專利名稱：：抑制水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及對水果或蔬菜進(jìn)行處理以抑制收獲后疾病和/或收獲后蔬菜或水果脫水的方法。
背景技術(shù)：
：收獲后疾病常常是發(fā)生在田地或果園的疾病的延伸。例如，果園中核果(Moniliniafructicola(Wint.)Honey)的褐腐病可導(dǎo)致花腐病和桑芽枯病。如果不對水果進(jìn)行冷藏，果園中的感染在收獲時可能是觀察不到的。炭疽病可攻擊柑橘、鱷梨、芒果、番木瓜、以及多種熱帶和亞熱帶物種的花或葉及未成熟的果實；發(fā)育中的果實的感染通常是潛伏性的，腐爛病變僅在水果開始成熟時顯現(xiàn)。Peziculamalicorticis(Jacks.)Nannfld可引起蘋果樹和梨樹枝干的枯病，此感染在發(fā)育中的果實中是潛伏性的，只有在果實儲存幾個月后，腐爛才會開始，并在-1℃儲存時繼續(xù)腐爛，因為這種生物在很低的溫度下能夠生長。上述例子中的真菌能夠穿透果實的表皮和外皮。不管能不能直接穿透，傷口常常是真菌進(jìn)入果實的通常方式。在收獲和處理過程中，割傷、刺傷、碰傷、擦傷是不能完全避免的。如果外皮和表皮破了，孢子就能在新鮮傷口處發(fā)現(xiàn)對孢子萌發(fā)和繁殖較為理想的營養(yǎng)和濕度。收獲時，從母體植物上分離果實就造成了不可避免的傷口來助長梗端腐爛。發(fā)生在花端的腐爛與之前在花部分發(fā)生的真菌繁殖有關(guān)聯(lián)。例如，在-1℃下貯藏1-2月后，Barlett梨時常發(fā)生灰色葡萄孢蒂腐病。果肉腐爛的開始是與保留在果實中的老花柱以及雄蕊相關(guān)聯(lián)的。對花的侵染是在開花期末在花的衰老部分中發(fā)生的。絕大多數(shù)的這些衰老部分遭受了鏈格孢和常見的腐生植物真菌的侵襲，而灰色葡萄孢偶爾可見。并非所有含有灰色葡萄孢侵襲過的花部分的果實都在貯藏時腐爛，但相當(dāng)大比例的這些植物在貯藏時腐爛。相反，如果發(fā)育中果實的成熟花部分不含有灰色葡萄孢，測試水果就沒有花端腐爛發(fā)生。在開花期末，利用殺真菌劑對整個果園進(jìn)行一次噴藥將會大大降低貯存水果的腐爛。許多非常常見的收獲后病原體尤其嚴(yán)重的一方面是在腐爛水果上生長的菌絲與臨近水果接觸并穿透臨近水果的接觸感染。如果時間充足，通過真菌菌絲連接在一起的腐爛水果不斷擴(kuò)大的‘巢’將會涉及容器中的所有水果。在很大程度上，疾病或疾病的威脅規(guī)定了處理易腐壞水果的方式。在近幾十年，人們將水果運送到離其產(chǎn)地越來越遠(yuǎn)的地方。然而，只有將商品的壽命延伸到其極限，對遠(yuǎn)途市場的開發(fā)才能帶來大的經(jīng)濟(jì)效益。類似的，通過貯藏水果來延長銷售時間直至它們接近生理壽命末期的時候就會引起另外的疾病問題。如果這些情況發(fā)生在市場上，損失就尤其嚴(yán)重，因為可能會造成遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過生產(chǎn)成本的分類、包裝、冷卻、貯存及運輸成本。甚至更重要的長期重要性是可能會損害聲譽，導(dǎo)致未來銷售下降。在世界范圍內(nèi)，水果收獲后疾病每年導(dǎo)致水果工業(yè)15-25％的損失。其中很大程度要歸因于微生物引起的腐爛。過去控制收獲后疾病的主要方式是殺真菌劑，現(xiàn)在要慎重使用，因為殺真菌劑用于加工后的食品會引起潛在的致癌危險。因此，在開發(fā)對人體健康和環(huán)境較少危害的水果和蔬菜收獲后疾病生物控制法方面的努力加強(qiáng)了。人們在利用拮抗性微生物作為合成殺真菌劑的可行性替代物的評估上給予了相當(dāng)?shù)淖⒁饬?。在利用拮抗性微生物來控制收獲后疾病方面有兩種基本的方法。已經(jīng)證明，已經(jīng)存在于水果和蔬菜表面的天然拮抗劑能控制多種日用品上的許多腐爛病原體。另外，已經(jīng)證明，人工導(dǎo)入的拮抗劑在生物控制收獲后病原體方面是有效的。自1993年起，爆發(fā)了對利用人工導(dǎo)入拮抗劑來生物控制收獲后疾病方面的研究，主要是在水果疾病方面(Janisiewicz，“BiologicalControlofDiseasesofFruit，”InBiocontrolofPlantDiseasesII，Mukergieetal.(ed.)，CRCPress，RocaRaton，pp.153-165(1988)和Wilsonetal.，“PotentialforBiologicalControlofPostharvestPlantDiseases，”PlantDisease69375-378(1985))。例如，蘋果腐爛是利用酵母來進(jìn)行控制的(Wisniewskietal.，“BiologicalControlofPostharvestDiseasesofFruitInhibitionofBotrytisRotonApplesbyanAntagonisticYeast，”Proc.ElectronMicrosc.Soc.Am.46290-91(1988))，而杏的褐腐病是利用枯草芽孢桿菌來控制的(Puseyetal.，“PostharvestBiologicalControlofStoneFruitBrownRotbyBacillussubtilis，”PlantDis.68753-56(1984))。利用木霉的一個種進(jìn)行控制后，檸檬皮中的發(fā)霉率從35％下降到8％(DeMatos，“ChemicalandMicrobiologicalFactorsInfluencingtheInfectionofLemonsbyGeotrichumcandidumandPenicilliumdigitatum，”Ph.D.dissertation，UniversityofCalifornia，Riverside，106pp.(1983))。對柑橘腐爛病原體的生物控制是利用枯草芽孢桿菌來進(jìn)行的(Singhetal.，“BacillussubtilisasaControlAgentAgainstFungalPathogensofCitrusFruit，”Trans.Br.Mycol.Soc.83487-90(1984))。這些拮抗劑具有多種作用方式抗生現(xiàn)象或競爭營養(yǎng)與空間，或二者兼具，在宿主組織中誘導(dǎo)抗性、以及直接與病原體相互作用(Wilsonetal.，“BiologicalControlofPostharvestDiseasesofFruitsandVegetablesAnEmergingTechnology，”Annu.Rev.Phytopathol.27425-441(1989))。雖然利用拮抗性細(xì)菌或真菌進(jìn)行處理至少可在一定程度上有效控制收獲后疾病，但在這些方法用于商業(yè)應(yīng)用之前，還需要考慮很多因素。首先，在處理過程中，一定要保證拮抗劑的生長及持續(xù)應(yīng)用。這可能造成重大的開支和管理負(fù)擔(dān)，這要依賴于這些拮抗劑的使用時間和使用頻率。并且，種植者是否愿意維持生物反應(yīng)器以使特定的拮抗劑菌株生長和繁殖也是值得懷疑的。其次，在收獲后水果的運輸過程中，那些拮抗劑的效力要依賴于貯存條件。一些拮抗劑可能不能承受運輸途中條件的變化，從而使得病原體克服了拮抗劑的抑制作用?？紤]到上述問題，已經(jīng)報道的控制植物病原體的拮抗劑很少有成功的從實驗室轉(zhuǎn)移到田地或收獲后環(huán)境中也就不足為奇了。因此，仍然需要提供有效的、商業(yè)可行的方法來處理水果和蔬菜以控制收獲后疾病，這樣可完全避免，或者顯著減少對殺真菌劑處理的需要。尤其是，需要提供一種有效的、可行的并對人類或環(huán)境造成很小或不造成危害的處理方法。本發(fā)明是用來克服本領(lǐng)域中的這些缺陷及其他缺陷的。發(fā)明簡述本發(fā)明涉及抑制水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的方法。此方法是在可有效抑制收獲后疾病或脫水的條件下，利用過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子(elicitor)蛋白或多肽處理水果或蔬菜來進(jìn)行的。本發(fā)明的進(jìn)一方面涉及抑制水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的另一方法。此方法是通過提供利用編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白的DNA分子轉(zhuǎn)化過的轉(zhuǎn)基因植物或植物種子，并在可有效抑制從轉(zhuǎn)基因植物收獲得到的水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的條件下，種植這些轉(zhuǎn)基因植物或從轉(zhuǎn)基因植物種子得到的轉(zhuǎn)基因植物來實現(xiàn)的。本發(fā)明的另一方面涉及DNA構(gòu)建體，此DNA構(gòu)建體包含有一個編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子、可操作性偶聯(lián)到DNA分子5′端并在水果或蔬菜組織中可有效轉(zhuǎn)錄DNA分子的植物可表達(dá)啟動子、以及可操作性偶聯(lián)到DNA分子上的3′調(diào)節(jié)區(qū)域，其中，水果或蔬菜組織中的DNA分子的表達(dá)給予水果或蔬菜對收獲后疾病或脫水的抗性。另外，也公開了表達(dá)系統(tǒng)、宿主細(xì)胞、以及含有本發(fā)明中的異源DNA構(gòu)建體的轉(zhuǎn)基因植物。按照本發(fā)明，過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽能用于抑制或控制水果或蔬菜的收獲后疾病(即，病原體引起的)。同樣的，這樣的處理也可用于抑制處理后的水果或蔬菜的收獲后脫水。通過實現(xiàn)這些目標(biāo)，本發(fā)明就可使得農(nóng)產(chǎn)品種植者、倉庫包裝工人、運輸者、以及供貨商在降低收獲后疾病和脫水導(dǎo)致的損失的條件下來加工、處理和貯存水果和蔬菜。結(jié)果就降低了水果和蔬菜從產(chǎn)地到消費者中間的成本。重要的是，處理后的水果或蔬菜的質(zhì)量提高了。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及抑制水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的方法。此方法是在可有效抑制收獲后疾病或脫水的條件下，利用過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽處理水果或蔬菜來進(jìn)行的。本發(fā)明的進(jìn)一方面涉及抑制水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的另一方法。此方法是通過提供利用編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白的DNA分子轉(zhuǎn)化過的轉(zhuǎn)基因植物或植物種子，并在可有效抑制從轉(zhuǎn)基因植物收獲得到的水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的條件下，種植這些轉(zhuǎn)基因植物或從轉(zhuǎn)基因植物種子得到的轉(zhuǎn)基因植物來實現(xiàn)的。對于這些方法的應(yīng)用來講，合適的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽是那些來源于多種細(xì)菌和真菌病原體，優(yōu)選細(xì)菌病原體的蛋白或多肽。源自細(xì)菌的示范性過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽包括，但并不局限于來源于歐文氏菌屬的物種(如解淀粉歐文氏菌、菊歐文氏菌、斯氏歐文氏菌、胡蘿卜歐文氏菌，等)、假單胞菌屬的物種(如丁香假單孢菌、青枯假單胞菌等)、以及黃單胞菌的物種(如野油菜黃單胞菌)的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子。除這些源于革蘭氏陰性細(xì)菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子之外，我們也可利用源于革蘭氏陽性細(xì)菌的誘導(dǎo)子。一個例子就是源自密執(zhí)安棍狀桿菌壞腐亞種的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子。源自真菌的示范性過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽包括，但并不局限于源于多種疫霉如寄生疫霉、隱地疫霉、肉桂疫霉、辣椒疫霉、大雄疫霉、柑橘褐腐病疫霉等)的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子(也即elicitin)。優(yōu)選的是源于解淀粉歐文氏菌、菊歐文氏菌、丁香假單孢菌或青枯假單胞菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽。源于菊歐文氏菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.1的氨基酸序列，如下所示MetGlnIleThrIleLysAlaHisIleGlyGlyAspLeuGlyValSer151015GlyLeuGlyAlaGlnGlyLeuLysGlyLeuAsnSerAlaAlaSerSer202530LeuGlySerSerValAspLysLeuSerSerThrIleAspLysLeuThr354045SerAlaLeuThrSerMetMetPheGlyGlyAlaLeuAlaGlnGlyLeu505560GlyAlaSerSerLysGlyLeuGlyMetSerAsnGlnLeuGlyGlnSer65707580PheGlyAsnGlyAlaGlnGlyAlaSerAsnLeuLeuSerValProLys859095SerGlyGlyAspAlaLeuSerLysMetPheAspLysAlaLeuAspAsp100105110LeuLeuGlyHisAspThrValThrLysLeuThrAsnGlnSerAsnGln115120125LeuAlaAsnSerMetLeuAsnAlaSerGlnMetThrGlnGlyAsnMet130135140AsnAlaPheGlySerGlyValAsnAsnAlaLeuSerSerIleLeuGly145150155160AsnGlyLeuGlyGlnSerMetSerGlyPheSerGlnProSerLeuGly165170175AlaGlyGlyLeuGlnGlyLeuSerGlyAlaGlyAlaPheAsnGlnLeu180185190GlyAsnAlaIleGlyMetGlyValGlyGlnAsnAlaAlaLeuSerAla195200205LeuSerAsnValSerThrHisValAspGlyAsnAsnArgHisPheVal210215220AspLysGluAspArgGlyMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMetAsp225230235240GlnTyrProGluIlePheGlyLysProGluTyrGlnLysAspGlyTrp245250255SerSerProLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSerLys260265270ProAspAspAspGlyMetThrGlyAlaSerMetAspLysPheArgGln275280285AlaMetGlyMetIleLysSerAlaValAlaGlyAspThrGlyAsnThr290295300AsnLeuAsnLeuArgGlyAlaGlyGlyAlaSerLeuGlyIleAspAla305310315320AlaValValGlyAspLysIleAlaAsnMetSerLeuGlyLysLeuAla325330335AsnAla此過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的分子量為34kDa，是熱穩(wěn)定性的，甘氨酸含量大于16％，基本上不含半胱氨酸。