025 %時(shí)，每半小時(shí)取樣一次監(jiān)測(cè)；當(dāng)流出液pH跳至2-4，且ADP基本洗盡或只有ATP時(shí)，洗滌結(jié)束，開(kāi)始洗脫；
[0102](4)洗脫:用 ρΗ3.5-3.8 的 lmol/LnaCl-0.01mol/L HCl 濃鹽液進(jìn)行洗脫，當(dāng)洗脫流出液ATP濃度>0.38%時(shí)，收集洗脫液，送脫色；當(dāng)洗脫流出液ATP濃度〈0.38%時(shí)，即停止收集；
[0103]3)精制
[0104](I)脫色:洗脫液根據(jù)色澤加入0.1-0.5%活性炭和0.1-0.3%硅藻土攪拌I小時(shí)脫色，離心分離過(guò)濾后，脫色液經(jīng)檢驗(yàn)合格后送超濾除蛋白；
[0105](2)超濾:將脫色液用〈I萬(wàn)分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白，合格后送去結(jié)晶；
[0106](3)結(jié)晶:超濾液先用CP級(jí)HCl調(diào)pH至2.5-3.3，再用> I萬(wàn)分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白，合格后放入結(jié)晶釜，開(kāi)動(dòng)攪拌，開(kāi)始加入95% (v/v)乙醇，出現(xiàn)白色混濁前酒精加入速度控制在100L/h ;出現(xiàn)白色混濁時(shí)，停止加酒精，攪拌半小時(shí)，然后繼續(xù)加酒精至料液體積的1.5-2.0倍，保持溫度攪拌半小時(shí)，然后開(kāi)夾套冷卻水，將料液冷至室溫，靜止I小時(shí)；
[0107]離心分離結(jié)晶液，濕品先用95% (v/v)酒精洗滌，再用無(wú)水乙醇浸泡，最后用干送去干燥；母液調(diào)PH至6.0-7.0后送蒸餾工段進(jìn)行回收酒精；
[0108]4)干燥包裝
[0109](I)干燥:將濕品放入真空干燥箱中，真空度彡一 0.lOMpa，控制溫度在40_42°C，干燥2個(gè)小時(shí)，然后，調(diào)整真空度彡一 0.08Mpa，控制溫度在37-38 °C，干燥4個(gè)小時(shí)，水分(8%時(shí)可出料；
[0110](2)包裝:將合格的產(chǎn)品按規(guī)定的批量放入混合器中混合15-20分鐘，然后按進(jìn)行包裝送檢，合格入庫(kù)；
[0111]所用原料的用量按重量份計(jì)為:腺苷40份、速凍酵母900份、磷酸二氫鉀40份、磷酸氫二鉀232份、硫酸鎂20份、蔗糖200份、苯扎溴銨溶液20份、反滲透水2000份。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種改進(jìn)的三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括如下步驟: 1)生化反應(yīng) (1)硫酸鎂溶液、腺苷溶液、苯扎溴銨溶液的制備: ①用少量反滲透水溶解硫酸鎂制成硫酸鎂溶液； ②用適量室溫的反滲透水溶解腺苷制成腺苷溶液； ③用適量的反滲透水溶解苯扎溴銨稀釋成5%苯扎溴銨溶液； (2)投放速凍酵母:加反滲透水于反應(yīng)鍋中，開(kāi)動(dòng)攪拌用夾套熱水加熱至40-45?，投放蔗糖及磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀，使其溶解，待其全部溶解后，停止加熱，開(kāi)循環(huán)水降溫，當(dāng)溫度降至40°C以下時(shí)，投放速凍酵母，并用夾套熱水緩慢升溫； 所述的速凍酵母，是指將啤酒酵母泥用適量反滲透水清洗，然后再用板框過(guò)濾器過(guò)濾，得到白色或淡褐色泥狀物，再通過(guò)速凍得到； (3)ATP生化反應(yīng):當(dāng)反應(yīng)鍋內(nèi)溫度升至20°C ± I時(shí)，依次投放硫酸鎂溶液、苯扎溴銨溶液、腺苷溶液，反應(yīng)開(kāi)始計(jì)時(shí)，將反應(yīng)液繼續(xù)加熱至36-39°C，保溫，待有氣泡溢出，開(kāi)始取樣測(cè)定ATP轉(zhuǎn)化率，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到ATP —條帶時(shí)，反應(yīng)結(jié)束； (4)滅活、調(diào)酸堿:反應(yīng)結(jié)束，立即放掉夾套熱水，迅速投放大量冰于反應(yīng)鍋內(nèi)，并通冷卻水降溫，當(dāng)溫度降至4°C以下，用磷酸調(diào)pH至2.5-3.0，I小時(shí)后，再用液堿調(diào)pH至5.5-6.0，調(diào)好堿后30分鐘開(kāi)始?jí)赫?，壓榨完畢，再用反滲透水頂洗濾餅，水頂液合并壓榨液，檢驗(yàn)含量、透光度，合格送分離工段處理； 2)樹(shù)脂分咼 (1)串柱上樣:將壓榨液及水頂液稀釋至0.2-0.45%，上D296樹(shù)脂柱，流速為4-6L/min，定時(shí)檢測(cè)流出液，查看是否有ATP漏出；當(dāng)流出液中ATP濃度多0.03%時(shí)，停止上樣，用反滲透水正頂至流出液ATP濃度< 0.01 %后，繼續(xù)上樣，如此反復(fù)直至上樣結(jié)束； (2)水洗雜質(zhì):串柱上樣結(jié)束，用反滲透水正進(jìn)洗滌至流出液A257nmS0.2 ;然后反進(jìn)水洗至樹(shù)脂上層無(wú)渾濁機(jī)械雜質(zhì)且流出液A257nmS 0.2后結(jié)束；流速控制在4-6L/min ； (3)稀鹽洗雜質(zhì):水洗結(jié)束，用ρΗ2.0-2.2 的 0.04mol/LNaCl—0.01mol/L HCl 稀鹽液反進(jìn)流洗，流速為6-10L/min ;每小時(shí)取樣，測(cè)流出液中ATP濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度^ 