Ρ0活力。
[0222]計(jì)算公式:ΜΡ0活力(U/g)=(測(cè)定0D值-對(duì)照0D值)/(11.3 X取樣量(g))
[0223] 慢性期藥效ΜΡ0考察結(jié)果如圖12所示。由圖12可見(jiàn)，模型組的ΜΡ0值比正常組的顯 著升高，表明炎癥還一定程度上存在;同時(shí)，XG
[0224] 組與模型組有顯著差異，ρ〈0· 05。
[0225] 2.2.5.5血清中SOD的測(cè)定
[0226] 眼眶取血后，血液室溫靜置lh，3500rmp離心制備血清，按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作 測(cè)定。
[0227] 慢性期藥效S0D考察結(jié)果如圖13所示。由圖13可見(jiàn)，模型組的S0D值比正常組的顯 著降低，表明炎癥還一定程度上存在;B組與模型組則無(wú)顯著差異。同時(shí)，XG組、XS組與模型 組有顯著差異，P值分別是P〈〇. 01，P〈〇. 05;此外，XG組比B組的S0D值明顯高，有顯著差異，p〈 0.05〇
[0228] 2.2.5.6結(jié)腸指數(shù)、臟器系數(shù)和體重變化的測(cè)定
[0229] 稱量脾臟、肝臟、肺臟的重量，計(jì)算各臟器系數(shù)。臟器系數(shù)=臟器重量(g)/體 [0230]重(g) X 100% ;結(jié)腸指數(shù)=結(jié)腸長(zhǎng)度(cm)/結(jié)腸重量(g) 〇
[0231 ]急性期結(jié)腸長(zhǎng)度考察結(jié)果如圖14所示，急性期結(jié)腸重量考察結(jié)果如圖15所示，急 性期結(jié)腸指數(shù)考察結(jié)果如圖16所示，慢性期結(jié)腸長(zhǎng)度考察結(jié)果如圖17所示，慢性期結(jié)腸重 量考察結(jié)果如圖18所示，慢性期結(jié)腸指數(shù)考察結(jié)果如圖19所示，圖14-19的統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表11 所示。
[0232]
[0233] 表11:給藥25天各組小鼠的結(jié)腸系數(shù)(:i ± s)
[0234] 慢性期脾臟系數(shù)觀察結(jié)果如圖20所示，慢性期肝臟系數(shù)觀察結(jié)果如圖21所示，慢 性期肺臟系數(shù)觀察結(jié)果如圖22所示，圖20-22的統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表12所示。
[0235]
[0236] 注：與正常組相比，ΛΡ<0·05，ΛΛΡ<0·01;與模型組相比，*Ρ<0·05, * *P< 0.01;與8組相比，1^?<0.05，1^1^?<0.01
[0237] 表12:給藥25天各組小鼠的臟器系數(shù)0 ± s:)
[0238]給藥25后，模型組的脾臟依然明顯腫大，肺臟萎縮，肝臟腫大，且結(jié)腸縮短，腸壁增 厚，結(jié)腸重量增加；而給藥XG、XS組則上癥狀較輕，與模型組有顯著差異;B組大部分系數(shù)與 模型組差異不顯著。
[0239] 急性期體重變化考察結(jié)果如圖23所示。由圖23可見(jiàn)，體重變化小檗堿組的體重減 輕最嚴(yán)重，比模型組的減輕純度還有高，與小檗堿l〇〇mg/kg會(huì)減輕UC小鼠體重的文獻(xiàn)報(bào)道 一致而XG組體重在第二周基本恢復(fù)。
[0240] 2.2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
[0241] 采用STATVIEW軟件分析，數(shù)據(jù)以表示，組間比較采用方差分析和t檢驗(yàn)，
[0242] ρ〈0·05為差異有顯著性。
[0243] 2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0244] 2.3.1結(jié)腸指數(shù)
[0245] 2.3.1.1結(jié)腸長(zhǎng)度變化
