專利名稱：一種用于防治奶牛乳腺炎的殺菌制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種殺菌制劑，尤其涉及一種含有抗菌肽的用以防治奶牛乳腺炎的殺菌制劑。
背景技術(shù)：
奶牛業(yè)和牛奶食品加工業(yè)是畜牧業(yè)水平的重要標(biāo)志，而奶牛乳腺炎卻一直是困擾奶牛業(yè)發(fā)展的主要難題。我國(guó)奶牛乳腺炎的發(fā)生率達(dá)20-70％，個(gè)別牛群發(fā)病率更高。奶牛乳腺炎造成的經(jīng)濟(jì)損失包括獸醫(yī)治療花費(fèi)高、產(chǎn)量下降、奶牛過(guò)早淘汰、牛奶品質(zhì)差等。奶牛乳腺炎由金黃色葡萄球菌，大腸桿菌和鏈球菌等細(xì)菌感染引起，國(guó)內(nèi)外常以大劑量的抗生素(如青霉素、鏈霉素、慶大霉素、氯霉素、新霉素等)治療奶牛乳腺感染，抗生素雖有一定的療效，但由于上述致病菌大都產(chǎn)生了耐藥性菌株，因此，療效并不明顯。反而造成牛奶中抗生素殘留，將這些牛所產(chǎn)生的奶混入食用牛奶造成的后果是嚴(yán)重的。聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)和世界衛(wèi)生組織(WHO)都建議，在奶牛接受抗生素治療停藥后至少3天內(nèi)擠出的奶汁，不直接作為食用的奶原料(最好要停藥5-7天)。而目前世界上對(duì)付乳腺炎除了使用抗生素別無(wú)它藥。
因此，研制高效、安全的新藥代替目前普遍使用的抗生素是防治奶牛乳腺炎的重要課題。
美國(guó)專利US 5762948公開(kāi)了一種預(yù)防和治療奶牛乳腺感染的濕巾，其成分以一種抗菌肽nisin為主，輔以酒精等其他抗菌成分。該濕巾能去除引起乳腺感染的各種致病菌，但對(duì)耐藥性金黃色葡萄球菌的效果不明顯。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問(wèn)題之一是提供一種用于防治奶牛乳腺炎的殺菌制劑，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。
本發(fā)明需要解決的另一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供一種殺菌制劑的制備方法。
本發(fā)明需要解決的再一個(gè)技術(shù)問(wèn)題公開(kāi)所述殺菌制劑在制備治療奶牛乳腺炎的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的發(fā)明構(gòu)思是這樣的抗菌肽是生物體經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽，一般由20-60個(gè)氨基酸組成，分子量在2000-7000D左右。隨著醫(yī)學(xué)免疫學(xué)和分子生物學(xué)的迅速發(fā)展，抗菌肽的研究越來(lái)越成為生物技術(shù)與生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的熱門(mén)課題。至今為止，在許多動(dòng)物(尤其是昆蟲(chóng))、植物、微生物和人體上已發(fā)現(xiàn)了超過(guò)200多種抗菌肽，這類短肽不僅對(duì)細(xì)菌、真菌有廣譜的殺菌作用，而且對(duì)病毒、原蟲(chóng)及癌細(xì)胞也有攻擊作用。臨床試驗(yàn)也表明，在機(jī)體感染病菌或可能導(dǎo)致病菌感染的情況下，抗菌肽能快速殺滅已侵入的病菌，并且能阻止病菌的繼續(xù)侵染。
具有殺菌作用的酶，特別是溶葡萄球菌酶(lysostaphin)，一種含鋅的金屬蛋白酶，專一降解細(xì)胞壁的甘氨酸肽鍵，能裂解金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁，從而起到徹底殺死細(xì)菌的目的，不易產(chǎn)生耐藥性，尤其對(duì)耐藥性金黃色葡萄球菌等難以根除的致病菌的效果非常好。
