本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)研究技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種紅掌組培快繁培養(yǎng)基及紅掌組培快繁制種方法。

背景技術(shù)：

目前普遍采用的技術(shù)介紹（相對同行現(xiàn)有技術(shù)而言）紅掌(Anthurium andraeanum)屬天南星科花燭屬，別名安組花、花燭，為多年生附生常綠草本植物。其花葉姿態(tài)優(yōu)美、典雅，花色鮮紅，花期長，觀賞性強，觀賞價值高，是近年來國內(nèi)外最為流行的名貴花卉之一。目前國內(nèi)主要通過組培方式進行繁殖。紅掌組培快繁容易出現(xiàn)愈傷不分化，組培苗生長弱小，變異率高的現(xiàn)象。

目前國內(nèi)主要通過組培方式進行繁殖。但用紅掌莖尖做外植體內(nèi)生菌較多，滅菌難度大，而且材料成本高。用種子作外植體，由于種子存在雜交現(xiàn)象，容易造成后代分化。用葉片作外植體，滅菌難度相對較低，但有些品種愈傷難誘導，而且愈傷容易變異。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種紅掌組培快繁培養(yǎng)基及紅掌組培快繁制種方法。此培養(yǎng)方法減少了繼代培養(yǎng)時出現(xiàn)變異苗的概率，延長繼代培養(yǎng)的代數(shù)，提高了產(chǎn)量以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種紅掌組培快繁制種方法，包括以下步驟：

S1.外植體滅菌：無菌水沖洗3次，75%酒精浸泡30-40秒，無菌水沖洗3次，切去傷口褐化部分，升汞0.1%浸泡5-10分鐘，無菌水沖洗；

S2.愈傷誘導培養(yǎng)：在無菌條件下，將滅菌后的葉片切成1cmX1cm大小，接種在愈傷誘導培養(yǎng)基中，在暗環(huán)境，溫度為25攝氏度的條件下，培養(yǎng)60-65天。可得到2mmX2mm大小的愈傷組織；

S3.愈傷增殖培養(yǎng)：將愈傷接種到愈傷增殖培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度1500-2000Lux，光照10h/d的條件下，培養(yǎng)40-50天，可得到1cmX1cm大小的帶不定芽點的愈傷，若愈傷較小可繼續(xù)接種在愈傷增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)多一個周期；

S4.愈傷分化培養(yǎng)：將愈傷接種到分化培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度2000-3000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)40-50天，愈傷組織上的不定芽轉(zhuǎn)化成小苗；

S5.繼代培養(yǎng)：將已長出小苗的愈傷組織接種在繼代培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度2000-3000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)40天，愈傷生長成帶不定芽，同時可長出帶根的完整的正常的小苗；

S6.生根培養(yǎng)：將帶根的小苗接種到生根培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度：2000-3000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)30天?？傻玫饺~片增大，長出2-3條新根的小苗；

S7.煉苗：將接種在生根培養(yǎng)基的瓶苗，放在玻璃大棚煉苗，在溫度20-28攝氏度，光照光強：5000-6000Lux，自然光光照時長的條件下，煉苗1周；

S8.移栽：用20攝氏度的清水清洗小苗，栽種在105孔穴盤中，在溫度為：20-28攝氏度，濕度為：70%-85%，光照光強：5000-8000Lux的玻璃大棚中生長，1周可恢復，3周后可正常生長。

一種紅掌組培快繁培養(yǎng)基，包括培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基包括愈傷誘導培養(yǎng)基、愈傷增殖培養(yǎng)基、愈傷分化培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。

優(yōu)選的，所述愈傷誘導培養(yǎng)基為1/2MS(1/8硝酸銨)+6-BA0.8-1mg/ml+2-4D0.8-1mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠7g/L，PH：5.6-6.0。

優(yōu)選的，所述愈傷增殖培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5-1mg/ml+2-ip0.5-1ma/ml+蔗糖30g/L+ 卡拉膠7g/L，PH：5.6-6.0。

優(yōu)選的，所述愈傷分化培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.5-0.8mg/ml+NAA0.2-0.5mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：5.6-6.0。

優(yōu)選的，所述繼代培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.1-0.3mg/ml+NAA0.01-0.05mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：5.6-6.0。

優(yōu)選的，所述生根培養(yǎng)基為：1/2MS+IBA0.5mg/ml+蔗糖20g/L+卡拉膠6.5g/L，PH：5.6-6.0。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提高紅掌制種的成功率，縮短紅掌組培苗制種周期，減少了愈傷分化的變異率。提高了紅掌組培苗的產(chǎn)量和品質(zhì)，利用本發(fā)明的滅菌方法，有效降低污染率，利用本發(fā)明的培養(yǎng)基配方，愈傷誘導率高，愈傷分化變異低，縮短了培養(yǎng)周期，相對傳統(tǒng)的組織培養(yǎng)方法，減少了繼代培養(yǎng)時出現(xiàn)變異苗的概率，延長繼代培養(yǎng)的代數(shù)，提高了產(chǎn)量。

