專利名稱：膜分離轉(zhuǎn)移培養(yǎng)裝置及制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種用微孔膜進(jìn)行分離培養(yǎng)的裝置及制作方法。
在本發(fā)明作出以前，在衛(wèi)生防疫、醫(yī)療、環(huán)境監(jiān)測及科研工作的微生物檢驗(yàn)工作中，經(jīng)常需要對大批量的不同稀釋度樣品進(jìn)行分離、轉(zhuǎn)移培養(yǎng)等繁雜的操作工作。微孔膜分離、培養(yǎng)技術(shù)是近年來主要采用的技術(shù)之一，它主要是應(yīng)用正、負(fù)壓力在膜濾器上完成對細(xì)菌的分離、再將膜轉(zhuǎn)移在固體培養(yǎng)基和加有液體培養(yǎng)基的襯墊上進(jìn)行培養(yǎng)，鑒定和計(jì)算。對大批量的樣品及不同稀釋度的檢驗(yàn)則利用多孔濾器來完成，這種方法不僅工作量大，所需操作器皿多、時(shí)間長，容易污染、準(zhǔn)確度差，而且濾器造價(jià)昂貴，一般小型檢驗(yàn)單位配備不起。近年來國外也有專用菌落檢驗(yàn)盒出現(xiàn)，即分離、培養(yǎng)可在同一盒內(nèi)進(jìn)行。但此盒造價(jià)高，且一次只能作一個(gè)樣品，不適應(yīng)各類檢驗(yàn)部門大批量樣品的檢驗(yàn)需要。
本發(fā)明的目的在于適應(yīng)衛(wèi)生防疫、醫(yī)療、環(huán)境監(jiān)測、食品檢驗(yàn)及科研工作的需要，找出一種快速、簡便、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、便于普及的技術(shù)解決方案，使得對于各種浮游生物、蟲卵、細(xì)菌等顆粒微生物樣品進(jìn)行不同梯度的加樣、分離、計(jì)數(shù)、轉(zhuǎn)移培養(yǎng)、特定和被檢驗(yàn)的培養(yǎng)基用已知菌株進(jìn)行稀釋梯度的測定、以及食品、飲料、污水樣品形成單位的測定等等大批量樣品的繁雜的檢驗(yàn)工作變得簡便易行。
現(xiàn)將本發(fā)明構(gòu)思及技術(shù)解決決方案敘述如下本發(fā)明提出了一種具有快速滲透分離作用的微孔膜滲透分離、轉(zhuǎn)移培養(yǎng)的裝置系列及其制造方法，該裝置由保護(hù)膜片、快速滲透微孔膜、滲透吸收襯墊、隔離膜片、培養(yǎng)襯墊及裝置盒組成。保護(hù)膜片為聚酯薄片，具有可保護(hù)微孔膜的超凈狀態(tài)和維持其平整的作用?？焖贊B透性微孔膜為纖維素酯做成的親液性微孔膜，該膜的滲透性、多樣性設(shè)計(jì)是本發(fā)明快速分離，同時(shí)測定不同稀釋度樣品的關(guān)鍵，滲透吸收襯墊是為了使?jié)B透速度更快，便于純化而設(shè)置的，隔離膜片的作用是防止液體樣品滲入培養(yǎng)襯墊。培養(yǎng)襯墊上加上培養(yǎng)液，被分離過的細(xì)菌可直接在培養(yǎng)襯墊上進(jìn)行培養(yǎng)。在檢驗(yàn)中，用加液器滴加處理好的液體樣品，液體在數(shù)秒鐘內(nèi)被快速滲透微孔膜和滲透襯墊吸收，細(xì)菌，浮游生物及非生物性粒子被分離在微孔膜上，然后棄去滲透吸收襯墊和隔離膜片，被分離的細(xì)菌便可在加有培養(yǎng)液的培養(yǎng)襯墊上直接培養(yǎng)或直接鏡檢染色。這樣便可將多份被測樣品或不同稀釋度樣品的分離，多道多重工序于同一裝置內(nèi)一次完成。滲透吸收襯墊也可根據(jù)實(shí)際需要用專用固體培養(yǎng)基取代。
本微孔膜分離轉(zhuǎn)移培養(yǎng)裝置中的快速滲透微孔膜，是本裝置的核心部分，在現(xiàn)有技術(shù)中，常用的微孔膜滲透速度慢，國產(chǎn)的微孔膜主要是用纖維素酯制成。在進(jìn)行分離過程中，大多數(shù)均需要借助各種濾器，濾瓶來完成。對于大批量樣品的檢測，所需的濾器結(jié)構(gòu)復(fù)雜，價(jià)格也昂貴。本發(fā)明微孔膜，在現(xiàn)有纖維素酯微孔膜的基礎(chǔ)上，增加了一道技術(shù)處理工藝，使膜的過濾過程可在幾秒鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速滲透分離，同時(shí)可以完全不使用各類濾器及其他動力設(shè)備完成過濾分離，簡化了分離過程中的嚴(yán)格，繁雜的操作程序，減少了檢測費(fèi)用。