此菊歐文氏菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽是由含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.2所示核苷酸序列的DNA分子編碼的，SEQ.IDNO.2所示核酸序列如下cgattttacccgggtgaacgtgctatgaccgacagcatcacggtattcgacaccgttacg60gcgtttatggccgcgatgaaccggcatcaggcggcgcgctggtcgccgcaatccggcgtc120gatctggtatttcagtttggggacaccgggcgtgaactcatgatgcagattcagccgggg180cagcaatatcccggcatgttgcgcacgctgctcgctcgtcgttatcagcaggcggcagag240tgcgatggctgccatctgtgcctgaacggcagcgatgtattgatcctctggtggccgctg300ccgtcggatcccggcagttatccgcaggtgatcgaacgtttgtttgaactggcgggaatg360acgttgccgtcgctatccatagcaccgacggcgcgtccgcagacagggaacggacgcgcc420cgatcattaagataaaggcggctttttttattgcaaaacggtaacggtgaggaaccgttt480caccgtcggcgtcactcagtaacaagtatccatcatgatgcctacatcgggatcggcgtg540ggcatccgttgcagatacttttgcgaacacctgacatgaatgaggaaacgaaattatgca600aattacgatcaaagcgcacatcggcggtgatttgggcgtctccggtctggggctgggtgc660tcagggactgaaaggactgaattccgcggcttcatcgctgggttccagcgtggataaact720gagcagcaccatcgataagttgacctccgcgctgacttcgatgatgtttggcggcgcgct780ggcgcaggggctgggcgccagctcgaaggggctggggatgagcaatcaactgggccagtc840tttcggcaatggcgcgcagggtgcgagcaacctgctatccgtaccgaaatccggcggcga900tgcgttgtcaaaaatgtttgataaagcgctggacgatctgctgggtcatgacaccgtgac960caagctgactaaccagagcaaccaactggctaattcaatgctgaacgccagccagatgac1020ccagggtaatatgaatgcgttcggcagcggtgtgaacaacgcactgtcgtccattctcgg1080caacggtctcggccagtcgatgagtggcttctctcagccttctctgggggcaggcggctt1140gcagggcctgagcggcgcgggtgcattcaaccagttgggtaatgccatcggcatgggcgt1200ggggcagaatgctgcgctgagtgcgttgagtaacgtcagcacccacgtagacggtaacaa1260ccgccactttgtagataaagaagatcgcggcatggcgaaagagatcggccagtttatgga1320tcagtatccggaaatattcggtaaaccggaataccagaaagatggctggagttcgccgaa1380gacggacgacaaatcctgggctaaagcgctgagtaaaccggatgatgacggtatgaccgg1440cgccagcatggacaaattccgtcaggcgatgggtatgatcaaaagcgcggtggcgggtga1500taccggcaataccaacctgaacctgcgtggcgcgggcggtgcatcgctgggtatcgatgc1560ggctgtcgtcggcgataaaatagccaacatgtcgctgggtaagctggccaacgcctgata1620atctgtgctggcctgataaagcggaaacgaaaaaagagacggggaagcctgtctcttttc1680ttattatgcggtttatgcggttacctggaccggttaatcatcgtcatcgatctggtacaa1740acgcacattttcccgttcattcgcgtcgttacgcgccacaatcgcgatggcatcttcctc1800gtcgctcagattgcgcggctgatggggaacgccgggtggaatatagagaaactcgccggc1860cagatggagacacgtctgcgataaatctgtgccgtaacgtgtttctatccgcccctttag1920cagatagattgcggtttcgtaatcaacatggtaatgcggttccgcctgtgcgccggccgg1980gatcaccacaatattcatagaaagctgtcttgcacctaccgtatcgcgggagataccgac2040aaaatagggcagtttttgcgtggtatccgtggggtgttccggcctgacaatcttgagttg2100gttcgtcatcatctttctccatctgggcgacctgatcggtt2141上述核苷酸和氨基酸序列是已經(jīng)公開的，并在Bauer等的美國專利NO.5,850,015和Wei等的美國專利NO.5,776,889中有進(jìn)一步的描述，此處，這兩個專利全文引用作為參考。源于菊歐文氏菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.3的氨基酸序列，如下所示MetSerLeuAsnThrSerGlyLeuGlyAlaSerThrMetGlnIleSer151015IleGlyGlyAlaGlyGlyAsnAsnGlyLeuLeuGlyThrSerArgGln202530AsnAlaGlyLeuGlyGlyAsnSerAlaLeuGlyLeuGlyGlyGlyAsn354045GlnAsnAspThrValAsnGlnLeuAlaGlyLeuLeuThrGlyMetMet505560MetMetMetSerMetMetGlyGlyGlyGlyLeuMetGlyGlyGlyLeu65707580GlyGlyGlyLeuGlyAsnGlyLeuGlyGlySerGlyGlyLeuGlyGlu859095GlyLeuSerAsnAlaLeuAsnAspMetLeuGlyGlySerLeuAsnThr100105110LeuGlySerLysGlyGlyAsnAsnThrThrSerThrThrAsnSerPro115120125LeuAspGlnAlaLeuGlyIleAsnSerThrSerGlnAsnAspAspSer130135140ThrSerGlyThrAspSerThrSerAspSerSerAspProMetGlnGln145150155160LeuLeuLysMetPheSerGluIleMetGlnSerLeuPheGlyAspGly165170175GlnAspGlyThrGlnGlySerSerSerGlyGlyLysGlnProThrGlu180185190GlyGluGlnAsnAlaTyrLysLysGlyValThrAspAlaLeuSerGly195200205LeuMetGlyAsnGlyLeuSerGlnLeuLeuGlyAsnGlyGlyLeuGly210215220GlyGlyGlnGlyGlyAsnAlaGlyThrGlyLeuAspGlySerSerLeu225230235240GlyGlyLysGlyLeuGlnAsnLeuSerGlyProValAspTyrGlnGln245250255LeuGlyAsnAlaValGlyThrGlyIleGlyMetLysAlaGlyIleGln260265270AlaLeuAsnAspIleGlyThrHisArgHisSerSerThrArgSerPhe275280285ValAsnLysGlyAspArgAlaMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMet290295300AspGlnTyrProGluValPheGlyLysProGlnTyrGlnLysGlyPro305310315320GlyGlnGluValLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSer325330335LysProAspAspAspGlyMetThrProAlaSerMetGluGlnPheAsn340345350LysAlaLysGlyMetIleLysArgProMetAlaGlyAspThrGlyAsn355360365GlyAsnLeuGlnAlaArgGlyAlaGlyGlySerSerLeuGlyIleAsp370375380AlaMetMetAlaGlyAspAlaIleAsnAsnMetAlaLeuGlyLysLeu385390395400GlyAlaAla此過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的分子量大約為39kDa，pI大約為4.3，在100℃下能保持至少10分鐘的熱穩(wěn)定性。此過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽基本上不含半胱氨酸。在Wei，Z-M.，etal.，“Harpin，ElicitoroftheHypersensitiveResponseProducedbythePlantPathogenErwiniaamylovora，”Science25785-88(1992)中對這個源自菊歐文氏菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽有更詳細(xì)的描述，此處全文引用作為參考。編碼此過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.4所示的核苷酸序列，SEQ.IDNO.4所示核苷酸序列如下aagcttcggcatggcacgtttgaccgttgggtcggcagggtacgtttgaattattcataa60gaggaatacgttatgagtctgaatacaagtgggctgggagcgtcaacgatgcaaatttct120atcggcggtgcgggcggaaataacgggttgctgggtaccagtcgccagaatgctgggttg180ggtggcaattctgcactggggctgggcggcggtaatcaaaatgataccgtcaatcagctg240gctggcttactcaccggcatgatgatgatgatgagcatgatgggcggtggtgggctgatg300ggcggtggcttaggcggtggcttaggtaatggcttgggtggctcaggtggcctgggcgaa3604ggactgtcgaacgcgctgaacgatatgttaggcggttcgctgaacacgctgggctcgaaa420ggcggcaacaataccacttcaacaacaaattccccgctggaccaggcgctgggtattaac480tcaacgtcccaaaacgacgattccacctccggcacagattccacctcagactccagcgac540ccgatgcagcagctgctgaagatgttcagcgagataatgcaaagcctgtttggtgatggg600caagatggcacccagggcagttcctctgggggcaagcagccgaccgaaggcgagcagaac660gcctataaaaaaggagtcactgatgcgctgtcgggcctgatgggtaatggtctgagccag720ctccttggcaacgggggactgggaggtggtcagggcggtaatgctggcacgggtcttgac780ggttcgtcgctgggcggcaaagggctgcaaaacctgagcgggccggtggactaccagcag840ttaggtaacgccgtgggtaccggtatcggtatgaaagcgggcattcaggcgctgaatgat900atcggtacgcacaggcacagttcaacccgttctttcgtcaataaaggcgatcgggcgatg960gcgaaggaaatcggtcagttcatggaccagtatcctgaggtgtttggcaagccgcagtac1020cagaaaggcccgggtcaggaggtgaaaaccgatgacaaatcatgggcaaaagcactgagc1080aagccagatgacgacggaatgacaccagccagtatggagcagttcaacaaagccaagggc1140atgatcaaaaggcccatggcgggtgataccggcaacggcaacctgcaggcacgcggtgcc1200ggtggttcttcgctgggtattgatgccatgatggccggtgatgccattaacaatatggca1260cttggcaagctgggcgcggcttaagctt1288上述核苷酸和氨基酸序列是已經(jīng)公開的，并在Beer等的美國專利NO.5,849,868和Wei等的美國專利NO.5,776,889中有進(jìn)一步的描述，此處，這兩個專利全文引用作為參考。源于解淀粉歐文氏菌的另一過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.5的氨基酸序列，如下所示MetSerIleLeuThrLeuAsnAsnAsnThrSerSerSerProGlyLeu151015PheGlnSerGlyGlyAspAsnGlyLeuGlyGlyHisAsnAlaAsnSer202530AlaLeuGlyGlnGlnProIleAspArgGlnThrIleGluGlnMetAla354045GlnLeuLeuAlaGluLeuLeuLysSerLeuLeuSerProGlnSerGly505560AsnAlaAlaThrGlyAlaGlyGlyAsnAspGlnThrThrGlyValGly65707580AsnAlaGlyGlyLeuAsnGlyArgLysGlyThrAlaGlyThrThrPro859095GlnSerAspSerGlnAsnMetLeuSerGluMetGlyAsnAsnGlyLeu100105110AspGlnAlaIleThrProAspGlyGlnGlyGlyGlyGlnIleGlyAsp115120125AsnProLeuLeuLysAlaMetLeuLysLeuIleAlaArgMetMetAsp130135140GlyGlnSerAspGlnPheGlyGlnProGlyThrGlyAsnAsnSerAla145150155160SerSerGlyThrSerSerSerGlyGlySerProPheAsnAspLeuSer165170175GlyGlyLysAlaProSerGlyAsnSerProSerGlyAsnTyrSerPro180185190ValSerThrPheSerProProSerThrProThrSerProThrSerPro195200205LeuAspPheProSerSerProThrLysAlaAlaGlyGlySerThrPro210215220ValThrAspHisProAspProValGlySerAlaGlyIleGlyAlaGly225230235240AsnSerValAlaPheThrSerAlaGlyAlaAsnGlnThrValLeuHis245250255AspThrIleThrValLysAlaGlyGlnValPheAspGlyLysGlyGln260265270ThrPheThrAlaGlySerGluLeuGlyAspGlyGlyGlnSerGluAsn275280285GlnLysProLeuPheIleLeuGluAspGlyAlaSerLeuLysAsnVal290295300ThrMetGlyAspAspGlyAlaAspGlyIleHisLeuTyrGlyAspAla305310315320LysIleAspAsnLeuHisValThrAsnValGlyGluAspAlaIleThr325330335ValLysProAsnSerAlaGlyLysLysSerHisValGluIleThrAsn340345350SerSerPheGluHisAlaSerAspLysIleLeuGlnLeuAsnAlaAsp355360365ThrAsnLeuSerValAspAsnValLysAlaLysAspPheGlyThrPhe370375380ValArgThrAsnGlyGlyGlnGlnGlyAsnTrpAspLeuAsnLeuSer385390395400HisIleSerAlaGluAspGlyLysPheSerPheValLysSerAspSer405410415GluGlyLeuAsnValAsnThrSerAspIleSerLeuGlyAspValGlu420425430AsnHisTyrLysValProMetSerAlaAsnLeuLysValAlaGlu435440445此蛋白或多肽是酸性的，富含甘氨酸和絲氨酸，但缺乏半胱氨酸。其也是熱穩(wěn)定性的，對蛋白酶敏感，并可受植物代謝抑制劑的抑制。本發(fā)明中的蛋白或多肽的預(yù)測分子大小約為4.5kDa。編碼此過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.6所示的核苷酸序列，SEQ.IDNO.6所示核苷酸序列如下atgtcaattcttacgcttaacaacaatacctcgtcctcgccgggtctgttccagtccggg60ggggacaacgggcttggtggtcataatgcaaattctgcgttggggcaacaacccatcgat120cggcaaaccattgagcaaatggctcaattattggcggaactgttaaagtcactgctatcg180ccacaatcaggtaatgcggcaaccggagccggtggcaatgaccagactacaggagttggt240aacgctggcggcctgaacggacgaaaaggcacagcaggaaccactccgcagtctgacagt300cagaacatgctgagtgagatgggcaacaacgggctggatcaggccatcacgcccgatggc360cagggcggcgggcagatcggcgataatcctttactgaaagccatgctgaagcttattgca420cgcatgatggacggccaaagcgatcagtttggccaacctggtacgggcaacaacagtgcc480tcttccggtacttcttcatctggcggttccccttttaacgatctatcaggggggaaggcc540ccttccggcaactccccttccggcaactactctcccgtcagtaccttctcacccccatcc600acgccaacgtcccctacctcaccgcttgatttcccttcttctcccaccaaagcagccggg660ggcagcacgccggtaaccgatcatcctgaccctgttggtagcgcgggcatcggggccgga720aattcggtggccttcaccagcgccggcgctaatcagacggtgctgcatgacaccattacc780gtgaaagcgggtcaggtgtttgatggcaaaggacaaaccttcaccgccggttcagaatta840ggcgatggcggccagtctgaaaaccagaaaccgctgtttatactggaagacggtgccagc900ctgaaaaacgtcaccatgggcgacgacggggcggatggtattcatctttacggtgatgcc960aaaatagacaatctgcacgtcaccaacgtgggtgaggacgcgattaccgttaagccaaac1020agcgcgggcaaaaaatcccacgttgaaatcactaacagttccttcgagcacgcctctgac1080aagatcctgcagctgaatgccgatactaacctgagcgttgacaacgtgaaggccaaagac1140tttggtacttttgtacgcactaacggcggtcaacagggtaactgggatctgaatctgagc1200catatcagcgcagaagacggtaagttctcgttcgttaaaagcgatagcgaggggctaaac1260gtcaataccagtgatatctcactgggtgatgttgaaaaccactacaaagtgccgatgtcc1320gccaacctgaaggtggctgaatga1344上述核苷酸和氨基酸序列是已經(jīng)公開的，并在Beer等的美國專利序列號NO.09/120,927中有進(jìn)一步的描述，此處，這兩個專利全文引用作為參考。