尿液中35種毒藥物的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜檢測法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種尿液中35種毒藥物的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜檢測法，首先用35種毒（藥）的標(biāo)準(zhǔn)品在串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀上建立多重反應(yīng)檢測方法，確定2~3對特征母離子和子離子對及每種毒（藥）物的保留時間。待測尿樣用乙醚萃取，經(jīng)超聲、離心、吹干和溶解后，用串聯(lián)質(zhì)譜MRM定性、定量分析毒（藥）物。本發(fā)明采用串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS/MS）同時快速篩檢人體尿液中35中常見毒（藥）物，檢驗結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏、快速，毒（藥）物回收率達(dá)80.82%至118.56%，檢出限達(dá)到0.0014~1.8μg/ml。
【專利說明】尿液中35種毒藥物的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜檢測法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于一種尿液中35種毒物的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜檢測法。
【背景技術(shù)】
[0002]吸毒、販毒已成為全球性的社會公害。人一旦沾染毒品就會經(jīng)常沉湎于毒品所幻想出的畸形“快感”之中，無心工作和學(xué)習(xí)。吸毒還會引發(fā)一系列的家庭社會問題。鑒于吸食毒品對家庭，特別是對社會的嚴(yán)重危害，國外一些國家除對本國吸毒者采取相應(yīng)的管理措施外，對入境者也要求提供 申請人:不吸毒的證明，如俄羅斯、比利時、香港等。隨著全球經(jīng)濟(jì)一體化進(jìn)程加快，其他國家對入境者不可避免的將陸續(xù)出臺類似的規(guī)定。為積極應(yīng)對國外一些國家對我人員入境簽證時涉及健康狀況方面提出加做毒品檢測的要求，檢驗檢疫部門要按照國家局的要求，一方面積極進(jìn)行物質(zhì)和技術(shù)上的準(zhǔn)備以應(yīng)對國外對我入境人員健康檢查的要求；另一方面從保護(hù)我國人民身體健康和維護(hù)社會穩(wěn)定目的出發(fā)，也應(yīng)采取對等的原則，對來華人員增加毒品檢測的要求。
[0003]目前國內(nèi)外最廣泛使用的人體內(nèi)毒品成分檢驗的測試技術(shù)是免疫測試技術(shù)以及氣相色譜法(GC)，國外也有使用氣質(zhì)聯(lián)用檢測的(GC/MS)。檢索中國標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)發(fā)現(xiàn)，在標(biāo)準(zhǔn)中僅有公安部的關(guān)于嗎啡、可卡因、海洛因等幾類毒品的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，主要是直接對毒品的檢測，而并不是針對臨床樣本方面的檢測方法。目前檢驗檢疫部門對出入境人員尿液進(jìn)行毒品檢測的方法主要采用膠體金技術(shù)快速檢測嗎啡和甲基安非他明，假陽性率極高，而且只能檢測2種毒品。因此建立一種快速、靈敏、準(zhǔn)確的多種毒(藥)物同時檢測方法變得尤為重要。
[0004]中國專利號為201110075177.4公開了一種尿液中33種毒品的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，其步驟如下:
[0005]樣品處理:稱取2g待檢尿樣，精確到0.0lg，置于50mL具塞離心管中，加入IOml乙酸乙酯，在液體混勻器上充分混勻lmin，以4000r/min離心lOmin，吸取上層乙酸乙酯于試管中，再加入ImL0.lmol/L NaOH溶液，在液體混勻器上充分混勻后，加入IOml乙酸乙酯重復(fù)提取一次，合并兩次提取液；提取液用氮?dú)獯蹈蓛x在40°C吹干，加入ImL體積比為30: 70的甲醇:水渦旋后，過0.25μπι濾膜，得待測樣品；