該微孔膜的技術(shù)處理工藝為在目前最廣泛使用的自然蒸發(fā)凝凍相轉(zhuǎn)化法制造纖維素酯微孔膜的基礎(chǔ)上，經(jīng)制版印刷，成各種所需的格圈后(印制油墨為疏水性油墨)用1%的凈化劑處理，凈化劑的配方為10%的十二烷基硫酸鈉、85%的碳酸鈉、碳酸氫鈉、5%的羧甲纖維素。在40℃水溫下浸泡半小時(shí)，再充分水洗，然后將微孔膜投入0.1%的聚乙烯吡咯啉酮(代血漿)中浸泡10分鐘，在常溫下干燥、消毒，在無菌條件下裝配。
本快速滲透微孔膜除具有快速滲透分離、避免使用濾器外，還可同時(shí)在一個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行多個(gè)樣品和各種濃度梯度的同時(shí)測定，其特征在于本快速滲透微孔膜可根據(jù)實(shí)際需要，制成各種不同形狀以及用疏水性油墨印成各種不同的樣品格圈及計(jì)數(shù)網(wǎng)格，方陣座標(biāo)或圓坐標(biāo)。
(參見圖1-16)例如，一個(gè)格圈的膜，適于單份樣品的操作，如大腸菌群的測定，多圈膜、適于常規(guī)稀釋度平行樣品的測定、菌液活菌數(shù)滴定、培養(yǎng)基研制試驗(yàn)及大批量樣品的測定，格圈面積大小不等的膜，適用于某些食品、污水樣品。帶有坐標(biāo)及網(wǎng)格的膜，適用于菌落的計(jì)數(shù)、統(tǒng)計(jì)。
本微孔膜分離轉(zhuǎn)移培養(yǎng)裝置盒由盒蓄1、盒底2、(參見圖17～19)組成，盒蓄1邊沿上有凹槽3以固定盒內(nèi)物保持平整，凹槽之間有連橋4，盒蓄、盒底外壁為斜面，呈喇叭狀吻合。裝置盒也可做成設(shè)有加液槽的形式(參見圖20、21、22、23)，加液槽5中間可逐漸增高形成分水線6，加液槽也可制成安瓶狀，將特定的培養(yǎng)基裝入如圖24中的加液槽7所示。
本裝置盒根據(jù)實(shí)際需要也可做成板卡式即在盒蓄8，盒底9之間加一板卡10，(參見圖25～29所示)。將滲透襯墊、快速滲透微孔膜、保護(hù)膜片與培養(yǎng)襯墊隔開，這樣打開盒蓄8，可進(jìn)行滲透分離，攝取微孔膜后，打開盒底9，即可進(jìn)行培養(yǎng)，板卡10為園形或方形，可任意使用其平面，同時(shí)盒底加入備用襯墊后，還可進(jìn)行二次培養(yǎng)及生化試驗(yàn)，一物多用，適應(yīng)目前致病菌培養(yǎng)所進(jìn)行的到選擇性培養(yǎng)的二次培養(yǎng)的需要。裝置盒也可設(shè)兩個(gè)同樣的盒底，第一層盒底起隔離薄片的作用，將滲透分離與培養(yǎng)襯墊分開，以適應(yīng)檢驗(yàn)人員先加培養(yǎng)基作實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的習(xí)慣，第二層盒底中加入第二片培養(yǎng)基襯墊，適應(yīng)復(fù)蘇和二次選擇的需要。為了便于開啟，在盒蓄及第一層盒底的外壁可設(shè)大小不等的半目狀開口11。整個(gè)裝置盒在超凈條件下無菌裝配，也可整批包裝后，再用r射線消毒。
現(xiàn)將


如下圖1～圖16各種不同形狀以及用疏水性油墨印成各種不同樣品格圈、計(jì)數(shù)網(wǎng)格、方陣坐標(biāo)或圓坐標(biāo)的快速滲透微孔膜。
圖17～圖19微孔膜分離轉(zhuǎn)移培養(yǎng)裝置的裝置盒。
圖20～圖22設(shè)有加液槽的裝置盒圖23～25可裝入安瓶的裝置盒。
圖26～圖28板卡式裝置盒圖29～圖30雙層裝置盒。
