專利名稱：硫代酰胺衍生物的制作方法
血管細胞粘連分子-1(VCAM-1)是免疫球蛋白(Ig)超基因組中一個成員，它表達激活了的而不是靜止的內(nèi)皮。表達許多細胞類型包括循環(huán)淋巴細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞和單核細胞(但不是中性白細胞)的整合蛋白VLA-4(a4b1)是VCAM-1的主要受體。VCAM-1或VLA-4的抗體能夠阻斷這些單核白細胞以及黑瘤細胞的粘附從而在體外激活內(nèi)皮。在好幾種炎癥動物模型中已經(jīng)證實這些蛋白中的任何一種的抗體都是能夠有效抑制白細胞浸潤和防止組織損傷?？?VLA-4單克隆抗體已經(jīng)顯示出阻斷T-細胞在佐劑誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎中的滲出，防止氣喘模型中嗜酸性細胞的累積和支氣管收縮并且在試驗性自身免疫腦炎(EAE)中減少癱瘓和抑制單核細胞和淋巴細胞浸潤?？?VCAM-1單克隆抗體已經(jīng)顯示出延長心臟同種移植的存活時間。最近研究已經(jīng)證實抗-VLA-4mAbs能夠防止非過渡性肥胖的糖尿病小鼠的胰島炎和糖尿病，并且在棉花頂絹毛猴的結(jié)腸炎模型中能夠顯著減輕炎癥。
由此可見，該化合物能夠抑制含α4的整合蛋白與VCAM-1之間的相互作用，可用作慢性炎癥疾病的治療劑，這些慢性炎癥疾病包括風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化(MS)、氣喘和腸炎(IBD)。
在本發(fā)明的一個實施方案中涉及具有下列通式的化合物 其中X是具有下列通式的基團 其中R15是鹵素、硝基、低級烷基磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、羧基、低級烷基氨基磺?；?、全氟低級烷基、低級烷基硫、羥基低級烷基、烷氧基低級烷基、低級烷基硫代低級烷基、低級烷基亞磺酰低級烷基、低級烷基磺?；图壨榛⒌图壨榛鶃喕酋；?、低級烷?；?、芳?；⒎蓟?、芳基氧；R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、OH、全氟低級烷基或低級烷基硫；或者X是具有通式X-2的基團 其中Het是含有1、2或3個雜原子的5-或6-節(jié)雜芳環(huán)，雜原子選自于N、O和S，或者Het是含有1、2、3或4個雜原子的9-或10-節(jié)雙環(huán)雜芳環(huán)，雜原子選自于N、O和S；R15和R16如上X-1中所述；R30是氫或低級烷基；和p是0到1的整數(shù)；或X是通式X-3的基團 其中R18是芳基、雜芳基、芳基低級烷基、雜芳基低級烷基；R19是被取代的或沒有被取代的低級烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基，和R20是被取代的或沒有被取代的低級烷酰基或芳?；?；并且Y是具有通式Y(jié)-1的基團 其中；
R22和R23各自是氫、低級烷基、低級烷氧基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、硝基、氰基、低級烷基硫、低級烷基磺?；?、低級烷基亞磺?；?、低級烷?；?、鹵素或全氟低級烷基并且R22和R23中至少一個不是氫，并且R24是氫、低級烷基、低級烷氧基、芳基、硝基、氰基、低級烷基磺?；螓u素；或Y-2是具有下列通式的基團 其中Het是由碳原子連接的五節(jié)或六節(jié)雜芳環(huán)，其中該環(huán)包括選自于N、O和S中的一個、兩個或三個雜原子并且R30和R31各自是氫、低級烷基、環(huán)烷基、鹵素、氰基、全氟低級烷基或芳基并且R30和R31中至少一個是連接點，p是0或1的整數(shù)。
或Y是具有通式Y(jié)-3的基團 其中R25是低級烷基、沒有被取代的或氟取代的低級鏈烯基，或者為通式R26-(CH2)e-的基團，R26是芳基、雜芳基、重氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷氧基、低級烷基硫、低級芳基磺?；⒌图壨榛鶃喕酋；⑷图壨轷；?、硝基，或者R26是具有通式-NR28R29的基團，其中R28是H或低級烷基，R29是氫、低級烷基、低級烷氧基羰基、低級烷?；?、芳酰基、全氟低級烷?；被?、低級烷基磺酰基、低級烷基氨基羰基、芳基氨基羰基，或R28和R29在一起形成4、5或6節(jié)飽和碳環(huán)，該環(huán)可含或不含選自于O、S和N中的一個雜原子；環(huán)中的碳原子是不被取代的或者被低級烷基或鹵素取代，
Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或者是一個鍵，R27是H、低級烷基、芳基、低級烷?；?、芳?；虻图壨轷ｔ驶?，e是從0到4的整數(shù)，f是從1到3的整數(shù)，并且用點線表示的鍵可以被氫化，也可以不被氫化；以及藥學(xué)上可接受的鹽和酯。
在說明書所用的這些術(shù)語定義如下術(shù)語“鹵素”是指溴、氯、氟或碘，并且術(shù)語“鹵代”指鹵素取代基。
術(shù)語“全氟”是指如在全氟低級烷基、全氟低級烷?；腿轷；被兴械臍湓油耆梅〈?。例子如三氟甲基。
術(shù)語“低級烷基”是指單一的或組合的(例如下面低級烷?；囊徊糠?直鏈或支鏈含有最多6個碳原子的的烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。低級烷基可以被一個或多個各自選自于下列基團取代或不被取代環(huán)烷基、硝基、芳氧基、芳基(優(yōu)選苯基或吡啶基)、羥基(低級烷基羥基或羥基低級烷基)、鹵素、氰基、低級烷氧基(烷氧基低級烷基或低級烷基烷氧基)、低級烷?；?、低級烷基硫(低級烷基硫低級烷基)、亞磺?；?低級烷基亞磺酰基)、亞磺酰基低級烷基(低級烷基亞磺?；图壨榛?、磺酰基(低級烷基磺?；?、磺?；图壨榛?低級烷基磺?；图壨榛?、全氟代(全氟低級烷基)和被取代的氨基如氨基磺?；?低級烷基氨基磺?；?或氨基羰基(低級烷基氨基羰基)。被取代的低級烷基基團的例子有2-羥基乙基、3-氧合丁基、氰基甲基和2-硝基丙基。術(shù)語“低級烷基硫”指得是通過二價硫原子連接的低級烷基，如甲基巰基或異丙基巰基。
術(shù)語“環(huán)烷基”指的是被取代的或沒有被取代的3-或7-節(jié)碳環(huán)。用于本發(fā)明的取代基是羥基、鹵素、氰基、低級烷氧基、低級烷酰基、低級烷基、芳酰基、低級烷基硫、低級烷基亞磺?；?、低級烷基磺?；?、芳基、雜芳基和被取代的氨基。
術(shù)語“低級烷氧基”指的是如上所述的通過氧原子連接的低級烷基。例子有甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等。
術(shù)語“低級鏈烯基”指的是含有至少一個雙鍵的非芳香部分不飽和烴鏈，長度優(yōu)選1-10和更優(yōu)選1-6個碳原子。該基團可以用常規(guī)取代基取代或不被取代，這些常規(guī)取代基優(yōu)選氟。例子是乙烯基、烯丙基、二甲基烯丙基、丁烯基、異丁烯基、戊烯基。
術(shù)語“芳基”指的是單環(huán)或雙環(huán)的芳香基團，如苯基或萘基，它們可以被常規(guī)的取代基取代或不被取代。優(yōu)選的取代基是低級烷基、低級烷氧基、羥基低級烷基、羥基、羥基烷氧基、鹵素、低級烷基硫、低級烷基亞磺?；⒌图壨榛酋；?、氰基、硝基、全氟烷基、烷酰基、芳酰基、芳基炔基、低級炔基、氨基烷基羰基(芳基氨基羰基)和低級烷酰基氨基。特別優(yōu)選的取代基是低級烷基、羥基和全氟低級烷基?？捎糜诒景l(fā)明中的芳基例子有苯基、對甲苯、對甲氧基苯基、對氯苯基、間羥基苯基、間甲基硫苯基、2-甲基-5-硝基苯基、2，6-二氯苯基、1-萘基等。
術(shù)語“芳基烷基”指的是如上所定義的其中一個或多個氫原子被如上定義的芳基取代的低級烷基。本發(fā)明中可以使用任何常規(guī)的芳烷基如芐基等。相似地，術(shù)語“雜芳烷基”是與芳烷基一樣，除了用芳基替換如下定義的雜芳基。這些基團的任何一個可以是不被取代的，或可以用常規(guī)取代基在環(huán)上取代。
術(shù)語“雜芳基”指的是被取代的或沒有被取代的5-或6-節(jié)單環(huán)雜芳環(huán)或9-或10-節(jié)雙環(huán)雜芳環(huán)，這些雜芳環(huán)含有1、2、3或4個各自選自于N、S或O的雜原子。雜芳環(huán)的例子是吡啶、苯并咪唑、吲哚、咪唑、噻吩、異喹啉、喹啉等。在雜芳基定義中使用與上述“芳基”中定義相同的取代基。術(shù)語“雜芳環(huán)”可以與術(shù)語雜芳基交換使用。
術(shù)語“低級烷氧基羰基”指的是用羰基連接的低級烷氧基。烷氧基羰基的例子是乙氧基羰基等。
術(shù)語“低級烷基羰基氧”指的是用氧原子連接的低級烷基羰基氧基團。如乙酰氧基。
術(shù)語“低級烷酰基”指的是用羰基連接的低級烷基并且包括前面定義的基團如乙?；⒈；取５图壨轷；梢员怀Ｒ?guī)取代基如烷氧基、低級烷基、羥基、芳基和雜芳基取代或不被取代。
術(shù)語“低級烷基羰基氨基”指的是用氮原子連接的低級烷基羰基，如乙酰基氨基。
術(shù)語“芳酰基”指的是用羰基連接的單環(huán)或雙環(huán)芳基或雜芳基。芳?；睦佑斜郊柞；?-氰基苯甲?；?、2-萘基等。芳酰基可以被常規(guī)取代基取代或不被取代。
術(shù)語“芳氧基”是指用氧原子連接的如上所述的芳基。優(yōu)選的芳氧基是苯氧基。
術(shù)語“缺電子的取代基”是指在芳環(huán)或雜芳環(huán)上的取代基，它具有正的Hammett signa值，例如在Jerry March高級有機化學(xué)，第二版，McGraw Hill，1977，第246-253頁所定義的。典型的去電子基團是氰基、硝基、氯、烷氧基羰基低級烷基磺?；?、和氨基羰基。
在通式I的化合物中，Y優(yōu)選是Y-1基團，由此本發(fā)明還包括下列通式的化合物 其中X、R22、R23和R24如上所述。
在Y-1組中，優(yōu)選R22是氫、鹵素、低級烷基、全氟烷基(尤其是三氟甲基)，R23是氫、低級烷基、全氟烷基(尤其是三氟甲基)，R24是氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素；更優(yōu)選R22和R23是低級烷基、三氟甲基或鹵素，最優(yōu)選R22和R23是低級烷基或鹵素并且R24優(yōu)選是氫。
優(yōu)選的Y-1中，其中R23是低級烷基或鹵素，它們是
當(dāng)Y是Y-2時，“Het”最好是6節(jié)雜芳環(huán)，優(yōu)選一個、兩個或三個雜原子N，在Y-2組中最優(yōu)選 當(dāng)Y是Y-3時，Q優(yōu)選是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-或-(CH2)f-，更優(yōu)選-(CH2)f-；Y尤其優(yōu)選的是 其中Q是如上所述并且用點線表示的鍵能夠被氫化或不被氫化，優(yōu)選Q是(CH2)f-并且用點線表示的鍵被氫化，R25是R26-(CH2)e-；e是0-4，優(yōu)選2-4并且R26是疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；?、低級烷基磺酰基、低級烷基亞磺?；?、全氟低級烷酰基、硝基、低級烷基硫、苯基或用烷氧基或鹵素取代的苯基；優(yōu)選疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；?、低級烷基磺?；?、低級烷基亞磺酰基、全氟低級烷?；?、硝基或低級烷基硫，或者R26是NHR29，其中R29是低級烷?；?、低級烷氧基羰基或低級烷基氨基羰基。
更優(yōu)選的是，Y-3是4到5或4到6節(jié)環(huán)烷基環(huán)(Q是(CH2)f，f是1、2或3)，R25是R26-(CH2)e)e，e是0-4，優(yōu)選2-4，并且R26是烷氧基、低級烷基磺?；?、低級烷基硫、苯基或用烷氧基或鹵素取代的苯基，優(yōu)選烷氧基、低級烷基磺?；虻图壨榛颍騌26是NHR29其中R29是低級烷?；?、低級烷氧基羰基或低級烷基氨基羰基，和用點線表示的鍵是氫化的。最優(yōu)選的是，Y-3是具有下列通式的基團 在X-1中，R15和R16優(yōu)選是氫、低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基磺?；⒌图壨榛蚧蛉图壨榛?，更優(yōu)選R15是低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基磺?；蛉图壨榛?，并且R16是氫、低級烷基、硝基、鹵素(尤其是氯或氟)、全氟烷基、低級烷基硫或氰基。R15特別是低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基硫、全氟低級烷基(尤其是三氟甲基)并且R16是在鄰位并為氫、低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基硫或全氟低級烷基(尤其是三氟甲基)。最優(yōu)選的是，R15和R16各自是氯或氟。
而且，優(yōu)選的是R15、或R15和R16這些基團選為如上所述的缺電子的。
特別優(yōu)選的X-1基團是具有下列通式 在X-2基團中，“Het”優(yōu)選是5-或6-節(jié)單環(huán)雜芳環(huán)，含有1、2或3個氮原子，或者一個氮原子和一個硫原子，或者一個氮原子和一個氧原子。當(dāng)Het是雙環(huán)雜芳環(huán)時，它優(yōu)選含有1到3個氮原子作雜原子。R15優(yōu)選是硝基、低級烷基磺酰基、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟烷基、低級烷基硫、低級烷?；蚍蓟?尤其是沒有被取代的苯基)；R16最好是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基；并且當(dāng)R30存在時，它最好是氫或低級烷基。
更優(yōu)選的是，在X-2中，Het是含有1或2個氮原子的6節(jié)單環(huán)雜芳基，優(yōu)選吡啶或嘧啶，或含有1個氮原子的10節(jié)雙環(huán)雜芳環(huán)，R15是低級烷基或全氟烷基，R16是氫、低級烷基或全氟烷基，并且R30不存在。
特別優(yōu)選的X-2基團是具有下列通式 在X-3中，R18優(yōu)選是苯基。R19優(yōu)選是低級烷基，它是用吡啶或苯基取代或不被取代。R20優(yōu)選最好是用乙?；〈幕騼?yōu)選不被取代的低級烷?；?。
在優(yōu)選的組合中，R18是苯基，R19是用吡啶或苯基取代的或不被取代的低級烷基而R20是低級烷酰基。在X-3的另一個實施方案中，R18是用鹵素或低級烷氧基取代的或不被取代的苯基；R19是用低級烷氧基、吡啶基低級烷基或低級烷基取代的或不被取代的苯基低級烷基；而R20是最好用乙?；〈騼?yōu)選不被取代的低級烷酰基。
特別優(yōu)選的X-3基團具有下列通式 本發(fā)明的化合物具有立體異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體，這些都包含在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
下面進一步把通式1化合物的特定實施方案列出。
1.1在上述通式1的化合物的一個實施方案中，X是具有下列通式的基團 并且Y、R15和R16如上所定義，特別是其中R15是低級烷基、硝基、鹵素、全氟甲基或氰基，而R16是氫、低級烷基、硝基、鹵素、全氟甲基或氰基，更優(yōu)選其中R15和R16各自是氯或氟，最優(yōu)選其中X-1選自于下組 1.2.在通式I化合物的另一個實施方案中，X是具有下列通式X-2的基團 并且p、Y、R15、R16和R30如上定義的，特別是其中Het是5-或6-節(jié)單環(huán)雜芳環(huán)，含有1、2或3個氮原子，或一個氮原子和一個硫原子，或一個氮原子和一個氧原子，或者其中Het是含有1到3個氮原子的雙環(huán)雜芳環(huán)；更優(yōu)選其中R15是硝基、低級烷基磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷基硫、低級烷?；蚍蓟?尤其是沒有被取代的苯基)，R15特別是沒有被取代的苯基，并且其中R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基；R30是氫或低級烷基。
在該實施方案中，Het是另一個特殊的方案，它是含有1或2個氮原子的6節(jié)單環(huán)雜芳環(huán)或含有1個氮原子的10節(jié)雙環(huán)雜芳環(huán)，R15是低級烷基或全氟烷基，R16是氫、低級烷基或全氟烷基，而R30不存在。
最優(yōu)選的X-2選自于下組 1.3.在通式I的化合物又一個實施方案中，X是通式X-3的基團 Y、R18、R19和R20如上所定義，特別是其中R18是苯基，或特別是R19是用吡啶基或苯基取代的或沒有被取代的低級烷基，或者特別是R20是取代或沒有被取代的低級烷?；?br> 在更優(yōu)選的實施方案中，R18是苯基，R19是用吡啶基或苯基取代的或沒有被取代的低級烷基而R20是低級烷酰基，或者R18是用鹵素或低級烷氧基取代或沒有被取代的苯基，R19是用低級烷氧基、吡啶基低級烷基或低級烷基取代的或沒有被取代的苯基低級烷基，R是取代的或不被取代的低級烷酰基；就X-3基團中最優(yōu)選下列基團 1.4.在通式1的化合物另外一個實施方案中，Y是具有下列通式的基團
X、R22、R23和R24如上所定義；特別是其中R22是氫、低級烷基、三氟甲基或鹵素，R23是低級烷基、三氟甲基或鹵素并且R24是氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素；更優(yōu)選的是R22和R23是低級烷基、三氟甲基或鹵素并且R24是氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素；更優(yōu)選的是Y-1是選自于下列基團 1.5.在通式1的化合物的又一個實施方案中，Y是具有下列通式Y(jié)-2的基團 并且p、X、Het、R30和R31如上所定義，特別是其中Het是6節(jié)雜芳環(huán)，尤其是其中雜原子為N。
