專利名稱：干擾素－人參二醇皂甙緩釋片劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及重組人α干擾素—人參二醇皂甙片劑的配方，生產(chǎn)工藝及適應(yīng)癥。
背景技術(shù)：
干擾素是具有多種生物活性的多肽，根據(jù)其結(jié)構(gòu)不同，可分為α型、β型、γ型、ω型等，它主要是作用于機體細胞，使細胞產(chǎn)生各種抗病毒蛋白，抑制病毒繁殖，從而達到抗病毒作用。
人參二醇皂甙是人參皂甙的一個成份，它含有Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg3等多種皂甙單位。目前發(fā)現(xiàn)人參二醇皂甙的生理活性主要有抗休克和抗應(yīng)激效應(yīng)；對受損細胞有保護作用；能改善微循環(huán)，防止血小板聚集；具有激活SOD，減少過氧化脂質(zhì)，從而保護細胞與亞細胞結(jié)構(gòu)的作用。
在臨床上，疾病的發(fā)生、發(fā)展有一定的規(guī)律，SARS作為一種新發(fā)現(xiàn)的傳染病，其在機體內(nèi)的致病過程已基本搞清，SARS是由SARS病毒引發(fā)的一種傳染病，它在人體內(nèi)引起一種類似于感染豬或牛的冠狀病毒所致的肺部病理改變，由于損傷部位主要位于終末細支氣管上皮細胞及肺泡上皮，嚴重影響呼吸黏膜的外呼吸功能，故出現(xiàn)進行性呼吸窘迫癥、低血糖癥等急性呼吸衰竭的臨床過程。
冠狀病毒的spike蛋白與其它屬的同類病毒同源性低，此外SARS病毒還編碼5種未知功能的蛋白，相對新的結(jié)構(gòu)蛋白與功能未知蛋白構(gòu)成一種“超抗原(super antigen)”，能夠引起局部肺組織的超強免疫反應(yīng)。炎癥細胞因子及趨化因子MCP釋放，導(dǎo)致肺血管內(nèi)皮細胞及肺泡上皮細胞損傷，基底塌陷，從而誘導(dǎo)炎癥細胞聚集，產(chǎn)生過量蛋白酶，進一步增加肺損傷。
目前對SARS病治療的方法和手段較多，但公認的治療方案一般為抗病毒藥物，提高機體免疫功能的藥物，抗炎藥物及減輕炎癥對機體損傷的激素類藥物。其中，抗病毒藥物和激素藥物的組合較為常用。目前存在的問題是激素藥物如地塞米松，使用的劑量難以掌握，如量小，不足以減輕癥狀，稍一過量，則會引起嚴重的后遺癥如股骨頭壞死，給患者造成新的病痛。
本申請人經(jīng)過努力，研究成了一種即可抗病毒，又可發(fā)揮激素類藥物，減輕病理損害的新型制劑IFN-PDS緩釋片劑。該片劑可經(jīng)口含或口服發(fā)揮藥效作用，對人體無毒副作用，使用方便效果好。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的之一是提供一種新型緩釋片劑的配方本發(fā)明另一目的之一是提供一種新型緩釋片劑本發(fā)明又一目的是提供這種片劑的應(yīng)用本發(fā)明的其它目的，在下面對本發(fā)明的具體描述中體現(xiàn)出來。


附圖1是本發(fā)明的制備IFN-PDS緩釋片劑的示意圖。
本發(fā)明的IFN-PDS片劑采用固體配方，可在口腔中與上皮黏膜充分接觸，也可在腸道中與腸黏膜充分接觸，但不溶于胃液中。藥物通過與黏膜接觸，引起黏膜上皮細胞被動吸收，發(fā)揮藥物作用。
根據(jù)本發(fā)明，一種IFN-PDS片劑的固體配方，含重組人干擾素α，含量為200-1×106IU/ml，黏膜吸收促進劑，濃度為1-10％(W/W)，保護劑，濃度為8-15％(W/W)，緩釋劑，濃度為20-30％(W/W)，緩沖液，PH值6.5-8.5。
根據(jù)本發(fā)明，黏膜吸收促進劑的濃度優(yōu)選為3-8％(W/W)，保護劑的濃度，優(yōu)選為9-13％，緩釋劑，優(yōu)造為21.5-24％(W/W)。重組人干擾素α可以是干擾素α2a、干擾素α2b、干擾素α2c或干擾素α1b，優(yōu)選的干擾素α是干擾素α2b。
根據(jù)本發(fā)明，黏膜吸收促進劑為吐溫-80，終濃度1-10％(W/W)，優(yōu)選為3-8％(W/W)；緩沖液為0.85％生理鹽水；保護劑為人血白蛋白，終濃度為8-15％，優(yōu)選為9-13％W/W)。
