專利名稱：一種制備細(xì)胞芯片的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于生物醫(yī)學(xué)材料檢測(cè)診斷裝置技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種 用于制備細(xì)胞芯片的裝置。
背景技術(shù)：
生物芯片技術(shù)是20世紀(jì)90年代中期發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)生物高科技 技術(shù)，它以玻片、硅、硝酸纖維膜、尼龍膜等為載體，通過(guò)在單位面 積上高密度的排列大量生物材料，從而達(dá)到一次試驗(yàn)同時(shí)檢測(cè)多種疾 病或分析多種生物樣品的目的。生物芯片根據(jù)其材料的不同可分為多 種，如組織芯片、細(xì)胞芯片、基因芯片、蛋白芯片等，可廣泛應(yīng)用于 基因研究、醫(yī)學(xué)診斷、藥物開(kāi)發(fā)、農(nóng)業(yè)等多個(gè)領(lǐng)域。
細(xì)胞芯片作為生物芯片的一種，因?yàn)槠湓卺t(yī)學(xué)研究及診斷領(lǐng)域尤 其是在新藥開(kāi)發(fā)、藥物試驗(yàn)、細(xì)胞生物學(xué)研究等方面具有非常重要的 意義，近年來(lái)也引起了人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。目前在細(xì)胞芯片的研究 開(kāi)發(fā)中，最常使用的方法是制備多孔檢測(cè)板(類似96孔板)或通過(guò)微 加工技術(shù)在硅、玻璃、塑料等基片表面制造出點(diǎn)陣更多的微孔檢測(cè)板， 將不同細(xì)胞培養(yǎng)或固化于孔中，加入不同的試劑、化學(xué)物等，通過(guò)各 種不同的化學(xué)或非化學(xué)方法檢測(cè)效應(yīng)細(xì)胞的反應(yīng)；還有人在此基礎(chǔ)上 研制了各種不同的微槽反應(yīng)器、反應(yīng)室等裝置來(lái)制備細(xì)胞芯片。
現(xiàn)有細(xì)胞芯片制備裝置在實(shí)際應(yīng)用中存在以下的缺陷和不足首 先是難以保證所有樣品細(xì)胞在被檢時(shí)處于同一細(xì)胞生長(zhǎng)周期和相同 的細(xì)胞生長(zhǎng)條件下，因而也就難以實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化、批量化生產(chǎn)；其次， 每種樣品細(xì)胞每次只能檢測(cè)一項(xiàng)指標(biāo)，再次檢測(cè)時(shí)培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀 態(tài)已經(jīng)發(fā)生了變化，因此樣品細(xì)胞不具有可重復(fù)性；再次，利用培養(yǎng)
細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，因?yàn)榧?xì)胞膜完整，不利于進(jìn)行組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化 學(xué)及原位雜交檢測(cè)；另外，現(xiàn)有細(xì)胞芯片制備裝置結(jié)構(gòu)大都比較復(fù)雜， 操作過(guò)程也相對(duì)煩瑣，條件不好控制，尤其反應(yīng)后檢測(cè)常需要昂貴儀 器，檢測(cè)成本高。
實(shí)用新型內(nèi)容
本實(shí)用新型的目的在于提供一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便、可有效解 決現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷和不足的制備細(xì)胞芯片的裝置。
用于實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)解決方案是這樣的:所提供的制備 細(xì)胞芯片的裝置由相互配合的陣列管固定板和內(nèi)芯固定板組成，在陣 列管固定板上按行列方式直立固定有多根兩端開(kāi)通的陣列管，在內(nèi)芯 固定板上直立固定有多根可分別與陣列管固定板上各陣列管對(duì)位插 入配合的陣列管內(nèi)芯，內(nèi)芯的長(zhǎng)度大于陣列管的長(zhǎng)度；在陣列管遠(yuǎn)離
