(zhuǎn)化為致瘤細(xì)胞(Hahn等人，2002，MolCellBiol22，2111-23;Hahn等人，1999，Nature400，464-8jHahn禾口Weinberg,2002,NatRevCancer2，331-41;Lessnick等人，2002,CancerCell1,393-401)。在本文所述的試驗(yàn)中利用了一系列工程化人致瘤細(xì)胞和它們的前體。先前已經(jīng)報(bào)告了這些工程化致瘤細(xì)胞的各種特征，包括它們的倍增時(shí)間，它們抗復(fù)制老化和培養(yǎng)危機(jī)的能力，它們的對(duì)Y照射的反應(yīng)，它們以非貼壁依賴(lài)性模式生長(zhǎng)的能力，以及它們?cè)诿庖呷毕菪∈笾行纬赡[瘤的能力(Hahn等人，1999,前文；Hahn等人，2002,前文；Lessnick等人，2002，前文)。篩選基因型選擇性化合物的方法此處使用的術(shù)語(yǔ)"試劑"和"藥物"是可互換使用的。此處使用的術(shù)語(yǔ)"對(duì)...有毒性"是指試劑或者化合物殺傷或者抑制致瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)/增殖的能力。大規(guī)模篩選包括對(duì)成百上千的化合物進(jìn)行高通量篩選對(duì)工程化致瘤細(xì)胞的選擇毒性。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)比較與候選試劑接觸后待測(cè)細(xì)胞與對(duì)照細(xì)胞的活力，來(lái)檢測(cè)選擇性的毒性，所述待測(cè)細(xì)胞是工程化致瘤細(xì)胞。一種合適的對(duì)照是與待測(cè)細(xì)胞相同類(lèi)型的細(xì)胞，除了對(duì)照細(xì)胞未被工程化為致瘤的。例如，對(duì)照細(xì)胞可能是衍生出待測(cè)細(xì)胞的親本原代細(xì)胞。對(duì)照細(xì)胞在與待測(cè)對(duì)照細(xì)胞相同的條件下接觸候選試劑。合適的對(duì)照可以同時(shí)進(jìn)行，或者可以預(yù)先建立(例如，預(yù)先建立標(biāo)準(zhǔn)或者參考)。細(xì)胞活力可以通過(guò)本領(lǐng)域己知的各種方法檢測(cè)，包括利用染料例如鈣黃綠素乙酰甲酯(鈣黃綠素AM)和AlamarBlue。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，在用候選試劑處理后，染料比如鈣黃綠素AM被用于待測(cè)和對(duì)照細(xì)胞。在活細(xì)胞中，鈣黃綠素AM被胞內(nèi)酯酶切割，形成陰離子熒光衍生物鈣黃綠素，它無(wú)法擴(kuò)散出活細(xì)胞。因此，當(dāng)與鈣黃綠素AM孵育時(shí)，活細(xì)胞顯示綠色熒光，而死細(xì)胞不顯示?；罴?xì)胞顯示的綠色熒光可以被檢測(cè)，從而提供檢測(cè)細(xì)胞活力的方法。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，進(jìn)一步在動(dòng)物模型中鑒定試劑的特性，所述試劑已被鑒定為一種在體外選擇性誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的試劑。動(dòng)物模型包括小鼠，大鼠，兔子和猴子，它們可以是非轉(zhuǎn)基因(例如野生型)或者轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。在工程化致瘤細(xì)胞中選擇性誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的試劑的效果可以在動(dòng)物模型中進(jìn)行評(píng)定任意多種效果，例如其在動(dòng)物致瘤細(xì)胞中選擇性誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的能力和其對(duì)動(dòng)物的總體毒性。例如，本方法還包括在適當(dāng)?shù)男∈竽Ｐ椭性u(píng)定試劑(例如藥物)對(duì)致瘤細(xì)胞的選擇毒性。在工程化致瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的試劑的效果可以在動(dòng)物模型中進(jìn)行評(píng)定任意多種效果，例如其在動(dòng)物的致瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的能力和其對(duì)動(dòng)物的總體毒性。例如，本方法還包括在適當(dāng)?shù)男∈竽Ｐ椭性u(píng)定試劑(例如藥物)對(duì)致瘤細(xì)胞的毒性。為了說(shuō)明，通過(guò)使用腫瘤生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)一步評(píng)價(jià)試劑，所述試驗(yàn)評(píng)定待測(cè)試劑抑制小鼠中建立的實(shí)體瘤生長(zhǎng)的能力。所述試驗(yàn)通過(guò)在裸鼠的脂肪墊植入腫瘤細(xì)胞來(lái)進(jìn)行。給藥之前允許腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)到一定大小。在數(shù)周內(nèi)監(jiān)控腫瘤體積，例如，三周。在試驗(yàn)過(guò)程中還監(jiān)控待測(cè)動(dòng)物的總體健康狀況。進(jìn)一步在基于細(xì)胞的試驗(yàn)中評(píng)定試劑的作用機(jī)理，所述試劑已經(jīng)被鑒定為一種選擇性殺傷或者抑制工程化致瘤細(xì)胞生長(zhǎng)/增殖的試劑。例如，試劑可以在凋亡試驗(yàn)中檢測(cè)其通過(guò)前-細(xì)胞凋亡途徑誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的能力。另外，可以評(píng)定試劑通過(guò)非細(xì)胞凋亡途徑在致瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)死亡的能力，所述試劑在腫瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)死亡。例如，試劑可以在凋亡試驗(yàn)中檢測(cè)其通過(guò)前-細(xì)胞凋亡途徑不能誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的能力。如果在上述試驗(yàn)中待測(cè)細(xì)胞的活力大于對(duì)照細(xì)胞的活力，則鑒定出選擇性抑制細(xì)胞毒性的試劑(藥物)。對(duì)照細(xì)胞在與待測(cè)對(duì)照細(xì)胞相同的條件下接觸候選試劑。合適的對(duì)照可以同時(shí)進(jìn)行，或者可以預(yù)先建立(例如，預(yù)先建立標(biāo)準(zhǔn)或者參考)。本發(fā)明的基因型選擇性化合物RASV12的表達(dá)導(dǎo)致幾種已經(jīng)清楚表征的信號(hào)途徑的活化，包括RAF-MEK-MAPK信號(hào)級(jí)聯(lián)，磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信號(hào)途徑和Ral-鳥(niǎo)嘌呤解離因子途徑(Ral-GDS)。