專利名稱：一種甘蔗葉多糖的制備方法
一種甘蔗葉多糖的制備方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于農(nóng)作物廢棄物資源開發(fā)領(lǐng)域和藥物化學(xué)領(lǐng)域，主要應(yīng)用領(lǐng)域為醫(yī)藥、 保健食品。
背景技術(shù)：
甘鹿葉是禾本科植物甘鹿Saccharum sinensis Roxb.的葉。甘鹿廣泛種植于熱帶、亞熱帶地區(qū)，中國蔗區(qū)主要分布在廣西、廣東、臺灣等地。甘蔗葉作為甘蔗豐收后的副產(chǎn)品，每年產(chǎn)量頗高，卻未得到充分利用，除少部分被加工成動物飼料、造紙等，大部分被蔗農(nóng)焚燒，造成資源浪費、環(huán)境污染且易造成森林火災(zāi)。甘蔗葉含有大量葉綠素、氨基酸、多糖利黃酮類等物質(zhì)，其嫩葉和蔗梢含過氧化物酶等物質(zhì)，具有抗氧化、抗菌、降血糖、抗腫瘤等藥理作用。國內(nèi)外對甘蔗葉多糖的研究并不多見，僅提取工藝、藥效學(xué)篩選等報道。目前制備多糖多采用水提醇沉法，水提液經(jīng)乙醇沉淀處理時，沉淀中除含有多糖類物質(zhì)，還含蛋白質(zhì)、色素等雜質(zhì)，影響多糖的純度，因此需除去多糖中蛋白質(zhì)等有關(guān)雜質(zhì)，提聞多糖的純度。 本發(fā)明人以甘蔗葉為原料，探究甘蔗葉多糖的提取、純化方法，探索出高產(chǎn)高純甘蔗葉多糖的制備工藝，對于甘蔗廢棄物資源的挖掘利用、深度開發(fā)，進一步促進甘蔗產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有積極意義。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于發(fā)掘出一種甘蔗葉多糖的新的制備方法。
本發(fā)明人將甘蔗葉采用水提醇沉、減壓干燥的方法制備粗多糖，先后利用大孔樹脂脫色、絮凝劑除雜、澄清，減壓干燥，制得白色甘蔗葉精制多糖，從而實現(xiàn)了本發(fā)明的目的。
I、一種甘蔗葉多糖的制備方法，包括以下步驟
(I)將甘蔗葉采用水提醇沉法、減壓干燥制備得灰褐色粗多糖；
(2)將步驟(I)中所得到的粗多糖用蒸餾水超聲溶解，離心除去不溶物，于上清液中按15 25g/100mL粗多糖溶液的比例加入大孔樹脂，置于40°C水浴鍋中靜態(tài)吸附脫色 6 8h，抽濾得濾液；
(3)于步驟⑵所得到的濾液中按6 8% /3 4%的體積比例先后滴加絮凝劑的B組分利A組分，邊攪邊加，分別置于40°C水浴鍋中保溫I 2h，過濾，濾液濃縮至原液的四分之一至三分之一，緩緩加入四倍量無水乙醇，邊攪邊加，于4°C冰箱中靜置過夜，抽濾， 用無水乙醇洗滌沉淀2 3次，減壓干燥得白色甘蔗葉精制多糖。
附絮凝劑配制方法
A組分稱取絮凝劑A組分lg，用IOmL蒸餾水溶解，并攪拌成糊狀，再加入剩余 90mL蒸餾水，不斷攪拌，使其充分溶解，溶脹24h，配成I %黏膠液lOOmL，即得(用前搖勻)。
B組分先配制I %醋酸(v/v)，稱取絮凝劑B組分lg，用IOmLl %醋酸溶解，并攪拌成糊狀，加入余下的90mLl%醋酸，充分攪拌使其溶解，溶脹24h，配成1%黏膠液lOOmL，即得(用前搖勻)。
2、上述純化過程特征在于先采用大孔樹脂靜態(tài)吸附脫色，然后再采用絮凝劑絮凝除雜、澄清，可有效保證純化后多糖溶液澄清、透亮。
步驟⑵中大孔樹脂用量為15 25g/100mL粗多糖溶液，時間為6 8h，在保證脫色效果的同時，兼顧了多糖的含量。
步驟(3)中絮凝劑B組分加入量為6 8%，A組分加入量為3 4%，溫度最好為30 50°C，時間為I 2h，從而保證除雜效果。
本發(fā)明的制備方法實現(xiàn)了安全無毒、綠色環(huán)保的提取、純化和精制過程，能夠制備出白色甘蔗葉精制多糖，實現(xiàn)了本發(fā)明的目的。
綜上所述，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)勢在于
I、現(xiàn)有技術(shù)利用雙氧水、活性炭對粗多糖進行脫色處理，而本發(fā)明采用大孔樹脂靜態(tài)吸附脫色，可以防止多糖被氧化和活性炭的殘留。