發(fā)明人將抗菌肽GK和溶葡萄球菌酶進(jìn)行復(fù)配，抗菌肽GK對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌都有殺滅作用，拓寬了殺菌譜，而加入溶葡萄球菌酶對(duì)耐藥性金黃色葡萄球菌等難以根除的致病菌有很好的殺菌效果。兩種都屬于蛋白質(zhì)，沒(méi)有刺激也不會(huì)產(chǎn)生任何毒副作用，同時(shí)由于生產(chǎn)成本低，價(jià)格不貴。
消除和控制奶牛乳腺感染較有效的辦法是殺滅引起感染的各種細(xì)菌，特別是乳區(qū)的各種致病菌，不但引起自身的乳腺感染，同時(shí)還會(huì)傳染給其它的奶牛。發(fā)明人經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，將抗菌肽GK和溶葡萄球菌酶按一定比例復(fù)配，可以簡(jiǎn)便有效的殺滅奶牛乳區(qū)的各種致病菌，消除感染，同時(shí)還能起到防止復(fù)發(fā)和預(yù)防的作用。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣的一種殺菌制劑，包括一種或一種以上的抗菌肽GK和抗菌有效量的酶，所述及的酶包括溶菌酶或溶葡萄球菌酶中的一種或一種以上，溶葡萄球菌酶的含量以總量計(jì)為0.0001～0.1wt％，所述及的抗菌肽的含量為0.0001～0.01wt％；所述的殺菌制劑還包括穩(wěn)定劑，所述及的穩(wěn)定劑是聚乙二醇或殼聚糖中的一種，含量為1～15％。
一種殺菌制劑，包括溶葡萄球菌酶0.0001～0.1wt％，抗菌肽GK0.0001～0.01wt％，穩(wěn)定劑1～15wt％，表面活性劑0.1～0.5wt％，水余量。
有關(guān)抗菌肽GK，詳見(jiàn)本發(fā)明人在2002年9月2日申報(bào)的發(fā)明專利，發(fā)明名稱為一組合成抗菌肽，申請(qǐng)?zhí)枮?2136766.3。
穩(wěn)定劑的主要作用是保持酶和抗菌肽在水溶液狀態(tài)下的穩(wěn)定性，即保持它們的活性。
所述及的殺菌制劑的制備方法包括如下步驟按上述比例稱取酶、抗菌肽GK，穩(wěn)定劑與水混合。
本發(fā)明的制劑用于制備治療奶牛乳腺炎的藥物，可以乳房?jī)?nèi)注射，其劑量可根據(jù)奶牛的年齡、病情決定，一般為每日兩次?？梢詺缫鹉膛Ｈ橄俑腥镜母鞣N細(xì)菌，包括革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌。特別是大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌和化膿棒狀桿菌?？梢灾委熡蛇@些細(xì)菌引起的各種乳腺炎。
也可以將上述的殺菌制劑負(fù)載于載體上，載體包括無(wú)紡材料或棉紗布，用于產(chǎn)奶前、后通過(guò)涂抹或擦拭奶牛乳區(qū)，進(jìn)行消毒，保證乳區(qū)的清潔，減少感染的可能性。
殺菌制劑通過(guò)體外殺菌試驗(yàn)，證明它對(duì)引起奶牛乳腺感染的主要病原菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、化膿棒狀桿菌的殺菌效果十分理想，殺滅率均超過(guò)99％。
殺菌制劑對(duì)昆明小白鼠的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，動(dòng)物經(jīng)肌注7天后，無(wú)異常反應(yīng)，活動(dòng)正常。經(jīng)7天觀察，60只小白鼠全部存活。證明無(wú)毒性作用。
殺菌制劑對(duì)SD大鼠陰道黏膜刺激試驗(yàn)，參照消毒技術(shù)規(guī)范(第三版)1999.11中皮膚刺激反應(yīng)強(qiáng)度的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分及皮膚刺激強(qiáng)度分級(jí)，進(jìn)行對(duì)陰道黏膜刺激強(qiáng)度的評(píng)定。結(jié)果表明，殺菌制劑對(duì)大鼠陰道黏膜刺激反應(yīng)最高總積分均值為0，屬無(wú)刺激性。
殺菌制劑對(duì)乳區(qū)急性感染的治療試驗(yàn)，并用青霉素G鉀和鏈霉素作為對(duì)照，給藥7天后，結(jié)果表明，殺菌制劑能有效殺滅引起乳腺感染的各種病原菌，尤其對(duì)金黃色葡萄球菌特別有效，而兩種抗生素則不能有效的去除乳區(qū)的病原菌。