源于丁香假單孢菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.7的氨基酸序列，如下所示MetGlnSerLeuSerLeuAsnSerSerSerLeuGlnThrProAlaMet151015AlaLeuValLeuValArgProGluAlaGluThrThrGlySerThrSer202530SerLysAlaLeuGlnGluValValValLysLeuAlaGluGluLeuMet354045ArgAsnGlyGlnLeuAspAspSerSerProLeuGlyLysLeuLeuAla505560LysSerMetAlaAlaAspGlyLysAlaGlyGlyGlyIleGluAspVal65707580IleAlaAlaLeuAspLysLeuIleHisGluLysLeuGlyAspAsnPhe859095GlyAlaSerAlaAspSerAlaSerGlyThrGlyGlnGlnAspLeuMet100105110ThrGlnValLeuAsnGlyLeuAlaLysSerMetLeuAspAspLeuLeu115120125ThrLysGlnAspGlyGlyThrSerPheSerGluAspAspMetProMet130135140LeuAsnLysIleAlaGlnPheMetAspAspAsnProAlaGlnPhePro145150155160LysProAspSerGlySerTrpValAsnGluLeuLysGluAspAsnPhe165170175LeuAspGlyAspGluThrAlaAlaPheArgSerAlaLeuAspIleIle180185190GlyGlnGlnLeuGlyAsnGlnGlnSerAspAlaGlySerLeuAlaGly195200205ThrGlyGlyGlyLeuGlyThrProSerSerPheSerAsnAsnSerSer210215220ValMetGlyAspProLeuIleAspAlaAsnThrGlyProGlyAspSer225230235240GlyAsnThrArgGlyGluAlaGlyGlnLeuIleGlyGluLeuIleAsp245250255ArgGlyLeuGlnSerValLeuAlaGlyGlyGlyLeuGlyThrProVal260265270AsnThrProGlnThrGlyThrSerAlaAsnGlyGlyGlnSerAlaGln275280285AspLeuAspGlnLeuLeuGlyGlyLeuLeuLeuLysGlyLeuGluAla290295300ThrLeuLysAspAlaGlyGlnThrGlyThrAspValGlnSerSerAla305310315320AlaGlnIleAlaThrLeuLeuValSerThrLeuLeuGlnGlyThrArg325330335AsnGlnAlaAlaAla340此過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的分子量為34-35kDa。其富含甘氨酸(大約13.5％)，但缺乏半胱氨酸和酪氨酸。在He，S.Y.，etal.，“Pseudomonassyringaepv.syringaeHarpinPssaProteinthatisSecretedviatheHrpPathwayandElicitstheHypersensitiveResponseinPlants，”Cell731255-1266(1993)”中對這個源自丁香假單孢菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽有進(jìn)一步的描述，此處全文引用作為參考。編碼此源自丁香假單孢菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.8所示的核苷酸序列，SEQ.IDNO.8所示核苷酸序列如下atgcagagtctcagtcttaacagcagctcgctgcaaaccccggcaatggcccttgtcctg60gtacgtcctgaagccgagacgactggcagtacgtcgagcaaggcgcttcaggaagttgtc120gtgaagctggccgaggaactgatgcgcaatggtcaactcgacgacagctcgccattggga180aaactgttggccaagtcgatggccgcagatggcaaggcgggcggcggtattgaggatgtc240atcgctgcgctggacaagctgatccatgaaaagctcggtgacaacttcggcgcgtctgcg300gacagcgcctcgggtaccggacagcaggacctgatgactcaggtgctcaatggcctggcc360aagtcgatgctcgatgatcttctgaccaagcaggatggcgggacaagcttctccgaagac420gatatgccgatgctgaacaagatcgcgcagttcatggatgacaatcccgcacagtttccc480aagccggactcgggctcctgggtgaacgaactcaaggaagacaacttccttgatggcgac540gaaacggctgcgttccgttcggcactcgacatcattggccagcaactgggtaatcagcag600agtgacgctggcagtctggcagggacgggtggaggtctgggcactccgagcagtttttcc660aacaactcgtccgtgatgggtgatccgctgatcgacgccaataccggtcccggtgacagc720ggcaatacccgtggtgaagcggggcaactgatcggcgagcttatcgaccgtggcctgcaa780tcggtattggccggtggtggactgggcacacccgtaaacaccccgcagaccggtacgtcg840gcgaatggcggacagtccgctcaggatcttgatcagttgctgggcggcttgctgctcaag900ggcctggaggcaacgctcaaggatgccgggcaaacaggcaccgacgtgcagtcgagcgct960gcgcaaatcgccaccttgctggtcagtacgctgctgcaaggcacccgcaatcaggctgca1020gcctga1026上述核苷酸和氨基酸序列是已經(jīng)公開的，并在Collmer等的美國專利NO.5,708,139和Wei等的美國專利NO.5,776,889中有進(jìn)一步的描述，此處，這兩個專利全文引用作為參考。源于丁香假單孢菌的另一過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.9的氨基酸序列，如下所示MetSerIleGlyIleThrProArgProGlnGlnThrThrThrProLeu151015AspPheSerAlaLeuSerGlyLysSerProGlnProAsnThrPheGly202530GluGlnAsnThrGlnGlnAlaIleAspProSerAlaLeuLeuPheGly354045SerAspThrGlnLysAspValAsnPheGlyThrProAspSerThrVal505560GlnAsnProGlnAspAlaSerLysProAsnAspSerGlnSerAsnIle65707580AlaLysLeuIleSerAlaLeuIleMetSerLeuLeuGlnMetLeuThr859095AsnSerAsnLysLysGlnAspThrAsnGlnGluGlnProAspSerGln100105110AlaProPheGlnAsnAsnGlyGlyLeuGlyThrProSerAlaAspSer115120125GlyGlyGlyGlyThrProAspAlaThrGlyGlyGlyGlyGlyAspThr130135140ProSerAlaThrGlyGlyGlyGlyGlyAspThrProThrAlaThrGly145150155160GlyGlyGlySerGlyGlyGlyGlyThrProThrAlaThrGlyGlyGly165170175SerGlyGlyThrProThrAlaThrGlyGlyGlyGluGlyGlyValThr180185190ProGlnIleThrProGlnLeuAlaAsnProAsnArgThrSerGlyThr195200205GlySerValSerAspThrAlaGlySerThrGluGlnAlaGlyLysIle210215220AsnValValLysAspThrIleLysValGlyAlaGlyGluValPheAsp225230235240GlyHisGlyAlaThrPheThrAlaAspLysSerMetGlyAsnGlyAsp245250255GlnGlyGluAsnGlnLysProMetPheGluLeuAlaGluGlyAlaThr260265270LeuLysAsnValAsnLeuGlyGluAsnGluValAspGlyIleHisVal275280285LysAlaLysAsnAlaGlnGluValThrIleAspAsnValHisAlaGln290295300AsnValGlyGluAspLeuIleThrValLysGlyGluGlyGlyAlaAla305310315320ValThrAsnLeuAsnIleLysAsnSerSerAlaLysGlyAlaAspAsp325330335LysValValGlnLeuAsnAlaAsnThrHisLeuLysIleAspAsnPhe340345350LysAlaAspAspPheGlyThrMetValArgThrAsnGlyGlyLysGln355360365PheAspAspMetSerIleGluLeuAsnGlyIleGluAlaAsnHisGly370375380LysPheAlaLeuValLysSerAspSerAspAspLeuLysLeuAlaThr385390395400GlyAsnIleAlaMetThrAspValLysHisAlaTyrAspLysThrGln405410415AlaSerThrGlnHisThrGluLeu420此蛋白或多肽是酸性的，富含甘氨酸，不含半胱氨酸，并且缺乏芳香族氨基酸。編碼此源自丁香假單孢菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.10所示的核苷酸序列，SEQ.IDNO.10所示核苷酸序列如下tccacttcgctgattttgaaattggcagattcatagaaacgttcaggtgtggaaatcagg60ctgagtgcgcagatttcgttgataagggtgtggtactggtcattgttggtcatttcaagg120cctctgagtgcggtgcggagcaataccagtcttcctgctggcgtgtgcacactgagtcgc180aggcataggcatttcagttccttgcgttggttgggcatataaaaaaaggaacttttaaaa240acagtgcaatgagatgccggcaaaacgggaaccggtcgctgcgctttgccactcacttcg300agcaagctcaaccccaaacatccacatccctatcgaacggacagcgatacggccacttgc360tctggtaaaccctggagctggcgtcggtccaattgcccacttagcgaggtaacgcagcat420gagcatcggcatcacaccccggccgcaacagaccaccacgccactcgatttttcggcgct480aagcggcaagagtcctcaaccaaacacgttcggcgagcagaacactcagcaagcgatcga540cccgagtgcactgttgttcggcagcgacacacagaaagacgtcaacttcggcacgcccga600cagcaccgtccagaatccgcaggacgccagcaagcccaacgacagccagtccaacatcgc660taaattgatcagtgcattgatcatgtcgttgctgcagatgctcaccaactccaataaaaa720gcaggacaccaatcaggaacagcctgatagccaggctcctttccagaacaacggcgggct780cggtacaccgtcggccgatagcgggggcggcggtacaccggatgcgacaggtggcggcgg840cggtgatacgccaagcgcaacaggcggtggcggcggtgatactccgaccgcaacaggcgg900tggcggcagcggtggcggcggcacacccactgcaacaggtggcggcagcggtggcacacc960cactgcaacaggcggtggcgagggtggcgtaacaccgcaaatcactccgcagttggccaa1020ccctaaccgtacctcaggtactggctcggtgtcggacaccgcaggttctaccgagcaagc1080cggcaagatcaatgtggtgaaagacaccatcaaggtcggcgctggcgaagtctttgacgg1140ccacggcgcaaccttcactgccgacaaatctatgggtaacggagaccagggcgaaaatca1200gaagcccatgttcgagctggctgaaggcgctacgttgaagaatgtgaacctgggtgagaa1260cgaggtcgatggcatccacgtgaaagccaaaaacgctcaggaagtcaccattgacaacgt1320gcatgcccagaacgtcggtgaagacctgattacggtcaaaggcgagggaggcgcagcggt1380cactaatctgaacatcaagaacagcagtgccaaaggtgcagacgacaaggttgtccagct1440caacgccaacactcacttgaaaatcgacaacttcaaggccgacgatttcggcacgatggt1500tcgcaccaacggtggcaagcagtttgatgacatgagcatcgagctgaacggcatcgaagc1560taaccacggcaagttcgccctggtgaaaagcgacagtgacgatctgaagctggcaacggg1620caacatcgccatgaccgacgtcaaacacgcctacgataaaacccaggcatcgacccaaca1680caccgagctttgaatccagacaagtagcttgaaaaaagggggtggactc1729上述核苷酸和氨基酸序列是已經(jīng)公開的，并在Collmer等的美國專利申請NO.09/120,817中有進(jìn)一步的描述，此處全文引用作為參考。源于青枯假單胞菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.11的氨基酸序列，如下所示MetSerValGlyAsnIleGlnSerProSerAsnLeuProGlyLeuGln151015AsnLeuAsnLeuAsnThrAsnThrAsnSerGlnGlnSerGlyGlnSer202530ValGlnAspLeuIleLysGlnValGluLysAspIleLeuAsnIleIle354045AlaAlaLeuValGlnLysAlaAlaGlnSerAlaGlyGlyAsnThrGly505560AsnThrGlyAsnAlaProAlaLysAspGlyAsnAlaAsnAlaGlyAla65707580AsnAspProSerLysAsnAspProSerLysSerGlnAlaProGlnSer859095AlaAsnLysThrGlyAsnValAspAspAlaAsnAsnGlnAspProMet100105110GlnAlaLeuMetGlnLeuLeuGluAspLeuValLysLeuLeuLysAla115120125AlaLeuHisMetGlnGlnProGlyGlyAsnAspLysGlyAsnGlyVal130135140GlyGlyAlaAsnGlyAlaLysGlyAlaGlyGlyGlnGlyGlyLeuAla145150155160GluAlaLeuGlnGluIleGluGlnIleLeuAlaGlnLeuGlyGlyGly165170175GlyAlaGlyAlaGlyGlyAlaGlyGlyGlyValGlyGlyAlaGlyGly180185190AlaAspGlyGlySerGlyAlaGlyGlyAlaGlyGlyAlaAsnGlyAla195200205AspGlyGlyAsnGlyValAsnGlyAsnGlnAlaAsnGlyProGlnAsn210215220AlaGlyAspValAsnGlyAlaAsnGlyAlaAspAspGlySerGluAsp225230235240GlnGlyGlyLeuThrGlyValLeuGlnLysLeuMetLysIleLeuAsn245250255AlaLeuValGlnMetMetGlnGlnGlyGlyLeuGlyGlyGlyAsnGln260265270AlaGlnGlyGlySerLysGlyAlaGlyAsnAlaSerProAlaSerGly275280285AlaAsnProGlyAlaAsnGlnProGlySerAlaAspAspGlnSerSer290295300GlyGlnAsnAsnLeuGlnSerGlnIleMetAspValValLysGluVal305310315320ValGlnIleLeuGlnGlnMetLeuAlaAlaGlnAsnGlyGlySerGln325330335GlnSerThrSerThrGlnProMet340在Arlat，M.，etal.，“PopAl，aProteinwhichInducesaHypersensifive-likeResponseinSpecificPetuniaGenotypes，isSecretedviatheHrpPathwayofPseudomonassolanacearum，”EMBOJ.13543-533(1994)中對這個源自青枯假單胞菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽有進(jìn)一步的描述，此處全文引用作為參考。