表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(egcg)在制備豬飼料添加劑方面的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于飼料添加劑技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，涉及表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯 (EGCG)在制備豬飼料添加劑方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 飼料添加劑是為了某些特殊需要，人為地在各種配合或混合飼料中加入的具有不 同用途的物質(zhì)，其作用是完善和強(qiáng)化飼料的營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)豬生長(zhǎng)發(fā)育、預(yù)防疾病、提高飼料的 利用率和肉產(chǎn)品的質(zhì)量等。隨著動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)、生理學(xué)、飼養(yǎng)學(xué)、生物化學(xué)、生物工程學(xué)、藥理 學(xué)、微生物學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，現(xiàn)在的飼料添加劑已經(jīng)融合了各門(mén)學(xué)科和多種技術(shù)，其功能、 種類(lèi)和應(yīng)用得到了巨大的拓展。
[0003] 另一方面，隨著生活水平的提高，消費(fèi)者對(duì)豬肉健康性有了更高的要求，通過(guò)飼料 添加劑途徑，可改變肌肉纖維的類(lèi)型，減少紅肉的比例，從而提高肉品的健康性。因此，開(kāi)發(fā) 研宄新的飼料添加劑非常重要，以保證實(shí)現(xiàn)在確保畜產(chǎn)品的質(zhì)量安全的同時(shí)有效提高動(dòng)物 肉品的健康性。
[0004] 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸醋（Epigallocatechin gallate，EGCG)是茶多酷中最有 效的活性成分，屬于兒茶素。EGCG具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗動(dòng)脈硬化、抗血栓形成、抗血 管增生、抗炎以及抗腫瘤等作用。目前有關(guān)EGCG對(duì)豬骨骼肌纖維類(lèi)型影響的相關(guān)研宄尚屬 空白，無(wú)相關(guān)技術(shù)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有改善豬肉健康性的豬飼料添加劑的不足，提 供EGCG在制備改變豬骨骼肌纖維類(lèi)型的飼料添加劑方面的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)將EGCG加入 豬飼料中，可降低豬骨骼肌I型肌纖維的比例，降低紅肉的含量的飼料添加劑，是EGCG的一 種新的應(yīng)用，拓寬了 EGCG的應(yīng)用范圍。
[0006] 本發(fā)明的目的是提供表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（EGCG)在制備豬飼料添加劑方 面的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種新的包含EGCG的豬飼料。
[0008] 本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供所述新的包含EGCG的豬飼料的制備方法。
[0009] 本發(fā)明上述目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)： 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（EGCG)在作為豬飼料添加劑或在制備豬飼料添加劑方面 的應(yīng)用。
[0010] 具體地，是應(yīng)用于制備改變豬骨骼肌纖維類(lèi)型的飼料添加劑。
[0011] 更具體地，是應(yīng)用于制備降低豬骨骼肌I型肌纖維的比例的飼料添加劑，以及應(yīng) 用于制備降低豬骨骼肌中紅肉的比例的飼料添加劑。
[0012] 本發(fā)明經(jīng)過(guò)大量動(dòng)物飼養(yǎng)試驗(yàn)和分子生物學(xué)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在豬的基礎(chǔ)日糧中添加 EGCG，能夠顯著降低豬骨骼肌I型肌纖維的比例，降低紅肉的含量。
[0013] 另外，EGCG可以應(yīng)用于制備能夠降低MyHCI蛋白表達(dá)的制劑，應(yīng)用于制備能夠降 低MyHC I mRNA的表達(dá)的制劑，應(yīng)用于制備能夠降低線粒體合成相關(guān)基因 PGC-I a、mtTFA 和NRF-I的蛋白表達(dá)的制劑。
[0014] -種新的豬飼料，包括EGCG和常規(guī)的飼料原料。優(yōu)選地，所述EGCG在豬飼料中的 含量是：〇. 1~2kg/噸豬飼料。
[0015] 更優(yōu)選地，所述EGCG在豬飼料中的含量是：0. 1~0. 5kg/噸豬飼料。
[0016] 最優(yōu)選地，所述EGCG在豬飼料中的含量是：0. 5kg/噸豬飼料。
[0017] 作為一種可實(shí)施方案，所述豬飼料包含EGCG、飼料預(yù)混原料和全價(jià)飼料原料；或 者包含EGCG、吸附載體和全價(jià)飼料原料。