這些途徑的每一種都與人類(lèi)癌癥有關(guān)，最近的研究顯示這些途徑與細(xì)胞轉(zhuǎn)化體系相呼應(yīng)而起作用(Hamad等人，2002，GenesDev16,2045-57)。鑒定基因型選擇性化合物靶標(biāo)的方法在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及利用本發(fā)明的化合物，此處也稱(chēng)為"配體"，鑒定參與改變患病細(xì)胞表型的耙標(biāo)(此處還被稱(chēng)為"細(xì)胞組分"(例如，蛋白，核酸，或者脂類(lèi))。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種鑒定參與腫瘤發(fā)生的細(xì)胞組分的方法，其中致瘤細(xì)胞，諸如工程化人致瘤細(xì)胞、組織、器官、有機(jī)體或者其裂解產(chǎn)物或者提取物，與所述抗腫瘤化合物接觸；在接觸后，與配體作用(直接或者間接)的細(xì)胞組分被鑒別，從而可以鑒定出參與腫瘤發(fā)生的細(xì)胞組分。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種鑒定參與腫瘤發(fā)生的細(xì)胞組分的方法。在這個(gè)方法中，(a)致瘤細(xì)胞，諸如工程化人致瘤細(xì)胞、組織、器官、有機(jī)體或者其裂解產(chǎn)物或者提取物，與配體抑制劑接觸和與配體接觸；和(b)與配體抑制劑作用(直接或者間接)的細(xì)胞組分被鑒別，這些細(xì)胞組分參與腫瘤發(fā)生。細(xì)胞可以先后或者同時(shí)接觸配體和配體抑制劑?？衫靡阎姆椒ㄨb定與配體或者本發(fā)明的任何試劑相互作用的細(xì)胞組分。如此處描述，這些方法的所述化合物(或者配體)可以用任何化學(xué)方法制備。配體可選衍生自另一個(gè)化合物。這種改變的一個(gè)益處是，衍生化合物可以用于促進(jìn)配體靶復(fù)合物收集或者配體收集，例如，在分離配體和靶標(biāo)后。衍生基團(tuán)的非限制性實(shí)例包括生物素，熒光素，地高辛，綠色熒光蛋白，同位素，多聚組氨酸，磁珠，谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶，光激活交聯(lián)劑或者任意其組合。衍生基團(tuán)還可以用于結(jié)合耙標(biāo)(例如，erastin結(jié)合蛋白)以有利于它們的檢測(cè)。根據(jù)本發(fā)明，靶標(biāo)(細(xì)胞組分)可以是體內(nèi)或者體外合成的天然存在的生物分子。靶標(biāo)可以包括氨基酸，核酸，糖，脂類(lèi)，天然產(chǎn)物或者其任意組合。本發(fā)明的一個(gè)益處是不需要靶標(biāo)性質(zhì)或者功能的先驗(yàn)知識(shí)。配體和靶標(biāo)的相互作用可以是共價(jià)的或者非共價(jià)的。任選，配體-靶標(biāo)配對(duì)中的配體對(duì)其他耙標(biāo)可以顯示親合力，或者也可以不顯示親合力。配體-靶標(biāo)配對(duì)中的靶標(biāo)對(duì)其他配體可以顯示親合力，或者也可以不顯示親合力。例如，配體和靶標(biāo)間的結(jié)合可以使用體外生化法在蛋白水平鑒定，包括光-交聯(lián)，放射性同位素標(biāo)記的配體結(jié)合和親和色譜法(JakobyWB等人，1974，MethodsinEnzymology46:1)。作為替代，小分子可以固定在合適的固體支持物或者親合基質(zhì)例如瓊脂糖基質(zhì)上，用于篩選不同細(xì)胞類(lèi)型和生物體的提取物。同樣地，小分子可以接觸細(xì)胞，組織，器官，生物體或者其裂解產(chǎn)物或者提取物，然后加入固相支持體以捕獲小分子和結(jié)合的靶蛋白。表達(dá)克隆可用于檢測(cè)蛋白的小庫(kù)中的靶標(biāo)(KingRW等人，1997，Science277:973)。肽(Kieffer等人，1992，PNAS89:12048)，核苷衍生物(HaushalterKA等人，1999，Curr.Biol.9:174)和藥物-牛血清白蛋白(藥物-BSA)結(jié)合物(Tanaka等人，1999，Mol.Pharmacol.55:356)已經(jīng)被用于表達(dá)克隆中。另一個(gè)將配體與編碼靶標(biāo)的DNA緊密聯(lián)系的有用技術(shù)是噬菌體展示。噬菌體展示，主要用于單克隆抗體領(lǐng)域，在病毒表面創(chuàng)建了肽或者蛋白文庫(kù)，并用于篩選活性(SmithGP,1985，Science228:1315)。淘篩噬菌體以獲得連接到固相上的靶標(biāo)(ParmleySF等人,1988，Gene73:305)。噬菌體展示的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是cDNA位于噬菌體中，因此不需要分離克隆步驟。一種非限制性實(shí)例包括結(jié)合反應(yīng)條件，其中配體包括標(biāo)記物例如生物素、熒光素、地高辛、綠色熒光蛋白、放射性同位素、組氨酸標(biāo)記物、磁珠、酶或者其組合。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，耙標(biāo)可以在基于機(jī)理的試驗(yàn)中篩選，比如檢測(cè)結(jié)合靶標(biāo)的配體的試驗(yàn)。這可以包括與配體或者蛋白或者被檢測(cè)的指示劑的固相或者液相結(jié)合情況。或者，編碼功能還不確定的蛋白的基因可以與報(bào)告系統(tǒng)(例如，iS-半乳糖苷酶、熒光素酶或者綠色熒光蛋白)一起轉(zhuǎn)染細(xì)胞，并篩選文庫(kù)，優(yōu)選的通過(guò)高通量篩選或者用文庫(kù)的單獨(dú)成員?？梢允褂没谄渌麢C(jī)理的結(jié)合試驗(yàn)，例如，檢測(cè)對(duì)酶活性作用的生化試驗(yàn)，基于細(xì)胞的試驗(yàn)，其中靶標(biāo)和報(bào)告系統(tǒng)(例如，熒光素酶或者/3-半乳糖苷酶)已經(jīng)導(dǎo)入細(xì)胞，以及檢測(cè)自由能變化的結(jié)合試驗(yàn)。靶標(biāo)被固定到孔、珠或者芯片上，或者通過(guò)固定化抗體捕獲，或者進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析，進(jìn)行結(jié)合試驗(yàn)。結(jié)合的配體通?？梢允褂帽壬蛘邿晒饣蛘弑砻娴入x子共振來(lái)檢測(cè)。在某些實(shí)施方案中，通過(guò)調(diào)節(jié)本發(fā)明鑒定的靶標(biāo)(細(xì)胞組分)的功能(例如，活性或者表達(dá))，本發(fā)明還預(yù)期了治療或者預(yù)防疾病(例如癌癥)的方法。為了說(shuō)明，如果靶標(biāo)被鑒定促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)，治療劑可用于改變或者降低靶標(biāo)的功能(活性或者表達(dá))?；蛘?，如果耙標(biāo)被鑒定抑制腫瘤生長(zhǎng)，治療劑可用于增強(qiáng)靶標(biāo)的功能(活性或者表達(dá))。治療劑是本發(fā)明的化合物。治療方法在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供在個(gè)體中治療或者預(yù)防癌癥的方法。術(shù)語(yǔ)"癌癥"，"腫瘤"，和"瘤形成"在此處可以互換使用。