專利名稱：一種中藥活性物質(zhì)分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取分離新技術(shù)，具體涉及一種以從中藥及其水提液中分離富集皂苷等表面活性物質(zhì)的新型分離技術(shù)。
背景技術(shù)：
皂苷是一類在水溶液中經(jīng)振搖能產(chǎn)生大量持久泡沫的復(fù)雜分子，由糖鏈與三萜類、甾體或甾體生物堿通過碳鍵相連而成。它們廣泛存在于植物的莖、葉和根中，如人參、三七、絞股藍(lán)、黃芪、甘草、毛冬青、遠(yuǎn)志、無患子等。經(jīng)大量研究結(jié)果表明，這些皂苷具有廣泛的藥理作用和生物活性如免疫作用、抗腫瘤、抗真菌、滅螺、殺血吸蟲、防治心血管疾病等，而且還可以作為食品天然甜味劑、保護(hù)劑、發(fā)泡劑、增味劑、抗氧化劑等[1]。由于皂苷類化合物極性大、水溶性強(qiáng)，分離、精制有一定難度。皂苷的分離、精制方法多采用酸沉法、醇沉法、大孔吸附樹脂法等。這些方法都必須用大量有機(jī)化學(xué)試劑或需要特殊，不僅增加了成本，而且?guī)砹艘欢ǔ潭壬系奈廴?，此外，還存在機(jī)械化程度低，工藝重現(xiàn)性較差等缺點(diǎn)。近年來，隨著分離手段的顯著進(jìn)步，國內(nèi)外除使用經(jīng)典的皂分離方法外，又發(fā)展了一些對皂苷有效的新分離技術(shù)，如超臨界流體萃取技術(shù)、半仿生提取法、超聲提取法、大孔吸附樹脂技術(shù)等提取技術(shù)及高效液相層析法、液滴逆流色譜法等分離、精制方法。超臨界流體萃取技術(shù)設(shè)備的一次性投資太大，提高了成本；超聲提取技術(shù)目前仍局限于中藥質(zhì)量分析和少量提取中，但用于大規(guī)模生產(chǎn)還有待進(jìn)一步對其設(shè)備等作摸索；半仿生提取法應(yīng)用當(dāng)中，要獲得穩(wěn)定可行的工藝，并實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)仍需做大量實(shí)驗(yàn)研究，目前該技術(shù)尚未實(shí)現(xiàn)工業(yè)化應(yīng)用。大孔吸附樹脂技術(shù)存在吸附選擇性差、技術(shù)難度較大、樹脂再生困難等缺點(diǎn)。但是，工藝穩(wěn)定、可行、經(jīng)濟(jì)、分離效果好，設(shè)備簡便、價廉易得、可以實(shí)現(xiàn)工程放大的工藝設(shè)備還沒有。
泡沫分離法是20世紀(jì)興起的、以氣泡作分離介質(zhì)來濃集表面活性物質(zhì)的一種新型分離技術(shù)。近30年來，該技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域得到不斷擴(kuò)大，尤其是對金屬離子、蛋白質(zhì)、酶及中草藥皂苷類等物質(zhì)的泡沫吸附分離備受人們關(guān)注。所謂泡沫分離技術(shù)是指一種基于溶質(zhì)間表面活性的差異，以泡沫形式提供氣液界面，分離濃縮表面活性溶質(zhì)的分離方法。此技術(shù)具有設(shè)備簡單、易于操作、成本低、分離效果好等特點(diǎn)，已在選礦、污水處理、生化工程等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。泡沫分離法是一種特殊的化工單元操作，以物質(zhì)氣-液界面吸附的物化原理為其分離前提，在冶礦、環(huán)保、生化工程等領(lǐng)域中應(yīng)用較多，但其在中藥生產(chǎn)中尚未得到普遍推廣，主要因?yàn)橹兴幊煞謴?fù)雜，除皂苷等表面活性類成分外，大多數(shù)高分子化合物均具有表面活性，而各組分表面活性的差異并不顯著，因此，分離的選擇性問題在很大程度上制約了該技術(shù)在中藥行業(yè)的推廣應(yīng)用。但由于該技術(shù)具有其他常用分離方法無法比擬的優(yōu)勢，應(yīng)用前景非常廣闊。
