一種釀酒酵母及其在制備皮膚外用劑中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及微生物領域，具體涉及一種釀酒酵母及其在制備皮膚外用劑中的應 用。
【背景技術】
[0002] 自由基衰老學說（Harman，D·Aging:Atheorybasedonfreeradicaland radiationchemistry.J.Gerontol· 1956，11: 289-300)，認為過多的自由基是造成生物老 化的重要原因。根據(jù)這一理論，體內(nèi)過量的活性氧自由基與不飽和脂肪酸作用產(chǎn)生丙二醛 等物質(zhì)，丙二醛與細胞膜上的蛋白質(zhì)等作用產(chǎn)生褐色素，沉淀于皮膚成為各種色斑。過量的 自由基還能使皮膚內(nèi)的膠原纖維、彈性纖維發(fā)生交聯(lián)變性、變脆、失去彈性，當皮膚水分不 足時，容易使彈性纖維斷裂，出現(xiàn)暗紋、細紋、皺紋等皮膚老化現(xiàn)象。此外，環(huán)境中的離子輻 射以及諸如空氣污染與化學物質(zhì)的環(huán)境污染物，也會使生物體內(nèi)不斷地產(chǎn)生自由基。例如 紫外線會使皮膚真皮中的纖維母細胞及粒線體受到刺激，進而釋放出超氧陰離子，而過量 的超氧陰離子則會轉(zhuǎn)換成其它破壞性更強的自由基。
[0003] 雖然人體內(nèi)具有能夠維持氧化與抗氧化之間平衡狀態(tài)的抗氧化防御系統(tǒng)，用以減 緩活性氧及自由基的產(chǎn)生，但若長期過度地曝曬在陽光下，則人體內(nèi)大量產(chǎn)生的自由基會 導致皮膚的抗氧化防御能力降低，造成皮膚的傷害，例如光老化、表皮皺紋、皮膚免疫力失 調(diào)等。目前已知有維生素E、維生素C等生物體內(nèi)的清除自由基型抗氧化劑，另外也報道了植 物來源的抗氧化劑如蓮花、梅果提取物等。
[0004] 皮膚老化的原因可以分為光老化和內(nèi)因引起的老化，紫外線(UV)暴露引起的光老 化會引起皮膚彈性蛋白酶的活性增加。目前已知有植物來源的抗老化活性物有寥藍、香豌 豆等。
[0005] 釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)是單細胞真菌，形態(tài)通常有球形、卵圓形 等，一般為1~5微米至5~30微米，有細胞壁、細胞膜、細胞核、細胞質(zhì)結構。釀酒酵母主要生 長在偏酸性的潮濕的含糖環(huán)境中，菌體含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、糖分和B族維生素等，以及 酶、輔酶、核糖核酸、留醇和一些新陳代謝的中間產(chǎn)物，具有豐富的營養(yǎng)價值。釀酒酵母豐富 的代謝產(chǎn)物可利用于藥物或化妝品的制備中，如SAM、NAD(H)激酶、Pos5p、胞外多糖、金屬硫 蛋白等。SAM是半胱氨酸、?；撬岷凸入赘孰牡戎匾镔|(zhì)的前體。如谷胱甘肽是美國Merle Norman經(jīng)典作品，風行歐美50年，堪稱世紀美白祛斑經(jīng)典。NAD(Η)激酶的缺失將導致細胞抗 氧化性能出現(xiàn)障礙。在細胞面臨不同類型的氧化脅迫時，P〇s5p都能有效行使其NAD(H)激酶 活性，補充NADP(H)的損耗，從而對細胞起到抗氧化保護作用。釀酒酵母多糖作為多糖中的 一種，研究發(fā)現(xiàn)其具有多種生理活性，能夠提高機體免疫力，還具有抗氧化、抗病毒和抑制 腫瘤等作用。
[0006] 盡管來源于微生物的具有抗氧化清除自由基和抗衰老活性作用的抗老化物質(zhì)正 日漸得到護膚產(chǎn)業(yè)的重視，但是目前仍然缺乏具有抵御紫外線能力強、糖苷酶活性強的釀 酒酵母。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明所要解決的技術問題是，針對目前缺乏具有抵御紫外線能力強、糖苷酶活 性強的釀酒酵母的不足，提供一種抵御紫外線能力強、糖苷酶活性強的釀酒酵母及其在制 備皮膚外用劑中的應用。