它是由源自青枯假單胞菌、并含有相應(yīng)于SEQ.IDNO.12所示的核苷酸序列的DNA分子編碼的，SEQ.IDNO.12所示核苷酸序列如下atgtcagtcggaaacatccagagcccgtcgaacctcccgggtctgcagaacctgaacctc60aacaccaacaccaacagccagcaatcgggccagtccgtgcaagacctgatcaagcaggtc120gagaaggacatcctcaacatcatcgcagccctcgtgcagaaggccgcacagtcggcgggc180ggcaacaccggtaacaccggcaacgcgccggcgaaggacggcaatgccaacgcgggcgcc240aacgacccgagcaagaacgacccgagcaagagccaggctccgcagtcggccaacaagacc300ggcaacgtcgacgacgccaacaaccaggatccgatgcaagcgctgatgcagctgctggaa360gacctggtgaagctgctgaaggcggccctgcacatgcagcagcccggcggcaatgacaag420ggcaacggcgtgggcggtgccaacggcgccaagggtgccggcggccagggcggcctggcc480gaagcgctgcaggagatcgagcagatcctcgcccagctcggcggcggcggtgctggcgcc540ggcggcgcgggtggcggtgtcggcggtgctggtggcgcggatggcggctccggtgcgggt600ggcgcaggcggtgcgaacggcgccgacggcggcaatggcgtgaacggcaaccaggcgaac660ggcccgcagaacgcaggcgatgtcaacggtgccaacggcgcggatgacggcagcgaagac720cagggcggcctcaccggcgtgctgcaaaagctgatgaagatcctgaacgcgctggtgcag780atgatgcagcaaggcggcctcggcggcggcaaccaggcgcagggcggctcgaagggtgcc840ggcaacgcctcgccggcttccggcgcgaacccgggcgcgaaccagcccggttcggcggat900gatcaatcgtccggccagaacaatctgcaatcccagatcatggatgtggtgaaggaggtc960gtccagatcctgcagcagatgctggcggcgcagaacggcggcagccagcagtccacctcg1020acgcagccgatgtaa1035上述核苷酸和氨基酸序列是已經(jīng)公開的，并在Wei等的美國專利NO.5,776,889中有進(jìn)一步的描述，此處全文引用作為參考。本發(fā)明的其他實施方案包括，但并不局限于源自胡蘿卜歐文氏菌和斯氏歐文氏菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的用途。在Cui，etal.，“TheRsmAMutantsofErwiniacarotovorasubsp.carotovoraStrainEcc71OverexpresshrpNEccandElicitaHypersensitiveReaction-likeResponseinTobaccoLeaves，”MPMI，9(7)565-73(1996)中對胡蘿卜歐文氏菌過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的分離有描述，此處全文引用作為參考。在Ahmad，etal.，“HarpinisNotNecessaryforthePathogenicityofErwiniastewartiionMaize，”8thInt’l.Cong.Molec.Plant-MicrobeInteract.，July14-19，1996和Ahmad，etal.，“HarpinisNotNecessaryforthePathogenicityofErwiniastewartiionMaize，”Ann.Mtg.Am.Phytopath.Soc.July27-31，1996中提出了斯氏歐文氏菌過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽，此處全文引用作為參考。源自多種疫霉物種的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽描述于，Kaman，etal.，“ExtracellularProteinElicitorsfromPhytophthoraMostSpecificityandInductionofResistancetoBacterialandFungalPhytopathogens，”Molec.Plant-MicrobeInteract.，6(1)15-25(1993)；Ricci，etal.，“StructureandActivityofProteinsfromPathogenicFungiPhytophthoraElicitingNecrosisandAcquiredResistanceinTobacco，”Eur.J.Biochem.，183555-63(1989)；Ricci，etal.，“DifferentialProductionofParasiticein，andElicitorofNecrosisandResistanceinTobacco，byIsolatesofPhytophthoraparasitica，”PlantPath.41298-307(1992)；Baillreul，etal.，“ANewElicitoroftheHypersensitiveResponseinTobaccoAFungalGlycoproteinElicitsCellDeath，ExpressionofDefenseGenes，ProductionofSalicylicAcid，andInductionofSystemicAcquiredResistance，”PlantJ.，8(4)551-60(1995)，和Bonnet，etal.，“AcquiredResistanceTriggeredbyElicitorsinTobaccoandOtherPlants，”Eur.J.PlantPath.，102181-92(1996)，此處全文引用作為參考。按照本發(fā)明，另一可利用的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽來源于源密執(zhí)安棍狀桿菌壞腐亞種，并在美國專利申請序號NO.09/136,625中有描述，此處全文引用作為參考。按照本發(fā)明，也可對上述過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的片段以及源自其他病原體的全長誘導(dǎo)子的片段進(jìn)行利用?？衫枚喾N方法來獲得合適的片段。采用亞克隆基因片段的常規(guī)分子遺傳學(xué)操作，就可獲得編碼已知誘導(dǎo)子蛋白的基因的亞克隆，這些操作在Sambrooketal.，MolecularCloningALaboratoryManual，ColdSpringsLaboratory，ColdSpringsHarbor，NewYork(1989)，和Ausubeletal.(ed.)，CurrentProtocolsinMolecularBiology，JohnWiley&Sons(NewYork，NY)(1999andprecedingeditions)中有描述，此處全文引用作為參考。然后，在細(xì)菌細(xì)胞的體內(nèi)或體外對這些亞克隆進(jìn)行表達(dá)來生產(chǎn)更小的蛋白或多肽，以便用于檢測誘導(dǎo)子的活性，例如，可選用Wei，Z-M等，Science25785-88(1992)中提出的方法，此文章在此處全文引用作為參考。在另一種方法中，在蛋白的一級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)之上，結(jié)合利用PCR技術(shù)和選來代表蛋白特定部分的特定引物組可以合成誘導(dǎo)子蛋白基因片段。Erlich，H.A.，etal.，“RecentAdvancesinthePolymeraseChainReaction，”Science2521643-51(1991)，此文在此處全文引用作為參考。隨后，如上文所述，將這些基因片段克隆到適當(dāng)載體中，以便在細(xì)菌細(xì)胞中表達(dá)截短的蛋白或多肽。作為一種替代方法，可利用蛋白水解酶如糜蛋白酶或葡萄球菌蛋白酶A或胰蛋白酶來消化全長蛋白，從而得到誘導(dǎo)子蛋白的片段。在誘導(dǎo)子蛋白的氨基酸序列基礎(chǔ)之上，不同的蛋白分解酶就可能在不同的位點切割誘導(dǎo)子蛋白。通過蛋白水解得到的許多片段有可能是有活性的抗性誘導(dǎo)子。也可利用化學(xué)合成來制備合適的片段。這樣的合成是利用待制備的誘導(dǎo)子的已知氨基酸序來完成的。另外，將全長誘導(dǎo)子置于高溫和壓力下也會得到其片段。然后，利用傳統(tǒng)的方法(如色譜，SDS-PAGE)對這些片段進(jìn)行分離。能夠引起過敏反應(yīng)的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子的合適片段的一個實例是SEQIDNO.3表示的、解淀粉歐文氏菌過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽片段。此片段可為SEQIDNO.3所示氨基酸序列的C-端片段、SEQIDNO.3所示氨基酸序列的N-端片段或SEQIDNO.3所示氨基酸序列的內(nèi)部片段。SEQIDNO.3所示氨基酸序列的C-端片段可包括SEQIDNO.3的105-403位氨基酸。SEQIDNO.3所示氨基酸序列的N-端片段可包括SEQIDNO.3的1-98、1-104、1-122、1-168、1-218、1-266、1-342、1-321、和1-372位氨基酸。SEQIDNO.3所示氨基酸序列的內(nèi)部片段可包括SEQIDNO.3的76-209、105-209、99-209、137-204、137-200、109-204、109-200、137-180及105-180位氨基酸。編碼這些片段的DNA分子也能用于本發(fā)明的嵌合基因中。也可(或替代性的)通過，如去除或添加對多肽的特性、二級結(jié)構(gòu)和親水性產(chǎn)生很小影響的氨基酸來對變體進(jìn)行修飾。例如，可將多肽連接到蛋白N-末端的信號(或前導(dǎo))序列上，而此蛋白可以共翻譯方式或在翻譯后指導(dǎo)蛋白的轉(zhuǎn)移。也可將多肽連接到接頭或其他序列上來輔助合成、純化或鑒定這些多肽。本發(fā)明的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽優(yōu)選利用傳統(tǒng)技術(shù)、以純化形式(優(yōu)選至少80％，更優(yōu)選90％的純度)制備得到。一般來講，本發(fā)明中的蛋白或多肽是分泌到重組宿主細(xì)胞的生長培養(yǎng)基(下文有討論)中的。另一種選擇是制備得到了本發(fā)明中的蛋白或多肽但并不分泌到生長培養(yǎng)基中。在這些情況下，為了對蛋白進(jìn)行分離，就要繁殖攜帶有重組質(zhì)粒的宿主細(xì)胞(如大腸桿菌)，通過超聲作用、熱或化學(xué)處理來使宿主細(xì)胞裂解，然后對勻漿進(jìn)行離心以除去細(xì)菌碎片。隨后將上清液進(jìn)行連續(xù)的硫酸銨沉淀。在適當(dāng)大小的葡聚糖或聚丙烯酰胺柱中對含有有益過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的部分進(jìn)行凝膠過濾來分離蛋白。如果有必要，此蛋白級分還可通過HPLC進(jìn)行進(jìn)一步純化。通過對假定候選蛋白或多肽進(jìn)行分離并檢測他們的誘導(dǎo)子活性就能對其他過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子進(jìn)行迅速鑒定，如Weietal.，“Harpin，ElicitorofHypersensitiveResponseProducedbythePlantPathogenErwiniaamylovora”Science25785-88(1992)中所描述的那樣，此文在此處全文引用作為參考。通過利用它們浸潤適當(dāng)?shù)闹参锝M織就可對培養(yǎng)上清液中的無細(xì)胞制劑進(jìn)行誘導(dǎo)子活性(即局部壞死)檢測。鑒定后，就可利用那些本領(lǐng)域中的熟練技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)對編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子的DNA分子進(jìn)行分離。通過確定這些DNA分子能否在嚴(yán)格條件下與含有SEQIDNO.2、4、6、8、10或12所示核苷酸序列的DNA分子進(jìn)行雜交，也能對編碼其他過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子進(jìn)行鑒定。合適的嚴(yán)格條件的實例是在大約37℃下、利用含有0.9M檸檬酸鈉(“SSC”)緩沖液的雜交培養(yǎng)基進(jìn)行雜交，隨后在37℃下利用0.2×SSC緩沖液進(jìn)行洗滌。更高的嚴(yán)格性可很容易的通過提高雜交或洗滌條件的溫度、或提高雜交或洗滌培養(yǎng)基中鈉的濃度來實現(xiàn)。利用多種已知方法中的任一種，如利用含有蛋白的溶液來封閉膜、向雜交緩沖液中添加異源RNA、DNA和SDS以及用RNA酶來處理等也可控制非特異性結(jié)合。洗滌一般是在嚴(yán)格條件或比嚴(yán)格低一些的條件下進(jìn)行的。示范性的高嚴(yán)格條件包括在含有1MNaCl、50mMTris-HCl、pH7.4、10mMEDTA、0.1％十二烷基硫酸鈉(SDS)、0.2％ficoll、0.2％聚乙烯吡咯烷酮、0.2％牛血清白蛋白及50μg/ml大腸桿菌DNA的雜交培養(yǎng)基中、在大約42-65℃下進(jìn)行最長達(dá)約20小時的雜交，隨后在約42-65℃下的0.2×SSC緩沖液中洗滌。利用傳統(tǒng)的重組DNA技術(shù)可將編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白的DNA分子摻入細(xì)胞中。一般來說，這包括將DNA分子插入到一表達(dá)系統(tǒng)中，而對此表達(dá)系統(tǒng)來講，此DNA分子是異源的(也即不是正常存在的)。以適當(dāng)?shù)挠辛x方向和正確的讀碼框架將異源DNA分子插入表達(dá)系統(tǒng)或載體中。此載體含有插入的蛋白編碼序列轉(zhuǎn)錄和翻譯必須的元件。Cohen和Boyer的美國專利NO.4,237,224描述了利用限制性酶切割和利用DNA連接酶連接來制備以重組質(zhì)粒形式存在的表達(dá)系統(tǒng)，此專利在此處全文引用作為參考。隨后，利用轉(zhuǎn)化方式將這些重組質(zhì)粒導(dǎo)入含有在組織培養(yǎng)物中生長的原核生物和真核細(xì)胞等單細(xì)胞培養(yǎng)物中，并在其中進(jìn)行復(fù)制。也可將重組基因?qū)氩《局?，例如疫苗病毒。將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入病毒感染過的細(xì)胞中就可得到重組病毒。合適的載體包括，但并不局限于下列病毒載體如λ載體系統(tǒng)gt11、gtWES.tB、Charon4，及質(zhì)粒載體如pBR322、pBR325、pACYC177、pACYC1084、pUC8、pUC9、pUC18、pUC19、pLG339、pR290、pKC37、pKC101、SV40、pBluescriptIISK+/-(見Stratagene的“stratagene克隆系統(tǒng)”目錄(1993)，LaJolla，Calif，此處全文引用作為參考)、pQE、pIH821、pGEX、pET系列F.W.Studieret.al.，“UseofT7RNAPolymerasetoDirectExpressionofClonedGenes，”GeneExpressionTechnologyvol.185(1990)，此處全文引用作為參考)，以及其衍生物。可通過轉(zhuǎn)化，尤其是轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、轉(zhuǎn)移或電穿孔將重組分子導(dǎo)入細(xì)胞中。利用本領(lǐng)域中的標(biāo)準(zhǔn)克隆方法，如Sambrooketal.，MolecularCloningALaboratoryManual，ColdSpringsLaboratory，ColdSpringsHarbor，NewYork(1989)中所描述，將DNA序列克隆到載體中，此文在此處全文引用作為參考。多種宿主載體系統(tǒng)可用于表達(dá)蛋白編碼序列。主要的是載體系統(tǒng)必須能與所用的宿主細(xì)胞相容。宿主載體系統(tǒng)包括但并不局限于下列系統(tǒng)利用噬菌體DNA轉(zhuǎn)化的細(xì)菌、質(zhì)粒DNA、或粘粒DNA；微生物如含有酵母菌載體的酵母菌；病毒(如痘苗病毒、腺病毒等)感染過的哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)；病毒(如桿狀病毒)感染過的昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)；以及細(xì)菌感染過的植物細(xì)胞。這些載體的表達(dá)元件在強(qiáng)度和特異性上有所不同。依賴于所用宿主載體系統(tǒng)的不同，可選用眾多合適的轉(zhuǎn)錄和翻譯元件中的任何一種。不同的遺傳信號和加工事件控制著基因表達(dá)的多個水平(如DNA轉(zhuǎn)錄和信使RNA(mRNA)翻譯)。DNA轉(zhuǎn)錄依賴啟動子的存在，而啟動子是一指導(dǎo)RNA聚合酶結(jié)合從而促進(jìn)mRNA合成的DNA序列。真核啟動子的DNA序列與原核啟動子的DNA序列不同。此外，真核啟動子和其伴隨的遺傳信號可能不為原核系統(tǒng)識別或不能在原核系統(tǒng)中發(fā)揮作用，此外，原核啟動子不為真核細(xì)胞所識別，不能在真核細(xì)胞中發(fā)揮作用。類似的，mRNA在原核生物中的翻譯依賴于與適當(dāng)?shù)摹⑴c真核信號不同的原核信號的存在。原核生物中，mRNA的有效翻譯要求在mRNA上具有稱為Shine-Dalgarno(SD)序列的核糖體結(jié)合位點。此序列是位于起始密碼子，一般為AUG前的mRNA的一個短核苷酸序列，編碼蛋白氨基端的蛋氨酸。SD序列與16sRNA(核糖體RNA)的3′末端互補，并可能通過與rRNA形成雙鏈體來保證核糖體的正確定位，從而促進(jìn)mRNA與核糖體的結(jié)合。對最大化基因表達(dá)的綜述參見RobertsandLauer，MethodsinEnzymology，68473(1979)，此處全文引用作為參考。