目前，甘草水提液中表面活性物質(zhì)主要代表為甘草皂苷及蛋白質(zhì)等高分子化合物。其中蛋白質(zhì)類及其它高分子化合物的分離、純化技術(shù)研究報道較少。甘草皂苷(又名甘草酸)提取分離的研究起步較早，多采用溶劑萃取法或離子交換樹法等，收率僅2％(wt)。近年來，又報道了幾種改進(jìn)的方法晶種法、大孔吸附樹脂法、超聲法、超臨界萃取法等。這些方法雖然所得產(chǎn)品純度較高，但均存在需使用大量有機(jī)試劑，成本高，對環(huán)境有污染等不足。泡沫分離法分離富集三七皂苷、人參皂苷和甘草皂苷的初步研究已見報道，但將該法作為甘草水提液的一種分離、純化工藝的系統(tǒng)研究和合理的評價系統(tǒng)還未見報道。
利用泡沫分離原理分離、富集中藥水提液中表面活性物質(zhì)，如皂苷等表面活性物質(zhì)的現(xiàn)代化分離技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的旨在提供一種中藥活性成分的新型分離技術(shù)。
本發(fā)明提供的是從中藥水提液中分離具有表面活性物質(zhì)特性的中藥活性成分的方法，特別是皂苷成分的分離方法，本發(fā)明的方法包括以下步驟，中藥水提，得水提液，泡沫分離得泡沫液，其特征在于，利用泡沫分離技術(shù)，從中藥水提液中分離、得到富集的表面活性物質(zhì)，如皂苷類表面活性物質(zhì)。
本發(fā)明所述的中藥包括但不限于以下重要，甘草、人參、三七、絞股藍(lán)、黃芪、毛冬青、遠(yuǎn)志、無患子等含皂苷類成分多的中藥，特別優(yōu)選的是甘草。
本發(fā)明所述的中藥水提液是將上述中藥用水提取得到的提取液，所述用水提取可以是用任何一種現(xiàn)有的提取方法進(jìn)行提取，如用水浸泡、用水煮提等。該水提液中富集皂苷類表面活性物質(zhì)。
本發(fā)明所述泡沫分離技術(shù)是將本發(fā)明所述中藥水提液放入泡沫分離柱內(nèi)，經(jīng)過調(diào)節(jié)氣液流速及分離柱溫度等工藝條件，通過破泡處理，分離出泡沫液和殘留液，得到的泡沫液即本發(fā)明的富集皂苷類表面活性物質(zhì)的中藥活性成分。所得泡沫液還可進(jìn)一步加工純化，制成純度更高的中藥皂苷成分。
本發(fā)明的泡沫分離步驟，可以選用四種泡沫分離操作方式，或?qū)⑺鼈兘Y(jié)合應(yīng)用，這四種操作方式是間歇式分離、連續(xù)式分離、分級分離和多級串連分離。
以下通過對甘草水提液進(jìn)行泡沫分離來描述這四種操作方式首先對中藥進(jìn)行水提得到水提液，甘草水提液可以通過以下方式得到將適量甘草飲片，加水5-20倍量(首次多加1-4倍)，煎煮1-3次，每次0.5-2小時，用濾布過濾，合并濾液，高速離心以除去顆粒狀雜質(zhì)等；4℃下冷藏，備用。定容至5-90倍體積，即每5-90ml藥液相當(dāng)于原生藥材1g。具體操作時，加水15倍量(首次多加2倍)，煎煮三次，每次2小時，每次用200目濾布過濾，定容至45倍體積，即每45ml藥液相當(dāng)于原生藥材1g。
泡沫分離工藝操作方式A 間歇式分離——指將一定體積的經(jīng)處理過的中藥水提液一次性倒入泡沫分離柱內(nèi)，以一定氣流速度鼓泡，直至無法收集到穩(wěn)定的泡沫為止。
操作方式B 連續(xù)式分離——指一定體積的原料液，在一定的操作條件下，用水泵連續(xù)注入泡沫分離塔內(nèi)，殘留液連續(xù)從出料口排出，泡沫液連續(xù)從頂部泡沫導(dǎo)出口排放，收集。