具體實施方式

下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

本發(fā)明提供一種技術(shù)方案：

實施例一

一種紅掌組培快繁制種方法，包括以下步驟：

S1.外植體滅菌：無菌水沖洗3次，75%酒精浸泡30秒，無菌水沖洗3次，切去傷口褐化部分，升汞0.1%浸泡5分鐘，無菌水沖洗；

S2.愈傷誘導培養(yǎng)：在無菌條件下，將滅菌后的葉片切成1cmX1cm大小，接種在愈傷誘導培養(yǎng)基中，在暗環(huán)境，溫度為25攝氏度的條件下，培養(yǎng)60天?？傻玫?mmX2mm大小的愈傷組織；

S3.愈傷增殖培養(yǎng)：將愈傷接種到愈傷增殖培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度1500Lux，光照10h/d的條件下，培養(yǎng)40天，可得到1cmX1cm大小的帶不定芽點的愈傷，若愈傷較小可繼續(xù)接種在愈傷增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)多一個周期；

S4.愈傷分化培養(yǎng)：將愈傷接種到分化培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度2000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)40天，愈傷組織上的不定芽轉(zhuǎn)化成小苗；

S5.繼代培養(yǎng)：將已長出小苗的愈傷組織接種在繼代培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度2000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)40天，愈傷生長成帶不定芽，同時可長出帶根的完整的正常的小苗；

S6.生根培養(yǎng)：將帶根的小苗接種到生根培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度：2000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)30天?？傻玫饺~片增大，長出2條新根的小苗；

S7.煉苗：將接種在生根培養(yǎng)基的瓶苗，放在玻璃大棚煉苗，在溫度20攝氏度，光照光強：5000Lux，自然光光照時長的條件下，煉苗1周；

S8.移栽：用20攝氏度的清水清洗小苗，栽種在105孔穴盤中，在溫度為：20攝氏度，濕度為：70%，光照光強：5000Lux的玻璃大棚中生長，1周可恢復，3周后可正常生長。

一種紅掌組培快繁培養(yǎng)基，包括培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基包括愈傷誘導培養(yǎng)基、愈傷增殖培養(yǎng)基、愈傷分化培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。

所述愈傷誘導培養(yǎng)基為1/2MS(1/8硝酸銨)+6-BA0.8-1mg/ml+2-4D0.8-1mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠7g/L，PH：5.6。

所述愈傷增殖培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5-1mg/ml+2-ip0.5-1ma/ml+蔗糖30g/L+ 卡拉膠7g/L，PH：5.6。

所述愈傷分化培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.5-0.8mg/ml+NAA0.2-0.5mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：5.6。

所述繼代培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.1-0.3mg/ml+NAA0.01-0.05mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：5.6。

所述生根培養(yǎng)基為：1/2MS+IBA0.5mg/ml+蔗糖20g/L+卡拉膠6.5g/L，PH：5.6。

實施例二

一種紅掌組培快繁制種方法，包括以下步驟：

S1.外植體滅菌：無菌水沖洗3次，75%酒精浸泡35秒，無菌水沖洗3次，切去傷口褐化部分，升汞0.1%浸泡8分鐘，無菌水沖洗；

S2.愈傷誘導培養(yǎng)：在無菌條件下，將滅菌后的葉片切成1cmX1cm大小，接種在愈傷誘導培養(yǎng)基中，在暗環(huán)境，溫度為25攝氏度的條件下，培養(yǎng)62天?？傻玫?mmX2mm大小的愈傷組織；

S3.愈傷增殖培養(yǎng)：將愈傷接種到愈傷增殖培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度1800Lux，光照10h/d的條件下，培養(yǎng)45天，可得到1cmX1cm大小的帶不定芽點的愈傷，若愈傷較小可繼續(xù)接種在愈傷增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)多一個周期；

S4.愈傷分化培養(yǎng)：將愈傷接種到分化培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度2500Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)45天，愈傷組織上的不定芽轉(zhuǎn)化成小苗；

S5.繼代培養(yǎng)：將已長出小苗的愈傷組織接種在繼代培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度2500Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)40天，愈傷生長成帶不定芽，同時可長出帶根的完整的正常的小苗；

S6.生根培養(yǎng)：將帶根的小苗接種到生根培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度：2500Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)30天?？傻玫饺~片增大，長出3條新根的小苗；

S7.煉苗：將接種在生根培養(yǎng)基的瓶苗，放在玻璃大棚煉苗，在溫度25攝氏度，光照光強：5500Lux，自然光光照時長的條件下，煉苗1周；

S8.移栽：用20攝氏度的清水清洗小苗，栽種在105孔穴盤中，在溫度為：25攝氏度，濕度為：79%，光照光強：6500Lux的玻璃大棚中生長，1周可恢復，3周后可正常生長。

