本發(fā)明涉及技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種提高肝素鈉澄清度的制備方法。
背景技術(shù)：
肝素鈉主要用于預(yù)防靜脈血栓栓塞性疾病(預(yù)防靜脈內(nèi)血栓形成)，特別是預(yù)防與骨科或普外手術(shù)有關(guān)的血栓形成；治療已形成的深靜脈栓塞，伴或不伴有肺栓塞；與阿司匹林同用，治療不穩(wěn)定性心絞痛及非Q波心梗；用于血液透析體外循環(huán)中，防止血栓形成等。
肝素鈉通過(guò)對(duì)豬腸黏膜肝素的芐基酯衍生物進(jìn)行堿解聚而獲得，其基本步驟為：以豬黏膜肝素為起始原料，經(jīng)肝素季銨鹽制備、肝素芐酯制備、對(duì)肝素芐酯進(jìn)行堿解聚，以酸中和、醇沉淀，精制、脫色，脫水干燥，得到肝素鈉成品。其中，在酸中和、醇沉淀后得到的肝素鈉中間體，其澄清度往往很差，如果不加以精制純化，就無(wú)法達(dá)到《中國(guó)藥典》2010版的澄清度要求。
現(xiàn)在國(guó)內(nèi)仿制肝素鈉的廠家很多，在國(guó)內(nèi)仿制除了要達(dá)到原研廠家的標(biāo)準(zhǔn)外，還必須達(dá)到或超過(guò)中國(guó)藥典的基本要求?，F(xiàn)有技術(shù)中制備肝素鈉粗品常用的方法是在反應(yīng)釜中加入芐索氯銨，用水溶解，再向反應(yīng)釜中攪拌下加入用水溶解好的并且去除掉硫酸皮膚素的肝素鈉溶液，產(chǎn)生大量沉淀，收集肝素季銨鹽沉淀。沉淀用純化水洗滌，沉淀過(guò)濾收集、干燥。在反應(yīng)釜中加入肝素季銨鹽用二氯甲烷溶解。溶解后加入氯化芐反應(yīng)，反應(yīng)后緩慢加入醋酸鈉甲醇溶液，得肝素芐酯沉淀混懸液，靜置沉降,抽出上層清液，得肝素芐酯。將肝素芐酯用純化水溶解用氫氧化鈉水溶液降解，得肝素鈉溶液；用甲醇沉淀干燥得肝素鈉粗品。
肝素鈉屬于注射劑用原料藥，按照中國(guó)藥典的要求，其水溶液澄清度必須為澄清，即小于0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液，中國(guó)藥典對(duì)此的標(biāo)準(zhǔn)比歐洲藥典要嚴(yán)格許多。由于肝素鈉在反應(yīng)過(guò)程中會(huì)有很多雜質(zhì)產(chǎn)生，這些雜質(zhì)會(huì)對(duì)澄清度造成影響，所以提供一種能夠提高澄清度、進(jìn)而提高肝素鈉質(zhì)量的制備方法尤為必要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)缺陷，而提供一種收率高、安全性高的提高肝素鈉澄清度的制備方法。
為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的所采用的技術(shù)方案是：一種提高肝素鈉澄清度的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將肝素鈉粗品，放入氯化鈉溶液A中溶解，得到肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；
(2)將乙醇或甲醇加入到步驟(1)中制得的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀，靜置后收集沉淀；
(3)將步驟(2)收集的沉淀氯化鈉溶液A溶解，將得到的肝素鈉粗品溶液過(guò)濾；用季銨鹽檢測(cè)試紙檢測(cè)季銨鹽濃度，若等于或小于5ppm，進(jìn)行步驟(5)的操作；若季銨鹽濃度大于5ppm，則進(jìn)行步驟(4)的操作；
(4)重復(fù)進(jìn)行步驟(2)和步驟(3)；
(5)用氯化鈉溶液B溶解沉淀，用0.22微米的微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾；
(6)將乙醇或甲醇加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，靜置8小時(shí)，收集沉淀；
(7)將步驟(6)得到的沉淀中加入5倍于沉淀重量的無(wú)水乙醇或甲醇，攪拌2小時(shí)，靜置后取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥溫度為65～75℃，得肝素鈉成品。
本發(fā)明的反應(yīng)原理為采用高于4.0％(w/v)濃度的氯化鈉溶解肝素鈉粗品，通過(guò)置換反應(yīng)使已經(jīng)與肝素鈉粗品結(jié)合的季銨鹽游離出來(lái)，然后用高倍量乙醇或甲醇沉淀出肝素鈉，同時(shí)也稀釋了體系中的季銨鹽，重復(fù)此過(guò)程以達(dá)到了去除季銨鹽的目的。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的提高肝素鈉澄清度的制備方法具有以下有益效果：
(1)肝素鈉產(chǎn)品的澄清度好；
(2)處理方式簡(jiǎn)便易行；
(3)產(chǎn)品收率高。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
實(shí)施例1：
一種提高肝素鈉澄清度的制備方法，包括如下操作步驟：
(1)稱(chēng)取100g肝素鈉粗品，用事先配制好的4％的氯化鈉溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；
(2)將8倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置8小時(shí)，收集沉淀；