殺菌制劑預(yù)防乳腺感染的試驗(yàn)，可以看出，殺菌制劑能有效的預(yù)防奶牛乳區(qū)受到細(xì)菌感染，可以保持乳區(qū)的清潔。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1殺菌濕巾的制備1.配制100g殺菌制劑，其中溶葡萄球菌酶含量0.001g(0.001wt％)，抗菌肽GK-2(見(jiàn)申請(qǐng)?zhí)枮?2136766.3的發(fā)明專利申請(qǐng)文件)含量0.001g(0.001wt％)，聚乙二醇含量3g(3％)，水余量。
2.對(duì)桌面、儀器、器皿、配料桶消毒。
3.在電子天平上準(zhǔn)確稱取溶葡萄球菌酶、抗菌肽GK-2、聚乙二醇，置于配料桶中，按比例加水76.80g，攪拌均勻，并加熱至60℃溶解，即為所需殺菌制劑。
實(shí)施例2殺菌制劑體外殺菌試驗(yàn)1、試驗(yàn)樣品的制備(1)殺菌制劑按實(shí)施例1的方法制備，其中溶葡萄球菌酶含量0.001wt％，抗菌肽GK-2含量0.001wt％，聚乙二醇含量3％。
(2)對(duì)照制劑其中聚乙二醇含量3％。
將(1)(2)的制劑進(jìn)行如下處理將無(wú)紡布剪裁成8cm×8cm，經(jīng)過(guò)紫外光消毒20分鐘后，浸入上述溶液中，待浸透后撈出，滴去多余溶液，即可使用。
2、試驗(yàn)菌株金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、大腸桿菌和化膿棒狀桿菌(以上菌株來(lái)自于沈陽(yáng)軍區(qū)軍馬防治研究所)。
3、試驗(yàn)步驟(1)將培養(yǎng)好的試驗(yàn)菌株用1％蛋白胨PBS洗下新鮮斜面，并稀釋到適宜濃度，在107～108cfu/ml。
(2)將樣品制劑和對(duì)照制劑制成1×3cm大小，并放置在無(wú)菌平皿中。
(3)取20ul菌液滴加到制劑上，涂抹均勻同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)。
(4)作用到預(yù)定時(shí)間后用無(wú)菌鑷子將制劑投入含5ml中和劑的試管中，充分振蕩混勻。
(5)對(duì)照制劑投入中和劑試管，充分振蕩后做適當(dāng)稀釋。
(6)取終液0.5ml進(jìn)行傾注平板，37恒溫倒置培養(yǎng)48小時(shí)。
(7)計(jì)算對(duì)照回收菌量及樣品回收菌量，得出殺滅率。
4、試驗(yàn)結(jié)果表1殺菌濕巾體外殺菌試驗(yàn)殺滅率結(jié)果試驗(yàn)菌株 殺菌制劑 對(duì)照制劑大腸桿菌 99.92％0金黃色葡萄球菌99.98％0無(wú)乳鏈球菌99.92％0停乳鏈球菌99.97％0乳房鏈球菌99.56％0化膿棒狀桿菌 99.46％0實(shí)施例3殺菌制劑體外殺菌試驗(yàn)1、試驗(yàn)樣品的制備(1)殺菌制劑樣品按實(shí)施例1的方法制備，其中溶葡萄球菌酶含量0.001wt％，抗菌肽GK-3含量0.001wt％，聚乙二醇含量3％。
(2)對(duì)照制劑其中聚乙二醇含量3％。
2、試驗(yàn)菌株金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、大腸桿菌和化膿棒狀桿菌(以上菌株來(lái)自于沈陽(yáng)軍區(qū)軍馬防治研究所)。
3、試驗(yàn)步驟按實(shí)施例2進(jìn)行。
4、試驗(yàn)結(jié)果表2殺菌制劑體外殺菌試驗(yàn)殺滅率結(jié)果試驗(yàn)菌株殺菌制劑 對(duì)照制劑大腸桿菌99.95％0金黃色葡萄球菌 99.97％0無(wú)乳鏈球菌 99.95％0停乳鏈球菌 99.98％0乳房鏈球菌 99.62％0化膿棒狀桿菌99.67％0實(shí)施例4動(dòng)物體內(nèi)急性毒性試驗(yàn)1、樣品的制備按實(shí)施例1中的方法配制殺菌制劑其中其中溶葡萄球菌酶含量0.01wt％，抗菌肽GK-1含量0.001wt％，聚乙二醇含量5％。
2、試驗(yàn)動(dòng)物采用昆明小白鼠60只，雌雄各半，體重33.5±0.25g，由復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。
