生物材料的透明化方法、及其利用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的生物材料的透明化方法包括：第一浸潤步驟，使以規(guī)定的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到生物材料中；第二浸潤步驟，繼而使以比第一浸潤步驟中用的所述溶液高的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到所述生物材料中。
【專利說明】生物材料的透明化方法、及其利用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種生物材料的透明化方法、及其利用。
【背景技術(shù)】
[0002]在使用光學(xué)顯微鏡觀察不透明的組織內(nèi)部時，將會使用透明化試劑來進(jìn)行預(yù)處理(透明化處理)。
[0003]關(guān)于透明化試劑及預(yù)處理方法，具代表性的例如已有專利文獻(xiàn)I及非專利文獻(xiàn)I中揭示的由Ann-Shyn Chiang提出的Focus Clear (商品名)溶液、或非專利文獻(xiàn)2中揭示的由Hans-Ulrich Dodt等人提出的組織透明法(tissue clearing method)。這些技術(shù)均用以使組織透明化，目的在于觀察存在于組織中的熒光物質(zhì)。
[0004][現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)]
[0005]專利文獻(xiàn)1:美國專利第6472216號公報；授權(quán)日2002年10月29日。
[0006]非專利文獻(xiàn)1:Ann_Shyn Chiang et al.:1nsect NMDA receptors mediatejuvenile hormone biosynthesis.PNAS99(I),37-42(2002).[0007]非專利文獻(xiàn)2:Hans_Ulrich Dodt et al.:Ultramicroscopy:three-dimensionalvisualization of neuronal networks in the whole mouse brain.Nature Methods4(4),331-336(2007).
【發(fā)明內(nèi)容】

[0008][本發(fā)明要解決的問題]
[0009]由于上述方法均需要將有機(jī)溶劑用作透明化處理的有效成分等，因此有難以適用于活組織，適用對象一味地限于固定化樣品的問題。另外，還有導(dǎo)致作為透明化處理的對象的生物材料弓I起收縮的問題。
[0010]在本發(fā)明以前，本發(fā)明的
【發(fā)明者】們發(fā)現(xiàn)如果使用尿素，便能使生物材料透明化。由于尿素是生物親和性優(yōu)異的成分，因此如果將尿素或尿素衍生物用作透明化處理的有效成分，就能解決上述的問題。
[0011]本發(fā)明的
【發(fā)明者】們還著手于開發(fā)用尿素或尿素衍生物來實(shí)現(xiàn)更有效的生物材料透明化處理的方法。
[0012]本發(fā)明正是為了解決上述課題而完成的，其目的在于提供一種使用生物親和性優(yōu)異的成分來使生物材料透明化的更有效率的方法、及其利用。
[0013][用以解決問題的技術(shù)方案]
[0014]為了解決上述問題，本發(fā)明的
【發(fā)明者】們進(jìn)行了銳意研究。結(jié)果新發(fā)現(xiàn)了通過對有效成分為尿素等的不同濃度的溶液進(jìn)行組合，便既能抑制不要的體積變化，又能更有效率地進(jìn)行透明化處理，從而完成了本發(fā)明。
[0015]S卩，本發(fā)明的生物材料的透明化方法的特征在于包括:第一浸潤步驟，使以規(guī)定的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到生物材料中；第二浸潤步驟，繼而使以比第一浸潤步驟中用的所述溶液高的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到所述生物材料中。
[0016]本發(fā)明的透明化方法也可以在第二浸潤步驟之后還包括第三浸潤步驟，即:使以比第二浸潤步驟中用的所述溶液低的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到所述生物材料中。