一種紅掌組培快繁培養(yǎng)基，包括培養(yǎng)基，所述紅培養(yǎng)基包括愈傷誘導培養(yǎng)基、愈傷增殖培養(yǎng)基、愈傷分化培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。

所述愈傷誘導培養(yǎng)基為1/2MS(1/8硝酸銨)+6-BA0.8-1mg/ml+2-4D0.8-1mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠7g/L，PH：5.6-6.0。

所述愈傷增殖培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5-1mg/ml+2-ip0.5-1ma/ml+蔗糖30g/L+ 卡拉膠7g/L，PH：5.8。

所述愈傷分化培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.5-0.8mg/ml+NAA0.2-0.5mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：5.8。

所述繼代培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.1-0.3mg/ml+NAA0.01-0.05mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：5.8。

所述生根培養(yǎng)基為：1/2MS+IBA0.5mg/ml+蔗糖20g/L+卡拉膠6.5g/L，PH：5.8。

實施例三

一種紅掌組培快繁制種方法，包括以下步驟：

S1.外植體滅菌：無菌水沖洗3次，75%酒精浸泡40秒，無菌水沖洗3次，切去傷口褐化部分，升汞0.1%浸泡10分鐘，無菌水沖洗；

S2.愈傷誘導培養(yǎng)：在無菌條件下，將滅菌后的葉片切成1cmX1cm大小，接種在愈傷誘導培養(yǎng)基中，在暗環(huán)境，溫度為25攝氏度的條件下，培養(yǎng)65天。可得到2mmX2mm大小的愈傷組織；

S3.愈傷增殖培養(yǎng)：將愈傷接種到愈傷增殖培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度2000Lux，光照10h/d的條件下，培養(yǎng)50天，可得到1cmX1cm大小的帶不定芽點的愈傷，若愈傷較小可繼續(xù)接種在愈傷增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)多一個周期；

S4.愈傷分化培養(yǎng)：將愈傷接種到分化培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度3000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)50天，愈傷組織上的不定芽轉(zhuǎn)化成小苗；

S5.繼代培養(yǎng)：將已長出小苗的愈傷組織接種在繼代培養(yǎng)基中，在溫度25攝氏度，光照強度3000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)40天，愈傷生長成帶不定芽，同時可長出帶根的完整的正常的小苗；

S6.生根培養(yǎng)：將帶根的小苗接種到生根培養(yǎng)基，在溫度25攝氏度，光照強度：3000Lux，光照12h/d的條件下，培養(yǎng)30天?？傻玫饺~片增大，長出3條新根的小苗；

S7.煉苗：將接種在生根培養(yǎng)基的瓶苗，放在玻璃大棚煉苗，在溫度20-28攝氏度，光照光強：6000Lux，自然光光照時長的條件下，煉苗1周；

S8.移栽：用20攝氏度的清水清洗小苗，栽種在105孔穴盤中，在溫度為：28攝氏度，濕度為：85%，光照光強：8000Lux的玻璃大棚中生長，1周可恢復，3周后可正常生長。

一種紅掌組培快繁培養(yǎng)基，包括培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基包括愈傷誘導培養(yǎng)基、愈傷增殖培養(yǎng)基、愈傷分化培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。

所述愈傷誘導培養(yǎng)基為1/2MS(1/8硝酸銨)+6-BA0.8-1mg/ml+2-4D0.8-1mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠7g/L，PH：6.0。

所述愈傷增殖培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5-1mg/ml+2-ip0.5-1ma/ml+蔗糖30g/L+ 卡拉膠7g/L，PH：6.0。

所述愈傷分化培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.5-0.8mg/ml+NAA0.2-0.5mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：6.0。

所述繼代培養(yǎng)基為：3/4MS+6-BA0.1-0.3mg/ml+NAA0.01-0.05mg/ml+蔗糖30g/L+卡拉膠6g/L，PH：6.0。

本發(fā)明內(nèi)的三組實施例有培養(yǎng)基的均能保證紅掌組培快繁的生長，提高紅掌制種的成功率，縮短紅掌組培苗制種周期，減少了愈傷分化的變異率，其中以實施例二效果最為明顯。提高了紅掌組培苗的產(chǎn)量和品質(zhì)，其未處理的生長緩慢，且最后不能存活，利用本發(fā)明的滅菌方法，有效降低污染率，利用本發(fā)明的培養(yǎng)基配方，愈傷誘導率高，愈傷分化變異低，縮短了培養(yǎng)周期，相對傳統(tǒng)的組織培養(yǎng)方法，減少了繼代培養(yǎng)時出現(xiàn)變異苗的概率，延長繼代培養(yǎng)的代數(shù)，提高了產(chǎn)量。

盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對這些實施例進行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。