[0006]測定:待測樣品用液相色譜串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀進(jìn)行測定；在33種毒品的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析法中，除了巴比妥類藥物使用負(fù)離子模式分析之外，其余化合物都使用正離子模式分析；
[0007]其中正離子模式的質(zhì)譜條件為:電離源:ESI源；掃描模式:正離子選擇掃描模式SRM ;電噴霧電壓:2.5kV ;干燥氣溫度:400°C ;氣簾氣壓力:45arb ;輔助氣壓力:7arb ;毛細(xì)管溫度:350°C ;碰撞氣:高純氬氣；
[0008]負(fù)離子模式的質(zhì)譜條件為:電離源:ESI源；掃描模式:負(fù)離子選擇掃描模式SRM ；電噴霧電壓:2.5kV ;干燥氣溫度:400°C ;氣簾氣壓力:50arb ;輔助氣壓力:7arb ;毛細(xì)管溫度:320°C ;碰撞氣:高純氬氣；[0009]色譜條件為:色譜柱:Phenomenex Gemini C18100 X 2.0, 3 μ m ;柱溫:室溫；流速:250 μ L/min ;進(jìn)樣體積:25 μ L。
[0010]中國專利號為201110075177.4的對比文件其尿液采用經(jīng)典的液液萃取法進(jìn)行樣品前處理，采用乙酸乙酯作為萃取溶劑，萃取劑共用量20ml，而且只能檢測33種毒品。本方法且采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測，其方法的不足之處為，由于檢測物質(zhì)有些用正離子掃描而有些為負(fù)離子掃描。所以檢測時要分成兩次進(jìn)行檢測不能達(dá)到真正的一次性檢測。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011]本發(fā)明的目的是提供一種采用串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS/MS)同時快速篩檢人體尿液中35中常見毒(藥)物的新方法。
[0012]本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的，所述的尿液中35種毒(藥)物的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測法，其特征在于:首先用35種毒(藥)的標(biāo)準(zhǔn)品在串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀上建立多重反應(yīng)檢測方法，確定2?3對特征母離子和子離子對及每種毒(藥)物的保留時間；待測尿樣用乙醚萃取，經(jīng)超聲、離心、吹干和溶解后，用串聯(lián)質(zhì)譜MRM定性、定量分析毒(藥)物；
[0013]色譜條件是:儀器，Agilent7890GC/7000QQB；GC 條件:DB_1MS(30mX0.25mmX0.25 μ m)石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度:250°C，不分流；程序升溫:起始溫度50。。，以 12V /min 升溫到 290°C保持 lOmin，流速:lml/min，進(jìn)樣量:0.5 μ L ;MS 條件:EI 離子源，電子能源70eV，離子源溫度230°C，接口溫度:280°C，四級桿溫度:150°C，電子倍增器電壓:1381eV0
[0014]所述的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測法，具體包括:
[0015]I)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:所加入35種毒(藥)物混合標(biāo)準(zhǔn)品的甲醇溶液中敵敵畏，樂果，甲基對硫磷，馬拉硫磷，對硫磷、毒鼠強(qiáng)濃度均為22.73μ g/ml ;巴比妥、異戊巴比妥、司可巴比妥、利多卡因、苯巴比妥、阿托品、阿米替林、氯丙嗪、咪達(dá)唑侖、硝西泮、氯硝西泮、氯氮平、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖濃度均為16.67 μ g/ml ;MDMA、撲熱息痛、哌替啶、氨基比林、曲馬多、撲爾敏、美沙酮、多慮平、卡馬西平、地西泮濃度均為20.83 μ g/ml ；甲基苯丙胺、麻黃堿、氯胺酮、可待因濃度均為25 μ g/ml ；
[0016]2)檢測方法
[0017]2.1)樣品處理
[0018]取待檢尿液1ml，加入乙醚6ml分三次萃取，每次2ml ;在40°C超聲萃取lOmin，然后以lOOOOr/min離心3min，三次萃取有機(jī)層合并轉(zhuǎn)移至另一試管中，于40°C下氮?dú)獯蹈?，殘留物?00 μ L甲醇溶解，取I μ L進(jìn)GC/MS/MS分析；
