調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP及其編碼基因與應(yīng)用。所述轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示,編碼基因如SEQ?ID?No.2所示。利用所述調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP及其編碼基因,本發(fā)明提供了增強(qiáng)植物抗非生物脅迫的新方法,有利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
【專利說明】調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP及其編碼基因與應(yīng) 用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物基因,具體地說,涉及一種調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP 及其編碼基因與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 自然界中植物的生長和發(fā)育會受到許多不良自然災(zāi)害的影響,其中干旱、高溫、低 溫、鹽堿和病蟲害是限制作物產(chǎn)量的主要因素。我國正處在快速工業(yè)化進(jìn)程中,隨著工業(yè)化 的加劇,環(huán)境所承受的壓力越來越大,各種極端的氣候頻頻出現(xiàn),嚴(yán)重威脅著我國的糧食安 全。干旱是我們國家面臨的嚴(yán)重環(huán)境威脅之一。據(jù)統(tǒng)計,我國大約有1/2的國土面積處在 干旱和半干旱狀態(tài),并且我國的水資源呈現(xiàn)南多北少、東多西少分布不均的現(xiàn)象。因此,研 究植物本身的抗旱機(jī)制,提高植物對干旱脅迫的耐受力,從而獲得適宜干旱半干旱地區(qū)種 植且具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀的作物品種,在實際的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有非常重要的意義。
[0003] 在植物逆境脅迫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中,DREB和AREB類轉(zhuǎn)錄因子是兩類起調(diào)控作用重 要因子,它們分別屬于不依賴ΑΒΑ和依賴ΑΒΑ的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。從1997年利用酵母單雜首 次克隆到DREB類轉(zhuǎn)錄因子到目前,對DREB類轉(zhuǎn)錄因子的研究已經(jīng)有十多年的時間。DREB 類轉(zhuǎn)錄因子主要參與植物抵御非生物脅迫的信號調(diào)控。在植物中不同的DREB類轉(zhuǎn)錄因子 有著不同的功能,有的對植物中脅迫應(yīng)答下游基因起到激活作用,有的起到抑制作用,有的 在植物中超表達(dá)會影響轉(zhuǎn)基因植株正常生長,有的則不會影響。對DREB類轉(zhuǎn)錄因子下游靶 基因的研究發(fā)現(xiàn),不同的轉(zhuǎn)錄因子對所結(jié)合的DRE元件堿基偏好性不同,所以它們下游所 選擇的靶基因也不同。對DREB轉(zhuǎn)錄因子上游調(diào)控基因的研究,首先被報道的是ICE1,可以 調(diào)控與低溫脅迫相關(guān)的DREB1的轉(zhuǎn)錄。但對于DREB2類轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控報道較少。目前, 大部分DREB類轉(zhuǎn)錄因子屬于不依賴ΑΒΑ的信號通路,但已有很多報道顯示部分DREB類轉(zhuǎn) 錄因子的轉(zhuǎn)錄水平會受外源ΑΒΑ的誘導(dǎo)。這些DREB類轉(zhuǎn)錄因子在受到非生物脅迫時很可 能參與到依賴和不依賴ΑΒΑ的兩種信號通路中,這說明非生物脅迫調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中兩種信號通 路并不是相對孤立的,而是相互聯(lián)系,相互補(bǔ)充的。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP及其編碼基因與 應(yīng)用。
[0005] 為了實現(xiàn)本發(fā)明目的,本發(fā)明首先提供一種調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子 SiARDP,其氨基酸序列如SEQ ID No. 1所示。
