一種純化穿心蓮內(nèi)酯的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥提取物提取純化加工領(lǐng)域，涉及一種制備純化的穿心蓮內(nèi)酯的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]穿心蓮內(nèi)酯為爵床科植物穿心蓮中提取得到的二萜內(nèi)酯類(lèi)化合物，分子式為C2tlH3tlO5，是中藥穿心蓮的主要有效成分之一?，F(xiàn)代藥理研宄表明穿心蓮內(nèi)酯具有抗菌、抗炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、治療心腦血管疾病、保肝利膽等作用，并有毒性低、價(jià)格便宜的特點(diǎn)。最近研宄報(bào)道穿心蓮內(nèi)酯對(duì)食道癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和白血病等具有較好的抗腫瘤作用，有望成為一種新的抗癌藥物。
[0003]傳統(tǒng)的穿心蓮內(nèi)酯的提取純化方法為乙醇提取，活性炭脫色除雜，過(guò)濾除去活性炭，濃縮回收乙醇，經(jīng)過(guò)多步重結(jié)晶的制備方法。這種方法造成穿心蓮內(nèi)酯的大量損失，且活性炭不可重復(fù)利用，后期處理較復(fù)雜且污染環(huán)境。
[0004]目前已有很多專(zhuān)利描述了穿心蓮內(nèi)酯的提取純化方法，例如編號(hào)為CN1935798B的中國(guó)專(zhuān)利提出的利用AB-8型大孔樹(shù)脂分離純化穿心蓮內(nèi)酯的方法，彭夢(mèng)薇等利用HPD100型大孔樹(shù)脂純化穿心蓮提取液(彭夢(mèng)薇，韋藤幼，陳曉光等所著大孔樹(shù)脂純化穿心蓮內(nèi)部沸騰提取液的工藝研宄[J]中成藥，2012，34(1):172-175)，但是均采用的單柱吸附，該方法大孔樹(shù)脂利用率低，上樣量小，且洗脫液使用量大，造成物料的很大浪費(fèi)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種純化穿心蓮內(nèi)酯的方法，利用該方法能夠達(dá)到簡(jiǎn)便連續(xù)化生產(chǎn)、提高樹(shù)脂利用率、減少洗脫劑使用量、提高穿心蓮內(nèi)酯純度的目的。
[0006]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的一個(gè)技術(shù)方案是:提供一種純化穿心蓮內(nèi)酯的方法，通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn):
(1)取穿心蓮的地上生長(zhǎng)部分為原料進(jìn)行干燥并粉碎，將干燥粉碎后的穿心蓮原料加入乙醇溶液進(jìn)行浸提、過(guò)濾，得到含有穿心蓮內(nèi)酯的提取液，然后將所述提取液濃縮回收乙醇，再向所述提取液中加水以調(diào)節(jié)其中的乙醇濃度和穿心蓮內(nèi)酯濃度，使乙醇的濃度為15%~30% (v/v)，穿心蓮內(nèi)酯的濃度為0.5-2 mg/mL，此時(shí)的提取液即為上柱液；
(2)將所述上柱液以0.5-5 BV/h的流速通過(guò)第一根大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行上樣吸附，當(dāng)上樣的上柱液體積達(dá)到第一根大孔樹(shù)脂柱的飽和吸附量時(shí)，切換使用第二根大孔樹(shù)脂柱繼續(xù)上樣，當(dāng)?shù)诙罂讟?shù)脂柱上樣時(shí)，飽和吸附的第一根大孔樹(shù)脂柱開(kāi)始洗脫，洗脫完成并經(jīng)過(guò)再生處理后該第一根大孔樹(shù)脂柱可以繼續(xù)用于上樣。
[0007]步驟(2)中所述上柱液體積達(dá)到第二根大孔樹(shù)脂柱的飽和吸附量時(shí)，可以繼續(xù)使用第三根以及多根大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行所述上柱液的上樣吸附。