此處使用的癌癥(腫瘤或者腫瘤形成)的特點(diǎn)在于一種或者多種下列性質(zhì)在環(huán)境中細(xì)胞生長(zhǎng)不受正常生化和生理影響調(diào)節(jié)；退行發(fā)育(例如，缺少正常調(diào)節(jié)的細(xì)胞分化)；和在有些情況下，轉(zhuǎn)移。癌癥疾病包括，例如，肛門(mén)癌，膀胱癌，乳腺癌，宮頸癌，慢性淋巴細(xì)胞性白血病，慢性髓性白血病，子宮內(nèi)膜癌，毛細(xì)胞性白血病，頭頸癌，肺(小細(xì)胞)癌，多發(fā)性骨髓瘤，非何杰金淋巴瘤，濾泡性淋巴瘤，卵巢癌，腦腫瘤，結(jié)腸直腸癌，肝細(xì)胞癌，卡波西肉瘤，肺癌(非小細(xì)胞癌)，黑素瘤，胰腺癌，前列腺癌，腎細(xì)胞癌，和軟組織肉瘤。其他的癌癥病癥可以參見(jiàn)，例如，Isselbacher等人(1994)Harrison'sPrinciplesofInternalMedicine1814-1877，在此引入作為參考。通常，如上所述的可用此處所述方法治療的癌癥顯示不受控制的Ras途徑活化。在一個(gè)實(shí)施方案中，上述癌癥包含Ras信號(hào)途徑的突變，導(dǎo)致Ras信號(hào)活性升高。例如，突變可以是Ras基因上的組成性活化突變，比如RasV12。突變還可以是任何的Ras途徑相關(guān)基因，其將導(dǎo)致所述途徑的活化或活性改變。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種在個(gè)體中治療或者預(yù)防癌癥的方法，包括給藥個(gè)體治療有效量的化合物，所述化合物對(duì)工程化人致瘤細(xì)胞，或者特定基因型(或者特異改變的基因型)的癌細(xì)胞顯示選擇毒性。在某些實(shí)施方案中，癌癥的特點(diǎn)在于包括活化的RAS途徑的細(xì)胞。在某些其他實(shí)施方案中，癌癥的特點(diǎn)在于細(xì)胞表達(dá)SV40小T癌蛋白，或者顯示sT和/或致癌RAS的靶標(biāo)的調(diào)節(jié)。在相關(guān)實(shí)施方案中，本發(fā)明預(yù)期本發(fā)明的方法與其他抗腫瘤療法，例如抗實(shí)體瘤和控制轉(zhuǎn)移建立的傳統(tǒng)化療方法，聯(lián)合應(yīng)用。本發(fā)明化合物的給藥可以在化療期間或者化療之后進(jìn)行。這種試劑通常與可接受的載體配制成制劑，可以靜脈內(nèi)、口服、經(jīng)頰、非腸道、通過(guò)吸入噴霧、通過(guò)局部施用或者經(jīng)皮膚給藥。試劑還可以通過(guò)局部給藥方式給藥。優(yōu)選的，一種或多種其他試劑與抗癌癥化療劑(例如，本發(fā)明的化合物)聯(lián)合給藥，以加合或者協(xié)同方式抑制癌細(xì)胞。大量的傳統(tǒng)化合物已經(jīng)顯示具有抗腫瘤活性。這些化合物已經(jīng)在化療中用作藥物制劑縮小實(shí)體瘤，預(yù)防轉(zhuǎn)移和進(jìn)一步生長(zhǎng)，或者降低在白血病或者骨髓惡性腫瘤中惡性細(xì)胞的數(shù)目。盡管化療在治療各種類(lèi)型的惡性腫瘤中有效，許多抗腫瘤化合物誘導(dǎo)不良副作用。多數(shù)情況下，當(dāng)兩種或者多種不同治療方法結(jié)合時(shí)，治療可以協(xié)同起作用，可以降低每種療法的劑量，從而降低每種化合物在較高劑量時(shí)的不良副作用。在其他情況下，對(duì)一種治療無(wú)反應(yīng)的惡性腫瘤可能對(duì)兩種或更多種不同治療的療法組合有反應(yīng)。因此，本發(fā)明的化合物和藥物組合物可以與傳統(tǒng)抗腫瘤化合物聯(lián)合給藥。傳統(tǒng)的抗腫瘤化合物包括，僅僅為舉例說(shuō)明氨魯米特，安吖啶，阿那曲唑，天冬酰胺酶，卡介苗，比卡魯胺，爭(zhēng)光霉素，布舍瑞林，白消安，喜樹(shù)堿，卡培他濱，卡鉑，卡莫司汀，苯丁酸氮芥，順鉑，2-氯脫氧腺苷，氯膦酸鹽，秋水仙堿，環(huán)磷酰胺，環(huán)丙氯地孕酮，阿糖胞苷，達(dá)卡巴嗪，放線菌素D，柔紅霉素，雙烯雌酚，己烯雌酚，紫杉萜，阿霉素，表柔比星，雌二醇，雌氮芥，鬼臼乙叉甙，依西美坦，非格司亭，氟達(dá)拉濱，氟氫可的松，氟尿嘧啶，氟烴甲基睪丸素，氟他米特，吉西他濱，染料木素，戈舍瑞林，羥基脲，伊達(dá)比星，異磷酰胺，伊馬替尼，干擾素，依立替康，ironotecan，來(lái)曲唑，甲酰四氫葉酸，亮丙瑞林，左旋四咪唑，洛莫司汀，氮芥，甲羥孕酮，甲地孕酮，左旋苯丙氨酸氮芥，巰基嘌呤，美司鈉，氨甲蝶呤，絲裂霉素，米托坦，米托蒽醌，尼魯米特，諾考達(dá)哇，奧曲肽，奧沙利鉑，紫杉醇，帕屈膦酸二鈉，噴司他丁，普卡霉素，卟菲爾鈉，甲基芐肼，雷替曲塞，利妥昔單抗(riruximab)，鏈脲霉素，蘇拉明，他莫昔芬，替莫唑胺，替尼泊甙，睪丸激素，硫鳥(niǎo)嘌呤，塞替派，二氯環(huán)戊二烯鈦，托泊替康，曲妥單抗，維甲酸，長(zhǎng)春花堿，長(zhǎng)春新堿，長(zhǎng)春地辛，和長(zhǎng)春瑞濱o在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物和藥物組合物可以與傳統(tǒng)抗腫瘤化合物聯(lián)合給藥，所述傳統(tǒng)抗腫瘤化合物選自表皮生長(zhǎng)因子受體拮抗劑，五硫化二砷，阿霉素，順鉑，卡鉑，西咪替丁，洋紅霉素，氮芥氫氯化物，五甲三聚氰酰胺，塞替派，替尼泊甙，環(huán)磷酰胺，苯丁酸氮芥，去甲氧基竹紅菌甲素A，左旋丙氨酸氮芥，異磷酰胺，曲磷胺，曲奧舒凡，足葉草毒素或者足葉草毒素衍生物，鬼臼乙叉甙磷酸鹽，替尼泊甙，鬼臼乙叉甙，異長(zhǎng)春堿，環(huán)氧長(zhǎng)春堿，長(zhǎng)春地辛，9-氨基喜樹(shù)堿，抗癌妥伊立替康(camptoirinotecan)，克立那托，甲地孕酮，甲氨蝶呤，絲裂霉素C，ecteinascidin743，白消安，卡莫司汀(BCNU)，洛莫司汀(CCNU)，洛伐他汀，l-甲基-4-苯基吡啶鑰離子，司莫司汀，十字孢堿，鏈脲霉素，酞菁，達(dá)卡巴嗪，氨基蝶呤，氨甲蝶呤，曲美沙特，硫鳥(niǎo)嘌呤，巰基嘌呤，氟達(dá)拉濱，噴它斯汀(pentastatin)，克拉曲賓，阿糖胞苷(amC)，泊非霉素，5-氟尿嘧啶，6-巰基嘌呤，阿霉素氫氯化物，甲酰四氫葉酸，霉酚酸，柔紅霉素，去鐵敏，5-氟脫氧尿苷，去氧氟尿苷，雷替曲塞，伊達(dá)比星，表柔比星，吡柔比星，佐柔比星，米托蒽醌，博來(lái)霉素硫酸鹽，放線菌素D,番紅精,沙弗拉霉素(saframycins)，quinocarcins，discodermolides，長(zhǎng)春新堿，長(zhǎng)春花堿，長(zhǎng)春瑞濱酒石酸鹽，維替泊芬，紫杉醇，他莫昔芬，雷洛昔芬，噻唑呋林，硫鳥(niǎo)嘌呤，病毒唑，EICAR，雌氮芥，雌氮芥磷酸鈉，氟他米特，比卡魯胺，布舍瑞林，亮丙瑞林，蝶啶，烯二炔，左旋四咪唑，aflacon，干擾素，白介素，阿地白介素，非格司亭，沙莫司亭，利妥昔單抗，卡介苗，維甲酸，betamethosone，鹽酸吉西他濱，異搏定，VP-16，六甲密胺，毒胡蘿卜內(nèi)酯(thapsigargin)，奧沙利鉑，異丙鉑，四鉑，洛鉑，DCP，PLD-147，JM118，JM216，JM335，沙鉑，紫杉萜，脫氧紫杉醇，TL-139，5'-降-脫水長(zhǎng)春堿(以下5'-降-長(zhǎng)春花堿)，喜樹(shù)堿，依立替康(Camptosar，CPT-ll)，托泊替康(Hycamptin)，BAY38-3441，9-硝基喜樹(shù)堿(Orethecin，盧比替康)，依沙替康(DX-8951)，勒托替康(GI-147211C)，吉馬替康，高喜樹(shù)堿氟替康(diflomotecan)(BN-80915)和9-氨基喜樹(shù)堿(IDEC-13')，SN-38，ST1481，karanitecin(BNP1350)，B引哚咔唑(indolocarbazole)(例如，NB-506)，原小蘗堿，茚托利辛，茚并異喹諾酮(idenoisoquinolones)，苯-吩嗪或者NB-506。