一種西柏烷二萜化合物及其分離與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于化合物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種西柏烷二萜化合物及其分離與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 天然產(chǎn)物是藥物的重要來源，也在抗腫瘤藥物開發(fā)中起著重要的作用。據(jù)報(bào)道，在 1981年至2006年間上市的新藥中有50%直接或間接來源于天然產(chǎn)物，其中，約有2/3的抗 腫瘤藥物來源于天然產(chǎn)物。
[0003] 西松燒二砲屬于十四元大環(huán)二砲，最早于1951年分離自植物ineoleresins和煙 草中。1960年代以來，相繼從海洋生物中分離得到了一系列西松烷二萜類化合物，至2013 年2月，已報(bào)道從自然界得到西松烷二萜700多個(gè)，這類化合物結(jié)構(gòu)新穎、復(fù)雜、種類繁多， 目前所得到的大多數(shù)西松烷型二萜類化合物都具有較好的細(xì)胞毒、抗腫瘤、抑菌和調(diào)節(jié)植 物生長等生物活性。
[0004]目前，分離獲得的西松烷二萜主要來至海洋生物軟珊瑚、柳珊瑚等軟體海洋動(dòng)物。 相對于海洋生物，煙草不僅資源豐富，生物產(chǎn)量高，生產(chǎn)成本低，而且西松烷二萜含量豐富， 據(jù)報(bào)道，目前從煙草中分離獲得的西松烷二萜化合物已達(dá)50多個(gè)。因此，進(jìn)一步挖掘煙草 西松烷二萜資源，尋找新的西松烷二萜化合物，研究其抗腫瘤活性，不僅促進(jìn)天然抗腫瘤藥 物的開發(fā)和利用，而且挖掘煙草在人類健康領(lǐng)域的作用，趨利避害，提高煙草的綜合利用價(jià) 值。
[0005]另外，西松烷二萜存在于海洋生物體內(nèi)，且含量低，提取、分離較困難，而煙草西松 烷二萜是煙草表面腺毛分泌物的主要成分，主要存在于煙草葉片、花表面，提取及分離純化 簡便，便于批量生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本發(fā)明的目的在于提供一種西柏烷二萜化合物 及其分離與應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
[0008] -種西柏烷二萜化合物，其特征在于，該化合物為10, 11-環(huán)氧_2, 7-西柏二 烯-4, 7, 12-三醇，分子式為：C2(]H3404,其結(jié)構(gòu)式如式I所示：
[0009]
[0010] 進(jìn)一步的，該化合物在高分辨質(zhì)譜給出準(zhǔn)分子離子峰為361. 2331 [M+Na]+，計(jì)算值 為 361.2349。
[0011] 進(jìn)一步的，該化合物在以MeOH為溶劑的紫外吸收UV的吸收峰為204,吸光 度為1. 25。
[0012] 進(jìn)一步的，該化合物在以KBr為溶劑的紅外吸收IR的吸收峰v_為3400, 2960， 1720, 1475, 1390, 1380, 1120, 980cmi。
[0013] -種西柏烷二萜化合物，該化合物的分離步驟如下：
[0014] (1)制粗提物浸膏：選取大田生產(chǎn)盛花期烤煙煙草花序?yàn)樵?，依次?個(gè)盛有二 氯甲烷的玻璃燒容器連續(xù)浸提兩次，每次ls_2s，浸提過程中，燒杯中二氯甲烷顏色變黃褐 時(shí)及時(shí)更換溶劑，浸提液合并，無水硫酸鈉干燥后過濾，40°C減壓濃縮，回收溶劑，獲得粗提 物浸膏；
[0015] (2)洗脫制餾分：取浸膏250g過硅膠柱層析，以石油醚：丙酮的體積比分別為 100 :0,60 :1，30 :1，10 :1，5 :1，3 :1，1 :1，0 :1的混合物和甲醇梯度洗脫，將所得餾份經(jīng)薄層 層析檢測合并，得到不同的餾分；
[0016] (3)二度洗脫制餾分：以石油醚：丙酮的體積比為10 :1的混合物和甲醇梯度洗脫 得到的餾分部分通過硅膠柱層析，以氯仿：甲醇的體積比分別為60 :1，20 :1的混合物為洗 脫劑進(jìn)行梯度洗脫，得到三個(gè)餾分；
