本發(fā)明屬于微膠囊包埋技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，尤其涉及一種麝香草酚納米脂質(zhì)體。同時(shí)，本發(fā)明還涉及一種麝香草酚納米脂質(zhì)體的制備方法。

背景技術(shù)：

麝香草酚又稱百里香酚，化學(xué)名稱為5-甲基-2-異丙基苯酚，存在于百里香油、牛至油、丁香羅勒油等植物精油中，具有特殊香氣和較強(qiáng)的防腐殺菌及抗氧化性能，常用于配制膠姆糖、蘑菇香和柑桔等香型香精。麝香草酚通過破壞細(xì)胞膜完整性、影響無機(jī)離子平衡和pH穩(wěn)定性而發(fā)揮其抑菌性能。麝香草酚苯環(huán)上的羥基能夠提供H⁺給自由基，從而延緩氧化過程。此外，麝香草酚還具有潛在的護(hù)肝、抗癌和抗腫瘤作用。盡管麝香草酚被FDA認(rèn)證為GRAS的食品添加劑，但其較差的水分散性和穩(wěn)定性，限制了其在工業(yè)中的應(yīng)用。通過構(gòu)建合適的載體，可提高其水溶性，擴(kuò)大反應(yīng)界面，并進(jìn)一步提高其抑菌和抗氧化活性。

脂質(zhì)體(liposome)是由磷脂或其類似物分散于水相中形成的具有雙分子層結(jié)構(gòu)的封閉囊泡。目前，認(rèn)同較廣的脂質(zhì)體形成機(jī)制是磷脂和水分子之間相互作用，磷脂極性頭部位于脂雙層內(nèi)外表面，疏水性尾部位于脂雙層中間，自發(fā)形成了雙分子層囊泡結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)特性使得脂質(zhì)體可以同時(shí)包埋親水性、疏水性和兩親性物質(zhì)。因其制備方法簡(jiǎn)單，且具有靶向性、緩釋性、細(xì)胞親和性和組織相容性，在食品領(lǐng)域已被成功應(yīng)用于抗菌劑、酶、食品添加劑和營養(yǎng)素的包埋和運(yùn)載。將脂質(zhì)體的粒徑控制在納米尺度，可進(jìn)一步提高其生物相容性、穿透性和體內(nèi)靶向性。

目前尚無關(guān)于麝香草酚納米脂質(zhì)體的報(bào)道，傳統(tǒng)的脂質(zhì)體配方和制備方法仍存在使用有毒有機(jī)溶劑、粒徑大且分散不均一、穩(wěn)定性不高和工業(yè)化較難實(shí)現(xiàn)等不足。

為擴(kuò)大麝香草酚的應(yīng)用范圍，提高其水分散性、穩(wěn)定性和生理利用程度，本發(fā)明采用薄膜分散法制備麝香草酚納米脂質(zhì)體，開發(fā)一種同時(shí)具有抗氧化和抗菌作用的水分散性食品添加劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種麝香草酚納米脂質(zhì)體及其制備方法，作為一種新型食品、化妝品添加劑，以提高麝香草酚的分散性、穩(wěn)定性和生物利用率。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種麝香草酚納米脂質(zhì)體，所述麝香草酚納米脂質(zhì)體的配方如下：按照質(zhì)量組份計(jì)：其麝香草酚9-25份、大豆卵磷脂90-200份、二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000 4-10份、膽固醇3-8份、抗氧化劑0.5-1.2份和吐溫80 0.15-0.4份。

優(yōu)選的，所述麝香草酚為提取自百里香油、牛至油的天然產(chǎn)物。

優(yōu)選的，所述膽固醇為蛋黃膽固醇。

優(yōu)選的，所述抗氧化劑為維生素E和表沒食子兒茶素沒食子酸酯。

本發(fā)明還提供一種麝香草酚納米脂質(zhì)體的制備方法，包括如下步驟：

S1、按量稱取麝香草酚、維生素E、大豆卵磷脂和二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000，經(jīng)磁力攪拌溶于食用酒精中；