最優(yōu)選的Y-2選自于下列基團 1.6.在通式1化合物的另一個實施方案中，Y是具有通式Y(jié)-3的基團 并且Y、R和Q是如上所定義的，用點線表示的鍵能夠被氫化或不被氫化，更優(yōu)選的是Y-3選自于下列基團 1.7.在如上所述的通式1化合物的進一步特定的實施方案中，X是通式X-1的基團而Y是通式Y(jié)-1、Y-2或Y-3的基團；或者X是通式X-2的基團而Y-3是通式Y(jié)-1、Y-2或Y-3的基團；或者X是通式X-3的基團而Y是通式Y(jié)-1、Y-2或Y-3的基團，其中X-1、X-2、X-3、Y-1、Y-2和Y-3是如上述任何實施方案中所定義的。
優(yōu)選通式1化合物的特定實施方案，其中X是通式X-1的基團 其中R16是鄰位并且是氫、低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基硫、全氟低級烷基，而R15是低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基磺酰基、全氟低級烷基，Y是具有通式Y(jié)-1的基團 其中R22是氫、鹵素、三氟烷基、或低級烷基而R22是鹵素、三氟烷基或低級烷基，并且R24是氫或者Y是下列通式的基團 其中Q是如上所定義的并且點線表示的鍵能夠被氫化或不被氫化，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4，R26是疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷酰基、低級烷基磺?；?、低級烷基亞磺?；?、全氟低級烷?；⑾趸虻图壨榛蚧蛘逺25是NHR29，其中R29是低級烷?；虻图壨榛被驶?；更優(yōu)選的是其中X是具有通式X-1的基團 其中R16是在鄰位并且是氫、低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基硫、全氟低級烷基并且R15是低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基磺?；?、全氟低級烷基；并且Y是通式Y(jié)-1的基團 其中R22是氫、鹵素、或低級烷基，而R23是鹵素或低級烷基，而R24是氫；更優(yōu)選的是其中R16是氫或鹵素，R15是鹵素，R22是氫、鹵素、乙基或甲基并且R23是鹵素、乙基或甲基；尤其是其中R15是鄰位并且R15和R16都是氯，R22是甲基并且R23是氯或乙基；優(yōu)選的化合物是4-[[(2，6-二氯苯基)羰基1氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸；或者更優(yōu)選的是其中X是通式X-1的基團 其中R16在鄰位并且是氫、低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基硫、全氟低級烷基，R15是低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷基磺酰基和全氟低級烷基，并且Y是通式Y(jié)-3的基團 它是4到6節(jié)環(huán)烷環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4并且R26是疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷酰基、低級烷基磺?；?、低級烷基亞磺酰基、全氟低級烷?；⑾趸虻图壨榛?，并且點線表示的鍵可以被氫化；特別是其中R16是鹵素而R15是氫或鹵素；并且Y-3是4或5節(jié)環(huán)，R26是低級烷氧基、低級烷基磺?；?、低級烷基亞磺酰基或低級烷基硫；更優(yōu)選其中R15在鄰位并且R15和R16都是氯，而R26是低級烷基磺?；虻图壨榛?；特別是化合物4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸；或者更優(yōu)選的是其中X是通式X-1的基團 其中R16是氫或鹵素并且R15是鹵素，Y是通式Y(jié)-1的基團 其中R22是氫、鹵素、乙基、或甲基而R23是氫、乙基或甲基并且R24是氫或者Y是通式Y(jié)-3的基團 其中Y-3是4或5節(jié)環(huán)，并且R25是R26-(CH2)e-；e是2-4，并且R26是低級烷氧基、低級烷基磺?；?、低級烷基亞磺?；虻图壨榛颍⑶尹c線表示的鍵被氫化，特別是其中R15是在鄰位并且R15和R16都是氯，并且當(dāng)Y是Y-1時，R22是甲基而R23是氯或乙基并且當(dāng)Y是Y-3時，Y-3是4或5節(jié)環(huán)并且R26是低級烷基磺?；虻图壨榛?。
在通式1化合物的另外一個實施方案中，Y是如在通式1中而X是X-1 其中R15在鄰位并且是鹵素、低級烷基或全氟烷基并且R16是氫、鹵素、低級烷基或全氟烷基；特別是其中R15是氯而R16是氫或氯。
在該實施方案中，Y特別是Y-1 其中R22是氫或低級烷基，R23是鹵素、低級烷基或全氟烷基，R24是氫；特別是其中R15是氯而R16是氫或氯；特別是化合物4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，或者4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-(三氟甲基)苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。
或者在該實施方案中Y是Y-3 它是4到6節(jié)環(huán)烷環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4，并且R26是烷氧基、低級烷基磺?；?、低級烷基硫；優(yōu)選R26是甲氧基、甲基磺?；蚣谆?，或者R25是NHR29其中R29是低級烷氧基羰基或低級烷基氨基羰基，并且點線表示的鍵被氫化；優(yōu)選的化合物選自于
4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[2-(乙?；被?-乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[1-[2-[[(甲基氨基)羰基]氨基]乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(4-甲基磺酰基)-丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(3-甲基硫)丙基]-環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，或4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(3-甲基磺酰基)丙基]-環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。
在通式1化合物的又一個實施方案中，Y是如通式1中所述并且X是X-2 其中Het是吡啶和嘧啶，R15是低級烷基或全氟烷基，并且R16和R30是氫、低級烷基或全氟烷基。
在通式1化合物的另一實施方案中，Y特別是Y-1 其中R22是氫或低級烷基，R23是鹵素、低級烷基或全氟烷基，R24是氫。
或者在該實施方案中Y是Y-3
它是4到6節(jié)環(huán)烷環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4，并且R26是烷氧基、低級烷基磺?；?、低級烷基硫；優(yōu)選R26是甲氧基、甲基磺?；蚣谆?，或者R25是NHR29其中R29是低級烷氧基羰基或低級烷基氨基羰基，并且點線表示的鍵被氫化；優(yōu)選的化合物選自4-[(2，6-二甲基-3-吡啶基羰基)氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[[4-(三氟甲基)-5-嘧啶基]羰基]氨基]-N-[[1-(4-甲基磺?；?-丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]基]-L-苯基丙氨酸，或4-[[(2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]-環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。
在通式1化合物的另一實施方案中，Y是如通式1中的所述并且X是X-3 其中R19是吡啶基低級烷基或苯基低級烷基，R20是低級烷?；⑶襌18是苯基。
在該實施方案中Y特別是Y-1 其中R22是氫或低級烷基，R23是鹵素、低級烷基或全氟烷基，R24是氫；優(yōu)選的化合物是4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-吡啶基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[[(4-甲基磺酰基)丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。
或者，在該實施方案中，Y是Y-3 它是4到6節(jié)環(huán)烷環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4，并且R26是烷氧基、低級烷基磺?；?、低級烷基硫；優(yōu)選R26是甲氧基、甲基磺?；蚣谆?，或者R25是NHR29其中R29是低級烷氧基羰基或低級烷基氨基羰基，并且點線表示的鍵被氫化；優(yōu)選的化合物選自于4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-苯基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[[(4-甲基磺酰基)丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，或者4-[(2R，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-苯基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[[(4-甲基磺酰基)丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。
在通式1的化合物另外一個實施方案中，X如通式1中所述并且Y是Y-1 其中R22是氫或低級烷基，R23是鹵素、低級烷基或全氟烷基，并且R24是氫，特別是其中R22是氫或甲基而R23是鹵素、乙基或三氟甲基。
其他優(yōu)選的通式1化合物是其中X是如通式1中所述而Y是Y-3 它是4到6節(jié)環(huán)烷環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4，并且R26是烷氧基、低級烷基磺?；?、低級烷基硫；優(yōu)選是甲氧基、甲基磺酰基或甲基硫，或者R25是NHR29其中R29是低級烷氧基羰基或低級烷基氨基羰基，并且點線表示的鍵被氫化。
本發(fā)明的化合物能夠抑制VCAM-1和纖連蛋白與VLA-4在循環(huán)的淋巴細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞和單核細胞(“表達VLA-4的細胞”)結(jié)合?，F(xiàn)已經(jīng)知道VCAM-1和纖連蛋白與VLA-4在這些細胞上結(jié)合與某些疾病癥狀(如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎病)有關(guān)，尤其是嗜酸性細胞與肺內(nèi)皮的結(jié)合，它是氣喘出現(xiàn)肺炎的主要原因。所以，本發(fā)明化合物能夠用作藥劑，特別是用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎疾病，尤其是氣喘。
根據(jù)本發(fā)明化合物能夠抑制VCAM-1和纖連蛋白與VLA-4在循環(huán)的淋巴細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞和單核細胞上的結(jié)合，它們能用作治療與這些結(jié)合相關(guān)的疾病的藥劑。這些疾病的例子是風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、氣喘和腸炎疾病。本發(fā)明化合物優(yōu)選用于治療包括肺炎如氣喘的疾病。氣喘中出現(xiàn)的肺炎與嗜酸性細胞浸潤到肺部有關(guān)，在肺部嗜酸性細胞與已被一些觸發(fā)氣喘的環(huán)境或物質(zhì)激活的內(nèi)皮結(jié)合。
而且，本發(fā)明化合物也能夠抑制VCAM-1和MadCAM與細胞內(nèi)受體α4-β7(也稱作LPAM)結(jié)合，這些受體是在淋巴細胞、嗜酸性細胞和T-細胞上被表達的。雖然人們還沒有完全清楚炎癥如氣喘的各種配位體與α4-β7相互之間的具體作用，但本發(fā)明化合物在氣喘的動物模型中已非常有效地抑制了α4-β1和α4-β7受體的結(jié)合。而且用α4-β7的單克隆抗體試驗表明，能夠抑制α4-β7與MadCAM或VCAM結(jié)合的化合物是可用于治療腸炎的。它們還可用于治療其他與這類結(jié)合相關(guān)而引起的疾病危害或癥狀。
本發(fā)明化合物能夠口服、經(jīng)腸或非腸道給藥，例如靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)或經(jīng)皮給藥，或者作為眼科用制劑或者作為氣霧劑治療肺炎?？诜哪z囊、片劑、懸浮液或溶液、栓劑、注射液、滴眼液均是給藥形式的例子。
靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、口腔或吸入給藥是優(yōu)選的使用形式。本發(fā)明化合物的有效給藥劑量取決于特殊活性成分的性質(zhì)、患者的年齡和要求和給藥方式。劑量可以用任何常規(guī)方法如限劑量的臨床試驗來決定。所以，本發(fā)明還包含了對于宿主受到粘連蛋白或VCAM-1與表達VLA-4的細胞的結(jié)合而引起的病癥或病害進行治療的方法，該方法包括服用足夠量的抑制粘連蛋白或VCAM-1與表達VLA-4的細胞結(jié)合的本發(fā)明化合物從而減輕該癥狀或該危害。一般來說，優(yōu)選劑量是大約每天0.1-100mg/kg體重，比較優(yōu)選每天1-25mg/kg體重的劑量，特別優(yōu)選每天1-10mg/kg體重的劑量。
本發(fā)明也包含其他藥物組合物的實施方案，該組合物含有藥學(xué)上有效量的本發(fā)明化合物，包括它們的鹽或酯以及藥學(xué)上可接受的載體。這類組合物可以用任何常規(guī)方法配制而成。就這方面，在另一實施方案中本發(fā)明涉及了生產(chǎn)藥物制劑的方法，尤其是用來治療或預(yù)防風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎疾病和氣喘的藥劑，該方法包括把一種或多種本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯以及根據(jù)需要的一種或多種其他治療上有價值的物質(zhì)與可配伍的藥用載體一起制成蓋倫制劑給藥形式。片劑或顆粒劑能夠含有一些黏合劑、填充劑、載體和稀釋劑。液體組合物，例如能夠是無菌水溶性溶液形式。膠囊中除活性成分外還可含有填充劑或增稠劑。而且，也可以含有調(diào)味添加劑以及常用作防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑和乳化劑的物質(zhì)，并還可含有改變滲透壓的鹽、緩沖液和其他添加劑。
前面提到的載體物質(zhì)和稀釋劑可以包括任何常規(guī)藥學(xué)上可接受的有機或無機物質(zhì)如水、明膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石粉、阿拉伯膠、聚亞烷基二醇等。
口服單位劑型如片劑和膠囊優(yōu)選含有25mg到1000mg本發(fā)明化合物。
本發(fā)明化合物可以用任何常規(guī)方法制得。在反應(yīng)流程1中，使用形成酰胺鍵的常規(guī)方法把通式1的4-硝基-L-苯基丙氨酸衍生物與通式2的苯甲酸衍生物酰化，其中通式1中R1是低級烷基，而通式1的衍生物是一種已知化合物或用常規(guī)方法容易制備，而通式2中R2是氫、低級烷基、低級烷氧基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、硝基、氰基、低級烷基硫、低級烷基亞磺?；?、低級烷基磺酰基、低級烷?；Ⅺu素或全氟低級烷基，R3是氫、鹵素或低級烷基并且R4是氫、低級烷基、低級烷氧基、芳基、硝基、氰基、低級烷基磺酰基或鹵素。例如，在質(zhì)子受體如烷基叔胺中把通式2的化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酸性氯化物并與通式1的化合物縮合。或者，用標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件如HBTU在極性非質(zhì)子傳遞劑如DMF中的DIPEA存在下在0℃至室溫的溫度下把化合物1與通式2的羧酸偶聯(lián)得到通式3的化合物。
用Lawesson試劑(它是[2，4-雙(4-甲氧基苯基)-1，3-二硫代-2，4-二phosphetane-2，4-二硫化物)處理能夠進行通式3化合物向相應(yīng)的通式4硫代酰胺的轉(zhuǎn)化。該方法是標(biāo)準(zhǔn)的方法，已有詳細報導(dǎo)。參見如Scheibey，S.，Pedersen，B.S.，Lawesson，S.-O.Bull Soc.Chim.Belg.1978 87，229和Cava，M.P.，Levinson，M.I.，Terahedron 1985，41，5061。用任何常規(guī)方法都能夠把通式4的化合物的硝基還原成相應(yīng)的胺，它可與硫酰胺相容。一種常用的方法是用鋅粉作還原劑在35到60℃有甲醇、氯化銨和水存在下還原得到通式5的化合物。將該化合物用標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件如HBTU在極性非質(zhì)子傳遞劑如DMF中的DIPEA存在下在0℃至室溫的溫度下用通式6的芳基-或雜芳基羧酸?；玫酵ㄊ?化合物。在某些情況下，如有受阻的羧酸6存在下，可能比較有利的是形成相應(yīng)的酸鹵化物并一般在有稍微過量的堿如叔胺或4-(二甲基氨基)吡啶存在下使其與通式5的胺反應(yīng)。通式6的羧酸可以被鹵素、硝基、低級烷基磺?；⑶杌?、低級烷基、低級烷氧基、低級烷基羰基、羧基、低級烷基氨基磺酰基、全氟低級烷基、低級烷基硫、羥基低級烷基、烷氧基低級烷基、烷基硫低級烷基、烷基亞磺酰基低級烷基、烷基磺酰基低級烷基、低級烷基亞磺?；⒌图壨轷；⒎减；⒎蓟?、芳氧基取代。在適當(dāng)時，也可以適當(dāng)摻入保護的反應(yīng)功能基團，該保護基在最終轉(zhuǎn)化成本發(fā)明化合物時除去。這類基團的選擇和使用對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是顯而易見的。在標(biāo)準(zhǔn)參考著作中提供了選擇和使用保護基團的指導(dǎo)，如T.W.Green和P.G.M.Wuts，有機合成中的保護基團，第2版，WileyInterscience，紐約，1991。在室溫到50℃的溫度和甲醇水溶液存在下用堿金屬氧化物如氫氧化鋰處理，通常將化合物7的酯基裂解為相應(yīng)的羧酸。根據(jù)R1的性質(zhì)，可以優(yōu)選其他的方法。在有功能基團如硫酰胺存在下酯基裂解條件的選擇對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是熟知的。
