全蝎藥材中牛磺酸的含量測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種全蝎藥材中?；撬岬暮繙y定方法。本發(fā)明采用薄層掃描法，其操作步驟如下：對照品溶液的制備，取牛磺酸對照品，加水制成對照品溶液；供試品溶液的制備，取全蝎藥材粗粉，加水25ml，回流提取，提取液過濾，濃縮并定容為10ml，作為供試品溶液。分別吸取對照品和供試品溶液點于同一硅膠G薄層板上，并以正丁醇-冰醋酸-無水乙醇-水展開，取出，晾干，以2％的茚三酮105℃下烘5分鐘顯色，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍以膠布固定，放置室溫，薄層掃描儀下單波長掃描。本發(fā)明能有效控制全蝎藥材的質(zhì)量，可為全蝎藥材制成品的原藥質(zhì)量提供保障。
【專利說明】全蝎藥材中牛磺酸的含量測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及物質(zhì)的含量測定，具體地說是一種全蝎藥材中牛磺酸的含量測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]全蝎為鉗蝎科動物東亞鉗蝎(Buthus martensii Karsch)的干燥全體,主產(chǎn)于河南，山東，河北等地。全蝎具有熄風(fēng)止痙、攻毒散結(jié)、通絡(luò)止痛的功效，用于急慢^(風(fēng)、中風(fēng)面癱、破傷風(fēng)痙攣、瘡瘍腫毒、頑固性偏正頭痛、風(fēng)濕痹痛等證。臨床應(yīng)用較廣，是一種較為貴重的中藥。但由于其為動物藥材，所含成分較為復(fù)雜，且分離困難，所以相關(guān)質(zhì)量標準方面研究文獻較少，《中國藥典》2010版未見其含量測定方法，其它已公開發(fā)表的文獻中一般對其中的氨基酸類成分進行定量研究，但方法繁瑣，且需要衍生化才能測定，大大限制了測定方法的通用性。
[0003]?；撬釣槿行С煞种唬且环N氨基酸，以游離的形式普遍存在于人體的各種組織中，屬于非蛋白質(zhì)氨基酸，具有消炎鎮(zhèn)痛，解熱抗驚厥作用。
[0004]在現(xiàn)有的公開資料中，牛磺酸含量測定的方法主要包括紫外法、薄層掃描法和HPLC法。其中紫外法在試驗中要求加入甲醛與?；撬嶙饔肐小時后測定，且測定結(jié)果精密度、重復(fù)性不好；HPLC法需要對?；撬徇M行柱前衍生，所用的衍生試劑為2，4_ 二硝基氟苯，為一種劇毒化合物，且分析衍生化過程中對時間控制要求極嚴，操作起來比較困難。本發(fā)明采用薄層掃描的方法測定則過程相對簡單，并經(jīng)方法學(xué)驗證，本發(fā)明方法線性、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性及加樣回 收率均符合要求，可作為全蝎藥材的含量測定標準。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有測定技術(shù)存在的缺陷，提供一種操作簡便、專屬性強、精密度好、回收率高、測量結(jié)果準確的?；撬岷繙y定方法，可有效控制全蝎藥材的質(zhì)量，以確保全蝎藥材制成品的原料品質(zhì)。
[0006]為此，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案:全蝎藥材中?；撬岬暮繙y定方法，本發(fā)明采用采用薄層掃描法，其操作步驟如下:對照品溶液的制備，取牛磺酸對照品，加水制成對照品溶液；供試品溶液的制備，取全蝎藥材粗粉，加水25ml，回流提取，提取液過濾，濃縮并定容為10ml，作為供試品溶液。分別吸取對照品和供試品溶液點于同一硅膠G薄層板上，并以正丁醇-冰醋酸-無水乙醇-水為展開劑展開，取出，晾干，以2%的茚三酮105°C下烘5分鐘顯色，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍以膠布固定，放置室溫，薄層掃描儀下單波長掃描。
[0007]所述的全蝎藥材中牛磺酸的含量測定方法，藥材提取次數(shù)為2次，第一次I小時，第二次0.5小時。
[0008]所述的全蝎藥材中?；撬岬暮繙y定方法，所用展開劑正丁醇-冰醋酸-無水乙醇-水的體積比為4:6:0.5:1。[0009]所述的全蝎藥材中?；撬岬暮繙y定方法，進行含量測定時掃描波長為500nm。
[0010]本發(fā)明采用的方法專屬性強、精密度好，回收率高、測量結(jié)果正確，可有效控制全蝎藥材的質(zhì)量，確保了全蝎藥材制成品的優(yōu)質(zhì)原料。
[0011]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步的說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。
[0012]說明書附圖:
圖1為?；撬岜语@色圖譜 圖2為?；撬岜訏呙鑸D譜
【具體實施方式】
[0013]所用儀器與試藥:
薄層掃描儀CAMAG Scanner 3 Linomat 5半自動點樣儀(瑞士卡瑪公司)。
[0014]檢測波長:500nm。
[0015]硅膠G預(yù)制板青島海洋化工廠；?；撬釋φ掌?中國藥品生物制品檢定所);其余試劑均為分析純(國藥集團上海試劑有限公司)。
[0016]線性試驗
精密稱定牛磺酸對照品11.25mg,加水定容至IOml,得濃度為1.125mg/ml的對照品溶液，分別精密吸取0.5、1.0、1.5,2.0,2.5 μ I點于同一硅膠G薄層板上，并以正丁醇-冰醋酸-無水乙醇-水(4:6:0.5:1)展開，取出，晾干，以2%的茚三酮105°C下烘5分鐘顯色，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍以膠布固定，放置室溫，500nm波長下掃描，以點樣量X為橫坐標，以峰面積積分值I為縱坐標，進行線性回歸，見表1。
[0017]表1牛磺酸含量測宇標準曲線(η = 5)
【權(quán)利要求】
1.全蝎藥材中?；撬岬暮繙y定方法，采用薄層掃描法，其操作步驟如下:1)對照品溶液的制備，取?；撬釋φ掌?，加水制成對照品溶液；2)供試品溶液的制備，取全蝎藥材粗粉，加水25ml，回流提取，提取液過濾，濃縮并定容為10ml，作為供試品溶液；分別吸取對照品和供試品溶液點于同一硅膠G薄層板上，并以正丁醇-冰醋酸-無水乙醇-水為展開劑展開，取出，晾干，以2%的茚三酮105°C下烘5分鐘顯色，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍以膠布固定，放置室溫，薄層掃描儀下單波長掃描，以標準曲線法計算?；撬岬暮?。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量測定方法，其特征在于藥材提取次數(shù)為2次，第一次I小時，第二次0.5小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量測定方法，其特征在于所用展開劑正丁醇-冰醋酸-無水乙醇-水的體積比為4:6:0.5:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量測定方法，其特征在于進行含量測定時掃描波長為500nm。
【文檔編號】G01N30/90GK103901153SQ201210567321
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2012年12月25日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月25日
【發(fā)明者】張繼全, 阮克鋒, 高君偉, 劉春林 申請人:上海張江中藥現(xiàn)代制劑技術(shù)工程研究中心