啟動子在它們的“強(qiáng)度”(也即它們促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的能力)上有所不同。對于表達(dá)一個克隆的基因來講，為了獲得高水平的轉(zhuǎn)錄從而對基因進(jìn)行表達(dá)，就需要利用強(qiáng)啟動子。依賴于所用的宿主細(xì)胞系統(tǒng)，可以選用多種合適的啟動子中的任一種。例如，當(dāng)在大腸桿菌、其噬菌體或質(zhì)粒中克隆時，啟動子如大腸桿菌噬菌體λ的T7噬菌體啟動子、lac啟動子、trp啟動子、recA啟動子、核糖體RNA啟動子、PR和PL啟動子，以及其他包括但不局限于lacUV5、ompF、bla、1pp等在內(nèi)的其他啟動子可用于指導(dǎo)相鄰DNA節(jié)段的高水平轉(zhuǎn)錄。此外，利用重組DNA或其他合成DNA技術(shù)制得的雜交trp-lavUV5(tac)啟動子或其他大腸桿菌啟動子可用于提供插入基因的轉(zhuǎn)錄。除非在特異性誘導(dǎo)條件下，可選擇細(xì)菌宿主細(xì)胞菌株和表達(dá)載體來抑制啟動子的作用。在特定操作中，添加特定誘導(dǎo)因子對于插入DNA的有效轉(zhuǎn)錄來說是必須的。例如，lac操縱子是通過添加乳糖或IPTG(異丙基硫代-β-半乳糖苷)來進(jìn)行誘導(dǎo)的。其他多種操縱子，如trp、pro等是在不同的控制之下的。原核細(xì)胞中，有效基因轉(zhuǎn)錄和翻譯也要求特異性起始信號。這些轉(zhuǎn)錄和翻譯起始信號可能在強(qiáng)度上有所不同，強(qiáng)度是分別以基因特異性信使RNA和合成的蛋白的量為指標(biāo)來測定的。含有啟動子的DNA表達(dá)載體也可能含有多種“強(qiáng)”轉(zhuǎn)錄和/或翻譯起始信號的任意組合。例如，大腸桿菌中的有效翻譯要求在起始密碼子(“ATG”)5′端大約7-9堿基的SD序列提供核糖體結(jié)合位點。因此，宿主細(xì)胞核糖體可利用的任何SD-ATG組合都可進(jìn)行應(yīng)用。這樣的組合包括但不局限于來自大腸桿菌噬菌體λ的cro基因或N基因的SD-AUG組合、或來自大腸桿菌的色氨酸E、D、C、B或A基因的SD-AUG組合。此外，可應(yīng)用任何通過重組DNA技術(shù)或其他涉及合成核苷酸摻入的技術(shù)制得的SD-AUG組合。一旦將分離的、編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白的DNA分子克隆到表達(dá)系統(tǒng)內(nèi)，這些DNA分子就將會容易摻入宿主細(xì)胞。這樣的摻入可通過上文指出的多種轉(zhuǎn)化方式來進(jìn)行，這要依賴于載體/宿主細(xì)胞系統(tǒng)。合適的宿主細(xì)胞包括，但并不局限于細(xì)菌、病毒、酵母菌、哺乳動物細(xì)胞、昆蟲、植物等。因為能分泌過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的重組宿主細(xì)胞是需要的，所以也優(yōu)選利用III型分泌系統(tǒng)來轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，這是根據(jù)Hametal.，“AClonedErwiniachrysanthemiHrp(TypeIIIProteinSecretion)SystemFunctionsinEscherichiacolitoDeliverPseudomonassyringaeAvrSignalstoPlantCellsandSecreteAvrProteinsinCulture，”Microbiol.9510206-10211(1998)來進(jìn)行的，此處全文引用作為參考?？砂凑丈衔乃鰪乃拗骷?xì)胞或生長培養(yǎng)基中分離過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽。本發(fā)明中的方法可用于在收獲前或收獲后對水果或蔬菜進(jìn)行處理。適當(dāng)?shù)氖斋@前應(yīng)用方法包括，但并不局限于對整個植物和水果進(jìn)行高壓或低壓噴藥。適當(dāng)?shù)氖斋@后應(yīng)用方法包括，但并不局限于低壓或高壓噴藥、包被或浸潤。本領(lǐng)域中的熟練技術(shù)人員能想象到其他合適的應(yīng)用方法(收獲前或收獲后)，只要它們能夠?qū)崿F(xiàn)過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白與水果或蔬菜的接觸。一旦對水果和蔬菜進(jìn)行處理，就可利用傳統(tǒng)方法對這些水果或蔬菜進(jìn)行處理、包裝、運輸和加工，以便將這些農(nóng)產(chǎn)品運輸?shù)郊庸S或最終消費者手中。按照本發(fā)明，過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白可單獨或以與其他物質(zhì)混合的形式用于水果或蔬菜。另外，過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白可在不同時間、獨立于其他物質(zhì)用于水果或蔬菜。按照本發(fā)明中的實施方案，一種適用于處理水果或蔬菜的組合物含有包含在載體中的、分離的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽。適當(dāng)?shù)妮d體包括水、水溶液、漿液或干粉。雖然過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白適用量的多少依賴于組合物的應(yīng)用頻率以及不同過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的效力，但組合物優(yōu)選含有大于約500nM的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白。雖然沒有要求，但組合物可含有額外的添加劑，這些添加劑包括肥料、殺昆蟲劑、殺真菌劑、殺線蟲劑以及他們的混合物。適當(dāng)?shù)姆柿习?NH4)2NO3。適當(dāng)?shù)臍⒗ハx劑的一個實施例是馬拉硫磷。有用的殺真菌劑包括克菌丹。其他適當(dāng)?shù)奶砑觿┌ň彌_劑、潤濕劑、涂布劑以及催熟劑。這些物質(zhì)可用于加快本發(fā)明的作用過程或?qū)σ种剖斋@后疾病或脫水提供附加的益處。正如上文所示，本發(fā)明的一個實施方案涉及利用分離的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽來處理水果或蔬菜?？蓮奶烊粊碓?如解淀粉歐文氏菌，丁香假單孢菌，等)或編碼蛋白或多肽的DAN分子轉(zhuǎn)化過的重組來源中分離過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽。本發(fā)明的另一方面涉及DNA構(gòu)建體和宿主細(xì)胞、表達(dá)系統(tǒng)及含有異源DNA構(gòu)建體的轉(zhuǎn)基因植物。DNA構(gòu)建體包括編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子、可操作性偶連到DNA分子5′端并可有效轉(zhuǎn)錄水果或蔬菜組織中的DNA分子的植物表達(dá)啟動子、以及可操作性偶連到DNA分子3′端的調(diào)節(jié)區(qū)域。DNA分子在水果或蔬菜中的表達(dá)給予了水果或蔬菜對收獲后疾病或脫水的抗性。這些異源DNA分子的表達(dá)需要可在植物組織中操作的適當(dāng)啟動子的存在。在本發(fā)明的一些實施方案中，如果不是在全部組織中，異源DNA分子在多種組織中表達(dá)是需要的。在它們的調(diào)控下，這些啟動子產(chǎn)生了編碼序列的組成型表達(dá)。示范性的組成啟動子包括，但并不局限于胭脂堿合成酶啟動子(Fraleyetal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA804803-4807(1983)，此處全文引用作為參考)和菜花花葉病毒35S啟動子(O’Delletal.，“IdentificationofDNASequencesRequiredforActivityoftheCauliflowerMosaicVirus35SPromoter，″Nature，313(6005)810-812(1985)，此處全文引用作為參考)。一般來講，雖然組成型表達(dá)適于表達(dá)DNA分子，但時間或組織調(diào)節(jié)的表達(dá)也是有需要的，在這種情況下可選用任何被調(diào)節(jié)的啟動子來獲得所要的表達(dá)，這對本領(lǐng)域中的熟練技術(shù)人員來說是很清楚的。通常情況下，時間或組織調(diào)節(jié)表達(dá)啟動子是與僅僅在特定發(fā)育階段或僅僅在特定組織中表達(dá)的DNA分子結(jié)合適用的。在本發(fā)明的另一實施方案中，是以組織特異性方式或環(huán)境調(diào)節(jié)方式(即誘導(dǎo)型啟動子)來指導(dǎo)異源DNA分子的表達(dá)的。發(fā)育控制下的組織特異性啟動子包括僅僅在特定組織中起始轉(zhuǎn)錄的啟動子。例如，番茄的E4和E8啟動子可用于指導(dǎo)轉(zhuǎn)基因番茄中異源DNA序列的水果特異性表達(dá)(Cordesetal.，PlantCell11025-1034(1989)；Deikmanetal.，EMBOJ.73315-3320(1988)；andDellaPennaetal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA836420-6424(1986)，此處全文引用作為參考)。另一水果特異性啟動子是PG啟動子(Birdetal.，PlantMolec.Biol.11651-662(1988)，此處全文引用作為參考)。另一組織特異性啟動子是來源于胚珠特異性BEL1基因啟動子的AP2啟動子，這在Reiseretal.，Cell83735-742(1995)中有描述，此處全文引用作為參考?？捎行в糜诜N子組織中的表達(dá)的啟動子包括，但并不局限于來自編碼種子貯存蛋白，如napin、cruciferin、菜豆蛋白等的基因的啟動子(見Kridl等的美國專利NO.5,420,034，此處全文引用作為參考)。其他的適當(dāng)啟動子包括那些來自編碼真核生物貯存蛋白基因的啟動子?？捎行в糜谌~組織中的表達(dá)的啟動子包括核酮糖二磷酸羧化酶小亞基啟動子?？捎行в糜趬K莖，尤其是馬鈴薯塊莖中的表達(dá)的啟動子包括patatin啟動子。通過誘導(dǎo)型啟動子影響轉(zhuǎn)錄的環(huán)境條件的例子包括厭氧條件、升高的溫度或光的存在。在一些植物中，對那些病原體侵入或壓力產(chǎn)生應(yīng)答的啟動子的利用也是需要的。例如，作為對植物特定病原體感染的應(yīng)答，可能需要限制蛋白或多肽的表達(dá)。病原體誘導(dǎo)的啟動子的一個實例是馬鈴薯的gstl啟動子，這在Strittmayer等的美國專利NO.5,750,874和5,723,760中有描述，此處全文引用作為參考。分離植物細(xì)胞或組織或整個植物中DNA分子的表達(dá)也利用mRNA的適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)錄終止和聚腺苷酸化作用?？蓪⒃谥参锛?xì)胞或組織中適用的3′調(diào)節(jié)區(qū)可操作性連接到第一和第二個DNA分子上。已知在植物中可對多種3′調(diào)節(jié)區(qū)域進(jìn)行操作。示范性3′調(diào)節(jié)區(qū)域包括，但并不局限于胭脂堿合成酶3′調(diào)節(jié)區(qū)域(Fraley，etal.，“ExpressionofBacterialGenesinPlantCells，”Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA，804803-4807(1983)，此處全文引用作為參考)和菜花花葉病毒3′調(diào)節(jié)區(qū)域(Odell，etal.，“IdentificationofDNASequencesRequiredforActivityoftheCauliflowerMosaicVirus35SPromoter，”Nature，313(6005)810-812(1985)此處全文引用作為參考)。利用已知的分子克隆技術(shù)，可以很容易的將啟動子和3′調(diào)節(jié)區(qū)域連接到DNA分子上，這些技術(shù)在Sambrooketal.，MolecularCloningALaboratoryManual，ColdSpringsLaboratory，ColdSpringsHarbor，NewYork(1989)中有描述，此處全文引用作為參考。利用本發(fā)明中的DNA分子來轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞的方法之一是對宿主細(xì)胞進(jìn)行粒子轟擊(稱為biolistic轉(zhuǎn)化)。這可通過多種方法來實現(xiàn)。第一個方法就包括向細(xì)胞中推進(jìn)惰性或生物活性粒子。這在Sanford等的美國專利NO.4,945,050、5,036,006和5,100,792中有公開，此處全文引用作為參考。一般來講，本方法包括在有效刺穿細(xì)胞外表面及摻入其內(nèi)部的條件下向細(xì)胞推進(jìn)惰性或生物活性粒子。在選用惰性粒子的情況下，可通過用含有異源DNA的載體包被粒子將載體導(dǎo)入細(xì)胞中。另外，利用載體來包圍靶細(xì)胞，這樣就可通過粒子的覺醒將載體導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。也可將生物活性粒子(如含有載體及異源DNA的干細(xì)菌細(xì)胞)推動到植物細(xì)胞內(nèi)。粒子轟擊的其他變化，不管是現(xiàn)在已知的還是將來開發(fā)的，都可選用。將DNA分子導(dǎo)入植物細(xì)胞的另一個方法是與其他實體，如小細(xì)胞、細(xì)胞、溶酶體或其他含有DNA分子的可融合的脂質(zhì)表面體，進(jìn)行原生質(zhì)體融合。Fraley，etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，791859-63(1982)，此處全文引用作為參考。也可通過電穿孔將DNA分子導(dǎo)入植物細(xì)胞中。Fromm，etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，825824(1985)，此處全文引用作為參考。在此技術(shù)中，在含有DNA分子的質(zhì)粒存在的條件下，對植物原生質(zhì)體進(jìn)行電穿孔。高場強(qiáng)的電脈沖可逆地滲透生物膜，從而將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞中。電穿孔后的植物原生質(zhì)體對細(xì)胞壁進(jìn)行改造，使其分裂并再生。將DNA分子導(dǎo)入植物細(xì)胞的另一方法是利用已經(jīng)用DNA分子轉(zhuǎn)化過的根癌土壤桿菌或發(fā)根土壤桿菌感染植物細(xì)胞。在本領(lǐng)域中已知的適當(dāng)條件下，培養(yǎng)轉(zhuǎn)化過的植物細(xì)胞來形成根或莖，并進(jìn)一步發(fā)育成植株。一般來講，此方法要包括利用細(xì)菌懸液來接種植物組織及在25-28℃下、在不含抗生素的再生培養(yǎng)基中對組織進(jìn)行48-72小時的培養(yǎng)。土壤桿菌屬是革蘭氏陰性根瘤菌科的代表屬。其各個種可引起根癌(根癌土壤桿菌)和發(fā)根病(發(fā)根土壤桿菌)。根癌腫瘤和發(fā)根病植物細(xì)胞可誘導(dǎo)來產(chǎn)生氨基酸衍生物冠癭堿，而此冠癭堿只能由細(xì)菌來分解代謝掉。負(fù)責(zé)冠癭堿表達(dá)的細(xì)菌基因是嵌合表達(dá)盒控制元件的便利來源。此外，對冠癭堿進(jìn)行檢測可用來鑒定轉(zhuǎn)化過的組織。利用發(fā)根土壤桿菌的Ri質(zhì)?；蚋┩寥罈U菌的Ti質(zhì)?？蓪愒催z傳序列如過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的編碼DNA分子導(dǎo)入適當(dāng)?shù)闹参锛?xì)胞中。利用土壤桿菌、經(jīng)由感染方式可將Ti或Ri質(zhì)粒轉(zhuǎn)送到植物細(xì)胞中，并穩(wěn)定整合到植物基因組中。Schell，J.，Science，2371176-83(1987)，此處全文引用作為參考。適合于轉(zhuǎn)化的植物組織包括葉組織、根組織、分生組織、合子和體細(xì)胞胚，以及花藥。轉(zhuǎn)化后，對轉(zhuǎn)化過的植物細(xì)胞進(jìn)行篩選和再生。優(yōu)選的，首先要利用，如與本發(fā)明中的DNA分子同步導(dǎo)入的選擇性標(biāo)記來簽定轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞。適當(dāng)?shù)倪x擇標(biāo)記包括，但并不局限于編碼抗生素抗性的標(biāo)記，如編碼卡那霉素抗性的標(biāo)記(Fraley，etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，804803-4807(1983)，此處全文引用作為參考)。已知在本領(lǐng)域中有多種抗生素抗性標(biāo)記，并且還在繼續(xù)鑒定其他的抗生素抗性標(biāo)記。按照本發(fā)明，任何已知的抗生素抗性標(biāo)記都可用于轉(zhuǎn)化和篩選轉(zhuǎn)化后的宿主細(xì)胞。在含有抗生素的選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)胞或組織，這樣一般只有那些表達(dá)抗生素抗性標(biāo)記的轉(zhuǎn)化體才能繼續(xù)生長。一旦獲得了重組植物細(xì)胞或組織，就可以利用它來再生成熟的植株。因此，本發(fā)明的另一方面涉及包含有編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的異源DAN分子的轉(zhuǎn)基因植物，其中的異源DNA分子是在能誘導(dǎo)水果或蔬菜組織DAN分子轉(zhuǎn)錄的啟動子的控制之下的。優(yōu)選的，將DNA分子插入到本發(fā)明中的轉(zhuǎn)基因植物的基因組中。