反應(yīng)方程1
不能從商業(yè)渠道得到的鄰位取代的苯甲酸衍生物能夠采用常規(guī)方法制備得到。例如在有一氧化碳和適當(dāng)?shù)拟Z催化劑存在下將鄰位取代的芳基碘化物或三氟甲基磺酸酯(triflates)羰基化。這種碘化物或triflates中間體的制備方法根據(jù)所需的具體取代方式而定，它們可以通過把苯胺直接碘化或重氮化接著用碘源如碘化鉀處理得到。Triflates可以用常規(guī)方法從相應(yīng)的苯酚中衍生，例如在惰性溶劑中有堿如三乙胺或二異丙基乙胺存在下用三氟甲烷磺酸酐處理。其他獲得鄰位取代的苯甲酸的方法包括用烷基Grignard試劑處理2-甲氧基苯基噁唑啉衍生物如9，接著按照Meeyers，A.I.，Gabel，R.，Milhelick，E.D，有機化學(xué)雜志，1978，43，1372-1379中所述的一般方法水解噁唑啉環(huán)，得到通式10的酸。2-或2，6-二取代的苯甲腈也可以作為與苯甲酸相應(yīng)的常用前體。對位阻較大的腈如2-氯-6-甲基苯甲腈而言，酸和堿條件下的常規(guī)水解是困難的，但用DIBAL還原成相應(yīng)的苯甲醛接著用亞氯酸鈉/過氧化氫氧化劑氧化會獲得較好的結(jié)果。
反應(yīng)方程2 使用與反應(yīng)方程1基本上相同的方法，用雜芳羧酸替代2，就能夠制備通式11的化合物。 對于類似的支鏈或環(huán)烷基基團的合成，可以用反應(yīng)方程1中所述的相似方法，從通式12適當(dāng)?shù)闹ф溁颦h(huán)烷羧酸開始。在這種情況，R6表示低級烷基、不被取代的或氟取代的低級鏈烯基、或被取代的低級烷基其中取代基可以選自于芳基、雜芳基、疊氮、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷基硫、低級烷基磺酰基、全氟低級烷酰基、硝基或保護性的氨基。氨基保護基團必須選擇是與需要將碳酰胺轉(zhuǎn)化為硫酰胺的試劑相容的。例如對于氨基甲酸酯，叔丁基羰?；糠质沁m合的。根據(jù)需要，這些保護基團可以在合成后用常規(guī)方法除去并且所得到的游離胺還能用標(biāo)準(zhǔn)方法再官能化。例如，該胺可用適當(dāng)?shù)乃狒惽杷狨セ蛩嵝喳u化物處理使其?；?在反應(yīng)流程3中描述了通式21的咪唑啉酮的合成。用標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件如HBTU在極性非質(zhì)子傳遞劑如DMF中的DIPEA存在下在0℃至室溫的溫度下把結(jié)構(gòu)13的氨基苯基丙氨酸衍生物與通式14的N保護的氨基酸偶聯(lián)得到通式15的化合物，其中結(jié)構(gòu)13中R6是芳基、雜芳基、支鏈烷基或者從通式12化合物得到，而R7是低級烷基，在通式14中，R8可以是天然或非天然的D-或L-α-氨基酸側(cè)鏈而R9是常用于肽化學(xué)中的氮保護基類型如Fmoc基團。按照保護基團R9的性質(zhì)，使用適當(dāng)?shù)娜ケＷo方法得到通式16的化合物。但保護基團R9是Fmoc基時，可使用實用肽化學(xué)的技術(shù)人員所熟知的標(biāo)準(zhǔn)堿處理如用DMF中的哌啶從15中除去它從而得到通式16的胺。然后該化合物16在25-60℃適當(dāng)?shù)娜軇┤缍燃淄榛騎HF中有水凈化劑如4分子篩存在下與醛17反應(yīng)得到通式18的亞胺，其中通式17中R10是低級烷基、芳基、或芳基低級烷基。然后該亞胺18在25-60℃在適當(dāng)溶劑如二氯甲烷或THF中有堿如DIPEA或DBU存在下用酰化劑如通式19的乙酰氯處理，得到通式20的?；溥蜻?，其中通式19中R11是烷基或芳基?；蛘撸谠摲磻?yīng)中也可以使用其他可反應(yīng)的?；鶊F如酸酐或混合的酸酐。用適當(dāng)?shù)乃夥椒ò鸦衔?0轉(zhuǎn)化成本發(fā)明化合物，例如在醇的水溶液中用堿金屬氫氧化物例如氫氧化鈉處理而水解，酸化后得到通式21的羧酸。
反應(yīng)方程3 一般方法熔點是在Thomas-Hoover設(shè)備上測定的，沒有校正。旋光度是用Perkin-Elmer241型光度測定儀測定的。1H-NMR譜是用Varian XL-200和Unityplus 400MHz分光光度計記錄的，使用了四甲基硅(TMS)作內(nèi)標(biāo)。電子碰撞(EI，70ev)和快速原子撞擊(FAB)質(zhì)譜是在VG自動色譜儀或VG70E-HF質(zhì)譜儀上進行的。用于柱色譜層析法的硅膠是用于閃蒸色譜層析法的Mallinkrodt SiliCar 230-400目硅膠；柱子是在0-5psi氮氣壓下流動情況下操作。薄層色譜層析是在用E.Merck提供的硅膠(E.Merck#1.05719)覆蓋的薄層玻璃板上進行的并且在觀察盒中在254nm UV燈下暴露在I2氣中觀察，或者噴灑磷鉬酸(PMA)的乙醇水溶液或者在暴露在Cl2后使用4，4’-四甲基二氨基二苯基甲烷試劑，該試劑是按照E.VonArx，M.Faupel和MBrugger，色譜層析雜志，1976，120，224-228中所述制備的。
反向高效液相色譜(RP-HPLC)的操作條件是或者使用Waters Delta Prep4000，3×30cm，Waters Delta Pak 15μM C-18柱，流速40mL/分鐘，在35-40分鐘內(nèi)一般使用5到95％乙腈的乙腈水(分別含有0.75％TFA)的梯度，或者使用Rainin HPLC，4×300mm，8μM DynamaxTMC-18柱，流速49mL/分鐘，乙腈水的梯度如上所述。HPLC的條件表示為數(shù)字格式(5-95-35-214)；這是指乙腈在水中35分鐘的線性梯度從5到95％，同時用設(shè)定在214nM波長的UV測定儀監(jiān)控流出液。
二氯甲烷、2-丙醇、DMF、THF、甲苯、己烷、乙醚和甲醇均是Fisher試劑級并且除另作說明外均不再純化就可使用，乙腈是Fisher hplc級并直接使用。
定義THF是四氫呋喃，DMF是N，N-二甲基甲酰胺，HOBT是1-羥基苯并三唑，BOP是[(苯并三唑-1-基)氧]三-(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽，HATU是O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基尿鎓六氟磷酸鹽，HBTU是O-苯甲三唑-N，N，N，N’-四甲基尿鎓(uronium)六氟磷酸鹽，DIPEA是二異丙基乙胺，DMAP是4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，DPPA是二苯基磷酰疊氮化物，DPPP是1，3-雙(二苯基膦基)丙烷，DBU是1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯，NaH是氫化鈉，鹽水是飽和的氯化鈉水溶液，TLC是薄層色譜層析，LDA是二異丙基酰胺鋰，BOP-Cl是雙(2-氧代-3-氧代噁唑烷基)次膦酸氯化物，NMP是N-甲基吡咯烷酮，Lawesson試劑是[2，4-雙(4-甲氧基苯基)-1，3-二硫代-2，4-二phosphetane-2，4-二硫化物]。
實施例實施例1.N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 向[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(4.30g，11.4mmol)的甲苯溶液(20mL)中加入Lawesson試劑(2.60g，6.27mmol)。把所得到的混合物加熱到50℃并攪拌18小時。用燒結(jié)玻璃板漏斗過濾反應(yīng)混合物并真空濃縮濾液。用己烷-乙酸乙酯(9∶1然后8∶1)洗脫的閃蒸柱色譜層析法純化得到N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(2.44g，54％；70％，以回收的起始物質(zhì)為準(zhǔn))淡黃色油。
HRMS測定的質(zhì)量，395.1639，計算的質(zhì)量395.1640(M+H)。
實施例2.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 在5分鐘內(nèi)向N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(4.58g，11.6mmol)、鋅粉(7.50g，116mmol)和氯化銨(9.20g，174mmol)的甲醇(200mL)混懸液中緩慢加入水(100mL)。攪拌20分鐘后，用乙酸乙酯(400mL)和飽和的氯化銨溶液(150mL)稀釋反應(yīng)混合物并分離有機相。含水相再用乙酸乙酯(3×100mL)反萃取并合并有機相，在Na2SO4上干燥，過濾并真空濃縮。把得到的油在高真空狀態(tài)下干燥2小時得到粗4-氨基-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(4.5g)。
向上述得到的粗胺(3.40g，8.77mmol，以94％純度)和二異丙基乙基胺(1.70mL，9.65mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中加入2，6-二氯苯甲酰氯(1.9g，9.21mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液。把所得到的混合物攪拌過夜。把反應(yīng)混合物真空濃縮并轉(zhuǎn)入裝有乙酸乙酯(150mL)和水(40mL)的分液漏斗。分離含水相并再用乙酸乙酯(1×50mL)反萃取。用飽和的Na2CO3接著飽和鹽水沖洗有機層，在MgSO4上干燥，過濾并真空濃縮。用己烷-乙酸乙酯(3∶1)洗脫的硅膠閃蒸塔色譜層析法純化得到4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(4.50g，95％)。
HR MS測定的質(zhì)量，559.1201，計算的質(zhì)量559.1201(M+Na)。
實施例3.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 向4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(4.00g，7.44mmol)的甲醇(18mL)溶液加入NaOH(421mg，10.5mmol)的水(3mL)溶液。把混合物攪拌2小時，然后用0.5M HCl酸化(pH＝1～2)。把反應(yīng)混合物倒入裝有乙酸乙酯(150mL)和水(25mL)的分液漏斗中。分離含水相并再用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有機相用飽和鹽水沖洗，在MgSO2上干燥，過濾并真空濃縮。用15-95％乙腈-水梯度反相HPLC25分鐘純化得到4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸(3.05g，78％)。
HR MS測定的質(zhì)量，545.1043，計算的質(zhì)量545.1045(M+Na)。
實施例4.1-(2-疊氮乙基)環(huán)戊烷羧酸 在20分鐘內(nèi)向二異丙胺(56mL，0.396mol)的THF(85mL)的冰凍溶液中加入正丁基鋰的己烷溶液(240mL，1.6M，0.393mol)。在0℃把混合物攪拌30分鐘，冷卻到-65℃的冰浴溫度并在20分鐘內(nèi)加入環(huán)戊烷羧酸乙酯(37.4g，0.263mmol)的THF(50mL)。1小時后，加入1，2-二溴乙烷(47mL，0.545mol)的THF(50mL)溶液，把混合物在-65℃保持3小時并加熱到室溫過夜。通過加入飽和的氯化銨溶液(200mL)使反應(yīng)猝滅，分離各相并把含水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。把合并的提取液用1∶1鹽水∶水(250mL)沖洗并干燥(Na2SO4)。把溶液過濾并濃縮，用甲苯(100mL)稀釋并濃縮。把稀釋和濃縮重復(fù)兩次得到1-(2-溴乙基)環(huán)戊烷羧酸乙酯(52.5g)。
在50℃氮氣下把上述溴化物(52.5g，0.211mol)和氮化鈉(54g，0.831mol)的DMF(200mL)溶液攪拌5小時并過濾。濃縮濾液至幾乎干燥，用乙酸乙酯(500mL)稀釋，過濾并濃縮得到粗1-(2-疊氮乙基)環(huán)戊烷羧酸乙酯(40.9g)棕色油。把該物質(zhì)與前面獲得的產(chǎn)物(總63.5g)混合并在250g硅膠上用5％乙酸乙酯的己烷洗脫來色譜層析純化得到50.3g產(chǎn)物，淡棕色油。
把上述油(50.3g，0.238mol)溶于THF(750mL)和甲醇(375mL)中并加入LiOH氫化物(15g，0.357mol)的水(300mL)溶液。把所得到的溶液在40℃攪拌過夜并濃縮。將殘余物溶于2L含有40mL的1N NaOH的水并用己烷(1L)沖洗。用1N HCl(375mL)酸化含水相并用乙醚(2×1L)萃取。把合并的提取液干燥(Na2SO4)并濃縮得到1-(2-疊氮基乙基)環(huán)戊烷羧酸(37.5g)，一種琥珀色液體。
實施例5.N-[[1-(2-疊氮基乙基)環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。
用二異丙基乙胺(4.2mL，24.2mmol)處理4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯鹽酸鹽(3.0g，11.5mmol)、1-(2-疊氮基乙基)環(huán)戊烷羧酸(2.3g，12.7mmol)和BOP(5.34g，12.1mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液和DMF(4mL)。把該混合物攪拌過夜，同時TLC(1∶1己烷∶乙酸乙酯)顯示沒有更多的起始物質(zhì)。用水稀釋該混合物，并用乙酸乙酯萃取。用水和飽和鹽水沖洗萃取液并在硫酸鈉上干燥。過濾和蒸發(fā)得到殘余物，在硅膠上用3∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫的色譜層析純化得到4.26g的N-[[1-(2-疊氮基乙基)環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。
實施例6.N-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 a.滴加1M的三甲基鏻的THF溶液處理N-[[1-(2-疊氮基乙基)環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(1.92g，4.93mmol)的THF(20mL)溶液。加完后，把該混合物攪拌20分鐘并加水(0.17mL)。把反應(yīng)再攪拌2小時，加少量TFA并把混合物在硫酸鈉上干燥并濃縮。 b.向N-[[1-(2-氨基乙基)環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯三氟乙酸鹽(2.35g，4.93mmol)的二噁烷(25mL)溶液中加入二異丙基乙胺(0.860mL，4.93mmol)和二叔丁基碳酸氫鹽(1.08g，4.93mmol)。把所得到的混合物攪拌18小時。用燒結(jié)的玻璃板漏斗過濾反應(yīng)混合物并把濾液真空濃縮。用己烷-乙酸乙酯(3∶1)洗脫用硅膠閃蒸塔色譜層析純化得到N-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(2.20g，95％)。
HR MS測定的質(zhì)量，465.2397，計算的質(zhì)量464.2397(M+H)。
實施例7.N-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 向N-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(1.00g，2.16mmol)的甲苯/二噁烷(1；1，10mL)溶液加入Lawesson試劑(0.524g，1.29mmol)。把所得到的混合物加熱到50℃并攪拌24小時。用燒結(jié)玻璃板漏斗過濾反應(yīng)混合物并把濾液真空濃縮。用硅膠閃蒸塔色譜層析法用己烷-乙酸乙酯(6∶1然后4∶1)洗脫純化得到N-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(460mg，4％；65％，以回收的初始物質(zhì)為準(zhǔn))，淡黃色油。
HR MS測定的質(zhì)量，478.2014，計算的質(zhì)量478.2012(M-H)。
實施例8.N-[[1-[2-(乙?；被?乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 向N-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(1.26g，2.63mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中滴加TFA(7mL)并在室溫把所得到的混合物攪拌2小時。把反應(yīng)混合物在真空濃縮得到粗的N-[[1-[2-(乙?；被?環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯的TFA鹽(1.4g)，黃色油。