[0017]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述第一浸潤步驟中所用的溶液和所述第三浸潤步驟中所用的溶液以實(shí)質(zhì)上相同的濃度含有所述化合物。
[0018]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述第一浸潤步驟中所用的溶液與所述第三浸潤步驟中所用的溶液為相同的溶液。
[0019]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述第一浸潤步驟、第二浸潤步驟、以及視需要而進(jìn)行的第三浸潤步驟中所用的溶液均含有尿素來作為所述化合物。
[0020]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述第一浸潤步驟、第二浸潤步驟、以及視需要而進(jìn)行的第三浸潤步驟中所用的溶液的至少一方為水溶液。
[0021]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述第一浸潤步驟、第二浸潤步驟、以及視需要而進(jìn)行的第三浸潤步驟中所用的溶液的至少一方含有表面活性劑。
[0022]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述表面活性劑為非離子性表面活性劑。
[0023]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述非離子性表面活性劑為選自由TritonX (注冊商標(biāo))、Tween (注冊商標(biāo))、及NP-40 (商品名)所組成的群中的至少一種。
[0024]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述水溶液還含有水溶性的高分子化合物。
[0025]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，水溶性的所述高分子化合物為選自由Percoll (注冊商標(biāo))、Ficoll (注冊商標(biāo))、聚乙二醇、及聚乙烯吡咯烷酮所組成的群中的至少一種。
[0026]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述第一浸潤步驟、第二浸潤步驟、以及視需要而進(jìn)行的第三浸潤步驟中所用的溶液的至少一方還含有選自由甘油、羧基乙烯基聚合物、羥丙基甲基纖維素、丙二醇、及聚乙二醇(maciOgol)所組成的群中的至少一種。
[0027]本發(fā)明的透明化方法優(yōu)選用以使作為所述生物材料的源自多細(xì)胞動物的組織或器官、或除人類以外的多細(xì)胞動物得以透明化。
[0028]在本發(fā)明的透明化方法中，作為優(yōu)選，所述第一浸潤步驟中所用的溶液中的所述化合物的濃度落在2.5M以上5.5M以下的范圍內(nèi)，并且所述第二浸潤步驟中所用的溶液中的所述化合物的濃度落在6M以上8.5M以下的范圍內(nèi)。
[0029]本發(fā)明的用于生物材料的透明化處理試劑盒的特征在于，包含:第一溶液，其以規(guī)定的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物；第二溶液，其以比所述第一溶液高的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物。
[0030]在本發(fā)明的用于生物材料的透明化處理試劑盒中，作為優(yōu)選，所述第一溶液含有濃度落在2.5M以上5.5M以下的范圍內(nèi)的尿素、以及濃度落在0.025 (w/v) %以上5 (w/v) %以下的范圍內(nèi)的表面活性劑。
[0031]在本發(fā)明的用于生物材料的透明化處理試劑盒中，作為優(yōu)選，所述第二溶液含有濃度落在5.5M以上8.5M以下的范圍內(nèi)的尿素、以及濃度落在0.025 (w/v) %以上5 (w/v) %以下的范圍內(nèi)的表面活性劑。
[0032]在本發(fā)明的用于生物材料的透明化處理試劑盒中，作為優(yōu)選，所述第一溶液含有選自由甘油、羧基乙烯基聚合物、羥丙基甲基纖維素、丙二醇、及聚乙二醇(maciOgol)所組成的群中的至少一種。
[0033][發(fā)明的效果]
[0034]本發(fā)明的效果在于能提供一種運(yùn)用生物親和性優(yōu)異的成分而實(shí)現(xiàn)的更為有效的生物材料透明化法、及其利用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0035]圖1涉及本發(fā)明的一個參考例，是用生物材料用透明化試劑處理小鼠的海馬區(qū)后的結(jié)果圖。