(3)將收集的沉淀用事先配制好的4％的氯化鈉溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；用季銨鹽檢測(cè)試紙檢測(cè)季銨鹽濃度，若小于5ppm，就進(jìn)行(5)的操作。若季銨鹽濃度大于5ppm，就進(jìn)行(4)的操作；
(4)將8倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置8小時(shí)，收集沉淀；重復(fù)(3)操作。
(5)用2％(w/v)氯化鈉溶液B溶解沉淀，用0.22微米的膜過(guò)濾器過(guò)濾；
(6)將8倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置8小時(shí)，收集沉淀；
(7)將沉淀中加入無(wú)水乙醇或甲醇，按照沉淀重量的5倍重量加入，攪拌2小時(shí)，靜置8小時(shí)，取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥溫度為65—75℃，得肝素鈉成品。
實(shí)施例2：
一種提高肝素鈉澄清度的制備方法，包括如下操作步驟：
(1)稱(chēng)取100g肝素鈉粗品，用事先配制好的10％(w/v)的氯化鈉溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；
(2)將9倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置12小時(shí)，收集沉淀；
(3)將收集的沉淀用事先配制好的10％的氯化鈉溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；用季銨鹽檢測(cè)試紙檢測(cè)季銨鹽濃度，若小于5ppm，就進(jìn)行(5)的操作。若季銨鹽濃度大于5ppm，就進(jìn)行(4)的操作。
(4)將9倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置12小時(shí)，收集沉淀；重復(fù)(3)操作。
(5)用2％(w/v)氯化鈉溶液B溶解沉淀，用0.22微米的膜過(guò)濾器過(guò)濾；
(6)將9倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置12小時(shí)，收集沉淀；
(7)將沉淀中加入無(wú)水乙醇或甲醇，按照沉淀重量的5倍重量加入，攪拌2小時(shí)，靜置12小時(shí)，取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥溫度為65—75℃，得肝素鈉成品。
實(shí)施例3：
一種提高肝素鈉澄清度的制備方法，包括如下操作步驟：
(1)稱(chēng)取100g肝素鈉粗品，用事先配制好的15％(w/v)的氯化鈉溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；
(2)將10倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置20小時(shí)，收集沉淀；
(3)將收集的沉淀用事先配制好的15％的氯化鈉溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；用季銨鹽檢測(cè)試紙檢測(cè)季銨鹽濃度，若小于5ppm，就進(jìn)行(5)的操作。若季銨鹽濃度大于5ppm，就進(jìn)行(4)的操作。
(4)將10倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置20小時(shí)，收集沉淀；重復(fù)(3)操作。
(5)用1％(w/v)氯化鈉溶液B溶解沉淀，用0.22微米的膜過(guò)濾器過(guò)濾；
(6)將10倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇溫度控制在10℃以下)加入到上述的肝素鈉粗品溶液中，得到沉淀沉淀，靜置20小時(shí)，收集沉淀；
(7)將沉淀中加入無(wú)水乙醇或甲醇，按照沉淀重量的5倍重量加入，攪拌2小時(shí)，靜置20小時(shí)，取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥溫度為66～75℃，得肝素鈉成品。
以上實(shí)施例1～3所用的肝素鈉粗品的10％的水溶液很渾濁，其渾濁程度按照《中國(guó)藥典》2010版附錄IXB“澄清度檢查法”檢查大大超過(guò)4號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液，而經(jīng)過(guò)本實(shí)施例最終得到的肝素鈉成品的澄清度淺于1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液甚至達(dá)到0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液以下，同時(shí)用季銨鹽試紙檢測(cè)后，季銨鹽殘留顯示為零。
本工藝采取4.0％(w/v)以上的氯化鈉濃度置換出與肝素鈉結(jié)合的芐索氯銨，然后經(jīng)過(guò)乙醇(或甲醇)倍比稀釋的方法去掉芐索氯銨雜質(zhì)。得到的成品澄清度也符合歐洲藥典EP7.0標(biāo)準(zhǔn)甚至高于歐洲藥典EP7.0的標(biāo)準(zhǔn)。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。