向上述所得到的鹽(1.4g，2.63mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入二異丙基乙胺(1.37mL，7.88mmol)和乙酸酐(0.250mL，2.63mmol)。把所得到的混合物攪拌過夜。真空濃縮反應(yīng)混合物并轉(zhuǎn)入裝有乙酸乙酯(100mL)和水(40mL)的分液漏斗中。分離含水相并再用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。把合并的有機相用鹽水沖洗，在MgSO4上干燥，過濾并真空濃縮。用二氯甲烷-丙酮(5∶1)的閃蒸塔色譜層析純化得到N-[[1-[2-(乙?；被?乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(743mg，67％)。
HRMS測定的質(zhì)量，422.1744，計算的質(zhì)量422.1750(M+H)。
實施例9.4-氨基-N-[[1-[2-(乙酰基氨基)乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 在5分鐘內(nèi)向N-[[1-[2-(乙酰基氨基)乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(740mg，1.75mmol)、鋅粉(1.14g，17.5mmol)和氯化銨(1.41g，26.3mmol)的甲醇(20mL)懸浮液中緩慢加水(10mL)。攪拌20分鐘后，用乙酸乙酯(80mL)和飽和氯化銨溶液(25mL)稀釋反應(yīng)混合物并且分離有機相。用乙酸乙酯(3×25mL)反萃取含水相并把有機相合并，在Na2SO4上干燥，過濾并真空濃縮。在高真空下把該油干燥2小時得到粗品胺(750mg)。用二氯甲烷-丙酮(2∶1)洗脫的閃蒸硅膠柱色譜層析純化得到4-氨基-N-[[1-[2-(乙酰基氨基)乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(650mg，95％)。
HRMS測定的質(zhì)量，392.2016，計算的質(zhì)量392.2008(M+H)。
實施例10.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[2-(乙?；被?乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 向4-氨基-N-[[1-[2-(乙?；被?乙基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(195mg，0.498mmol)和二異丙基乙胺(0.0950mL，0.548mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中加入2，6-二氯苯甲酰氯(110mg，0.523mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液。把所得到的混合物攪拌過夜。真空濃縮反應(yīng)混合物并將其轉(zhuǎn)入裝有乙酸乙酯(50mL)和水(10mL)的分液漏斗中。分離含水相并再用乙酸乙酯(1×25mL)萃取。用飽和的碳酸鈉溶液接著用飽和鹽水沖洗合并的有機相，并在硫酸鎂上干燥，過濾并真空濃縮得到粗的4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[2-(乙?；被?乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(300mg)。
向上述甲酯(300mg，0.498mmol)的甲醇(1mL)溶液中加入氫氧化鈉(64mg，14.9mmol)水(1mL)溶液。把混合物攪拌2小時，然后用0.5M鹽酸酸化(pH＝1～2)。把反應(yīng)混合物倒入裝有乙酸乙酯(50mL)和水(10mL)的分液漏斗中。分離含水相并再乙酸乙酯(2×25mL)反萃取。用飽和鹽水沖洗合并的有機相，在硫酸鎂上干燥，過濾并真空濃縮。用15-95％的乙腈-水梯度在25分鐘內(nèi)反相色譜層析法純化得到4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[2-(乙?；被?乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸(126mg，46％)，白色固體。
HR MS測定的質(zhì)量，550.1330，計算的質(zhì)量550.1334(M+H)。
實施例11.[[1-[2-[[(甲基氨基)羰基]氨基]乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-L-苯基丙氨酸。 用實施例8-10中所述的一般方法從N-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯和異氰酸甲酯制備[[1-[2-[[(甲基氨基)羰基]氨基]乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-L苯基丙氨酸。
HRMS測定的質(zhì)量，565.1436，計算的質(zhì)量565.1443(M+H)。
實施例12. 2-氯-6-甲基苯甲醛。 向500mL帶有磁性攪拌器、溫度計、外加的漏斗和氬氣入口的三頸圓底燒瓶中裝入75g(494mmol)的2-氯-6-甲基芐腈和400mL的甲苯(在4A分子篩上存放)。把混合物冷卻到-2℃(冰水+丙酮)并且在30分鐘內(nèi)滴加DIBAL-H(593mmol，593mL，1.0N)的己烷溶液同時把溫度保持在0℃以下。加入后，在0℃攪拌反應(yīng)混合物1小時，然后加熱到室溫。在室溫2小時后，TLC分析表明沒有起始物質(zhì)(4∶1己烷∶乙醚，磷鉬酸噴霧，因為用紫外熒光分析會誤導(dǎo))。把反應(yīng)混合物倒入冰(2000g)和濃硫酸(50mL)并攪拌過夜。過濾收集沉淀的固體，并把濾液用乙醚(2×200mL)萃取。用鹽水溶液沖洗合并的提取液并在硫酸鎂上干燥。過濾干燥劑并濃縮該溶液得到粗醛，與上述固體合并得到71.31g(93％)的淡黃色固體適用于下一步。
實施例13. 2-氯-6-甲基苯甲酸 向1000mL帶有磁性攪拌器、溫度計、另外的漏斗和氬氣入口的三頸圓底燒瓶中裝入71.31g(461mmol，從上述試驗中得到的粗品)的2-氯-6-甲基芐醛和750mL的乙腈。在室溫，向該懸浮液中加入磷酸一鈉(115mmol，15.9g，0.25當(dāng)量)的水(240mL)溶液，接著加入過氧化氫(50mL，30％)。然后，在0℃滴加亞氯酸鈉(73.5g，811mmol，1.76當(dāng)量)的水(700mL)溶液，同時把溫度保持在3℃以下。加入后，在0℃到室溫把黃色懸浮液攪拌15小時，同時TLC分析混合物表示沒有醛存在。然后，在0℃滴加二硫化鈉(73g，701mmol，1.52當(dāng)量)的水(200mL)溶液直到黃色消失(KI紙陽性)。冷卻是控制放熱反應(yīng)所必須的。在真空下除去溶劑得到白色固體。過濾收集固體并用乙醚(200mL)萃取濾液。把上述固體也溶于乙醚溶液中并用10％NaOH溶液(2×200mL)沖洗。用10％鹽酸中和該堿性水溶液到pH到1。過濾收集沉淀的白色固體并在空氣中干燥得到54.88g(65％，總共兩步)的2-氯-6-甲基苯甲酸白色固體。
實施例14.N-(2-氯-6-甲基苯基羰基)-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 在室溫向4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯鹽酸鹽(7.44mmol，1.94g)、2-氯-6-甲基苯甲酸(8.2mmol，1.4g)和HBTU(8.2mmol，3.11g)的DMF(27mL)溶液中加入二異丙基乙胺(18.6mmol，3.24mL)。在室溫把透明溶液攪拌48小時并用100mL乙酸乙酯稀釋。連續(xù)用0.5N鹽酸(2×50mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(2×50mL)、鹽水溶液(100mL)沖洗乙酸乙酯層并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮溶劑得到2.67g(95％)的N-(2-氯-6-甲基苯基羰基)-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯白色固體熔點120-123℃。
HRMS測定的質(zhì)量，367.4274，計算的質(zhì)量367.4238(M+H)。
實施例15.N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 在室溫向N-(2-氯-6-甲基苯基羰基)-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(9.66mmol，3.64g)和Lawesson試劑(6.0mmol，2.46g，0.62當(dāng)量)混合物中加入甲苯(15mL，它已經(jīng)存放在4A分子篩上)。把懸浮液加熱到90-100℃并攪拌24小時(到這時得到透明溶液)，在這時混合物的TLC分析顯示沒有起始物質(zhì)。用乙酸乙酯(50mL)稀釋反應(yīng)混合物并用水(50mL)、飽和的碳酸氫鈉溶液(50mL)、鹽水溶液(50mL)沖洗，在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮溶劑得到粗品化合物，通過用己烷∶乙酸乙酯(4∶1到2∶1)洗脫的硅膠柱色譜層析法仔細純化得到1.52g(40％)的N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種黃色固體熔點150-153℃(從乙醚和己烷3∶1的比例研制的)。
HR MS測定的質(zhì)量，393.0685，計算的質(zhì)量393.0677(M+H)。
實施例16.4-氨基-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 在室溫向N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(3.86mmol，1.25g)、鋅粉(325目，39.0mmol，2.55g，10當(dāng)量)和氯化銨(58.0mmol，3.09g，15當(dāng)量)中加入甲醇(50mL)和水(25mL)。加入水后，接著發(fā)生放熱反應(yīng)，溫度升至45-50℃。在50-60℃的水浴溫度把懸浮液攪拌2小時，這時TLC分析混合物表明沒有起始物質(zhì)存在。用硅藻土墊過濾反應(yīng)混合物并用甲醇(50mL)和水(40mL)沖洗濾餅。真空濃縮濾液除去甲醇并把產(chǎn)物用乙酸乙酯(2×50mL萃取)。用鹽水溶液(50mL)沖洗合并的提取液并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮得到1.3g(92％)的4-氨基-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯無定形黃色固體，可以直接用于下一步。
HR MS測定的質(zhì)量，363.0932，計算的質(zhì)量363.0934(M+H)。
實施例17. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 在室溫向4-氨基-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(3.57mmol，1.296g)和2，6-二氯苯甲酰氯(3.75mmol，0.785g)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入二異丙基乙胺(5.35mmol，0.93mL)。把溶液攪拌15小時，這時TLC分析該混合物表明沒有起始物質(zhì)存在。然后，用水(30mL)稀釋它并分離兩相。用二氯甲烷(20mL)萃取含水相并用鹽水溶液(50mL)沖洗合并的提取液。在無水硫酸鎂上干燥后，真空濃縮溶液并且把殘余物用己烷∶乙酸乙酯(4∶1到1∶1)洗脫的硅膠柱色譜層析法純化得到1.91g(83％)的4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯的無定形白色固體。
HR MS測定的質(zhì)量，535.0399，計算的質(zhì)量535.0416(M+H)。
實施例18.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 在室溫向4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(2.89mmol，1.55g)的乙醇(8mL)的懸浮液中加入1.0N氫氧化鈉水溶液(5mL)。把混合物加熱到50-55℃并把所得到的透明溶液攪拌3-4小時，這時TLC分析混合物表明沒有起始物質(zhì)存在。濃縮混合物除去乙醇，并用15mL水稀釋并用25mL的乙醚萃取除去任何中性雜質(zhì)。用1N鹽酸酸化含水相并把沉淀的白色固體在乙酸乙酯(2×30mL)中萃取。用鹽水溶液沖洗合并的萃取液并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮溶液得到1.45g(46％)的4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸無定形白色固體。
HR MS測定的質(zhì)量，521.0241，計算的質(zhì)量521.0260(M+H)。
實施例19. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸鈉鹽。 在室溫把4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸(2.77mmol，1.45g)溶于含有1.5當(dāng)量的1.0N氫氧化鈉含水溶液(4.2mL)的水(10mL)中。把該溶液裝入8英寸長直徑1.5英寸的C-18硅膠反相柱并用水洗脫除去過量的堿。把該產(chǎn)物用5-20％甲醇的水溶液洗脫。濃縮合并的餾分并把殘余物溶于50mL水中冷凍干燥得到1.3g鈉鹽，白色無定形固體。
HR MS測定的質(zhì)量，543.0076，計算的質(zhì)量543.0079(M+H)。
實施例20. 2-乙基-6-甲基苯甲酸 在250mL的壓力瓶中裝入2-乙基-6-甲基碘代苯(30.07mmol，7.4g)、Pd(OAc)2(1.43mmol，334mg)和dppp(1.43mmol，620mg)。把燒瓶用隔膜封閉并用氬氣抽空三次。然后，用注射器連續(xù)加入乙腈(96mL)、三乙胺(189mmol，19.0g，26.25mL)和水(19.1mL)。然后，用連接一氧化碳源的襯特氟隆的蓋替換橡膠隔膜。這時用一氧化碳(40psi)給燒瓶加壓并釋放剩余壓力。把該過程重復(fù)三次并最后在40psi一氧化碳壓力下把混合物攪拌5分鐘。然后把燒瓶與一氧化碳圓錐體斷開并浸入預(yù)熱的油浴(83-85℃)。在1小時內(nèi)反應(yīng)混合物變黑并在該溫度再攪拌14小時。然后，把反應(yīng)混合物冷卻到室溫并釋放壓力。用乙醚(200mL)和0.1N氫氧化鈉(20mL)稀釋所得到的混合物。把所形成的酸放入水(2×100mL)中萃取。用1.0N的鹽酸中和合并的水萃取液并把該酸放入二氯甲烷(3×100mL)萃取。用鹽水溶液沖洗合并的二氯甲烷萃取液并在硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并在真空除去溶劑得到3.58g(72.5％)的粘稠性棕色油，慢慢固化一夜。
HR MS測定的質(zhì)量，164.0833，計算的質(zhì)量164.0837(M+)。
實施例21.N-[(2-乙基-6-甲基苯基)羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。
試驗實施例14所述的步驟，制備N-[(2-乙基-6-甲基苯基)羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，白色固體，得率72％，熔點119-121℃。
HR MS測定的質(zhì)量，371.1610，計算的質(zhì)量371.1607(M+H)。
實施例22.N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 用實施例15所述的方法，制備N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率47％。
HR MS測定的質(zhì)量，387.1383，計算的質(zhì)量387.1378(M+H)。
實施例23. 4-氨基-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例16中所述的常規(guī)方法，制備4-氨基-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率94％。
HR MS測定的質(zhì)量，357.1640，計算的質(zhì)量357.1638(M+H)。
實施例24. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例17中所述的方法，制備4-[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為70％。
HR MS測定的質(zhì)量，529.1094，計算的質(zhì)量529.1119(M+H)。
實施例25. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例18中所述的方法，制備4-[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體，得率77％。
HR MS測定的質(zhì)量，515.0942，計算的質(zhì)量515.0963(M+H)。
實施例26. 4-[[(2R)-2-(Fmoc-氨基)-3-(3-吡啶基)-1-氧代丙基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。