[0246]模型組的結(jié)腸長(zhǎng)度明顯縮短;給藥組與模型組中，結(jié)腸長(zhǎng)度以XG最長(zhǎng)，與模型組有 顯著差異。
[0247] 將實(shí)施例2~7中制得的雙黃素，進(jìn)行上述的抗菌活性試驗(yàn)和抗?jié)冃阅c炎活性試 驗(yàn)，也得到同樣的結(jié)論:本發(fā)明的雙黃素具有較好的抗菌活性和抗?jié)冃阅c炎活性。因此， 實(shí)施例2~7的試驗(yàn)數(shù)據(jù)就不再一一列出。
[0248] 以上所述的僅是本發(fā)明的一些實(shí)施方式。對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫 離本發(fā)明創(chuàng)造構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種雙黃素，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示：其中，式（I)中的η為整數(shù)，且1封到0。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雙黃素，其特征在于，所述的η等于4。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雙黃素的制備方法，其特征在于，包括W下步驟： (la) 小築紅堿衍生物的合成:稱取小築紅堿，加入有機(jī)溶劑，加熱至沸騰后加入X(C此)η Υ，回流反應(yīng)，將反應(yīng)液濃縮，冷卻結(jié)晶，過(guò)濾，得小築紅堿衍生物； 所述的X(C出)η Υ中，Χ = Υ或X辛Υ，Χ、Υ獨(dú)立地為0、S、F、C1、化或Ι，η為整數(shù)，且l^n^lO; (2a)取步驟（la)得到的小築紅堿衍生物與黃琴素混合，加入無(wú)水碳酸鋼和有機(jī)溶劑， 攬拌，加熱回流反應(yīng)，將反應(yīng)液趁熱過(guò)濾，濾液回收溶劑，用DMS0溶解，柱分離，依次用質(zhì)量 百分濃度為30 %、40 %、50 %、60 %的甲醇溶液洗脫，HPLC檢測(cè)，收集質(zhì)量百分濃度為60 %甲 醇洗脫部分，濃縮，濃縮液再用硅膠拌樣，硅膠柱分離，洗脫后即得雙黃素。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種雙黃素的制備方法，其特征在于，所述步驟(la)替換為： 稱取小築紅堿1重量份，加入有機(jī)溶劑150~200重量份，85 °C加熱至沸騰，加入1，2-二 漠下燒20~40重量份，回流反應(yīng)化，將反應(yīng)液濃縮至50~100份，冷卻得結(jié)晶C，過(guò)濾，用適量 有機(jī)溶劑洗涂結(jié)晶C，洗涂液與濾液合并，回收有機(jī)溶劑，殘?jiān)?0重量份的甲醇溶解，冷卻 得結(jié)晶D，過(guò)濾，用甲醇洗涂結(jié)晶D，合并結(jié)晶C和結(jié)晶D，即得小築紅堿衍生物。5. 根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的一種雙黃素的制備方法，其特征在于，所述步驟(2a)替換 為： 取步驟(la)得到的小築紅堿衍生物1.2重量份與黃琴素1重量份混合，加入無(wú)水碳酸鋼 2重量份、有機(jī)溶劑150重量份，攬拌，加熱至85°C，回流化，將反應(yīng)液趁熱過(guò)濾，濾液回收溶 劑，用5重量份的DMS0溶解溶解，柱分離，依次用質(zhì)量百分濃度為30 %、40 %、50 %、60 %的甲 醇溶液洗脫，HPLC檢測(cè)，收集質(zhì)量百分濃度為60 %甲醇洗脫部分，濃縮，濃縮液再用3重量份 的硅膠拌樣，硅膠柱分離，用20倍柱體積的石油酸和乙酸乙醋混合液洗脫，再用甲醇洗脫， 回收甲醇，即得雙黃素。