[0036]圖2涉及本發(fā)明的其他參考例，是用生物材料用透明化試劑處理小鼠的海馬區(qū)后的結(jié)果圖。
[0037]圖3涉及本發(fā)明另一參考例，是用生物材料用透明化試劑處理小鼠的整個大腦后的結(jié)果圖。
[0038]圖4涉及本發(fā)明另一參考例，是表示生物材料用透明化試劑、與被處理的生物材料的膨潤情況的相關(guān)性的圖表。
[0039]圖5涉及本發(fā)明另一參考例，是用生物材料用透明化試劑處理小鼠的整個大腦后的結(jié)果圖。
[0040]圖6涉及本發(fā)明另一參考例，是用生物材料用透明化試劑處理小鼠的腦切片，然后測定該腦切片的透光率而得的結(jié)果圖表。
[0041]圖7涉及本發(fā)明另一參考例，是用生物材料用透明化試劑處理胎鼠后的結(jié)果圖。
[0042]圖8涉及本發(fā)明另一參考例，是用生物材料用透明化試劑處理小鼠的海馬區(qū)并觀察神經(jīng)干細(xì)胞后的結(jié)果圖。
[0043]圖9是，用以尿素為有效成分的生物材料用透明化試劑處理小鼠大腦的結(jié)果、與用先前技術(shù)(BABB法)處理小鼠大腦的結(jié)果的比較圖。
[0044]圖10是，用以尿素為有效成分的生物材料用透明化試劑來對表達(dá)了各種熒光蛋白質(zhì)的HeLa細(xì)胞進(jìn)行處理后的結(jié)果、與用先前技術(shù)(BABB法)來對表達(dá)了各種熒光蛋白質(zhì)的HeLa細(xì)胞進(jìn)行處理后的結(jié)果的比較圖。
[0045]圖11涉及本發(fā)明另一參考例，是用生物材料用透明化試劑對經(jīng)神經(jīng)干細(xì)胞移植的大腦皮質(zhì)進(jìn)行處理并觀察的結(jié)果圖。
[0046]圖12涉及本發(fā)明另一參考例，是對尚未用生物材料用透明化試劑進(jìn)行透明化處理前的生物材料、以及經(jīng)透明化處理之后又恢復(fù)成處理前狀態(tài)的生物材料進(jìn)行免疫染色的
結(jié)果圖。
[0047]圖13涉及本發(fā)明的一實(shí)施例，是對小鼠的海馬區(qū)進(jìn)行透明化處理，然后觀察該海馬區(qū)的透光情況的結(jié)果圖。
[0048]圖14涉及本發(fā)明的其他實(shí)施例，是對小鼠的腦切片進(jìn)行透明化處理，然后測定該腦切片的透光率而得的結(jié)果圖表。
[0049]圖15涉及本發(fā)明另一參考例，是表示透明化處理對尿素濃度的依賴性的圖。【具體實(shí)施方式】
[0050]以下對本發(fā)明的實(shí)施形態(tài)進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0051]〔1.使用生物材料用透明化試劑的透明化處理方法〕
[0052](透明化處理方法的概要)
[0053]本發(fā)明的透明化處理法是使生物材料透明化的方法，其依次包括以下所示的第一浸潤步驟和第二浸潤步驟。本發(fā)明的透明化處理法中，優(yōu)選在第二浸潤步驟后還包括第三浸潤步驟。
[0054]I)第一浸潤步驟:使以規(guī)定的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物(有時也統(tǒng)稱為尿素系化合物)的溶液(“第一生物材料用透明化試齊U”)，浸潤到生物材料中；
[0055]2)第二浸潤步驟:使以比第一浸潤步驟中所用的所述溶液的濃度高的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液(“第二生物材料用透明化試劑”)，浸潤到所述生物材料中；
[0056]3)第三浸潤步驟:使以比第二浸潤步驟所用的所述溶液的濃度低的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液(“第三生物材料用透明化試劑”)，浸潤到所述生物材料中。
[0057]另外，在以下的說明中，當(dāng)對第一生物材料用透明化試劑、第二生物材料用透明化試劑、及第三生物材料透明化試劑進(jìn)行統(tǒng)稱時，則單稱為“生物材料用透明化試劑”。因此，說明書中單用“生物材料用透明化試劑”一詞所做的說明，是指第一?第三生物材料透明化試劑的共通說明。
[0058]本發(fā)明的生物材料的透明化處理方法為:使作為透明化處理有效成分的尿素系化合物的濃度不同的“生物材料用透明化試劑”，以規(guī)定的順序浸潤到“生物材料”中。該流程的利點(diǎn)之一在于:既能抑制生物材料的不要的體積變化，又能大幅縮短透明化處理的所需時間。