使用實施例1所述的方法，制備4-[(2R)-2-(Fmoc-氨基)-3-(3-吡啶基)-1-氧代丙基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為72％。
HR MS測定的質(zhì)量，727.2973，計算的質(zhì)量727.2954(M+H)。
實施例27. 4-[[(2R)-2-氨基-3-(3-吡啶基)-1-氧代丙基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 用25％哌啶的NMP(3mL)溶液處理實施例26得到的產(chǎn)物(0.308mol，224mg)并在室溫把溶液攪拌1小時，這時用TLC分析混合物表明沒有起始物質(zhì)存在。用己烷(25mL)稀釋混合物并分離兩相。用己烷稀釋黃色的底層并分離。然后，用水稀釋黃色的底層并用乙酸乙酯和THF(2∶1，3×25mL)萃取。用水(50mL)、鹽水溶液(50mL)沖洗合并的提取液并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮溶劑得到產(chǎn)物，在高真空下干燥得到126mg(81％)的4-[[(2R)-2-氨基-3-(3-吡啶基)-1-氧代丙基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體。
HR MS測定的質(zhì)量，505.2270，計算的質(zhì)量505.2274(M+H)。
實施例28. 4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-吡啶基)甲基]-5-氧代咪唑烷-1-基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。
向4-[[(2R)-2-氨基-3-(3-吡啶基)-1-氧代丙基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(0.224mmol，113mg)的二氯甲烷(0.75mL)和CH(OMe)3(0.75mL)溶液中加入苯甲醛(0.25mmol，27.5mg)。在室溫下把所得到的淡黃色溶液攪拌3天并把反應(yīng)混合物加熱到90℃(油浴溫度)。然后，用注射器加入過量的乙酸酐(2.0mmol，0.21mL)并在110-120℃(油浴溫度)攪拌溶液6小時。把反應(yīng)混合物冷卻到室溫并真空除去溶劑。用反相HPLC純化殘余物的粗品得到95mg(67％)的4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-吡啶基)甲基]-5-氧代咪唑烷-1-基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，635.2672，計算的質(zhì)量635.2692(M+H)。用HPLC(＜5％)形成小量的其他異構(gòu)體并且不是用來分離它。
實施例29. 4-[(2S，4R)-3-乙酰基-2-苯基-4-[(3-吡啶基)甲基]-5-氧代咪唑烷-1-基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 用實施例18中所述的一般方法進行水解，并在30分鐘內(nèi)用5-95％乙腈-水梯度洗脫的反相HPLC純化該產(chǎn)物并收集所需要的級分。真空除去乙腈并把該產(chǎn)物萃取入乙酸乙酯THF(3∶1)(2×25mL)。用鹽水溶液沖洗合并的級分并在無水硫酸鎂上干燥。過濾干燥劑后，濃縮溶液并在高真空下干燥殘余物得到4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-吡啶基)甲基]-5-氧代咪唑烷-1-基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，得率為30％的無定形白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，621.2520，計算的質(zhì)量621.2535(M+H)。
實施例30.N-[(2-氟苯基)羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例14中所述的一般方法，用2-氟苯甲酸作起始物，制備N-[(2-氟苯基)羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯的白色固體，得率為99％。沸點137-139℃。HR MS測定的質(zhì)量，346.0977，計算的質(zhì)量346.0980，M+。
實施例31.N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例15中所述的一般步驟，用N-[(2-氟苯基)羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率99％。
HR MS測定的質(zhì)量，363.0816，計算的質(zhì)量363.0815，(M+H)。
實施例32. 4-氨基-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。
使用實施例16中所述的一般步驟，用N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-氨基-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率87％。
HR MS測定的質(zhì)量，332.1042，計算的質(zhì)量332.1046，(M+H)。
實施例33. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例17所述的一般步驟，用4-氨基-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率74％。
HR MS測定的質(zhì)量，505.0561，計算的質(zhì)量505.0555，(M+H)。
實施例34. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例18所述的一般步驟，用4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體，得率89％。
HR MS測定的質(zhì)量，491.0407，計算的質(zhì)量491.0399，(M+H)。
實施例35. 4-硝基-N-[[(2-(三氟甲基)苯基]羰基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例14所述的一般步驟，用2-三氟甲基苯甲酸作起始物質(zhì)，制備4-硝基-N-[[(2-(三氟甲基)苯基]羰基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色固體，得率為69％。熔點152-154℃。HR MS測定的質(zhì)量，397.1017，計算的質(zhì)量397.1011，(M+H)。
實施例36. 4-硝基-N-[[(2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例15所述的一般步驟，用4-硝基-N-[[(2-(三氟甲基)苯基]羰基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-硝基-N-[[(2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為67％。HR MS測定的質(zhì)量，412.0752，計算的質(zhì)量412.0757，(M+H)。
實施例37. 4-氨基-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例16所述的一般步驟，用4-硝基-N-[[(2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-氨基-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為98％。HR MS測定的質(zhì)量，382.1072，計算的質(zhì)量382.1078，(M+H)。
實施例38. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例17所述的一般步驟，用4-氨基-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為98％。HR MS測定的質(zhì)量，555.0511，計算的質(zhì)量555.0524，(M+H)。
實施例39. 4-(2，6-二氯苯基羰基氨基)-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例18所述的一般步驟，用4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-(2，6-二氯苯基羰基氨基)-N-[[2-(三氟甲基)苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體，得率為99％。HR MS測定的質(zhì)量，541.0358，計算的質(zhì)量541.0367，(M+H)。
實施例40. 1-(4-溴丁基)環(huán)戊烷羧酸甲酯。 在-10℃，向二異丙胺(150mmol，21mL)的THF(100mL)溶液中滴加正丁基鋰(145mmol，58mL，2.5M)的己烷溶液，同時把溫度保持在0℃以下。加入后，在0℃攪拌溶液30分鐘。在-70℃，向該溶液中滴加甲基環(huán)戊烷羧酸酯(100mmol，13.1g)的THF(20mL)溶液，并保持內(nèi)部溫度在-60到-70℃。加入后，在-50到-60℃把反應(yīng)混合物攪拌1小時。然后，滴加1，4-二溴丁烷(100mmol，21.59g)的THF(20mL)溶液并在-60到-70℃攪拌該淡棕色懸浮液一小時。然后，將其加熱到室溫并攪拌一夜。把反應(yīng)混合物倒入飽和的氯化銨溶液(200mL)中并把有機化合物萃取入乙醚(2×100mL)中。用飽和的氯化鈉溶液(150mL)沖洗合并的提取液并在無水硫酸鎂上干燥。過濾干燥劑后，真空濃縮溶液并在120-133℃/2.5mm Hg蒸餾得到12.8g(48％)的1-(4-溴丁基)環(huán)戊烷羧酸甲酯無色油。HR MS測定的質(zhì)量，262.0565，計算的質(zhì)量262.0568，(M+)。
實施例41. 1-[4-(甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸甲酯。
實施例41. 1-[4-(甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸甲酯。 向1-(4-溴丁基)環(huán)戊烷羧酸甲酯(38mmol，10g)的DMF(100mL)溶液中加入硫代甲醇鈉(72.6mmol，5.09g)。加入后，接著發(fā)生放熱反應(yīng)，混合物轉(zhuǎn)化為淡棕色混濁溶液。在室溫把混合物攪拌15分鐘并倒入水中(200mL)。把有機化合物萃入二乙醚(2×150mL)中。用飽和的氯化鈉溶液(150mL)沖洗合并的提取液并在無水硫酸鎂上干燥。過濾除去干燥劑后，真空濃縮溶液并用硅膠柱色譜層析法純化殘余物得到4.43g(51％)的甲基1-[4-(甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸甲酯，無色油。HR MS測定的質(zhì)量，230.1343，計算的質(zhì)量230.1341，(M+)。
實施例42. 1-[4-(甲基磺?；?丁基]環(huán)戊烷羧酸甲酯。 向1-[4-(甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸甲酯(19.2mmol，4.43g)的AcOH(20mL)加入30％過氧化氫(10mL)。把反應(yīng)混合物加熱到70℃并攪拌15小時，這時混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在。把反應(yīng)混合物冷卻到室溫并真空濃縮。把殘余物倒入飽和的碳酸氫鈉溶液并用乙醚(3×100mL)萃取。用飽和的氯化鈉溶液(200mL)沖洗合并的提取液并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑后，真空除去溶劑并把殘余物用硅膠柱色譜層析法純化得到4.94g(98％)無色油。LR MS(C12H22O4S)，263(M+H)。
實施例43. 1-[4-(甲基磺?；?丁基]環(huán)戊烷羧酸 向1-[4-(甲基磺?；?丁基]環(huán)戊烷羧酸甲酯(18.8mmol，4.94g)的THF(38mL)和甲醇(38mL)加入1N氫氧化鈉(38mL)。把反應(yīng)混合物加熱到50-55℃并攪拌15小時，這時混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在，把反應(yīng)混合物冷卻到室溫。真空除去溶劑并把殘余物用水(100mL)稀釋并用乙醚(2×50mL)萃取來除去任何中性雜質(zhì)。然后，用1N鹽酸酸化堿性含水相并把該產(chǎn)物用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。用鹽水溶液沖洗合并的提取液并在無水硫酸鈉上干燥。濾除干燥劑后，真空濃縮溶液并把殘余物在高真空下干燥得到標(biāo)題化合物4.31g(92％)低熔點白色固體。
LR MS(C11H20O4S)249(M+H)。
實施例44. 1-[4-(甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸
向1-[4-(甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸甲酯(18.8mmol，4.94g)的THF(38mL)和甲醇(38mL)溶液中加入1N氫氧化鈉(38mL)。把反應(yīng)混合物加熱到50-55℃并攪拌15小時，這時混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在，把反應(yīng)混合物冷卻到室溫。真空除去溶劑并把殘余物用水(100mL)稀釋并用乙醚(2×50mL)萃取來除去任何中性雜質(zhì)。然后，用1N鹽酸酸化堿性含水相并把該產(chǎn)物用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。用鹽水溶液沖洗合并的提取液并在無水硫酸鈉上干燥。濾除干燥劑后，真空濃縮溶液并把殘余物在高真空下干燥得到4.31g(92％)的1-[4-(甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸，低熔點白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，216.1181，計算的質(zhì)量216.1184，M+。
實施例45.N-[[1-[(4-甲基硫代)丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 在室溫向4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯鹽酸鹽(181.84mmol，47.41g)、1-[(4-甲基硫代)丁基]環(huán)戊烷羧酸(177.17mmol，38.33g)的DMF(470mL)懸浮液中加入HBTU(177.17mmol，67.2g)和二異丙基乙胺(443mmol，77mL)。在室溫把透明的溶液攪拌15小時，這時混合物的TLC分析表明沒有起始物質(zhì)存在。用600mL乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。連續(xù)用0.5N鹽酸(2×250mL)、飽和的碳酸氫鈉溶液(2×250mL)、鹽水溶液(300mL)沖洗乙酸乙酯相并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮溶劑得到產(chǎn)物粗品，用硅膠柱色譜層析法純化得到58.5g(78％)的N-[[1-[(4-甲基硫代)丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，423.1940，計算的質(zhì)量423.1953，(M+H)。
實施例46.N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 在-5℃(冰-鹽浴)，向N-[[1-[(4-甲基硫代)丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(138.4mmol，58.8g)的二氯甲烷(1.2L)的溶液加入間氯過苯甲酸(415mmol，71.7g)。在0℃把懸浮液攪拌30分鐘并加熱到室溫，然后再攪拌5小時，這時混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在。把該固體過濾并真空濃縮濾液得到白色殘余物。將這種白色殘余物溶于乙酸乙酯(600mL)并用飽和的碳酸氫鈉溶液(3×300mL)沖洗。TLC分析顯示有間氯過苯甲酸存在。這樣，用飽和的亞硫酸鈉溶液(在150mL的水中20g)和飽和的碳酸氫鈉溶液(200mL)、鹽水溶液(300mL)沖洗乙酸乙酯相并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮濾液得到產(chǎn)物粗品，將其溶于乙酸乙酯中；加入乙醚和己烷沉淀到油狀殘余物。減壓除去一部分溶劑得到白色懸浮液。把該懸浮液再用乙醚稀釋并過濾收集固體，用己烷沖洗。干燥后，得到53.9g(86％)的N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色低熔點的固體，熔點40-44℃。HR MS測定的質(zhì)量，455.1854，計算的質(zhì)量455.1852，(M+H)。