[0006] 本發(fā)明還提供了編碼所述轉(zhuǎn)錄因子SiARDP的基因。
[0007] 進(jìn)一步地,所述編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID No. 2所示。
[0008] 本發(fā)明還提供了含有前述基因的載體。
[0009] 本發(fā)明還進(jìn)一步提供了前述轉(zhuǎn)錄因子在提高植物抗逆性上的應(yīng)用,所述轉(zhuǎn)錄因子 通過調(diào)控干旱脅迫相關(guān)基因的表達(dá)來提高植株耐旱能力。
[0010] 本發(fā)明還進(jìn)一步提供了前述基因在提高植物耐旱能力上的應(yīng)用,超表達(dá)所述基因 能夠提商植物對干旱和商鹽的耐受:力。
[0011] 本發(fā)明的有益效果在于:
[0012] 本發(fā)明首次通過酵母單雜技術(shù)從谷子非生物脅迫cDNA文庫中篩選到了一個編 碼 DREB 類轉(zhuǎn)錄因子的 cDNA,稱之為 SiARDP。qRT-PCR(quantitative real-time PCR)和 Northern blot結(jié)果顯示SiARDP受干旱、高鹽、脫落酸(abscisic acid, ABA)和低溫誘導(dǎo) 表達(dá)(圖2)。SiARDP基因在谷子的根、莖、葉和花序中都有表達(dá),并且在葉中表達(dá)量較高。 谷子原生質(zhì)體亞細(xì)胞定位顯示SiARDP蛋白定位于細(xì)胞核;凝膠阻滯(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)實驗表明原核表達(dá)的SiARDP-His融合蛋白能與DRE元件結(jié) 合;酵母轉(zhuǎn)錄激活實驗證明SiARDP蛋白具有轉(zhuǎn)錄激活活性。在擬南芥中異源表達(dá)SiARDP 基因能夠提高植物對干旱和高鹽的耐受力,干旱脅迫下轉(zhuǎn)基因植株比野生型植株積累更多 的脯氨酸,高鹽脅迫下轉(zhuǎn)基因植株的離子滲透率低于野生型植株。在谷子中超表達(dá)SiARDP 提高了轉(zhuǎn)基因谷子的耐旱性,并且干旱脅迫下轉(zhuǎn)基因谷子比野生型谷子積累了更多的脯氨 酸。超表達(dá)轉(zhuǎn)基因谷子中多個啟動子區(qū)存在DRE元件與干旱脅迫相關(guān)基因的表達(dá)量升高, 說明超表達(dá)谷子植株中SiARDP通過調(diào)控干旱脅迫相關(guān)基因的表達(dá)來提高植株耐旱能力。
[0013] 本發(fā)明利用所述的調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP及其編碼基因,提供了 增強(qiáng)植物抗非生物脅迫的新方法,有利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014] 圖1為本發(fā)明所述基因 SiARDP的核甘酸序列。
[0015] 圖2為本發(fā)明所述基因 SiARDP脅迫處理下的表達(dá)模式分析。
[0016] 圖3為本發(fā)明所述基因 SiARDP在谷子原生質(zhì)體中的亞細(xì)胞定位;A :紅色熒光;B : 綠色熒光;C :綠色熒光與紅色熒光疊加 ;D :明場;Bar = 10 μ m。
[0017] 圖4為本發(fā)明所述基因 SiARDP轉(zhuǎn)錄活性檢測。
[0018] 圖5為T3代SiARDP轉(zhuǎn)基因擬南芥RT-PCR檢測。
[0019] 圖6為SiARDP轉(zhuǎn)基因擬南芥種子抗旱與抗鹽分析。
[0020] 圖7為SiARDP轉(zhuǎn)基因擬南芥幼苗抗鹽分析。
[0021] 圖8為SiARDP轉(zhuǎn)基因擬南芥植株鹽脅迫下離子滲漏分析。
[0022] 圖9為野生型和SiARDP轉(zhuǎn)基因植株干旱脅迫下的表型分析。
[0023] 野生型和轉(zhuǎn)基因擬南芥干旱處理表型分析。正常條件下生長3周的擬南芥停止?jié)?水兩周,復(fù)水5天,結(jié)果重復(fù)三次。
[0024] 圖10為野生型和SiARDP轉(zhuǎn)基因植株干旱脅迫下存活率和脯氨酸含量分析。
[0025] A :干旱脅迫下存活率統(tǒng)計;B :干旱脅迫下擬南芥植株的游離脯氨酸含量測定。
[0026] 圖11為谷子抗性愈傷的篩選和再生植株的獲得;
[0027] A :轉(zhuǎn)化前幼穗誘導(dǎo)的愈傷組織;B :抗性篩選后的潮霉素抗性愈傷組織;C :抗性愈 傷分化出苗;D :瓶中的谷子再生植株;E :花盆中的谷子再生植株;F :溫室中的谷子再生植 株。