利用培養(yǎng)的原生質(zhì)體進(jìn)行植株再生在Evans，etal.，HandbookofPlantCellCultures，Vol.1(MacMillanPublishingCo.，NewYork，1983)；andVasilI.R.(ed.)，CellCultureandSomaticCellGeneticsofPlants，Acad.Press，Orlando，Vol.I，1984，andVol.III(1986)中有描述，此處全文引用作為參考。實際上，已知所有的植物，包括單子葉植物和雙子葉植物，都可從培養(yǎng)的細(xì)胞或組織再生得到。再生方法因植物種的不同而不同，但一般來講，首先要提供轉(zhuǎn)化后的原生質(zhì)體懸液或含有轉(zhuǎn)化后的外植體的培養(yǎng)皿。形成愈傷組織并從愈傷組織誘導(dǎo)莖，隨后生根。另外，可以從愈組織來誘導(dǎo)形成胚。這些胚象天然胚一樣發(fā)芽，然后形成植株。培養(yǎng)基一般含有多種氨基酸和激素，如生長素和促細(xì)胞分裂素。向培養(yǎng)基中添加谷氨酸和脯氨酸，尤其是對一些種如玉米和苜蓿來說也是有益的。有效的再生要依賴于培養(yǎng)基、基因型及培養(yǎng)史。如果控制了這三個影響因素，一般來說再生是能繁殖和可重復(fù)的。將編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子穩(wěn)定摻入轉(zhuǎn)基因植物中后，就可通過有性雜交或通過制備栽培品種來轉(zhuǎn)移到其他植物中。對于有性雜交來講，可以選用多種標(biāo)準(zhǔn)的培育技術(shù)來進(jìn)行，這要依賴于待雜交的植物種的不同。可利用本領(lǐng)域中的熟練技術(shù)人員已知的普通農(nóng)業(yè)方法對栽培品種進(jìn)行繁殖。對于可給予收獲后疾病抗性的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽來講，雖然不能給予對感染的絕對免疫，但疾病的嚴(yán)重程度可以減輕，并且癥狀的出現(xiàn)也會延遲。病變數(shù)目、病變大小、真菌病原體的芽孢形成都有所減少。此控制收獲后疾病的方法具有能控制以前不能治療的疾病并避免使用感染性藥物或?qū)Νh(huán)境有危害的物質(zhì)的潛力。對于脫水來講，雖然不能對脫水給予完全保護(hù)，但可降低脫水的嚴(yán)重程度。脫水保護(hù)不可避免的要依賴于，至少在一定程度上依賴于其他的條件，如貯存溫度、光照等。然而，此控制脫水的方法具有減少其他多種處理(如利用石蠟包被)的潛力，這樣就可降低成本，至少基本上不增加成本。本發(fā)明的方法可用于控制多種病原體引起的多種收獲后疾病。按照本發(fā)明，可進(jìn)行處理的收獲后疾病和致病因素包括，但不局限于青霉(如指狀青霉)、葡萄孢(如灰色葡萄孢)、疫霉(如柑橘褐腐病疫霉)以及歐文氏菌(如胡蘿卜歐文氏菌)。本發(fā)明進(jìn)一步涉及提高水果或蔬菜成熟壽命的方法。按照一個實施方案，本發(fā)明的這一方面是通過在可有效延長水果或蔬菜成熟壽命的條件下，利用過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽對水果或蔬菜進(jìn)行處理來完成的。優(yōu)選的，如上文指出的，過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽是以分離形式存在的。利用上述的技術(shù)，可在水果或蔬菜收獲前或收獲后對其進(jìn)行處理。按照另一實施方案，本發(fā)明的這一方面是在有效延長從轉(zhuǎn)基因植物收獲的水果或蔬菜成熟壽命的條件下，提供利用編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白的DNA分子轉(zhuǎn)化過的轉(zhuǎn)基因植物或植物種子，并種植這些轉(zhuǎn)基因植物或從轉(zhuǎn)基因植物種子得到的轉(zhuǎn)基因植物來完成的。本發(fā)明的這一方面可進(jìn)一步包括將過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白應(yīng)用到水果或蔬菜上來提高水果或蔬菜的成熟壽命。利用上述的技術(shù)，可在水果或蔬菜收獲前或收獲后對其進(jìn)行處理。本發(fā)明中的方法可用來處理多種水果和蔬菜，從而控制收獲后疾病或脫水，并提高水果或蔬菜的成熟壽命?？山邮芴幚淼乃蚴卟税ㄈ魏慰墒秤玫闹参锂a(chǎn)品，尤其是傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)植物，如種子、根、塊莖、干、葉、花及果實。可接受處理的示范性轉(zhuǎn)基因植物或水果包括，但并不局限于蘋果、梨、桃、蜜桃、杏、李子、橄欖、甜瓜、柑橘、葡萄、草莓、覆盆子、藍(lán)莓、醋栗果、菠蘿、番木瓜、番石榴、香蕉或獼猴桃?？山邮芴幚淼氖痉缎赞D(zhuǎn)基因蔬菜植物或蔬菜包括，但并不局限于蘆筍、馬鈴薯、紅薯、蠶豆、豌豆、菊苣、萵苣、歐芹、羅勒、苣荬菜、卷心菜、芽橄欖、甜菜、歐洲防風(fēng)根、大頭菜、菜花、綠花椰菜、菠菜、洋蔥、大蒜、茄子、辣椒、芹菜、韭菜、小蘿卜、胡蘿卜、倭瓜、南瓜、西葫蘆、黃瓜、大豆、煙草、番茄、高粱、大黃和甘蔗?？砂词芴幚淼氖痉缎赞D(zhuǎn)基因植物和谷類作物包括，但并不局限于苜蓿、水稻、小麥、大麥、玉米和黑麥。實施例下列實施例是用來舉例說明本發(fā)明的實施方案的，但沒有限制本發(fā)明涉及的范圍的意圖。正如在下列實施例中所用到的，Messenger_指購自EdenBioscienceCorporation(Bothell，Washington)的產(chǎn)品，其中含有重量比為3％的活性成分harpinEa和重量比為97％的惰性成分。harpinEa是一種源自解淀粉歐文氏菌的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白，此處是利用SEQ.ID.NO.3來表示的。實施例1---用Messenger_處理柑橘對收獲后貯存的影響第0天，在22℃的溫室中，對水果表面噴灑Messenger_溶液(約15μg/ml)或緩沖溶液(5mMKPO4，pH6.8)來處理Fall-GLO柑橘。隨后，將柑橘表面的Messenger_或緩沖溶液風(fēng)干，對處理過的柑橘進(jìn)行標(biāo)記，與其他柑橘混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L，SteriliteCorporation制造)。然后將盛有處理過的柑橘的容器置于18℃的生長室中貯存。在第7天的時候，通過噴灑105cfu/ml懸液的方式在柑橘表面接種指狀青霉和灰色葡萄孢。上述步驟的實施對象是每處理組的40個柑橘。Messenger_或緩沖溶液處理后的第20、24和26天對疾病進(jìn)行測定。0-5級表示不同的疾病分級----0級沒有癥狀；1級1/5的水果具有疾病癥狀；2級2/5的水果具有疾病癥狀；3級3/5的水果具有疾病癥狀；4級4/5的水果具有疾病癥狀；5級所有水果都具有疾病癥狀。處理結(jié)果如下表1所示。表1柑橘疾病指數(shù)的降低分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品012345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01Messenger_2033310210.0958.14％是是緩沖液2023802610.22n/a--Messenger_2425264120.2045.21％是是緩沖液2416733470.37n/a--Messenger_2619464520.2936.96％是是緩沖液26163307110.46n/a--上表1所示數(shù)據(jù)表明在對水果進(jìn)行噴灑處理以降低灰色葡萄孢和灰色葡萄孢的疾病指數(shù)并提供更長的貯存期方面，Messenger_要比緩沖溶液更有效。在18℃貯存的條件下，在Messenger_噴灑處理后第21天的時候可減少約58.14％的柑橘疾病、在25天的時候可減少約45.12％的柑橘、在27天的時候可減少約36.97％的柑橘疾病。T-檢驗表明，Messenger_和緩沖溶液處理結(jié)果在95％和99％置信水平上具有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。實施例2---用Messenger_處理番茄(HotHouse)對收獲后貯存的影響第0天，在22℃的溫室中，對水果表面噴灑Messenger_溶液(15μg/ml)或緩沖溶液(5mMKPO4，pH6.8)來處理HotHouse番茄。隨后，將番茄表面的Messenger_或緩沖溶液風(fēng)干，對處理過的番茄進(jìn)行標(biāo)記，與其他番茄混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L，SteriliteCorporation制造)。然后將盛有處理過的番茄的容器置于18℃的生長室中貯存。在第7天的時候，以噴灑105cfu/ml懸液的方式在番茄表面接種指狀青霉和灰色葡萄孢。上述步驟的實施對象是每處理組的15個番茄。Messenger_或緩沖溶液處理后的第21和27天對疾病進(jìn)行測定。按照實施例1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級。處理結(jié)果如下表2所示。表2番茄疾病指數(shù)的降低分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品012345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01Messenger_217223100.2558.70％是是緩沖液213121260.61n/a--Messenger_272243220.4930.19％是是緩沖液271122360.71n/a--上表2所示數(shù)據(jù)表明在對水果進(jìn)行噴灑處理以降低指狀青霉和灰色葡萄孢的疾病指數(shù)并提供更長的貯存期方面，Messenger_要比緩沖溶液更有效。在18℃貯存的條件下，在Messenger_噴灑處理后第21天的時候可減少約58.70％的番茄疾病、在27天的時候可減少約30.19％的番茄疾病。T-檢驗表明，Messenger_和緩沖溶液處理結(jié)果在95％和99％置信水平上具有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。實施例3---用Messenger_處理葡萄對收獲后貯存的影響第0天，在22℃的溫室中，對水果表面噴灑Messenger_溶液(約15μg/ml)或緩沖溶液(5mMKPO4，pH6.8)來處理RedG葡萄。隨后，將葡萄表面的Messenger_或緩沖溶液風(fēng)干，對處理過的葡萄進(jìn)行標(biāo)記，與其他葡萄混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L，SteriliteCorporation制造)。然后將盛有處理過的葡萄的容器置于18℃的生長室中貯存。在第7天的時候，以噴灑105cfu/ml懸液的方式在葡萄表面接種指狀青霉和灰色葡萄孢。上述步驟的實施對象是每處理組約3700g葡萄。Messenger_或緩沖溶液處理后的第14和21天對疾病進(jìn)行測定。按照實施例1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級。處理結(jié)果如下表3所示。表3葡萄疾病指數(shù)的降低分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品012345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01Messenger_1422599423921130.2045.65％是是緩沖液1498130915238480.38n/a--Messenger_2166831269839270.4239.35％是是緩沖液21183664721191370.69n/a--上表3所示數(shù)據(jù)表明在對水果進(jìn)行噴灑處理以降低指狀青霉和灰色葡萄孢的疾病指數(shù)并提供更長的貯存壽命方面，Messenger_要比緩沖溶液更有效。在18℃貯存的條件下，在Messenger_噴灑處理后第14天的可減少約45.65％的葡萄疾病、在21天的時候可減少約39.35％的葡萄疾病。T-檢驗表明，Messenger_和緩沖溶液處理結(jié)果在95％和99％置信水平上具有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。實施例4---用Messenger_處理葡萄柚對收獲后貯存的影響第0天，在22℃的溫室中，對水果表面噴灑Messenger_溶液(約15μg/ml)或緩沖溶液(5mMKPO4，pH6.8)來處理FL33935葡萄柚。隨后，將葡萄柚表面的Messenger_或緩沖溶液風(fēng)干，對處理過的葡萄柚進(jìn)行標(biāo)記，與其他葡萄柚混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L，SteriliteCorporation制造)。然后將盛有處理過的葡萄柚的容器置于18℃的生長室中貯存。在第7天的時候，以噴灑105cfu/ml懸液的方式在葡萄柚表面按種柑橘褐腐病疫霉。上述步驟的實施對象是每處理組約6個葡萄柚。在Messenger_或緩沖溶液處理后的第87、97、103和111天對疾病進(jìn)行測定。按照實施例1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級。處理結(jié)果如下表4所示。表4葡萄柚疾病指數(shù)的降低分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品012345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01Messenger_875100000.0375.00％是是緩沖液874101000.13n/a--Messenger_975001000.1050.00％是是緩沖液974010100.20n/a--Messenger_1034100100.1728.57％是是緩沖液1033200010.23n/a--Messenger_1114100010.2033.33％是是緩沖液1113101010.30n/a--上表4所示數(shù)據(jù)表明在對水果進(jìn)行噴灑處理以降低柑橘褐腐病疫霉的疾病指數(shù)并提供更長的貯存壽命方面，Messenger_要比緩沖溶液更有效。在18℃貯存的條件下，在Messenger_噴灑處理后第87天的可減少約75.00％的葡萄柚疾病、在97天的時候可減少約50.00％的葡萄柚疾病、在103天的時候可減少約28.57％的葡萄柚疾、在111天的時候可減少約33.33％的葡萄柚疾。T-檢驗表明，Messenger_和緩沖溶液處理結(jié)果在95％和99％置信水平上具有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。實施例5---用Messenger_處理蘋果(Fuji)對收獲后貯存的影響第0天，在22℃的溫室中，對水果表面噴灑Messenger_溶液(約15μg/ml)或緩沖溶液(5mMKPO4，pH6.8)來處理Fuji蘋果。隨后，將蘋果表面的Messenger_或緩沖溶液風(fēng)干，對處理過的蘋果進(jìn)行標(biāo)記，與其他蘋果混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L，SteriliteCorporation制造)。然后將盛有處理過的蘋果的容器置于18℃的生長室中貯存。在第7天的時候，以噴灑105cfu/ml懸液的方式在蘋果表面接種指狀青霉和柑橘褐腐病疫霉。上述步驟的實施對象是每處理組約20個蘋果。在Messenger_或緩沖溶液處理后的第50、61、70、78和85天對疾病進(jìn)行測定。按照實施例1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級。處理結(jié)果如下表5所示。表5蘋果疾病指數(shù)的降低分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品012345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01Messenger_5020000000.00100.00％是是緩沖液5018110000.03n/a--Messenger_6119100000.0188.89％是是緩沖液6116210010.09n/a--Messenger_7018020000.0471.43％是是緩沖液7014221010.14n/a--Messenger_7815230000.0857.89％是是緩沖液7813221020.19n/a--Messenger_8513311200.1640.74％是是緩沖液8510500320.27n/a--上表5所示數(shù)據(jù)表明在對水果進(jìn)行噴灑處理以降低指狀青霉和柑橘褐腐病疫霉的疾病指數(shù)并提供更長的貯存壽命方面，Messenger_要比緩沖溶液更有效。在18℃貯存的條件下，在Messenger_噴灑處理后第51天的可減少約100.00％的蘋果疾病、在61天的時候可減少約88.89％的蘋果疾病、在70天的時候可減少約71.43％的蘋果疾病、在78天的時候可減少約57.89％的蘋果疾病、在85天的時候可減少約40.74％的蘋果疾病。T-檢驗表明，Messenger_和緩沖溶液處理結(jié)果在95％和99％置信水平上具有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。實施例6---用Messenger_處理蘋果(GrannySmith)對收獲后貯存的影響第0天，在22℃的溫室中，對水果表面噴灑Messenger_溶液(約15μg/ml)或緩沖溶液(5mMKPO4，pH6.8)來處理GrannySmith蘋果。隨后，將蘋果表面的Messenger_或緩沖溶液風(fēng)干，對處理過的蘋果進(jìn)行標(biāo)記，與其他蘋果混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L，SteriliteCorporation制造)。然后將盛有處理過的蘋果的容器置于18℃的生長室中貯存。在第7天的時候，以噴灑105cfu/ml懸液的方式在蘋果表面接種指狀青霉和柑橘褐腐病疫霉。上述步驟的實施對象是每處理組20個蘋果。