專利名稱：使用具有兩個(gè)金( i )原子的癌癥治療，所述兩個(gè)金( i )原子的每個(gè)在連接所述兩個(gè)金 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及癌癥的治療，更加具體但并非排它性地，涉及對基于鉑的化療劑具有抗性的癌癥的治療。
鉑藥物(例如順鉑(cisplatinum)和卡鉑(carboplatinum)，也分別叫作cisplatin和carboplatin)是廣泛使用的和臨床上具有活性的抗腫瘤劑。它們的活性是基于這樣的能力，即交聯(lián)DNA以便抑制DNA復(fù)制或轉(zhuǎn)錄，由此阻礙細(xì)胞增殖和延緩腫瘤生長。
對鉑藥物活性一個(gè)限制是抗性形成，導(dǎo)致抗腫瘤活性減弱或喪失。引發(fā)對鉑藥劑抗性的生化和藥理學(xué)改變是復(fù)雜的并且許多已經(jīng)得以描述，包括谷胱甘肽增多、改變的DNA修復(fù)過程以及金屬硫蛋白1。涉及到的一種DNA修復(fù)方法是DNA錯(cuò)配修復(fù)的喪失或減弱2。開發(fā)能夠克服或避免這種抗性的新療法將對于多種人癌癥，包括卵巢癌和肺癌的治療具有意義。
基于金的化合物在癌癥化療的使用是基于一系列基本原理之上的在基于正方平面形Pt(II)和Au(III)之間的類似性；與Au(I)免疫調(diào)節(jié)作用的類似；以及Au(I)和Au(III)二者與已知抗腫瘤劑的絡(luò)合作用3?；贏u(I)的化合物在癌癥治療中的應(yīng)用集中于含磷化合物、非手性或手性的基于硫的配體組，或集中于生物學(xué)相關(guān)配體4。由于Au(III)系統(tǒng)在結(jié)構(gòu)和電子相似性上類似于已知的基于Pt(II)的系統(tǒng)如順鉑和卡鉑，到目前為止含有有機(jī)金屬金的絡(luò)合物的使用集中在Au(III)系統(tǒng)的應(yīng)用上4.5。
按照本發(fā)明的第一方面，提供了治療癌癥的藥物組合物以及藥用的賦形劑，所述藥物組合物包含有效量的具有兩個(gè)金(I)原子的化合物，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都在連接兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接(covalent link)中共價(jià)鍵合到碳原子上。
本發(fā)明的第二方面提供一種化合物用作化療劑，其具有兩個(gè)金(I)原子，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都在連接兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合到碳原子上。
本發(fā)明的第三方面提供一種化合物在制備用來治療癌癥的藥物中的應(yīng)用，所述化合物具有兩個(gè)金(I)原子，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都在連接兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合到碳原子上。
本發(fā)明的第四方面提供一種治療人或動物患者體內(nèi)癌癥的方法，其包括向所述患者施用治療有效量的化合物，所述化合物具有兩個(gè)金(I)原子，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都在連接兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合到碳原子上。
本發(fā)明是基于這樣的觀察，即包含兩個(gè)金(I)原子的化合物在細(xì)胞毒性研究和DNA交聯(lián)測定中展示了出人意料的高度潛力，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都在連接兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合到碳原子上，這表明包含這些化合物的藥物組合物應(yīng)當(dāng)在癌癥的治療中顯示功效。盡管不希望被任何特定理論所限制，提出高度細(xì)胞毒性和交聯(lián)行為可能與在本發(fā)明化合物中提供兩個(gè)金(I)原子相關(guān)，所述兩個(gè)金(I)原子促進(jìn)DNA交聯(lián)。進(jìn)一步假定這種作用可以由金(I)-碳共價(jià)鍵相對高度穩(wěn)定性增強(qiáng)，所述共價(jià)鍵是至少部分地作為金(I)和碳電負(fù)性的相似性的結(jié)果而產(chǎn)生的。然而，這種解釋不應(yīng)被視作以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
已觀察到對于對鉑藥物敏感的細(xì)胞系以及對鉑藥物具有抗性的細(xì)胞系來說，形成本發(fā)明的部分的化合物比鉑藥物有效得多。所以本發(fā)明提供與鉑藥物相比在癌癥治療上有可能展示顯著提高的功效的化療劑。
另外，本發(fā)明的化合物在順鉑或卡鉑抗性的細(xì)胞系中顯示特別高的效能。所以本發(fā)明提供這樣的化療劑，其應(yīng)當(dāng)在治療癌癥中特別有效，所述癌癥對于用鉑藥物進(jìn)行的治療不再有反應(yīng)。
所以本發(fā)明代表了癌癥治療的重要進(jìn)步，特別是在腫瘤細(xì)胞已經(jīng)發(fā)展出對于鉑藥物具有抗性的情形中。
優(yōu)選地本發(fā)明中所用的化療劑(即具有兩個(gè)金(I)原子的化合物，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都共價(jià)鍵合到碳原子上)具有共價(jià)鍵合到第一碳原子上的第一金(I)原子和共價(jià)鍵合到第二碳原子上的第二金(I)原子。所述化合物優(yōu)選包含取代或未取代的芳香基作為共價(jià)連接(covalent link)的部分。
優(yōu)選所述第一碳原子是取代或未取代的芳香基的部分，即所述第一碳原子優(yōu)選地是形成部分取代或未取代的芳香基的環(huán)碳原子。所述取代或未取代的芳香基可以是取代或未取代的苯基基團(tuán)。
所述第二碳原子可以是取代或未取代的烷基、烯基、炔基、芳基或芳香基的部分。優(yōu)選地芳香基是取代或未取代的苯基，在所述芳香基中第二碳原子是一部分。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物結(jié)合由式1所表示的部分Au1-C1-Zn-C2-Au2式1其中Au1是第一金(I)原子；Au2是第二金(I)原子；C1是第一碳原子；C2是第二碳原子；Z是連接基團(tuán)；而n是0或1，即可以或不可以在第一和第二碳原子之間提供連接基團(tuán)。
在本發(fā)明的又一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述化療劑結(jié)合連接到所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)上的配體，所述配體的每個(gè)都選自由PR3，P(OR)3，CNR，NCR， N4C6H12，[N4C6H12-N-CH3]+，PN3C6H12，以及P[N3C6H12-N-CH3]+組成的組，其中R是取代或未取代的烴基部分而 選自由H，Me，SO2-，PO3-，烷基和芳基組成的組，并且在任何一個(gè)配體中的每個(gè) 是相同或不同的。優(yōu)選地R是取代或未取代的烷基、烯基、炔基、芳基或芳香基，并且在任何一個(gè)配體中的每個(gè)R是相同或不同的。而且，R可以選自由甲基、乙基、丙基、丁基和苯基組成的組。在本發(fā)明的特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述配體是PPh3。