[0018] 其中，所述飼料預(yù)混原料參照常規(guī)，可優(yōu)選為維生素或礦物質(zhì)預(yù)混料；所述全價(jià)飼 料原料均參照常規(guī)，優(yōu)選為玉米、豆柏、魚(yú)粉或其它雜柏型日糧；所述吸附載體可以是本領(lǐng) 域常用的載體，優(yōu)選為麩皮、玉米粉或石粉等。
[0019] 作為一種優(yōu)選地可實(shí)施方案，所述豬飼料由質(zhì)量比為0. 01~0. 05%的EGCG、4%的 飼料預(yù)混原料和95. 95~95. 99%的全價(jià)飼料原料組成，或者由質(zhì)量比為0. 01~0. 05%的 EGCG、4%的吸附載體和95. 95~95. 99%的全價(jià)飼料原料組成。
[0020] 上述豬飼料的制備方法包括如下步驟： 51. 按照質(zhì)量比，將EGCG與飼料預(yù)混原料進(jìn)行混合得到預(yù)混料，或?qū)GCG與吸附載體 進(jìn)行混合得到預(yù)混劑； 52. 將步驟Sl混合得到的預(yù)混料或預(yù)混劑與全價(jià)飼料原料進(jìn)行混合，得到所述豬飼 料。
[0021] 其中，步驟Sl可采用常規(guī)的小型混合設(shè)備進(jìn)行混合；步驟S2所述；預(yù)混料或預(yù)混 劑與全價(jià)飼料原料進(jìn)行混合可采用常規(guī)的大型混合粉碎設(shè)備。
[0022] 本發(fā)明具有以下有益效果： (1)本發(fā)明提供了 EGCG的一種重要的新應(yīng)用。本發(fā)明首次公開(kāi)EGCG能夠顯著降低豬 骨骼肌I型肌纖維的比例，降低紅肉的含量，可作為或制備一種豬飼料添加劑，對(duì)提高豬肉 健康性具有重要意義。
[0023] (2)本發(fā)明提供了一種新的豬飼料，添加了 EGCG的豬飼料是一種安全的飼料，它 不含有對(duì)豬群生長(zhǎng)和豬群健康有毒有害的物質(zhì)。與一般的飼料添加劑相比，它不僅能夠降 低豬骨骼肌I型肌纖維的比例，降低紅肉的含量，提高豬肉的健康性，而且EGCG是從中國(guó) 綠茶中提取的一種成份，它是綠茶主要的活性和水溶性成份，是兒茶素中含量最高的組分。 EGCG具有非常強(qiáng)的抗氧化活性，抗氧化活性至少是維生素 C的100多倍，是維生素 E的25 倍，能夠保護(hù)細(xì)胞和DNA受損害，不會(huì)對(duì)人和周?chē)h(huán)境產(chǎn)生有害影響。
[0024] (3)本發(fā)明公開(kāi)的EGCG作為主飼料添加劑，添加量較少，可以直接加入預(yù)混料中， 添加過(guò)程方便快捷，制備方法簡(jiǎn)單，沒(méi)有特殊設(shè)備要求，具有很好的推廣應(yīng)用前景。
【附圖說(shuō)明】
[0025] 圖1為EGCG對(duì)豬背最長(zhǎng)肌纖維比例的影響。
[0026] 圖2為EGCG對(duì)豬背最長(zhǎng)肌肌球蛋白重鏈表達(dá)的影響。
[0027] 圖3為EGCG對(duì)豬背最長(zhǎng)肌線粒體生物合成相關(guān)基因表達(dá)的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 以下結(jié)合說(shuō)明書(shū)附圖和具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明 做任何形式的限定。除非特別說(shuō)明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)試 劑、方法和設(shè)備。
[0029] 除非特別說(shuō)明，以下實(shí)施例所用試劑和材料均為市購(gòu)。
[0030] 實(shí)施例1制備包含EGCG的豬飼料 1、制備 (1)可采用常規(guī)的小型混合設(shè)備，將EGCG與飼料預(yù)混原料進(jìn)行混合得到預(yù)混料，或與 載體進(jìn)行混合制成預(yù)混劑。
[0031] 所述飼料預(yù)混原料為維生素或礦物質(zhì)預(yù)混料；所述載體為麩皮或玉米粉等；所述 飼料預(yù)混原料和載體的用量參照常規(guī)。
[0032] (2)采用常規(guī)的大型混合粉碎設(shè)備，將步驟（1)混合得到的預(yù)混料或預(yù)混劑與全價(jià) 飼料原料進(jìn)行混合，制得全價(jià)飼料。
[0033] 所述全價(jià)飼料原料為粉碎的玉米、豆柏、魚(yú)粉或其它雜柏型日糧。
[0034] 2、本實(shí)施例制備的豬飼料，各配方百分比組成如表1所示：
實(shí)施例2 EGCG對(duì)肥育豬肌纖維類(lèi)型的影響 以實(shí)施例1的配方2和配方3作為豬飼料開(kāi)展實(shí)驗(yàn) 1、為了研宄EGCG對(duì)豬骨骼肌纖維類(lèi)型的影響，選擇70公斤左右三元雜肥育豬180頭， 按照體重接近、公母各半的比例隨機(jī)分成3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭。
[0035] 試驗(yàn)組：分別飼喂在基礎(chǔ)日糧中分別添加配方2和配方3的全價(jià)飼料。
[0036] 對(duì)照組，伺喂基礎(chǔ)日糧。
[0037] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (1)飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，選擇處于平均體重左右的豬18頭(每個(gè)重復(fù)一頭)，屠宰，采集背 最長(zhǎng)肌。利用ATP酶染色法檢測(cè)EGCG對(duì)不同肌纖維類(lèi)型（I型、IIa型和IIb型）比例的影 響，結(jié)果如附圖1所示。