[0028] 圖12為SiARDP超表達(dá)轉(zhuǎn)基因谷子在干旱脅迫下的表型分析
[0029] A :野生型和轉(zhuǎn)基因谷子干旱脅迫下表型分析;B :干旱處理后,存活率統(tǒng)計;C :干 旱脅迫下野生型和轉(zhuǎn)基因植株脯氨酸含量分析。
【具體實施方式】
[0030] 以下實施例用于說明本發(fā)明,但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0031] 實施例1受非生物脅迫誘導(dǎo)基因 SiARDP的克隆
[0032] 將受干旱、鹽和低溫脅迫的谷子材料混合后,提取總RNA,構(gòu)建cDNA文庫。以 RD29A啟動子區(qū)DRE元件序列(ATACTACCGACATGAGC)為誘餌,利用Clontech公司酵母單雜 試劑盒,從谷子非生物脅迫cDNA文庫中克隆到了 SiARDP,其全長序列見圖1。Northern和 qRT-PCR分析顯示,該基因受ΑΒΑ處理和干旱等非生物脅迫的誘導(dǎo)(圖2)。
[0033] 實施例2SiARDP具有轉(zhuǎn)錄因子功能
[0034] 為了研究SiARDP在細(xì)胞中的定位情況,構(gòu)建了帶有GFP標(biāo)簽的質(zhì)粒 35S: SiARDP-GFP。另外,以已知核定位的AHL22為正對照,構(gòu)建帶有RFP標(biāo)簽的質(zhì)粒 35S:AHL22-RFP。將兩個質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化谷子黃化苗的原生質(zhì)體,避光培養(yǎng)16小時后在激光共 聚焦顯微鏡下觀察SiARDP蛋白定位。結(jié)果顯示,SiARDP定位位置與AHL22相同,定位于 細(xì)胞核中(圖3),這與預(yù)測SiARDP為轉(zhuǎn)錄因子的性質(zhì)相吻合。利用酵母轉(zhuǎn)錄激活系統(tǒng)對 SiARDP的轉(zhuǎn)錄活性進(jìn)行了分析。將SiARDP構(gòu)建到pBD-GAL4質(zhì)粒中,轉(zhuǎn)化酵母YRG-2。將 轉(zhuǎn)化得到的陽性酵母用無菌水稀釋至〇D 6(?為0. 5,點10 μ L至相應(yīng)營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基上,培 養(yǎng)3天觀察。結(jié)果顯示轉(zhuǎn)SiARDP酵母與轉(zhuǎn)正對照的酵母在雙缺培養(yǎng)基上能生長,并且能激 活LacZ表達(dá),而轉(zhuǎn)負(fù)對照酵母不能在雙缺培養(yǎng)基上生長并且不能激活LacZ表達(dá)。這說明 SiARDP作為轉(zhuǎn)錄因子具有轉(zhuǎn)錄激活活性(圖4)。
[0035] 實施例3SiARDP異源表達(dá)擬南芥植株的獲得
[0036] 為了研究SiARDP的功能,構(gòu)建了 35S啟動子驅(qū)動的SiARDP表達(dá)載體 p35S: SiARDP,并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法將p35S: SiARDP轉(zhuǎn)入野生型擬南芥植株中。通過潮 霉素篩選共得到48株陽性植株,經(jīng)過兩代篩選,在T3代得到的純合單拷貝植株中選出3株 作為進(jìn)一步研究的材料,分別命名為L4、L15和L22。分別提取野生型和轉(zhuǎn)基因擬南芥總RNA 進(jìn)行PCR檢測和RT-PCR檢測,引物為RT-SiARDPS和RT-SiARDPR,轉(zhuǎn)基因植株均有SiARDP 插入并且轉(zhuǎn)錄表達(dá)(圖5)。
[0037] 實施例4異源表達(dá)擬南芥植株的抗旱和抗鹽性分析
[0038] 為了研究SiARDP在逆境脅迫中的作用和功能,首先觀察了野生型擬南芥和轉(zhuǎn)基 因擬南芥萌發(fā)階段對干旱脅迫和鹽脅迫的響應(yīng)。將春化處理后的擬南芥種子分別點種于含 有200mM、300mM甘露醇和100mM、150mM、175mM NaCl的MS培養(yǎng)基中,萌發(fā)生長8天觀察并 測定脅迫處理材料的生物量。結(jié)果顯示,在不同脅迫處理條件下,轉(zhuǎn)基因擬南芥的萌發(fā)和生 長狀態(tài)都好于野生型擬南芥(圖6)。這說明異源表達(dá)SiARDP的擬南芥在萌發(fā)階段的抗旱 和抗鹽能力要強(qiáng)于野生型植株。為了進(jìn)一步驗證SiARDP在鹽脅迫下的功能,將MS培養(yǎng)基 上萌發(fā)生長5天的野生型和轉(zhuǎn)基因擬南芥幼苗轉(zhuǎn)移至含有0、150、200、250禮似(:1的1^培 養(yǎng)基中處理4天并觀察結(jié)果。