專利名稱：用于治療rna依賴性rna病毒感染的核苷氨基磷酸芳基酯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及核苷氨基磷酸芳基酯、其合成法以及作為RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑的前體的用途。本發(fā)明的化合物是RNA依賴性RNA病毒復制抑制劑的前體，并且用于治療RNA依賴性RNA病毒感染。它們特別可用作丙型肝炎病毒(HCV)NS5B聚合酶的抑制劑的前體、HCV復制抑制劑的前體、以及用于治療丙型肝炎感染。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒(HCV)感染是引起慢性肝病(例如肝硬化和肝細胞癌)的一個主要健康問題，受感染者的人數(shù)估計占世界人口的2～15％。根據(jù)美國疾病控制中心報道，在美國估計有4.5百萬人感染。根據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全世界有超過2億的感染人群，且每年至少有3～4百萬人感染。一旦感染，約20％的人清除病毒，但在其余的受感染者中，HCV卻存留一生。10～20％的長期被感染者最后發(fā)展為肝臟損傷性的肝硬化或癌癥。該病毒性疾病通過受污染的血液和血液制品、受污染的針而經(jīng)腸胃外傳播，或者通過受感染母體或母體攜帶者的通過性途徑或垂直途徑傳染給后代。目前對于HCV感染的治療方法僅限于單獨使用或與核苷類似物病毒唑聯(lián)合使用重組干擾素-α，它們的臨床效果都是有限的。此外，對于HCV還沒有已建定的疫苗。因此，急需有效抵抗慢性HCV感染的改良治療劑。有關(guān)HCV感染的治療技術(shù)的現(xiàn)狀的綜述參閱B.Dymock等“Novel approaches to the treatment of hepatitisC virus infection，”Antiviral Chemistry & Chemotherapy，1179-96(2000)；H.Rosen等“Hepatitis C viruscurrent understanding andprospects for future therapies，”Molecular Medicine Today，5393-399(1999)；D.Moradpour等，“Current and evolving therapies forhepatitis C，”European J.Gastroenterol.Hepatol.，111189-1202(1999)；R.Bartenschlager，“Candidate Targets for Hepatitis CVirus-Specific Antiviral Therapy，”Intervirology，40378-393(1997)；G.M.Lauer和B.D.Walker，“Hepatitis C Virus Infection，”N.Engl，J.Med.，34541-52(2001)；B.W.Dymock，“Emerging therapies forhepatitis C virus infection，”Emerging Drugs，613-42(2001)；和C.Crabb，“Hard-Won Advances Spark Excitement about Hepatitis C，”Science506-507(2001)；其全部內(nèi)容在此引為參考。
目前已經(jīng)采取了不同的HCV治療方法，包括抑制病毒性絲氨酸蛋白酶(NS3蛋白酶)、解旋酶和RNA依賴性RNA聚合酶(NS5B)，以及開發(fā)疫苗。
HCV病毒是一種具備約9600堿基的單個寡核糖核苷酸基因組序列(其編碼約3010個氨基酸的多蛋白)的有包膜的正鏈RNA病毒。HCV基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物由結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)C、E1和E2，以及非結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)NS2、NS3、NS4A和NS4B以及NS5A和NS5B組成。據(jù)信非結(jié)構(gòu)性(NS)蛋白為病毒復制提供了催化機構(gòu)。NS3蛋白酶從多蛋白鏈釋放NS5B，RNA依賴性RNA聚合酶。HCV NS5B聚合酶是從單鏈病毒RNA(其作為HCV復制循環(huán)的模板)合成雙鏈RNA所需要的。因此，NS5B聚合酶被認為是HCV復制復合體中的必要成分[參閱K.Ishi等“Expressionof Hepatitis C Virus NS5B ProteinCharacterization of Its RNAPolymerase ActiVity and RNA Binding，”Hepatology. 291227-1235(1999)和V.Lohmann等“Biochemical and Kinetic Analyses ofNS5B RNA-Dependent RNA Polymerase of the Hepatitis C Virus，″Virology，249108-118(1998)]。因此，HCV NS5B聚合酶的抑制阻止了雙鏈HCV RNA的形成，并因此構(gòu)成了一誘人的開發(fā)HCV特異性抗病毒療法的方法。
有關(guān)具有治療HCV感染的潛在作用的HCV NS5B聚合酶的抑制劑的開發(fā)的綜述參閱M.P.Walker等“Promising candidates for thetreatment of chronic hepatitis C，″Expert Opin.Invest.Drugs.121269-1280(2003)和P.Hoffmann等“Recent patents on experimentaltherapy for hepatitis C Virus infection(1999-2002)，”Expert Opin.Ther.Patente.″“131707-1723(2003)。在A.E.Eldrup等“Structure-ActivityRelationship of Purine Ribonucleosides for Inhibition of HCV RNA-Dependent RNA Polymerase，“J.Med.Chem.，472283-2295(2004)中報道了嘌呤核糖核苷抗HCV聚合酶的活性。仍然需要在結(jié)構(gòu)上不同的核苷衍生物，作為HCV聚合酶抑制劑用于HCV治療的治療性療法。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯是RNA依賴性RNA病毒復制(特別是HCV復制)的有效的抑制劑的前體。所述氨基磷酸酯在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為其核苷5’-磷酸(核苷酸)衍生物，后者轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的核苷5’-三磷酸衍生物——RNA依賴性RNA病毒聚合酶(特別是HCV NS5B聚合酶)的抑制劑。本發(fā)明的核苷氨基磷酸酯可以用于治療RNA依賴性RNA病毒感染(特別是HCV感染)。
因此，本發(fā)明的另一個目的在于提供核苷氨基磷酸芳基酯，其被用作RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑的前體，特別用作HCVNS5B聚合酶的抑制劑的前體。
本發(fā)明的另一個目的在于提供核苷氨基磷酸芳基酯，其被用作RNA依賴性RNA病毒復制抑制劑的前體，特別用作丙型肝炎病毒復制抑制劑的前體。
本發(fā)明的另一個目的在于提供核苷氨基磷酸芳基酯，其被用于治療RNA依賴性RNA病毒感染，特別是用于治療HCV感染。
本發(fā)明的另一個目的在于提供藥物組合物，其包含本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯和藥學上可接受的載體。
本發(fā)明的另一個目的在于提供包含本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯用作RNA依賴性RNA病毒聚合酶抑制劑的前體、特別是作為HCVNS5B聚合酶抑制劑的前體的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的在于提供包含本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯用作RNA依賴性RNA病毒復制抑制劑的前體、特別是作為HCV復制抑制劑的前體的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的在于提供包含本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯用于治療RNA依賴性RNA病毒感染、特別是用于HCV感染的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的在于提供包含與其它抗RNA依賴性RNA病毒(特別是HCV)的活性劑聯(lián)合的本發(fā)明核苷氨基磷酸芳基酯的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的在于提供抑制RNA依賴性RNA病毒聚合酶，特別是抑制HCV NS5B聚合酶的方法。