實施例47.N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 在室溫，向N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(33mmol，15g)的甲苯(100mL，在4A的分子篩上存放)和剛剛蒸餾的THF(50mL)的溶液中加入Lawesson試劑(33mmol，13.35g，1.0當(dāng)量)。把該溶液加熱到60-65℃并攪拌48小時，這時混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在。把反應(yīng)混合物冷卻到室溫并倒入飽和的碳酸氫鈉溶液(200mL)中并用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。分離在含水相中形成的油狀物，用水稀釋并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用飽和的碳酸氫鈉溶液(200mL)、鹽水溶液(300mL)沖洗合并的乙酸乙酯相并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮溶劑得到淡棕色的漿，用己烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫的硅膠柱色譜層析法純化得到6.87g(44％)的N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種松散的黃色固體。HR MS測定的質(zhì)量，493.1438，計算的質(zhì)量493.1443，(M+Na)。
實施例48. 4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 用加熱槍慢慢加熱下，把溶解性較差的N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯(19.3mmol，9.07g)溶于甲醇(150mL)和THF(20mL)。在室溫下，向該溶液中加入鋅粉(325目，193mmol，12.62g，10當(dāng)量)和氯化銨(289.5mmol，15.5g，15當(dāng)量)和水(75mL)。加完水后，發(fā)生放熱反應(yīng)并把溫度升至45到50℃。把懸浮液攪拌1小時，這時，混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在。把反應(yīng)混合物過濾并用甲醇(200mL)和THF(100mL)沖洗。真空除去甲醇和THF并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取有機殘余物。用鹽水溶液(250mL)沖洗合并的提取液并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并濃縮得到8.37g(98％)的4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色膠體，直接用于下一步驟。HR MS測定的質(zhì)量，441.1884，計算的質(zhì)量441.1882，(M+H)。
實施例49. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 在室溫，向4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(19.0mmol，8.37g)和2，6-二氯苯甲酰氯(21mmol，4.4g)的二氯甲烷(90mL)溶液中加入二異丙基乙胺(32.3mmol，5.6mL)。把溶液攪拌15小時，這時，混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在。然后，用水(100mL)稀釋并分相。用二氯甲烷(100mL)萃取含水相并用鹽水溶液(200mL)沖洗合并的提取液。在無水硫酸鎂上干燥后，真空濃縮溶液并把殘余物用己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷(1∶1∶1)洗脫的硅膠柱色譜層析法純化得到11.54g(99％)的4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色固體，熔點200-202℃。HR MS測定的質(zhì)量，613.1367，計算的質(zhì)量613.1363，(M+H)。
實施例50. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 在50℃，向4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(25.86mmol，15.87g)的乙醇(75mL)溶液中加入1.0N的氫氧化鈉(60mL)。把混合物加熱到50-55℃并將所得到的透明的淡棕色溶液攪拌22小時，這時，混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在。用水稀釋混合物并冷卻到室溫并過濾除去少量固體。濃縮濾液并用乙醚(2×75mL)沖洗殘留的水溶液。用3.0N鹽酸酸化堿性溶液形成混濁的懸浮液，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用鹽水溶液(200mL)沖洗合并的提取液并在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑后，濃縮濾液。把殘余物溶于二氯甲烷并用乙醚∶己烷(1∶1)稀釋得到固體，過濾收集。用熱乙酸乙酯(100mL)研磨該固體得到懸浮液，用乙醚(50mL)稀釋。過濾收集固體。重復(fù)上述步驟得到10.89g(70％)的4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，599.1193，計算的質(zhì)量599.1208，(M+H)。
實施例51. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸鈉。 在室溫用1.0N氫氧化鈉水溶液(16.4mmol，16.4mL)處理4-(2，6-二氯苯基羰基氨基)-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸(16.49mmol，9.89g)的水溶液(100mL)。把混合物加熱到40-45℃并加入一些乙腈(15mL)得到含有少量懸浮固體的透明溶液。過濾溶液并把濾液冷凍干燥得到10.1g鈉鹽，一種白色固體。
HR MS測定的質(zhì)量，621.1023，計算的質(zhì)量621.1027，(M+H)。
實施例52. 4-[[(2，4-二甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 在0℃向2，4-二甲基-3-吡啶羧酸(0.3mmol，45mg)的二氯甲烷(2mL)冰冷溶液和一滴DMF中加入草酰氯(0.39mmol，49.5mg)。在該溫度把反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，使其加熱到室溫并再攪拌2小時。濃縮溶液并在高真空干燥殘余物。在室溫向上述酸性氯化物和4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(0.2mmol，88mg)的二氯甲烷(3mL)混合物中加入二異丙基乙胺(1mmol，0.175mL)。把溶液攪拌15小時，這時，混合物的TLC表明已經(jīng)沒有起始物質(zhì)存在。將其用水(20mL)和二氯甲烷(20mL)稀釋并分離兩相。用二氯甲烷(10mL)萃取含水相并用鹽溶液(20mL)沖洗合并的提取液。在無水硫酸鎂上干燥后，真空濃縮溶液并用反相HPLC純化殘余物得到純74mg(65％)的4-[[(2，4-二甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體。HRMS測定的質(zhì)量，574.2389，計算的質(zhì)量574.2409，(M+H)。
實施例53. 4-[[(2，6-二甲基-3-吡啶基羰基)氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸的TFA鹽。 在室溫向4-[[(2，4-二甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(0.118mmol，68mg)的乙醇(4mL)溶液中加入1.0N的氫氧化鈉水溶液(3mL)。把混合物加熱到45-50℃并把所得到的透明溶液攪拌3小時，這時，混合物的TLC表明已經(jīng)沒有起始物質(zhì)存在。濃縮混合物并反相HPLC純化混合物粗品得到54.5mg(82％)的4-[[(2，4-二甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸TFA鹽，一種無定形白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，560.2240，計算的質(zhì)量560.2253，(M+H)。
實施例54. 1-(4-溴丁基)環(huán)丁烷羧酸乙酯 使用實施例40中的一般步驟，用環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-(4-溴丁基)環(huán)丁烷羧酸乙酯，一種無色油，得率為58％。HR MS測定的質(zhì)量，263.0563，計算的質(zhì)量263.0568，M+。
實施例55. 1-[4-(甲基硫)丁基]環(huán)丁烷羧酸乙酯 使用實施例41中的一般步驟，用1-(4-溴丁基)環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-[4-(甲基硫)丁基]環(huán)丁烷羧酸乙酯，一種無色油，得率為87％。HRMS測定的質(zhì)量，230.1339，計算的質(zhì)量230.1340，M+。
實施例56. 1-[4-(甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁烷羧酸乙酯 使用實施例46中的一般步驟，用1-[4-(甲基硫)丁基]環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-[4-(甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁烷羧酸乙酯，一種無色油，得率為92％。HR MS測定的質(zhì)量，262.1231，計算的質(zhì)量262.1238，M+。
實施例57. 1-[4-(甲基磺?；?丁基]環(huán)丁烷羧酸 使用實施例43中的一般步驟，用1-[4-(甲基磺?；?丁基]環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-[4-(甲基磺?；?丁基]環(huán)丁烷羧酸，一種低熔點白色固體，得率為92％。HR MS測定的質(zhì)量，234.0921，計算的質(zhì)量234.0918，(M+)。
實施例58.N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例45所述的一般步驟，用1-[4-(甲基磺?；?丁基]環(huán)丁烷羧酸作起始物質(zhì)，制備N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)戊基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種黃色膠體，得率為89％。HR MS測定的質(zhì)量，441.1700，計算的質(zhì)量441.1696，(M+H)。
實施例59.N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例47所述的一般步驟，用4-硝基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]羰基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色固體，得率為80％，熔點150-152℃。HR MS測定的質(zhì)量，457.1464，計算的質(zhì)量457.1467，(M+H)。
實施例60. 4-硝基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例48所述的一般步驟，用N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色固體，得率為94％，吸濕的固體。HR MS測定的質(zhì)量，427.1720，計算的質(zhì)量427.1725，(M+H)。
實施例61. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例49所述的一般步驟，用4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為92％。HR MS測定的質(zhì)量，599.1207，計算的質(zhì)量599.1208，(M+H)。
實施例62. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例50所述的一般步驟，用4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體，得率為99％。HR MS測定的質(zhì)量，585.1038，計算的質(zhì)量585.1051，(M+H)。
實施例63. 4-[[[4-(三氟甲基)-5-嘧啶基]羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例45所述的一般步驟，用4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[[2-(三氟甲基)-5-嘧啶基]羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為32％。HR MS測定的質(zhì)量，601.1766，計算的質(zhì)量601.1766，(M+H)。
實施例64. 4-[[[4-(三氟甲基)-5-嘧啶基]羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例50所述的一般步驟，用實施例63的產(chǎn)物作起始物質(zhì)，制備4-[[[2-(三氟甲基)-5-嘧啶基]羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體，得率為22％。HR MS測定的質(zhì)量，587.1619，計算的質(zhì)量587.1609，(M+H)。
實施例65. 1-(3-溴丙基)環(huán)丁烷羧酸乙酯。 使用實施例40中所述的一般步驟，用環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-(3-溴丙基)環(huán)丁烷羧酸乙酯，無色油，得率為33％。HR MS測定的質(zhì)量，248.0416，計算的質(zhì)量248.0412，(M+)。
實施例66. 1-[3-(甲基硫代)丙基]環(huán)丁烷羧酸乙酯(Ro28-1367/000，29156-271-3)和1-[3-(甲基硫代)丙基]環(huán)丁烷羧酸 使用實施例41中所述的一般步驟，用1-(3-溴丙基)環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-[3-(甲基硫代)丙基]環(huán)丁烷羧酸乙酯，無色油，得率為16％。HRMS測定的質(zhì)量，188.0872，計算的質(zhì)量188.0871，(M+)。
實施例67.N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例45中所述的一般步驟，用4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備N-[[1-(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，黃色粘稠油，得率為92％。HR MS測定的質(zhì)量，395.1638，計算的質(zhì)量395.1640，(M+H)。
實施例68.N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例47中所述的一般步驟，用4-硝基-N-[[1-(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，無色粘稠油，得率為95％。HR MS測定的質(zhì)量，411.1408，計算的質(zhì)量411.1412，(M+H)。
實施例69. 4-氨基-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。
使用實施例48中所述的一般步驟，用N-[[1-(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-氨基-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種吸濕的黃色固體，得率為97％。HR MS測定的質(zhì)量，381.1660，計算的質(zhì)量381.1671，(M+H)。
實施例70. 4-[(2，6-二氯苯基羰基)氨基]-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例49中所述的一般步驟，用4-氨基-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[(2，6-二氯苯基羰基)氨基]-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色固體，得率為83％，熔點184-186℃。HR MS測定的質(zhì)量，553.1139，計算的質(zhì)量553.1153，(M+H)。
實施例71. 4-[(2，6-二氯苯基羰基)氨基]-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例50中所述的一般步驟，用4-[(2，6-二氯苯基羰基)氨基]-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備-4-[(2，6-二氯苯基羰基)氨基]-N-[[1-[(3-甲基硫代)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種白色固體，得率為97％，熔點186-188℃。HR MS測定的質(zhì)量，539.0986，計算的質(zhì)量539.0996，(M+H)。