0.03%時(shí)，反進(jìn)洗雜質(zhì)結(jié)束；改正進(jìn)，正進(jìn)流速不變，每小時(shí)取樣一次，測(cè)流出液中ATP的濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度多0.025 %時(shí)，每半小時(shí)取樣一次監(jiān)測(cè)；當(dāng)流出液pH跳至2-4，且ADP基本洗盡或只有ATP時(shí)，洗滌結(jié)束，開(kāi)始洗脫； (4)洗脫:用ρΗ3.5-3.8的Imol/LnaCl-0.01mol/L HCl濃鹽液進(jìn)行洗脫，當(dāng)洗脫流出液ATP濃度>0.38%時(shí)，收集洗脫液，送脫色；當(dāng)洗脫流出液ATP濃度〈0.38%時(shí)，即停止收集； 3)精制 (1)脫色:洗脫液根據(jù)色澤加入0.1-0.5%活性炭和0.1-0.3%硅藻土攪拌I小時(shí)脫色，離心分離過(guò)濾后，脫色液經(jīng)檢驗(yàn)合格后送超濾除蛋白； (2)超濾:將脫色液用〈I萬(wàn)分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白，合格后送去結(jié)晶； (3)結(jié)晶:超濾液先用CP級(jí)HCl調(diào)pH至2.5-3.3，再用> I萬(wàn)分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白，合格后放入結(jié)晶釜，開(kāi)動(dòng)攪拌，開(kāi)始加入95% (v/v)乙醇，出現(xiàn)白色混濁前酒精加入速度控制在100L/h ;出現(xiàn)白色混濁時(shí)，停止加酒精，攪拌半小時(shí)，然后繼續(xù)加酒精至料液體積的1.5-2.0倍，保持溫度攪拌半小時(shí)，然后開(kāi)夾套冷卻水，將料液冷至室溫，靜止I小時(shí)； 離心分離結(jié)晶液，濕品先用95% (v/v)酒精洗滌，再用無(wú)水乙醇浸泡，最后甩干送去干燥；母液調(diào)PH至6.0-7.0后送蒸餾工段進(jìn)行回收酒精； 4)干燥包裝 (1)干燥:將濕品放入真空干燥箱中，真空度彡一0.lOMpa，控制溫度在40-42°C，干燥2個(gè)小時(shí)，然后，調(diào)整真空度彡一 0.08Mpa，控制溫度在37-38°C，干燥4個(gè)小時(shí)，水分彡8%時(shí)可出料； (2)包裝:將合格的產(chǎn)品按規(guī)定的批量放入混合器中混合15-20分鐘，然后按進(jìn)行包裝送檢，合格入庫(kù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種改進(jìn)的三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，其特征在于:所用原料的用量按重量份計(jì)為:腺苷38-42份、速凍酵母880-920份、磷酸二氫鉀38-42份、磷酸氫二鉀230-235份、硫酸鎂18-22份、蔗糖190-210份、苯扎溴銨溶液18-22份、反滲透水1950-2050 份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種改進(jìn)的三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，其特征在于:所用原料的用量按重量份計(jì)為:腺苷40份、速凍酵母900份、磷酸二氫鉀40份、磷酸氫二鉀232份、硫酸鎂20份、蔗糖200份、苯扎溴銨溶液20份、反滲透水2000份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種改進(jìn)的三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，其特征在于:步驟2)所述串柱上樣，定時(shí)檢測(cè)流出液，當(dāng)流出液中ATP濃度< 0.025%時(shí)，每?jī)尚r(shí)取樣檢定一次；當(dāng)流出液中0.025%〈ATP濃度〈0.03%時(shí)，每小時(shí)取樣檢定一次。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種改進(jìn)的三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，本發(fā)明是用適量室溫的反滲透水溶解腺苷制成腺苷溶液，不僅節(jié)約能耗15％以上，而且操作簡(jiǎn)單且有效的避免了對(duì)酶的損害?，F(xiàn)有技術(shù)中，在樹(shù)脂分離工序的上樣時(shí)，是采用單條樹(shù)脂柱上樣至結(jié)束，單條樹(shù)脂柱上樣會(huì)有很多弊端，比如單條樹(shù)脂柱上樣往往容易流穿且流速需實(shí)時(shí)控制、延長(zhǎng)了上樣時(shí)間而且產(chǎn)品量還收率較低；而本發(fā)明采用串柱上樣可以顯著提高流速，縮短上樣時(shí)間50％以上，且因?yàn)槭谴礈?，產(chǎn)品流穿的可能性也小了很多，極大的提高了產(chǎn)品的收率，收率提高30％以上。本發(fā)明采用兩段法真空干燥，既避免了污染的發(fā)生，又節(jié)約了時(shí)間。
【IPC分類】C07H19-20, C12P19-32, C12R1-865, C07H1-06
【公開(kāi)號(hào)】CN104862358
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510280691
【發(fā)明人】阮傳明, 盧志榮, 黃偉
【申請(qǐng)人】廣西浦北制藥廠
【公開(kāi)日】2015年8月26日
【申請(qǐng)日】2015年5月28日