)本發(fā)明的一種生物醫(yī)用復合水凝膠，以透明質酸鈉中的有效成分透明質酸和海藻 酸鈉為主要原材料，形成產品透明質酸-海藻酸鈉復合凝膠，不僅具有可降解性，還具有高 強度的特性，巧妙的融合了可降解性和高強度兩者性能，產品用途廣，價值高。
[0021] (2)本發(fā)明的一種生物醫(yī)用復合水凝膠，突破可生物降解生物醫(yī)用凝膠目前的應 用范疇，作為一種新型的生物醫(yī)用復合水凝膠，應用領域包括日化原料或輔料，組織填充材 料，藥物載體或藥物配料，創(chuàng)面或者皮膚輔料，組織工程用支架材料，防粘連隔離材料，美 容、除皺和保濕材料等。
[0022] (3)本發(fā)明的一種生物醫(yī)用復合水凝膠的制備方法，采用穿透型雙交聯制備原理， 在不影響凝膠生物相容性和降解性能的基礎上，能制備具有優(yōu)異力學強度的HA-SA復合凝 膠，能用于肌腱等強度高的組織的再生修復材料，也能用于需承受一定應力體內外創(chuàng)面或 創(chuàng)傷的修復材料，或是負重骨、軟骨的再生。本技術利用BDDE和Ca 2+的兩種不同交聯機理， 方法簡單易行，無任何毒性，且能精確控制HA、SA各自的交聯度和優(yōu)秀的凝膠力學性能。
[0023] (4)本發(fā)明的一種生物醫(yī)用復合水凝膠的制備方法，在不影響凝膠生物相容性和 降解性能的基礎上，極大的增強了復合凝膠的力學性能；以上的交聯劑用量，在制備單交聯 膜片時均已證明生物安全性和可降解性。在交聯反應發(fā)生前，HA和SA分子鏈在溶液中彼 此之間相互纏繞，類似于"線圈"，交聯反應后，分子鏈通過交聯劑固定在一起，形成一種互 穿網絡結構；兩個網絡組分中不同分子鏈之間沒有化學鍵的結合，都保持著其各自的性能， 所以兩個組分之間的性能可以得到互補。因此，這兩種網絡互相穿透互相影響，在性能上能 夠產生特殊的協同作用，從而使得水凝膠的強度得到了提高。
【附圖說明】 圖1為本發(fā)明具體實施例1中凝膠拉伸測試圖譜。 圖2為本發(fā)明具體實施例2中凝膠拉伸測試圖譜。 圖3為本發(fā)明具體實施例3中凝膠拉伸測試圖譜。 圖4為本發(fā)明具體實施例4中凝膠拉伸測試圖譜。 圖5為本發(fā)明具體實施例5中凝膠拉伸測試圖譜。 圖6為本發(fā)明具體實施例6中凝膠拉伸測試圖譜。
【具體實施方式】
[0024] 下面結合具體實施例對本發(fā)明的技術方案作詳細說明。
[0025] 以下實施例中的透明質酸（Hyaluronic acid,簡稱HA)是由N-乙酰氨基葡 糖-D-葡萄糖醛酸為雙糖單位組成的天然直鏈高分子多糖（glycosaminoglycan; GAG)，商 品形式的HA主要以透明質酸鈉的形式出售，以下實施例中的HA即指透明質酸鈉。
[0026] 實施例1 精確稱取0. 4g HA，將其置于7ml的0. 71%氫氧化鈉溶液中，直至完全溶解。向上述HA 溶液中加入SA，使SA的濃度為1. 3% (質量百分比)，持續(xù)攪拌直至徹底混合均勻，向混合 溶液中加入56P1BDDE (交聯劑最終體積濃度為0. 8%)，將溶液置于40°C使其均勻混合4h， 然后把混合液室溫干燥3d，待水分揮發(fā)率為90%，得到HA-SA透明膜片。將膜片清洗去除 殘留堿液后，將其置于3% CaCl2溶液中浸泡24小時，得到HA-SA復合凝膠。膜片依次用磷 酸鹽緩沖液（PBS:氯化鈉（NaCl) 9 mg/ml,磷酸二氫鉀（KH2PO4)0.0 3mg/ml,磷酸氫二鈉 (Na2HPO4X2H20 0· 14mg/ml，pH=7)和去離子水室溫下反復清洗，以除去未參加反應的交聯 劑，得到最終HA-SA凝膠備用。
[0027] 當本實施例的復合凝膠用于檢測力學性能將凝膠裁剪成5cmX3cmX0. 3cm的規(guī) 格。當用于細胞和體內實驗，則應置于高壓蒸汽滅菌（120°C，20 min)后使用。