本發(fā)明的另一個目的在于提供抑制RNA依賴性RNA病毒復制，特別是抑制HCV復制的方法。
本發(fā)明的另一個目的在于提供治療RNA依賴性RNA病毒感染，特別是治療HCV感染的方法。
本發(fā)明的另一個目的在于提供與其他抗RNA依賴性RNA病毒的活性劑聯(lián)合治療RNA依賴性RNA病毒感染的方法，特別是與其他抗HCV活性劑聯(lián)合治療HCV感染的方法。
本發(fā)明的另一個目的在于提供核苷氨基磷酸芳基酯及其藥物組合物作為藥物用于抑制RNA依賴性RNA病毒復制和/或治療RNA依賴性RNA病毒感染，特別是用于抑制HCV復制和/或治療HCV感染。
本發(fā)明的另一個目的在于提供本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯及其藥物組合物在制造用于抑制RNA依賴性RNA病毒復制和/或治療RNA依賴性RNA病毒感染，特別是用于抑制HCV復制和/或治療HCV感染的藥物中的用途。
從下述詳細說明中，上述及其他目的將變得顯而易見。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及下面立體化學構(gòu)型表示的結(jié)構(gòu)式I的化合物 或其藥學上可接受的鹽，其中Y是CR9或N；Ar是未取代的或被1～3個獨立選自下列組的取代基取代的苯基鹵素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、氰基、硝基、氨基、羧基、三氟甲基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基羰基氧基和C1-4烷基氧基羰基；R1選自氫、氟、疊氮基、氨基、羥基、C1-3烷氧基、巰基和C1-3烷硫基；
R2和R3獨立地選自氫、甲基、C1-16烷基羰基、C2-18烯基羰基、C1-10烷基氧基羰基、C3-6環(huán)烷基羰基、C3-6環(huán)烷基氧基羰基；R4是氫、鹵素、甲基、疊氮基或氨基；R5和R6獨立地選自氫、羥基、鹵素、C1-4烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C3-6環(huán)烷基氨基、二(C3-6環(huán)烷基)氨基、芐基氨基、二芐基氨基或C4-6雜環(huán)烷基，其中烷基、環(huán)烷基、芐基和雜環(huán)烷基是未取代的或被1～5個獨立選自鹵素、羥基、氨基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的基團取代；R7是氫、C1-5烷基、苯基或芐基；其中烷基是未取代的或被一個選自羥基、甲氧基、氨基、羧基、氨基甲?；?、胍基、巰基、甲硫基、1H-咪唑基和1H-吲哚-3-基的取代基取代；其中苯基和芐基是未取代的或被1～2個獨立選自鹵素、羥基和甲氧基的取代基取代；R8是氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、苯基或芐基；其中烷基和環(huán)烷基是未取代的或被1～3個獨立選自鹵素、羥基、羧基、C1-4烷氧基的取代基取代；其中苯基和芐基是未取代的或被1～3個獨立選自鹵素、羥基、氰基、C1-4烷氧基和三氟甲基的取代基取代；R9選自氫、氟、氰基、C1-3烷基、NHCONH2、CONR10R10、CSNR10R10、COOR10、C(＝NH)NH2、羥基、C1-3烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基和二(C1-4烷基)氨基；每個R10獨立表示氫或C1-6烷基；R11是氫或甲基。
式I的化合物可以用作RNA依賴性RNA病毒聚合酶(特別是HCVNS5B聚合酶)的抑制劑的前體。其還是RNA依賴性RNA病毒復制(特別是HCV復制)抑制劑的前體，并用于治療RNA依賴性RNA病毒感染(特別是治療HCV感染)。
本發(fā)明的氨基磷酸芳基酯是作為相應(yīng)的核苷5’-單磷酸酯的前藥進行作用的，對于其作用機制沒有限制。內(nèi)源性激酶將5’-單磷酸酯轉(zhuǎn)變成其5’-三磷酸酯衍生物——RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑。因此，氨基磷酸芳基酯比核苷本身具有更有效的標靶細胞滲透，可能對代謝降解的敏感性更小，并能夠靶向特定組織(例如肝臟)，從而在較低的抗病毒試劑總劑量下得到更廣泛的治療指數(shù)。
本發(fā)明還包括包含單獨或與其他抗RNA依賴性RNA病毒(特別是抗HCV)的活性劑組合的該化合物的藥物組合物、以及抑制RNA依賴性RNA病毒復制和治療RNA依賴性RNA病毒感染的方法。
發(fā)明的詳細說明本發(fā)明涉及下面立體化學構(gòu)型表示的結(jié)構(gòu)式I的化合物 或其藥學上可接受的鹽，其中Y是CR9或N；Ar是未取代的或被1～3個獨立選自下列組的取代基取代的苯基鹵素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、氰基、硝基、氨基、羧基、三氟甲基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基羰基氧基和C1-4烷基氧基羰基；R1選自氫、氟、疊氮基、氨基、羥基、C1-3烷氧基、巰基和C1-3烷硫基；R2和R3獨立地選自氫、甲基、C1-16烷基羰基、C2-18烯基羰基、C1-10烷基氧基羰基、C3-6環(huán)烷基羰基、C3-6環(huán)烷基氧基羰基；R4是氫、鹵素、甲基、疊氮基或氨基；R5和R6各自獨立地選自氫、羥基、鹵素、C1-4烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C3-6環(huán)烷基氨基、二(C3-6環(huán)烷基)氨基、芐基氨基、二芐基氨基或C4-6雜環(huán)烷基，其中烷基、環(huán)烷基、芐基和雜環(huán)烷基是未取代的或被1～5個獨立選自鹵素、羥基、氨基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的基團取代；R7是氫、C1-5烷基、苯基或芐基；其中烷基是未取代的或被一個選自羥基、甲氧基、氨基、羧基、氨基甲?；㈦一?、巰基、甲硫基、1H-咪唑基和1H-吲哚-3-基的取代基取代；其中苯基和芐基是未取代的或被1～2個獨立選自鹵素、羥基和甲氧基的取代基取代；R8是氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、苯基或芐基；其中烷基和環(huán)烷基是未取代的或被1～3個獨立選自鹵素、羥基、羧基、C1-4烷氧基的取代基取代；其中苯基和芐基是未取代的或被1～3個獨立選自鹵素、羥基、氰基、C1-4烷氧基和三氟甲基的取代基取代；R9選自氫、氟、氰基、C1-3烷基、NHCONH2、CONR10R10、CSNR10R10、COOR10、C(＝NH)NH2、羥基、C1-3烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基和二(C1-4烷基)氨基；每個R10獨立表示氫或C1-6烷基；R11是氫或甲基。
式I的化合物可以用作RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑的前體。其還是RNA依賴性RNA病毒復制抑制劑的前體，并可用于治療RNA依賴性RNA病毒感染。
在本發(fā)明化合物的一個實施方式中，Y是N，R1是氫或氟，且R2和R3是氫。在該類實施方式中R4是氫。
在本發(fā)明化合物的第二個實施方式中，Y是CR9，R1是氫或氟，且R2和R3是氫。在該類實施方式中R9是氫或氟，在該類的子類中，R4是氫。
在本發(fā)明化合物的第三個實施方式中，Ar是未取代的苯基。
在本發(fā)明化合物的第四個實施方式中，R11是氫，R7選自氫、甲基、乙基、正丙基、異丙基、異丁基、2-甲基-1-丙基、羥基甲基、巰基甲基、羧基甲基、氨基甲酰基甲基、1-羥基乙基、2-羧基乙基、2-氨基甲?；一?、2-甲硫基乙基、4-氨基-1-丁基、3-氨基-1-丙基、3-胍基-1-丙基、1H-咪唑-4-基甲基、苯基、4-羥基芐基和1H-吲哚-3-基甲基。在該類實施方式中R7是甲基或芐基。
在本發(fā)明化合物的第五個實施方式中，R8是C1-6烷基、環(huán)己基、苯基或芐基。在該類實施方式中R8是甲基。
在本發(fā)明化合物的第六個實施方式中，Ar是未取代的苯基、R7是甲基或芐基、R8是甲基、R11是氫。
結(jié)構(gòu)式I的本發(fā)明化合物，其用作RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑的前體，舉例但非限制的實例如下
和 或其藥學上可接受的鹽。
在本發(fā)明的一個實施方式中，本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯可以用作正義單鏈RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑、正義單鏈RNA依賴性RNA病毒復制抑制劑，和/或用于治療正義單鏈RNA依賴性RNA病毒感染。在該類實施方式中，正義單鏈RNA依賴性RNA病毒是黃病毒科(Flaviviridae)病毒或小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)病毒。在該類的子類中，小核糖核酸病毒科病毒是鼻病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒或甲型肝炎病毒。在該類的第二子類中，黃病毒科病毒包括丙型肝炎病毒、黃熱病病毒、登革熱病毒、西尼羅河病毒、日本腦炎病毒、Banzi病毒和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)。在該子類的子類中，黃病毒科病毒為丙型肝炎病毒。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物中抑制RNA依賴性RNA病毒聚合酶的方法、抑制RNA依賴性RNA病毒復制的方法、和/或治療RNA依賴性RNA病毒感染的方法，其包括對哺乳動物給藥治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的化合物。