本發(fā)明的藥物組合物的“有效量”是這樣一種量，即，當(dāng)給藥于患者時(shí)，改善待治療的特定疾病或狀況的癥狀。有效量的本發(fā)明的組合物可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過向患者給藥一定量的組合物并且觀察結(jié)果來進(jìn)行確定。此外，本領(lǐng)域那些技術(shù)人員熟知鑒定具有特定疾病或狀況的患者的并且能夠容易鑒定患有這些疾病或狀況的患者。
本發(fā)明的組合物可以通過任何對于化療劑常規(guī)采用的途徑進(jìn)行給藥。
本發(fā)明的組合物可以單獨(dú)或者作為組合物的部分而進(jìn)行給藥，所述組合物含有其它組分如賦形劑、稀釋劑和載體，它們?nèi)渴潜绢I(lǐng)域眾所周知的?？梢詫⑺鼋M合物以口服、直腸的、腸胃外的(靜脈內(nèi)，通過肌內(nèi)地或皮下地)，intracisternally，陰道內(nèi)，腹膜內(nèi)(其可以特別適合于治療卵巢癌)，鞘內(nèi)，囊內(nèi)，局部(粉末，軟膏劑或滴劑)的方式，或作為頰含或鼻腔噴霧劑施用給人和動物。
適合于腸胃外注射的組合物可以包括生理可接受的無菌水性或非水性溶液，分散體系，混懸液或乳劑，和用于重構(gòu)成無菌可注射溶液或分散體系的無菌粉末。適合的水性和非水性載體，稀釋劑，溶劑或賦形劑的實(shí)例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)，其適合的混合物，植物油(諸如橄欖油)和可注射的有機(jī)酯諸如油酸乙酯。可以，例如通過使用包衣諸如卵磷脂，通過在分散體系的情形中維持需要的顆粒大小和通過使用表面活性劑來維持適當(dāng)?shù)牧鲃有浴?br> 這些組合物還可以包含佐劑諸如防腐劑，濕潤劑，乳化劑和分散劑。預(yù)防微生物的作用可以通過各種抗細(xì)菌和抗真菌劑，例如parbens、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等來確保。包括等滲劑，例如糖、氯化鈉等也可以是理想的。通過使用延緩吸收劑，例如單硬脂酸鋁和明膠可以引起可注射藥物形式的延長的吸收。
用于口服施用的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉末和顆粒劑。在這些固體劑型中，所述活性劑與至少一種常用惰性賦形劑(或載體)諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣或(a)填充劑或補(bǔ)充劑，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和硅酸；(b)粘合劑，至于實(shí)例，羧甲基纖維素、alignates、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠；(c)濕潤劑，至于實(shí)例甘油；(d)崩解劑，至于實(shí)例，瓊脂，碳酸鈣，馬鈴薯或木薯淀粉，海藻酸，某些絡(luò)合硅酸鹽和碳酸鈉；(e)溶液阻滯劑，至于實(shí)例，石蠟；(f)吸收加速劑，至于實(shí)例季銨絡(luò)合物；(g)濕潤劑，至于實(shí)例，乙酰醇和甘油單硬脂酰酯；(h)吸收劑，至于實(shí)例，白陶土和膨潤土；和(i)潤滑劑，至于實(shí)例，滑石，硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，固體聚乙二醇，月桂硫酸鈉，或其混合物混合。在膠囊、片劑和丸劑的情形中，所述劑型還可以包含緩沖劑。
使用這樣的賦形劑如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等，還可以將類似類型的固體組合物用作以軟和硬填充的明膠膠囊形式存在的填充劑。
可以與包衣和殼來制備固體劑型諸如片劑、膠囊、丸劑和顆粒劑，所述包衣和殼諸如腸包衣和其它本領(lǐng)域眾所周知的。它們可以包含鎮(zhèn)靜劑(pacifying agents)并且還可以是這樣的組合物，從而使它們以延緩的方式來在腸道的某一部分進(jìn)行釋放活性劑或試劑。可以使用的包埋組合物的實(shí)例是聚合物質(zhì)和蠟。所述活性劑還可以以微囊形式存在，如果適合，具有一種或多種上述賦形劑。用于口服施用的液體劑型包括藥用乳劑，溶液，混懸液，糖漿和酏劑。除了活性劑外，液體劑型可以包含常用在本領(lǐng)域中的惰性稀釋劑，諸如水或其它溶劑，增溶劑和乳化劑，至于實(shí)例乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1.3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油，特別地，棉籽油、落花生油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇和山梨坦的脂肪酸酯或這些物質(zhì)的混合物等。
除了這些惰性稀釋劑之外，所述組合物還可以包括佐劑，諸如濕潤劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、芳香劑和香味劑。
除了活性劑之外，混懸液可以包含懸浮劑，至于實(shí)例，乙氧基化的異硬脂醇，聚氧乙烯山梨醇和山梨糖醇酐酯，微晶纖維素，偏氫氧化鋁(aluminium metahydroxide)，膨潤土，瓊脂和黃芪膠，或這些物質(zhì)的混合物等。
用于直腸施用的組合物優(yōu)選地是這樣的栓劑，其可以通過將本發(fā)明的組合物與適合的非刺激性賦形劑或載體諸如可可脂，聚乙二醇或栓劑蠟混合進(jìn)行制備，所述賦形劑或載體在一般溫度下是固體，但是在體溫是液體，因此，在直腸或陰道腔融化并釋放活性成分。
用于本發(fā)明組合物的局部施用的劑型包括軟膏劑，粉末，噴霧劑和吸入劑。在無菌條件下，將所述活性劑與生理可接受的載體和根據(jù)可能的需要，任何防腐劑，緩沖劑，或推進(jìn)劑混合。意欲眼藥制劑、眼膏劑、粉末和溶液也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的活性化合物可以以約0.1到約1,000mg/日的范圍的劑量水平施用給患者。對于具有約70千克體重的正常成年人而言，約0.01到約7000mg/千克體重/日范圍的劑量是充足的。然而，所用的具體劑量可以變化。例如，所述劑量可以取決于許多因素，所述因素包括患者的要求，被治療的疾病的嚴(yán)重性，和所用的組合物的藥學(xué)活性。對于具體患者的最優(yōu)劑量的確定對于本領(lǐng)域那些技術(shù)人員而言是眾所周知的。在靜脈內(nèi)施用的情形中，可以將化療劑給藥于患者多到12次，其中間隔為在每次治療之間多到約4周。在該情形中，可以在相對較短的時(shí)間周期內(nèi)，例如幾分鐘，或在較長的時(shí)間周期諸如介于約30分鐘和數(shù)小時(shí)內(nèi)，通過以靜脈內(nèi)輸注進(jìn)行的滴注將靜脈內(nèi)施用注射到靜脈中。備選地，通過在較長時(shí)間周期內(nèi)，例如從數(shù)天到多周或多月，通過使用經(jīng)過中心管的輸注泵來以持續(xù)輸注(也稱作延長的靜脈輸注或流動輸注)靜脈內(nèi)施用所述藥劑。