[0059]S卩，通過按照上述順序進(jìn)行所述第一浸潤步驟及第二浸潤步驟，便既能抑制生物材料的不要的體積變化，又能大幅縮短透明化處理的所需時間。并且，視需要進(jìn)而進(jìn)行所述第三浸潤步驟，便能更確實(shí)地抑制生物材料的不要的體積變化，且即使周邊溫度下降時(寒冷時)，也能更確實(shí)地抑制因發(fā)生尿素系化合物的結(jié)晶析出等而導(dǎo)致生物材料損傷的憂患。
[0060](第一浸潤步驟)
[0061]第一浸潤步驟是，使所述第一生物材料用透明化試劑浸潤到生物材料中的步驟。更具體而言，例如在供進(jìn)行透明化處理的容器內(nèi)，使“第一生物材料用透明化試劑”浸潤到所述“生物材料”中。
[0062]進(jìn)行所述第一浸潤步驟時的處理溫度并無特別限定，優(yōu)選落在15°C以上45°C以下的范圍內(nèi)。另外，進(jìn)行第一浸潤步驟的處理時間并無特別限定，優(yōu)選落在2小時以上I個月以內(nèi)的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在12小時以上3日以內(nèi)的范圍內(nèi)。另外，進(jìn)行透明化處理時的壓力并無特別限定。
[0063]所述第一生物材料用透明化試劑中所含的所述尿素系化合物的濃度只要低于所述第二生物材料用透明化試劑中所含的所述尿素系化合物的濃度，則無特別限定。該第一生物材料用透明化試劑中的尿素系化合物濃度優(yōu)選落在IM以上5.5M以下的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在2.5M以上5.5M以下的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在3.5M以上4.5M以下的范圍內(nèi)，特別優(yōu)選落在3.7M以上4.3M以下的范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明中，生物材料用透明化試劑中若含有多種作為透明化上所需的有效成分的尿素系化合物，則“尿素系化合物的濃度”是指多種尿素系化合物的合計濃度。
[0064](第二浸潤步驟)
[0065]第二浸潤步驟是，使所述第二生物材料用透明化試劑浸潤到生物材料中的步驟。更具體而言，例如在供進(jìn)行透明化處理的容器內(nèi)，使“第二生物材料用透明化試劑”浸潤到所述“生物材料”中。通過使第二生物材料透明化試劑中的所述尿素系化合物的濃度高于第一生物材料透明化試劑、及視需要而用的第三生物材料透明化試劑中的所述尿素系化合物的濃度，便可促進(jìn)尿素系化合物滲入生物材料。
[0066]進(jìn)行所述第二浸潤步驟時的處理溫度并無特別限定，優(yōu)選落在15°C以上45°C以下的范圍內(nèi)。另外，進(jìn)行第二浸潤步驟的處理時間并無特別限定，優(yōu)選落在2小時以上I個月以內(nèi)的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在12小時以上3日以內(nèi)的范圍內(nèi)。另外，進(jìn)行透明化處理時的壓力并無特別限定。
[0067]所述第二生物材料用透明化試劑中所含的所述尿素系化合物的濃度只要滿足高于所述第一生物材料用透明化試劑中所含的所述尿素系化合物的濃度的這一前提條件，則無特別限定。其中，在滿足該前提條件的基礎(chǔ)上，優(yōu)選落在5.5M以上8.5M以下的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在6M以上8.5M以下的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在6.5M以上8.5M以下的范圍內(nèi)，特別優(yōu)選落在7.7M以上8.2M以下的范圍內(nèi)。另外，就與第一生物材料用透明化試劑的濃度差的觀點(diǎn)而言，第二生物材料用透明化試劑優(yōu)選以2M以上的高濃度方式含有所述尿素系化合物，更優(yōu)選以3M以上的高濃度方式含有所述尿素系化合物，更優(yōu)選以3.5M以上的高濃度方式含有所述尿素系化合物。
[0068](第三浸潤步驟)
[0069]視需要而進(jìn)行的第三浸潤步驟是，使所述第三生物材料用透明化試劑浸潤到生物材料中的步驟。更具體而言，例如在供進(jìn)行透明化處理的容器內(nèi)，使“第三生物材料用透明化試劑”浸潤到所述“生物材料”中。