本發(fā)明此方面的一個實施方式中，RNA依賴性RNA病毒聚合酶是正義單鏈RNA依賴性RNA病毒聚合酶。在該類實施方式中，正義單鏈RNA依賴性RNA病毒聚合酶是黃病毒科病毒聚合酶或小核糖核酸病毒科病毒聚合酶。在該類的子類中，小核糖核酸病毒科病毒聚合酶是鼻病毒聚合酶、脊髓灰質(zhì)炎病毒聚合酶或甲型肝炎病毒聚合酶。在該類的第二子類中，黃病毒科病毒聚合酶包括丙型肝炎病毒聚合酶、黃熱病病毒聚合酶、登革熱病毒聚合酶、西尼羅河病毒聚合酶、日本腦炎病毒聚合酶、Banzi病毒聚合酶和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)聚合酶。在該子類的子類中，黃病毒科病毒聚合酶為丙型肝炎病毒聚合酶。
本發(fā)明此方面的第二個實施方式中，RNA依賴性RNA病毒復制是正義單鏈RNA依賴性RNA病毒復制。在該類實施方式中，正義單鏈RNA依賴性RNA病毒復制是黃病毒科病毒復制或小核糖核酸病毒科病毒復制。在該類的子類中，小核糖核酸病毒科病毒復制是鼻病毒復制、脊髓灰質(zhì)炎病毒復制或甲型肝炎病毒復制。在該類的第二子類中，黃病毒科病毒復制包括丙型肝炎病毒復制、黃熱病病毒復制、登革熱病毒復制、西尼羅河病毒復制、日本腦炎病毒復制、Banzi病毒復制和牛病毒性腹瀉病毒復制。在該子類的子類中，黃病毒科病毒復制為丙型肝炎病毒復制。
本發(fā)明此方面的第三個實施方式中，RNA依賴性RNA病毒感染是正義單鏈RNA依賴性RNA病毒感染。在該類實施方式中，正義單鏈RNA依賴性RNA病毒感染是黃病毒科病毒感染或小核糖核酸病毒科病毒感染。在該類的子類中，小核糖核酸病毒科病毒感染是鼻病毒感染、脊髓灰質(zhì)炎病毒感染或甲型肝炎病毒感染。在該類的第二子類中，黃病毒科病毒感染包括丙型肝炎病毒感染、黃熱病病毒感染、登革熱病毒感染、西尼羅河病毒感染、日本腦炎病毒感染、Banzi病毒感染和牛病毒性腹瀉病毒感染。在該子類的子類中，黃病毒科病毒感染為丙型肝炎病毒感染。
在本說明書中，下列術(shù)語具有如下的意義
上述烷基是指包括指定長度的直鏈或支鏈烷基。該烷基的實例是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、異己基等。
術(shù)語“烯基”是指2～6個總碳原子數(shù)(或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù))的直鏈或支鏈烯烴(例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基等)。
術(shù)語“炔基”是指2～6個總碳原子數(shù)(或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù))的直鏈或支鏈炔烴(例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基等)。
術(shù)語“環(huán)烷基”是指3～8個總碳原子數(shù)(或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù))的環(huán)狀烷烴(例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基或環(huán)辛基)。
術(shù)語“環(huán)雜烷基”包括含1～2個選自氮、氧和硫的雜原子的非芳香雜環(huán)。實例為4～6-員環(huán)雜烷基，包括氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、咪唑烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、四氫噻吩基、哌嗪基等。
術(shù)語“烷氧基”是指規(guī)定碳原子數(shù)(例如C1-4烷氧基)或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù)(例如甲氧基(MeO-)、乙氧基、異丙氧基等)的直鏈或支鏈烴氧化物。
術(shù)語“烷硫基”是指規(guī)定碳原子數(shù)(例如C1-4烷硫基)或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù)(例如甲硫基(MeS-)、乙硫基、異丙硫基等)的直鏈或支鏈烷基硫。
術(shù)語“烷基氨基”是指規(guī)定碳原子數(shù)(例如C1-4烷基氨基)或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù)(例如甲氨基、乙氨基、異丙氨基、叔丁氨基等)的直鏈或支鏈烷基胺。
術(shù)語“烷基磺?！笔侵敢?guī)定碳原子數(shù)(例如C1-6烷基磺酰)或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù)(例如甲磺酰(MeSO2-)、乙磺酰、異丙磺酰等)的直鏈或支鏈烷基砜。
術(shù)語“烷基氧基羰基”是指規(guī)定碳原子數(shù)(例如C1-4烷基氧基羰基)或該范圍內(nèi)任何碳原子數(shù)(例如甲基氧基羰基(MeOCO-)、乙基氧基羰基、丁基氧基羰基)的本發(fā)明羧酸衍生物的直鏈或支鏈酯。
術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴和碘。
術(shù)語“磷?；笔侵?P(O)(OH)2。
術(shù)語“二磷?；笔侵妇哂邢铝薪Y(jié)構(gòu)的基團
術(shù)語“三磷?；笔侵妇哂邢铝薪Y(jié)構(gòu)的基團 術(shù)語“取代”應(yīng)當認為包括被給定的取代基多重取代。在說明書或權(quán)利要求所述的多重取代基殘基中，取代化合物可以獨立地被一個或多個說明書的或權(quán)利要求所述的取代基殘基一次或多次取代。
術(shù)語“5’-三磷酸酯”是指本發(fā)明的核苷化合物的5’-羥基的三磷酸酯衍生物，其具有下列結(jié)構(gòu)通式II 其中Y和R1～R6定義如上。
術(shù)語“組合物”，例如在“藥物組合物”中，包括含活性成分的產(chǎn)物和形成載體的惰性成分的產(chǎn)物，以及通過組合、絡(luò)合或聚集任何兩種或多種所述成分、或解離一種或多種所述成分、或經(jīng)一種或多種所述成分的其他類型反應(yīng)直接或間接得到的其他產(chǎn)物。因此，本發(fā)明的藥物組合物包含本發(fā)明的化合物與藥學上可接受的載體混合制得的任何組合物。
術(shù)語化合物的“給藥”和“用藥”應(yīng)當理解為向所需個體提供本發(fā)明的化合物或本發(fā)明化合物的前藥。
本發(fā)明的另一方面涉及聯(lián)合一種或多種可用于治療HCV感染的藥劑使用本發(fā)明的化合物抑制HCV NS5B聚合酶的方法、聯(lián)合一種或多種可用于治療HCV感染的藥劑使用本發(fā)明的化合物抑制HCV復制的方法，或聯(lián)合一種或多種可用于治療HCV感染的藥劑使用本發(fā)明的化合物治療HCV感染的方法。這種抗HCV的活性劑包括但不局限于病毒唑、左旋韋林(levovirin)、viramidine、胸腺素α-1、干擾素-β、干擾素-α、PEG化(pegylated)干擾素-α(PEG干擾素-α)、干擾素-α和病毒唑的組合、PEG干擾素-α和病毒唑的組合、干擾素-α和左旋韋林的組合、PEG干擾素-α和左旋韋林的組合。干擾素-α包括但不局限于重組干擾素-α2a(例如從Hoffmann-LaRoche，Nutley，NJ購得的Roferon干擾素)、PEG化干擾素-α2a(PegasysTM)、干擾素-α2b(例如從ScheringCorp.，Kenilworth，NJ購得的Intron-A干擾素)、PEG化干擾素-α2b(PegIntronTM)、重組共有序列干擾素(consensus interferon)(例如干擾素alphacon-1)和純化干擾素-α產(chǎn)品。Amgen′s重組共有序列干擾素的商品名是Infergen。左旋韋林是病毒唑的L-對映異構(gòu)體，其具有類似于病毒唑的免疫調(diào)節(jié)活性。Viramidine表示W(wǎng)O 01/60379(轉(zhuǎn)讓給ICN Pharmaceuticals)中公開的病毒唑的類似物。根據(jù)本發(fā)明的方法，該組合的單個成分可以在治療的不同時期分別給藥或以分開的或單一的組合的形式同時給藥。因此本發(fā)明應(yīng)理解為包含這種同時或交替治療的全部方案，且術(shù)語“給藥”應(yīng)做相應(yīng)的解釋。很明顯，本發(fā)明的化合物與用于治療HCV感染的其他藥劑組合在原則上包括與任何用于治療HCV感染的藥物組合物的任何組合。當本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽與第二抗HCV的活性治療劑聯(lián)合使用時，每種化合物的劑量既可以與其單獨使用時的劑量相同，也可以不同。