此外，本發(fā)明的組合物可以以未溶劑化形式和具有藥用溶劑諸如水、乙醇等的溶劑化形式存在。通常，出于本發(fā)明的目的，將溶劑化形式考慮為等價(jià)于未溶劑化的形式。
本發(fā)明的組合物可以與另外的治療劑共同施用。這種治療可以包括，但不限于，化療劑。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物和共同施用的治療劑彼此聯(lián)合工作以產(chǎn)生更持續(xù)的效果。這兩種治療劑可以在一種藥用載體中或分別地進(jìn)行施用。
化療劑可以作為外科手術(shù)或放射性治療的佐劑來進(jìn)行施用于患者。
本發(fā)明的第一類優(yōu)選的化合物形成部分由式2所代表 式2其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0到3；且b是0到3。金部分的芳香環(huán)上的取代模式可以是鄰位，間位或?qū)ξ弧?br> R可以是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，氨基酸基團(tuán)，包含1-6個(gè)碳原子的取代的或亞取代的線性或支鏈烷基基團(tuán)或部分(例如C1-C4烷基基團(tuán)或部分，甲基，乙基，正丙基，i-丙基，丁基，i-丁基或t-丁基)，其如果被取代，可以攜帶一個(gè)或兩個(gè)取代基(例如鹵素，氰基，硝基，氨基，烷氧基，羥基，芳基，雜芳基，酯-CO2R1，其中R1是氫或甲基或乙基，和酰胺C(O)NHR2，其中R2是氫或甲基或乙基)，氨基基團(tuán)NR″″C(O)(R″)其中R″″和R″可以是相同的或不同的，并且R″″和R″獨(dú)立地選自由H，烷基(例如(CH2)nCH3其中n是0到6)，芳基，雜芳基，環(huán)烷基組成的組，并且可以一起形成(任選地包含雜原子的)環(huán)，取代的或未取代的芳基(例如C6-C10芳基基團(tuán)諸如苯基或萘基，任選地?cái)y帶1，2，3或4個(gè)取代基(例如氰基，鹵素，硝基，三氟甲基，烷基，烷硫基，烷氧基和羥基))或取代的或未取代的雜環(huán)基團(tuán)諸如雜芳基基團(tuán)(例如具有5-10元芳香環(huán)，諸如5或6元環(huán)，包含至少一個(gè)選自O(shè)，S和N的雜原子(例如吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，呋喃基，噻吩基，吡唑烷基，吡咯基和吡唑基基團(tuán)))或可以用氰基、硝基、鹵素、烷基、烷硫基、烷氧基和羥基基團(tuán)取代的非芳基雜環(huán)基團(tuán)(例如，四氫呋喃基或吡咯烷基)。
該類化合物的優(yōu)選實(shí)例選自由下列組成的組
本發(fā)明的第二類化合物形成部分由式3表示 式3其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0到3；且b是0到3。金部分的芳香環(huán)上的取代模式可以是鄰位，間位或?qū)ξ弧?br> R可以是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，氨基酸基團(tuán)，包含1-6個(gè)碳原子的取代的或亞取代的線性或支鏈烷基基團(tuán)或部分(例如C1-C4烷基基團(tuán)或部分，甲基，乙基，正丙基，i-丙基，丁基，i-丁基或t-丁基)，其如果被取代，可以攜帶一個(gè)或兩個(gè)取代基(例如鹵素，氰基，硝基，氨基，烷氧基，羥基，芳基，雜芳基，酯-CO2R1，其中R1是氫或甲基或乙基，和酰胺C(O)NHR2，其中R2是氫或甲基或乙基)，氨基基團(tuán)NR″″C(O)(R″)其中R″″和R″可以是相同的或不同的，并且R″″和R″獨(dú)立地選自由H，烷基(例如(CH2)nCH3其中n是0到6)，芳基，雜芳基，環(huán)烷基組成的組，并且可以一起形成(任選地包含雜原子的)環(huán)，取代的或未取代的芳基(例如C6-C10芳基基團(tuán)諸如苯基或萘基，任選地?cái)y帶1，2，3或4個(gè)取代基(例如氰基，鹵素，硝基，三氟甲基，烷基，烷硫基，烷氧基和羥基))或取代的或未取代的雜環(huán)基團(tuán)諸如雜芳基基團(tuán)(例如具有5-10元芳香環(huán)，諸如5或6元環(huán)，包含至少一個(gè)選自O(shè)，S和N的雜原子(例如吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，呋喃基，噻吩基，吡唑烷基，吡咯基和吡唑基基團(tuán)))或可以用氰基、硝基、鹵素、烷基、烷硫基、烷氧基和羥基基團(tuán)取代的非芳基雜環(huán)基團(tuán)(例如，四氫呋喃基或吡咯烷基)。
該類化合物的優(yōu)選實(shí)例選自由下列組成的組
本發(fā)明的第三類化合物形成部分由式4表示 式4其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0到3；且b是0到3；并且X是接頭基團(tuán)。X可以選自由O，S，PR或NR組成的組，其中R是取代的或未取代的烴部分。金部分的每個(gè)芳香環(huán)上的取代模式可以是鄰位，間位或?qū)ξ弧?br> R可以是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，氨基酸基團(tuán)，包含1-6個(gè)碳原子的取代的或亞取代的線性或支鏈烷基基團(tuán)或部分(例如C1-C4烷基基團(tuán)或部分，甲基，乙基，正丙基，i-丙基，丁基，i-丁基或t-丁基)，其如果被取代，可以攜帶一個(gè)或兩個(gè)取代基(例如鹵素，氰基，硝基，氨基，烷氧基，羥基，芳基，雜芳基，酯-CO2R1，其中R1是氫或甲基或乙基，和酰胺C(O)NHR2，其中R2是氫或甲基或乙基)，氨基基團(tuán)NR″″C(O)(R″)其中R″″和R″可以是相同的或不同的，并且R″″和R″獨(dú)立地選自由H，烷基(例如(CH2)nCH3其中n是0到6)，芳基，雜芳基，環(huán)烷基組成的組，并且可以一起形成(任選地包含雜原子的)環(huán)，取代的或未取代的芳基(例如C6-C10芳基基團(tuán)諸如苯基或萘基，任選地?cái)y帶1，2，3或4個(gè)取代基(例如氰基，鹵素，硝基，三氟甲基，烷基，烷硫基，烷氧基和羥基))或取代的或未取代的雜環(huán)基團(tuán)諸如雜芳基基團(tuán)(例如具有5-10元芳香環(huán)，諸如5或6元環(huán)，包含至少一個(gè)選自O(shè)，S和N的雜原子(例如吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，呋喃基，噻吩基，吡唑烷基，吡咯基和吡唑基基團(tuán)))或可以用氰基、硝基、鹵素、烷基、烷硫基、烷氧基和羥基基團(tuán)取代的非芳基雜環(huán)基團(tuán)(例如，四氫呋喃基或吡咯烷基)。
該類化合物的優(yōu)選實(shí)例選自由下列組成的組