[0008] 本發(fā)明的技術方案之一是:一種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，其保藏 在中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏號為:CCTCCNo:M2015725。
[0009] 將購自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心（ChinaCenterofIndustrial CultureCollection，CICC)的釀酒酵母菌株通過神舟十號載人飛船搭載進入太空，歷經(jīng)15 天的太空搭載后，經(jīng)選擇獲得所述的釀酒酵母CCTCCNo:M2015725。所述的釀酒酵母CCTCC No:Μ2015725在PDA液體培養(yǎng)基中生長良好，具有抵御紫外線能力強、糖苷酶活性強的特 性。對該菌株進行鑒定，結果為釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，命名為JBA-DZ-49-Gly-3-05。該菌株已于2015年12月7日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，并收到保藏編號 CCTCCNo:M2015725〇
[0010] 本發(fā)明的技術方案之二是，一種培養(yǎng)釀酒酵母CCTCCΝο:Μ2015725的方法，其包 括以下的步驟:在培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述的釀酒酵母CCTCCΝο:Μ2015725即可。
[0011] 其中，所述的培養(yǎng)基為本領域常規(guī)的培養(yǎng)基，能夠生長所述的釀酒酵母CCTCCNo: Μ2015725即可，較佳地為PDA液體培養(yǎng)基、YH)培養(yǎng)基或GMMY培養(yǎng)基。所述的Η)Α液體培養(yǎng)基 為本領域常規(guī)的PDA液體培養(yǎng)基，較佳地，其包括5g/L馬鈴薯浸粉、15g/L葡萄糖、10g/L蛋白 胨和5g/LNaCl。所述培養(yǎng)的溫度為本領域常規(guī)的溫度，能夠生長所述的釀酒酵母CCTCC No:Μ2015725即可，較佳地為28~30°C，更佳地為28°C。所述培養(yǎng)的時間為本領域常規(guī)的時 間，較佳地為2~3天，更佳地為2天。
[0012] 較佳地，所述的培養(yǎng)前還包括使用種子培養(yǎng)基進行種子培養(yǎng)的步驟。所述的種子 培養(yǎng)為本領域常規(guī)的種子培養(yǎng)。所述的種子培養(yǎng)基為本領域常規(guī)的種子培養(yǎng)基，較佳地為 PDA液體培養(yǎng)基。所述種子培養(yǎng)的時間為本領域常規(guī)的時間，較佳地為48~60小時，更佳地 為48小時。所述種子培養(yǎng)的溫度為本領域常規(guī)的溫度，較佳地為28~30°C。所述種子培養(yǎng)的 接種量為本領域常規(guī)的接種量，較佳地為5%，所述百分比為體積百分比。
[0013]本發(fā)明的技術方案之三是:一種釀酒酵母CCTCCNo:M2015725在制備皮膚外用劑 中的應用。
[0014] 本發(fā)明所述釀酒酵母CCTCCNo:M2015725具有抵御紫外線能力強、β-糖苷酶酶活 性高的特性，能夠應用于皮膚外用劑的制備中，以達到抗氧化、抗衰老的目的。
[0015]本發(fā)明中，所述皮膚外用劑是通常用于皮膚外部的所有成分的統(tǒng)稱概念，例如可 以是化妝品或藥品。所述化妝品中可以是基礎化妝品、面部妝容化妝品、頭部用護理品、身 體用化妝品等，對其劑型無特殊限制，根據(jù)不同目的可合理選擇。
