4] 其中所述的中藥添加劑，由以下重量份的原料制成（混合均勻即可）：紫蘇35份， 辛夷18份，金銀花9份，鹿銜草12份，銀杏葉6份，夜交藤9份，白術(shù)35份，青皮8份，決明 子7份，金毛狗脊25份，魚(yú)腥草9份。
[0045] 所述的袖珍菇培養(yǎng)基的制備方法為：按配比量稱(chēng)取全部原料，將棉籽殼、甘蔗渣、 米糠、麩皮和石灰，加入全部原料重量7倍水，再加入全部原料重量0. 7%酵母，攪拌均勻， 露天發(fā)酵一天，再加入中藥添加劑攪拌均勻，密封，控制溫度為32°C發(fā)酵1天，裝袋，常規(guī)方 式滅菌，即得到袖珍菇培養(yǎng)基。
[0046] 實(shí)施例5
[0047] -種袖珍菇培養(yǎng)基，由以下重量份的原料制成：棉籽殼43份，甘蔗渣6份，米糠 22 份，中藥添加劑8份，麩皮6份，石灰2. 1份。
[0048] 其中所述的中藥添加劑，由以下重量份的原料制成（混合均勻即可）：紫蘇40份， 辛夷20份，金銀花10份，鹿銜草10份，銀杏葉5份，夜交藤10份，白術(shù)30份，青皮10份， 決明子5份，金毛狗脊30份，魚(yú)腥草6份。
[0049] 所述的袖珍菇培養(yǎng)基的制備方法為：按配比量稱(chēng)取全部原料，將棉籽殼、甘蔗渣、 米糠、麩皮和石灰，加入全部原料重量9倍水，再加入全部原料重量0.8%酵母，攪拌均勻， 露天發(fā)酵一天，再加入中藥添加劑攪拌均勻，密封，控制溫度為30°C發(fā)酵2天，裝袋，常規(guī)方 式滅菌，即得到袖珍菇培養(yǎng)基。
[0050] 對(duì)比例
[0051] -種袖珍菇培養(yǎng)基，由以下重量份的原料制成：棉籽殼43份，甘蔗渣8份，米糠 26 份，麩皮8份，石灰2. 1份。
[0052] 所述的袖珍菇培養(yǎng)基的制備方法為：按配比量稱(chēng)取全部原料，將棉籽殼、甘蔗渣、 米糠、麩皮和石灰，加入全部原料重量9倍水，再加入全部原料重量0.8%酵母，攪拌均勻， 露天發(fā)酵一天，再密封，控制溫度為30°C發(fā)酵2天，裝袋，常規(guī)方式滅菌，即得到袖珍菇培養(yǎng) 基。
[0053] 試驗(yàn)例1
[0054] 用本發(fā)明的袖珍菇培養(yǎng)基與對(duì)比例的袖珍菇培養(yǎng)基培養(yǎng)袖珍菇比較結(jié)果，見(jiàn)表 1 ：
[0055] 表1含中藥添加劑與對(duì)比例培養(yǎng)基培養(yǎng)的袖珍燕比較結(jié)果
[0056]
[0057] 試驗(yàn)例2 :本發(fā)明的培養(yǎng)基對(duì)培養(yǎng)的袖珍菇的抗氧化作用
[0058] 1、材料：實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例分別培養(yǎng)的袖珍菇。
[0059] 2、試驗(yàn)方法：
[0060] (1)袖珍菇粗體物制備提取方法：取實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例分別培養(yǎng)的袖珍 菇l〇g，分別粉碎，按料液比1 :25加水提取，提取三次，合并提取液，濃縮至一定體積，加3 倍95 %的乙醇沉淀，取上清液濃縮、干燥，得袖珍菇粗提物備用。
[0061] ⑵還原力的測(cè)定：樣品將鐵氰化鉀（K3Fe(CN)6)還原成亞鐵氰化鉀（K 4Fe(CN)6), 亞鐵氰化鉀再與Fe3+作用，生成亞鐵氰化鐵（普魯士藍(lán)），以在700nm波長(zhǎng)處檢測(cè)普魯士藍(lán) 的吸光度表示還原力的大小，吸光度越高，樣品的還原力就越強(qiáng)，抗氧化性越強(qiáng)。在700nm 波長(zhǎng)處，分別測(cè)定濃度為5mg/ml的實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例分別培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物 的吸光值。
[0062] (3)清除超氧陰離子實(shí)驗(yàn)：在產(chǎn)生超氧陰離子自由基（O2 ·)的反應(yīng)體系中，分別 加入濃度為5mg/ml的實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例分別培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物，測(cè)定它們清 除率。
[0063] (4)清除羥基自由基的實(shí)驗(yàn)：FeSOg H 202反應(yīng)產(chǎn)生·0Η，在體系內(nèi)加入水楊酸，可 捕捉羥基自由基并產(chǎn)生有色物質(zhì)，該物質(zhì)在510nm處有最大吸收，當(dāng)反應(yīng)體系中存在·0Η自 由基清除劑時(shí)，此氧化過(guò)程受到抑制，吸光度值則降低。在？^0 4與H 202反應(yīng)體系中，分別 加入濃度為30mg/ml的實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例分別培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物，測(cè)定清除 率。