[0070]進(jìn)行所述第三浸潤步驟時的處理溫度并無特別限定，優(yōu)選落在15°C以上45°C以下的范圍內(nèi)。另外，進(jìn)行第三浸潤步驟的處理時間并無特別限定，優(yōu)選落在2小時以上I個月以內(nèi)的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在12小時以上3日以內(nèi)的范圍內(nèi)。另外，進(jìn)行透明化處理時的壓力并無特別限定。
[0071]所述第三生物材料用透明化試劑中所含的所述尿素系化合物的濃度只要低于所述第二生物材料用透明化試劑中所含的所述尿素系化合物的濃度，則無特別限定。該第三生物材料用透明化試劑中的尿素系化合物濃度優(yōu)選落在IM以上、5.5M以下的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在2.5M以上5.5M以下的范圍內(nèi)，更優(yōu)選落在3.5M以上4.5M以下的范圍內(nèi)，特別優(yōu)選落在3.7M以上4.3M以下的范圍內(nèi)。
[0072]另外，作為特別優(yōu)選的方案，更優(yōu)選第一生物材料用透明化試劑與第三生物材料用透明化試劑以實(shí)質(zhì)上相同的濃度含有所述尿素系化合物。在此，所謂實(shí)質(zhì)上相同的濃度，優(yōu)選指濃度差為0.5M以內(nèi)，更優(yōu)選為0.3M以內(nèi)，進(jìn)而優(yōu)選為0.1M以內(nèi)。在其他方案中，第一生物材料用透明化試劑與第三生物材料用透明化試劑是同一溶液。
[0073]所述第一浸潤步驟~第三浸潤步驟中，將“生物材料用透明化試劑”與“生物材料”裝入透明化處理用容器內(nèi)時的順序并無特別限定。例如當(dāng)在同一容器內(nèi)連續(xù)進(jìn)行第一浸潤步驟~第三浸潤步驟時，可以首先將“第一生物材料用透明化試劑”裝入容器，然后裝入“生物材料”，接著依序進(jìn)行如下處理:倒去第一生物材料用透明化試劑，將第二生物材料用透明化試劑裝入容器；倒去第二生物材料用透明化試劑，將第三生物材料用透明化試劑裝入容器。另外，也可以視需要而在各浸潤步驟之間設(shè)置對容器及生物材料進(jìn)行清洗處理等的步驟。
[0074]可以在例如室溫或低溫環(huán)境下保存所述各浸潤步驟中所用的裝有經(jīng)透明化處理的生物材料的處理容器，直到該處理容器被提供給后述觀察步驟為止(透明化試樣保存步驟)。
[0075](生物材料用透明化試劑的有效成分)
[0076]本發(fā)明中使用含有“尿素”的溶液，該“尿素”是進(jìn)行生物材料的透明化時所必須的有效成分。在本發(fā)明的其他方案中，使用含有“尿素衍生物”的溶液，該“尿素衍生物”是進(jìn)行生物材料的透明化時所必須的有效成分。這些溶液相當(dāng)于所述“生物材料用透明化試劑”。
[0077]所述尿素衍生物的種類并無特別限定，具體例如有各種烷基脲、或下述通式(I)所示的化合物。另外，通式(I)所示的化合物包括一部分烷基脲。本發(fā)明中所用的生物材料用透明化試劑只要含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少I種化合物來作為有效成分即可，其中更優(yōu)選含有尿素。
[0078]
【權(quán)利要求】
1.一種生物材料的透明化方法，其特征在于包括: 第一浸潤步驟，使以規(guī)定的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到生物材料中；第二浸潤步驟，繼而使以比第一浸潤步驟中用的所述溶液高的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到所述生物材料中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物材料的透明化方法，其特征在于， 在所述第二浸潤步驟之后還包括第三浸潤步驟: 使以比該第二浸潤步驟中用的所述溶液低的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物的溶液，浸潤到所述生物材料中。