[0016]本發(fā)明中，所述的皮膚外用劑的形式可以為任何合適的產(chǎn)品形式，所述的產(chǎn)品形 式包括，但不限于氣溶膠型噴霧劑、霜劑、乳液、固體、液體、分散體、泡沫、凝膠、化妝水、摩 絲、軟膏、粉劑、貼劑、潤發(fā)油、手按栗型噴霧劑、棒狀物、面膜和濕紙巾。眾所周知地，本發(fā)明 的皮膚外用劑可為化妝品、皮膚病學或藥物局部施用產(chǎn)品，其制備方法可為本領域常規(guī)的 制備方法。
[0017]所述的皮膚外用劑還可以進一步包含可藥用載體。所述的可藥用載體是本領域常 規(guī)可藥用載體，較佳地為防腐劑、香精、親水性活性劑和親脂性活性劑中的一種或多種。所 述的可藥用載體的含量為本領域常規(guī)的含量。
[0018]所述的皮膚外用劑還可以進一步包括一種或多種下述成分:抗過敏劑、抗微生物 劑、抗氧化劑、螯合劑、著色劑去色素劑、潤膚劑、乳化劑、表皮脫落劑、香料、保濕劑、昆蟲驅(qū) 避劑、潤滑劑、藥物活性劑、增濕劑、耐光劑、防腐劑、護膚劑、皮膚滲透增強劑、防曬劑、穩(wěn)定 劑、表面活性劑、增稠劑、粘度調(diào)節(jié)劑、維生素或其任意組合。該些成分的含量可為本領域常 規(guī)的含量。
[0019] 在符合本領域常識的基礎上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實 例。
[0020] 本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。
[0021] 本發(fā)明的積極進步效果在于:本發(fā)明通過太空搭載誘變及后續(xù)的篩選方法，獲得 了一株抵御紫外線能力強、糖苷酶活性強的釀酒酵母CCTCCNo:M2015725,并且提供了其 在制備皮膚外用劑中的應用。釀酒酵母CCTCCNo:M2015725具有抵御紫外線能力強、β-糖 苷酶酶活性高的特性，并且可以通過發(fā)酵提高植物提取物的生物可利用性和活性，因此該 釀酒酵母能夠應用于皮膚外用劑的制備中。所制得的皮膚外用劑擁有更強的抗老化和抗衰 老能力，該皮膚外用劑能夠幫助皮膚清除的自由基，抵御UV輻射，防止光老化。
[0022]生物材料保藏信息
[0023]本發(fā)明的所述的釀酒酵母（Saccharomycescerevisiae)，已于2015年12月7日保 藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：中國武漢武漢大學，郵編:430072，保藏 編號為CCTCCNo:M2015725,培養(yǎng)物名稱為釀酒酵母JBA-DZ-49-Gly-3-05,分類命名為 SaccharomycescerevisiaeJBA-DZ-49-Gly-3-〇5〇
【具體實施方式】
[0024]下面通過實施例的方式進一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實 施例范圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規(guī)方法和條件，或按照商 品說明書選擇。
[0025]實施例中所述室溫是本領域常規(guī)的室溫，較佳地為10~30°C。
[0026]實施例中所述培養(yǎng)基的組分如下所示：
[0027] YPD培養(yǎng)基：1% (w/w)酵母膏、2% (w/w)蛋白胨、2% (w/w)葡萄糖和水，pH為6.0。 [0028]PDA液體培養(yǎng)基:5g/L馬鈴薯浸粉、15g/L葡萄糖、15g/L蛋白胨和5g/LNaCl。
[0029]實施例1本發(fā)明新微生物的獲得
[0030] 將購自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心（ChinaCenterofIndustrial CultureCollection，CICC)的酵母菌菌株(菌株保藏編號CICC1210)等分為兩份，一份通過 神舟十號載人飛船搭載進入太空，歷經(jīng)15天的太空搭載后，分離獲得太空誘變的酵母菌菌 株DZ-39、DZ-49,另外一份為出發(fā)菌株CK作為對照，以便進行以下的試