本發(fā)明的第四類化合物形成部分由式5表示 式5其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0到3；且b是0到3。金部分的芳香環(huán)上的取代模式可以是鄰位，間位或?qū)ξ弧?br> R可以是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，氨基酸基團(tuán)，包含1-6個(gè)碳原子的取代的或亞取代的線性或支鏈烷基基團(tuán)或部分(例如C1-C4烷基基團(tuán)或部分，甲基，乙基，正丙基，i-丙基，丁基，i-丁基或t-丁基)，其如果被取代，可以攜帶一個(gè)或兩個(gè)取代基(例如鹵素，氰基，硝基，氨基，烷氧基，羥基，芳基，雜芳基，酯-CO2R1，其中R1是氫或甲基或乙基，和酰胺C(O)NHR2，其中R2是氫或甲基或乙基)，氨基基團(tuán)NR″″C(O)(R″)其中R″″和R″可以是相同的或不同的，并且R″″和R″獨(dú)立地選自由H，烷基(例如(CH2)nCH3其中n是0到6)，芳基，雜芳基，環(huán)烷基組成的組，并且可以一起形成(任選地包含雜原子的)環(huán)，取代的或未取代的芳基(例如C6-C10芳基基團(tuán)諸如苯基或萘基，任選地?cái)y帶1，2，3或4個(gè)取代基(例如氰基，鹵素，硝基，三氟甲基，烷基，烷硫基，烷氧基和羥基))或取代的或未取代的雜環(huán)基團(tuán)諸如雜芳基基團(tuán)(例如具有5-10元芳香環(huán)，諸如5或6元環(huán)，包含至少一個(gè)選自O(shè)，S和N的雜原子(例如吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，呋喃基，噻吩基，吡唑烷基，吡咯基和吡唑基基團(tuán)))或可以用氰基、硝基、鹵素、烷基、烷硫基、烷氧基和羥基基團(tuán)取代的非芳基雜環(huán)基團(tuán)(例如，四氫呋喃基或吡咯烷基)。
該類化合物的優(yōu)選實(shí)例選自由下列組成的組
本發(fā)明的第五類化合物形成部分由式6表示
式6其中Y選自由(R′)bAuL′和 組成的組，其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0到3；且b是0到3。金部分的芳香環(huán)上的取代模式可以是鄰位，間位或?qū)ξ弧?br> R可以是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，氨基酸基團(tuán)，包含1-6個(gè)碳原子的取代的或亞取代的線性或支鏈烷基基團(tuán)或部分(例如C1-C4烷基基團(tuán)或部分，甲基，乙基，正丙基，i-丙基，丁基，i-丁基或t-丁基)，其如果被取代，可以攜帶一個(gè)或兩個(gè)取代基(例如鹵素，氰基，硝基，氨基，烷氧基，羥基，芳基，雜芳基，酯-CO2R1，其中R1是氫或甲基或乙基，和酰胺C(O)NHR2，其中R2是氫或甲基或乙基)，氨基基團(tuán)NR″″C(O)(R″)其中R″″和R″可以是相同的或不同的，并且R″″和R″獨(dú)立地選自由H，烷基(例如(CH2)nCH3其中n是0到6)，芳基，雜芳基，環(huán)烷基組成的組，并且可以一起形成(任選地包含雜原子的)環(huán)，取代的或未取代的芳基(例如C6-C10芳基基團(tuán)諸如苯基或萘基，任選地?cái)y帶1，2，3或4個(gè)取代基(例如氰基，鹵素，硝基，三氟甲基，烷基，烷硫基，烷氧基和羥基))或取代的或未取代的雜環(huán)基團(tuán)諸如雜芳基基團(tuán)(例如具有5-10元芳香環(huán)，諸如5或6元環(huán)，包含至少一個(gè)選自O(shè)，S和N的雜原子(例如吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，呋喃基，噻吩基，吡唑烷基，吡咯基和吡唑基基團(tuán)))或可以用氰基、硝基、鹵素、烷基、烷硫基、烷氧基和羥基基團(tuán)取代的非芳基雜環(huán)基團(tuán)(例如，四氫呋喃基或吡咯烷基)。
在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，L和L′是相同的。此外，優(yōu)選地，R′和R″是相同的。
該類化合物的優(yōu)選實(shí)例選自由下列組成的組
在式2-6中，L和L′可以是相同的或不同的。L和/或L′可以選自由PR3，P(OR)3，CNR，NCR， N4C6H12(六亞甲基四胺)，[N4C6H12-N-CH3]+，PN3C6H12，和P[N3C6H12-N-CH3]+組成的組，其中R是任何理想的取代的或未取代的烴部分，例如取代的或未取代的烷基、烯、炔、芳基或芳香基團(tuán)。因此，R可以選自由甲基、乙基、丙基、丁基和苯基基團(tuán)組成的組。特別優(yōu)選的是在PR3中的每個(gè)R基團(tuán)是苯基并且所述配體是PPh3。而且，R′和R″可以每個(gè)獨(dú)立地選自由亞甲基、乙烯、丙烯、丁烯、和亞苯基基團(tuán)。
選自由H，SO2-，PO3-，烷基(特別是甲基)和芳基組成的組，并在任何一個(gè)配體中的每個(gè) 可以是相同的或不同的。此外，可以選擇L和/或L′以控制所述化合物的溶解度。適合的配體包括乙二醇、聚醚、冠醚和糖。對于包含多種膦配體的化合物而言，那么兩個(gè)或更多膦配體可以通過PEG接頭、冠醚等來進(jìn)行連接。
設(shè)想可以制備這樣的化合物，所述化合物作為對于包含活性金(I)的化合物的前藥而起作用，其將以一種形式進(jìn)行施用并接著在體內(nèi)被轉(zhuǎn)化為活性金(I)包含形式。因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及對于包含活性金(I)化合物的前藥，其中金(I)原子的至少一個(gè)被金(III)原子所取代，所述金(III)原子在體內(nèi)可還原為金(I)原子。
本發(fā)明的第五個(gè)方面提供治療癌癥的藥物組合物，所述藥物組合物包括有效量的化合物和藥用賦形劑，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)在連接第一和第二金原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)被還原為金(I)原子。
本發(fā)明的第六個(gè)方面提供這樣的化合物以用作化療劑，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)在連接第一和第二金原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)被還原為金(I)原子。
本發(fā)明的第七個(gè)方面提供將化合物用在制備治療癌癥的藥物中的應(yīng)用，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)在連接第一和第二金原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)還原為金(I)原子。
本發(fā)明的第八個(gè)方面提供治療人或動物患者中的癌癥的方法，所述方法包括向所述患者施用治療有效量的化合物，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)在連接第一和第二金原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)還原為金(I)原子。
優(yōu)選地，所述第二金原子是金(III)原子。