在Messenger_或緩沖溶液處理后的第50、61、70、78和85天對疾病進(jìn)行測定。按照實施例1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級。處理結(jié)果如下表6所示。表6蘋果疾病指數(shù)的降低分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品012345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01Messenger_50200000000.00100.00％是是緩沖液5019100000.01n/a--Messenger_6113520000.0950.00％是是緩沖液617931000.18n/a--Messenger_7071030000.1636.00％是是緩沖液7021251000.25n/a--Messenger_7861031000.1932.14％是是緩沖液7821151100.28n/a--Messenger_857921100.2023.08是是緩沖液854104101n/a--上表6所示數(shù)據(jù)表明在對水果進(jìn)行噴灑處理以降低指狀青霉和柑橘褐腐病疫霉的疾病指數(shù)并提供更長的貯存壽命方面，Messenger_要比緩沖溶液更有效。在18℃貯存的條件下，在Messenger_噴灑處理后第51天的可減少約100.00％的蘋果疾病、在61天的時候可減少約50.00％的蘋果疾病、在70天的時候可減少約36.00％的蘋果疾病、在78天的時候可減少約32.14％的蘋果疾病、在85天的時候可減少約23.08％的蘋果疾病。T-檢驗表明，Messenger_和緩沖溶液處理結(jié)果在95％和99％置信水平上具有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。實施例7---用Messenger_處理番茄對收獲后貯存的影響第0天，在22℃的溫室中，對水果表面噴灑Messenger_溶液(約15μg/ml)或緩沖溶液(5mMKPO4，pH6.8)來處理番茄。隨后，將番茄表面的Messenger_或緩沖溶液風(fēng)干，對處理過的番茄進(jìn)行標(biāo)記，與其他番茄混合在一起并置于一塑料容器中(ClearView66Qt/63L，SteriliteCorporation制造)。然后將盛有處理過的番茄的容器置于18℃的生長室中貯存。在第7天的時候，以噴灑105cfu/ml懸液的方式在番茄表面接種指狀青霉和灰色葡萄孢。上述步驟的實施對象是每處理組44個番茄。在Messenger_或緩沖溶液處理后的第18、27、35和42天對疾病進(jìn)行測定。按照實施例1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級。處理結(jié)果如下表7所示。表7番茄疾病指數(shù)的降低分級T-檢驗樣品處理后天數(shù)012345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01Messenger_18211850000.1337.78％是是緩沖液181121120000.20n/a--Messenger_27161891000.1825.00％是是緩沖液2782484000.24n/a--Messenger_357141310000.3216.67％是是緩沖液351161510200.38n/a--Messenger_42110912930.5212.88％是是緩沖液420315101150.60n/a--上表7所示數(shù)據(jù)表明在對水果進(jìn)行噴灑處理以降低指狀青霉和灰色葡萄孢的疾病指數(shù)并提供更長的貯存壽命方面，Messenger_要比緩沖溶液更有效。在18℃貯存的條件下，在Messenger_噴灑處理后第18天的可降低約37.78％的番茄疾病、在27天的時候可降低約25.00％的番茄疾病、在35天的時候可降低約16.67％的番茄疾病、在42天的時候可降低約12.88％的番茄疾病。T-檢驗表明，Messenger_和緩沖溶液處理結(jié)果在95％和99％置信水平上具有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。實施例8-收獲前和收獲后Messenger_處理番茄(Sanibel)對收獲后貯存的影響在番茄生長季節(jié)內(nèi)，在標(biāo)準(zhǔn)條件或完全的Messenger_處理下種植紅色Sanibel番茄和綠色Sanibel番茄。標(biāo)準(zhǔn)條件，也稱作栽培者的標(biāo)準(zhǔn)，包括在番茄移植后每隔7天對其進(jìn)行殺真菌劑噴灑處理，選用的殺真菌劑主要是含有基于銅的活性成分的殺真菌劑。Messenger_處理包括進(jìn)行6次每英畝2.2oz.該產(chǎn)品的噴灑處理。從利用Messenger_處理和栽培者標(biāo)準(zhǔn)田里收獲紅番茄和綠番茄。需要指出的是從經(jīng)過栽培者標(biāo)準(zhǔn)處理田里收獲的綠番茄比從Messenger_處理過的植物收獲的綠番茄要小(也即欠成熟)。對收獲后的水果進(jìn)行如下處理(1)對從Messenger_處理過的田里收獲的番茄進(jìn)一步用Messenger_處理；(2)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄用Messenger_處理；(3)對從Messenger_處理過的田里收獲的番茄不進(jìn)行任何額外處理；(4)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄不進(jìn)行任何額外處理。組(1)和組(2)中的水果的收獲后處理是通過利用backback噴霧器以大約30p.s.i采用20ppmharpinEa的濃度噴灑Messenger_來完成的。在噴灑過程中要轉(zhuǎn)動番茄以保證噴霧劑覆蓋完全。風(fēng)干已接受了收獲后處理的番茄，然后對組(1)-(4)的番茄進(jìn)行標(biāo)記，與其他番茄混合，單層排放進(jìn)行貯存。貯存溫度為18-32℃，光照和黑暗間隔，各約為12小時。每天對番茄的腐爛和脫水情況進(jìn)行檢查，直至收獲后31天。結(jié)果如下表8所示。表8收獲前和收獲后處理對腐爛和脫水的影響收獲后的天數(shù)脫水的可銷售的成熟度水果數(shù)組14192122232531數(shù)目百分比(1)收獲前/后用紅50001112060％Messenger_綠400000000100％(2)僅收獲的用紅50000000420％Messenger_綠40000000175％(3)僅收獲的用紅50000002060％Messenger_綠500000000100％(4)不用Messenger_紅5131555500％綠50000000180％在第21天時，組(4)中的紅番茄全部腐爛掉。相反，接受Messenger_處理的所有紅番茄表現(xiàn)出降低的腐敗和腐爛比率。在實驗接近結(jié)束時，可以觀察到很多番茄脫水，表皮皺縮但沒有腐爛。這樣的情況也包括在不適于銷售的情況之內(nèi)。這些結(jié)果表明，在收獲前或收獲后Messenger_處理都能降低腐爛和脫水的程度，從而延長了新鮮水果或蔬菜的貯存時間。實施例9-Messenger_處理對環(huán)境溫度下貯存的番茄收獲后成熟和腐爛的影響在番茄生長季節(jié)內(nèi)(如實施例8)，在標(biāo)準(zhǔn)條件(同實施例8)或完全的Messenger_處理下種植番茄，隨后在商業(yè)有利的收獲時間對他們進(jìn)行手工采摘。收集整個田中相同大小(5/6)的成熟綠番茄，分成4組，每組25個，將他們直接放入水果袋中并運輸?shù)綄嶒炘O(shè)備中以進(jìn)行收獲后處理和/或分析。對下列三種處理方法進(jìn)行檢驗(1)對從Messenger_處理過的田里收獲的番茄不進(jìn)行任何收獲后處理；(2)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄進(jìn)一步用Messenger_進(jìn)行收獲后處理；(3)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄不進(jìn)行任何收獲后處理。組(2)的收獲后處理是通過將番茄浸入Messenger_溶液(20ppmharpinEa)來完成的。風(fēng)干已接受了收獲后處理的番茄，然后對組(1)-(3)中的番茄進(jìn)行標(biāo)記，與其他番茄混合，放入番茄簍中貯存。貯存溫度為23-26℃(75-80)。然后，隨著時間推移，利用下列分級標(biāo)準(zhǔn)對番茄顏色變化和腐爛程度進(jìn)行分級。級別說明1成熟的綠色將番茄切為兩半，沒有切到籽；整個番茄為綠色，無雜色；2粉紅色在番茄的某些部位可以看到開始有雜色的跡象，這些部位通常為粉紅色；3粉紅色/紅色中等成熟番茄沒有完全變紅；仍然有一些粉紅色；4紅色番茄完全變紅；5腐爛由于腐爛，番茄一些部分開始分解檢測結(jié)果總結(jié)在下表9中。表9收獲前和收獲后處理對成熟和腐爛的影響分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品12345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.0111011687500.697.28％是是21057117700.723.81％是是3105368610.75N/AN/AN/A1144558600.752.61％是是2142658700.751.57％是是3142448910.77N/AN/AN/A1170039250.803.37％是是21701482130.812.16％是是31700182170.83N/AN/AN/A12000089110.822.61％是是22000080200.840.47％是是32000176230.84N/AN/AN/A本實驗獲得的數(shù)據(jù)表明，相對于栽培者標(biāo)準(zhǔn)，對番茄進(jìn)行的Messenger_處理，不管是通過田間噴灑還是收獲后浸泡完成的，都會造成番茄提前成熟變紅。此外，雖然觀察到提前成熟現(xiàn)象，但相對于栽培者標(biāo)準(zhǔn)，Messenger_處理可維持更長時間的紅熟狀態(tài)并可延遲番茄的分解和腐爛。實施例10-Messenger_處理對冷藏條件下番茄的收獲后成熟與腐爛的影響在番茄生長季節(jié)內(nèi)(如實施例8)，在標(biāo)準(zhǔn)條件(同實施例8)或完全的Messenger_處理下種植番茄，隨后在商業(yè)有利的收獲時間對他們進(jìn)行手工采摘。收集整個田中相同大小(5/6)的成熟綠番茄，分成4組，每組25個，將他們直接放入水果袋中并運輸?shù)綄嶒炘O(shè)備中以進(jìn)行收獲后處理和/或分析。對下列四種不同的處理方法進(jìn)行檢驗(1)對從Messenger_處理過的田里收獲的番茄不進(jìn)行任何收獲后處理；(2)對從Messenger_處理過的田里收獲的番茄進(jìn)一步進(jìn)行收獲后Messenger_處理；(3)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄進(jìn)一步進(jìn)行收獲后Messenger_處理；(4)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄不進(jìn)行任何額外的收獲后處理。組(2)和(3)的收獲后處理是通過將番茄浸入Messenger_溶液(20ppmharpinEa)來完成的。風(fēng)干已接受了收獲后處理的番茄，然后對組(1)-(4)中的番茄進(jìn)行標(biāo)記，與其他番茄混合，放入番茄簍中，在11℃(52)下的CustomPackingHouse冷卻器中貯存。然后，隨著時間推移，利用實施例8中描述的分級標(biāo)準(zhǔn)對番茄顏色變化和腐爛程度進(jìn)行分級。表10收獲前和收獲后處理對成熟和腐爛的影響分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品12345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.011766340000.270.00％是是2767330000.270.75％是是3776240000.277.46％是是4768302000.27N/A是是11059318000.307.53％是是210602812000.305.00％是是31065350000.2715.63％是是41049429000.32N/AN/AN/A1171935281800.497.20％是是2172038281400.4710.61％是是3171928391400.506.06％是是4171727312500.53N/AN/AN/A1211128293200.566.62％N/AN/A2211526372200.5311.92％是是3211033352200.5410.93％是是4211018324000.60N/AN/AN/A126315235900.68-2.26％是是226919254160.634.39％是是326323314300.635.00％是是426219235010.66N/AN/AN/A132315235900.68-2.26％是是232919254160.634.39％是是332323314300.635.00％是是432219235010.66N/AN/AN/A表10續(xù)分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品12345指數(shù)效力p＜0.05p＜0.0113804108420.770.26％是是238110156590.743.64％是是33815147820.752.60％是是43803138040.77N/AN/AN/A145031174120.792.95％是是245141269140.783.93％是是34501118170.793.19％是是445001073170.81N/AN/AN/A150031063230.823.55％是是250041158270.823.55％是是35000878140.814.02％是是45000371260.85N/AN/AN/A15500073270.851.84％是是25500068320.860.69％是是35500280180.834.37％是是45500065350.87N/AN/AN/A16000065350.872.47％是是26000063370.872.02％是是36000074260.854.48％是是46000054460.89N/AN/AN/A16500053470.891.76％是是26500058420.882.86％是是36500065350.874.40％是是46500045550.91N/AN/AN/A在前面的實驗中，在環(huán)境溫度(75-80)下，利用田地噴灑Messenger_和/或在Messenger_溶液中進(jìn)行收獲后浸泡方式處理時，番茄發(fā)育成紅熟要比利用栽培者標(biāo)準(zhǔn)處理情況下快。雖然觀察到了成熟提前，但這些成熟的果實腐爛的并不比經(jīng)栽培者標(biāo)準(zhǔn)處理過的番茄早。在本研究中，番茄是在番茄加工廠設(shè)備中的商業(yè)用冷藏室中保存的，冷藏溫度為52。正如我們所預(yù)期的，這樣低的溫度似乎會延緩番茄成熟的過程，在前30天內(nèi)，Messenger_處理并沒有加快番茄紅熟的速度。然而，相對于栽培者標(biāo)準(zhǔn)，Messenger_處理確實使番茄維持了更長時間沒有分解和腐爛的紅熟狀態(tài)。實施例11-Messenger_處理對番茄收獲后成熟與腐爛的影響在番茄生長季節(jié)內(nèi)(如實施例8)，在標(biāo)準(zhǔn)條件(同實施例8)或完全的Messenger_處理下種植番茄，隨后在商業(yè)有利的收獲時間對他們進(jìn)行手工采摘。收集整個田中相同大小(5/6)的成熟綠番茄，分成4組，每組25個，將他們直接放入水果袋中并運輸?shù)綄嶒炘O(shè)備中以進(jìn)行收獲后處理和/或分析。對下列四種不同的處理方法進(jìn)行檢驗(1)對從Messenger_處理過的田里收獲的番茄不進(jìn)行任何收獲后處理；(2)對從Messenger_處理過的田里收獲的番茄進(jìn)一步進(jìn)行收獲后Messenger_處理；(3)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄進(jìn)一步進(jìn)行收獲后Messenger_處理；(4)對從標(biāo)準(zhǔn)田里收獲的番茄不進(jìn)行任何額外的收獲后處理。組(2)和(3)的收獲后處理是通過將番茄浸入Messenger_溶液(20ppmharpinEa)來完成的。風(fēng)干已接受了收獲后處理的番茄，然后對組(1)-(4)中的番茄進(jìn)行標(biāo)記，與其他番茄混合，放入番茄簍中貯存。貯存溫度為23-26℃(75-80)。然后，隨著時間推移，利用FloridaTomatoCommittee的商業(yè)用分級標(biāo)準(zhǔn)對番茄顏色變化和腐爛程度進(jìn)行分級，顏色指南如下所示。級別說明1綠色將番茄切為兩半，沒有切到籽；整個番茄是綠色的，無雜色；2出現(xiàn)雜色番茄小于等于10％部分開始有雜色跡象；這些區(qū)域一般是粉紅色；3轉(zhuǎn)變番茄表面有10-30％的粉紅或紅色區(qū)域；4粉紅色番茄表面有30-60％的粉紅或紅色區(qū)域；5淺紅色番茄表面有大于60％的粉紅和不超過90％的紅色區(qū)域6紅色番茄完全為紅色；7腐爛番茄一些部分開始腐敗分解處理結(jié)果如下表11。