專(zhuān)利名稱(chēng)：慶大霉素、鏈霉素、新霉素分子印跡整體分離柱及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，具體地說(shuō)是應(yīng)用于測(cè)定動(dòng)物性食品中慶大霉素、鏈霉素、新霉素殘留量的高選擇性分離的分子印跡整體柱及其制備方法。
背景技術(shù)：
氨基糖苷類(lèi)抗生素是一類(lèi)應(yīng)用廣泛，需進(jìn)行治療藥物監(jiān)測(cè)的廣譜抗菌藥物，主要包括慶大霉素(GM)、鏈霉素(SM)、卡那霉素(KM)、巴龍霉素(PM)、新霉素(NM)等。此類(lèi)抗生素的基本結(jié)構(gòu)都是氨基環(huán)醇和氨基糖縮合而成的苷，含氨基或其它堿性基團(tuán)?？股卦讷F醫(yī)和畜牧業(yè)生產(chǎn)中均有大量應(yīng)用，大部分抗生素作為獸藥添加劑用于動(dòng)物疾病預(yù)防、降低死亡率和促生長(zhǎng)。但抗生素存在耐藥性、過(guò)敏和穩(wěn)定性等問(wèn)題，對(duì)人有毒害作用，因此是各國(guó)獸藥殘留監(jiān)控的重要內(nèi)容。測(cè)定動(dòng)物性食品中慶大霉素、鏈霉素、新霉素殘留量的方法目前主要采用離子對(duì)反相液相色譜法，這種方法需使用離子對(duì)試劑，這些離子對(duì)試劑大多為不揮發(fā)鹽，且價(jià)格昂貴，對(duì)色譜柱壽命影響較大，同時(shí)使得分離流動(dòng)相與具有定性能力的質(zhì)譜聯(lián)用非常困難，限制了方法的專(zhuān)一性；且不能與國(guó)際要求和標(biāo)準(zhǔn)接軌。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種應(yīng)用于測(cè)定動(dòng)物源食品中慶大霉素、鏈霉素、新霉素殘留量的高選擇性分離的分子印跡整體柱及其制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的慶大霉素、鏈霉素、新霉素分子印跡整體分離柱是用慶大霉素、鏈霉素、新霉素作為聚合原料模板分子與功能單體甲基丙烯酸和交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯，按模板分子∶功能單體∶交聯(lián)劑＝1～5∶4～10∶20～100，在柱管直徑為0.20mm～20mm，長(zhǎng)度為1cm～30cm的空柱管中采用原位聚合方式制備的整體分離柱。
其制備方法包括以下步驟(1).慶大霉素、鏈霉素、新霉素印跡分子聚合物反應(yīng)體系將聚合原料模板分子(慶大霉素、鏈霉素、新霉素)功能單體甲基丙烯酸(MAA)、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)，按模板分子∶功能單體∶交聯(lián)劑＝1～5∶4～10∶20～100，依次加入到圓底燒瓶中，再加入引發(fā)劑偶氮二異丁腈(AIBN)、致孔劑水、甲醇、乙腈、四氫呋喃、乙醇、氯仿、乙醚等中的幾種構(gòu)成的混合物，超聲5～30min，真空條件下通氮?dú)?～40min；(2)將反應(yīng)混合物吸入空柱管，柱管尺寸直徑為0.20mm～20mm，長(zhǎng)度為1cm～30cm，柱管材料可用不銹鋼、石英玻璃、及高聚物材料，如聚丙烯等；柱管兩頭密封后，在40～90℃水浴中反應(yīng)聚合5～48h；(3)聚合完成后，開(kāi)啟柱兩端封口，分別用水、甲醇洗柱，體積分別為3～20個(gè)柱體積。
由于慶大霉素、鏈霉素、新霉素印跡分子聚合物是一種有固定孔穴大小和形狀及有確定排列的功能基團(tuán)的交聯(lián)聚合物，它對(duì)慶大霉素、鏈霉素、新霉素模板分子的立體結(jié)構(gòu)具有“記憶”功能，可應(yīng)用于用于測(cè)定動(dòng)物性食品中慶大霉素、鏈霉素、新霉素殘留量的高選擇性分離。
本印跡整體分離柱較普通離子對(duì)反相高效液相色譜法法更為簡(jiǎn)單、快速、高效。其所用流動(dòng)相與電噴霧質(zhì)譜完全兼容，慶大霉素、鏈霉素、新霉素在該柱上分離后可同時(shí)用質(zhì)譜進(jìn)行定性、定量。