將理解的是，適當(dāng)數(shù)量的配體應(yīng)該在每個(gè)金(III)原子上進(jìn)行提供，所述金(III)原子存在于本發(fā)明的第五，第六，第七和第八個(gè)方面的化合物形成部分。因此，當(dāng)金(I)原子取代金(III)原子以提供對于活性金(I)包含化合物的前藥時(shí)，已經(jīng)鍵合于金(I)原子的單個(gè)L或L′基團(tuán)應(yīng)該以三個(gè)L或L′基團(tuán)進(jìn)行取代。可以由配體的適當(dāng)選擇來對化合物上的總電荷進(jìn)行預(yù)選擇，例如從而提供中性金(III)包含化合物，可以選擇每個(gè)攜帶-1電荷的三個(gè)陰離子配體?？梢詫⑦m合的配體，例如卟啉或冠醚用在金(III)包含的化合物中以操縱化合物的溶解度。
參考下面的非限制性的實(shí)施例和附圖來對本發(fā)明進(jìn)行舉例說明，其中

圖1是在用順鉑處理后，在母體和抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；圖2是在用卡鉑處理后，在母體和抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；圖3是在用化合物A處理后，在母體和鉑-抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；圖4是在用化合物B處理后，在母體和鉑-抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；圖5是在用化合物C處理后，在母體和鉑-抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；圖6是在用化合物D處理后，在母體和鉑-抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；圖7是在用化合物E處理后，在母體和鉑-抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；圖8是在用化合物F處理后，在母體和鉑-抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖；和圖9是在用單-金化合物，苯基金三苯基磷(PAuP)處理后，在母體和鉑-抗性細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)的示意圖，從而與本發(fā)明的二金化合物進(jìn)行比較。
實(shí)施例使用一系列的成對細(xì)胞系，來對化合物A-F(下面)和順鉑和卡鉑的化療活性進(jìn)行比較，已知所述細(xì)胞系對于臨床上有效的試劑順鉑和卡鉑敏感或具有獲得的抗性。對于化合物A的合成的細(xì)節(jié)，見附錄A。
使用生長抑制測定來確定細(xì)胞系對于順鉑，卡鉑和化合物A-F的敏感性，所述生長抑制測定是MTT方法的改進(jìn)形式(在附錄B中描述的MTT方法的改進(jìn)形式)。
下面是用在生長抑制測定中的十一個(gè)不同細(xì)胞系的簡短描述·A2780細(xì)胞系(在圖1-9中的1)是人卵巢細(xì)胞系，其對于順鉑和卡鉑敏感。A2780cis(2)和A2780carb(3)細(xì)胞系是分別顯示順鉑和卡鉑抗性的A2780細(xì)胞系的改進(jìn)形式(modified version)。
細(xì)胞系mcp1(4)和mcp8(5)是鉑抗性的A2780亞系，它是錯(cuò)配修復(fù)缺陷。
所述cor123(6)是非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系，所述細(xì)胞系對于鉑藥物敏感。所述cor123/cpr(7)細(xì)胞系是所述cor123細(xì)胞系的改進(jìn)形式，所述cor123細(xì)胞系已經(jīng)被修飾從而對順鉑和卡鉑具有抗性。
所述ccu24(8)細(xì)胞系是來自腫瘤活體組織檢查在Christie Hospital開發(fā)的上皮卵巢癌細(xì)胞系，并且所述ccu24/cpr(9)細(xì)胞系是這種細(xì)胞系的改進(jìn)形式，所述細(xì)胞系是順鉑和卡鉑抗性的。
所述L1210(10)是鼠白血病細(xì)胞系，并且L1210/M1140(11)是其鉑藥物抗性亞系。
表1舉例說明第一個(gè)系列的測定，進(jìn)行所述測定以研究6種本發(fā)明化合物(A-F)和順鉑的每種的活性。表2舉例說明另一系列的測定的結(jié)果，所述測定在化合物A-F，和卡鉑上進(jìn)行。
表1測試的化合物的IC50(nM)。*比較數(shù)據(jù)
表2測試的化合物的IC50值(nM)。*比較數(shù)據(jù)在表2中顯示的結(jié)果舉例說明在表1中顯示的數(shù)據(jù)的再現(xiàn)性。
化合物A-F對十一種細(xì)胞系的影響的數(shù)據(jù)可以總結(jié)如下1)與鉑藥物相比，化合物A-F是相對更加有效的(nM比較μM)；2)本發(fā)明的化合物A-F在鉑-抗性細(xì)胞系中比在母體細(xì)胞系中更加具有活性。將化合物A作為實(shí)例a)與母體(敏感的)A2780-S系(IC5013.4nM)相比，所述A2780cis細(xì)胞系(IC500.2nM)對于化合物A具有超過60倍更多的敏感性；和b)與母體A2780-S系(IC5013.4nM)相比，所述A2780carb細(xì)胞系(IC500.6nM)對于化合物A具有超過20倍的敏感性。
3)包含超過1個(gè)Au(I)原子的化合物與單金化合物相比，更具有效力。
這種間接敏感性見于小鼠和人腫瘤細(xì)胞系中。
已經(jīng)進(jìn)行了初期研究以調(diào)查這種增加的敏感性的機(jī)制。使用測量對于DNA的損傷的彗星實(shí)驗(yàn)(在附錄C中描述)來進(jìn)行這些研究。將所述結(jié)果顯示于圖1(順鉑)，2(卡鉑)，3-8(化合物A-F)和9(苯基金三苯基磷，PAuP)中。
從圖1和2中可見，順鉑和卡鉑二者都導(dǎo)致在母體(鉑敏感性)A2780，L1210，和cor123細(xì)胞系中的廣泛DNA交聯(lián)，而在鉑-抗性的細(xì)胞系中觀察到更少得多的交聯(lián)。這與DNA是鉑藥物的靶標(biāo)并且抗性是由抗性細(xì)胞中的DNA損傷的減少引起的假說相一致。這可以由許多機(jī)制所引起，所述機(jī)制包括DNA修復(fù)，藥物的增加的失活作用，或減少的藥物吸收。
與此相對，從圖3-8中可見，與母體(鉑-敏感性)細(xì)胞系相比，化合物A-F在鉑抗性細(xì)胞系中導(dǎo)致更多的DNA損傷。
圖9舉例說明比較性數(shù)據(jù)并且顯示在分子中具有超過一個(gè)金原子的重要性。關(guān)于PAuP觀察到的交聯(lián)的水平與二金化合物相比是低的。單金化合物也具有少得多的細(xì)胞毒性(ID50＞10000nm，表1)。
表3舉例說明使用在彗星實(shí)驗(yàn)中獲得的DNA交聯(lián)的結(jié)果進(jìn)行的下列計(jì)算的結(jié)果在母體(敏感的)細(xì)胞系中的DNA交聯(lián)在鉑藥物抗性細(xì)胞系的DNA交聯(lián)
表3DNA交聯(lián)(彗星)實(shí)驗(yàn)的概述。Au(III)是[Au(η2-C6H4CH＝NC6H5)Cl2]，且Au(I)是[Au(C6H5)(PPh3)].*比較數(shù)據(jù)。