[0017] (4)取步驟（3)中的第三個(gè)餾分部分過硅膠柱層析，以氯仿：甲醇的體積比為20: 1的洗脫劑進(jìn)行洗脫，然后過S印hadexLH-20,以CHCl3:MeOH的體積比為1 :1的混合物為洗 脫液，最后過硅膠柱層析，以CHCl3:Me2C0的體積比為2 :1的洗脫液反復(fù)洗脫得到化合物。
[0018] 進(jìn)一步的，該化合物在制備抗腫瘤的治療藥物中的應(yīng)用。
[0019] 進(jìn)一步的，該化合物對結(jié)腸癌細(xì)胞HTC-116有抑制活性，在20-80yg/mL范圍內(nèi)， 呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，其半抑制濃度為65yg/mL。
[0020] 進(jìn)一步的，該化合物對肺腺癌細(xì)胞A549有抑制活性，在20-120yg/mL范圍內(nèi)，呈 劑量-效應(yīng)關(guān)系，其半抑制濃度為83yg/mL。
[0021 ] 進(jìn)一步的，該化合物對肝癌細(xì)胞IfepG2有抑制活性，在40-120yg/mL范圍內(nèi)，呈劑 量-效應(yīng)關(guān)系，其半抑制濃度為84yg/mL。
[0022] 本發(fā)明的有益效果為：
[0023] 本發(fā)明為充分利用煙草資源，尋找新型抗腫瘤藥物醫(yī)藥中間體，對采自我國山東 諸城大田開花期煙草花絮表面分泌物二氯甲烷提取物進(jìn)行分離、結(jié)構(gòu)鑒定，經(jīng)現(xiàn)代波譜技 術(shù)（一維和二維核磁、高分辨質(zhì)譜和紅外光譜等）確定了該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及立體構(gòu) 型為一新化合物獲得一個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的化合物，10,11-環(huán)氧-2, 7-西柏二烯-4, 7,12-三醇 (10,ll-epoxy-2, 7-cembradiene_4, 7,12-triol)，分子式為：C2QH3404。其應(yīng)用為制備抗腫瘤 藥物，經(jīng)體外抗腫瘤活性測定，該化合物對結(jié)腸癌細(xì)胞HTC-116、肺腺癌細(xì)胞A549、肝癌細(xì) 胞IfepG2等3種腫瘤細(xì)胞株有明顯的抑制作用，本發(fā)明不僅為研制新的抗腫瘤藥物提供了 先導(dǎo)化合物，而且該西松烷化合物提取、分離方法簡單，便于批量生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0024] 圖1為化合物對結(jié)腸癌細(xì)胞HTC-116的抑制活性圖。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 1、化合物的分離過程
[0026] 該化合物是從煙草花序表面分泌物提取物獲得的。選取大田生產(chǎn)盛花期烤煙煙 草花序?yàn)樵希来卧?個(gè)盛有二氯甲烷的玻璃燒容器連續(xù)浸提兩次，每次ls_2s，浸提過 程中，燒杯中二氯甲烷顏色變黃褐時(shí)及時(shí)更換溶劑，浸提液合并，無水硫酸鈉干燥后過濾， 40°C減壓濃縮，回收溶劑，獲得粗提物浸膏。取浸膏250g過硅膠柱層析，以石油醚：丙酮 (100 :0 ;60 :1 ;30 :1 ;10 :1 ;5 :1 ;3 :1 ;1 :1 ;0 :1 ;v/v)和甲醇梯度洗脫。將所得餾份經(jīng)薄 層層析檢測合并，得到十個(gè)餾分，即Fr. 1 (100 :1)，F(xiàn)r. 2 (60 :1)，F(xiàn)r. 3 (30 :1)，F(xiàn)r. 4 (10 :1)， Fr.5(5 :1)，F(xiàn)r.6(5 :1)，F(xiàn)r.7(3 :1)，F(xiàn)r.8(3 :1)，F(xiàn)r.9(l:1)和Fr. 10 (丙酮和甲醇洗脫部 分）。Fr. 4 (115g)部分通過硅膠柱層析，以氯仿：甲醇（60:1，20:1)為洗脫劑進(jìn)行梯度洗 脫，共得Fr. 4. 1 -Fr. 4. 3三個(gè)餾分。取F