固定板的管口段內(nèi)管壁四周開(kāi)有多個(gè)微孔。本實(shí)用新型實(shí)際操作中， 首先將內(nèi)芯固定板上各內(nèi)芯由下方對(duì)應(yīng)插入至陣列管固定板的各陣
列管中，通過(guò)陣列管及管內(nèi)芯之間形成的空腔結(jié)構(gòu)，可將多份(2份 以上)細(xì)胞樣本通過(guò)瓊脂糖一次成型包埋于各空腔內(nèi)，在陣列管上端 蓋上擋封板后將制備裝置倒置，使擋封板位于最下層；陣列管空間及 四周微孔有利于細(xì)胞瓊脂包埋塊的脫水、透明、浸蠟等處理，而后利 用陣列管裝置在形成石蠟空心小孔的同時(shí)，輕推內(nèi)芯固定板使各內(nèi)芯 中細(xì)胞瓊脂包埋塊整齊的落入陣列小孔內(nèi)，制成了細(xì)胞芯片石蠟包埋 塊，再經(jīng)過(guò)切片、染色即可完成細(xì)胞芯片的制備。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型所述裝置具有構(gòu)造簡(jiǎn)單，使用方便 等優(yōu)點(diǎn)，使用該裝置能夠迅速大量地一次成型制備出幾十、上百種不 同細(xì)胞類型的細(xì)胞芯片，其產(chǎn)品非常適合于在醫(yī)學(xué)診斷、藥物開(kāi)發(fā)、 細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域推廣使用。

圖1為本實(shí)用新型一個(gè)具體實(shí)施例的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是圖1裝置倒置使用結(jié)構(gòu)的縱剖示意圖。
具體實(shí)施方式
以下將結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型內(nèi)容做進(jìn)一步說(shuō)明，但本實(shí)用新型 的實(shí)際制作結(jié)構(gòu)并不僅限于下述的實(shí)施例。
參見(jiàn)附圖，本實(shí)用新型所述的用于制備細(xì)胞芯片的裝置具有一個(gè) 其上直立固定有多根陣列管2的陣列管固定板3和一個(gè)其上直立固定 有多根陣列管內(nèi)芯l的內(nèi)芯固定板4。陣列管2由多根(2根以上)長(zhǎng) 度相同并以行、列方式平行排列固定于陣列管固定板3上的通管構(gòu) 成，陣列管2管口形狀可為圓形、橢圓形、正方形或長(zhǎng)方形，在陣列 管2遠(yuǎn)離固定板3的管口段內(nèi)管壁四周開(kāi)有多個(gè)微孔6(圖2)。陣列 管內(nèi)芯l的設(shè)置數(shù)目與陣列管2的數(shù)目相同，在固定板4上的分布位 置與陣列管2對(duì)應(yīng)；陣列管內(nèi)芯1的外徑與陣列管2內(nèi)徑相配合，內(nèi) 芯1的長(zhǎng)度大于陣列管2的長(zhǎng)度，各內(nèi)芯1的徑向截面的形狀均與相 應(yīng)陣列管管口的形狀相同，使用時(shí)各內(nèi)芯1均可對(duì)位配合插入在一根 相應(yīng)的陣列管2內(nèi)。陣列管固定板3和內(nèi)芯固定板4的大小相同、形 狀一致，為長(zhǎng)方形或正方形，兩板對(duì)插后，其中一個(gè)板可以另一個(gè)板 為支點(diǎn)上下互相移動(dòng)。在陣列管固定板的各陣列管2的非內(nèi)芯插口端 設(shè)有一個(gè)用于封蓋陣列管端口的大小形狀與固定板3、 4相同的擋封 板5，在擋封板5上開(kāi)有多個(gè)微孔。
通過(guò)本實(shí)用新型所述裝置制備細(xì)胞芯片的方法包括下列步驟
1) 收集多份(2份以上)培養(yǎng)細(xì)胞或脫落細(xì)胞、穿刺液等于離心管 內(nèi)，2000 — 5000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，棄上清，加入適量10%福爾馬 林或95%酒精固定30 60分鐘，離心棄上清，用少許PBS溶解沉淀；
2) 將1 3%優(yōu)質(zhì)瓊脂糖微波加熱溶解后置于55 6CTC水浴鍋中 保持熔化狀態(tài)；
3) 根據(jù)欲制備芯片中所含細(xì)胞數(shù)量及瓊脂糖包埋塊的大小，選擇 相應(yīng)標(biāo)號(hào)的制備裝置并調(diào)節(jié)內(nèi)芯的位置，預(yù)留制備裝置頂端適當(dāng)大小 的空心管腔；
