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一種檢測m型磷脂酶a2受體自身抗體的試紙條及其檢測卡的制作方法

文檔序號:8665951閱讀:852來源:國知局
一種檢測m型磷脂酶a2受體自身抗體的試紙條及其檢測卡的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及臨床免疫學(xué)檢測領(lǐng)域,具體涉及一種快速、定量檢測M型磷脂酶A2受體自身抗體熒光免疫層析的試紙條及其檢測卡。
【背景技術(shù)】
[0002]在我國成年人中腎臟病的患病率達到10.8%,每年有數(shù)百萬人因腎臟病或引發(fā)心腦血管病死亡。腎病綜合征是以腎小球基膜通透性增加,表現(xiàn)為大量蛋白尿、低蛋白血癥、高度水腫、高脂血癥的一組臨床癥候群。其中膜性腎病(membranous nephropathy, MN)是導(dǎo)致成人腎病綜合征的一個常見病因。膜性腎病起病往往較隱匿,約20%的患者表現(xiàn)為無癥狀、非腎病范圍的蛋白尿,有些患者是在常規(guī)體檢時發(fā)現(xiàn)有蛋白尿才引起注意。目前膜性腎病診斷上主要依靠臨床表現(xiàn)及腎活檢病理改變,腎組織活檢也叫腎穿刺,對病人來說是個痛苦、有風險、經(jīng)濟負擔重的過程,因而很多患者選擇了拒絕,錯過了早期診斷和治療的機會,延誤了病情。如果能有其他醫(yī)學(xué)手段,特別是血清學(xué)檢查手段能對膜性腎病進行靈敏、準確地診斷和療效評估,將是該疾病診治的一個突破。
[0003]2009年發(fā)現(xiàn)存在于正常足細胞表面的膜性腎病的靶抗原-M型磷脂酶A2受體(PLA2R),在有特發(fā)性膜性腎病患者中,70%左右的患者血清檢測出針對PLA2R的自身抗體(AAbs),而且PLA2R-AAbs滴度與膜性腎病程度和愈后相關(guān),若定量檢測PLA2R_AAbs對膜性腎病診斷和療效的評估具有指導(dǎo)意義。PLA2R-AAbs的發(fā)現(xiàn)及檢測對膜性腎病的診斷、活動性的判斷、治療時機的把握、藥物的選擇及療效判斷提供了一個理想的標志物。但目前采用ffestern-blot方法進行PLA2R_AAbs的檢測的,要將經(jīng)過SDS-PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶標記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色以檢測電泳分離的蛋白成分。該傳統(tǒng)的Western-blot方法靈敏度有限,主要用于定性或半定量分析,而且操作復(fù)雜,一次檢測的樣品有限,不適用臨床大樣品的檢測。
【實用新型內(nèi)容】
[0004]為此,本實用新型所要解決的技術(shù)問題在于現(xiàn)有技術(shù)中的M型磷脂酶A2受體自身抗體的檢測方法,靈敏度有限,操作復(fù)雜;進而提供一種靈敏度高,且操作簡單的檢測M型磷脂酶A2受體自身抗體的試紙條及其檢測卡。
[0005]為解決上述技術(shù)問題,本實用新型的一種檢測M型磷脂酶A2受體自身抗體的試紙條,其包括底板,以及沿所述底板長度方向順次粘覆于所述底板上的吸水紙、硝酸纖維素包被膜、抗體結(jié)合墊以及樣品墊;其中,所述吸水紙、所述硝酸纖維素包被膜、所述抗體結(jié)合墊以及所述樣品墊之間,依次與且僅與相鄰部位相接觸且部分重疊;所述硝酸纖維素包被膜粘覆于所述底板的中間部位,且其上設(shè)置有相間隔的噴涂有PLA2R抗原的檢測帶和噴涂有羊抗兔IgG抗體的質(zhì)控帶,所述檢測帶靠近所述抗體結(jié)合墊,所述質(zhì)控帶靠近所述吸水紙;所述抗體結(jié)合墊處噴涂有表面修飾了兔抗人IgG的熒光微球的聚酯膜。