用于治療HCV感染時，本發(fā)明的化合物還可以聯(lián)合HCV NS3絲氨酸蛋白酶抑制劑進行給藥。HCV NS3絲氨酸蛋白酶是一種基本病毒酶。且已經(jīng)將它們描述為抑制HCV復制的優(yōu)異標靶。HCV NS3蛋白酶抑制劑的底物和非底物基抑制劑公開于WO 98/22496、WO98/46630、WO 99/07733、WO 99/07734、WO 99/38888、WO 99/50230、WO 99/64442、WO 00/09543、WO 00/59929、GB-2337262、WO02/48116、WO 02/48172和美國專利US 6,323,180。HCV NS3蛋白酶作為用于開發(fā)HCV復制抑制劑和用于治療HCV感染的標靶的內(nèi)容如B.W.Dymock，″Emerging therapies for hepatitis C virus infection，″Emerging Drugs，613-42(2001)所述。
病毒唑、左旋韋林和viramidine可以通過抑制細胞內(nèi)酶肌苷單磷酸酯脫氫酶(IMPDH)來調(diào)節(jié)細胞內(nèi)鳥嘌呤核苷酸庫，從而發(fā)揮它們的抗HCV效果。IMPDH是從頭鳥嘌呤核苷酸生物合成路線上的限速酶。病毒唑很容易細胞內(nèi)磷酸化，且該單磷酸酯衍生物是IMPDH的抑制劑。因此，抑制IMPDH代表了發(fā)現(xiàn)HCV復制抑制劑的另一個有用標靶。因此，本發(fā)明的化合物也可以與以下物質(zhì)聯(lián)合給藥IMPDH抑制劑，例如VX-497，如WO 97/41211和WO 01/00622(轉(zhuǎn)讓給Vertex)所述；另一種IMPDH抑制劑，如WO 00/25780(轉(zhuǎn)讓給Bristol-MyersSquibb)；或mycophenolate mofetil(參閱A.C.Allison和E.M.Eugui，Agents Action.44(Suppl.)165(1993))所述。
用于治療HCV感染時，本發(fā)明的化合物還可以聯(lián)合抗病毒劑金剛烷胺(1-氨基金剛烷)(該藥劑的詳細說明參閱J.Kirschbaum，Anal.Profiles Drug Subs.121-36(1983))給藥。
本發(fā)明的化合物還可與抗病毒2’-C-分支核糖核苷聯(lián)合治療HCV感染，所述2’-C-分支核糖核苷如R.E.Harry-O′kuru等，J.Org.Chem..621754-1759(1997)；M.S.Wolfe等，Tetrahedron Lett..367611-7614(1995)；美國專利US 3,480,613(Nov.25，1969)；國際專利申請WO01/90121(29 November 2001)；國際專利申請WO 01/92282(6 December2001)；國際專利申請WO 02/32920(25 April 2002)；國際專利申請WO04/002999(8 January 2004)；國際專利申請WO 04/003000(8 January2004)；國際專利申請WO 04/002422(8 January 2004)所述；其全文在此引為參考。該2’-C-分支核糖核苷包括但不限于2’-C-甲基胞苷、2’-C-甲基尿苷、2’-C-甲基腺苷、2’-C-甲基鳥苷和9-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤以及核糖C-2’、C-3’、C-5’羥基的相應(yīng)氨基酸酯和5’-磷酸酯衍生物相應(yīng)的任選取代的環(huán)狀1，3-丙二醇酯。
本發(fā)明的化合物還可與其他具有抗HCV特性的核苷組合治療HCV感染，例如，如WO 02/51425(4 July 2002)，轉(zhuǎn)讓給MitsubishiPharma Corp.；WO 01/79246、WO 02/32920和WO 02/48165(20 June2002)，轉(zhuǎn)讓給Pharmasset，Ltd.；WO 01/68663(20 September 2001)，轉(zhuǎn)讓給ICN Pharmaceuticals；WO 99/43691(2 Sept.1999)；WO02/18404(7 March 2002)，轉(zhuǎn)讓給Hoffmann-LaRoche；U.S.2002/0019363(14 Feb.2002)；WO 02/100415(19 Dec.2002)；WO03/026589(3 Apr.2003)；WO 03/026675(3 Apr.2003)；WO 03/093290(13Nov.2003)；US 2003/0236216(25 Dec.2003)；US 2004/0006007(8 Jan.2004)；WO 04/011478(5 Feb.2004)；WO 04/013300(12 Feb.2004)；US2004/0063658(1 Apr.2004)和WO 04/028481(8 Apr.2004)所述的那些。
本發(fā)明的化合物還可與HCV聚合酶的非核苷抑制劑組合治療HCV感染，例如，如WO 01/77091(18 Oct.2001)，轉(zhuǎn)讓給Tularik，Inc.；WO 01/47883(5 July 2001)，轉(zhuǎn)讓給Japan Tobacco，Inc.；WO02/04425(17 January 2002)，轉(zhuǎn)讓給Boehringer Ingelheim；WO02/06246(24 Jan.2002)，轉(zhuǎn)讓給Istituto di Ricerche di BiologiaMoleculare P.Angeletti S.P.A.；和WO 02/20497(3 March 2002)所述的那些。
“藥學上可接受的”是指載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑的其他成分相容，且對接受者無害。
含本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯與藥學上可接受的載體的藥物組合物也包括在本發(fā)明內(nèi)。本發(fā)明的另一個實例是通過將任何上述化合物與藥學上可接受的載體結(jié)合制得的藥物組合物。本發(fā)明的另一個實例是制備藥物組合物的方法，包括將任何上述化合物與藥學上可接受的載體結(jié)合。
本發(fā)明還包括含有效量的本發(fā)明化合物和藥學上可接受的載體、用于抑制RNA依賴性RNA病毒聚合酶，特別是HCV NS5B聚合酶的藥物組合物。本發(fā)明還包括用于治療RNA依賴性RNA病毒感染，特別是HCV感染的藥物組合物，以及抑制RNA依賴性RNA病毒聚合酶，特別是HCV NS5B聚合酶的方法，和治療RNA依賴性的病毒復制，特別是HCV復制的方法。此外，本發(fā)明涉及含治療有效量的本發(fā)明化合物與另一治療有效量的抗RNA依賴性RNA病毒(特別是抗HCV)活性劑的藥物組合物?？笻CV的活性劑包括但不局限于，病毒唑、左旋韋林、viramidine、胸腺素α-1、HCV NS3絲氨酸蛋白酶抑制劑、干擾素-α、PEG化干擾素-α(PEG干擾素-α)、干擾素-α和病毒唑的組合、PEG干擾素-α和病毒唑的組合、干擾素-α和左旋韋林的組合、PEG干擾素-α和左旋韋林的組合。干擾素-α包括但不局限于重組干擾素-α2a(例如從Hoffmann-LaRoche，Nutley，NJ購得的Roferon干擾素)、干擾素-α2b(例如從Schering Corp.，Kenilworth，NJ購得的Intron-A干擾素)、共有序列干擾素和純化干擾素-α產(chǎn)品。對于病毒唑及其抗HCV活性的論述參閱J.O. Saunders和S.A. Raybuck，″InosineMonophosphate DehydrogenaseConsideration of Structure，Kinetics，and Therapeutic Potential，″Ann.Rep.Med.Chem.，35201-210(2000)。
本發(fā)明另一方面提供核苷氨基磷酸芳基酯及其藥物組合物用于制備抑制RNA依賴性RNA病毒復制(特別是HCV復制)，和/或治療RNA依賴性RNA病毒感染(特別是HCV感染)的藥物的用途.本發(fā)明另一方面提供核苷氨基磷酸芳基酯及其藥物組合物用作抑制RNA依賴性RNA病毒復制(特別是HCV復制)，和/或治療RNA依賴性RNA病毒感染(特別是HCV感染)的藥物。
本發(fā)明的藥物組合物包含作為活性成分的結(jié)構(gòu)式I的化合物或其藥學上可接受的鹽，并可還包含藥學上可接受的載體和任選地其他治療成分。
所述組合物包括如下組合物，其適合于口服、直腸、局部、腸胃外(包括皮下、肌肉內(nèi)和靜脈內(nèi))、眼(眼用藥)、肺部(鼻或口腔吸入)或鼻給藥，在任何給出的情形中最合適的途徑取決于所需治療的狀況的性質(zhì)和嚴重程度，以及活性成分的特征。它們可以方便地以單元劑量形式存在，并且可以通過藥學領(lǐng)域熟知的任何方法制備。
在實際使用中，結(jié)構(gòu)式I的化合物可作為活性成分根據(jù)常規(guī)的藥物混配技術(shù)與藥物載體緊密混合。該載體可以是各種形式，取決于希望給藥的制劑形式，例如口服或腸胃外(包括靜脈內(nèi))。在制備組合物的口服劑量形式時，可以使用任何常見的藥物介質(zhì)，例如在口服液體制劑例如懸浮液、酏劑和溶液情況下，水、二醇、油、醇、調(diào)味劑、防腐劑、著色劑等；或在口服固體制劑例如粉末、硬和軟膠囊和片劑情況下，載體比如淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、成粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等，其中相對于液體制劑更優(yōu)選固體口服制劑。