操作方式C 分級泡沫分離——指將一定體積的甘草水提液先調(diào)pH至堿性下，連續(xù)鼓泡至泡沫無法堆積，停止，再將處理完后的殘留液調(diào)pH至酸性下，又一次鼓泡至泡沫無法堆積，停止。分別收集兩次所得的泡沫液，分析其成分含量。
操作方式D多級串連泡沫分離——指將一定量的原料液通過水泵打入多級泡沫分離裝置，經(jīng)過一段時間泡沫分離后，從各級泡沫分離塔頂部收集泡沫，殘留液循環(huán)利用，直到泡沫無法堆積為止。
四種泡沫分離操作方式，具體技術(shù)要求分別如下操作方式A，特征在于藥液起始濃度為0.1-0.5mg/ml(甘草酸的濃度)，pH值為3-5，氣流速度為300-1200ml/min，所用的時間約為10-40秒。
操作方式B，特征在于所述一定操作條件是指原料液濃度為0.4-1.2mg/ml(甘草酸的濃度)，pH值為3-5，藥液溫度為25-50℃，氣流速度為300-1200ml/min，液流速度為2-8L/h，進(jìn)料口位置為B。
操作方式C，其特征在于所述一級分離的工藝條件為甘草酸濃度為0.4-1.2mg/ml，pH為7-10左右，室溫條件，氣體流速為400-1000ml/min，流體流速為2-8L/h，從進(jìn)料口B進(jìn)料；二級分離工藝條件為將一級分離所得殘留液調(diào)pH至3-5左右，氣體流速為200-600ml/min，溫度為25-50℃，液體流速同一級泡沫分離。
操作方式D，其特征在于所述甘草水提液pH為4左右，總的氣體流速為700-2800ml/min，每一級泡沫分離塔內(nèi)氣體流量為100-400ml/min，流體流速為1-4L/h。分別對泡沫液、殘留液、原料液固性物、甘草皂苷含量進(jìn)行測定，用回收率、富集比、純度作為本工藝的評價指標(biāo)。
四種泡沫分離操作方式，最優(yōu)選的條件可以是操作方式A，將泡沫分離裝置安裝好，下端鼓入空氣，流速為100ml/min，再將備用的甘草水提液取出一定體積，調(diào)pH至4左右，一次性倒入泡沫分離柱中，然后將氣流速度慢慢調(diào)至600ml/min，藥液在分離柱中經(jīng)過一段時間的泡沫分離后，液面產(chǎn)生豐富泡沫，不斷堆積，經(jīng)過分離柱放大段排液后，由塔頂泡沫導(dǎo)出管排出，收集，待處理。
操作方式B，將泡沫分離裝置安裝好，下端鼓入氣休，以氣體轉(zhuǎn)子流量計計流速，為100ml/min，將備用的甘草水提液調(diào)pH值至4，再用水泵從中間口注入泡沫分離柱，液流速度調(diào)至33ml/min，氣流速度調(diào)至600ml/min，藥液溫度控制在35℃左右，泡沫不斷產(chǎn)生，直到無法堆積至出口，收集泡沫，待處理。
操作方式C，分為一級和二級分離。
一級泡沫分離將備用的甘草水提液調(diào)pH至8，以實(shí)際設(shè)計流量泵入泡沫分離塔中，同時將用空氣壓縮機(jī)使氣體通過分離塔底部的氣體分布器按一定的氣液比送入分離塔中，藥液在分離塔中經(jīng)過一定時間的泡沫分離后，浮上分離塔頂部的大量泡沫在產(chǎn)品貯罐1中，剩下的殘留液待下步處理。
二級泡沫分離將一級泡沫分離所剩殘留液調(diào)整pH值至4，改變?nèi)芤罕砻嫘阅芎腿芙舛龋龠M(jìn)行泡沫分離和破泡處理，分離出的殘液經(jīng)分離器底部出料口排放；不斷堆積至出料口的泡沫送入產(chǎn)品貯罐2。
操作方式D，取一定體積的甘草水提液置于原料池中，用水泵將其打入多級泡沫分離裝置，藥液經(jīng)過一段時間泡沫分離后，分別從每一級的泡沫導(dǎo)出口排出，并收集，等分析處理。
泡沫分離步驟中還包括破泡處理即對所得的泡沫產(chǎn)品，用風(fēng)機(jī)吹風(fēng)破泡，得到泡沫液。