本發(fā)明的IFN-PDS緩釋片，含有重組人干擾素α，含量為2×102-106IU/ml，人參二醇皂甙，含量為0.04-0.1g/片；黏膜吸收促進劑吐溫-80，終濃度1-10％(W/W)，優(yōu)選為3-8％(W/W)，緩沖液為0.85％生理鹽水；保護劑為人血白蛋白，終濃度為8-15％(W/W)，優(yōu)選為9-13％(W/W)；緩沖劑聚乙烯醇20-30％(W/W)，優(yōu)選為21.5-24％(W/W)。
本發(fā)明的IFN-PDS緩釋片，通過將IFN和PDS與適量的保護劑，黏膜吸收促進劑，緩釋劑混合而制成，其制備工藝的一種方案，可參見附圖1。用于本發(fā)明的片劑包裝材料，均為國家批準使用的無毒，無刺激，性質(zhì)穩(wěn)定與主藥及敷料不起理化作用的材料制造。
例如，本發(fā)明緩釋片劑的成品可以是規(guī)格0.25mg/片(含重組人干擾素α2×102-106IU/ml，人參二醇皂甙0.04-0.1mg)。
儲藏2-8℃冷暗處。
包裝無毒塑料泡罩。
有效期18個月。
本發(fā)明的IFN-PDS片劑，可以增強機體免疫力，預(yù)防和治療SARS病及其它上呼吸道病毒感染性疾病，如病毒性感冒。
本發(fā)明的IFN-PDS片劑配方，可用于制備本發(fā)明的片劑，片劑可用于預(yù)防和治療呼吸道病毒感染性疾病。
具體實施例方式
實施例1取一般藥用敷料淀粉40g，依次加入聚乙烯醇25g，吐溫-80 6g，白蛋白10g，人參二醇皂甙20g，攪拌混勻，再加入干擾素1.6×105IU/5ml其余部分加入0.85％生理鹽水混勻后制粒，壓片。
實施例2取一般藥用敷料淀粉40g，依次加入取一般藥用敷料淀粉40g，依次加入聚乙烯醇25g，吐溫-80 6g，白蛋白10g，人參二醇皂甙20g，攪拌混勻，再加入干擾素1.6×106IU/5ml其余部分加入0.85％生理鹽水混勻后制粒，壓片。
實施例3取一般藥用敷料淀粉40g，依次加入取一般藥用敷料淀粉40g，依次加入聚乙烯醇25g，吐溫-80 6g，白蛋白10g，人參二醇皂甙20g，攪拌混勻，再加入干擾素1.6×107IU/5ml其余部分加入0.85％生理鹽水混勻后制粒，壓片。
一、本發(fā)明IFN-PDS緩釋片劑穩(wěn)定性試驗材料和方法(一)材料本發(fā)明的IFN-PDS緩釋片劑，為連續(xù)產(chǎn)生的三批制品，批號為20040601 20040602 20040603，試驗前于4℃冰箱保存。
(二)方法將上述三批樣品，分批分別存放于4-8℃、20-25℃和37℃條件下，放置當(dāng)時及放置后不同時間分別抽樣進行IFN活性測定，微生物限度檢查，外觀和片重差異檢查。
1.IFN生物活性測定采用Wish細胞-VSV檢測系統(tǒng)，微量細胞病變抑制法測定IFN生物活性單位，用中國藥品生物制品檢定所頻發(fā)的干擾素標(biāo)準品效正。
2.PDS含量檢查采用薄層層析掃描法進行檢查。
3.微生物限度檢查按《中華人民共和國藥典》二部2000年版要求進行4.外觀檢查按《藥劑學(xué)》方法進行。
5.片重差異按《中華人民共和國藥典》二部2000年版要求進行。
結(jié) 果1.在不同溫度條件下，保存不同時間的重組人干擾素α2b片劑三批IFN生物學(xué)活性測定見表1表1 本發(fā)明IFN-PDS緩釋片劑穩(wěn)定性測定結(jié)果

由表1可見重組人干擾素α2b片劑在4-8℃條件放置當(dāng)時和放置12個月后的IFN生物活性基本一致，未見下降；在20-25℃條件下放置4個月后的生物活性未見下降；37℃條件下放置1個月生物活性未見下降。上述三批間結(jié)果基本一致，說明該制劑IFN生物活性十分穩(wěn)定，在4-8℃條件下可保存12個月以上。
2.PDS含量檢查取純PDS為對照，檢查片劑中PDS含量，取10片IFN-PDS片劑溶于10ml水中，用硅膠板展開進行層析，將層析好的板進行顯色，掃描，掃描結(jié)果表明，片劑中人參二醇皂甙的含量與計算的理論數(shù)值基本一致。
3.生物限度檢查按《中華人民共和國藥典》二部2000年版要求進行，結(jié)果表明，片劑中所含細菌總數(shù)，大腸桿菌數(shù)，霉菌數(shù)均符合要求。
4.差異試驗任取20個片劑分別稱重重量，計算其平均數(shù)，X＝0.24±0.015mg/片，符合藥典要求。
5.觀檢查取50個片劑在燈光下檢查，表面未發(fā)現(xiàn)有麻點、異物、黑點，外觀合格。