2、現(xiàn)有技術(shù)利用氯仿-正丁醇、三氯乙酸去除粗多糖中的蛋白質(zhì)，而本發(fā)明摒棄有毒有害的有機試劑及酸性試劑，應(yīng)用純天然的絮凝劑去除粗多糖中蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，且無試劑殘留，可保證純化工藝安全無毒、綠色環(huán)保。
3、相比大孔樹脂柱層析而言，本發(fā)明中脫色、除雜都采用恒溫水浴保溫方法，簡化了操作，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施方式
實例一
稱取甘蔗葉粗多糖7. 5044g，加入250mL蒸餾水超聲溶解，離心除去不溶物，上清液置于裝有50g已預(yù)處理的Dltll大孔樹脂的錐形瓶，于40°C恒溫水浴鍋中靜態(tài)吸附脫色6h， 抽濾，用蒸餾水洗滌樹脂，得濾液300mL，按6 8 % /3 4%的體積比例先后滴加絮凝劑的 B組分和A組分，邊攪邊加，于40°C恒溫水浴鍋中分別保溫2h、Ih,過濾，用蒸餾水洗滌絮凝物，濾液濃縮為原液的四分之一至三分之一，然后加入四倍量無水乙醇沉，于4°C冰箱中靜置過夜，抽濾，用無水乙醇洗滌沉淀2 3次，減壓干燥得白色甘蔗葉精制多糖2. 1032g。
實例二
稱取甘蔗葉粗多糖9. 0021g,加入300mL蒸餾水超聲溶解，離心除去不溶物，上清液置于裝有60g已預(yù)處理的AB-8大孔樹脂的錐形瓶，于40°C恒溫水浴鍋中靜態(tài)吸附脫色 6h，抽濾，用蒸餾水洗滌樹脂，得濾液350mL，按6 8% /3 4%的體積比例先后滴加絮凝劑的B組分和A組分，邊攪邊加，于40°C恒溫水浴鍋中分別保溫2h、Ih,過濾，用蒸餾水洗滌絮凝物，濾液濃縮為原液的四分之一至三分之一，然后加入四倍量無水乙醇沉，于4°C 冰箱中靜置過夜，抽濾，用無水乙醇洗滌沉淀2 3次，減壓干燥得白色甘蔗葉精制多糖5.9739g0
權(quán)利要求
1.一種甘蔗葉多糖的制備方法，包括以下步驟(1)將甘蔗葉采用水提醇沉法、減壓干燥制備得灰褐色粗多糖；(2)將步驟(I)中得到的粗多糖用蒸餾水超聲溶解，離心除去不溶物，于上清液中加入已預(yù)處理的大孔樹脂，置于水浴鍋中靜態(tài)吸附脫色，抽濾得濾液；(3)于步驟(2)得到的濾液中滴加絮凝劑，邊攪邊加，置于水浴鍋中保溫，過濾，濾液濃縮至飽和狀態(tài)，緩緩加入無水乙醇，邊攪邊加，于冰箱中靜置過夜，抽濾得沉淀，無水乙醇洗滌沉淀數(shù)次，減壓干燥得白色甘蔗葉精制多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種甘蔗葉多糖的制備方法，步驟(2)中樹脂脫色方法的特征在于其脫色方式為靜態(tài)吸附脫色；所采用的大孔樹脂可以從非極性大孔樹脂D1(ll、D3520, 弱極性大孔樹脂AB-8中任選一種；樹脂用量為15 25g/100mL粗多糖溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種甘蔗葉多糖的制備方法，其特征在于粗多糖純化方法為大孔樹脂、絮凝劑聯(lián)合應(yīng)用，且純化方式為先采用大孔樹脂靜態(tài)吸附脫色，然后再利用絮凝劑除雜、澄清。
全文摘要
本發(fā)明屬于農(nóng)作物廢棄物資源開發(fā)利藥物化學(xué)領(lǐng)域，主要應(yīng)用領(lǐng)域為醫(yī)藥、保健食品；涉及了一種新的甘蔗葉多糖的制備方法，其特征主要為先將甘蔗葉采用水提醇沉法、減壓干燥得灰褐色粗多糖；用蒸餾水超聲溶解粗多糖，離心除去不溶物，上清液先用大孔樹脂靜態(tài)吸附脫色，然后利用絮凝劑除雜、澄清，醇沉，無水乙醇洗滌沉淀，減壓干燥得白色甘蔗葉精制多糖。本發(fā)明解決了粗多糖溶液過濾難、顏色深的問題，且提取、純化過程不含有毒有害、呈酸性的有機溶劑，保證多糖結(jié)構(gòu)的完整性，實現(xiàn)全過程安全無毒、綠色環(huán)保的提取、純化。
文檔編號C08B37/00GK102911286SQ201210475688
公開日2013年2月6日 申請日期2012年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月22日
發(fā)明者侯小濤, 趙超超, 鄧家剛 申請人:廣西中醫(yī)藥大學(xué)