本發(fā)明的工作原理為溶液中含有表面活性物質(zhì)是泡沫分離的必要條件之一，而本發(fā)明的這些中草藥中具有比較多的表面活性物質(zhì)，特別是水提液中，其在強(qiáng)烈攪拌或沸騰時產(chǎn)生泡沫，通過泡沫分離得到泡沫成分。
泡沫分離技術(shù)的基本原理是表面活性劑在水溶液中易被吸附到氣泡的氣一液界面上。表面活性劑極性的一端向著水相，非極性的一端向著氣相，含有待分離的離子、分子的水溶液中的表面活性劑的極性端與水相中的離子或其極性分子通過物理(如靜電引力)或化學(xué)(如配位反應(yīng))作用連接在一起。當(dāng)通入氣泡時，表面活性劑就將這些物質(zhì)連在一起定向排列在氣—液界面，被氣泡表面吸附，并在浮力作用下氣泡被帶到液面，形成泡沫層，從而達(dá)到分離的目的。皂苷具有親水性能的糖體和疏水性的皂甙元，所以它一種優(yōu)良的天然非離子型表面活性成分，具有良好的起泡性。因此，從泡沫分離的原理這個角度考慮，運(yùn)用泡沫分離技術(shù)分離、富集中草藥提取液中皂苷等活性成分合理、可行。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于操作工藝簡單，投資少，較大孔吸附樹脂工藝降低一半；占地面積??；分離效果好，泡沫液甘草酸純度較原料液有顯著提高；操作管理方便，泡沫分離及破泡處理均不受環(huán)境、氣候的限制，運(yùn)行穩(wěn)定可靠；運(yùn)行費(fèi)用低，無需使用任何化學(xué)試劑，為綠色工程。


圖1間歇式泡沫分離流程及其裝置示意圖流程其中1、空氣壓縮機(jī) 2、氣體轉(zhuǎn)子流量計 3、鼓泡區(qū) 4、泡沫區(qū) 5、泡沫導(dǎo)出管6、產(chǎn)品貯罐 7、氣體分布器飲片->提取->離心->稀釋->預(yù)處理(調(diào)pH，加溫)->泡沫分離->收集泡沫圖2連續(xù)式泡沫分離的工藝流程及其裝置示意圖；其中1、原料池 2、水泵 3、液體轉(zhuǎn)子流量計 4、鼓泡區(qū) 5、泡沫區(qū) 6、泡沫導(dǎo)出管7、產(chǎn)品貯罐 8、殘留液貯罐 9、空氣壓縮機(jī) 10、殘留液出口 11、氣體分布器
12、氣體轉(zhuǎn)子流量計 13、預(yù)熱裝置 A、B、C為三個不同位置的進(jìn)料口流程飲片->提取->離心->稀釋->預(yù)處理(調(diào)pH，加溫)->泡沫分離->收集泡沫圖3多級串連泡沫分離工藝流程及其裝置示意圖，其中1、原料池 2、水泵 3、液體轉(zhuǎn)子流量計 4、一級泡沫分離柱 5、二級泡沫分離柱 6、三級泡沫分離柱 7、四級泡沫分離柱 8、五級泡沫分離柱 9、六級泡沫分離柱 10、七級泡沫分離柱11～17氣體轉(zhuǎn)子流量計 18、殘留液導(dǎo)出管 19、空氣壓縮機(jī) 20、預(yù)熱裝置流程飲片->提取->離心->稀釋->預(yù)處理(調(diào)pH，加溫)->泡沫分離->收集泡沫本發(fā)明較現(xiàn)有技術(shù)具有設(shè)備簡單、操作方便、成本低、投資少、無污染、適應(yīng)性廣等特點(diǎn)。特別是對甘草而言，由于其特殊性，其他工藝都難以達(dá)到本發(fā)明的收率和純度，因此特別適合使用本發(fā)明的技術(shù)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1 如附圖1。本發(fā)明生產(chǎn)工藝流程由空氣壓縮機(jī)、液體導(dǎo)管、泡沫分離塔、產(chǎn)品貯罐及吹風(fēng)機(jī)組成。其中泡沫分離塔由氣體分布器、鼓泡段、泡沫放大段、泡沫導(dǎo)出管組成，各段用普通磨口連接，可自由安裝，靈活加減泡沫分離柱，并有利于清洗設(shè)備。