通關(guān)藤藥材及制劑指紋圖譜的建立方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種通關(guān)藤藥材及制劑的指紋圖譜建立方法及其在通關(guān)藤藥材及制劑的質(zhì)量控制中的應(yīng)用，同時(shí)公開了通關(guān)藤藥材及制劑中酚酸類及甾體皂苷類的指紋圖譜及其測定方法和應(yīng)用。本發(fā)明利用酚酸類和甾體皂苷類指紋圖譜控制通關(guān)藤藥材及其制劑的質(zhì)量，以此對通關(guān)藤藥材真?zhèn)?、產(chǎn)地和品質(zhì)進(jìn)行鑒別和控制，使通關(guān)藤藥材及其制劑的質(zhì)量有了真正可控制的標(biāo)準(zhǔn)，確保通關(guān)藤藥材及其制劑的質(zhì)量穩(wěn)定。本發(fā)明通過測定通關(guān)藤藥材及其制劑酚酸類及甾體皂苷類的指紋圖譜控制其質(zhì)量的方法操作簡單，穩(wěn)定可靠。
【專利說明】通關(guān)藤藥材及制劑指紋圖譜的建立方法及應(yīng)用
[0001]本申請是申請日為2011年5月18日、發(fā)明名稱為“通關(guān)藤藥材及制劑指紋圖譜的建立方法及應(yīng)用”的中國專利申請201110128793.1的分案申請。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及一種中藥藥材及其制劑的質(zhì)量控制方法，特別涉及通關(guān)藤藥材及其制劑高效液相色譜法指紋圖譜的建立方法，以及由此方法得到的通關(guān)藤藥材及其制劑的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
【背景技術(shù)】
[0003]通關(guān)藤系蘿蘑科(Asclep iadaceae)牛奶菜屬植物通光散[Marsdeniatenacissima(Roxb.)Wight et Arn]的干燥藤莖,又名烏骨藤、扁藤、下奶藤、黃木香、大苦藤等，始載于《滇南本草》，收載于1974年版《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》、1977年版《中國藥典》及2010年版《中國藥典》。
[0004]通關(guān)藤味苦，性微寒。入肺、胃、膀胱經(jīng)。有清熱解毒，止咳平喘，散結(jié)止痛，敗毒抗癌，祛風(fēng)除濕，通乳利尿，活血生肌，催乳的功能。通關(guān)藤根、藤、莖、葉藥用，主治肺炎，支氣管炎，支氣管哮喘，咽喉炎，扁桃體炎，膀胱炎，疔瘡腫毒。治瘡瘍，咳喘，喉痛，胃痛。據(jù)《抗癌中藥方選》記載:“主治腫瘤如食道癌、賁門癌、胃癌、白血病、何杰金氏病、宮頸癌、肺癌等。兼治疾病如上呼吸道感染、支氣管炎、支氣管哮喘、小便不利”。
[0005]目前控制通關(guān)藤藥材質(zhì)量的方法主要包括性狀鑒定、顯微鑒定、薄層鑒定、理化鑒定及含量測定等方法。含量測定主要通過利用分光光度法測定通關(guān)藤中留體皂苷含量來達(dá)到控制通關(guān)藤藥材質(zhì)量的目的。
[0006]發(fā)明專利CN100434088C公開了一種從通關(guān)藤中提取的靜脈給藥制劑，其制備工藝是將通關(guān)藤提取液制為浸膏，再向浸膏中加入藥用輔料成適合供靜脈滴注給藥的劑型，功能主治為清熱解毒，化痰軟堅(jiān)，在臨床上主要用于食道癌、胃癌、肺癌、肝癌，并可配合放療、化療的輔助治療。
[0007]目前通關(guān)藤靜脈給藥制劑的質(zhì)量控制方法主要依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)WS-10630(ZD-0630)-2002，主要檢測注射液中的總固體、pH、蛋白質(zhì)、草酸鹽、樹脂、鞣制、鉀離子、熱源等，以及利用分光光度法測定注射液中總酚酸含量并將其作為注射液的質(zhì)量控制指標(biāo)。
[0008]留體皂苷類成分是有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)的公認(rèn)的通關(guān)藤藥材及制劑的主要活性成分。然而通關(guān)藤藥材以留體皂苷含量為質(zhì)量控制的指標(biāo)，而其注射液則以總酚酸含量為質(zhì)量控制的指標(biāo)，并且單一的某成分含量測定并不能完全反映藥材及注射液的整體特征、藥效作用，也不能很好的控制通關(guān)藤藥材及其注射液的質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明涉及通關(guān)藤藥材及其制劑高效液相色譜法指紋圖譜的建立方法，以及由此方法得到的通關(guān)藤藥材及其制劑的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。通過測定通關(guān)藤藥材及其注射液的指紋圖譜有效地控制通關(guān)藤藥材及其注射液的質(zhì)量，彌補(bǔ)了現(xiàn)有質(zhì)量控制技術(shù)的不足，從而確保通關(guān)藤藥材及其注射液的有效性、安全性、穩(wěn)定性和均一性。