[0006]所述熒光微球的粒徑為10-1000nm。
[0007]所述試紙條的寬度為0.3_2cm。
[0008]所述吸水紙、所述硝酸纖維素包被膜、所述抗體結(jié)合墊以及所述樣品墊之間,依次與且僅與相鄰部位部分重疊區(qū)域的重疊長度彼此獨立的為l_5mm。
[0009]所述吸水紙與所述硝酸纖維素包被膜的所述部分重疊區(qū)域在所述硝酸纖維素包被膜的上側(cè)。
[0010]所述底板是塑料底板。
[0011 ] 一種檢測M型磷脂酶A2受體自身抗體的檢測卡,包括上述的試紙條以及包覆所述試紙條的外殼;所述外殼進一步包括底座和卡蓋,所述卡蓋上設(shè)置有觀察口和加樣口,以露出試紙條的局部區(qū)域;所述加樣口開口于所述樣品墊上部,以露出部分或全部所述樣品墊區(qū)域;所述觀察口開口于所述包被膜上側(cè),以露出全部所述檢測帶和所述質(zhì)控帶。
[0012]所述底座為塑料底座。
[0013]所述卡蓋為塑料卡蓋。
[0014]本實用新型的上述技術(shù)方案相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點:
[0015]1、在本實用新型中,試劑條以突光微球為信號源,突光微球的體積遠大于突光染料分子的體積,不但可以負載大量的熒光染料分子,而且便于熒光染料分子在檢測帶和質(zhì)控帶處的聚集,起到信號放大的作用,可實現(xiàn)檢測M型磷脂酶A2受體自身抗體的快速、單人份定量檢測,且靈敏度高、誤差小,為臨床使用提供了極大的便利。
[0016]2、在本實用新型中,帶有外殼的所述檢測卡不僅便于存放和攜帶,還便于操作過程中的檢測操作。
[0017]3、在本實用新型中,所述底座設(shè)為塑料底座,所述卡蓋設(shè)為塑料卡蓋,使得該檢測卡重量輕,且制作成本低。
【附圖說明】
[0018]為了使本實用新型的內(nèi)容更容易被清楚的理解,下面根據(jù)本實用新型的具體實施例并結(jié)合附圖,對本實用新型作進一步詳細的說明,其中
[0019]圖1是實施例1中試紙條沿長度方向的剖面示意圖;
[0020]圖2是實施例1中試紙條平面示意圖;
[0021]圖3是實施例2中檢測卡平面意圖;
[0022]圖中附圖標記表不為:1_底座;2-卡蓋;3_試紙條;4-底板;5_樣品塾;6_抗體結(jié)合墊;7_硝酸纖維素包被膜;8_吸水紙;9_檢測帶;10-觀察口 ; 11-質(zhì)控帶;12-加樣口。
【具體實施方式】
[0023]為了使本實用新型的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚,下面將結(jié)合附圖對本實用新型的實施方式作進一步地詳細描述。
[0024]本實用新型可以以許多不同的形式實施,而不應(yīng)該被理解為限于在此闡述的實施例。相反,提供這些實施例,使得本實用新型公開將是徹底和完整的,并且將把本實用新型的構(gòu)思充分傳達給本領(lǐng)域技術(shù)人員,本實用新型將僅由權(quán)利要求來限定。在附圖中,為了清晰起見,會夸大層和區(qū)域的尺寸和相對尺寸。
[0025]實施例1
[0026]如圖1和2所示,本實施例的一種檢測M型磷脂酶A2受體自身抗體的試紙條3,其包括底板4,以及沿所述底板4長度方向順次粘覆于所述底板4上的吸水紙8、硝酸纖維素包被膜7、抗體結(jié)合墊6以及樣品墊5 ;其中,所述吸水紙8、所述硝酸纖維素包被膜7、所述抗體結(jié)合墊6以及所述樣品墊5之間,依次與
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