氣體分布器下方接有進(jìn)氣管，用于輸進(jìn)壓縮空氣，泡沫導(dǎo)出管內(nèi)徑與液相段分離柱內(nèi)徑相同，角度約為100度。其中破泡裝置即為一個風(fēng)機(jī)，可以向泡沫吹冷風(fēng)，從而使泡沫及時破裂，成為液體。其工作過程是將甘草飲片加水15倍量(首次多加2倍)，煎煮三次，每次2小時，合并濾液，離心，定容，冷藏，備用。取一定量備用的甘草水提液，稀釋4倍，藥液中甘草酸濃度約為0.23mg/ml，調(diào)pH至4左右，開啟空氣壓縮機(jī)，并調(diào)節(jié)氣流量為100ml/min，然后將1000ml甘草水提液一次性倒入泡沫分離塔內(nèi)，再將氣流速度調(diào)至600ml/min，泡沫在柱停留時間10-40秒，具體約20秒，從頂部的泡沫導(dǎo)出管排出，在風(fēng)機(jī)的冷氣下使泡沫破裂成液體，收集于產(chǎn)品貯罐。
實(shí)施例2 如附圖2。參照圖2，本發(fā)明生產(chǎn)工藝流程由原料池、預(yù)熱裝置、水泵、空氣壓縮機(jī)、氣體轉(zhuǎn)子流量計、液體轉(zhuǎn)子流量計、泡沫分離塔、破泡裝置、產(chǎn)品貯罐等用管道依次連接組成。其中泡沫分離塔自下而上依次包括氣體分布器、鼓泡段、泡沫放大段、泡沫導(dǎo)出管，各段用普通磨口連接。氣體分布器下方接有進(jìn)氣管，用于輸進(jìn)壓縮空氣。在氣體分布器上方的殼體右側(cè)有出料口，出料口外端出口控制液面高度。左側(cè)有進(jìn)料口A；液相段分離柱上方的殼體左側(cè)有進(jìn)料口B；泡沫放大段分離柱上方殼體左側(cè)有進(jìn)料口C，另外，可根據(jù)需要添加泡沫相段，與液相段內(nèi)徑相同；泡沫導(dǎo)出管內(nèi)徑與液相段分離柱內(nèi)徑相同，角度約為100度。破泡裝置即為一個風(fēng)機(jī)，可以向泡沫吹冷風(fēng)，從而使泡沫及時破裂，成為液體。其工作過程是將甘草飲片加水15倍量(首次多加2倍)，煎煮三次，每次2小時，合并濾液，離心，定容，冷藏，備用。將備用的藥液pH調(diào)至4左右，加熱至35℃，開啟空氣壓縮機(jī)，氣流速度開始為100ml/min，開啟水泵，使液體流速為4L/h，從進(jìn)料口B注入泡沫分離塔，待液面升至所需達(dá)到的液面高度時，將氣流速度調(diào)至600ml/min，泡沫不斷從泡沫導(dǎo)出管排出，用風(fēng)機(jī)使其破裂成液體，收集于產(chǎn)品貯罐。殘留液由出料口排出。分別對原料液、泡沫液、殘留液的固性物、甘草皂苷含量進(jìn)行測定，用回收率、富集比、產(chǎn)品純度等作為此工藝的評價指標(biāo)。
實(shí)施例3 如附圖2。本發(fā)明生產(chǎn)工藝流程圖與連續(xù)式泡沫分離相同，所不同的是，操作的步驟不一樣。分級泡沫分離是先將將甘草飲片加水15倍量(首次多加2倍)，煎煮三次，每次2小時，合并濾液，離心，定容，冷藏，備用。藥液調(diào)pH至堿性，pH約為8，氣流速度為600ml/min，藥液流速為4L/h，藥液起始濃度為0.81mg/ml(甘草酸的濃度)，溫度為室溫，藥液循環(huán)鼓泡至泡沫無法堆積，停止，收集泡沫產(chǎn)品1。將所得到的殘留液再調(diào)pH至4左右，再一次在氣流速度為600ml/min，藥液流速為4L/h，溫度仍為室溫的條件下鼓泡，至泡沫無法堆積，收集泡沫產(chǎn)品2。分別對泡沫產(chǎn)品1和2進(jìn)行性狀描述及固性物、甘草皂苷等的含量測定，以此評價此工藝。