由于易于給藥，片劑和膠囊代表最有利的口服劑量單元形式，在此時顯然是使用固體藥物載體。如果需要，可以通過標準的含水或非水工藝對片劑進行包衣。這種組合物和制劑應(yīng)包含至少0.1％的活性化合物。這些組合物中活性化合物的百分比當然可以改變，可適宜地在約2％～約60％單元重量。在這種治療上可用組合物中的活性化合物的量使得得到有效的劑量。該活性化合物還可以鼻內(nèi)給藥，例如以液體滴劑或噴霧劑的形式存在。
片劑、丸、膠囊等還可以包含粘合劑，例如黃著膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠；賦形劑比如磷酸二鈣；崩解劑比如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、藻酸；潤滑劑比如硬脂酸鎂；和甜味劑比如蔗糖、乳糖或糖精。當劑量單元形式為膠囊時，它除上述類型的材料外還可以包含液體載體，例如脂油。
多種其他材料可以作為包衣存在或用來改進劑量單元的物理形式。例如片劑可以涂有蟲膠、糖或兩者皆有。糖漿或酏劑，除活性成分外，還可以包含蔗糖作為甜味劑，對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯作為防腐劑，染料，和調(diào)味劑例如櫻桃或橙味香料。
結(jié)構(gòu)式I的化合物還可以腸胃外給藥?？梢栽谂c表面活性劑(例如羥基-丙基纖維素)適當混合的水中制備這些活性化合物的溶液或懸浮液?？梢栽诟视?、液體聚乙二醇及其在油中的混合物中制備分散體。在普通儲存條件和使用下，這些制劑含有防腐劑以防止微生物生長。
適合注射用的藥物形式包括無菌水溶液或分散體，以及用于臨時制備無菌注射溶液或分散體的無菌粉末。在所有的情況中，藥物形式都必須是無菌的，且必須呈流動態(tài)達到容易注射的程度。它在制備和儲存條件下中必須穩(wěn)定，且必須在防止抗微生物(例如細菌和真菌)污染作用的條件下保存。載體可以是溶劑或分散介質(zhì)，其中包含例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、其適當?shù)幕旌衔锖椭参镉汀?br> 可以采用任何適當?shù)慕o藥途徑對哺乳動物(尤其是人類)使用有效劑量的本發(fā)明化合物。例如可以采用口服、直腸、局部、腸胃外、眼、肺部、鼻等途徑。劑量形式包括片劑、錠劑、分散體、懸浮液、溶液、膠囊、乳劑、軟膏劑、氣霧劑等。優(yōu)選結(jié)構(gòu)式I的化合物以口服給藥。
對于向人類口服給藥，在分劑量(divided doses)中，劑量范圍為0.01～1000mg/kg體重。在一個實施方式中，在分劑量中，劑量范圍是0.1～100mg/kg體重。在另一個實施方式中，在分劑量中，劑量范圍是0.5～20mg/kg體重。對于口服給藥，組合物優(yōu)選形式為片劑或膠囊，包含1.0～1000毫克的活性成分，特別是1、5、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400、500、600、750、800、900和1000毫克的活性成分，以根據(jù)需治療的患者的癥狀調(diào)整劑量。
使用的活性成分的有效劑量可以變化，其取決于使用的具體化合物、給藥模式、被治療的狀況和被治療的狀況的程度。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以很容易確定這樣的劑量?？梢哉{(diào)整該劑量方案以提供最佳的治療反應(yīng)。
本發(fā)明的化合物包含一個或多個不對稱中心，因此可以以外消旋物和外消旋混合物、單個對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體混合物和單個非對映異構(gòu)體存在。當R11是氫且與結(jié)構(gòu)式I中磷原子連接的氨基?；鶜埢械腞7在下式中不是氫時， 所述氨基酸殘基包含不對稱中心，并且意圖包括單獨的R-和S-立體異構(gòu)體以及RS-立體異構(gòu)體混合物。在一個實施方式中，在產(chǎn)生立體化學的(stereogenic)碳原子上的立體化學對應(yīng)于S-氨基酸的立體化學，即天然存在的α-氨基酸的立體化學。
結(jié)構(gòu)式I的化合物中四取代的磷構(gòu)成另一不對稱中心，并且本發(fā)明的化合物意圖包括該磷原子上的所有兩種立體化學構(gòu)型。
本發(fā)明意在包括，具有下述結(jié)構(gòu)式所示的五-員呋喃糖環(huán)β-D立體化學構(gòu)型的核苷氨基磷酸芳基酯，即這樣的核苷氨基磷酸芳基酯，其中五-員呋喃糖環(huán)的C-1和C-4取代基具有β-立體化學構(gòu)型(粗線表示“向上”的立體取向)。

本文描述的某些化合物含有烯屬雙鍵，除非另外特別說明，意在包括E和Z兩種幾何異構(gòu)體。
本文描述的某些化合物可以以互變異構(gòu)體存在，例如酮-烯醇互變異構(gòu)體。單個互變異構(gòu)體及其混合物包括在結(jié)構(gòu)式I的化合物中。意圖包括在本發(fā)明化合物中的酮-烯醇互變異構(gòu)體的實例舉例說明如下 結(jié)構(gòu)式I的化合物可以分離成單個的非對映異構(gòu)體，通過例如從適的溶劑中(例如甲醇、乙酸乙酯或其混合物)分級結(jié)晶進行，或通過使用旋光固定相經(jīng)手性色譜法進行。
另外，結(jié)構(gòu)式I的化合物的任何立體異構(gòu)體也可以使用已知構(gòu)型的光學純起始原料或試劑通過立體專一性合成得到。
本發(fā)明的化合物可以以藥學上可接受的鹽的形式給藥。術(shù)語“藥學上可接受的鹽”是指從藥學上可接受的無毒堿或酸(包括無機或有機堿和無機或有機酸)制備的鹽。包含在術(shù)語“藥學上可接受的鹽”中的堿性化合物的鹽指通常由游離堿與適當?shù)挠袡C或無機酸反應(yīng)制備的本發(fā)明化合物的無毒鹽。本發(fā)明的堿性化合物的代表性鹽，包括但不限于乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、克拉維酸鹽、檸檬酸鹽、二鹽酸化物、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽(edisylate)、丙酸酯月桂硫酸鹽(estolate)、乙磺酸鹽(esylate)、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、甘苯砷鹽(glycollylarsanilate)、hexylresorcinate、哈胺、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥基萘甲酸鹽、碘化物、isothionate、乳酸鹽、乳糖醛酸鹽(lactobionate)、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基溴化物、甲基硝酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽(napsylate)、硝酸鹽、N-甲基葡萄糖胺銨鹽、油酸鹽、乙二酸鹽、雙羥萘酸鹽、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽、多聚半乳糖醛酸鹽(polygalacturonate)、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、硫酸鹽、堿式醋酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶堿鹽、甲苯磺酸鹽、三乙基碘化物和戊酸鹽。此外，當本發(fā)明的化合物帶有酸性結(jié)構(gòu)部分時，其適當?shù)乃帉W上可接受的鹽，包括但不限于，來自無機堿(包括鋁、銨、鈣、銅、鐵、亞鐵、鋰、鎂、錳、亞錳、鉀、鈉、鋅等)的鹽。特別優(yōu)選銨、鈣、鎂、鉀、鈉鹽。來自藥學上可接受的有機無毒堿的鹽包括伯胺、仲胺、叔胺、環(huán)胺和堿離子交換樹脂比如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、N，N-二芐基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡萄糖胺(glucamine)、葡糖胺(glucosamine)、組氨酸、哈胺、異丙胺、賴氨酸、甲基葡萄糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、多胺樹脂、普魯卡因、嘌呤類、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、緩血酸胺等的鹽。
此外，如果本發(fā)明的化合物中存在羧酸(-COOH)或羥基基團時，可以采用藥學上可接受的羧酸衍生物的前藥酯類(例如甲酯、乙酯或特戊酰氧甲酯)或核糖C-2’、C-3’和C-5’羥基的前藥?；苌?例如O-乙?；?、O-特戊酰基、O-苯甲?；?、O-氨基酰基)。包括本領(lǐng)域已知的用于改進生物利用率、組織分布、溶解度和水解特征的那些酯和?；?，用于緩釋或前藥制劑。所考慮的該衍生物可以在體內(nèi)很容易轉(zhuǎn)化成所需的化合物.因此，在本發(fā)明的治療方法中，術(shù)語“給藥”和“用藥”是指包括使用具體公開的化合物，或雖然沒有具體公開但在哺乳動物(包括人類患者)給藥后可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成該指定化合物的化合物，對所描述的病毒感染進行治療。適當?shù)那八幯苌锏倪x擇與制備的常規(guī)程序描述在例如“Design of Prodrugs”，H.Bundgaard編輯，Elsevier，1985，其全文在此引為參考。