[0010]本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:用高效液相色譜法建立通關(guān)藤藥材及其注射液的指紋圖譜，從而有效的控制通關(guān)藤藥材及其注射液的質(zhì)量。具體包括如下步驟:
[0011]一、通關(guān)藤藥材的留體皂苷類指紋圖譜建立方法及質(zhì)量控制方法
[0012]1、通關(guān)藤藥材留體皂苷類成分指紋圖譜的建立方法
[0013](a)供試品的制備:取通關(guān)藤藥材適量，粉碎，過篩，精密稱取藥材粉末lg，精密加入甲醇40ml，再稱重；401(氏超聲提取10分鐘以上，自然冷卻，用甲醇補(bǔ)足重量，振搖混合均勻；過濾，取續(xù)濾液20ml揮干，殘?jiān)眉状糏ml溶解，經(jīng)0.45 μ m微孔濾膜過濾，即得供試品溶液。
[0014](b)參照物溶液的制備:精密稱取Tenacissosides A (由南京圣和藥業(yè)有限公司研究院植化室提供)12mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，參照物溶液即得。
[0015]Tenacissosides A 結(jié)構(gòu)式為:
[0016]
【權(quán)利要求】
1.通關(guān)藤注射液留體皂苷類指紋圖譜的建立方法，其特征在于:包括以下步驟: (a)供試品的制備:取通關(guān)藤注射液，經(jīng)0.45 μ m濾膜過濾，續(xù)濾液即為供試品溶液， (b)參照物溶液的制備:精密稱取TenacigenosideA 12mg,置于50ml容量瓶中，加甲醇定容，搖勻，參照物溶液即得， (c)色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動(dòng)相A為水，流動(dòng)相B為乙腈，梯度洗脫:0 ?110.0min:90% A — 44% A, 10% B — 56% B ；110.0 ?110.1min:44% A — 90% A,56% B — 10% B ；110.1 ?120.0min:90% A — 90% A, 10% B — 10% B ；流速0.8ml/min ;柱溫35°C，檢測器:蒸發(fā)光散射檢測器；霧化氣體流速:1.5-3.5L/min ;漂移管溫度:80-115°C， (d)測定:分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，測定，記錄O?120分鐘的色譜峰，得到通關(guān)藤注射液留體皂苷類指紋圖譜， 其中，所述通關(guān)藤注射液留體皂苷類指紋圖譜包括8個(gè)共有峰，其中7號峰為Tenacigenoside A對照峰，各特征峰的相對保留時(shí)間為:1號峰:0.23± 10%、2號峰:.0.36±10%、3 號峰:0.60±10%、4 號峰:0.62±10%、5 號峰:0.66±10%、6 號峰:0.97±10%、7號峰:1.00±10%、8 號峰:1.01 ±10%。
2.一種通關(guān)藤注射液質(zhì)量控制的方法，其特征在于:包括以下步驟: (a)待測通關(guān)藤注射液指紋圖譜的測定:取待測通關(guān)藤注射液，按權(quán)利要求1所述的方法處理并測定； (b)通關(guān)藤注射液質(zhì)量控制:將待測通關(guān)藤注射液的留體皂苷類指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜對比，以特征峰計(jì)算，相似度不低于0.80的注射液質(zhì)量合格，其中所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜包括8個(gè)共有峰,其中7號峰為Tenacigenoside A對照峰,各特征峰的相對保留時(shí)間為:1 號峰:0.23±10%、2 號峰:0.36±10%、3 號峰:0.60±10%、4 號峰:0.62±10%、5 號峰:.0.66±10%、6 號峰:0.97±10%、7 號峰:1.00±10%、8 號峰:1.01±10%。
【文檔編號】G01N30/06GK103884793SQ201410119474
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2011年5月18日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月4日
【發(fā)明者】王勇, 李邇娜, 錢金葉, 欽松, 沈振濤, 張倉 申請人:南京圣和藥業(yè)有限公司