實(shí)施例4 如附圖3。本發(fā)明生產(chǎn)工藝流程由原料池、預(yù)熱裝置、一級泡沫分離塔、二級泡沫分離塔、三級泡沫分離塔、四級泡沫分離塔、五級泡沫分離塔、六級泡沫分離塔、七級泡沫分離塔、破泡裝置、產(chǎn)品貯罐等用管道依次連接組成。各級泡沫分離塔內(nèi)外結(jié)構(gòu)相同，自下而上依次包括氣體分布器、液相段分離柱、泡沫放大段分離柱、泡沫相段分離柱、泡沫收集彎管。各段分離柱由普通磨口連續(xù)，可自由安裝，靈活加減液相高度和泡沫高度，并利于清洗設(shè)備。氣體分布器下方接有進(jìn)氣管，用于輸進(jìn)壓縮空氣，在氣體分布器上方的殼體右側(cè)有出料口，左側(cè)有進(jìn)料口；，另外，可根據(jù)需要添加泡沫相段，與液相段內(nèi)徑相同；泡沫收集彎管內(nèi)徑與液相段分離柱內(nèi)徑相同，角度約為100度。其工作過程如下將甘草飲片加水15倍量(首次多加2倍)，煎煮三次，每次2小時，合并濾液，離心，定容，冷藏，備用。將備用的甘草水提液調(diào)pH至4左右，藥液稀釋至4倍，藥液溫度控制在35℃左右，開啟空氣壓縮機(jī)，調(diào)節(jié)各級泡沫分離氣體流量，起始流量約為50ml/min，再開啟水泵，使液體流量為2L/h，待操作穩(wěn)定后，再將氣體流速調(diào)節(jié)為200ml/min，泡沫從各級泡沫分離塔頂部的泡沫導(dǎo)出管排出，并收集，統(tǒng)一破泡處理，從一級分離泡沫分離塔內(nèi)處理完后的藥液又流入二級分離塔，這樣逐級進(jìn)行泡沫分離，經(jīng)過第七級泡沫分離塔的殘留液又回到原料池，循環(huán)利用，直到無法產(chǎn)生泡沫。對所收集的泡沫液和殘留液、原料液中固性物、甘草皂苷含量進(jìn)行測定，用回收率、富集比、純度等作為此工藝的評價指標(biāo)。
實(shí)施例5 利用本發(fā)明有益效果的實(shí)施例。
稱取甘草粗粉100g，加15倍量水煎煮3次，每次2小時，合并煎液。高速離心，4000r/min30分鐘，取上清液，用水稀釋4倍，加入泡沫分離裝置，在經(jīng)實(shí)驗(yàn)考察得到的最佳間歇式操作工藝參數(shù)條件下進(jìn)行泡沫分離。收集泡沫，消泡，泡沫液于70℃恒溫真空干燥至恒重，粉碎，得甘草酸粗品粉末。
同時，采用如下對照方法制備甘草酸粗品(1)取甘草粗粉100g，加15倍量水煎煮3次，每次2小時，合并煎液。減壓濃縮。濃縮液冷卻至室溫后加3.5mol/L硫酸，調(diào)pH值為2，靜置12小時，甘草酸沉淀析出。過濾，沉淀用蒸餾水洗滌3次，并將水抽干，于70℃恒溫真空干燥至恒重，粉碎，得甘草酸粗品粉末。
(2)取甘草粗粉100g，加15倍量水煎煮3次，每次2小時，合并煎液。減壓濃縮至原體積的1/6，緩緩加入85％的乙醇，邊加邊攪拌，直至溶液中含乙醇量達(dá)65％左右，靜置過夜，取上清液備用，沉淀再加與上清液相同體積的65％的乙醇，充分?jǐn)嚢瑁o置過夜，取出上清液備用，沉淀再用65％乙醇提取一次，合并三次提取液[3]，濾過，回收乙醇，于70℃恒溫真空干燥至恒重，粉碎，得甘草酸粗品粉末。
(3)取甘草粗粉100g，加入12倍量0.5％氨水滲漉，滲漉前浸漬半小時，滲漉流速為5ml/min/kg，收集滲漉液。取滲漉液減壓濃縮，向濃縮液中加3.5mol/L的濃硫酸調(diào)至pH值為2，靜置，析出沉淀并過濾，蒸餾水洗沉淀3次，于70℃恒溫真空干燥至恒重，粉碎，得甘草酸粗品粉末。
(4)稱取甘草粗粉100g，用含氨0.3％的60％乙醇溶液作溶媒進(jìn)行回流提取。第一次加入溶媒量是甘草量的5倍，第二、三次各為4倍量；第一次回流2h，第二、三次各為1.5h，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮，向濃縮液中加3.5mol/L的濃硫酸調(diào)至pH值為2，靜置，析出沉淀并過濾，蒸餾水洗沉淀3次，于70℃恒溫真空干燥至恒重，粉碎，得甘草酸粗品粉末。