實驗結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因擬南芥和野生型擬南芥在無 NaCl脅迫 MS培養(yǎng)基中生長無差別,但在NaCl脅迫下尤其是在250mM NaCl處理下,野生型擬南芥葉 子完全白化,而轉(zhuǎn)基因擬南芥植株生長狀態(tài)相對較好(圖7)。離子滲漏率分析顯示在NaCl 脅迫處理下,轉(zhuǎn)基因植株與野生型相比具有更低的離子滲漏率(圖8),說明轉(zhuǎn)基因植株在 抵御NaCl脅迫方面要強(qiáng)于野生型植株。為了驗證SiARDP在干旱脅迫下的功能,我們將在 土中正常生長3周的野生型和轉(zhuǎn)基因擬南芥幼苗停止?jié)菜畠芍芎?,再恢?fù)澆水4天,重復(fù)三 次(圖9),統(tǒng)計存活率。數(shù)據(jù)為三次實驗的平均值土SD,*P〈0. 05, #P〈0. 01 (t-test)。存 活率顯示,約5 %的野生型擬南芥干旱處理后能存活,而轉(zhuǎn)基因擬南芥的存活率可達(dá)58 %。 游離脯氨酸是重要的滲透調(diào)節(jié)物,干旱脅迫下可以對細(xì)胞進(jìn)行保護(hù)。游離脯氨酸含量檢測 顯示,轉(zhuǎn)基因擬南芥中游離脯氨酸的積累量要高于野生型擬南芥(圖10)。
[0039] 實施例5SiARDP超表達(dá)谷子的獲得
[0040] 為了進(jìn)一步明確SiARDP功能,構(gòu)建了 Ubiqutin啟動子驅(qū)動的SiARDP超表達(dá)載 體pUbi-SiARDP-hpt,用于谷子轉(zhuǎn)化。選取生長狀態(tài)良好的冀谷11號幼穗(幼穗長度小于 1. 5cm為宜)為材料,切成長度約為0. 5cm的小段,放置在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上28°C黑暗培養(yǎng),誘 導(dǎo)愈傷,每兩周繼代一次,繼代培養(yǎng)2-3次后,挑選生長狀態(tài)較好、質(zhì)地緊密、顏色鮮黃的谷 子愈傷作為外植體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將構(gòu)建好的超表達(dá)載體進(jìn)行轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化后的谷子愈傷 在恢復(fù)培養(yǎng)基上黑暗恢復(fù)培養(yǎng)一周,然后將愈傷轉(zhuǎn)到含有潮霉素的篩選培養(yǎng)基上進(jìn)行抗性 篩選。每兩周繼代一次,兩次篩選潮霉素濃度分別為5mg/L和8mg/L。兩輪篩選后的愈傷組 織已經(jīng)大部分褐化,少部分愈傷仍為黃色,為抗性愈傷。將抗性愈傷轉(zhuǎn)移至分化培養(yǎng)基見光 分化(光周期為16h光照/8h黑暗,28°C ),每兩周繼代一次??剐杂鷤姽夥只瘍芍苤畠?nèi) 在愈傷表面出現(xiàn)綠色芽點。當(dāng)再生幼苗長出主莖后,除去周圍多余的葉子,移入生根培養(yǎng)基 進(jìn)行生根,生根培養(yǎng)基中含有5mg/L的潮霉素進(jìn)一步篩選谷子陽性幼苗。大部分谷子幼苗 不能在含有潮霉素的生根培養(yǎng)基中生長,不能長出根系,葉子褐化死亡。少部分谷子在含有 潮霉素的生根培養(yǎng)基中能夠長出根系,根系發(fā)達(dá)后,將谷子幼苗移至溫室煉苗3天,洗凈根 上殘留的培養(yǎng)基后,將谷子再生苗移栽至小花盆中,一至兩周后,再將成活的谷子小苗移栽 至溫室土壤中繼續(xù)生長(圖11)。
[0041] 實施例6SiARDP超表達(dá)谷子的抗旱性分析
[0042] 為了研究SiARDP在谷子干旱脅迫下的功能,選取了兩個SiARDP超表達(dá)轉(zhuǎn)基因株 系(L7和L15)的T2代植株進(jìn)行研究。為了驗證SiARDP是否在干旱脅迫下發(fā)揮作用,我們 對野生型谷子和SiARDP超表達(dá)轉(zhuǎn)基因谷子進(jìn)行了干旱脅迫處理。將吸脹1天后的野生型 和轉(zhuǎn)基因谷子種子每盆12棵種于土中,在28°C正常生長條件下生長2周,停止?jié)菜?,干旱?理2周,再恢復(fù)澆水,4天后觀察。存活率統(tǒng)計結(jié)果顯示,干旱處理條件下野生型植株存活率 低于10%,而SiARDP超表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株存活率在50%以上。對干旱脅迫10天和12天時 野生型和轉(zhuǎn)基因谷子中游離脯氨酸含量進(jìn)行分析,結(jié)果在轉(zhuǎn)基因植株中脯氨酸含量積累較 多,尤其脅迫處理12天時轉(zhuǎn)基因植株中脯氨酸積累要明顯高于野生型植株(圖12)。這些 結(jié)果說明,SiARDP超表達(dá)植株對干旱脅迫表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐受力。