[0008]步驟(I)中的乙醇溶液浸提時(shí)所用的乙醇濃度為90%~100% (v/v),所述提取料液的體積為所加干穿心蓮原料重量的5~10倍，浸提提取次數(shù)為2~3次，浸提溫度為15~50°C。
[0009]步驟(2)中所述的大孔樹(shù)脂柱的裝柱徑高比為1:5~1:10。
[0010]步驟(2)中所述的上樣吸附與大孔樹(shù)脂柱切換過(guò)程為第一大孔樹(shù)脂柱上樣達(dá)到20-25 BV(柱床體積)時(shí)，第一大孔樹(shù)脂柱達(dá)到飽和吸附狀態(tài)，此時(shí)切換到第二大孔樹(shù)脂柱繼續(xù)上樣，第二大孔樹(shù)脂柱繼續(xù)上樣至5~10 BV,后續(xù)切換其他的大孔樹(shù)脂柱上樣量均為5~10BV0
[0011]步驟(2)中所述的大孔樹(shù)脂柱上樣吸附還包括以下步驟:首先使用1.0-3.0 BV的去離子水清洗大孔樹(shù)脂柱，然后用1.0-3.0 BV的濃度為10%~30% (v/v)的乙醇溶液除去大孔樹(shù)脂柱上雜質(zhì)，最后使用4~8 BV的濃度為35%~60% (v/v)的乙醇溶液以1.0-4.0 BV/h的流速洗脫大孔樹(shù)脂柱上的穿心蓮內(nèi)酯。
[0012]所述的上樣和洗脫過(guò)程中的大孔樹(shù)脂柱溫度為20~40°C。
[0013]本發(fā)明應(yīng)用多級(jí)膜純化技術(shù)，通過(guò)多個(gè)大孔樹(shù)脂柱以串聯(lián)形式連續(xù)進(jìn)行多次上樣吸附，對(duì)穿心蓮內(nèi)酯吸附量大且解析率高，取代活性炭脫色除雜，減少了廢物排放；大孔樹(shù)脂柱可以連續(xù)使用，提高了樹(shù)脂的利用率，且飽和吸附洗脫節(jié)省了洗脫劑的使用量；能夠?qū)崿F(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)，樹(shù)脂再生容易，經(jīng)濟(jì)效益較好。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0015]實(shí)施例一:
稱(chēng)取穿心蓮的地上生長(zhǎng)部分干燥并粉碎藥材1.0 kg，加入10.0 L的90% (v/v)乙醇溶液浸提，重復(fù)提取兩次，浸提溫度為50°C，合并濾液，得到穿心蓮醇提液。醇提液減壓濃縮2倍，加水稀釋?zhuān)挂掖紳舛葹?5% (v/v),穿心蓮內(nèi)酯濃度為0.5mg/mL，即為上柱液；DM130大孔樹(shù)脂的預(yù)處理:分別稱(chēng)取200.0 g樹(shù)脂，用95% (v/v)的乙醇溶液浸泡24小時(shí)，分別將樹(shù)脂裝柱，徑高比為1:10，用去離子水洗至無(wú)醇味，備用；上樣與樹(shù)脂柱的切換:將上柱液以5 BV/h的流速流經(jīng)多個(gè)串聯(lián)的大孔樹(shù)脂柱，當(dāng)上樣20 BV時(shí)第一個(gè)大孔樹(shù)脂柱達(dá)到飽和吸附，切換到第二個(gè)大孔樹(shù)脂柱繼續(xù)上樣。第二個(gè)大孔樹(shù)脂柱繼續(xù)上樣7 BV，后續(xù)切換上樣均為7 BV0同時(shí)，切換后前一個(gè)大孔樹(shù)脂柱開(kāi)始洗脫；穿心蓮內(nèi)酯洗脫，步驟為:首先使用2.0 BV去離子水洗柱，然后用3.0 BV的濃度為20% (v/v)的乙醇水溶液除雜，最后使用
8.0 BV的濃度為35% (v/v)的乙醇水溶液以4.0 BV/h的流速洗脫穿心蓮內(nèi)酯，即得到高純度的穿心蓮內(nèi)酯溶液；上樣和洗脫過(guò)程中保持柱溫20°C ;將吸附后的大孔樹(shù)脂采用濃度為95% (v/v)的乙醇水溶液洗脫再生，后水洗至無(wú)醇味，將大孔樹(shù)脂串聯(lián)至大孔樹(shù)脂柱組繼續(xù)上樣。檢測(cè)制得的穿心蓮內(nèi)酯純度達(dá)到73.85%溶液，總收率86.02%。
[0016]實(shí)施例二:
稱(chēng)取穿心蓮的地上生長(zhǎng)部分干燥并粉碎藥材1.0 kg，加入7.0 L的95% (v/v)的乙醇溶液浸提，重復(fù)提取