S2、將S1所得溶液經(jīng)減壓蒸發(fā)除去溶劑，溶質(zhì)形成均勻薄膜；

S3、將溶解表沒食子兒茶素沒食子酸酯的磷酸鹽緩沖液和吐溫80加入至薄膜中，冰浴超聲8-10min，即得麝香草酚納米脂質(zhì)體。

優(yōu)選的，在S1中，大豆卵磷脂和二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000質(zhì)量比為10-20：1，麝香草酚與大豆卵磷脂質(zhì)量比為1：8-14，維生素E與大豆卵磷脂質(zhì)量比為0.005-0.01：1，磁力攪拌時(shí)間為0.5-2h，按照mg/mL為單位計(jì)，固液比為5：1。

優(yōu)選的，在S2中，減壓蒸發(fā)溫度為40℃，真空度為0.05-0.1Mpa。

優(yōu)選的，在S3中，緩沖液為pH7.2的0.05M的磷酸鹽緩沖液，按照以mg/ml為單位計(jì)的液固比，緩沖液體積為大豆卵磷脂用量的10-15倍，表沒食子兒茶素沒食子酸酯與磷酸鹽緩沖液的固液比為0.0001-0.0002：1，吐溫80與緩沖液的體積比為0.002-0.005：1。

優(yōu)選的，在S3中，所述冰浴超聲功率200w，超聲2s，停止2s。

本發(fā)明的技術(shù)效果和優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明提供的一種麝香草酚納米脂質(zhì)體，與傳統(tǒng)技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下特點(diǎn)：

（1）所用原料多為食品級(jí)或天然來源，避免引入有毒試劑，安全性更高；

（2）配方中維生素E和表沒食子兒茶素沒食子酸酯協(xié)同發(fā)揮抗氧化作用，防止磷脂氧化，可增加脂質(zhì)體的穩(wěn)定性；

（3）制得的麝香草酚納米脂質(zhì)體粒徑為96-105nm，多分散指數(shù)為0.196-0.201，包封率為86.1-89.3%,常溫下貯藏12d仍能保持較好的穩(wěn)定性；

（4）該方法操作簡(jiǎn)單，較易實(shí)現(xiàn)規(guī)模化工業(yè)生產(chǎn)。

附圖說明

圖1 為麝香草酚納米脂質(zhì)體透射電鏡照片(×20000)。

圖2為麝香草酚納米脂質(zhì)體粒徑和包封率隨時(shí)間變化圖。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1

一種麝香草酚納米脂質(zhì)體，所述麝香草酚納米脂質(zhì)體的配方如下：按照質(zhì)量組份計(jì)：其麝香草酚10mg、大豆卵磷脂100mg、二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000 5mg、膽固醇3mg、維生素E 0.5mg、表沒食子兒茶素沒食子酸酯0.2mg、吐溫80 0.16ml。

稱取10mg麝香草酚、100mg大豆卵磷脂、5mg二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000和0.5mg維生素E，經(jīng)1h磁力攪拌溶于23ml食用酒精中；在真空度為0.1Mpa，溫度為 40 ℃條件下減壓蒸發(fā)除去溶劑，溶質(zhì)形成均勻薄膜；將溶解有0.2mg表沒食子兒茶素沒食子酸酯的80ml磷酸鹽緩沖液和0.16ml吐溫80加入至薄膜中，冰浴超聲10min (200W，2s開，2s停)，即得麝香草酚納米脂質(zhì)體。

所制得的麝香草酚納米脂質(zhì)體的平均粒徑為96.39nm，PDI為0.201，平均包封率為88.2%，具體形狀為近球形結(jié)構(gòu)。

實(shí)施例2

一種麝香草酚納米脂質(zhì)體，所述麝香草酚納米脂質(zhì)體的配方如下：按照質(zhì)量組份計(jì)：其麝香草酚10mg、大豆卵磷脂80mg、二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000 4mg、膽固醇4mg、維生素E 0.4mg、表沒食子兒茶素沒食子酸酯0.25mg、吐溫80 0.2ml。