[0064] (5)模擬胃液pH條件下的NO2清除反應(yīng)作用：清除亞硝酸鹽是有效防止N-亞硝 基化合物致癌的途徑之一。在模擬體系中加入分別加入濃度為14mg/ml的實(shí)施例1、實(shí)施例 3和對(duì)比例分別培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物，測(cè)定清除率。
[0065] (6) DPPH法測(cè)定袖珍菇抗氧化活性：DPPH ·在有機(jī)溶劑中是一種穩(wěn)定的自由基，廣 泛用于抗氧化評(píng)價(jià)體系中。在體系中，分別加入濃度為30mg/ml的實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì) 比例分別培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物，測(cè)定清除率。
[0066] 3、試驗(yàn)結(jié)果：
[0067] 表2不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物的還原能力
[0069] 表2結(jié)果表明，實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物具有抗氧化性， 實(shí)施例1和實(shí)施例3抗氧化性?xún)?yōu)于對(duì)比例。
[0070] 表3不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物清除超氧陰離子的能力
[0073] 表3表明，實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物都具有清除超氧陰 離子的能力，實(shí)施例1和實(shí)施例3清除能力優(yōu)于對(duì)比例。
[0074] 表4不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物清除羥基自由基的能力
[0076] 表4表明，實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物都具有清除羥基自 由基的能力，實(shí)施例1和實(shí)施例3清除能力優(yōu)于對(duì)比例。
[0077] 表5不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物對(duì)NO2清除作用
[0079] 表5表明，實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物對(duì)NO2都有清除作 用，實(shí)施例1和實(shí)施例3清除能力優(yōu)于對(duì)比例。
[0080] 表6不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物對(duì)DPPH清除效果
[0082] 表6表明，實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例培養(yǎng)的袖珍菇粗提取物對(duì)DPPH都有清除效 果，實(shí)施例1和實(shí)施例3清除效果優(yōu)于對(duì)比例。
[0083] 綜合上述氧化反應(yīng)體系試驗(yàn)結(jié)果，可知實(shí)施例1、實(shí)施例3和對(duì)比例培養(yǎng)的袖珍菇 具有抗氧化性，而實(shí)施例1和實(shí)施例3優(yōu)于對(duì)比例，說(shuō)明添加本發(fā)明添加劑的袖珍菇培養(yǎng)基 能夠增強(qiáng)袖珍菇的抗氧化功效。
[0084] 試驗(yàn)例3 :本發(fā)明培養(yǎng)的袖珍菇抗癌作用
[0085] 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康昆明種小鼠，體重（22±3)g，雌雄各半，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng) 物中心提供。
[0086] 2、腫瘤細(xì)胞株：小鼠肉瘤S18。腹水型瘤株，由廣西腫瘤防治研究所提供。
[0087] 3、袖珍菇藥劑制備：
[0088] 分別取實(shí)施例3和對(duì)比例培養(yǎng)出的袖珍菇10g，置于1000 mL的玻璃燒杯中，加水 500mL，浸泡Ih后，置于火上煎熬，先武火煮沸后改為文火，再煎熬60min后熄火，將藥液 3500r/min離心5min，取出上清藥液。然后再向沉渣中加入300mL水，用同樣方法再煎熬兩 次。將3次上清藥液混合后置于文火上，濃縮定容成200mL，制成含生藥5%的原藥液，將該 藥液密封，置于冰箱冷藏保存?zhèn)溆谩?br>[0089] 3、實(shí)驗(yàn)方法：