3、試驗(yàn)方法每日一次連續(xù)7天經(jīng)肌注小白鼠，觀察動(dòng)物在最大劑量下毒性反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，動(dòng)物經(jīng)肌注7天后，無(wú)異常反應(yīng)，活動(dòng)正常。經(jīng)7天觀察，60只小白鼠全部存活。證明無(wú)毒性作用。
實(shí)施例5殺菌制劑對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物陰道黏膜刺激試驗(yàn)1、樣品制備殺菌制劑的制備方法參照實(shí)施例1，其中其中溶葡萄球菌酶含量0.01wt％，抗菌肽GK-3含量0.011wt％，聚乙二醇含量5％。
2、試驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，雌性，普通級(jí)，18只，體重230克-250克，隨機(jī)分三組，殺菌制劑組、賦形劑組和空白對(duì)照組，每組6只，由復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。
3、試驗(yàn)方法參照消毒技術(shù)規(guī)范(第三版)1999.11中的3.8條。將殺菌制劑置動(dòng)物陰道內(nèi)，與陰道黏膜接觸4小時(shí)。賦形劑組用棉條0.01克浸以滅菌生理鹽水作同樣的試驗(yàn)?？瞻讓?duì)照組不做任何處理。于24小時(shí)處死動(dòng)物，取出局部陰道組織，觀察有無(wú)充血、水腫現(xiàn)象。參照消毒技術(shù)規(guī)范(第三版)1999.11中皮膚刺激反應(yīng)強(qiáng)度的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分及皮膚刺激強(qiáng)度分級(jí)，進(jìn)行對(duì)陰道黏膜刺激強(qiáng)度的評(píng)定。
4、試驗(yàn)結(jié)果表3殺菌制劑對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物陰道黏膜刺激試驗(yàn)刺激反應(yīng)評(píng)分組別動(dòng)物數(shù)(只)紅斑 水腫 總分殺菌制劑組60 0 0賦形劑組 60 0 0空白對(duì)照組60 0 0殺菌制劑對(duì)大鼠陰道黏膜刺激反應(yīng)最高總積分均值為0，屬無(wú)刺激性。
實(shí)施例6殺菌制劑對(duì)乳區(qū)急性感染的治療試驗(yàn)1、樣品準(zhǔn)備殺菌制劑的制備制備方法按實(shí)施例1，其中其中溶葡萄球菌酶含量0.008wt％，抗菌肽GK含量0.002wt％，聚乙二醇含量2％。用G-6垂熔玻璃濾器過(guò)濾滅菌，密封于安瓶中，置4冰箱中保存。
青霉素G鉀80萬(wàn)單位，華北制藥廠硫酸鏈霉素100萬(wàn)單位，華北制藥廠2、試驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備選擇泌乳期的4-8歲青、壯年高產(chǎn)、黑白花奶牛，共20頭，急性乳腺感染引發(fā)炎癥，，其癥狀為乳房腫脹，牛奶異常有凝塊，絮片或者以后有絮片。但是沒(méi)有疼痛，沒(méi)有其它癥狀。隨機(jī)分為4小組，1小組為殺菌制劑治療組，2小組為青霉素G鉀治療組，3小組為鏈霉素治療組，4小組為空白對(duì)照組。
3、試驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)方法治療組殺菌制劑治療組中第1組為一次給藥，按40ml的劑量每一患乳區(qū)，乳房?jī)?nèi)一次注入，2、3小組每天早晚各一次，于擠干乳后，按青霉素10萬(wàn)單位，鏈霉素10萬(wàn)單位乳房?jī)?nèi)注射給藥。4小組對(duì)照組，不進(jìn)行任何治療，給藥7天。
4、觀察指標(biāo)(1)痊愈臨床乳腺炎的癥狀全部消失，乳房組織柔軟，牛奶里沒(méi)有凝塊，牛奶的顏色和平時(shí)一樣白。
有效臨床乳腺炎癥狀減輕，或者不再惡化，牛奶正常，但乳房腫脹沒(méi)有完全消失。
