褐孔菌內(nèi)酯、其制法及其藥物組合物與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地涉及一個從褐孔菌屬真菌斜生褐孔菌中提取出的新 化合物褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone)、其制備方法、包含該化合物的藥物組合物及其在預(yù) 防和/或治療腫瘤及PTKs活性異常升高相關(guān)疾病中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 斜生褐孔菌[Phaeoporusobliquus(Pers. :Fr. )J.Schrotet?或Inonotus obliquus(Pers. :Fr.)Pilat或PolyporusobliquusPers. :Fr.]，是傘菌綱、鎊革孔菌目、鎊 革孔菌科、褐孔菌屬真菌，曾用名樺褐孔菌。斜生褐孔菌具有抗糖尿病、抗癌、防治艾滋病、 提高免疫等作用。
[0003] 酪氨酸磷酸化在許多細(xì)胞調(diào)節(jié)過程中有重要作用，主要體現(xiàn)在T細(xì)胞和B細(xì)胞的 活化、對外來刺激的反應(yīng)、有絲分裂、血管增生、神經(jīng)遞質(zhì)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期的生長控制、轉(zhuǎn)錄 調(diào)節(jié)、葡萄糖攝取、腫瘤發(fā)生及細(xì)胞分化、形成和凋亡等過程。酪氨酸蛋白激酶（Protein tyrosinekinases，PTKs)功能紊亂可能導(dǎo)致許多疾病。目前PTKs活性已成為衡量細(xì)胞增 殖惡變的標(biāo)志之一。鑒于PTKs在腫瘤分子病原學(xué)上的重要作用，人們嘗試?yán)肞TKs抑制 劑抑制腫瘤細(xì)胞生長及一些增生性疾病，如PCI術(shù)后再狹窄、動脈粥樣硬化、高血壓、多發(fā) 性硬化癥、糖尿病視網(wǎng)膜病變、子宮內(nèi)膜異位癥、牛皮癬等皮膚病和哮喘等疾病。
[0004] 從廣義上抗腫瘤藥可分為兩代藥物。第一代為傳統(tǒng)的細(xì)胞毒化療藥物，如鉬類和 抗代謝類抗癌藥；第二代為分子靶向治療藥物，這一類藥物通常是指特異地對一個或多個 腫瘤相關(guān)蛋白進行調(diào)控的藥物。手術(shù)、化療、放療是當(dāng)今治療腫瘤的主要手段，但各有弊端， 主要是毒副作用較大。目前抗腫瘤藥物研發(fā)面臨的挑戰(zhàn)，一是多種抗腫瘤藥物遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿 足臨床需求，急需開發(fā)更多的新藥；二是毒副作用大，選擇性差，治療效果不理想；三是靶 向抗腫瘤藥物也存在耐藥問題，療效越明顯的藥物耐藥性表現(xiàn)越為突出；四是長期應(yīng)用靶 向抗腫瘤藥物對機體的影響不容忽視。因此開發(fā)第三代新型的高效、低毒、高選擇性的抗腫 瘤新藥仍是一個重要的研究課題，具有重要的創(chuàng)新意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明解決的技術(shù)問題是，一方面提供了一種新化合物褐孔菌內(nèi)酯 (Phaeoporlactone)，其結(jié)構(gòu)如式（I)所示：
[0007] 本發(fā)明的另一方面提供了制備化合物褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone)的方法。
[0008] 本發(fā)明的又一個方面涉及一種藥物組合物，其包括化合物褐孔菌內(nèi)酯 (Phaeoporlactone)以及藥學(xué)上可接受的載體。
[0009] 本發(fā)明的再一方面涉及化合物褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone)預(yù)防和/或治療蛋 白酪氨酸激酶（PTKs)相關(guān)疾病的應(yīng)用，蛋白酪氨酸激酶（PTKs)相關(guān)疾病包括但不限定于 腫瘤，PCI術(shù)后再狹窄、動脈粥樣硬化、高血壓、多發(fā)性硬化癥、糖尿病視網(wǎng)膜病變、子宮內(nèi)膜 異位癥、牛皮癬等皮膚病和哮喘等疾病藥物中的應(yīng)用。特別是在制備預(yù)防和/或治療肝癌 的藥物中的應(yīng)用。
[0010] 為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0011] -種新化合物褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone)的制備方法，其特征在于包括以下 步驟：
[0012] (1)取一定量的斜生褐孔菌藥材，用95%的乙醇提取三次，得到浸膏；
[0013] (2)將步驟（1)中的乙醇浸膏混懸于水，先用氯仿萃取，然后用乙酸乙酯萃取，最后 用正丁醇萃取，最終粗分成氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水等四個部分；
[0014] (3)將乙酸乙酯萃取部分減壓濃縮，并經(jīng)硅膠柱色譜分離，使用氯仿-丙 酮及氯仿-甲醇系統(tǒng)進行梯度洗脫，每500ml為一流份，檢測、收集得到褐孔菌 內(nèi)酯（Phaeoporlactone)粗品，再經(jīng)制備型HPLC純化得到化合物褐孔菌內(nèi)酯 (Phaeoporlactone)純品。
[0015] 其中步驟（3)中制備型HPLC的分離條件為甲醇-水-甲酸（30:70:1，V:V:V)，流 速8ml/min，227nm波長檢測，取500uL進樣，在tR=20min得褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone) 純品。
[0016] 經(jīng)鑒定，得到的新化合物褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone)的結(jié)構(gòu)如式（I)所示
[0018] 通過藥理活性實驗發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的式I化合物具有和抑制蛋白酪氨酸激酶PTKs作 用?？蓱?yīng)用于制備預(yù)防和/或治療PTKs活性異常升高相關(guān)疾病的藥物。所述的PTKs相關(guān) 疾病包括但不現(xiàn)定于腫瘤、PCI術(shù)后再狹窄、動脈粥樣硬化、高血壓、多發(fā)性硬化癥、糖尿病 視網(wǎng)膜病變、子宮內(nèi)膜異位癥、牛皮癬等皮膚病和哮喘等疾病。根據(jù)與抗腫瘤相關(guān)的藥理實 驗可知，新化合物褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone)具有較好的抗腫瘤藥理作用，尤其是抑制 人肝癌細(xì)胞的生長。
[0019] 有益技術(shù)效果：
[0020]a)褐孔菌內(nèi)酯（Phaeoporlactone)為真菌斜生褐孔菌中提取、分離的單體化合 物，具有制備工藝簡單的優(yōu)點。
[0021]b)其原材料已可栽培，具有很好的應(yīng)用與開發(fā)前景。