與鉑抗性細(xì)胞系相比，關(guān)于順鉑的結(jié)果顯示在母體細(xì)胞系中增加的活性的預(yù)期趨勢(即，大于均一性的比率)。本發(fā)明化合物(A-F)的每種對于所有的抗性細(xì)胞系而言具有顯著低于1.00的比率，因此證實(shí)化合物A-F導(dǎo)致與在母體(鉑-敏感性)細(xì)胞系中相比，在鉑抗性細(xì)胞系中的更多DNA交聯(lián)的上述觀察。
因此，化合物A-F顯示在體外，在鉑-抗性細(xì)胞系中增加的細(xì)胞的殺傷，這可能是由于在鉑-抗性細(xì)胞系中增加的DNA損傷所導(dǎo)致的。其精確機(jī)制尚未被充分闡明。然而，在鉑抗性錯(cuò)配修復(fù)缺陷mcp16和mcp8細(xì)胞系中觀察到活性。因此，提議本發(fā)明的化合物可能在錯(cuò)配修復(fù)缺陷的腫瘤中顯示增加的活性。
化合物A-F是簡單的金屬化合物并且不包含鉑。本發(fā)明化合物選擇性殺傷鉑-抗性細(xì)胞的能力可具有重要的臨床意義，因?yàn)檎J(rèn)為對于鉑藥物的抗性在包括卵巢癌和肺癌的許多癌癥中是治療失敗的原因。
附錄A化合物的合成在使用前，于N2氣氛下對所有的溶劑進(jìn)行干燥和蒸餾。除了[ClAu(SC4H8)]，從商業(yè)來源購買所有的化學(xué)品，所述[ClAu(SC4H8)]通過文獻(xiàn)的方法14進(jìn)行制備。
1，4-二-(三苯基膦金(phospinogold)(I)苯(A)的制備于-78℃將叔丁基鋰(0.75mL，1.25mmol)加入溶解在醚(20mL)中的1，4-二溴代苯(0.074g，0.31mmol)中并且將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。將噻吩(5mL)和[ClAu(SC4H8)](0.200g，0.62mmol)加入該混合物中并且將反應(yīng)攪拌達(dá)1.5小時(shí)。接著，加入三苯基膦(0.083g，0.32mmol)并且在加溫到室溫前，再將溶液攪拌1.5小時(shí)，并且再攪拌30分鐘。接著，在減壓下，將二乙基醚去除，將原料抽提到二氯甲烷中并且進(jìn)行過濾以去除鋰鹽。接著，從熱醚中將所述化合物進(jìn)行再結(jié)晶；得到0.286g，93％.mp139°decomp.NMR1H7.70-7.49ppm芳基-H；31P{1H}44.8ppm；13C{1H}168.0，139.7，133.3，130.2，128.1，131.0ppm；微量分析實(shí)測值C＝50.2；H＝3.9；P＝6.0；計(jì)算值C＝50.7；H＝3.4；P＝6.2。
以類似的方式，可以制備化合物[1，4-二-(LAu)C6H4]，其中L是任何理想的配體，例如CNBut，PEt3，P(OMe)3或NCMe。
可以將該實(shí)驗(yàn)方法延伸到其它的聚芳香烴系統(tǒng)。其實(shí)例是4，4′-二-(三苯基膦金(I))二苯基。
4，4′-二-(三苯基膦金(I))二苯基的制備方法1-使用[ClAu(SC4H8)]于-78℃，將叔丁基鋰(0.75mL，1.25mmol)加入溶解在醚(20mL)中的4，4′-二溴代二苯基(0.096g，0.31mmol)中，并且使反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。將噻吩(5mL)和[ClAu(SC4H8)](0.200g，0.62mmol)加入該混合物，并且將反應(yīng)攪拌達(dá)1.5小時(shí)。接著將三苯基膦(0.083g，0.62mmol)加入并將溶液在加溫到室溫前，再攪拌1.5小時(shí)，并且再攪拌30分鐘。接著在減壓下，將二乙基醚去除，將原料抽提到二氯甲烷中并且進(jìn)行過濾以去除鋰鹽。接著，從熱醚中將所述化合物進(jìn)行再結(jié)晶；產(chǎn)量0.275g，83％.mp138°decomp.NMR1H7.70-7.47ppm芳基-H；31P{1H}44.9ppm；13C{1H}170.5，139.9，134.8，131.6，131.5，129.5，126.4ppm；微量分析實(shí)測值C＝53.8，H＝3.6，P＝5.8；計(jì)算值C＝53.2；H＝3.6；P＝6.1。
以類似的方式，可以制備化合物[1，4-二-(LAu)C6H4]，其中L是任何理想的配體，例如，CNBut，PEt3，P(OMe)3或NCMe。
方法2-使用[ClAu(AsPh3)]于-78℃，將叔丁基鋰(0.75mL，1.25mmol)加入溶解在醚(20mL)中的4，4′-二溴代二苯基(0.096g，0.31mmol)，并且容許所述反應(yīng)混合物再攪拌30分鐘。將噻吩(5mL)和[ClAu(AsPh3)](0.128g，0.62mmol)15加入該混合物，并將反應(yīng)攪拌達(dá)1.5小時(shí)。接著，加入三苯基膦(0.083g，0.62mmol)，并且在加溫到室溫之前，將溶液再攪拌1.5小時(shí)，并且再攪拌30分鐘。接著，在減壓下，去除二乙基醚，將原料抽提到二氯甲烷中并進(jìn)行過濾以去除鋰鹽。接著，將所述化合物從熱醚中再次進(jìn)行結(jié)晶，產(chǎn)量0.265g，80％.mp138°decomp.NMR1H7.70-7.47ppm芳基-H；31P{1H}44.9ppm；13C{1H}170.5，139.9，134.8，131.6，131.5，129.5，126.4ppm；微量分析實(shí)測值C＝53.6，H＝3.5，P＝6.1；計(jì)算值C＝53.2；H＝3.6；P＝6.1。
以類似的方法，可以制備化合物[1，4-二-(LAu)C6H4]，其中L是任何理想的配體，CNBut，PEt3，P(OMe)3或NCMe。
還已經(jīng)通過單晶體X-射線衍射研究晶形單斜晶；間隔基團(tuán)P21/c；a18.6224(2)；b＝10.27190(10)；c＝24.0682(3)；D＝102.634°；Z＝4；T＝150K；R1＝4.05對4，4′-二-(三苯基phospino金(I))二苯基進(jìn)行了特征鑒定。
包含兩個(gè)金(III)原子的前藥化合物的制備在下面顯示的是適合于制備包含兩個(gè)金(III)原子的前藥化合物的制備的反應(yīng)路線的實(shí)例，所述金(III)原子在體內(nèi)可還原成金(I)原子。

R可以是任何需要的化學(xué)基團(tuán)，例如，氫，甲基，乙基，丙基等。
附錄B生長抑制測定使用方法MTT7的改進(jìn)方法來進(jìn)行細(xì)胞毒性研究。該測定的原理是在5天的時(shí)間進(jìn)程中，評估在各種劑量上的藥物的生長抑制效果。在96-孔微量滴定板中進(jìn)行該測定。根據(jù)細(xì)胞系的加倍時(shí)間(doubling time)將細(xì)胞以400-1,000細(xì)胞/孔的密度進(jìn)行接種。在包含10％FCS(胎牛血清)的生長培養(yǎng)基中進(jìn)行所有的細(xì)胞稀釋。
將研究的化合物溶解在DMSO(二甲亞砜)中。將系列稀釋的化合物制成細(xì)胞混懸液，確保DMSO的比例保持在低于0.5％。以三次重復(fù)，將200μL的細(xì)胞和藥物混合物添加到96-孔板中。將板在5％CO2和37℃溫育5天。在這段時(shí)間后，從溫箱中移去所述板并將50μl的MTT[3-(4，5-二甲基-噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物]的3mg/ml的溶液加入每個(gè)孔中并且在相同的條件下再溫育3小時(shí)。從每個(gè)孔中吸出培養(yǎng)基并且將formazan晶體溶解于200μl的DMSO中。使用Multiskan板讀數(shù)器在540nm和690nm讀出板。使用三次重復(fù)吸收值的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差來構(gòu)建生長抑制曲線，并且從這些曲線，計(jì)算IC50值。