在另一個(gè)相關(guān)實(shí)施方案中，本發(fā)明預(yù)期將本發(fā)明實(shí)施的方法與其他抗腫瘤療法例如照射聯(lián)用。此處使用的術(shù)語(yǔ)"照射"是用于包括通過(guò)光子、中子、電子或者其他類(lèi)型的電離輻射治療贅生性細(xì)胞或者相關(guān)細(xì)胞的任意療法。這種放療包括，但不限于，x射線，y照射，或者重離子顆粒，比如CX或者(3粒子。此外，照射可以是放射性的。在患者中照射贅生性細(xì)胞的方法是本領(lǐng)域公知的，包括例如，外粒子束療法和近距放射療法。檢測(cè)癌癥(腫瘤或者腫瘤形成)是否已經(jīng)被治愈的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，包括，例如，腫瘤細(xì)胞數(shù)目減少(例如，細(xì)胞增殖下降或者腫瘤大小減小)。應(yīng)該意識(shí)到本發(fā)明的治療可以是持續(xù)和完全反應(yīng)，或者可以包括部分或者短暫的臨床反應(yīng)。參見(jiàn)實(shí)例，Isselbacher等人(1996)Harrison'sPrinciplesofInternalMedicine13ed.，1814-1882，在此引入作為參考。檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的致敏性或者增加的死亡的試驗(yàn)是本領(lǐng)域公知的，包括，例如，評(píng)定細(xì)胞活力的標(biāo)準(zhǔn)劑量反應(yīng)試驗(yàn)；DNA提取物的瓊脂糖凝膠電泳或者檢測(cè)表示細(xì)胞死亡特征的DNA片段的流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)；檢測(cè)參與凋亡的多肽活性的試驗(yàn)；和檢測(cè)細(xì)胞死亡形態(tài)特征的試驗(yàn)。關(guān)于這些試驗(yàn)的細(xì)節(jié)在此處其他地方描述。其他試驗(yàn)包括，染色質(zhì)試驗(yàn)(例如，計(jì)數(shù)濃縮的核染色質(zhì)的頻率)或者例如在Lowe等人(1993)Cell74:957-697中描述的抗藥性試驗(yàn)，在此引入作為參考。還可參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，821，072，也在此引入作為參考。藥物組合物預(yù)期的治療劑可以進(jìn)行評(píng)價(jià)以便檢測(cè)它們包含在藥物組合物中的適應(yīng)性。這種試劑一個(gè)通用的檢測(cè)方法是療效指數(shù)，這是治療劑量對(duì)有毒劑量的比率。治療劑量(功效)和有毒劑量的閾值可以調(diào)整為適當(dāng)?shù)?例如，治療反應(yīng)或者最小化毒性反應(yīng)的必需量)。例如，治療劑量可以是試劑治療有效量的(相對(duì)于治療一種或多種病癥)，有毒劑量可以是引起死亡的劑量(例如，LD5Q)或者在一定比例受治療者中引起不希望有的效果。優(yōu)選的，試劑的療效指數(shù)至少是2，更優(yōu)選的至少是5，甚至更優(yōu)選的至少是10。評(píng)價(jià)治療劑還可以包括檢測(cè)試劑的藥物動(dòng)力學(xué)，當(dāng)以不同制劑和/或通過(guò)不同途徑給藥時(shí)檢測(cè)其生物利用率和/或吸收。本發(fā)明的化合物可以施用給需要它的個(gè)體。在某些實(shí)施方案中，個(gè)體是哺乳動(dòng)物比如人，或者非人哺乳動(dòng)物。當(dāng)給藥個(gè)體時(shí)，本發(fā)明的化合物可以作為藥物組合物給藥，所述藥物組合物包含，例如，本發(fā)明的化合物和藥學(xué)可接受的載體。藥學(xué)可接受的載體是本領(lǐng)域公知的，包括，例如，水溶液比如水或者生理緩沖鹽水或者其他溶劑，或者媒介例如乙二醇，甘油，油劑比如橄欖油或者可注射的有機(jī)酯。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)這種藥物組合物用于人施用時(shí)，水溶液是無(wú)熱原的，或者基本上無(wú)熱原的。可以選擇賦形劑，例如，以延緩試劑的釋放或者選擇性靶向一種或多種細(xì)胞，組織或者器官。藥學(xué)可接受的載體可以包含生理可接受的試劑，所述試劑用作，例如，穩(wěn)定或者促進(jìn)本發(fā)明化合物的吸收。這種生理可接受的試劑包括，例如，糖類(lèi)，比如葡萄糖，蔗糖或者右旋糖酐，抗氧化劑，比如抗壞血酸或者谷胱甘肽，螯合劑，低分子量蛋白或者其他穩(wěn)定劑或者賦形劑。藥學(xué)可接受的載體的選擇，包括生理可接受的試劑，依賴(lài)于例如組合物的給藥途徑。藥物組合物(制劑)還可以是脂質(zhì)體或者其他聚合物基質(zhì)，這可以整合入例如本發(fā)明的化合物。脂質(zhì)體，例如，由磷脂或者其他脂類(lèi)組成，是無(wú)毒的，生理可接受的和可代謝的載體，可以相對(duì)容易的制造和給藥。包含本發(fā)明化合物的藥物組合物(制劑)可以通過(guò)多種給藥途徑給藥，包括，例如，口服；肌內(nèi)；靜脈內(nèi)；肛門(mén)；陰道；非腸道；鼻；腹膜內(nèi)；皮下；和局部。組合物可以通過(guò)注射或者通過(guò)溫育給藥。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)給藥或者與另一種抗腫瘤治療劑聯(lián)合給藥。此處使用的短語(yǔ)"聯(lián)合給藥"是指聯(lián)用兩種或更多不同治療化合物的任意給藥形式，這樣的話在先前給藥的治療化合物在體內(nèi)仍然有效時(shí)給藥第二種化合物(例如，兩種化合物同時(shí)在患者體內(nèi)起作用，這可以包括兩種化合物的協(xié)同效應(yīng))。例如，不同的治療化合物可以在相同制劑或者在分開(kāi)的制劑中給藥，或者同時(shí)的或者依次的。因此，接受這種治療的個(gè)體可以受益于不同治療化合物的協(xié)同效應(yīng)。預(yù)期本發(fā)明的化合物以治療有效量(劑量)給藥患者(例如哺乳動(dòng)物，優(yōu)選的是人)。"治療有效量"是指化合物的濃度足以得到所需治療效果(例如，病癥的治愈，贅生性細(xì)胞的死亡)。應(yīng)該理解化合物的有效量會(huì)根據(jù)患者的重量，性別，年齡和治療史而變化。其他影響有效量的因素可能包括，但不限于，患者病癥的嚴(yán)重程度，接受治療的疾病，化合物的穩(wěn)定性，和，如果需要，與本發(fā)明的化合物一起給藥的另一種治療劑。通常，對(duì)人類(lèi)患者有效量的范圍從大約0.001mg/kg體重到大約50mg/kg體重。通過(guò)多次試劑給藥可以輸送更多的總劑量。檢測(cè)功效和劑量的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。