稱取10mg麝香草酚、80mg大豆卵磷脂、4mg二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000和0.4mg維生素E，經(jīng)1.5h磁力攪拌溶于18.8ml食用酒精中；在真空度為0.08Mpa，溫度為 40 ℃條件下減壓蒸發(fā)除去溶劑，溶質(zhì)形成均勻薄膜；將溶解有0.25mg表沒食子兒茶素沒食子酸酯的100ml磷酸鹽緩沖液和0.2ml吐溫80加入至薄膜中，冰浴超聲8min (200W，2s開，2s停)，即得麝香草酚納米脂質(zhì)體。

所制得的麝香草酚納米脂質(zhì)體的平均粒徑為98.12nm，PDI為0.196，平均包封率為89.3%，具體形狀為近球形結(jié)構(gòu)。

實(shí)施例3

一種麝香草酚納米脂質(zhì)體，所述麝香草酚納米脂質(zhì)體的配方如下：按照質(zhì)量組份計(jì)：其麝香草酚20mg、大豆卵磷脂180mg、二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000 9mg、膽固醇3mg、維生素E 0.9mg、表沒食子兒茶素沒食子酸酯0.25mg、吐溫80 0.16ml。

稱取20mg麝香草酚、180mg大豆卵磷脂、9mg二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-甲氧基聚乙二醇5000和0.9mg維生素E，經(jīng)2h磁力攪拌溶于41.8ml食用酒精中；在真空度為1Mpa，溫度為 40 ℃條件下減壓蒸發(fā)除去溶劑，溶質(zhì)形成均勻薄膜；將溶解有0.25mg表沒食子兒茶素沒食子酸酯的180ml磷酸鹽緩沖液和0.36ml吐溫80加入至薄膜中，冰浴超聲10min (200W，2s開，2s停)，即得麝香草酚納米脂質(zhì)體。

所制得的麝香草酚納米脂質(zhì)體的平均粒徑為102.88nm，PDI為0.208，平均包封率為86.1%，具體形狀為近球形結(jié)構(gòu)。

實(shí)施例 4 麝香草酚納米脂質(zhì)體的粒徑及多分散指數(shù)的測(cè)定

采用PBS緩沖液將脂質(zhì)體適當(dāng)稀釋后，加至專用比色皿中，采用納米粒度儀測(cè)定其平均粒徑及多分散指數(shù)。

實(shí)施例 5 麝香草酚納米脂質(zhì)體包封率的測(cè)定

麝香草酚納米脂質(zhì)體混懸液倒入125 mL梨形分液漏斗，加入20 mL石油醚（30～60℃），振搖，使其與麝香草酚納米脂質(zhì)體充分混勻，靜置分層，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方式去除石油醚，圓底燒瓶中殘?jiān)靡宜嵋阴ト芙獠⒍ㄈ葜?5 mL，再取1mL于10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度；

以空白脂質(zhì)體同法制得的乙酸乙酯溶液為空白對(duì)照液，測(cè)定吸光值A(chǔ) ，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算未包埋麝香草酚的含量；

計(jì)算公式為：包封率=[(總麝香草酚量－未包埋麝香草酚量)/總麝香草酚量]×100%

實(shí)施例 6 麝香草酚納米脂質(zhì)體的形態(tài)觀察

將麝香草酚納米脂質(zhì)體經(jīng)PBS緩沖液稀釋至適當(dāng)倍數(shù)后，取適量滴于銅網(wǎng)正面，采用濾紙吸干多余樣品，再加2%磷鎢酸溶液負(fù)染4min，再用濾紙吸干多余染液，室溫下干燥后采用透射電子顯微鏡（TEM）觀察。

測(cè)定結(jié)果如圖1-2所示。

最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。