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物材料的透明化方法，其特征在于: 所述第一浸潤步驟中所用的溶液與所述第三浸潤步驟中所用的溶液以實(shí)質(zhì)上相同的濃度含有所述化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物材料的透明化方法，其特征在于: 所述第一浸潤步驟中所用的溶液與所述第三浸潤步驟中所用的溶液為相同的溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的透明化方法，其特征在于: 所述溶液均含有尿素來作為所述化合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的透明化方法，其特征在于:` 所述溶液的至少一方為水溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的透明化方法，其特征在于: 所述溶液的至少一方含有表而活性劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的透明化方法，其特征在于: 所述表面活性劑為非離子性表面活性劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的透明化方法，其特征在于: 所述非離子性表面活性劑為選自由TritonX(注冊商標(biāo))、Tween(注冊商標(biāo))、及NP-40(商品名)所組成的群中的至少一種。
10.根據(jù)權(quán)利要求6至9中任一項(xiàng)所述的透明化方法，其特征在于: 所述水溶液還含有水溶性的高分子化合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的透明化方法，其特征在于: 水溶性的所述高分子化合物為選自由Percoll (注冊商標(biāo))、Ficoll (注冊商標(biāo))、聚乙二醇、及聚乙烯吡咯烷酮所組成的群中的至少一種。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的透明化方法，其特征在于: 所述溶液的至少一方還含有選自由甘油、羧基乙烯基聚合物、羥丙基甲基纖維素、丙二醇、及聚乙二醇所組成的群中的至少一種。
13.根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述的透明化方法，其特征在于: 其使作為所述生物材料的源自多細(xì)胞動物的組織或器官、或除人類以外的多細(xì)胞動物得以透明化。
14.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的透明化方法，其特征在于: 所述第一浸潤步驟中所用的溶液中的所述化合物的濃度落在2.5M以上5.5M以下的范圍內(nèi)，并且所述第二浸潤步驟中所用的溶液中的所述化合物的濃度落在6M以上8.5M以下的范圍內(nèi)。
15.一種用于生物材料的透明化處理試劑盒，其特征在于包含: 第一溶液，其以規(guī)定的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物； 第二溶液，其以比所述第一溶液高的濃度而含有選自由尿素及尿素衍生物所組成的群中的至少一種化合物。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的用于生物材料的透明化處理試劑盒，其特征在于: 所述第一溶液含有濃度落在2.5M以上5.5M以下的范圍內(nèi)的尿素、以及濃度落在0.025 (w/v) %以上5 (w/v) %以下的范圍內(nèi)的表面活性劑。
17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的用于生物材料的透明化處理試劑盒，其特征在于: 所述第二溶液含有濃度落在5.5M以上8.5M以下的范圍內(nèi)的尿素、以及濃度落在0.025 (w/v) %以上5 (w/v) %以下的范圍內(nèi)的表面活性劑。
18.根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項(xiàng)所述的用于生物材料的透明化處理試劑盒，其特征在于: 所述第一溶液含有選自由甘油、羧基乙烯基聚合物、羥丙基甲基纖維素、丙二醇、及聚乙二醇所組成的群中的至少一種。`
【文檔編號】G01N1/28GK103492852SQ201280020354
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2012年4月27日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月28日
【發(fā)明者】宮脅敦史, 濱裕, 黑川裕 申請人:獨(dú)立行政法人理化學(xué)研究所