(2)細(xì)菌學(xué)檢測(cè)對(duì)治療前、后感染乳區(qū)的病原菌進(jìn)行分離、培養(yǎng)、鑒定，其中因?yàn)槟膛Ｈ橄俑腥疽源竽c桿菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、化膿棒狀桿菌六種細(xì)菌為主，故本檢測(cè)試驗(yàn)以上述六種細(xì)菌為主。具體操作步驟如下A、采樣同常規(guī)無(wú)菌采樣進(jìn)行，用10ml試管，每頭牛每個(gè)乳區(qū)采集5-7ml鮮乳，注意的是前2-3把乳棄之不要，作好標(biāo)記，盡可能快的放入4℃冰箱中保存。
B、培養(yǎng)、分離培養(yǎng)同常規(guī)進(jìn)行，溫度37℃，相對(duì)溫度在50％以上。所用培養(yǎng)基主要有7％綿羊血瓊脂；加入1％七葉甙的綿羊湯瓊脂；卻浦曼瓊脂；疊氮鈉結(jié)晶紫血瓊脂；肉流培養(yǎng)基等。(以上培養(yǎng)基來(lái)自沈陽(yáng)軍區(qū)軍馬防治研究所)C、鑒定金黃色葡萄球菌的鑒定采用試管法和玻片法進(jìn)行，利用枸櫞酸兔血漿凝固實(shí)驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定。
鏈球菌的鑒定采用Camp試驗(yàn)進(jìn)行，Camp試驗(yàn)陽(yáng)性而七葉甙為陰性者即是無(wú)乳鏈球菌，Camp試驗(yàn)陽(yáng)性而七葉甙為陽(yáng)性者即是乳房鏈球菌，Camp試驗(yàn)陰性七葉甙也為陰性者即是停乳鏈球菌。
大腸桿菌的鑒定采用伊紅美蘭培養(yǎng)基分離培養(yǎng)以及進(jìn)行V、P試驗(yàn)和M、R試驗(yàn)，V、P試驗(yàn)陰性，M、R試驗(yàn)陽(yáng)性者為大腸桿菌。
化膿棒狀桿菌的鑒定采用血瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)，36小時(shí)后，如見(jiàn)有直徑約1-2cm，圖形、凸起、乳白色、表面光滑有光澤，并出現(xiàn)β瓊血圈的小菌落者，即為化膿棒狀桿菌。
5、試驗(yàn)結(jié)果表4殺菌制劑對(duì)乳區(qū)急性感染的治療試驗(yàn)結(jié)果殺菌制劑組 青霉素G鉀組 鏈霉素組 空白對(duì)照組臨床 痊愈(頭數(shù))4 2 1 0表現(xiàn) 有效(頭數(shù))1 2 2 0病原 大腸桿菌 99.8 97.192.2 0菌殺滅率(％)
金黃色葡萄球菌 99.863.3 43.2 0無(wú)乳鏈球菌 99.585.2 86.3 0停乳鏈球菌 99.378.2 86.4 0乳房鏈球菌 99.188.6 91.3 0化膿棒狀桿菌99.478.5 87.9 0從上表中可以看出，殺菌制劑能有效殺滅引起乳腺感染的各種病原菌，尤其對(duì)金黃色葡萄球菌特別有效，而兩種抗生素則不能有效的去除乳區(qū)的病原菌。
實(shí)施例7殺菌制劑預(yù)防乳腺感染的試驗(yàn)1、樣品準(zhǔn)備殺菌制劑的制備制備方法按實(shí)施例1，其中其中溶葡萄球菌酶含量0.002wt％，抗菌肽GK-2含量0.002wt％，聚乙二醇含量3％，聚梨山醇酯20含量0.2wt％。
將制劑進(jìn)行如下處理將無(wú)紡布剪裁成8cm×8cm，經(jīng)過(guò)紫外光消毒20分鐘后，浸入上述溶液中，待浸透后撈出，滴去多余溶液，即可使用。
碘消靈溶液100ml，浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)。
采樣液1％蛋白胨，0.5％硫代硫酸鈉，2％吐溫-80，0.5％卵磷脂的PBS，每管10ml。
2、試驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備選擇泌乳期的4-8歲青、壯年高產(chǎn)、黑白花奶牛，正常無(wú)任何感染癥狀，共3頭，1小組為殺菌制劑預(yù)防組，2小組為碘消靈組，3小組為空白對(duì)照組。
3、試驗(yàn)方法將一支無(wú)菌棉拭沾濕采樣液采乳區(qū)，檢測(cè)乳區(qū)每個(gè)采樣樣本的自然菌落數(shù)。1小組用殺菌制劑擦拭原采樣的鄰近部位后，1分鐘，30分鐘，2小時(shí)，各采一次樣；2小組方法同1小組，檢測(cè)作用后殘留的自然菌數(shù)，計(jì)算作用前后的自然菌殺滅率。
4、試驗(yàn)結(jié)果表5殺菌制劑預(yù)防乳區(qū)感染的試驗(yàn)結(jié)果殺滅率(％)殺菌制劑組碘消靈組空白對(duì)照組1分鐘后 99.9 94.213.5