實施例72. 1-[3-(甲基磺?；?丙基]環(huán)丁烷羧酸乙酯。 使用實施例46中所述的一般步驟，用1-(3-(甲基硫代)丙基)環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-[3-(甲基磺?；?丙基]環(huán)丁烷羧酸乙酯，無色油，得率為87％。HR MS測定的質(zhì)量，248.1084，計算的質(zhì)量248.1082，(M+)。
實施例73. 1-[3-(甲基磺?；?丙基]環(huán)丁烷羧酸乙酯。 使用實施例43中所述的一般步驟，用1-(3-(甲基磺?；?丙基)環(huán)丁烷羧酸乙酯作起始物質(zhì)，制備1-[3-(甲基磺?；?丙基]環(huán)丁烷羧酸，白色固體，得率為76％。HR MS測定的質(zhì)量，220.0770，計算的質(zhì)量220.0769，(M+)。
實施例74. 4-(硝基)-N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]羰基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例45中所述的一般步驟，制備N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種白色無定形固體，得率為76％。HRMS測定的質(zhì)量，427.1526，計算的質(zhì)量427.1539，(M+H)。
實施例75.N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例47中所述的一般步驟，用N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作為起始物質(zhì)，制備N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯，一種黃色膠粘固體，得率為88％。HR MS測定的質(zhì)量，443.1309，計算的質(zhì)量443.1310，(M+H)。
實施例76. 4-氨基-N-[[1-[(3-甲基磺酰基)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例48中所述的一般步驟，用N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]羰基]-4-硝基-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-氨基-N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種吸濕性黃色固體，得率為97％。HR MS測定的質(zhì)量，413.1556，計算的質(zhì)量413.1570，(M+H)。
實施例77. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(3-甲基磺酰基)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例49中所述的一般步驟，用4-氨基-N-[[1-[(3-甲基磺酰基)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為82％。HR MS測定的質(zhì)量，585.1056，計算的質(zhì)量585.1051，(M+H)。
實施例78. 4-[((2，6-二氯苯基羰基)氨基]-N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例50中所述的一般步驟，用4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(3-甲基磺?；?丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[((2，6-二氯苯基羰基)氨基]-N-[[1-[(3-甲基磺酰基)丙基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體，得率為87％。HR MS測定的質(zhì)量，571.0894，計算的質(zhì)量571.0895，(M+H)。
實施例79. 2-氯-5-(三氟甲基)苯酚三氟甲磺酸酯。 在-70℃，向2-氯-5-(三氟甲基)苯酚(24.4mmol，4.8g)的二氯甲烷(160mL)溶液中加入DMAP(54.0mmol，6.7g)，接著在-70℃加入三氟甲磺酸酐(36.6mmol，10.32g，6.16mL)。加完后，在該溫度下把混懸液攪拌30分鐘，然后加熱到室溫并且再攪拌3小時，這時反應(yīng)混合物的TLC表明沒有起始物質(zhì)存在。用水(100mL)稀釋混合物并分離兩相。用二氯甲烷(100mL)萃取含水相。用鹽水溶液沖洗合并的二氯甲烷萃取液并在硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并真空除去溶劑得到白色懸浮液，用己烷∶乙醚(4∶1)洗脫的硅膠柱色譜層析法純化得到6.8g(85％)的無色油。HRMS測定的質(zhì)量，327.9388，計算的質(zhì)量327.9392，(M+)。
實施例80. 2-氯-5-(三氟甲基)苯甲酸。 把250mL壓力瓶中裝入2-氯-5-(三氟甲基)苯酚三氟甲磺酸酯(20.6mmol，6.76g)、Pd(OAc)2(1.71mmol，384mg)和dppp(1.71mmol，701mg)。把燒瓶用隔膜封閉并用氬氣抽空三次。用注射器連續(xù)加入乙腈(114mL)、三乙胺(225.3mmol，30.7mL)和水(22.2mL)。用特氟隆襯蓋替換橡膠隔膜。用一氧化碳(40psi)給燒瓶加壓并釋放氣體。把該過程重復(fù)三次并最后在壓力下把混合物攪拌5分鐘。然后把燒瓶與一氧化碳圓錐體斷開并浸入預(yù)熱的油浴(83-85℃)并攪拌2小時。用一氧化碳給燒瓶加壓并再攪拌1小時。然后，把反應(yīng)混合物冷卻到室溫并釋放壓力。用乙醚(250mL)和25mL 0.1N氫氧化鈉。把該酸萃入水(2×100mL)。用1.0N的鹽酸中和合并的水萃取液并把該酸萃入乙醚(3×100mL)。用鹽水溶液沖洗合并的乙醚萃取液并在硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑并在真空除去溶劑得到淡黃色固體粗品。把該固體溶于乙醚(2×100mL)并用1.0N氫氧化鈉溶液(2×50mL)萃取。然后，酸化含水相并用乙醚(2×100mL)萃取。用鹽水溶液(100mL)沖洗合并的乙醚萃取液并在硫酸鎂上干燥。過濾和濃縮溶液后，得到1.6g(35％)的2-氯-5-(三氟甲基)苯甲酸，白色固體，熔點82-83.5℃。HR MS測定的質(zhì)量，223.9852，計算的質(zhì)量223.9851(M+)。
實施例81. 4-[[[(2-氯-5-(三氟甲基)苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 使用實施例52中所述的一般步驟，用4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[[(2-氯-5-(三氟甲基)苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體，得率為97％。
HR MS測定的質(zhì)量，633.1477，計算的質(zhì)量633.1471(M+H)。
實施例82. 4-[[[(2-氯-5-(三氟甲基)苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例50中所述的一般步驟，用4-[[[(2-氯-5-(三氟甲基)苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯作起始物質(zhì)，制備4-[[[(2-氯-5-(三氟甲基)苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體，得率為75％。
HR MS測定的質(zhì)量，619.1315，計算的質(zhì)量619.1318(M+H)。
實施例83. 4-[[(2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯。 在0℃向2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶羧酸(0.84mmol，184mg)的二氯甲烷(10mL)和DMF(3-滴)的懸浮液中滴加草酰氯(1.14mmol，146mg，0.1mL)2-3分鐘。加入后，在0℃攪拌30分鐘，然后將其加熱到室溫。在室溫再把透明溶液攪拌2小時。真空除去溶劑并在高真空下干燥殘余物1小時。在室溫向4頸聲處理燒瓶中4-氨基-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(0.7mmol，298mg)和大孔樹脂A-21(1.4mmol，900mg)的乙酸乙酯(10mL，在4A分子篩上存放)混合物中加入上述制備的酸性氯化物的乙酸乙酯(6mL)。使混合物聲處理30分鐘并且用水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)稀釋和分離兩相。用乙酸乙酯(50mL)萃取含水相并且用鹽水溶液(100mL)沖洗合并的萃取液，在無水硫酸鎂上干燥。濾除干燥劑后，真空濃縮溶液并用反相HPLC純化殘余物得到139mg(32％)的4-[[(2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺?；?丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯，一種無定形白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，628.2122，計算的質(zhì)量628.2127(M+H)。
實施例84. 4-[[(2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。
在室溫，向4-[[(2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸甲酯(0.2mmol，125mg)的乙醇(7mL)懸浮液中加入1.0M氫氧化鈉溶液(5.0mL)。在幾分鐘內(nèi)，它變成透明溶液，將其加熱到45-55℃并攪拌4小時，這時混合物的TLC分析表明沒有起始物質(zhì)存在。然后，將其冷卻到室溫并真空除去乙醇。把殘余物用反相HPLC純化得到67.5mg(55％)4-[[(2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，一種無定形白色固體。HR MS測定的質(zhì)量，614.1970，計算的質(zhì)量614.1970(M+H)。
實施例85. 4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例35到39中所述的方法，用2-溴苯甲酸作起始物質(zhì)，制備標(biāo)題化合物。HR MS測定的質(zhì)量，550.9593，計算的質(zhì)量550.9598(M+H)。
實施例86. 4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-苯基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[[(4-甲基磺?；?丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸和4-[(2R，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-苯基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[[(4-甲基磺酰基)丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。 使用實施例26到29中所述的步驟，制備標(biāo)題化合物。在甲酯階段用色譜層析法分離異構(gòu)體。對2S，4R異構(gòu)體來說，HR MS測定的質(zhì)量，650.2670，計算的質(zhì)量650.2665(M+Na)。對2R，4R異構(gòu)體來說，HRMS測定的質(zhì)量，650.2679，計算的質(zhì)量650.2665(M+Na)。
測定法1.VLA-4/VCAM-1篩選測定法用固相雙抗體ELISA定量分析VLA-4拮抗藥的活性，該活性被定義為其與固定的VCAM-1結(jié)合的競爭能力。測定與VCAM-1結(jié)合的VLA-4(α4β1整合蛋白)是使用抗整合蛋白β1抗體的絡(luò)合物偶合-HRP的抗小鼠IgG顯色底物(K-藍)。首先需要給96孔平皿(Nunc Maxisorp)涂上人的重組VCAM-1(在100μlPBS中有0.4μg)、密封各個平皿，然后把平皿在4℃放置18小時。接著用250μl 1％的BSA/0.02％NaN3阻斷包被VCAM的平皿來減少非特異性結(jié)合。在測定那天，用VCAM測定緩沖液(200μl/孔的50mMTris-HCl，100mM NaCl，1mM MnCl2，0.05％Tween 20；pH7.4)沖洗所有的平皿兩次。把實驗化合物溶于100％DMSO，然后用1mg/mL BSA補給的VCAM測定緩沖液(即最終DMSO＝5％)稀釋到1∶2。進行1∶4的系列稀釋得到各實驗化合物的濃度在0.005nM-1.563μM范圍內(nèi)。把各稀釋液每孔100μl加入VCAM包被的平皿，接著用10μl的來源于Ramos細胞的VLA-4。接著在平臺振搖器上把這些平皿混合1分鐘，在37℃孵育2小時，然后用200μl/孔VCAM分析緩沖液沖洗四次。向各孔(0.6μl/mLVCAM分析緩沖液+1mg/mL BSA)中加入100μl的小鼠抗人整合蛋白β1抗體并且在37℃孵育1小時。在孵育期結(jié)束時，把所有的平皿用VCAM分析緩沖液(200μl/孔)沖洗四次。然后向各孔中加入相應(yīng)的第二種抗體HRP-偶連的羊抗鼠IgG(100μl/孔@1∶1800稀釋液VCAN分析緩沖液+1mg/mL BSA)，接著在室溫孵育1小時并用VCAM分析緩沖液沖洗三次(200μl/孔)結(jié)束。每孔中加入100μl K-藍開始顯色(15分鐘孵育，室溫)并通過向每孔中加入100μlRED Stop緩沖液結(jié)束。然后在650nM的UV/Vis分光光度計讀取所有平皿的數(shù)值。結(jié)果按照總結(jié)合的抑制％計算(即，VLA-4+沒有實驗化合物的VCAM-1)。對本發(fā)明化合物的選擇性數(shù)據(jù)顯示在下表2.Ramos(VLA-4)/VCAM-1細胞為主的篩選測定方案物質(zhì)用免疫親和性色譜層析法從CHO細胞培養(yǎng)基中純化可溶性人VCAM-1重組體(5-和7-Ig2結(jié)構(gòu)域混合物)并保留在含有0.1M Tris-甘氨酸(pH7.5)、0.1M NaCl、5mM EDTA、1mM PMSF、0.02％NaN3和10μg/mL亮肽素的溶液中。從Molecular Probes公司中預(yù)先購買Calcein-AM。
方法用Ramos-VCAM-1細胞粘附測定法定量分析VLA-4(α4β1整合蛋白)拮抗藥的活性，即該活性定義為與細胞表面的VLA-4競爭其與固定的VCAM-1結(jié)合的能力。用熒光染料(Calcein-AM)標(biāo)記支撐細胞表面VLA-4的Ramos細胞，并在有或沒有實驗化合物存在時使其與VCAM-1結(jié)合。與粘附細胞相關(guān)的熒光強度的減弱(％抑制)反映了實驗化合物VLA-4介導(dǎo)細胞粘附的競爭性抑制。
首先，需要給96孔平皿(Nunc Maxisorp)涂上人重組體VCAM-1(在100μlPBS中有100ng)、密封各個平皿，然后把平皿在4℃放置18小時。接著用0.05％的Tween-20的PBS將VCAM包被的平皿沖洗兩次，然后用200μl的阻斷緩沖液(1％的BSA/0.02％乙基汞硫代水楊酸鈉)阻斷1小時(室溫)來減少非特異性結(jié)合。在用阻斷緩沖液孵育后，把平皿倒位、印跡和抽吸保留的緩沖液。然后用300μlPBS沖洗各平皿，倒位并抽吸保留的PBS。
把實驗化合物溶于100％的DMSO，然后用VCAM細胞粘附測定緩沖液(4mMCaCl2，4mM MgCl2的50mMTRIS-HCl，pH7.5)稀釋1∶25(最終DMSO＝4％)。對各化合物進行8個系列1∶4稀釋液(一般濃度范圍1nM-12,500nM)。把100μl/孔各稀釋液加入VCAM包被的平皿中，接著加入100μl的Ramos細胞(200,000細胞/孔，1％BSA/PBS)。把含有實驗化合物和Ramos細胞的平皿在室溫孵育45分鐘，之后加入165μl/孔PBS。把平皿倒位除去非粘附性細胞、印跡并加入300μl/孔PBS。再把平皿倒位、涂污并輕微地抽吸保留的緩沖液。向各孔中加入100μl Lysis緩沖液(0.1％SDS 50mMTRIS-HCl，pH8.5)并在旋轉(zhuǎn)振搖平臺上振蕩2分鐘。然后把這些平皿在Cytofluor2300(Millipore)熒光測定系統(tǒng)(激發(fā)＝485nm，發(fā)射＝530nm)上讀取熒光強度的數(shù)值。
3.MadCAM RPMI 8866細胞基礎(chǔ)測定法用RPMI 8866細胞基礎(chǔ)測定法定量分析MadCAM結(jié)合活性。用熒光染料(calcein AM)標(biāo)記支撐細胞表面MadCAM的RPMI 8866細胞并在有或沒有實驗化合物存在下使其與MadCAM結(jié)合。與粘附細胞相關(guān)的熒光強度的減弱(％抑制)反映了實驗化合物用MadCAM介導(dǎo)細胞粘附的競爭性抑制。
首先，需要給96孔平皿(Nunc F96 Maxisorp)涂上25ng/孔的MadCAM(100μl/孔包被緩沖液10mM碳酸鹽/碳酸氫鹽緩沖液，0.8g/L碳酸氫鈉，1.55g/L碳酸氫鈉，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH到9.6)、密封并包裹各平皿并把平皿冷凍至少24小時。接著用0.05％的Tween-20的PBS沖洗兩次MadCAM包被的平皿，然后用阻斷緩沖液(1％無脂肪的無水牛奶PBS)在室溫阻斷至少1小時來減少非特異性結(jié)合。在用阻斷緩沖液孵育后，用PBS沖洗平皿、手工印跡和抽吸保留的液體。