本發(fā)明氨基磷酸芳基酯的制備在國際專利申請公開WO 02/057287(25 July 2002)和WO02/057425(25 July 2002)中描述了用于磷酸化反應(yīng)的核苷中間體的制備。用于磷酸化反應(yīng)的氯化磷酸芳基酯(aryl phosphorochloridates)根據(jù)美國專利6,455,513描述的方法制備，其全文在此引為參考。生成本發(fā)明的氨基磷酸芳基酯的磷酸化反應(yīng)根據(jù)美國專利US 6,455,513和C.McGuigan等，J.Med.Chem.，361048(1993)描述的方法進行。
下列實施例用于舉例說明制備本發(fā)明化合物的條件。這些實施例并非意圖以任何方式限制本發(fā)明的范圍，不應(yīng)對其作這種解釋.核苷和核苷酸合成領(lǐng)域的技術(shù)人員很容易理解，可以使用已知的對下列制備工序條件和過程的變型來制備本發(fā)明的這些化合物和其他化合物。除非另作說明，所有的溫度規(guī)定是攝氏度。
實施例1和22’-C-甲基腺苷5’-[甲氧基-(S)-丙氨?；姿岜交 在室溫下將2’-C-甲基腺苷(500mg)，甲氧基-(S)-丙氨?；然姿岜交1.3g，根據(jù)J.Med.Chem.，361048(1993)制備]，N-甲基咪唑(0.8mL)和1，4-二氧六環(huán)(10mL)的溶液攪拌18小時。濃縮該反應(yīng)化合物，放入飽和的碳酸氫鈉水溶液中，并用氯仿萃取三次。該氯仿萃取物在無水硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮得到棕褐色固體。所需的產(chǎn)物在硅膠上使用色譜法使用10％甲醇/二氯甲烷作為洗脫液純化，然后凍干得到無色固體——為磷原子上非對映異構(gòu)體的混合物。使用反相液相色譜(Kromasil C8，4.6×250mm，梯度20％～50％乙腈溶于0.1％三氟乙酸水溶液，歷時15分鐘，1.5mL/分鐘)分離所述非對映異構(gòu)體，得到呈無色固體的每個非對映異構(gòu)體。各異構(gòu)體的質(zhì)譜m/z＝523。
實施例3和42’-C-甲基鳥苷5’-[甲氧基-(S)-丙氨酰基磷酸苯基酯] 在室溫下將2’-C-甲基鳥苷(40mg)，1，4-二氧六環(huán)(2mL)，N-甲基咪唑(70μL)和所述氯化磷酸酯(73mg)的溶液攪拌一整夜。濃縮混合物除去二氧六環(huán)，混合物在飽和的碳酸氫鈉水溶液和氯仿之間分配。所需的產(chǎn)物留在含水的級分中。非對映異構(gòu)體混合物的水溶液經(jīng)過反相液體色譜(Kromasil C8，4.6×250mm，梯度20％～50％乙腈溶于0.1％三氟乙酸水溶液，歷時15分鐘，1.5mL/分鐘)得到呈無色固體的各非對映異構(gòu)體。各異構(gòu)體的質(zhì)譜m/z＝539。
實施例5和64-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶5’-[甲氧基-(S)-丙氨酰基磷酸苯基酯]
以4-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶為起始原料，按照實施例1和2相同方法制備實施例5和6，得到非對映異構(gòu)體混合物，非對映異構(gòu)體混合物使用實施例1和2的條件通過反相液相色譜拆分。各異構(gòu)體的質(zhì)譜m/z＝522。
1HNMR(CD3OD，500MHz)異構(gòu)體Aδ 0.80(s，3H)，1.30(d，3H)，3.66(s，3H)和6.30(s，1H)；異構(gòu)體Bδ 0.84(s，3H)，1.34(d，3H)，3.62(s，3H)和6.28(s，1H)。
實施例7和82-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮5’-[甲氧基-(S)-丙氨酰基磷酸苯基酯]
以2-氨基-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮為起始原料，按照制備實施例3和4的步驟制備實施例7和8，得到非對映異構(gòu)體混合物。使用實施例3和4的條件通過反相液相色譜分離非對映異構(gòu)體。各異構(gòu)體的質(zhì)譜m/z＝538。
1HNMR(CD3OD，500MHz)異構(gòu)體Aδ 0.85(s，3H)，1.31(d，3H)，3.67(s，3H)和6.10(s，1H)；異構(gòu)體Bδ 0.87(s，3H)，1.35(d，3H)，3.63(s，3H)和6.05(s，1H)。
實施例9和102，4-二氨基-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶5’-[甲氧基-(S)-丙氨?；姿岜交
以2，4-二氨基-7-(2-C-甲基-β-D-呋喃核糖基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶為起始原料，按照實施例1和2相同方法制備實施例9和10，得到非對映異構(gòu)體混合物，非對映異構(gòu)體混合物使用實施例1和2的條件通過反相液相色譜拆分。各異構(gòu)體的質(zhì)譜(M+1)m/z＝537.
1HNMR(CD3OD，500MHz)異構(gòu)體Aδ 0.89(s，3H)，1.32(d，3H)，3.64(s，3H)和6.12(s，1H)；異構(gòu)體Bδ 0.91(s，3H)，135(d，3H)，3.62(s，3H)和6.10(s，1H)。
生物試驗用于測量HCV NS5B聚合酶和HCV復制的抑制的試驗描述如下。
下列試驗用于測量本發(fā)明的化合物作為HCV NS5B RNA依賴性RNA聚合酶(RdRp)的抑制劑的有效性。
A.HCV NS5B聚合酶的抑制試驗該試驗用于測量本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯在雜聚RNA模板上抑制丙型肝炎病毒(HCV)RNA依賴性RNA聚合酶(NS5B)酶活性的能力。
程序試驗緩沖液條件(50μL-總量/反應(yīng))20mM Tris，pH 7.550μM EDTA5mM DTT2mM MgCl280mM KCl0.4U/μL RNAsin(Promega，原液為40單元/μL)0.75μg t500(500-nt RNA，其用來自丙型肝炎基因組的NS2/3區(qū)序列使用T7失控轉(zhuǎn)錄制得)1.6μg純化丙型肝炎NS5B(21個氨基酸C端截短形成)1μM A、C、U、GTP(核苷三磷酸酯混合物)[α-32P]-GTP或[α-33P]-GTP化合物在多種濃度下測試，最多達100μM終濃度。
制備適量的包括酶和模板t500的反應(yīng)緩沖劑。將本發(fā)明的核苷衍生物移液入96孔板的孔中。制備核苷三磷酸酯(NTP’s)混合物，包括放射性標記的GTP在內(nèi)，并移液入96孔板的孔中。添加酶-模板反應(yīng)溶液后開始反應(yīng)，并在室溫下進行1～2小時。
加入20μL 0.5 M EDTA，pH 8.0猝滅反應(yīng)。包括空白反應(yīng)(其中，在加入反應(yīng)緩沖劑之前向NTP’s中加入猝滅溶液)。
50μL猝滅的反應(yīng)物點到DE81濾盤(Whatman)上，并干燥30分鐘。使用0.3 M甲酸銨，pH 8(150 mL/每次洗滌，直到1mL洗滌液的cpm小于100，通常為6次洗滌)洗滌過濾器。在5mL閃爍流體中使用閃爍計數(shù)器對過濾器進行計數(shù)。
根據(jù)下列等式計算抑制百分比抑制％＝[1-(測試反應(yīng)中cpm-空白中cpm)/(對照反應(yīng)中cpm-空白中cpm)]×100。
在HCV NS5B聚合酶試驗中測試的代表性化合物顯示IC50小于100微摩爾。
B.HCV RNA復制的抑制試驗還在含亞基因組HCV復制子的培養(yǎng)肝瘤(HuH-7)細胞中評價本發(fā)明的化合物影響丙型肝炎病毒RNA復制的能力。試驗詳情描述如下。該復制子試驗是在對V.Lohmann，F(xiàn).Korner，J-O.Koch，U.Herian，L.Theilmann和R.Bartenschlager，“Replication of a Sub-genomicHepatitis C Virus RNAs in a Hepatoma Cell Line”，Science285110(1999)的試驗進行了修進的條件下進行的。
方案該試驗是原位核糖核酸酶保護，基于閃爍親近的板試驗(SPA)。將10000～40000個細胞置于96孔cytostar板(Amersham)中100～200μL含0.8mg/mL G418的培養(yǎng)基中。在0～18小時內(nèi)向細胞加入各種濃度(最多達100μM溶于1％DMSO)的化合物，然后培養(yǎng)24～96小時。使細胞固定(20分鐘，10％福爾馬林)，可滲透(20分鐘，0.25％ TritonX-100/PBS)并使用與RNA病毒基因組中所含的(+)鏈NS5B(或其他基因)互補的單鏈33p RNA探針雜交(整夜，50℃)。洗滌細胞，用RNAse處理，洗滌，加熱至65℃，并在Top-Count中計數(shù)。復制的抑制讀取為每分鐘計數(shù)(cpm)的減少。
被選擇含有亞基因組復制子的人類HuH-7肝瘤細胞攜帶一胞質(zhì)RNA，其由HCV 5’非翻譯區(qū)(NTR)、新霉素可選標記、EMCV IRES(內(nèi)部核糖體進入部位)和HCV非結(jié)構(gòu)蛋白NS3至NS5B、隨后是3’NTR組成。
在復制試驗中測試的代表性化合物顯示EC50小于100微摩爾。