[0019]2.2)GC 條件
[0020]GC條件:DB-l(30mX0.25mmX0.25m)石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度:250°C，不分流；程序升溫:起始溫度50°C,以12°C /min升溫到290°C保持IOmin,流速:lml/min,進(jìn)樣量:
0.5 μ L ；
[0021]2.3) MS 條件
[0022]MS條件:ΕΙ離子源，電子能源70eV，離子源溫度230°C，接口溫度:280°C，四級桿溫度:150°C，電子倍增器電壓:1381eV ；[0023]35種毒藥物的最優(yōu)母離子子離子對見下表1:
[0024]表135種毒(藥)物色譜保留時間及質(zhì)譜特征離子對
[0025]
【權(quán)利要求】
1.一種尿液中35種毒(藥)物的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測法，其特征在于:首先用35種毒(藥)的標(biāo)準(zhǔn)品在串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀上建立多重反應(yīng)檢測方法，確定2~3對特征母離子和子離子對及每種毒(藥)物的保留時間；待測尿樣用乙醚萃取，經(jīng)超聲、離心、吹干和溶解后，用串聯(lián)質(zhì)譜MRM定性、定量分析毒(藥)物； 色譜條件是:儀器，Agilent7890GC/7000QQB ;GC 條件:DB-1MS(30mX0.25mmX0.25 μ m)石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度:250°C，不分流；程序升溫:起始溫度50。。，以 12V /min 升溫到 290°C 保持 lOmin，流速:lml/min，進(jìn)樣量:0.5μ L ;MS 條件:EI 離子源，電子能源70eV，離子源溫度230°C，接口溫度:280°C，四級桿溫度:150°C，電子倍增器電壓:1381eV0
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測法，其特征在于: 1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:所加入35種毒(藥)物混合標(biāo)準(zhǔn)品的甲醇溶液中敵敵畏，樂果，甲基對硫憐，馬拉硫憐，對硫憐、毒鼠強(qiáng)濃度均為22.73 u g/ml ;巴比妥、異戍巴比妥、司可巴比妥、利多卡因、苯巴比妥、阿托品、阿米替林、氯丙嗪、咪達(dá)唑侖、硝西泮、氯硝西泮、氯氮平、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖濃度均為16.67 μ g/ml ;MDMA、撲熱息痛、哌替啶、氨基比林、曲馬多、撲爾敏、美沙酮、多慮平、卡馬西平、地西泮濃度均為20.83 μ g/ml ;甲基苯丙胺、麻黃堿、氯胺酮、可待因濃度均為25 μ g/ml ； 2)檢測方法 2.1)樣品處理 取待檢尿液1ml，加入乙醚6ml分三次萃取，每次2ml ;在40°C超聲萃取lOmin，然后以lOOOOr/min離心3min，三次萃取有機(jī)層合并轉(zhuǎn)移至另一試管中，于40°C下氮?dú)獯蹈?，殘留物?00 μ L甲醇溶解，取I μ L進(jìn)GC/MS/MS分析； 2.2) GC條件
GC條件:DB-l(30mX0.25mmX0.25m)石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度:250°C，不分流；程序升溫:起始溫度50°C,以12°C /min升溫到290°C保持IOmin,流速:lml/min,進(jìn)樣量:0.5 μ L ； 2.3) MS條件 MS條件:ΕΙ離子源，電子能源70eV，離子源溫度230°C，接口溫度:280°C，四級桿溫度:150°C，電子倍增器電壓:1381eV ； 35種毒藥物的最優(yōu)母離子子離子對見下表1: 表135種毒(藥)物色譜保留時間 及質(zhì)譜特征離子對
【文檔編號】G01N30/88GK103808846SQ201410057537
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2014年2月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月20日
【發(fā)明者】曹潔, 高博, 黃恩炯, 張建明, 閆育培, 鄭幼靈 申請人:福建國際旅行衛(wèi)生保健中心