30分鐘后 99.1 91.115.22小時(shí)后 98.4 62.314.6從上述試驗(yàn)可以看出，殺菌制劑能有效的預(yù)防奶牛乳區(qū)受到細(xì)菌感染，可以保持乳區(qū)的清潔。
權(quán)利要求
1.一種殺菌制劑，其特征在于，包括一種或一種以上的抗菌肽GK和抗菌有效量的酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殺菌制劑，其特征在于，所述及的酶包括溶菌酶或溶葡萄球菌酶中的一種或一種以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的殺菌制劑，其特征在于，所述及的溶葡萄球菌酶的含量以總量計(jì)為0.0001～0.1wt％。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的殺菌制劑，其特征在于，所述及的抗菌肽的含量以總量計(jì)為0.0001～0.01wt％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的殺菌制劑，其特征在于，所述的殺菌制劑還包括穩(wěn)定劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的殺菌制劑，其特征在于，所述及的穩(wěn)定劑是聚乙二醇或殼聚糖中的一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的殺菌制劑，其特征在于，所述及的穩(wěn)定劑含量以總量計(jì)為1～15％。
8.一種殺菌制劑，其特征在于包括抗菌肽GK0.0001～0.01wt％，溶葡萄球菌酶0.0001～0.1wt％，穩(wěn)定劑1～15wt％，水余量。
9.一種殺菌制劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟按比例稱取酶、抗菌肽GK，穩(wěn)定劑與水混合。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的殺菌制劑的制備方法，其特征在于，所述及的酶包括溶菌酶或溶葡萄球菌酶中的一種或一種以上。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的殺菌制劑的制備方法，其特征在于，所述及的穩(wěn)定劑是聚乙二醇或殼聚糖中的一種。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一所述的殺菌制劑在制備治療奶牛乳腺炎的藥物中的應(yīng)用。
13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的殺菌制劑的應(yīng)用，其特征在于，所述及的藥物用于奶牛乳房?jī)?nèi)注射。
14.根據(jù)權(quán)利要求10所述的殺菌制劑的應(yīng)用，其特征在于，所述及的藥物外用于奶牛乳區(qū)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種殺菌制劑，含有抗菌肽，溶葡萄球菌酶，穩(wěn)定劑。本發(fā)明還公開(kāi)了該殺菌制劑的制備方法和在治療和預(yù)防奶牛乳腺感染中的應(yīng)用，可以乳房?jī)?nèi)注射，也可以將上述殺菌制劑負(fù)載于載體上，外用于奶牛的乳區(qū)。本發(fā)明提供的殺菌制劑用于殺滅引起奶牛乳腺感染的各種細(xì)菌，取得十分顯著的效果，尤其對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、化膿棒狀桿菌的殺滅率均超過(guò)99％，能有效的治療和預(yù)防奶牛乳腺炎。
文檔編號(hào)A61P15/00GK1520881SQ03115388
公開(kāi)日2004年8月18日 申請(qǐng)日期2003年2月13日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月13日
發(fā)明者黃青山 申請(qǐng)人:上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司