[0028] 實施例2 精確稱取0. 4g HA，將其置于9ml的0. 56%氫氧化鈉溶液中，直至完全溶解，向上述 HA溶液中加入SA，使SA的濃度為2. 1% (質量百分比)，持續(xù)攪拌直至徹底混合均勻，向混 合溶液中加入72μ1 BDDE (交聯劑最終體積濃度為0. 8%)，將溶液置于40°C使其均勻混合 4h，然后把混合液室溫干燥3d，待水分揮發(fā)率為90%，得到HA-SA透明膜片。將膜片清洗去 除殘留堿液后，將其置于3% CaCl2溶液中浸泡24小時，得到HA-SA復合凝膠。膜片用磷 酸鹽緩沖液（PBS:氯化鈉（NaCl)9mg/ml,磷酸二氫鉀（KH 2PO4) 0.03mg/ml,磷酸氫二鈉 (Na2HPO4X2H20) 0· 14mg/ml，pH=7)和去離子水室溫下反復清洗，以除去未參加反應的交聯 劑，得到最終HA-SA凝膠備用。
[0029] 如用于檢測力學性能將凝膠裁剪成5cmX3cmX0. 3cm的規(guī)格。如用于細胞和體內 實驗，則應置于高壓蒸汽滅菌（120°C，20 min)后使用。
[0030] 實施例3 精確稱取0. 4g HA，將其置于7ml的0. 71%氫氧化鈉溶液中，直至完全溶解。向上述HA 溶液中加入SA，使HA的濃度為1. 3% (質量百分比)，持續(xù)攪拌直至徹底混合均勻，向混合溶 液中加入28μ1 BDDE (交聯劑最終體積濃度為0. 4%)，將溶液置于40°C使其均勻混合4h， 然后把混合液室溫干燥3d，待水分揮發(fā)率為90%，得到HA-SA透明膜片。將膜片清洗去除 殘留堿液后，將其置于3% CaCl2溶液中浸泡24小時，得到HA-SA復合凝膠。膜片依次用磷 酸鹽緩沖液（PBS:氯化鈉（NaCl) 9mg/ml,磷酸二氫鉀（KH2PO4) 0.03mg/ml,磷酸氫二鈉 (Na2HPO4X2H20) 0· 14mg/ml，pH=7)和去離子水室溫下反復清洗，以除去未參加反應的交聯 劑，得到最終HA-SA凝膠備用。
[0031] 如用于檢測力學性能將凝膠裁剪成5cmX3cmX0. 3cm的規(guī)格。如用于細胞和體內 實驗，則應置于高壓蒸汽滅菌（120°C，20 min)后使用。
[0032] 實施例4 精確稱取0. 4g HA，將其置于7ml的0. 71%氫氧化鈉溶液中，直至完全溶解。向上述HA 溶液中加入SA，使SA的濃度為1. 3% (質量百分比)，持續(xù)攪拌直至徹底混合均勻，向混合 溶液中加入84μ1 BDDE (交聯劑最終體積濃度為1. 2%)，將溶液置于40°C使其均勻混合4h， 然后把混合液室溫干燥3d，待水分揮發(fā)率為90%，得到HA-SA透明膜片。將膜片清洗去除 殘留堿液后，將其置于3% CaCl2溶液中浸泡24小時，得到HA-SA復合凝膠。膜片依次用磷 酸鹽緩沖液（PBS:氯化鈉（NaCl) 9mg/ml,磷酸二氫鉀（KH2PO4) 0.03mg/ml,磷酸氫二鈉 (Na2HPO4X2H20) 0· 14mg/ml，pH=7)和去離子水室溫下反復清洗，以除去未參加反應的交聯 劑，得到最終HA-SA凝膠備用。
[0033] 如用于檢測力學性能將凝膠裁剪成5cmX3cmX0. 3cm的規(guī)格。如用于細胞和體內 實驗，則應置于高壓蒸汽滅菌（120°C，20 min)后使用。
[0034] 實施例5 精確稱取0. 4g HA，將其置于7ml的0. 71%氫氧化鈉溶液中，直至完全溶解。向上述HA 溶液中加入SA，使SA的濃度為1. 3% (質量百分比)，持續(xù)攪拌直至徹底混合均勻，向混合 溶液中加入56μ1 BDDE (交聯劑最終體積濃度為0. 8%)，將溶液置于40°C使其均勻混合4h， 然后把混合液室溫干燥3d，待水分揮發(fā)率為90%，得到HA-SA透明膜片。將膜片清洗去除 殘留堿液后，將其置于1% CaCl2溶液中浸泡24小時，得到HA-SA復合凝膠。膜片依次用磷 酸鹽緩沖液（PBS:氯化鈉（NaCl) 9mg/ml,磷酸二氫鉀（KH2PO4) 0.03mg/ml,磷酸氫二鈉 (Na2HPO4X2H20) 0· 14mg/ml，pH=7)和去離子水室溫下反復清洗，以除去未參加反應的交聯 劑，得到最終HA-SA凝膠備用。
[0035] 如用于檢測力學性能將凝膠裁剪成5cmX3cmX0. 3cm的規(guī)格。如用于細胞和體內 實驗，則應置于高壓蒸汽滅菌（120°C，20 min)后使用。
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