專利名稱：一種去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的菌株及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域的一種去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的菌株及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
森林和草原火災(zāi)、火山爆發(fā)及微生物的內(nèi)源合成等均會(huì)產(chǎn)生多環(huán)芳烴，未開采的 煤、石油中也含有大量的多環(huán)芳烴。隨著工業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，多環(huán)芳烴大大地增加，每年因 人類的活動(dòng)會(huì)有成千上萬噸的多環(huán)芳烴釋放到地球環(huán)境系統(tǒng)中，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了環(huán)境的自凈能 力。多環(huán)芳烴最突出的特性是具有強(qiáng)致癌性、致畸性及致突變性。多環(huán)芳烴具有較高的親 脂性，可以通過食物鏈進(jìn)入人體，對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境具有很大的潛在危害，已引起各國(guó) 環(huán)境科學(xué)家的極大重視。因此，加快降解環(huán)境中的多環(huán)芳烴成為新的研究熱點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的菌株及其應(yīng)用。本發(fā)明提供的微桿菌(Microbacterium sp.)LU1，其保藏號(hào)為CGMCC No. 3581。本發(fā)明提供了一種菌劑，其活性成分為微桿菌(Microbacterium sp. ) LUl CGMCCNo. 3581。本發(fā)明中提供的菌株微桿菌(Microbacteriumsp.)LUl CGMCC No. 3581 于 2010 年1月18日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCCJia 北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101)。上述菌劑的制備方法可為將微桿菌(Microbacterium sp. )LU1 CGMCC No. 3581在 如下培養(yǎng)基中在30°C進(jìn)行培養(yǎng)，收集培養(yǎng)容器內(nèi)的所有物質(zhì)獲得菌劑；1 升所述培養(yǎng)基的組成如下0. 5-1. 5g NH4CUO. 05-0. 15g MgSO4 · 7H20、 0. 01-0. IgCaCl2 · 2Η20、0· 05-0. 15g 酵母膏、1. 5_2g KH2PO4U. 5_2g Na2HP04、0. 05-0. 15ml 維生素混合液、0. 5-1. 5ml微量金屬混合液、以及0. 5-1. 5mg苯并[b]熒蒽，其余為水；所 述維生素混合液的組成為50-150 μ g/L對(duì)氨基苯酸、10-100 μ g/L葉酸、50-150 μ g/L硫 辛酸、150-250 μ g/L 煙酸、50-150 μ g/L 維生素 B2、150-250 μ g/L 硫胺素、50-150 μ g/L 泛 酸、450-550 μ g/L維生素Β6、50-150μ g/L維生素B12、以及15-25 μ g/L生物素，其余為 水；所述微量金屬混合液的組成為1. 5-2. 5mg/L FeSO4 · 7Η20、0· 01-0. 05mg/LMnCl2 · 4H20、 0. 15-0. 25mg/L CaCl2 · 6Η20、0· 01-0. 03mg/L NiCl2 · 6Η20、0· 02-0. 03mg/LNa2Se03 · 5H20、 0. 5-1. 5mg/L EDTA、0. 05-0. 15mg/L ZnSO4 · 7H20、0. 1-0. 5mg/L H3B03、0. 005—0· 015mg/L CuCl2 · 2H20、0. 01-0. 05mg/L NaMoO4 · 2H20、0. 01-0. 05mg/L Na2MoO4 · 2H20 和 0. 15-0. 25mg/ L CoCl2 · 6H20，其余為水。上述1升所述培養(yǎng)基的組成優(yōu)選為lg NH4CUO. Ig MgSO4 · 7H20、 0. 05gCaCl2 · 2Η20、0· Ig 酵母膏、1. 86g KH2PO4U. 69g Na2HP04、0. Iml 維生素混合液、Iml 微量金屬混合液、以及Img苯并[b]熒蒽，其余為水；所述維生素混合液的組成為100yg/L 對(duì)氨基苯酸、50 μ g/L葉酸、100μ g/L硫辛酸、200μ g/L煙酸、100μ g/L維生素Β2、200μ g/ L硫胺素、100 μ g/L泛酸、500 μ g/L維生素B6、100 μ g/L維生素B12、以及20 μ g/L生物素， 其余為水；所述微量金屬混合液的組分為2. Omg/L FeSO4 · 7Η20、0· 03mg/L MnCl2 · 4H20、 0. 2mg/L CaCl2 · 6Η20、0· 02mg/L NiCl2 · 6Η20、0· 026mg/LNa2Se03 · 5Η20、1· Omg/L EDTA, 0. lmg/L ZnSO4 · 7H20、0. 3mg/L H3B03、0. 01mg/LCuCl2 · 2H20、0. 03mg/L NaMoO4 · 2H20、 0. 033mg/L Na2MoO4 · 2H20 禾口 0. 