C.細胞內(nèi)代謝試驗還評價本發(fā)明的化合物進入人類肝瘤細胞系并在細胞內(nèi)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的核苷5’-單-、二-和三磷酸酯的能力。
HuH-7和HBI10A兩個細胞系用于本發(fā)明化合物的細胞內(nèi)代謝研究。HuH-7是人類肝瘤細胞系，HBI10A表示衍生自攜帶HCV雙順反子復制子的HuH-7細胞的克隆系。HuH-7細胞置于含10％胎牛血清的完全Dulbecco氏改良Eagle氏培養(yǎng)基中，HBI10A細胞置于含G418(0.8mg/mL)的同樣培養(yǎng)基中，1.5×106細胞/60-mm皿，以至于在加入化合物時有80％的細胞匯合。氚化物以2μM在細胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)3或23小時。收集細胞，用磷酸鹽緩沖的鹽水洗滌并計數(shù)。然后在70％甲醇、20mM EDTA、20mM EGTA中提取細胞，并離心。干燥該胞溶產(chǎn)物，在連接至在線β-RAM閃爍探測器(IN/US Systems)的Waters Millenium系統(tǒng)上使用離子對反相(C-18)HPLC分析放射性標記的核苷酸。HPLC流動相由(a)含2mM四丁銨氫氧化物的10mM磷酸鉀和(b)含10mM磷酸鉀和2mM四丁銨氫氧化物的50％甲醇組成。通過和標準比較保留時間進行峰鑒別?；钚员硎緸樵?06HuH-7或HBI10A細胞中檢測的核苷酸的皮摩爾數(shù)。
還在下述的反篩選中評價本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯的細胞毒性和抗病毒特異性。
C.反篩選在下列試驗中測量本發(fā)明核苷氨基磷酸芳基酯抑制人類DNA聚合酶的能力。
a.人類DNA聚合酶α和β的抑制反應(yīng)條件50μL反應(yīng)體積反應(yīng)緩沖劑組分20mM Tris-HCl，pH 7.5200μg/mL牛血清白蛋白100mM KCl2mM β-巰基乙醇10mM MgCl21.6μM dA，dG，dC，dTTPα-33P-dATP酶和模板0.05mg/mL缺口的(gapped)魚精(fish sperm)DNA模板0.01 U/μL DNA聚合酶α或β缺口魚精DNA模板的制備將5μL 1M MgCl2加入500μL活化的魚精DNA(USB 70076)；升溫至37℃，并加入30μL 65U/μL的核酸外切酶III(GibcoBRL18013-011)；
在37℃下培養(yǎng)5分鐘；通過加熱至65℃10分鐘終止反應(yīng)；取50～100μL等份裝載到用20mM Tris-HCl，pH 7.5平衡的Bio-spin 6色譜柱(Bio-Rad 732-6002)上；通過在1000Xg下離心洗脫4分鐘；收集洗脫物，并在260nm下測定吸光度用來測定濃度。
DNA模板稀釋入適量的20mM Tris-HCl，pH 7.5，酶稀釋入適量的20mM Tris-HCl(含2mM β-巰基乙醇)和100mM KCl。模板和酶移液入微量離心管或96孔板中。還分別使用酶稀釋緩沖劑和測試化合物溶劑準備排除酶的空白反應(yīng)和排除測試化合物的對照反應(yīng)。使用含上面所列組分的反應(yīng)緩沖劑啟動反應(yīng)。該反應(yīng)在37℃下溫育1小時。加入20μL 0.5 M EDTA猝滅反應(yīng)。50μL猝滅的反應(yīng)物點到WhatmanDE81濾盤上并風干。用150mL 0.3 M甲酸銨，pH 8，反復洗滌濾盤，直到1mL洗滌液＜100cpm。用150mL絕對乙醇洗滌盤兩次，用150mL無水乙醚洗滌一次，干燥，在5mL閃爍流體中計數(shù)。
根據(jù)下列等式計算抑制百分比抑制％＝[1-(測試反應(yīng)中cpm-空白中cpm)/(對照反應(yīng)中cpm-空白中cpm)]×100。
b.人類DNA聚合酶γ的抑制測量對人類DNA聚合酶γ的抑制的效力，反應(yīng)物包括0.5ng/μL酶；10μM dATP，dGTP，dCTP和TTP；2μCi/反應(yīng)[α-33P]-dATP，和0.4μg/μL活化的魚精DNA(從US Biochemical購得)于含20mM TrispH 8、2mM β-巰基乙醇、50mM KCl、10 mM MgCl2和0.1μg/μL BSA的緩沖劑中。該反應(yīng)在37℃下進行1小時，通過加入0.5M EDTA至終濃度為142mM猝滅反應(yīng)。通過陰離子交換濾器結(jié)合和閃爍計數(shù)量化產(chǎn)物的形成.在最高達50μM測試化合物。
根據(jù)下列等式計算抑制百分比抑制％＝[1-(測試反應(yīng)中cpm-空白中cpm)/(對照反應(yīng)中cpm-空白中cpm)]×100。
在下列試驗中測量本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯抑制HIV感染性和HIV傳播的能力。
c.HIV感染性試驗使用表達CXCR4和CCR5二者(選擇用于低背景β-半乳糖苷酶(β-gal)表達)的HeLa Magi細胞變體進行反應(yīng)。細胞感染48小時，使用化學發(fā)光底物(Galactolight Plus，Tropix，Bedford，MA)量化由整合的HIV-1 LTR啟動子產(chǎn)生的β-gal。在始于100μM連續(xù)兩倍稀釋液中進行抑制劑滴定(平行兩份)；相對于對照感染計算在每個濃度時的抑制百分比。
d.HIV 傳播的抑制本發(fā)明的化合物抑制人類免疫缺陷病毒(HIV)傳播的能力是通過美國專利US.5,413,999(May 9，1995)，和J.P.Vacca等，Proc.Natl.Acad.Sci.914096-4100(1994)中所描述的方法進行測量的，其全部內(nèi)容在此引為參考。
還在如下試驗中所述，在基于MTS-細胞的試驗中，針對含亞基因組HCV復制子的培養(yǎng)肝瘤(HuH-7)細胞的細胞毒性對本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯進行了篩選。Huh-7細胞系如H.Nakabayashi等，CancerRes.，423858(1982)所述。
e.細胞毒性試驗細胞培養(yǎng)物在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中制得，對懸浮培養(yǎng)物，濃度約1.5×105細胞/mL，溫育3天，對附著培養(yǎng)物，濃度在5.0×104細胞/mL，溫育3天。99μL細胞培養(yǎng)物轉(zhuǎn)入96孔組織培養(yǎng)物處理過的板中，加入1μL 100倍終濃度的溶于DMSO的測試化合物。該板在37℃下5％CO2中溫育一指定時間段。溫育期過后，向每個孔中加入20μL CellTiter 96Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay試劑(MTS)(Promega)，該板在37℃下5％CO2中再溫育一段時間，最多3小時。振蕩該板以充分混合，使用板讀取器在490nm下讀取吸光度。在加入MTS試劑前準備已知細胞數(shù)的懸浮培養(yǎng)細胞的標準曲線。代謝活性細胞還原MTS為甲。甲在490nm吸收。比較在490nm下有化合物存在的吸光度和沒有加入任何化合物的細胞中的吸光度。
參閱Cory，A.H.等，“Use of an aqueous solubletetrazolium/formazan assay for cell growth assays in culture，”CancerCommun.3207(1991)。
采用下列試驗測量本發(fā)明的化合物抗其他RNA依賴性RNA病毒的活性。
a.化合物體外抗鼻病毒的抗病毒活性測定(細胞病變效果抑制試驗)試驗條件如Sidwell和Huffman，“ Use of disposable microtissueculture plates for antiviral and interferon induction studies，”Appl.Microbiol.22797-801(1971)所述。
病毒如Sidwell和Huffman參考文獻中所述，鼻病毒2型(RV-2)，HGP株，與KB細胞和培養(yǎng)基(0.1％NaHCO3，不含抗生素)一起使用。從ATCC獲得的病毒，來自于患輕度急性發(fā)熱性上呼吸道疾病的成年男性的咽喉拭子。
鼻病毒9型(RV-9)，211株，和鼻病毒14型(RV-14)，ToW株，也從Rockville，MD的美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)獲得。RV-9來自人類咽喉洗滌物，并且RV-14來自患上呼吸道疾病的年輕成人的咽喉拭子。這兩種病毒與HeLa Ohio-1細胞(Dr.Fred Hayden，Univ.ofVA)(為人類頸上皮樣癌細胞)-起使用。含5％胎牛血清(FBS)和0.1％NaHCO3的MEM(Eagle氏極限必需培養(yǎng)基)作為生長培養(yǎng)基。
所述三種病毒的抗病毒測試培養(yǎng)基是含5％FBS、0.1％NaHCO3、50μg慶大霉素/mL和10mM MgCl2的MEM。
用于試驗本發(fā)明化合物的最大濃度為2000μg/mL。加入測試化合物后，大約5分鐘后，向試驗板中加入病毒。適當?shù)膶φ找策M行。試驗板在37℃下，濕潤空氣和5％CO2中溫育。通過在顯微鏡下觀察形態(tài)變化，監(jiān)測對照細胞的細胞毒性。病毒CPE數(shù)據(jù)和毒性對照數(shù)據(jù)的回歸分析得出ED50(50％有效劑量)和CC50(50％細胞毒濃度)。通過如下公式計算選擇指數(shù)(SI)SI＝CC50÷ED50。