4) 通過(guò)微量加樣器將少許烙化的瓊脂糖加至相對(duì)應(yīng)的制備裝置 上由陣列管2和內(nèi)芯1配合形成的空心管腔內(nèi)，稍等，加入少量溶解 細(xì)胞，然后再加入少量熔化的瓊脂糖封閉管口 ，按對(duì)應(yīng)位置一一加樣， 直至完成最后一例細(xì)胞樣本的瓊脂糖包埋；
5) 脂糖冷卻凝固后，向上推內(nèi)芯固定板，使成形的細(xì)胞瓊脂糖包 埋小柱進(jìn)入帶有微孔的外套管腔內(nèi)，然后在陣列管上面放置帶有微孔 的擋封板5;
6) 將制備裝置倒置，使擋封板5位于最下層(圖2);
7) 按石蠟切片制備流程常規(guī)脫水、透明、浸蠟；
8) 將制備裝置正置，取下?lián)醴獍?，用少許溶解狀態(tài)瓊脂糖或石 蠟一一封固陣列管口；
9) 在包埋框下置一包埋用平板，將制備裝置平放其上，在平板上 傾倒少許熔化專用石蠟，其冷卻凝固后，輕輕壓下內(nèi)芯，使陣列管腔 內(nèi)的細(xì)胞瓊脂包埋小柱按相同的方向在同一平面整齊地落入已經(jīng)形 成的小孔中；
10) 小心緩慢加入熔化的石蠟，待其冷卻凝固后即可將所在細(xì)胞 包埋小柱按規(guī)則的陣列方式固定于同一蠟塊，將其從包埋框中取出即 可得到細(xì)胞芯片的蠟塊；
11) 冷卻凝固蠟塊后即可進(jìn)行切片，染色，并可進(jìn)行免疫細(xì)胞化 學(xué)、原位雜交等檢測(cè)。
權(quán)利要求1、一種制備細(xì)胞芯片的裝置，其特征在于由相互配合的陣列管固定板(3)和內(nèi)芯固定板(4)組成，在陣列管固定板(3)上按行列方式直立固定有多根兩端開(kāi)通的陣列管(2)，在內(nèi)芯固定板(4)上直立固定有多根可分別與陣列管固定板(3)上各陣列管(2)對(duì)位插入配合的陣列管內(nèi)芯(1)，內(nèi)芯(1)的長(zhǎng)度大于陣列管(2)的長(zhǎng)度；在陣列管(2)遠(yuǎn)離固定板(3)的管口段內(nèi)管壁四周開(kāi)有多個(gè)微孔(6)。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備細(xì)胞芯片的裝置，其特征在于陣 列管(2)的管口形狀為圓形、橢圓形、正方形或長(zhǎng)方形，內(nèi)芯(l)的徑 向截面的形狀與陣列管(2)管口形狀相同。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備細(xì)胞芯片的裝置，其特征在于陣 列管固定板(3)和內(nèi)芯固定板(4)的大小相同、形狀一致，為長(zhǎng)方形或正方形。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的制備細(xì)胞芯片的裝置，其特征是在陣 列管固定板的各陣列管(2)的非內(nèi)芯插口端設(shè)有大小形狀與固定板 (3、 4)相同的擋封板(5)，在擋封板(5)上開(kāi)有多個(gè)微孔。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種用于制備細(xì)胞芯片的裝置，由相互配合的陣列管固定板和內(nèi)芯固定板組成，在陣列管固定板上按行列方式設(shè)有多根帶微孔的陣列管，在內(nèi)芯固定板上設(shè)有多根與陣列管固定板上各陣列管對(duì)位配合的陣列管內(nèi)芯。工作中通過(guò)陣列管及內(nèi)芯間形成的空腔結(jié)構(gòu)，將細(xì)胞樣本通過(guò)瓊脂糖包埋于空腔內(nèi)，使之在帶微孔的陣列管空間進(jìn)行脫水、透明、浸蠟等處理，進(jìn)而制成細(xì)胞芯片石蠟包埋塊，再經(jīng)過(guò)切片、染色后即可完成細(xì)胞芯片的制備。本實(shí)用新型的構(gòu)造簡(jiǎn)單，操作方便，能夠迅速成型制備出多種不同細(xì)胞類型的細(xì)胞芯片，非常適合于在醫(yī)學(xué)診斷、藥物開(kāi)發(fā)、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域推廣使用。
文檔編號(hào)G01N33/53GK201186924SQ20082002855
公開(kāi)日2009年1月28日 申請(qǐng)日期2008年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月13日
發(fā)明者張?jiān)搅? 李文生, 王岐山 申請(qǐng)人:陜西省人民醫(yī)院