參見(jiàn)例如，Isselbacher等人(1996)Harrison'sPrinciplesofInternalMedicine13ed.，1814-1882，在此引入作為參考。實(shí)施例現(xiàn)在概述本發(fā)明，參考下列實(shí)施例更容易地理解本發(fā)明，下列實(shí)施例僅僅為了舉例說(shuō)明本發(fā)明的某些方面和實(shí)施方式，不是用于限制本發(fā)明。實(shí)施例12-(1-(4-(2-(4-氯苯氧基)乙?；?哌嗪-1-基)乙基)-7-氯-3-(2-乙氧基苯基)喹唑啉-4(311)-酮的制備根據(jù)反應(yīng)路線所示的反應(yīng)制備2-(l-(4-(2-(4-氯苯氧基)乙?；?哌嗪-l-基)乙基)-7-氯-3-(2-乙氧基苯基)喹唑啉-4(3H)-酮(化合物1)。反應(yīng)路線1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage50</formula>簡(jiǎn)而言之，使用丙酰氯在三乙胺(TEA)和四氫呋喃(THF)中將2-氨基_4_氯苯甲酸?；?，酰化化合物與2-乙氧基苯胺在三氯化磷和甲苯中回流，得到2-乙基-7-氯-3-(2-乙氧基苯基)喹唑啉-4(3H)-酮。2-乙基-7-氯-3-(2-乙氧基苯基)喹唑啉-4(3H)-酮與N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)在四氯化碳中溴化，其產(chǎn)物隨后與哌嗪在THF中反應(yīng)。哌嗪基部分用4-氯苯氧基乙酰氯在THF和TEA中?；玫阶罱K產(chǎn)物。實(shí)施例23-(2-乙氧基苯基)-2-[(六氫-4-甲基-111-1，4-二氮雜卓-1-基)甲基]喹唑啉-4(3H)-酮的制備。根據(jù)反應(yīng)路線2所示的反應(yīng)制備3-(2-乙氧基苯基)-2-[(六氫-4-甲基-lH-l，4-二氮雜卓-l-基)甲基]喹唑啉-4(3H)-酮(化合物10)?；衔飅o<formula>formulaseeoriginaldocumentpage50</formula>反應(yīng)路線2簡(jiǎn)而言之，使用丙酰氯在三乙胺(TEA)和四氫呋喃(THF)中將2-氨基-4-硝基苯甲酸?；；衔锱c2-乙氧基苯胺在三氯化磷(POCl3)和甲苯中回流，得到2-乙基-7-硝基-3-(2-乙氧基苯基)喹唑啉-4(3H)-酮。2-乙基-7-硝基-3-(2-乙氧基苯基)喹唑啉-4(3H)-酮與N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)在四氯化碳中溴化，其產(chǎn)物隨后與N-甲基高哌嗪在THF中反應(yīng)，該反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)歷使用催化量的Pd/碳(10。/。Pd)的氫化條件，得到化合物10。實(shí)施例3化合物1的細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制檢測(cè)化合物1在DMSO中抑制腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞生長(zhǎng)的能力?；衔锿ㄟ^(guò)Sytox初篩進(jìn)行分析，這是一種監(jiān)控作為化合物處理結(jié)果的細(xì)胞幸存-增殖改變的表型試驗(yàn)。它設(shè)計(jì)為鑒定特異改變細(xì)胞生長(zhǎng)潛力的化合物的高通量方法，所述細(xì)胞帶有在癌癥患者中發(fā)現(xiàn)的致病性的突變，而這種突變不影響正常細(xì)胞的生長(zhǎng)。該試驗(yàn)依賴(lài)于一種便宜、簡(jiǎn)單和可靠的膜不可滲透的熒光染料(Sytox，來(lái)自MolecularProbes)的讀數(shù)，所述熒光染料結(jié)合核酸。在健康細(xì)胞中，沒(méi)有檢測(cè)到信號(hào)，因?yàn)榧?xì)胞膜是完整的，染料不會(huì)進(jìn)入。但是，如果細(xì)胞膜是作為凋亡或者壞死的結(jié)果而受損，將檢測(cè)到與受到類(lèi)似影響細(xì)胞的數(shù)目成比例的熒光信號(hào)。利用兩步讀數(shù)(在去污劑存在條件下最終讀數(shù)，以標(biāo)記所有細(xì)胞)，該試驗(yàn)可以鑒定產(chǎn)生白細(xì)胞郁積、細(xì)胞毒性和/或致有絲分裂的化合物。第一次讀數(shù)或者"死細(xì)胞"讀數(shù)，通過(guò)顯示試驗(yàn)時(shí)培養(yǎng)物中死亡或者瀕死細(xì)胞的數(shù)目來(lái)評(píng)估給定化合物的毒性。第二次讀數(shù)或者"總細(xì)胞"讀數(shù)，獲得細(xì)胞毒性在減小細(xì)胞群大小方面的累積效應(yīng)，以及無(wú)毒性時(shí)待測(cè)化合物對(duì)待測(cè)細(xì)胞群的任意細(xì)胞的抑制細(xì)胞或者抗增殖效果。細(xì)胞種于96孔板過(guò)夜，在未處理情況下種植密度允許在72小時(shí)后孔中95%融合。隨后幾天，細(xì)胞接受系列稀釋的待測(cè)化合物處理48小時(shí)。在這段溫育期后，按廠商推薦濃度添加Sytox試劑到培養(yǎng)物，讀取死細(xì)胞熒光讀數(shù)。在完成這些測(cè)量后，添加去污劑皂角苷到培養(yǎng)物各孔對(duì)膜進(jìn)行透化處理，以允許Sytox試劑對(duì)進(jìn)入每個(gè)細(xì)胞，從而便于測(cè)量留在培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)。對(duì)于數(shù)據(jù)評(píng)價(jià)，在表現(xiàn)細(xì)胞毒性和抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的化合物之間沒(méi)有差異。該試驗(yàn)結(jié)果如圖2所示?；衔?抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的IQo為約IO岸。化合物2和3，如圖3和4所示，抑制HT-1080細(xì)胞增殖的IC5()值分別為lOOnM和200nM。實(shí)施例4HT-1080細(xì)胞生長(zhǎng)抑制在DMSO中測(cè)量了本發(fā)明的多種化合物抑制HT-1080細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。在這些實(shí)驗(yàn)中使用的HT-1080細(xì)胞系來(lái)自纖維肉瘤并帶有在密碼子12的N-ms基因的激活突變的患者。使用實(shí)施例3所示的試驗(yàn)試驗(yàn)的化合物。該試驗(yàn)的結(jié)果如下表所示，其中活性相當(dāng)于以下范圍A-低于10nM，B-10-100nM，C-100-1000nM，D-1000-2000nM，E-高于2000nM。<table>complextableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table>實(shí)施例5腫瘤異種移植物的治療使用相似的方法(如下所述)在每天靜脈內(nèi)給藥后檢查化合物10和25抑制HT-1080異種移植物生長(zhǎng)的能力。化合物10和25連續(xù)5天給藥，并評(píng)價(jià)它們各自的IVMTD劑量。概述在異種移植物研究中使用的HT-1080細(xì)胞系來(lái)自患纖維肉瘤并帶有在密碼子12的N-ras基因的激活突變的患者?