以上方法所得甘草酸采用高效液相色譜法進(jìn)行含量測定，測定條件如下色譜柱Diamonsil C18(250mm×4.6mm，5μm)；檢測波長250nm；柱溫40℃；流動相甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(67∶33∶1)。
樣品制備方法定為取甘草酸粗品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入丙酮35ml，密塞稱定重量，超聲處理30min，放冷，密塞，再稱定重量，用丙酮補(bǔ)足減失的重量，搖勻。過濾，取續(xù)濾液即得。
評價指標(biāo)的計算公式甘草酸粗品純度＝甘草酸重量(g)/甘草酸粗品重量(g)×100％甘草酸提取轉(zhuǎn)移率＝提取液中甘草酸總量(g)/藥材中甘草酸總量(g)×100％甘草酸純化轉(zhuǎn)移率＝粗品中甘草酸總量(g)/提取液中甘草酸總量(g)×100％純度提高比＝粗品中甘草酸純度/提取液固形物中甘草酸純度試驗(yàn)結(jié)果如下表


權(quán)利要求
1.一種中藥活性成分分離方法，其特征在于，包含以下步驟，a.中藥水提，得水提液，b.水提液經(jīng)過泡沫分離得泡沫液。
2.權(quán)利要求1的分離方法，其特征在于，步驟a中所述水提步驟中，包含中藥的水提取與前處理工藝，水提取時需要確定加水量、煎煮次數(shù)、煎煮時間，得到的水提取液經(jīng)過高速離心以除去顆粒狀雜質(zhì)。步驟b所述泡沫分離步驟中需要確定藥液濃度、氣液流速及溫度條件，通過破泡處理，得泡沫液。
3.權(quán)利要求2的分離方法，其特征在于，所述中藥選自甘草、人參、三七、絞股藍(lán)、黃芪、毛冬青、遠(yuǎn)志、無患子等含皂苷類成分多的中藥。
4.權(quán)利要求2的分離方法，其特征在于，所述的藥材提取與前處理工藝，包括以下步驟，取中藥飲片，加水5-20倍量，煎煮1-3次，每次0.5-2小時，每次用濾布過濾，合并濾液；高速離心處理后，將離心得到的藥液，定容至5-90倍體積，即每5-90ml藥液相當(dāng)于原生藥材1g。
5.權(quán)利要求4的分離方法，其特征在于，所述的藥材提取與前處理工藝，包括以下步驟取中藥飲片，加水15倍量，煎煮三次，每次2小時，每次用200目濾布過濾，合并濾液；高速離心轉(zhuǎn)速4000r/min，時間30min，藥液濃度0.7g/ml，藥液相對密度為1.04；將離心得到的藥液，定容至45倍體積，即每45ml藥液相當(dāng)于原生藥材1g。
6.權(quán)利要求2的分離方法，其特征在于，所述泡沫分離選自以下泡沫分離操作方式1)操作方式A間歇式分離——指將中藥水提液一次性倒入泡沫分離柱內(nèi)，以一定氣流速度鼓泡，直至無法收集到穩(wěn)定的泡沫為止；2)操作方式B連續(xù)式分離——指將中藥水提液，用水泵連續(xù)注入泡沫分離塔內(nèi)，殘留液連續(xù)從出料口排出，泡沫液連續(xù)從頂部泡沫導(dǎo)出口排放，收集；3)操作方式C分級泡沫分離——指將中藥水提液先調(diào)pH至堿性下，連續(xù)鼓泡至泡沫無法堆積，停止，再將處理完后的殘留液調(diào)pH至酸性下，又一次鼓泡至泡沫無法堆積，停止。分別收集兩次所得的泡沫液；4)操作方式D多級串連泡沫分離——指將中藥水提液通過水泵打入多級泡沫分離裝置，經(jīng)過一段時間泡沫分離后，從各級泡沫分離塔頂部收集泡沫，殘留液循環(huán)利用，直到泡沫無法堆積為止。