[0022]c)蛋白酪氨酸激酶（PTKs)相關(guān)疾病包括但不限定于腫瘤，PCI術(shù)后再狹窄、動脈 粥樣硬化、高血壓、多發(fā)性硬化癥、糖尿病視網(wǎng)膜病變、子宮內(nèi)膜異位癥、牛皮癬等皮膚病和 哮喘等疾病藥物中的應(yīng)用。特別是在制備預(yù)防和/或治療肝癌的藥物中的應(yīng)用。
[0023] 本發(fā)明還涉及一種含有藥物有效劑量的式（I)化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥 物組合物。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明的實施方案，式（I)化合物還包括其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、酯以 及前體藥物。
[0025] 本發(fā)明還涉及含有作為活性成份的式（I)化合物以及常規(guī)藥物賦形劑或輔劑的藥 物組合物。通常式（I)化合物占藥物組合物總重量的〇. 1~95%。在單元劑型中式（I)化 合物一般含量為〇. 1至l〇〇mg。
[0026] 本發(fā)明所述的藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。用于此目的時，如果需 要，可將本發(fā)明的式（I)化合物與一種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成 可作為人藥或獸藥使用的適當(dāng)?shù)氖┯眯问交騽┝啃问健?br>[0027] 本發(fā)明的式（I)化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑 可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺、皮膚、陰道、腹膜、直腸等， 優(yōu)選口服給藥。
[0028] 本發(fā)明的式（I)化合物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可為注射給藥。注射包 括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、皮內(nèi)注射、腹腔注射和穴位注射等。
[0029] 給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括 真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括水包油型、油包水型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、 粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等。固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶 片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、 顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉）霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏 齊II、凝膠劑、糊劑等。
[0030] 本發(fā)明的式（I)化合物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制 劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
[0031] 為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀 釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳 糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤劑可以是水、乙 醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖楽、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠 漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、卡 波姆、聚乙烯毗咯烷酮、聚乙二丙醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖 維素、交聯(lián)聚乙烯毗咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與構(gòu)椽酸、碳酸 鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉；潤滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化 硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。
[0032] 還可以將片劑進一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙 層片和多層片。
[0033]為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例 子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、 月桂酸聚乙二醇甘油酯、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃菩膠、明膠、乙醇、蜂蜜、 液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維 素、乙基纖維素等。
[0034]為了將給藥單元制成栓劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例 子是，例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高級醇、高級醇的酯、明膠、半合成甘油酯等。
[0035] 為了將給藥單元制成膠囊，將式（I)化合物與上述的各種載體混合，并將由此得到 的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明的式（I)化合物制成微囊 齊U，混懸于水性介質(zhì)中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。
[0036]例如，將式（I)化合物制成注射用制劑，如溶液齊[J、混懸劑溶液劑、乳劑、凍干粉針 齊U，這種制劑可以是含水或非水的，可含一種和/或多種藥效學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、 粘合劑、潤滑劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙 二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，為了制 備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加 常規(guī)的助溶劑、緩沖劑