圖1為未加模板分子進(jìn)行原位聚合后的聚合物內(nèi)部掃描電鏡圖；圖2為以慶大霉素、鏈霉素、新霉素為模板分子進(jìn)行原位聚合后聚合物內(nèi)部掃描電鏡圖。
具體實(shí)施例方式
以下通過(guò)具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施例1慶大霉素、鏈霉素、新霉素分子印跡整體分離柱的制備向細(xì)頸帶磨口的10ml試管中加入慶大霉素、鏈霉素、新霉素0.060、0.076、0.078g、甲基丙烯酸0.16ml，用9ml混合有機(jī)溶劑(水1.5ml、甲醇1ml、乙腈6ml、四氫呋喃0.5ml)溶解，加入二甲基丙烯酸乙二醇酯2.4ml真空脫氣15min后加19.6mg偶氮二異丁腈超聲振蕩1min密封，低溫保存。
將上述溶液吸入毛細(xì)管內(nèi)，并密封小柱兩端后置于60℃水浴中聚合24h。以上所得的聚合物柱先用水沖洗，再用甲醇洗脫。經(jīng)掃描電鏡對(duì)整體柱中填料聚合物內(nèi)部進(jìn)行觀(guān)察，分子印跡聚合物空隙度遠(yuǎn)大于不含模板分子進(jìn)行聚合而成的空白聚合物的空隙度，證明模板分子形成了有效吸附空腔。
權(quán)利要求
1.慶大霉素、鏈霉素、新霉素分子印跡整體分離柱，其特征在于是用慶大霉素、鏈霉素、新霉素作為聚合原料模板分子與功能單體甲基丙烯酸和交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯，按模板分子∶功能單體∶交聯(lián)劑＝1～5∶4～10∶20～100，在柱管直徑為0.20mm～20mm，長(zhǎng)度為1cm～30cm的空柱管中采用原位聚合方式制備的整體分離柱。
2.慶大霉素、鏈霉素、新霉素分子印跡整體分離柱的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1).慶大霉素、鏈霉素、新霉素印跡分子聚合物反應(yīng)體系將聚合原料模板分子(慶大霉素、鏈霉素、新霉素)、功能單體甲基丙烯酸(MAA)、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)，按模板分子∶功能單體∶交聯(lián)劑＝1～5∶4～10∶20～100，依次加入到圓底燒瓶中，再加入引發(fā)劑偶氮二異丁腈(AIBN)、致孔劑水、甲醇、乙腈、四氫呋喃、乙醇、氯仿、乙醚等，超聲5～30min，通氮?dú)?～40min，真空；(2)將反應(yīng)混合物吸入空柱管，柱管尺寸直徑為0.20mm～20mm，長(zhǎng)度為1cm～30cm，柱管材料可用不銹鋼、石英玻璃、及高聚物材料，如聚丙烯等；柱管兩頭密封后，在40～90℃水浴中反應(yīng)聚合5～48h；(3)聚合完成后，開(kāi)啟柱兩端封口，分別用水、甲醇洗柱，體積分別為3～20個(gè)柱體積。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了應(yīng)用于測(cè)定動(dòng)物源食品中慶大霉素、鏈霉素、新霉素殘留量的高選擇性分離的分子印跡整體柱及其制備方法。以慶大霉素、鏈霉素、新霉素作分子模板，在空柱中進(jìn)行原位結(jié)合，制備慶大霉素、鏈霉素、新霉素分子印跡整體柱，柱中填料是一種有固定孔穴大小和形狀及有確定排列功能基團(tuán)的交聯(lián)聚合物，它對(duì)慶大霉素、鏈霉素、新霉素模板分子的立體結(jié)構(gòu)具有“記憶”功能。用于此分子印跡整體柱可對(duì)殘留分析樣品溶液中慶大霉素、鏈霉素、新霉素進(jìn)行高選擇性分離。本印跡整體柱較普通反相C18分離柱有更強(qiáng)的保留，不需離子對(duì)試劑參與分離，流動(dòng)相可與質(zhì)譜很好的兼容。
文檔編號(hào)B01D53/00GK1667409SQ20051003111
公開(kāi)日2005年9月14日 申請(qǐng)日期2005年1月6日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月6日
發(fā)明者陳波, 馬金余, 劉程 申請(qǐng)人:湖南紐爾科技有限公司