7.權(quán)利要求6的分離方法，四種泡沫分離操作方式，具體條件是操作方式A間歇式泡沫分離操作，特征在于藥液起始濃度為0.1-0.5mg/ml(甘草酸的濃度)，pH值為3-5，氣流速度為300-1200ml/min，所用的時間約為10-40秒；操作方式B連續(xù)式操作，特征在于所述一定操作條件是指原料液濃度為0.4-1.2mg/ml(甘草酸的濃度)，pH值為3-5，藥液溫度為25-50℃，氣流速度為300-1200ml/min，液流速度為2-8L/h，進(jìn)料口位置為B；操作方式C分級泡沫分離式操作，其特征在于所述一級分離的工藝條件為甘草酸濃度為0.4-1.2mg/ml，pH為7-10左右，室溫條件，氣體流速為300-1200ml/min，流體流速為2-8L/h，從進(jìn)料口B進(jìn)料；二級分離工藝條件為將一級分離所得殘留液調(diào)pH至3-5左右，其他條件同一級分離；操作方式D多級串連泡沫分離操作方式，其特征在于所述5甘草水提液pH為4左右，總的氣體流速為700-2800ml/min，每一級泡沫分離塔內(nèi)氣體流量為100-400ml/min，流體流速為1-4L/h。分別對泡沫液、殘留液、原料液固性物、甘草皂苷含量進(jìn)行測定，用回收率、富集比、純度作為本工藝的評價指標(biāo)。
8.權(quán)利要求6的泡沫分離操作方式，具體條件是操作方式A間歇式泡沫分離操作，特征在于所述的一定體積為1000ml藥液，藥液起始濃度為0.23mg/ml(甘草酸的濃度)，pH值為4，氣流速度為600ml/min，所用的時間約為20秒；操作方式B連續(xù)式操作，特征在于所述的一定體積是指4000ml藥液，一定操作條件是指原料液濃度為0.81mg/ml(甘草酸的濃度)，pH值為4，藥液溫度為35℃，氣流速度為600ml/min，液流速度為4L/h，進(jìn)料口位置為B；操作方式C分級泡沫分離式操作，其特征在于所述一級分離的工藝條件為4500ml原料液，甘草酸濃度為0.81mg/ml，pH為8左右，室溫條件，氣體流速為600ml/min，流體流速為4L/h，從進(jìn)料口B進(jìn)料；二級分離工藝條件為將一級分離所得殘留液調(diào)pH至4左右，其他條件同一級分離；操作方式D多級串連泡沫分離操作方式，其特征在于所述一定量是指9000ml原料液，甘草水提液pH為4左右，總的氣體流速為1400ml/min，每一級泡沫分離塔內(nèi)氣體流量為200ml/min，流體流速為2L/h。分別對泡沫液、殘留液、原料液固性物、甘草皂苷含量進(jìn)行測定，用回收率、富集比、純度作為本工藝的評價指標(biāo)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的分離方法，其特征在于，得到的是中藥皂苷類活性成分。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的分離方法，其特征在于，得到的是中藥甘草的皂苷類活性成分。
全文摘要
本發(fā)明是一種中藥活性物質(zhì)的分離方法，是從中藥粗提液中分離皂苷和其它表面活性物質(zhì)的新型分離技術(shù)；該技術(shù)依據(jù)中藥水提液中各組分間理化性質(zhì)的差異，運(yùn)用泡沫分離基本原理，采用四種不同的操作方式，對甘草粗提液中各類組分進(jìn)行分離富集，該技術(shù)具有無需使用任何化學(xué)試劑、成本低、設(shè)備簡單、投資少、對環(huán)境無任何污染等特點(diǎn)，該方法不僅適用于甘草粗提液，還適應(yīng)于含皂苷等表面活性物的其它中藥提取液，是中藥分離工程中的一種可行且有效的新技術(shù)。
文檔編號C07G3/00GK1789220SQ200510115130
公開日2006年6月21日 申請日期2005年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月15日
發(fā)明者楊明, 蘇艷桃, 韓麗, 馬鴻雁, 王虎山, 蘭潔, 李銳, 蔡培烈, 耿炤, 宋浩亮, 蔡金娜 申請人:江西匯仁藥業(yè)有限公司