；衔镆种艸T-1080瘤生長(zhǎng)。當(dāng)化合物以其各自的MTD給藥時(shí)觀察到穩(wěn)固的腫瘤消退。沒(méi)有觀察到不利的臨床跡象。小鼠品系裸Balb/c(Nu/Nu品系，CharlesRiverLaboratories)，雌性，5-6周，老齡(平均體重22g)。實(shí)驗(yàn)組A:未治療對(duì)照，11=6B:化合物10的媒介物對(duì)照，QDx5天，IV，n=6D:化合物10@25mg/Kg(MTD)，QDx5天，IV,n=6E:化合物10@12.5mg/Kg(l/2MTD),QDx5天，IV，n=6治療計(jì)劃當(dāng)平均腫瘤體積達(dá)到200mi^并且腫瘤開(kāi)始活性生長(zhǎng)時(shí)開(kāi)始(實(shí)驗(yàn)的第一天)，持續(xù)至第5天，每天給藥每只動(dòng)物單一IP注射上述治療中的一種，總共5次治療。腫瘤移植和分期50只小鼠每只都移植1X107個(gè)HT-1080細(xì)胞，通過(guò)在右后肢側(cè)面SC注射O.lcc接種物。使用26GX3/8"針號(hào)。使用HT-1080細(xì)胞(ATCC分離，第6次傳代凍存物)制備腫瘤細(xì)胞接種物，所述HT-1080細(xì)胞在DMEM[Gibco，No.l0569-010]+10%FCS[Gibco，No.F-2442]中培養(yǎng)。在細(xì)胞收獲時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)到95-100。^的融合度。HT-1080接種物在無(wú)菌的DMEM培養(yǎng)基+10。/。FCS中制備，密度1.0Xl()8細(xì)胞/ml。在腫瘤移植后+10天，動(dòng)物分組匹配為治療和對(duì)照組，每組由6只小鼠組成?？偣?4個(gè)非正常值從實(shí)驗(yàn)中剔除，因?yàn)槟[瘤太小或者太大。這被認(rèn)為是實(shí)驗(yàn)第1天，治療從這天開(kāi)始。化合物10儲(chǔ)液的制備在每天早上給藥化合物，制備新鮮的化合物10的儲(chǔ)液，首先將20mg的化合物10溶解在由400mMHC1在水中組成的溶劑中得到0.2ml的最終體積，達(dá)到20mg/ml的濃度。然后將得到的100mg/ml溶液以1:5稀釋到20mg/ml的濃度，使用的稀釋劑由1.1%(78mM)磷酸氫二鈉和3%(90mM)蔗糖組成。這通過(guò)將0.2毫升體積的100mg/ml溶液與0.8ml的稀釋劑混合進(jìn)行。得到的溶液具有的pH=6.8和304mOsm。然后對(duì)該溶液進(jìn)行過(guò)濾滅菌(0.45pm)，并用于最終的注射溶液的制備(參見(jiàn)下文)?；衔颕O注射溶液的制備在給藥化合物的5天的每一天，制備注射溶液，通過(guò)使用5%的注射用葡萄糖(Baxter，No.2B0064，NDC0338-0017-04)稀釋20mg/ml儲(chǔ)液，如下表所示(兩種注射溶液的濃度基于22.0克的平均體重)<table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>化合物IO媒介物對(duì)照制備媒介物對(duì)照首先將0.1ml的400mMHC1與0.4ml的稀釋劑混合，所述稀釋劑由1.1%(78mM)的磷酸氫二鈉和3%(90mM)蔗糖組成。然后將得到的溶液進(jìn)一步稀釋?zhuān)?:7.27，通過(guò)添加3.135ml的5%的注射用葡萄糖(Baxter，No.2B0064,NDC0338-0017-04)進(jìn)行稀釋。然后使用5MNaOH調(diào)節(jié)溶液的pH到7.4。最終溶液相當(dāng)于媒介物存在于準(zhǔn)備用于D組的注射溶液中，而沒(méi)有化合物存在。媒介物對(duì)照在給藥之前進(jìn)行過(guò)濾滅菌。劑量概述(基于平均體重-22.0克.V.<table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>腫瘤測(cè)量:從第1天開(kāi)始，每隔一天稱(chēng)重全部動(dòng)物，測(cè)量腫瘤尺寸(長(zhǎng)度(L)和寬度(W))。使用下列公式將腫瘤測(cè)量結(jié)果轉(zhuǎn)換為腫瘤體積(mm3):腫瘤體積=LXWXW/2。計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)各實(shí)驗(yàn)組獲得的腫瘤體積的平均值，對(duì)時(shí)間作圖。差異表示為平均值標(biāo)準(zhǔn)差(士SEM)。這些實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如圖1-3中所示。異種移植物研究顯示選擇的化合物能夠引導(dǎo)穩(wěn)固的HT-1080腫瘤消退。在劑量給藥Prolexys化合物的動(dòng)物中沒(méi)有觀察到不利的臨床癥狀。因此，這些化合物表現(xiàn)出腫瘤選擇性的細(xì)胞死亡。實(shí)施例6鑒別在特定的癌癥相關(guān)等位基因存在條件下具有增強(qiáng)效力或者活性的化合物此處描述的工作是用于鑒定在RASV^存在條件下具有增強(qiáng)的效力或者活性的化合物。盡管此處描述的工作利用RAS^M乍為轉(zhuǎn)化基因，其它的研究可以利用多種癌癥結(jié)合等位基因，利用這種方法以便確定參與許多癌基因和腫瘤抑制物的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)。初篩檢測(cè)測(cè)定用每種化合物治療致瘤細(xì)胞的效果，所述化合物在4ug/mL濃度作用48小時(shí)，對(duì)應(yīng)于分子量400的化合物10uM。使用染料鈣黃綠素乙酰甲酯(鈣黃綠素AM)檢測(cè)細(xì)胞活力(Wang等人，1993，Hum.Immunol.337,264-270)，這是一種能夠自由擴(kuò)散進(jìn)細(xì)胞的非熒光化合物。在活細(xì)胞中，鈣黃綠素AM被胞內(nèi)酯酶切割，形成陰離子熒光衍生物鈣黃綠素，它不能擴(kuò)散出活細(xì)胞。因此，當(dāng)與鈣黃綠素AM孵育時(shí)，活細(xì)胞顯示綠色熒光，而死細(xì)胞不顯示。當(dāng)與Sytox孵育時(shí)，活細(xì)胞和死細(xì)胞顯示熒光。誘導(dǎo)的熒光與在對(duì)照細(xì)胞中觀察到的熒光不同的化合物隨后在對(duì)照細(xì)胞和致癌細(xì)胞中的系列稀釋物中進(jìn)行檢測(cè)，以鑒定顯示合成致死性的化合物，這種化合物在致瘤細(xì)胞中是致死性的，但在同源原代細(xì)胞中不是。實(shí)施例7化合物的結(jié)合伴侶的鑒定和表征用Pull-down試驗(yàn)鑒定細(xì)胞內(nèi)的本發(fā)明的化合物的結(jié)合伴侶，所述Pull-down試驗(yàn)使用固定的本發(fā)明的化合物和細(xì)胞裂解產(chǎn)物。pull-down實(shí)驗(yàn)用全細(xì)胞裂解產(chǎn)物進(jìn)行。在這些實(shí)驗(yàn)中，本發(fā)明的化合物被固定到Affigel10，在標(biāo)準(zhǔn)pull-down條件下與裂解產(chǎn)物孵育。洗滌珠子，然后用100UMerastin或本發(fā)明的化合物或0.8%十二垸酰肌氨酸(sarkosyl)洗脫。洗脫液用于質(zhì)譜分析。