從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其解決了現(xiàn)有從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質存在的提取時間長、成本高、環(huán)境污染嚴重和產品得率低的技術問題，其將海帶清洗、粉碎后，與一定比例的水裝入提取罐中，在高溫高壓下提取，提取液熱過濾，降溫、沉降，沉淀為巖藻黃質，干燥得到巖藻黃質產品；然后將上清液采用超濾濃縮，收集濾液，加入三氯乙酸除去蛋白質，離心，上清液加入乙醇溶液分級沉淀，收集沉淀物，真空干燥得到巖藻聚糖硫酸酯，本發(fā)明可應用于海帶中巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的提取。
【專利說明】從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種海帶中活性物質的提取方法，特別是一種從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法。

【背景技術】
[0002]巖藻聚糖硫酸酯是褐藻中特有的一種含有硫酸酯的天然活性多糖，具有抗腫瘤、抗凝血、抗病毒、抗血栓、降血脂、提高免疫力、解重金屬中毒和抗HIV的作用，有很好的醫(yī)藥應用價值，同時也是一種重要的食品、化妝品和保健品原料。巖藻聚糖硫酸酯來源豐富，成本低廉，在日本、美國作為預防和治療癌癥及血栓疾病的藥已經進入市場。
[0003]巖藻黃質(fucoxanthin)具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎及減肥等多種活性功能，是海帶中富含的一個重要的類胡蘿卜素成分，其占海帶中類胡蘿卜素的60%以上，不僅可以作為醫(yī)藥產品，還可作為保健品原料和食品添加劑、著色劑。近年來，海洋藥物在腫瘤研宄方面極受重視，巖藻黃質來源廣泛，副作用小，作為新藥開發(fā)的潛力很大。
[0004]目前，我國已經形成了以褐藻酸、甘露醇、碘為主要產品的海帶工業(yè)產品體系。但是，按干物質計，海帶的工業(yè)利用率僅為30%，還有約2/3的海帶資源未得到有效利用，已嚴重制約了海帶養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。海帶中含有豐富的褐藻糖膠(巖藻聚糖硫酸酯)、巖藻黃質等生物活性成分，目前尚未得到有效利用，多被作為廢棄物排放掉了，浪費了大量的自然資源。所以，對海帶進行合理的綜合利用既可提高海帶資源的利用率，又可以明顯降低廢物排放量。
[0005]目前，對于海帶中巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的提取多采用分步提取，如先將海帶采用有機溶劑如乙醇或添加丙酮提取，然后將殘渣采用水、酸或超聲波提取，該方法步驟繁瑣，提取時間長，并且采用大量有機溶劑，成本高、環(huán)境污染較為嚴重，產品得率較低。


【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明就是為了解決現(xiàn)有從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質存在提取時間長、成本高、環(huán)境污染嚴重和產品得率低的技術問題，提供一種提取時間短、成本低、環(huán)保效果好和產品得率高的從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法。
[0007]為此，本發(fā)明提供一種從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其包含以下步驟:
[0008](I)將海帶清洗并粉碎后裝入提取罐中，然后加入萃取劑去離子水，提取20?80min ；
[0009](2)將提取物過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置8?12小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后即得到巖藻黃質；
[0010](3)將濾液用超濾膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入三氯乙酸除去除蛋白質，離心；
[0011](4)向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為20?30%，靜置8?10小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為60?70%，靜置8?10小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯。
[0012]優(yōu)選地，步驟⑴中去離子水與海帶的質量比為3?100:1。
[0013]優(yōu)選地，步驟(I)中提取溫度為105?140°C、壓力為0.5?20MPa。
[0014]優(yōu)選地，步驟⑵中熱過濾溫度為90?100°C。
[0015]優(yōu)選地，步驟(3)中三氯乙酸的體積百分比為5?7%。
[0016]優(yōu)選地，步驟(3)中超濾膜為截留分子量3000?5000的中空纖維素超濾膜。
[0017]本發(fā)明使用去離子水提取，與使用常態(tài)水提取相比，提取時間短、產量得率高，并實現(xiàn)了巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的同時提取，更進一步提高了提取效率。本發(fā)明步驟簡單，省去了現(xiàn)有提取方法中使用的大量有機溶劑，節(jié)約了成本的同時也起到了環(huán)境保護的效果。目前，尚未見到將去離子水提取技術用于海帶中巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質同時提取的報道，本發(fā)明為海帶中生物活性成分的提取提供了新的途徑和思路。