[0043] 雖然,上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述,但在 本發(fā)明基礎(chǔ)上,可以對之作一些修改或改進(jìn),這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因 此,在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn),均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
[0001] 序列表 <110>中國農(nóng)業(yè)大學(xué) <120〉調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄囚子SiARDP及其編碼基因與應(yīng)用 <130> KHP141112613.0 <160〉 2 <丄70> Patentln version 3.5 <210> 1 <211> 333 <212> PRT <213〉 SiARDP <400> 1 Met Thr Val Asp Leu Lys Gin Ala Met Pro Met Gin Ala Gin Ala Met 15 10 15 Gin Pro Gly Ser Arg Lys Lys Arg Pro Arg Arg Leu Arg Asp Gly Pro 20 25 30 Thr Ser Val Ala Ala Val lie Gin Arg Trp Ala Glu His Asn Lys Gin 35 40 45 Leu Glu His Asp Ser Glu Gly Ala Lys Arg Pro Arg Lys Ala Pro Ala 50 55 60 Lys Gly Ser Lys Lys Gly Cys Met Lys Gly Lys Gly Gly Pro Glu Asn 65 70 75 80 Thr His Cys Gly Tyr Arg Gly Val Arg Gin Arg Thr Trp Gly Lys Trp 85 90 95 Val Ala Glu lie Arg Glu Pro Asn Arg Ala Asn Arg Leu Trp Leu Gly 100 105 110 Thr Phe Pro Thr Ala Glu Asp Ala Ala Arg Ala Tyr Asp Gin Ala Ala 115 120 125 Arg Ala Met Tyr Gly Glu Val Ala Arg Thr Asn Phe Pro Arg Gin Asn 130 135 140 Ala Va] Ala Ser Ser Gin Va] Ala Trp Ala Ala Thr Pro Ala Gin Val 145 150 155 160 Ala Pro Ser Val Val Glu Gly Val Val His Ser Thr Ser Cys Glu Ser
[0002] 165 170 175 Thr Thr Thr Ser Asn His Ser Asp He Ala Ser Thr Leu His Lys Pro 180 185 190 Glu Val Ser Asp Leu Ser Ser Ser Val Lys Val Glu Cys Pro Glu Val 195 200 205 Val Glu Ala Gly Ser Arg Krg Ser Glu Met Val Ser Gly Thr Ser His 210 215 220 Gin His Glu Asp Ser His Pro Ser Thr Gin Ala Ser Thr Pro Asn Val 225 230 235 240 Gly Asp Lys G丄u Val Phe Glu Pro Leu G丄u Pro lie Ala Asn Leu Pro 245 250 255 Glu Gly Asp Phe Asp Gly Phe Asp lie Asp Glu Met Leu Arg Met Met 260 265 270 Glu Ala Asp Pro Gin Asn Glu Gly Gly Ala Gly Ala Gly Met Glu Gin 275 280 285 Pro Phe Tyr Phe Asp Gly Leu Asp Ser Ser Leu Leu Glu Ser Met Leu 290 295 300 Gin Ser Glu Ser Glu Pro Tyr Ser