圖4表示使用BJELR全細(xì)胞裂解產(chǎn)物和化合物(4)-(9)的Pull-down試驗(yàn)的結(jié)果。引用參考此處提及的全部出版物和專(zhuān)利在此完整引入作為參考，就像各個(gè)獨(dú)立出版物或者專(zhuān)利是特異和單獨(dú)引入作為參考。在沖突情況下，將以本申請(qǐng)，包括此處的任何定義，為準(zhǔn)。等同物當(dāng)討論本發(fā)明的特定實(shí)施方案時(shí)，上述說(shuō)明書(shū)是說(shuō)明性和非限制的。在獲知該說(shuō)明書(shū)和下列權(quán)利要求時(shí)本發(fā)明的許多變化對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的。本發(fā)明的全部范圍應(yīng)該參考權(quán)利要求和等同物的全部范圍以及說(shuō)明書(shū)和這種變化來(lái)決定。權(quán)利要求1.由結(jié)構(gòu)式(I)表示的化合物或其可藥用鹽，其中Ra為鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基-O-，被取代或未被取代的烷基-O-，被取代或未被取代的烯基-O-或被取代或未被取代的炔基-O-，其中烷基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)n間斷；每個(gè)R2獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR’，-CON(R)2，-NRC(O)R，-SO2N(R)2，-N(R)2，-NO2，-OH和-OR’；每個(gè)R3獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR’，-CON(R)2，-NRC(O)R，-SO2N(R)2，-N(R)2，-NO2，-OH和-OR’；R4和R5獨(dú)立地選自-H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)和被取代或未被取代的芳基，其中烷基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)n間斷；或者R4和R5一起形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；V為-NH-L-A-Q或環(huán)C為被取代或未被取代的雜環(huán)的芳香或非芳香環(huán)；A為NR或O；或者A為共價(jià)鍵；L為被取代或未被取代的烴基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S的雜原子間斷；Q選自-R，-C(O)R’，-C(O)N(R)2，-C(O)OR’和-S(O)2R’；每個(gè)R獨(dú)立地為-H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)；每個(gè)R’獨(dú)立地為被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)或被取代或未被取代的芳基；j為0-4的整數(shù)；k為0-4的整數(shù)，條件是j和k至少之一是1-4的整數(shù)；和每個(gè)n獨(dú)立地為0、1或2。2.權(quán)利要求1的化合物，其中V是3.權(quán)利要求2的化合物，其中V是:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>4.權(quán)利要求3的化合物，其中Q是-C(O)R'或-R。5.權(quán)利要求4的化合物，其中Q是-H、甲基或乙基。6.權(quán)利要求2的化合物，其中A是共價(jià)鍵或NR。7.權(quán)利要求2的化合物，其中R4和R5是-H或被取代或未被取代的垸基。8.權(quán)利要求7的化合物，其中R4和Rs是-H或未被取代的Q-C4院基。9.權(quán)利要求2的化合物，其中Ra是被取代或未被取代的烷基-O-基。10.權(quán)利要求9的化合物，其中Ra是未被取代的CrC4烷基-0-基。11.權(quán)利要求1的化合物，其中j是1-4的整數(shù)。12.權(quán)利要求ll的化合物，其中每個(gè)R2獨(dú)立地選自-NRC(O)R，-NR2，卣素，極性取代的垸基，極性取代的碳環(huán)芳基，被取代或未被取代的雜芳基和被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)。13.權(quán)利要求ll的化合物，其中所述化合物由結(jié)構(gòu)式(Ia)表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>14.權(quán)利要求l的化合物，其中k是l-4的整數(shù)。15.權(quán)利要求14的化合物，其中每個(gè)R3獨(dú)立地選自極性取代的垸基，極性取代的碳環(huán)芳基，被取代或未被取代的雜芳基和被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)。16.權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物由結(jié)構(gòu)式(Ib)表示v(Ib)。17.權(quán)利要求1的化合物，其中j是1-4的整數(shù)并且k是1-4的整數(shù)。18.由結(jié)構(gòu)式(n)表示的化合物:v(II)'或其可藥用鹽，其中&為被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基或被取代或未被取代的炔基，其各自任選地被NR、O或S(O)n間斷；每個(gè)R2獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-S02N(R)2，-OH和曙OR，；每個(gè)R3獨(dú)立地選自鹵素，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)，-CN，-COOR'，-CON(R)2，-S02N(R)2，-OH和-OR，；R4和R5獨(dú)立地選自-H，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)和被取代或未被取代的芳基，其中垸基，烯基和炔基任選地被NR、O或S(O)n間斷；或者R4和R5—起形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；V為-NH-L-A-Q或環(huán)C為被取代或未被取代的雜環(huán)的芳香或非芳香環(huán)；A為NR或O;或者A為共價(jià)鍵；L為被取代或未被取代的烴基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S的雜原子間斷；Q選自-R，-C(0)R，，-C(0)N(R)2，-C(0)OR，-S(0)2R，；每個(gè)R獨(dú)立地為-H，被取代或未被取代的垸基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)；每個(gè)R'獨(dú)立地為被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烯基，被取代或未被取代的炔基，被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)或被取代或未被取代的芳基；j為0-4的整數(shù)；k為0-4的整數(shù)，條件是j和k至少之一是l-4的整數(shù)；和每個(gè)n獨(dú)立地為0、1或2。