上述結(jié)果表明，生產(chǎn)的IFN-PDS片劑工藝配方合理，生產(chǎn)方便，質(zhì)量穩(wěn)定，為制品將來大規(guī)模生產(chǎn)和運輸保存提供了可靠的科學(xué)依據(jù)。
二.本發(fā)明IFN-PDS緩釋片異常毒性試驗(一)材料1、本發(fā)明使用的重組人干擾素α，效價為1×106IU/ml；人參二醇皂甙，劑量為40mg/只、80mg/只；重組人干擾素α-人參二醇皂甙合劑，劑量為干擾素106IU+人參二醇皂甙40mg/只。
2、試驗動物豚鼠由長春生物制品研究所供應(yīng)體重為250-300g。小白鼠KM種，由長春生物制品研究所供應(yīng)，體重18-20g。
(二)試驗方法每組劑量2只豚鼠，5只小白鼠，腹腔注射待檢藥物，注射前稱量體重，注射后觀察7天，動物不出現(xiàn)異常，體重不下降，判為藥品安全性合格。
(三)結(jié)果按照《中國生物制品規(guī)程》2000版有關(guān)異常毒性試驗的要求進行試驗，結(jié)果見表2表2 IFN、PDS和IFN-PDS合劑對試驗動物的異常毒性試驗結(jié)果藥物分組 動物(只) 給藥前平 給藥后平 體重差 動物狀態(tài)均重量 均重量(g)(g) (g)IFN106IU 小鼠18.2 24.1 +5.9良好豚鼠260 328 +68 良好PDS80mg 小白鼠 19.0 26.0 +7.0良好豚鼠269 336 +67 良好
IFN+PDS小白鼠18.124.0+5.9良好豚鼠 255 325 +70 良好由表2結(jié)果可見，兩種試驗動物于觀察期結(jié)束后，體重增長較明顯，而且PDS劑量高者均比劑量低者體重增長快，說明PDS和IFN兩者合劑對試驗動物無異常毒性，經(jīng)解刨后也未見注射部位和體內(nèi)各臟器有任何改變，說明各組藥品對動物是安全的。上述試驗用藥物劑量為實驗使用藥物劑量的二萬倍。
三、本發(fā)明IFN-PDS緩釋片抗病毒效果(一)材料1、本發(fā)明IFN-PDS緩釋片2、流感強毒株為甲1型，LD50＝5.0由北京病毒學(xué)研究所提供3、試驗動物KM小鼠體重13-15g每組20只(二)試驗方法選取健康小鼠，每組20只，雌雄各半，于試驗前一天給藥，然后用流感強毒進行攻擊，觀察攻擊后動物死亡率，以確定藥物對動物的保護作用。
(三)結(jié)果動物感染流感強毒后，保護率見表3表3 IFN-PDS合劑不同劑量抗流感病毒感染的效果

上述結(jié)果可見IFN與PDS合用后，對動物保護作用非常好，與目前市場常用的抗病毒特效藥利巴韋林療效相當(dāng)，明顯高于對照組(未服藥，只攻擊病毒)的保護力，說明本發(fā)明抗病毒效果是肯定的，有效的。
權(quán)利要求
1.重組人干擾素-人參二醇皂甙(IFN-PDS)合劑的配方包含重組人干擾素α，含量200-1×106IU/ml；人參二醇皂甙含量0.04-0.1g/片黏膜吸收促進劑濃度為5-20％保護劑濃度為8-15％緩釋劑濃度為1-10％緩沖液PH為6.5-8.5
2.權(quán)利要求1的配方，其中黏膜吸收促進劑為?；撬?br> 3.權(quán)利要求1的配方，其中保護劑為人血白蛋白
4.權(quán)利要求1的配方，其中緩釋劑為聚乙烯醇
5.緩沖液為磷酸緩沖生理鹽水
6.權(quán)利要求1-5的配方在制備預(yù)防和治療呼吸道病毒感染性疾病的片劑制劑中的應(yīng)用
7.權(quán)利要求6的應(yīng)用，其中呼吸道病毒感染性疾病為病毒性感冒，SARS病毒感染，扁桃體炎。
全文摘要
本發(fā)明提供了預(yù)防和治療人上呼吸道病毒感染的固體制劑。本發(fā)明的制劑是一種重組人干擾素(IFN)原液與人參二醇皂甙(PDS)組合后再配以適當(dāng)?shù)姆罅现瞥傻墓腆w制劑，該制劑的適應(yīng)癥為預(yù)防和治療呼吸道病毒感染性疾病，如病毒性感冒、SARS病、扁桃體炎等。
文檔編號A61K9/22GK1596973SQ20041007070
公開日2005年3月23日 申請日期2004年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月21日
發(fā)明者程曉耕, 趙學(xué)儉, 遲寶琦, 張淑潔, 王曉宇, 朱燕, 吉海濱, 賈國富, 曹杰 申請人:長春生物制品研究所