b.化合物體外抗登革熱、Banzi和黃熱病的抗病毒活性的測定(CPE抑制試驗)上述Sidwell和Huffman參考文獻提供了試驗的詳情。
病毒從疾病控制中心獲得登革熱病毒2型，新幾內(nèi)亞株。兩個非洲綠猴腎細胞系用于培養(yǎng)該病毒(Vero)，并進行抗病毒測試(MA-104)。由感染的小鼠腦制備的黃熱病病毒，17D株，和從南非發(fā)熱男孩的血清分離的Banzi病毒，H336株，均得自ATCC。Vero細胞被用于這兩種病毒和試驗。
細胞和培養(yǎng)基MA-104細胞(BioWhittaker，Inc.，Walkersville，MD)和Vero細胞(ATCC)用于培養(yǎng)基199(含5％FBS和0.1％NaHCO3，不含抗生素)。
用于登革熱、黃熱病和Banzi病毒的試驗培養(yǎng)基是MEM，含2％FBS、0.18％NaHCO3、50μg慶大霉素/mL。
根據(jù)Sidwell和Huffman參考文獻和類似上述鼻病毒抗病毒測試的方式進行本發(fā)明的化合物的抗病毒測試。對于每種所述病毒，在5～6天后達到足夠的細胞病變效應(yīng)(CPE)讀數(shù)。
c.化合物在體外抗西尼羅河病毒的抗病毒活性的測定(CPE抑制試驗)上述Sidwell和Huffman參考文獻提供了試驗的詳情。西尼羅河病毒，來源于烏鴉腦的紐約分離物，從疾病控制中心獲得。Vero細胞如上生長和使用。試驗培養(yǎng)基是MEM，含1％FBS、0.1％NaHCO3、50μg慶大霉素/mL。
根據(jù)類似于用于鼻病毒活性試驗的方式的Sidwell和Huffman方法進行本發(fā)明化合物的抗病毒測試。在5～6天后達到足夠的細胞病變效應(yīng)(CPE)讀數(shù)。
d.化合物在體外抗鼻病毒、黃熱病病毒、登革熱病毒、Banzi病毒和西尼羅河病毒的抗病毒活性測定(中性紅攝取試驗)進行上述CPE抑制試驗后，使用另外的細胞病變檢測方法，其描述在“Microtiter Assay for InterferonMicrospectrophotometricQuantitation of Cytopathic Effect，”Appl.Environ.Microbiol.3135-38(1976)。使用Model EL309微量板讀取器(Bio-Tek Instruments Inc.)讀取試驗板。如上計算ED50和CD50。
藥物制劑的實例作為本發(fā)明化合物的口服組合物的一個具體實施方式
，將50mg實施例1或?qū)嵤├?的化合物與充分細碎的乳糖配制，總量為580～590mg，并填充O號硬明膠膠囊中。
已經(jīng)參照具體實施方式
描述并舉例說明了本發(fā)明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，其中可進行各種變化、改進和替換而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。例如，由于針對HCV感染程度，被治病人的響應(yīng)度不同，結(jié)果，除上文所述的優(yōu)選劑量外的有效劑量可能是適用的。同樣，觀察到的藥理學反應(yīng)可能根據(jù)和依賴于所選特定活性化合物或是否存在藥物載體以及制劑類型和使用的用藥模式而變化，且遵循本發(fā)明目的和實踐考慮了這樣的預期變化或結(jié)果差異。因此，本發(fā)明僅僅被權(quán)利要求范圍限制，且權(quán)利要求在合理情況下盡可能廣泛地進行解釋。
權(quán)利要求
1.結(jié)構(gòu)式I的化合物 或其藥學上可接受的鹽，其中Y是CR9或N；Ar是未取代的或被1～3個獨立選自下列組的取代基取代的苯基鹵素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、氰基、硝基、氨基、羧基、三氟甲基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基羰基氧基和C1-4烷基氧基羰基；R1選自氫、氟、疊氮基、氨基、羥基、C1-3烷氧基、巰基和C1-3烷硫基；R2和R3獨立地選自氫、甲基、C1-16烷基羰基、C2-18烯基羰基、C1-10烷基氧基羰基、C3-6環(huán)烷基羰基和C3-6環(huán)烷基氧基羰基；R4是氫、鹵素、甲基、疊氮基或氨基；R5和R6各自獨立地選自氫、羥基、鹵素、C1-4烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C3-6環(huán)烷基氨基、二(C3-6環(huán)烷基)氨基、芐基氨基、二芐基氨基或C4-6雜環(huán)烷基，其中烷基、環(huán)烷基、芐基和雜環(huán)烷基是未取代的或被1～5個獨立選自鹵素、羥基、氨基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的基團取代；R7是氫、C1-5烷基、苯基或芐基；其中烷基是未取代的或被一個選自羥基、甲氧基、氨基、羧基、氨基甲?；㈦一?、巰基、甲硫基、1H-咪唑基和1H-吲哚-3-基的取代基取代；其中苯基和芐基是未取代的或被1～2個獨立選自鹵素、羥基和甲氧基的取代基取代；R8是氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、苯基或芐基；其中烷基和環(huán)烷基是未取代的或被1～3個獨立選自鹵素、羥基、羧基、C1-4烷氧基的取代基取代；其中苯基和芐基是未取代的或被1～3個獨立選自鹵素、羥基、氰基、C1-4烷氧基和三氟甲基的取代基取代；R9選自氫、氟、氰基、C1-3烷基、NHCONH2、CONR10R10、CSNR10R10、COOR10、C(＝NH)NH2、羥基、C1-3烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基和二(C1-4烷基)氨基；每個R10獨立表示氫或C1-6烷基；和R11是氫或甲基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y是N，R1是氫或氟，且R2和R3是氫。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R4是氫。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y是CR9，R1是氫或氟，且R2和R3是氫。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中R9是氫或氟。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中R4是氫。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是未取代的苯基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R11是氫，R7選自氫、甲基、乙基、正丙基、異丙基、異丁基、2-甲基-1-丙基、羥基甲基、巰基甲基、羧基甲基、氨基甲?；谆?、1-羥基乙基、2-羧基乙基、2-氨基甲酰基乙基、2-甲硫基乙基、4-氨基-1-丁基、3-氨基-1-丙基、3-胍基-1-丙基、1H-咪唑-4-基甲基、苯基、4-羥基芐基和1H-吲哚-3-基甲基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中R7是甲基或芐基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R8是C1-6烷基、環(huán)己基、苯基或芐基。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中R8是甲基。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是未取代的苯基，R7是甲基或芐基，R8是甲基，R11是氫。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其選自 和 或其藥學上可接受的鹽。
14.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1的化合物和藥學上可接受的載體。
15.權(quán)利要求1的化合物在哺乳動物中治療丙型肝炎病毒感染中的用途。
16.權(quán)利要求1的化合物在制造用于在哺乳動物中治療丙型肝炎病毒感染的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供RNA依賴性RNA病毒聚合酶的抑制劑的前體——核苷氨基磷酸芳基酯。這些化合物是RNA依賴性RNA病毒復制抑制劑的前體，其用于治療RNA依賴性RNA病毒感染。它們特別可用作丙型肝炎病毒(HCV)NS5B聚合酶的抑制劑的前體、HCV復制的抑制劑的前體、和/或治療丙型肝炎感染。本發(fā)明還描述了包含單獨或與其它抗RNA依賴性RNA病毒感染(特別是HCV感染)的活性劑聯(lián)合的所述核苷氨基磷酸芳基酯的藥物組合物。還公開了使用本發(fā)明的核苷氨基磷酸芳基酯抑制RNA依賴性RNA聚合酶、抑制RNA依賴性RNA病毒復制，和/或治療RNA依賴性RNA病毒感染的方法。
文檔編號C07H19/00GK1972696SQ200580021151
公開日2007年5月30日 申請日期2005年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月24日
發(fā)明者M·麥科斯, D·B·奧爾森 申請人:默克公司