本發(fā)明屬于中草藥繁育栽培領(lǐng)域,具體涉及一種旋覆花組培快繁方法。
背景技術(shù):
旋覆花,又名:金佛花、金佛草等,拉丁學(xué)名:Inula japonica Thunb.屬于菊科、旋覆花屬多年生草本,主要分布于東北、華北、華東、華中及廣西等地。夏、秋二季花開時采收,除去雜質(zhì),陰干或曬干。生用或蜜炙用?!渡褶r(nóng)本草經(jīng)》:“主結(jié)氣脅下滿,驚悸。除水,去五臟間寒熱,補(bǔ)中,下氣?!爆F(xiàn)代研究,旋覆花對免疫性肝損傷有保護(hù)作用,其化學(xué)成分天人菊內(nèi)酯有抗癌作用。其根及莖葉或地上部分亦可入藥,治刀傷、疔毒,煎服可平喘鎮(zhèn)咳。其主要具有降氣,消痰,行水,止嘔的藥效。
目前,由于旋覆花的藥用價值較高,旋覆花的種植也逐漸普及,通常采用種子繁殖和分株繁殖方法進(jìn)行種植。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的是提供一種繁殖效率高、周期短且成本低的旋覆花培育方法。
為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)。
一種旋覆花組培快繁方法,包括以下的步驟:
⑴外植體消毒:采取當(dāng)年生的腋芽的莖段為外植體,去塵,放入清水中培養(yǎng),24h換水一次,培養(yǎng)至抽出嫩芽,取生長健壯的嫩芽,流水沖洗1h,在超凈臺上用75%酒精處理20s,無菌水漂洗3次,再用質(zhì)量比為1%NaClO處理5min,之后無菌水漂洗4次,并用無菌濾紙吸去多余水分,得到無菌苗;
⑵誘導(dǎo)培養(yǎng):在無菌條件下將獲得的無菌苗接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,在23℃、光照8h、光強(qiáng)2500lx條件下培養(yǎng),獲得叢生芽;其中所述快誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組成為:MS培養(yǎng)基+TDZ0.015mg/L+6-BA0.01mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L,pH值為5.8;
⑶生根培養(yǎng):步驟⑵培養(yǎng)得到的叢生芽生長至3cm高時,在無菌條件下將獲得的叢生芽分成單株,切去基部直接轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),在25℃、光照16小時、光照強(qiáng)度為3000lx條件下培養(yǎng);其中所述生根培養(yǎng)基的組成為MS培養(yǎng)基+IBA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L,pH值為5.8;
⑷煉苗移栽:將獲得的生根組培苗移至煉苗室,室內(nèi)溫度22℃,濕度70%,閉瓶煉苗7天,開瓶蓋煉苗5天,取出小苗,洗凈培養(yǎng)基后,移栽至鋸末:蛭石:河沙:腐葉土=1:2:3:1的基質(zhì)中,在溫室內(nèi)繼續(xù)煉苗35天,待根系發(fā)育正常,苗株生長健壯后移栽至大田。
本發(fā)明的有益技術(shù)效果:本發(fā)明的方法步驟簡單、繁殖效率高,為旋覆花工廠化育苗或規(guī)?;a(chǎn)及推廣奠定了良好基礎(chǔ)。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進(jìn)一步詳述,不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。
實施例
采取當(dāng)年生的腋芽的莖段為外植體,去塵,放入清水中培養(yǎng),24h換水一次,培養(yǎng)至抽出嫩芽,取生長健壯的嫩芽,流水沖洗1h,在超凈臺上用75%酒精處理20s,無菌水漂洗3次,再用質(zhì)量比為1%NaClO處理5min,之后無菌水漂洗4次,并用無菌濾紙吸去多余水分,得到無菌苗。在無菌條件下將獲得的無菌苗接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,在23℃、光照8h、光強(qiáng)2500lx條件下培養(yǎng),獲得叢生芽;其中所述快誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組成為:MS培養(yǎng)基+TDZ0.015mg/L+6-BA0.01mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L,pH值為5.8。培養(yǎng)得到的叢生芽生長至3cm高時,在無菌條件下將獲得的叢生芽分成單株,切去基部直接轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),在25℃、光照16小時、光照強(qiáng)度為3000lx條件下培養(yǎng);其中所述生根培養(yǎng)基的組成為MS培養(yǎng)基+IBA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L,pH值為5.8。將獲得的生根組培苗移至煉苗室,室內(nèi)溫度22℃,濕度70%,閉瓶煉苗7天,開瓶蓋煉苗5天,取出小苗,洗凈培養(yǎng)基后,移栽至鋸末:蛭石:河沙:腐葉土=1:2:3:1的基質(zhì)中,在溫室內(nèi)繼續(xù)煉苗35天,待根系發(fā)育正常,苗株生長健壯后移栽至大田。