Leu Phe Glu Glu Gin Asp Met Phe 305 310 315 320 Leu Ala Gly Phe Glu Ser Pro Gly Phe Phe Glu Gly Leu 325 330 <210〉 2 <211> 1002 <212> DNA <213> SiARDP <400> 2 atgacggtgg atctgaagca ggccatgccg atgcaggcgc aggccatgca gcccggaagc 60 aggaagaagc gtcctcgcag attgcgcgat gggccaacct cagtggcagc tgtcatccag 120 cggtgggctg agcacaacaa gcagttggag cacgattctg agggcgcgaa gcgaccaagg 180 aaagcacctg ctaagggttc aaaaaagggc tgcatgaegg gaaaaggagg gcctgagaat 240 acrdGactgtg g-aLaccgLgg agLgaggcag eg'iacL Lggg gLaagLgggL Lgctgaaalc 300 cgagagccga atcgggccaa cagactctgg ctggggacct tcccaactgc agaggatgca 360 gccagggcct atgatcaggc ggccagagcg atgtatggag aagtcgcccg caccaacttc 420
[0003] cccagacaga atgcagtggc ctctagccaa gttgcttggg cggcaacccc tgcccaggtt 480 gctccatcag ttgttgaagg tgttgtacat agcacatcat gcgagtcaac gacaacatca 540 aatcactcag atattgcatc caccttgcat aagccggaag tatccgacct ttcaagctct 600 gtgaaggtgg agtgcccaga agttgtggag gctggttcac gtaggtctga gatggtatct 660 ggtacttcgc atcagcatga agacagccat cccagtaccc aagctagcac acccaatgta 720 ggtgacaagg aagttttcga gccacttgaa cctattgcca accttccaga gggtgatttt 780 galggttttg atattgatga gatgctgaga atgatggaag ctgatccaca gaalgaaggt 840 ggtgctggtg ctggcatgga gcagcccttt tactttgatg ggttggattc aagtttactg 900 gagagtatgc tccagtcgga gtcagagcca tattccctgt ttgaggaaca ggacatgttc 960 cttgctggct ttgaaagtcc tggttttttc gagggcctgt ag 1002
【權(quán)利要求】
1. 一種調(diào)節(jié)谷子抗逆能力的轉(zhuǎn)錄因子SiARDP,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID No. 1所示。
2. 編碼權(quán)利要求1所述轉(zhuǎn)錄因子SiARDP的基因。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID No. 2所示。
4. 含有權(quán)利要求2或3所述基因的載體。
5. 權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)錄因子在提高植物抗逆性上的應(yīng)用。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述轉(zhuǎn)錄因子通過調(diào)控干旱脅迫相關(guān)基 因的表達(dá)來提高植株耐旱能力。
7. 權(quán)利要求2或3所述基因在提高植物耐旱能力上的應(yīng)用。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,超表達(dá)所述基因能夠提高植物對干旱和 商鹽的耐受:力。
【文檔編號】C12N15/84GK104059138SQ201410175682
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月28日
【發(fā)明者】于靜娟, 李叢, 岳靜 申請人:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)