[0038] 由附圖1可知，與對(duì)照組相比，0. 025% EGCG組和0. 05% EGCG組能一定程度上降低 背最長(zhǎng)肌中I型肌纖維分型的比例。
[0039] (2)同時(shí)利用定量PCR法和western blot法檢測(cè)EGCG對(duì)不同類(lèi)型肌球蛋白重鏈 (MyHCI和MyHCII)的mRNA和蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果如附圖2所示。
[0040] 從附圖2A可知，0.025% EGCG和0.05% EGCG可顯著降低MyHCI的蛋白表達(dá)，而對(duì) MyHCII的蛋白表達(dá)無(wú)顯著影響。同時(shí)，0.025%、0. 05% EGCG還能夠顯著降低MyHC I mRNA 的表達(dá)（圖2B)。
[0041] (3)最后，還檢測(cè)了 EGCG對(duì)線粒體合成相關(guān)基因表達(dá)的影響，結(jié)果如附圖3所示。
[0042] 從附圖3可知，日糧中添加0.5Kg EGCG/噸能顯著降低線粒體合成相關(guān)基因 PGC-I a、mtTFA和NRF-I蛋白的表達(dá)；日糧中添加0. 25Kg EGCG/噸能顯著降低線粒體合成 相關(guān)基因 PGC-I α和mtTFA蛋白的表達(dá)。
[0043] 綜上所述，試驗(yàn)結(jié)果表明，在豬的日糧中添加 EGCG、添加包含EGCG的添加劑或配 合飼喂包含EGCG的飼料，可以通過(guò)降低肌肉線粒體合成基因的表達(dá)來(lái)降低I型肌纖維類(lèi)型 的比例，降低紅肉含量，提高肉品健康性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯EGCG在作為豬飼料添加劑或在制備豬飼料添加劑方面 的應(yīng)用。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，是應(yīng)用于制備改變豬骨骼肌纖維類(lèi)型的飼 料添加劑。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述應(yīng)用，其特征在于，是應(yīng)用于制備降低豬骨骼肌I型肌纖維的比 例和/或降低豬骨骼肌中紅肉的比例的飼料添加劑。4. 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯EGCG在制備能夠降低MyHCI蛋白表達(dá)、降低線粒體合成 相關(guān)基因PGC-Ia、mtTFA和NRF-I的蛋白表達(dá)的制劑中的應(yīng)用。5. -種豬飼料，其特征在于，含有EGCG。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述豬飼料，其特征在于，所述EGCG在所述豬飼料中的含量是： 0. 1~2kg/噸豬飼料。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述豬飼料，其特征在于，包含EGCG、飼料預(yù)混原料和全價(jià)飼料原 料；或者包含EGCG、吸附載體和全價(jià)飼料原料。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述豬飼料，其特征在于，所述飼料預(yù)混原料為維生素或礦物質(zhì)預(yù) 混料；所述全價(jià)飼料原料均為玉米、豆柏、魚(yú)粉或其它雜柏型日糧；所述吸附載體為麩皮、 玉米粉或石粉。9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述豬飼料，其特征在于，由質(zhì)量比為0. 01~0. 05%的EGCG、4%的 飼料預(yù)混原料和95. 95~95. 99%的全價(jià)飼料原料組成，或者由質(zhì)量比為0. 01~0. 05%的 EGCG、4%的吸附載體和95. 95~95. 99%的全價(jià)飼料原料組成。10. 權(quán)利要求7~9任一所述豬飼料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：51. 按照質(zhì)量比，將EGCG與飼料預(yù)混原料進(jìn)行混合得到預(yù)混料，或?qū)GCG與吸附載體 進(jìn)行混合得到預(yù)混劑；52. 將步驟Sl混合得到的預(yù)混料或預(yù)混劑與全價(jià)飼料原料進(jìn)行混合，得到所述豬飼 料。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（EGCG）在作為或制備豬飼料添加劑中的應(yīng)用及制備的豬飼料。具體為將EGCG應(yīng)用于制備降低豬骨骼肌I型肌纖維比例或降低豬骨骼肌中紅肉的比例的飼料添加劑。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)豬飼料中添加EGCG可以降低骨骼肌I型纖維比例，減少豬骨骼肌中紅肉的比例，提高肉品的健康性。而且，添加了EGCG的豬飼料是一種安全的飼料，它不含有對(duì)豬群生長(zhǎng)和豬群健康有毒有害的物質(zhì)，EGCG添加量較少，可以直接加入預(yù)混料中，添加過(guò)程方便快捷，制備方法簡(jiǎn)單，沒(méi)有特殊設(shè)備要求，具有很好的推廣應(yīng)用前景。
【IPC分類(lèi)】A23K1/18, A23K1/16
【公開(kāi)號(hào)】CN104920868
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510314609
【發(fā)明人】王松波, 朱曉彤, 江青艷, 束剛, 王麗娜, 高萍
【申請(qǐng)人】華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年6月10日