附錄C彗星實(shí)驗(yàn)通過最初由Ostling和Johnson8開發(fā)的單細(xì)胞凝膠電泳(SCGE)實(shí)驗(yàn)或“彗星實(shí)驗(yàn)”來測量DNA損傷。這是確定在個(gè)體細(xì)胞中DNA損傷程度和修復(fù)能力的方法9-11。前面已經(jīng)顯示該技術(shù)可以用于研究不同DNA損傷劑的作用機(jī)制12。
將細(xì)胞進(jìn)行胰蛋白酶消化，懸浮在0.5ml的冰冷新鮮的培養(yǎng)基中并且在包埋在瓊脂糖之前，將其轉(zhuǎn)移到塑料24-孔碟中。對于交聯(lián)研究而言，將處理的和對照樣品在冰上預(yù)冷(以防止DNA損傷的任何修復(fù))并在銫-137源中以20Gy的劑量進(jìn)行輻射(0.4Gy/min)。將對照，(未輻射，未藥物處理的細(xì)胞)以與處理的樣品相同的方式保持在冰上。
將一端冰凍的玻璃顯微鏡載玻片在蒸餾水中，用1％的正常瓊脂糖進(jìn)行預(yù)包被。使這些載玻片在使用前過夜風(fēng)干。將在PBS中的1％的低熔點(diǎn)瓊脂糖(LMP)混合物熔化并保持在45℃。接著，于冰上將1ml的LMP加入0.5ml的細(xì)胞混懸液中并將得到的混合物吸取到預(yù)包被的玻璃顯微鏡載玻片上并且容許在被轉(zhuǎn)移到玻璃托盤之前，放置1-2分鐘。將載玻片浸沒于冰冷的裂解溶液(100mM EDTA，10mM Tris-HCl，1％TritonX100，1％DMSO，2.5M NaCl)中達(dá)1小時(shí)，并且通過浸沒在新鮮的雙蒸水中達(dá)15分鐘來洗滌3次。
接著將載玻片放置在平板電泳槽中并且用堿性解鏈溶液(50mMNaOH，1mM EDTA緩沖到pH 12.5)覆蓋(5-6mm)在柔和光照下放置45分鐘以容許DNA在電泳前解鏈，所述電泳在0.6V/cm上進(jìn)行25分鐘。用2×1ml的0.4MTris-HCl，pH 8.0來漂洗每個(gè)載玻片并且容許進(jìn)行風(fēng)干。接著用雙蒸水來將干燥的載玻片再水合20分鐘，加入2×1ml的propidium iodide溶液(2.5μg/ml)，使染色進(jìn)行15分鐘。接著，將載玻片浸沒在1升的雙蒸水中達(dá)1小時(shí)以減少過量的背景染色。將載玻片滑動覆蓋，并接著在落射熒光顯微鏡(Zeiss-Jenamed)下，使用來自50瓦特汞源的綠光，用580nm的反射器和590nm的隔離濾色片裝置，以250x放大進(jìn)行檢查。使用連接的Sony HAD-1夾層CCD照相機(jī)和Komet軟件分析包(動力學(xué)成像)來捕獲圖像。從兩個(gè)重復(fù)的載玻片的每個(gè)上面捕獲25張圖像并進(jìn)行分析，計(jì)算如Olive等13定義的個(gè)體“彗星矩量(moment)”。圖像的總的熒光代表存在的DNA的量，而以象素測量的圖像的長度代表DNA遷移的長度。鑒定圖像的頭部和尾部區(qū)域，并且測定每個(gè)的強(qiáng)度。通過將尾部存在的DNA的級分乘以尾部的長度的一半來計(jì)算尾部矩量。
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權(quán)利要求
1.一種用于治療癌癥的藥物組合物，所述藥物組合物包括有效量的化合物和藥用賦形劑，所述化合物具有兩個(gè)金(I)原子，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)在連接所述兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子。
2.按照權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述化合物具有共價(jià)鍵合于第一碳原子的第一金(I)原子和共價(jià)鍵合于第二碳原子的第二金(I)原子。
3.按照權(quán)利要求2的藥物組合物，其中所述化合物包括取代的或未取代的芳香基團(tuán)作為所述共價(jià)連接的部分。
4.按照權(quán)利要求2或3的藥物組合物，其中所述第一碳原子是取代的或未取代的芳香基團(tuán)的部分。
5.按照權(quán)利要求4的組合物，其中所述取代的或未取代的芳香基團(tuán)是取代的或未取代的苯基基團(tuán)。
6.按照權(quán)利要求2-5任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述第二碳原子是取代的或未取代的烷基，烯，炔，芳基或芳香基團(tuán)的部分。
7.按照權(quán)利要求6的藥物組合物，其中所述第二碳原子作為部分的芳香基團(tuán)是取代或未取代的苯基基團(tuán)。
8.按照權(quán)利要求2-7任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物結(jié)合具有式Au1—C1—Zn—C2—Au2的部分，其中Au1是所述第一金(I)原子；Au2是所述第二金(I)原子；C1是所述第一碳原子；C2是所述第二碳原子；Z是接頭基團(tuán)；并且n是0或1。
9.按照前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物包括結(jié)合于所述金(I)原子的每個(gè)的配體，所述配體的每個(gè)單獨(dú)地選自由PR3，P(OR)3，CNR，NCR，PRn(CH2OR)3-n，N4C6H12，[N4C6H12-N-CH3]+，PN3C6H12，和P[N3C6H12-N-CH3]+組成的組中，其中R是取代的或未取代的烴部分并且R選自由H，Me，SO2-，PO3-，烷基和芳基組成的組，并且在任一個(gè)配體中的每個(gè)R是相同的或不同的。
10.按照權(quán)利要求9的藥物組合物，其中R是取代的或未取代的烷基、烯、炔、芳基或芳香基團(tuán)組成的組，并且在任一個(gè)配體中的每個(gè)R是相同的或不同的。
11.按照權(quán)利要求9或10的藥物組合物，其中R選自由甲基、乙基、丙基、丁基和苯基基團(tuán)組成的組。
12.按照權(quán)利要求9，10或11的藥物組合物，其中所述配體是PPh3。
13.按照權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物具有式 其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0或3；b是0或3；R是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，或NR″″C(O)(R″)，其中R″″和R″是(CH2)nCH3；并且n是0-6。
14.按照權(quán)利要求13的藥物組合物，其中所述化合物具有選自由下列各項(xiàng)組成的組中的式
15.按照權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物具有式 其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0或3；b是0或3；R是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，或NR″″C(O)(R″)，其中R″″和R″是(CH2)nCH3；并且n是0-6。