[0090] 取（22±3)g小鼠60只，前肢皮下分別接種經(jīng)昆明系小鼠傳代第7天的小鼠肉瘤 S18。瘤株細(xì)胞（經(jīng)臺(tái)盼蘭染色活細(xì)胞數(shù)大于95% )的腹腔稀釋液0. 2mL，其濃度5X105/mL。 將注射瘤細(xì)胞后的小鼠隨機(jī)分為3組，每組10只，雌雄各半：實(shí)施例3組，同側(cè)同位注射袖 珍菇湯劑稀釋液〇. 25mL，終劑量為每只小鼠注射袖珍菇成分0. 5mg，連續(xù)注10次；對(duì)比例 組，同側(cè)同位注射袖珍菇湯劑稀釋液0. 25mL，終劑量為每只小鼠注射袖珍菇成分0. 5mg，連 續(xù)注10次；對(duì)照組，同側(cè)同位注射生理鹽水0. 5mL。觀(guān)察小鼠的生活狀態(tài)、腫瘤生長(zhǎng)狀況及 小鼠的生存情況。
[0091] 4、試驗(yàn)結(jié)果：
[0092] 自實(shí)驗(yàn)之日起，隨時(shí)觀(guān)察每只小鼠的生活狀況。對(duì)照組小鼠1周開(kāi)始出現(xiàn)肉眼可 見(jiàn)腫塊（約〇. 05cmX0. 05cm)，而實(shí)施例3組、對(duì)比例組則未見(jiàn)肉眼可見(jiàn)的腫塊。實(shí)施例3 組、對(duì)比例組小鼠全部存活。繼續(xù)觀(guān)察至實(shí)驗(yàn)第16天起，對(duì)照組小鼠開(kāi)始逐漸死亡，至36 天對(duì)照組全部死亡。而實(shí)施例3組、對(duì)比例組小鼠則全部存活，且均未出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)腫塊。 繼續(xù)觀(guān)察至第96天，對(duì)比例組小鼠出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)腫塊，繼續(xù)觀(guān)察至實(shí)驗(yàn)第106天起，對(duì)比例 組小鼠開(kāi)始逐漸死亡，至126天對(duì)比例組小鼠全部死亡，實(shí)施例3組小鼠全部存活，未出現(xiàn) 肉眼可見(jiàn)腫塊，繼續(xù)觀(guān)察至160天仍全部存活。本實(shí)驗(yàn)共重復(fù)4次，結(jié)果基本相同。小鼠的 生存情況見(jiàn)表7。
[0093] 表7不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的袖珍菇抗小鼠 S18。腹水型肉瘤的實(shí)驗(yàn)觀(guān)察結(jié)果
[0095] 袖珍菇抗癌試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)施例3組、對(duì)比例培養(yǎng)的袖珍菇對(duì)S18。腹水型肉瘤細(xì) 胞有抑制作用，而實(shí)施例3組優(yōu)于對(duì)比例，說(shuō)明添加本發(fā)明的中藥添加劑的袖珍菇培養(yǎng)基 能夠增強(qiáng)袖珍菇的抗癌作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種袖珍菇培養(yǎng)基，其特征在于，由以下重量份的原料制成：棉籽殼36~43份，甘 鹿渣6~12份，米糠11~22份，中藥添加劑8~18份，麩皮6~13份，石灰0. 8~2. 1 份； 所述的中藥添加劑，由以下重量份的原料制成：紫蘇20~40份，辛夷10~20份，金銀 花5~10份，鹿銜草10~20份，銀杏葉5~10份，夜交藤5~10份，白術(shù)30~50份，青 皮10~20份，決明子5~11份，金毛狗脊10~30份，魚(yú)腥草6~16份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的袖珍菇培養(yǎng)基，其特征在于，由以下重量份的原料制成：棉籽 殼39份，甘蔗渣9份，米糠16份，中藥添加劑13份，麩皮9份，石灰1.4份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的袖珍菇培養(yǎng)基，其特征在于，所述的中藥添加劑，由以下重量 份的原料制成：紫蘇30份，辛夷15份，金銀花8份，鹿銜草15份，銀杏葉7份，夜交藤8份， 白術(shù)40份，青皮15份，決明子8份，金毛狗脊20份，魚(yú)腥草11份。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及袖珍菇培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種袖珍菇培養(yǎng)基，由以下重量份的原料制成：棉籽殼36～43份，甘蔗渣6～12份，米糠11～22份，中藥添加劑8～18份，麩皮6～13份，石灰0.8～2.1份。本發(fā)明的袖珍菇培養(yǎng)基能夠促進(jìn)袖珍菇的成長(zhǎng)，提高產(chǎn)量，培養(yǎng)出來(lái)的袖珍菇氨基酸含量顯著提高，能夠提高袖珍菇的抗氧化性和抗癌性，所用的原料多為天然原料，環(huán)保，無(wú)害，成本低。
【IPC分類(lèi)】C05G3/00, C05G3/02
【公開(kāi)號(hào)】CN105384562
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201511026340
【發(fā)明人】李榮軒
【申請(qǐng)人】廣西揚(yáng)桂生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年3月9日
【申請(qǐng)日】2015年12月31日