【具體實施方式】
[0018]下面結合實施例對本發(fā)明使用去離子水從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法做進一步描述。
[0019]實施例1
[0020](I)將海帶清洗并粉碎，取1kg裝入亞臨界提取罐中，然后向亞臨界提取罐中加入萃取劑去離子水30kg，在溫度130°C、壓力IMPa下，提取30min。
[0021](2)將提取物在100°C下進行熱過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置12小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后即得到巖藻黃質粗品。
[0022](3)將濾液用截留分子量3000的中空纖維素膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入體積百分比為5%的三氯乙酸除去蛋白質，離心。
[0023](4)向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為20%，靜置8小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為60%，靜置10小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯，得率為1.2%,巖藻聚糖硫酸酯含量為80 %。
[0024]實施例2
[0025](I)將海帶清洗并粉碎，取20kg裝入亞臨界提取罐中，然后向亞臨界提取罐中加入萃取劑去離子水100kg，在溫度140°C、壓力1.5MPa下，提取20min。
[0026](2)將提取物在100°C下進行熱過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置8小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后即得到巖藻黃質粗品。
[0027](3)將濾液用截留分子量5000的中空纖維素膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入體積百分比為6 %的三氯乙酸除去蛋白質，離心，向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為30%，靜置10小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為60%，靜置9小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯，得率為1.15%，巖藻聚糖硫酸酯含量為81%。
[0028]實施例3
[0029](I)將海帶清洗并粉碎，取10kg裝入亞臨界提取罐中，然后向亞臨界提取罐中加入萃取劑去離子水600kg，在溫度125°C、壓力1.2MPa下，提取25min。
[0030](2)將提取物在95°C下進行熱過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置11小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后即得到巖藻黃質粗品。
[0031](3)將濾液用截留分子量5000的中空纖維素膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入體積百分比為7%的三氯乙酸除去蛋白質，離心。
[0032](4)向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為25%，靜置9小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為70%，靜置8小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯，得率為1.1%，巖藻聚糖硫酸酯含量為85%。
[0033]實施例4
[0034](I)將海帶清洗并粉碎，取12kg裝入亞臨界提取罐中，然后向亞臨界提取罐中加入萃取劑去離子水120kg，在溫度131°C、壓力0.5MPa下，提取80min。
[0035](2)將提取物在95°C下進行熱過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置12小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后即得到巖藻黃質粗品。
[0036](3)將濾液用截留分子量4000的中空纖維素膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入體積百分比為5.5%的三氯乙酸除去蛋白質，離心。
[0037](4)向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為26%，靜置10小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為68%，靜置10小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯，得率為1.2%,巖藻聚糖硫酸酯含量為83 %。
[0038]實施例5
[0039](I)將海帶清洗并粉碎，取3kg裝入亞臨界提取罐中，然后向亞臨界提取罐中加入萃取劑去離子水300kg，在溫度126°C、壓力20MPa下，提取50min。
[0040](2)將提取物在95°C下進行熱過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置9小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后即得到巖藻黃質粗品。
[0041](3)將濾液用截留分子量3000的中空纖維素膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入體積百分比為5.8%的三氯乙酸除去蛋白質，離心。
[0042](4)向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為29%，靜置9小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為70%，靜置9小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯，得率為1.3%,巖藻聚糖硫酸酯含量為85 %。
[0043]實施例6
[0044](I)將海帶清洗并粉碎，取6kg裝入亞臨界提取罐中，然后向亞臨界提取罐中加入萃取劑去離子水120kg，在溫度105°C、壓力15MPa下，提取60min。
[0045](2)將提取物在90°C下進行熱過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置12小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后即得到巖藻黃質粗品。
[0046](3)將濾液用截留分子量4000的中空纖維素膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入體積百分比為6.3%的三氯乙酸除去蛋白質，離心。
[0047](4)向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為22%，靜置10小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇含量為65%，靜置8小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯，得率為1.22%,巖藻聚糖硫酸酯含量為86%。
[0048]根據(jù)上述說明書的揭示和教導，上述實例為本發(fā)明較佳的實施方式。因此，本發(fā)明并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明實質與原理下所作的改變、組合、修飾，均應為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其特征是包含以下步驟: (1)將海帶清洗并粉碎后裝入提取罐中，然后加入萃取劑去離子水，提取20?SOmin; (2)將提取物過濾至沉降罐中，濾液在沉降罐中冷卻至4°C后靜置8?12小時，然后過濾得到不溶物，將不溶物干燥后，即得到巖藻黃質； (3)將步驟(2)中所得濾液用超濾膜超濾濃縮，收集濃縮液，向濃縮液中加入三氯乙酸除去蛋白質，離心； (4)向離心液中加入體積百分比為95%的乙醇溶液，使溶液中乙醇的質量百份比含量為20?30%，靜置8?10小時，除去沉淀；再向上清液中加入體積百分比為95%乙醇溶液，使溶液中乙醇的質量百份比含量為60?70%，靜置8?10小時，最后收集沉淀物進行真空干燥即得到巖藻聚糖硫酸酯。
2.根據(jù)權利要求1所述的從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其特征在于所述步驟(I)中，去離子水與海帶的質量比為3?100:1。
3.根據(jù)權利要求2所述的從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其特征在于所述步驟(I)中提取溫度為105?140°C、壓力為0.5?20MPa。
4.根據(jù)權利要求3所述的從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其特征在于所述步驟(2)中熱過濾溫度為90?100°C。
5.根據(jù)權利要求4所述的從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其特征在于所述步驟(3)中三氯乙酸的體積百分比為5?7%。
6.根據(jù)權利要求5所述的從海帶中提取巖藻聚糖硫酸酯和巖藻黃質的方法，其特征在于所述步驟(3)中超濾膜為截留分子量3000?5000的中空纖維素超濾膜。
【文檔編號】C08B37/00GK104448027SQ201410855043
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月31日 優(yōu)先權日:2014年12月31日
【發(fā)明者】苗其壯, 雷建都, 付東霖 申請人:威海芝恩藥業(yè)股份有限公司