16.按照權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物具有式 其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0或3；b是0或3；R是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，或NR″″C(O)(R″)，其中R″″和R″是(CH2)nCH3；并且n是0-6；且X是接頭基團(tuán)。
17.按照權(quán)利要求16的藥物組合物，其中X選自由O，S，PR或NR組成的組，其中R是取代的或未取代的烴部分。
18.按照權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物具有式 其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0或3；且b是0或3；R是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，或NR″″C(O)(R″)，其中R″″和R″是(CH2)nCH3；并且n是0-6。
19.按照權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物具有式 其中Y選自由(R′)bAuL′和 組成的組其中L和L′是配體；R′和R″是取代的或未取代的二價(jià)烴部分；a是0或3；且b是0或3；R是H，SO3-，PO42-，CO2H，OH，(CH2)nCH3，O(CH2)nCH3，S(CH2)nCH3，或NR″″C(O)(R″)，其中R″″和R″是(CH2)nCH3；并且n是0-6。
20.按照權(quán)利要求13-19任一項(xiàng)的藥物組合物，其中L和L′獨(dú)立地選自由PR3，P(OR)3，CNR，NCR，PRn(CH2OR)3-n，N4C6H12，[N4C6H12-N-CH3]+，PN3C6H12，以及P[N3C6H12-N-CH3]+組成的組，其中R是取代或未取代的烴部分而R選自由H，Me，SO2-，PO3-，烷基和芳基組成的組，并且在任何一個(gè)配體中的每個(gè)R是相同或不同的。
21.按照權(quán)利要求20的藥物組合物，其中R是取代的或未取代的烷基、烯、炔、芳基或芳香基團(tuán)并且在任一個(gè)配體中的每個(gè)R是相同的或不同的。
22.按照權(quán)利要求20或21的藥物組合物，其中R選自由甲基、乙基、丙基、丁基和苯基基團(tuán)組成的組。
23.按照權(quán)利要求20、21或22的藥物組合物，其中所述配體是PPh3。
24.按照權(quán)利要求13-23任一項(xiàng)的藥物組合物，其中R′和R″每個(gè)獨(dú)立地選自由亞甲基、乙烯、丙烯、丁烯、和亞苯基基團(tuán)組成的組。
25.一種用作化療劑的化合物，所述化合物具有兩個(gè)金(I)原子，所述兩個(gè)金(I)原子在連接所述兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子。
26.化合物用作制備治療癌癥的藥物的應(yīng)用，所述化合物具有兩個(gè)金(I)原子，所述兩個(gè)金(I)原子在連接所述兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子。
27.按照權(quán)利要求26的化合物的應(yīng)用，其中所述癌癥對鉑藥物具有抗性。
28.按照權(quán)利要求27的化合物的應(yīng)用，其中所述癌癥對于順鉑和/或卡鉑具有抗性。
29.按照權(quán)利要求26，27或28的化合物的應(yīng)用，其中所述癌癥是卵巢或肺癌。
30.按照權(quán)利要求26-29任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述化合物按照權(quán)利要求1-24任一項(xiàng)進(jìn)行定義。
31.一種治療人或動物患者中癌癥的方法，所述方法包括向所述患者施用治療有效量的化合物，所述化合物具有兩個(gè)金(I)原子，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都在連接所述兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子。
32.按照權(quán)利要求31的方法，其中所述癌癥對于鉑藥物具有抗性。
33.按照權(quán)利要求32的方法，其中所述癌癥對于順鉑和/或卡鉑具有抗性。
34.按照權(quán)利要求31，32或33的方法，其中所述癌癥是卵巢癌或肺癌。
35.按照權(quán)利要求31-34任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物按照權(quán)利要求1-24任一項(xiàng)進(jìn)行定義。
36.一種用于治療癌癥的藥物組合物，其包括有效量的化合物和藥用賦形劑，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)以連接所述第一和第二金原子的共價(jià)連接共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)還原為金(I)原子。
37.按照權(quán)利要求36的藥物組合物，其中所述第二金原子是金(III)原子。
38.一種用作化療劑的化合物，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)以連接所述第一和第二金原子的共價(jià)連接共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)還原為金(I)原子。
39.化合物用作制備治療癌癥的藥物的應(yīng)用，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)以連接所述第一和第二金原子的共價(jià)連接共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)還原為金(I)原子。
40.一種治療人或動物患者中癌癥的方法，所述方法包括向所述患者施用治療有效量的化合物，所述化合物具有是金(III)原子的第一金原子和是金(I)原子或金(III)原子任一的第二金原子，所述第一和第二金原子的每個(gè)以連接所述第一和第二金原子的共價(jià)連接共價(jià)鍵合于碳原子，并且所述或每個(gè)金(III)原子可在體內(nèi)還原為金(I)原子。
全文摘要
本發(fā)明涉及癌癥，特別是對基于鉑的化療劑具有抗性的癌癥的治療。一種用于治療癌癥的藥物組合物，其包含有效量的具有兩個(gè)金(I)原子的化合物以及藥用賦形劑，所述兩個(gè)金(I)原子的每個(gè)都在連接兩個(gè)金(I)原子的共價(jià)連接中共價(jià)鍵合于碳原子。
文檔編號A61K31/66GK1968728SQ200480041844
公開日2007年5月23日 申請日期2004年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月19日
發(fā)明者K·弗勞爾, A·麥高恩 申請人:索爾福德大學(xué), 曼徹斯特大學(xué)