619.權(quán)利要求18的化合物，其中V是:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>20.權(quán)利要求19的化合物，其中V是:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>21.權(quán)利要求20的化合物，其中Q是-R。22.權(quán)利要求21的化合物，其中Q是-H，甲基或乙基。23.權(quán)利要求19的化合物，其中A是共價(jià)鍵或NR。24.權(quán)利要求23的化合物，其中R4和Rs是-H或被取代或未被取代的垸基。25.權(quán)利要求24的化合物，其中&和R5是-H或未被取代的CrC4焼基o26.權(quán)利要求18的化合物，其中R,是被取代或未被取代的垸基。27.權(quán)利要求27化合物，其中R,是未被取代的d-C4烷基。28.權(quán)利要求18的化合物，其中j是l-4的整數(shù)。29.權(quán)利要求28的化合物，其中每個(gè)R2獨(dú)立地選自-NRC(0)R，-NR2，鹵素，極性取代的垸基，極性取代的碳環(huán)芳基，被取代或未被取代的雜芳基和被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)。30.權(quán)利要求18的化合物，其中k是l-4的整數(shù)。31.權(quán)利要求30的化合物，其中每個(gè)R2獨(dú)立地選自極性取代的烷基，極性取代的碳環(huán)芳基，被取代或未被取代的雜芳基和被取代或未被取代的非芳香雜環(huán)。32.權(quán)利要求18的化合物，其中j是1-4的整數(shù)并且k是1-4的整數(shù)。33.藥物組合物，包括權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)的化合物和可藥用載體。34.治療哺乳動(dòng)物的病況的方法，包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物給用治療有效量的權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)的化合物。35.權(quán)利要求34的方法，其中所述細(xì)胞具有可測(cè)量的Ras信號(hào)活性。36.權(quán)利要求34的方法，其中所述病況是癌。37.權(quán)利要求34的方法，還包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物聯(lián)合給藥通過(guò)細(xì)胞凋亡機(jī)理殺傷細(xì)胞的試劑。38.權(quán)利要求37的方法，其中所述試劑是化療劑。39.權(quán)利要求38的方法，其中所述化療劑選自表皮生長(zhǎng)因子受體拮抗劑，五硫化二砷，阿霉素，順鉑，卡鉑，西咪替丁，洋紅霉素，氮芥氫氯化物，五甲三聚氰酰胺，塞替派，替尼泊甙，環(huán)磷酰胺，苯丁酸氮芥，去甲氧基竹紅菌甲素A，左旋丙氨酸氮芥，異磷酰胺，曲磷胺，曲奧舒凡，足葉草毒素或者足葉草毒素衍生物，鬼臼乙叉甙磷酸鹽，替尼泊甙，鬼臼乙叉甙，異長(zhǎng)春堿，環(huán)氧長(zhǎng)春堿，長(zhǎng)春地辛，9-氨基喜樹(shù)堿，抗癌妥伊立替康，克立那托，甲地孕酮，甲氨蝶呤，絲裂霉素C，ecteinascidin743，白消安，卡莫司汀，洛莫司汀，洛伐他汀，1_甲基_4_苯基吡啶総離子，司莫司汀，十字孢堿，鏈脲霉素，酞菁，達(dá)卡巴嗪，氨基蝶呤，氨甲蝶呤，曲美沙特，硫鳥(niǎo)嘌呤，巰基嘌呤，氟達(dá)拉濱，噴它斯汀，克拉曲賓，阿糖胞苷，泊非霉素，5-氟尿嘧啶，6-巰基嘌呤，阿霉素氫氯化物，甲酰四氫葉酸，霉酚酸，柔紅霉素，去鐵敏，5-氟脫氧尿苷，去氧氟尿苷，雷替曲塞，伊達(dá)比星，表柔比星，吡柔比星，佐柔比星，米托蒽醌，博來(lái)霉素硫酸鹽，放線菌素D,番紅精，沙弗拉霉素，quinocarcins，discodermolides，長(zhǎng)春新堿，長(zhǎng)春花堿，長(zhǎng)春瑞濱酒石酸鹽，維替泊芬，紫杉醇，他莫昔芬，雷洛昔芬，噻唑呋林，硫鳥(niǎo)嘌呤，病毒唑，EICAR，雌氮芥，雌氮芥磷酸鈉，氟他米特，比卡魯胺，布舍瑞林，亮丙瑞林，蝶啶，烯二炔，左旋四咪唑，aflacon，干擾素，白介素，阿地白介素，非格司亭，沙莫司亭，利妥昔單抗，卡介苗，維甲酸，betamethosone，鹽酸吉西他濱，異搏定，VP-16,六甲密胺，毒胡蘿卜內(nèi)酯，奧沙利鉑，異丙鉑，四鉑，洛鉬，DCP，PLD-147，JM118，JM216，JM335，沙鉑，紫杉萜，脫氧紫杉醇，TL-139，5'-降-脫水長(zhǎng)春堿，喜樹(shù)堿，依立替康，托泊替康，BAY38-3441，9-硝基喜樹(shù)堿，依沙替康，勒托替康，吉馬替康，高喜樹(shù)堿氟替康和9-氨基喜樹(shù)堿，SN-38，ST固，karanitedn，吲哚咔唑，原小蘗堿，茚托利辛，茚并異喹諾酮，苯-吩嗪和NB-506。40.殺傷細(xì)胞的方法，包括對(duì)細(xì)胞給用有效量的權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)的化合物和增加細(xì)胞中VDAC豐度的試劑。41.權(quán)利要求40的方法，其中所述細(xì)胞是癌細(xì)胞。42.殺傷細(xì)胞的方法，包括對(duì)細(xì)胞給用有效量的權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)的化合物和降低細(xì)胞中VDAC豐度的試劑。43.促進(jìn)細(xì)胞死亡或抑制細(xì)胞增殖的方法，包括對(duì)細(xì)胞給用有效量的權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)的化合物。44.降低腫瘤生長(zhǎng)率的方法，包括使腫瘤接觸有效量的權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)的化合物。45.增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療劑的敏感性的方法，包括使腫瘤細(xì)胞接觸有效量的權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)的化合物。46.包裝的藥物，其包括(i)治療有效量的權(quán)利要求l-32中任一項(xiàng)的化合物；和(ii)用于治療癌癥患者的試劑給藥的說(shuō)明書(shū)、標(biāo)簽或二者。全文摘要本發(fā)明提供了由結(jié)構(gòu)式(I)表示的化合物，該化合物可用于例如有效的殺傷或降低癌細(xì)胞增殖速率，諸如在癌患者中。除了化合物自身之外，本發(fā)明提供了該化合物的藥物組合物和使用該化合物的治療方法。文檔編號(hào)A61P35/00GK101374819SQ200680052925公開(kāi)日2009年2月25日申請(qǐng)日期2006年12月22日優(yōu)先權(quán)日2005年12月22日發(fā)明者保羅·B·羅賓斯,拉杰·葛佩爾·文卡特,羅伯特·塞利亞,蘇迪爾·R·薩哈斯拉布德,邁克·皮爾斯,齊龍武申請(qǐng)人:普羅歷克西醫(yī)藥品公司