表11收獲前和收獲后處理對番茄成熟和腐爛的影響分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品1234567指數(shù)效力p＜0.05p＜0.01138018200000.170.00％否否237317910000.20-13.11％是是337819300000.18-2.46％是是438018200000.17N/A否否17362322125200.333.72％是否27372317194000.334.96％是否37401715189100.350.00％是否47352219158100.35N/A否否1142588136500.748.02％是是214235987210.774.44％是是3144478176000.739.41％是是4140065137240.80N/A否否117002368900.832.51％是是217111078820.832.35％是是317120098800.833.18％是是417000078940.85N/A否否121000009730.861.31％是是2210000097310.861.31％是是321000039520.861.96％是是4210000187120.87N/A否否1280000085150.882.84％是是228000009190.873.79％是是3280000081190.882.21％是是4280000067330.90N/A否否1320000022780.972.16％是是2320000016840.981.30％是是3320000055450.926.93％是是432000007930.99N/A否否表11續(xù)分級T-檢驗處理后天數(shù)樣品1234567指數(shù)效力p＜0.05p＜0.011370000014860.981.15％是是237000007930.000.14％是是337000009910.990.43％是是437000006940.99N/A否否1420000012880.981.01％是是242000007930.990.29％是是342000008920.990.43％是是442000005950.99N/A否否145000008920.990.57％否否245000004960.990.00％否否345000004960.990.00％否否445000004960.99N/A否否150000007930.990.43％否否250000004960.990.00％否否350000004960.990.00％否否450000004960.99N/A否否在前面的實驗中，相對于栽培者標(biāo)準(zhǔn)，利用田地噴灑Messoenger_和/或在Messenger_溶液中進(jìn)行收獲后浸泡處理使得番茄發(fā)育成紅熟變快，并延緩了其腐爛。實驗獲得的數(shù)據(jù)支持了這一觀測結(jié)果。到收獲后21天為止，與經(jīng)栽培者標(biāo)準(zhǔn)處理過的番茄有87％紅熟相比，Messeonger_處理過的番茄有97％已經(jīng)完全紅熟。雖然我們可假定成熟較快的番茄開始分解的也比較快，但令人驚訝的是，本實施例卻證明這些早熟的番茄的腐敗實際上要比利用栽培者標(biāo)準(zhǔn)番茄延緩15％。這一現(xiàn)象應(yīng)該對番茄市場的幾個部分有重要的影響。栽培者就能減少乙烯氣站時間，而零售市場也能顯著減少庫存。雖然為了例證本發(fā)明，我們已經(jīng)對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的描述，但我們應(yīng)該明白，這些詳細(xì)的描述僅僅是為了例證本發(fā)明這個目的而作的，因而在這一點上，本領(lǐng)域中的熟練技術(shù)人員在不偏離下述權(quán)利要求限定的發(fā)明精神和范圍的情況下可對本發(fā)明進(jìn)行多種變更。序列表<110>伊登生物科學(xué)有限公司<120>抑制水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子<130>21829/192<140><141><150>60/198,359<151>2000-04-19<160>12<170>PatentInVer.2.1<210>1<211>338<212>PRT<213>菊歐文氏菌(Erwiniachrysanthemi)<400>1MetGlnIleThrIleLysAlaHisIleGlyGlyAspLeuGlyValSer151015GlyLeuGlyAlaGlnGlyLeuLysGlyLeuAsnSerAlaAlaSerSer202530LeuGlySerSerValAspLysLeuSerSerThrIleAspLysLeuThr354045SerAlaLeuThrSerMetMetPheGlyGlyAlaLeuAlaGlnGlyLeu505560GlyAlaSerSerLysGlyLeuGlyMetSerAsnGlnLeuGlyGlnSer65707580PheGlyAsnGlyAlaGlnGlyAlaSerAsnLeuLeuSerValProLys859095SerGlyGlyAspAlaLeuSerLysMetPheAspLysAlaLeuAspAsp100105110LeuLeuGlyHisAspThrValThrLysLeuThrAsnGlnSerAsnGln115120125LeuAlaAsnSerMetLeuAsnAlaSerGlnMetThrGlnGlyAsnMet130135140AsnAlaPheGlySerGlyValAsnAsnAlaLeuSerSerIleLeuGly145150155160AsnGlyLeuGlyGlnSerMetSerGlyPheSerGlnProSerLeuGly165170175AlaGlyGlyLeuGlnGlyLeuSerGlyAlaGlyAlaPheAsnGlnLeu180185190GlyAsnAlaIleGlyMetGlyValGlyGlnAsnAlaAlaLeuSerAla195200205LeuSerAsnValSerThrHisValAspGlyAsnAsnArgHisPheVal210215220AspLysGluAspArgGlyMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMetAsp225230235240GlnTyrProGluIlePheGlyLysProGluTyrGlnLysAspGlyTrp245250255SerSerProLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSerLys260265270ProAspAspAspGlyMetThrGlyAlaSerMetAspLysPheArgGln275280285AlaMetGlyMetIleLysSerAlaValAlaGlyAspThrGlyAsnThr290295300AsnLeuAsnLeuArgGlyAlaGlyGlyAlaSerLeuGlyIleAspAla305310315320AlaValValGlyAspLysIleAlaAsnMetSerLeuGlyLysLeuAla325330335AsnAla<210>2<211>2141<212>DNA<213>菊歐文氏菌(Erwiniachrysanthemi)<400>2cgattttacccgggtgaacgtgctatgaccgacagcatcacggtattcgacaccgttacg60gcgtttatggccgcgatgaaccggcatcaggcggcgcgctggtcgccgcaatccggcgtc120gatctggtatttcagtttggggacaccgggcgtgaactcatgatgcagattcagccgggg180cagcaatatcccggcatgttgcgcacgctgctcgctcgtcgttatcagcaggcggcagag240tgcgatggctgccatctgtgcctgaacggcagcgatgtattgatcctctggtggccgctg300ccgtcggatcccggcagttatccgcaggtgatcgaacgtttgtttgaactggcgggaatg360acgttgccgtcgctatccatagcaccgacggcgcgtccgcagacagggaacggacgcgcc420cgatcattaagataaaggcggctttttttattgcaaaacggtaacggtgaggaaccgttt480caccgtcggcgtcactcagtaacaagtatccatcatgatgcctacatcgggatcggcgtg540ggcatccgttgcagatacttttgcgaacacctgacatgaatgaggaaacgaaattatgca600aattacgatcaaagcgcacatcggcggtgatttgggcgtctccggtctggggctgggtgc660tcagggactgaaaggactgaattccgcggcttcatcgctgggttccagcgtggataaact720gagcagcaccatcgataagttgacctccgcgctgacttcgatgatgtttggcggcgcgct780ggcgcaggggctgggcgccagctcgaaggggctggggatgagcaatcaactgggccagtc840tttcggcaatggcgcgcagggtgcgagcaacctgctatccgtaccgaaatccggcggcga900tgcgttgtcaaaaatgtttgataaagcgctggacgatctgctgggtcatgacaccgtgac960caagctgactaaccagagcaaccaactggctaattcaatgctgaacgccagccagatgac1020ccagggtaatatgaatgcgttcggcagcggtgtgaacaacgcactgtcgtccattctcgg1080caacggtctcggccagtcgatgagtggcttctctcagccttctctgggggcaggcggctt1140gcagggcctgagcggcgcgggtgcattcaaccagttgggtaatgccatcggcatgggcgt1200ggggcagaatgctgcgctgagtgcgttgagtaacgtcagcacccacgtagacggtaacaa1260ccgccactttgtagataaagaagatcgcggcatggcgaaagagatcggccagtttatgga1320tcagtatccggaaatattcggtaaaccggaataccagaaagatggctggagttcgccgaa1380gacggacgacaaatcctgggctaaagcgctgagtaaaccggatgatgacggtatgaccgg1440cgccagcatggacaaattccgtcaggcgatgggtatgatcaaaagcgcggtggcgggtga1500taccggcaataccaacctgaacctgcgtggcgcgggcggtgcatcgctgggtatcgatgc1560ggctgtcgtcggcgataaaatagccaacatgtcgctgggtaagctggccaacgcctgata1620atctgtgctggcctgataaagcggaaacgaaaaaagagacggggaagcctgtctcttttc1680ttattatgcggtttatgcggttacctggaccggttaatcatcgtcatcgatctggtacaa1740acgcacattttcccgttcattcgcgtcgttacgcgccacaatcgcgatggcatcttcctc1800gtcgctcagattgcgcggctgatggggaacgccgggtggaatatagagaaactcgccggc1860cagatggagacacgtctgcgataaatctgtgccgtaacgtgtttctatccgcccctttag1920cagatagattgcggtttcgtaatcaacatggtaatgcggttccgcctgtgcgccggccgg1980gatcaccacaatattcatagaaagctgtcttgcacctaccgtatcgcgggagataccgac2040aaaatagggcagtttttgcgtggtatccgtggggtgttccggcctgacaatcttgagttg2100gttcgtcatcatctttctccatctgggcgacctgatcggtt2141<210>3<211>403<212>PRT<213>解淀粉歐文氏菌(Erwiniaamylovora)<400>3MetSerLeuAsnThrSerGlyLeuGlyAlaSerThrMetGlnIleSer151015IleGlyGlyAlaGlyGlyAsnAsnGlyLeuLeuGlyThrSerArgGln202530AsnAlaGlyLeuGlyGlyAsnSerAlaLeuGlyLeuGlyGlyGlyAsn354045GlnAsnAspThrValAsnGlnLeuAlaGlyLeuLeuThrGlyMetMet505560MetMetMetSerMetMetGlyGlyGlyGlyLeuMetGlyGlyGlyLeu65707580GlyGlyGlyLeuGlyAsnGlyLeuGlyGlySerGlyGlyLeuGlyGlu859095GlyLeuSerAsnAlaLeuAsnAspMetLeuGlyGlySerLeuAsnThr100105110LeuGlySerLysGlyGlyAsnAsnThrThrSerThrThrAsnSerPro115120125LeuAspGlnAlaLeuGlyIleAsnSerThrSerGlnAsnAspAspSer130135140ThrSerGlyThrAspSerThrSerAspSerSerAspProMetGlnGln145150155160LeuLeuLysMetPheSerGluIleMetGlnSerLeuPheGlyAspGly165170175GlnAspGlyThrGlnGlySerSerSerGlyGlyLysGlnProThrGlu180185190GlyGluGlnAsnAlaTyrLysLysGlyValThrAspAlaLeuSerGly195200205LeuMetGlyAsnGlyLeuSerGlnLeuLeuGlyAsnGlyGlyLeuGly210215220GlyGlyGlnGlyGlyAsnAlaGlyThrGlyLeuAspGlySerSerLeu225230235240GlyGlyLysGlyLeuGlnAsnLeuSerGlyProValAspTyrGlnGln245250255LeuGlyAsnAlaValGlyThrGlyIleGlyMetLysAlaGlyIleGln260265270AlaLeuAsnAspIleGlyThrHisArgHisSerSerThrArgSerPhe275280285ValAsnLysGlyAspArgAlaMetAlaLysGluIleGlyGlnPheMet290295300AspGlnTyrProGluValPheGlyLysProGlnTyrGlnLysGlyPro305310315320GlyGlnGluValLysThrAspAspLysSerTrpAlaLysAlaLeuSer325330335LysProAspAspAspGlyMetThrProAlaSerMetGluGlnPheAsn340345350LysAlaLysGlyMetIleLysArgProMetAlaGlyAspThrGlyAsn355360365GlyAsnLeuGlnAlaArgGlyAlaGlyGlySerSerLeuGlyIleAsp370375380AlaMetMetA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、葡萄孢、疫霉或歐文氏菌引起的。37.一種DNA構(gòu)建體，包含一種編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽的DNA分子一種可操作性偶聯(lián)到DNA分子5′端的植物可表達(dá)啟動子，此啟動子可在水果或蔬菜組織中有效轉(zhuǎn)錄DNA分子；以及可操作性偶聯(lián)到DNA分子的3′調(diào)節(jié)區(qū)；其中DNA分子在水果和蔬菜中的表達(dá)給予了水果或蔬菜對收獲后疾病或脫水的抗性。38.含有一種載體的表達(dá)系統(tǒng)，其中此載體插入了權(quán)利要求37的異源DNA構(gòu)建體。39.含有權(quán)利要求37的異源DNA構(gòu)建體的宿主細(xì)胞。40.權(quán)利要求39的宿主細(xì)胞，其中此宿主細(xì)胞是植物細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞。41.權(quán)利要求40的宿主細(xì)胞，其中的細(xì)菌細(xì)胞是土壤桿菌細(xì)胞。42.含有權(quán)利要求37的異源DNA構(gòu)建體的轉(zhuǎn)基因植物。43.一種延長水果或蔬菜成熟壽命的方法，包括在有效延長水果或蔬菜成熟壽命的條件下，利用過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽處理水果或蔬菜。44.權(quán)利要求43的方法，其中的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽是以分離形式存在的。45.權(quán)利要求43的方法，其中該處理是在水果或蔬菜收獲前進(jìn)行的。46.權(quán)利要求43的方法，其中該處理是在水果或蔬菜收獲后進(jìn)行的。47.一種延長水果或蔬菜成熟壽命的方法，包括提供利用編碼過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白的DNA分子轉(zhuǎn)化過的轉(zhuǎn)基因植物或植物種子，以及在可有效延長從轉(zhuǎn)基因植物收獲得到的水果或蔬菜的成熟壽命的條件下，種植所述轉(zhuǎn)基因植物或從轉(zhuǎn)基因植物種子得到的轉(zhuǎn)基因植物。48.權(quán)利要求47的方法，進(jìn)一步包括對水果或蔬菜應(yīng)用過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白來延長水果或蔬菜的成熟壽命。49.權(quán)利要求48的方法，其中該應(yīng)用是在水果或蔬菜收獲前進(jìn)行的。50.權(quán)利要求43的方法，其中該應(yīng)用是在水果或蔬菜收獲后進(jìn)行的。全文摘要本發(fā)明涉及在有效抑制收獲后疾病或脫水的條件下，利用過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子蛋白或多肽來處理水果或蔬菜，從而抑制水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的方法?；蛘撸峁├镁幋a過敏反應(yīng)誘導(dǎo)子多肽或蛋白的DNA分子轉(zhuǎn)化過的轉(zhuǎn)基因植物或植物種子，并在可有效抑制從轉(zhuǎn)基因植物收獲得到的水果或蔬菜收獲后疾病或脫水的條件下，種植這些轉(zhuǎn)基因植物或從轉(zhuǎn)基因植物種子得到的轉(zhuǎn)基因植物來實現(xiàn)上述目的。另外，也公開了DNA構(gòu)建體和表達(dá)系統(tǒng)、宿主細(xì)胞、以及含有該DNA構(gòu)建體的轉(zhuǎn)基因植物。文檔編號C07K14/27GK1437443SQ01811434公開日2003年8月20日申請日期2001年4月17日優(yōu)先權(quán)日2000年4月19日發(fā)明者Z·-M·韋,D·丘,D·雷米克申請人:伊登生物科學(xué)有限公司