把RPMI 8866細胞(2×106個細胞/ml×10ml，每平皿×平皿數(shù))轉(zhuǎn)移到裝有PBS的50ml離心管中并以200×g旋轉(zhuǎn)8分鐘，之后把PBS倒出并將小珠再懸浮于10×106個細胞/ml的PBS中。向細胞中以5μl/mlPBS加入Calcein(用200μl來自5mg/ml冷凍儲藏的DMSO稀釋)。在37℃黑暗處孵育30分鐘后，用PBS沖洗細胞并以2×106個細胞/ml再懸浮于細胞緩沖液(RPMI 1640培養(yǎng)基(無添加劑))中。
把實驗化合物溶于100％DMSO中，然后在結(jié)合緩沖液(1.5mMCaCl2，0.5mMMnCl2的50mM TRIS-HCl，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為7.5)中稀釋1∶25。把剩余的稀釋液加入稀釋緩沖液(4％DMSO的結(jié)合緩沖液——以1∶2稀釋孔時，DMSO最終濃度為2％)。對各實驗化合物進行一系列稀釋。把129μl結(jié)合緩沖液放在MadCAM-包被的平皿中的第1排孔中。向其余孔中加入100μl/孔稀釋緩沖液，接著加入5.4μl各實驗化合物的適當(dāng)稀釋液(一式三份)。加入100μl的細胞(200,000個細胞/孔)。對照孔含有100μl稀釋緩沖液+100μl細胞緩沖液，和100μl稀釋緩沖液+100μl細胞緩沖液。在室溫把平皿孵育45分鐘，之后加入150μl/孔PBS。把平皿倒位除去非粘附的細胞，印跡并加入200μl/孔PBS。再把平皿倒位、印跡并輕輕抽吸剩余緩沖液。向各孔中再加100μlPBS。然后在熒光測定系統(tǒng)讀取平皿的熒光強度數(shù)值(激發(fā)＝485nm，發(fā)射＝530nm，靈敏度＝2)。進行線性回歸分析得到各化合物IC50。結(jié)果如下表顯示
[實施例4.特應(yīng)性靈長目動物的急性氣道炎癥使用Turner等所述的修正方案(Turner等，1994)測定猴子的氣道炎癥。在該實驗中使用體重在3.6-5.8kg的成年雄性獼猴(Macacafascicularis，Hazelton實驗室，Denver，PA)。所有動物都對Ascaris suum具有陽性的皮膚和氣道反應(yīng)并當(dāng)使用蛔蟲提取液的氣霧劑時，對乙酰甲基膽堿(MCh)的敏感度至少增加3倍。
在每一實驗當(dāng)天，用鹽酸氯胺酮12mg/kg和賽拉嗪0.5mg/kg麻醉動物，插有帶套的氣管內(nèi)用的導(dǎo)管(3mm，Mallinckrodt Medical，St.Louis，MO)，然后坐在特別設(shè)計的Plexiglass椅子(Plas-Labs，Lansing，MI)的上部位置。把氣管內(nèi)用的導(dǎo)管連接到加熱的Fleisch呼吸速度描記器上。通過用連接到該呼吸速度描記器上的Validyn微分氣壓換能器(DP45-24)測定氣流。通過連接在氣管內(nèi)用的導(dǎo)管和插入位于左乳頭下肋間空間的18-徑計的胸膜內(nèi)針之間的第二個Validyne換能器(DP45-24)測定經(jīng)肺的氣壓。用如上所述的Modular儀器數(shù)據(jù)獲得系統(tǒng)記錄氣壓和氣流并計算RL。在各個實驗當(dāng)天測定全部動物的基線RL，其平均值大約0.04cmH2O/ml/秒。
方案動物受到為時60秒的A.Suum提取液的氣霧劑作用而誘發(fā)氣道炎癥。該氣霧劑通過連接到氣管內(nèi)用導(dǎo)管的噴霧器(De Vilbiss Model 5000，HealtCare Inc.，Somerset，PA)輸送。對各動物使用的提取液的濃度預(yù)先測定(500到50,000PUN)，此濃度至少要引起氣道抵抗的雙倍。抗原激發(fā)后24小時，如前所述麻醉動物并將其放置在不銹鋼桌上。氣道炎癥的測定是把兒科支氣管鏡插入氣道腔下大約第4或5段支氣管并用3×2ml等份Hanks平衡鹽溶液輕輕灌洗。然后用標(biāo)準(zhǔn)的血液學(xué)技術(shù)分析該收集的灌洗液中的總細胞數(shù)和差異細胞數(shù)。
藥物治療在抗原激發(fā)前2小時，動物口服給藥接受藥物或載體。實施例1的化合物引起灌洗液中炎癥細胞數(shù)和百分比相對于載體治療的對照動物顯著降低。
權(quán)利要求
1.一種式1的化合物 其中X是下式的基團 其中R15是鹵素、硝基、低級烷基磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、羧基、低級烷基氨基磺?；?、全氟低級烷基、低級烷基硫、羥基低級烷基、烷氧基低級烷基、低級烷基硫低級烷基、低級烷基亞磺酰低級烷基、低級烷基磺酰基低級烷基、低級烷基亞磺?；?、低級烷?；⒎减；?、芳基、芳基氧；R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、OH、全氟低級烷基或低級烷基硫；或者X是具有通式X-2的基團 其中Het是含有1、2或3個雜原子的5-或6-節(jié)雜芳環(huán)，雜原子選自于N、O和S，或者Het是含有1、2、3或4個雜原子的9-或10-節(jié)雙環(huán)雜芳環(huán)，雜原子選自于N、O和S；R15和R16如上X-1中所述；R30是氫或低級烷基；和p是0到1的整數(shù)；或X是通式X-3的基團 其中R18是芳基、雜芳基、芳基低級烷基、雜芳基低級烷基；R19是被取代的或沒有被取代的低級烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基，和R20是被取代的或沒有被取代的低級烷酰基或芳?；徊⑶襓是具有通式Y(jié)-1的基團 其中R22和R23各自是氫、低級烷基、低級烷氧基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、硝基、氰基、低級烷基硫、低級烷基磺?；?、低級烷基亞磺?；?、低級烷?；Ⅺu素或全氟低級烷基并且R22和R23中至少一個不是氫，并且R24是氫、低級烷基、低級烷氧基、芳基、硝基、氰基、低級烷基磺?；螓u素；或Y-2是具有下列通式的基團 其中Het是由碳原子連接的五節(jié)或六節(jié)雜芳環(huán)，其中該環(huán)包括選自于N、O和S中的一個、兩個或三個雜原子并且R30和R31各自是氫、低級烷基、環(huán)烷基、鹵素、氰基、全氟低級烷基或芳基并且R30和R31中至少一個是連接點，p是0或1的整數(shù)?；験是具有通式Y(jié)-3的基團 其中R25是低級烷基、沒有被取代的或氟取代的低級鏈烯基，或者為通式R26-(CH2)e-的基團，R26是芳基、雜芳基、疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷氧基、低級烷基硫、低級芳基磺?；?、低級烷基亞磺?；⑷图壨轷；⑾趸?，或者R26是具有通式-NR28R29的基團，其中R28是H或低級烷基，R29是氫、低級烷基、低級烷氧基羰基、低級烷酰基、芳?；?、全氟低級烷?；被?、低級烷基磺?；?、低級烷基氨基羰基、芳基氨基羰基，或R28和R29在一起形成4、5或6節(jié)飽和碳環(huán)，該環(huán)可含或不含選自于O、S和N中的一個雜原子；環(huán)中的碳原子是不被取代的或者被低級烷基或鹵素取代，Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或者是一個鍵，R27是H、低級烷基、芳基、低級烷酰基、芳?；虻图壨轷ｔ驶?，e是從0到4的整數(shù)，f是從1到3的整數(shù)，并且用點線表示的鍵可以被氫化，也可以不被氫化；以及藥學(xué)上可接受的鹽和酯。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中X是具有下列通式的基團 并且Y、R15和R16如權(quán)利要求1中所述。
3.權(quán)利要求2所述的化合物，其中R15是低級烷基、硝基、鹵素、低級烷基磺?；?、全氟低級烷基、或者氰基和R16是氫、低級烷基、硝基、鹵素、低級烷基硫、全氟低級烷基或氰基。
4.權(quán)利要求2或3所述的化合物，其中R15和R16分別是氯或氟。
5.權(quán)利要求3所述的化合物，其中X-1選自于下列基團
6.權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是具有通式X-2的基團 和p、Y、R15、R16和R30如權(quán)利要求1所述。
7.權(quán)利要求6所述的化合物，其中Het是含有1、2或3個氮原子、或者氮和硫、或者氮和氧的5-或6-節(jié)單環(huán)雜芳環(huán)。
8.權(quán)利要求6所述的化合物，其中Het是含有1到3個氮原子的雙環(huán)雜芳環(huán)。
9.權(quán)利要求6所述的化合物，其中R15是硝基、低級烷基磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷基硫、低級烷?；?、或芳基。
10.權(quán)利要求9所述的化合物，其中R15是沒有被取代的苯基。
11.權(quán)利要求6所述的化合物，其中R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基；和R30是氫或低級烷基。
12.權(quán)利要求6所述的化合物，其中Het是含有1或2個氮原子的6節(jié)單環(huán)雜芳環(huán)或者Het是含有1個氮原子的10節(jié)雙環(huán)雜芳環(huán)，R15是低級烷基或全氟烷基并且R16是氫、低級烷基或全氟烷基，并且R30不存在。
13.按照權(quán)利要求6所述的化合物，其中X-2選自于下列基團
14.權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是具有下列通式X-3的的基團 并且Y、R18、R19和R20如權(quán)利要求1所述。
15.權(quán)利要求14所述的化合物，其中R18是苯基。
16.權(quán)利要求14所述的化合物，其中R19是被吡啶基和苯基取代的或沒有被取代的低級烷基。
17.權(quán)利要求13所述的化合物，其中R20是被取代的或沒有被取代的低級烷?；?br> 18.權(quán)利要求14所述的化合物，其中R18是苯基，R19是被吡啶基或苯基取代的或沒有被取代的低級烷基并且R20是低級烷氧基。
19.權(quán)利要求14所述的化合物，其中R18是被鹵素或低級烷氧基取代的或沒有被取代的苯基；R19是被低級烷氧基、吡啶基低級烷基或低級烷基取代的或沒有被取代的苯基低級烷基；并且R20是被取代的或沒有被取代的低級烷?；?。
20.權(quán)利要求19所述的化合物，其中X-3是選自于下列基團
21.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Y是具有下列通式的基團 并且X、R22、R23和R24是如權(quán)利要求1所述。
22.權(quán)利要求21所述的化合物，其中R22是氫、低級烷基、全氟烷基或鹵素；R23是低級烷基、全氟烷基或鹵素；以及R24是氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素。
23.權(quán)利要求22所述的化合物，其中Y-1是選自于下列基團
24.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Y是具有通式Y(jié)-2的基團 并且p、X、Het、R30和R31如權(quán)利要求1所述。
25.權(quán)利要求24所述的化合物，其中Het是6節(jié)雜芳環(huán)。
26.權(quán)利要求25所述的化合物，其中雜原子是N。
27.權(quán)利要求26所述的化合物，其中Y-2是選自于下列基團
28.按照權(quán)利要求1所述的化合物，其中Y是具有通式Y(jié)-3的基團 并且Y、R25和Q如權(quán)利要求1所述，并且用點線表示的鍵能夠被氫化或不被氫化。
29.權(quán)利要求28所述的化合物，其中在Y-3中的R25是R26-(CH2)e，e是0-4，R26是烷氧基、低級烷基磺?；⒌图壨榛?、苯基或被烷氧基或鹵素取代的苯基、或NHR29其中R29是低級烷?；?、低級烷氧基羰基或低級烷基氨基羰基，并且用點線表示的鍵是被氫化的。
30.權(quán)利要求28所述的化合物，其中Y-3是選自于下列基團
31.權(quán)利要求1所述的化合物，選自于下組4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲基磺酰基)-丁基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)-硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)-硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氟苯基)-硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-(三氟甲基)-苯基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-吡啶基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[(2-乙基-6-甲基苯基)硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[2-(乙?；被?-乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，[[1-[2-[[(甲基氨基)羰基]氨基]乙基]環(huán)戊基]硫代甲基]-4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(4-甲基磺酰基)-丁基]環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(3-甲基硫)丙基]-環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(3-甲基磺酰基)丙基]-環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，6-二甲基-3-吡啶基羰基)氨基]-N-[[1-(4-甲基磺?；?丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[[4-(三氟甲基)-5-嘧啶基]羰基]氨基]-N-[[1-(4-甲基磺?；?丁基]-環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[[(2，4-二甲基-6-三氟甲基-3-吡啶烷基)羰基]氨基]-N-[[1-(4-甲基磺?；?丁基]-環(huán)丁基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸，4-[(2S，4R)-3-乙?；?2-苯基-4-[(3-苯基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[[(4-甲基磺?；?丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸或者4-[(2R，4R)-3-乙酰基-2-苯基-4-[(3-苯基)甲基]-5-氧代-咪唑烷-1-基]-N-[[(4-甲基磺?；?丁基]-環(huán)戊基]硫代甲基]-L-苯基丙氨酸。
32.權(quán)利要求1-31中的任一項所述的化合物用作藥物，尤其是用作治療或預(yù)防風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎和氣喘的藥物。
33.一種藥物制劑，尤其是一種治療或預(yù)防風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎和氣喘的藥物制劑，它含有權(quán)利要求1-31中任一項所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯和可相容的藥用載體物質(zhì)。
34.一種制備藥物制劑尤其是治療或預(yù)防風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎和氣喘的藥物制劑的方法，包括把一種或多種權(quán)利要求1-31中的任一項所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯以及根據(jù)需要的一種或多種治療學(xué)上有價值的物質(zhì)，與可配伍的藥用載體物質(zhì)一起制成蓋倫服藥形式的制劑。
35.權(quán)利要求1-31中任一項所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在治療或預(yù)防風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎和氣喘方面的用途。
36.權(quán)利要求1-31中任一項所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備藥物中的用途，該藥物含有權(quán)利要求1-31中任一項所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯作活性成分，用于治療或預(yù)防疾病，尤其是治療或預(yù)防風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、腸炎和氣喘。
37.實質(zhì)上如上所述的新化合物、藥物、方法和用途。
全文摘要
通式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯(其中X和Y是如說明書中所定義的)能夠抑制VCAM－1與VLA－4的結(jié)合并且可用于治療慢性炎性疾病如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、多發(fā)性硬化(MS)、氣喘和慢性腸炎(I/BD)等疾病。
文檔編號C07D233/84GK1342140SQ00804397
公開日2002年3月27日 申請日期2000年2月10日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月18日
發(fā)明者肯尼思·G·赫爾, 阿奇薩拉奧·賽杜里, 杰斐遜·W·蒂利 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司