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雙黃素的制備方法，其特征在于，包括W下步驟： (lb) 黃琴素衍生物的合成：取黃琴素，與無(wú)水碳酸鋼混合，加入有機(jī)溶劑，再加入X (C出)η Y，加熱反應(yīng)，得黃琴素衍生物； 所述的X(C出)η Υ中，Χ = Υ或X辛Υ，Χ、Υ獨(dú)立地為0、S、F、C1、化或Ι，η為整數(shù)，且l^n^lO; (2b)取步驟Qb)得到的黃琴素衍生物，與無(wú)水碳酸鋼和小築紅堿混合，加入有機(jī)溶劑， 攬拌，加熱回流反應(yīng)，將反應(yīng)液趁熱過(guò)濾，濾液回收溶劑，用DMSO溶解，柱分離，依次用質(zhì)量 百分濃度為30 %、40 %、50 %、60 %的甲醇溶液洗脫，HPLC檢測(cè)，收集質(zhì)量百分濃度為60 %甲 醇洗脫部分，濃縮，濃縮液再用硅膠拌樣，硅膠柱分離，洗脫，即得雙黃素。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種雙黃素的制備方法，其特征在于，所述步驟（lb)中黃琴 素、無(wú)水碳酸鋼、X(CH2)n Y的摩爾比為1:2:16,所述黃琴素與有機(jī)溶劑的摩爾體積比為1: 150mol/L，反應(yīng)溫度為85°C，反應(yīng)時(shí)間為化;所述X(C出)η Y為1,2-二漠下燒。8. 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的一種雙黃素的制備方法，其特征在于，所述步驟(2b)替換 為:取步驟（lb)得到的黃琴素衍生物1重量份、無(wú)水碳酸鋼2重量份、小築紅堿1重量份加入 反應(yīng)器中，加入有機(jī)溶劑150份，攬拌，加熱至85°C，回流化，將反應(yīng)液趁熱過(guò)濾，濾液回收溶 劑，用5重量份的DMSO溶解，柱分離，依次用質(zhì)量百分濃度為30 %、40 %、50 %、60 %的甲醇溶 液洗脫，HPLC檢測(cè)，收集質(zhì)量百分濃度為60%甲醇洗脫部分，濃縮，濃縮液再用3重量份的娃 膠拌樣，硅膠柱分離，用20倍柱體積的石油酸和乙酸乙醋混合液洗脫，再用甲醇洗脫，回收 甲醇，即得雙黃素。9. 根據(jù)權(quán)利要求3、4、6或7所述的一種雙黃素的制備方法，其特征在于，所述小築紅堿 采用W下方法制備而成： 在反應(yīng)器中加入料液比為1:15~30g/L的小築堿和DMF，加入沸石，回流冷凝，在400W~ 800W微波福射下，反應(yīng)10~20min，取出反應(yīng)器，趁熱加入水稀釋冷卻，冷藏過(guò)夜，使析晶完 全，抽濾，干燥，得結(jié)晶C;濾液另用大孔樹(shù)脂柱分離，依次用質(zhì)量百分濃度為40%、45%、 50 %、55 %、60 %、65 %、70 %的甲醇洗脫，收集質(zhì)量百分濃度為70%甲醇洗脫部位，濃縮，得 結(jié)晶D，將結(jié)晶C和結(jié)晶D合并，即得小築紅堿。10. 權(quán)利要求1或2所述的一種雙黃素在制備治療潰瘍性腸炎藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種雙黃素，具有如通式(Ⅰ)所示的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明還公開(kāi)了該化合物的制備方法，由小檗紅堿與黃芩素的合成得到。本發(fā)明還公開(kāi)了該化合物在制備治療潰瘍性腸炎藥物中的應(yīng)用。該化合物與小檗堿和黃芩素相比，多核分子化合物的毒性得到顯著降低，吸收顯著提高，提高了生物利用度，延長(zhǎng)了代謝時(shí)間，可以達(dá)到長(zhǎng)效的效果，而且增強(qiáng)了抗?jié)冃阅c炎和抗致病菌的藥效。
【IPC分類】C07D455/03, A61K31/4375, A61P1/00, A61P1/04
【公開(kāi)號(hào)】CN105693713
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610117470
【發(fā)明人】李衛(wèi)民, 袁曉, 榮向路, 周東斌
【申請(qǐng)人】廣州牌牌生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年6月22日
【申請(qǐng)日】2016年3月2日