其中1.盒蓄、2.盒底、3.凹槽、4.連橋、5.加液槽、6.分水線、7.安瓶8.盒蓄、9.盒底、10.板卡、11.半月狀開口、12.壓模凸 13.保護(hù)薄片、14快速滲透微孔膜、15.滲透吸收襯墊、16隔離薄片、17.試驗(yàn)襯墊本發(fā)明技術(shù)解決方案與現(xiàn)有技術(shù)如膜濾器過濾法的主要區(qū)別在于，不需任何動力，利用滲透膜本身特性即可快速完成批量樣品的滲透分離操作，并有微量操作的特點(diǎn)，與菌薄檢驗(yàn)盒不同之處在于滲透分離轉(zhuǎn)移系列不僅可做為分離培養(yǎng)某種特定目標(biāo)細(xì)菌檢驗(yàn)裝置，而且可作為進(jìn)行光學(xué)顯微檢驗(yàn)技術(shù)中對于活性或非活性離子檢驗(yàn)的通用性檢驗(yàn)裝置，不僅可作為細(xì)菌、酵母、菌落檢驗(yàn)用，還可進(jìn)行真菌、蟲卵、藻類、浮游生物、顆粒性雜質(zhì)、細(xì)胞含量的分離、染色和直接鏡檢，并且能在同一裝置內(nèi)完成不同稀釋度的測定，具有用途廣泛、適應(yīng)性強(qiáng)、微量、快速、操作簡便，易于普及的特點(diǎn)。此技術(shù)若在微生物檢驗(yàn)技術(shù)中普及，必將深受廣大分析檢驗(yàn)人員的歡迎。
權(quán)利要求
1.一種微生物檢驗(yàn)裝置，具有微孔膜，其特征在于由保護(hù)膜片、快速滲透微孔膜、滲透吸收襯墊、隔離膜片、培養(yǎng)襯墊及裝置盒組成，快速滲透微孔膜可根據(jù)實(shí)際需要，制成不同形狀，如方形、圓形、在膜上可用疏水性油墨印上各種不同形狀的格圈、網(wǎng)格、方陣坐標(biāo)或圓坐標(biāo)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種微生物檢驗(yàn)裝置，其特征在于滲透吸收襯墊采用玻璃纖維材料，也可根據(jù)實(shí)際需要用專用固體培養(yǎng)基取代。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種微生物檢驗(yàn)裝置，其特征在于，裝置盒由盒蓄，盒底構(gòu)成，盒蓄邊沿上有凹槽，盒蓄、盒底外壁為斜面，呈喇叭狀吻合，裝置盒內(nèi)設(shè)有利于形成分水線的加液槽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種微生物檢驗(yàn)裝置，其特征在于，裝置盒可根據(jù)實(shí)際需要做成板卡式，板卡裝在盒蓄、盒底之間，將滲透襯墊、快速滲透微孔膜、保護(hù)膜片與培養(yǎng)襯墊分開。
5.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種微生物檢驗(yàn)裝置，其特征在于，裝置盒根據(jù)實(shí)際需要也可設(shè)兩個(gè)同樣的盒底，第一層盒底起隔離膜片的作用，在盒蓄及第一層盒底的外壁上設(shè)半月狀開口。
6.一種根據(jù)權(quán)利要求1中所述的微生物檢驗(yàn)裝置中快速滲透微孔膜的制作方法，其特征在于在自然蒸發(fā)凝凍相轉(zhuǎn)化法制造纖維素酯微孔膜的基礎(chǔ)上，采用疏水性油墨在膜上經(jīng)制版印刷成各種所需的格圈后，用1%的凈化劑，在40℃水溫下浸泡半小時(shí)，再充分水洗，然后將本發(fā)明所述的微孔膜投入0.1%的聚乙烯吡咯啉酮(代血漿)中浸泡10分鐘，在常溫下干燥、消毒，在無菌條件下裝配。
7.根據(jù)權(quán)利要求6中所述的一種微生物檢驗(yàn)裝置中快速滲透微孔膜的制作方法，其特征在于，凈化劑的配方為10%的十二烷基硫酸鈉，85%的碳酸鈉、碳酸氫鈉，5%的羧甲纖維。將上述三種成分混合后，再配制成10%濃度的水溶液。
全文摘要
本發(fā)明屬于微生物檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種利用微孔膜進(jìn)行快速分離，培養(yǎng)的裝置及快速滲透微孔膜的制作方法。該裝置由保護(hù)膜片快速滲透微孔膜，滲透吸收襯墊，隔離膜片，培養(yǎng)襯墊及裝置盒組成?？焖贊B透微孔膜用1％的凈化劑及0.1％的聚乙烯吡咯啉酮處理，在常溫下干燥消毒，在無菌條件下裝配。本發(fā)明可廣泛應(yīng)用于衛(wèi)生防疫、醫(yī)療、環(huán)境監(jiān)測、食品檢驗(yàn)等工作中，裝置簡單，操作方便，價(jià)格底廉。
文檔編號C12M1/00GK1055559SQ90101819
公開日1991年10月23日 申請日期1990年3月30日 優(yōu)先權(quán)日1990年3月30日
發(fā)明者尚修澤 申請人:鄭州鐵路局西安中心防疫站