2mg/LCoCl2 · 6H20，其余為水。所述培養(yǎng)的條件為培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為300r/min，培養(yǎng)時(shí)間為兩周。上述培養(yǎng)為放置在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。上述的菌劑或上述菌株在去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的應(yīng)用，所述多環(huán)芳 烴選自下述16種中的至少一種萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、熒蒽、芘、苯并蒽、屈、苯并[b]熒 蒽、苯并[k]熒蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并蒽和苯并[ghi]茈。上述的菌劑或上述菌株在降解低分子量多環(huán)芳烴的應(yīng)用，所述低分子量多環(huán)芳烴 優(yōu)選為菲。本發(fā)明提供的菌株去除多環(huán)芳烴的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，微桿菌對(duì)低環(huán)的多環(huán)芳烴如萘 (NAP)、苊烯(ANY)、苊(ANE)、芴(FLE)、菲(PHE)和蒽(ANT)和高環(huán)的多環(huán)芳烴苯并[k]熒 蒽(BkF)的去除明顯；微桿菌還可以降解低分子量多環(huán)芳烴，如菲，微桿菌對(duì)菲的礦化速率 約為0. 3/天。


圖1為微桿菌對(duì)水體中16種多環(huán)芳烴的降解情況圖2為微桿菌對(duì)菲礦化產(chǎn)生累積二氧化碳隨時(shí)間的變化
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。實(shí)施例1、去除和/或降解多環(huán)芳烴的菌株的分離及鑒定一、分離取北京焦化廠污染土壤，接種到滅菌的液體培養(yǎng)基中(接種量為Ig 土/100ml培 養(yǎng)液)，在控溫?fù)u床中振蕩培養(yǎng)(30°C )。1升液體培養(yǎng)基成分為lg NH4CUO. IgMgSO4 ·7Η20、 0. 05g CaCl2 · 2Η20、0· Ig 酵母膏、1· 86g KH2PO4U. 69g Na2HP04、0. Iml 維生素混合液、 Iml微量金屬混合液、以及Img苯并[b]熒蒽，其余為水。其中，維生素混合液的組分 為對(duì)氨基苯酸(100 μ g/L)、葉酸(50 μ g/L)、硫辛酸(100 μ g/L)、煙酸(200 μ g/L)、 維生素 B2 (100 μ g/L)、硫胺素(200 μ g/L)、泛酸(100 μ g/L)、維生素 B6 (500 μ g/L)、 維生素B12(100yg/L)、以及生物素(20 μ g/L)，其余為水；微量金屬混合液的組分為 FeSO4 ·7Η20(2· 0mg/L) ,MnCl2 ·4Η20(0· 03mg/L)、CaCl2 ·6Η20(0· 2mg/L) ,NiCl2 ·6Η20(0· 02mg/ L)、Na2SeO3 · 5H20(0. 026mg/L)、EDTA (1. Omg/L)、ZnSO4 · 7H20(0. lmg/L)、H3BO3 (0. 3mg/ L)、CuCl2 · 2H20(0. Olmg/L)、NaMoO4 · 2H20(0. 03mg/L)、Na2MoO4 · 2H20(0. 033mg/L)禾口 CoCl2 ·6Η20(0. 2mg/L)，其余為水。培養(yǎng)一周后，用接種環(huán)從培養(yǎng)液中取1環(huán)在滅菌的固體培
4養(yǎng)基上劃線。固體培養(yǎng)基成分如下:lg/LNH4Cl、0. lg/L MgSO4 ·7Η20、0. 05g/L CaCl2 · 2H20、
1.86g/L KH2P04、1.69g/LNa2HP04、17g/L 瓊脂、lmg/L 苯并[b]熒蒽。在 30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 一周，然后取單菌落在新鮮的固體培養(yǎng)基上劃線，如此反復(fù)幾次，直至固體培養(yǎng)基上為純菌 落。二、鑒定1、分子水平鑒定挑一環(huán)純菌落接種于5ml新鮮配置的滅菌LB培養(yǎng)基中，在37 °C恒溫?fù)u床 振蕩培養(yǎng)一天，然后用蛋白酶K法提取該菌落的DNA，以提取的DNA為模板，用細(xì) 菌 16SrRNA 基因的通用引物進(jìn)行擴(kuò)增(F27 :5，-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3，，R1492 5，-TACGYTACCTTGTTACGACT-3，)，50 μ 1 反應(yīng)體系包括1. 5mmol/L Mg2+, 50mmol/LKCl, 0. 2mmol/L dNTPs，1 μ mol/L 引物，0. 5-1. OU Taq DNA 聚合酶，IO2-IO5 拷貝模板 DNA。擴(kuò)增 產(chǎn)物為送上海英俊生物技術(shù)公司進(jìn)行測(cè)序，測(cè)序結(jié)果見附表中的序列，該序列為該菌16S rRNA的基因序列。將得到的堿基序列在GenBank內(nèi)進(jìn)行同源序列搜索，結(jié)果顯示該菌與類 似氧化微桿菌(Microbacteriumparaoxydans)的同源性最高，可達(dá)99. 9%。2、特征鑒定觀察分離出的單菌落，菌落形態(tài)為黃色，表面光滑半透明，邊緣整齊，有光澤，經(jīng)革 蘭氏染色鑒定革蘭氏陽性菌，呈不規(guī)則的桿狀。接觸酶、硝酸鹽還原、酪素水解、酪氨酸水解 等試驗(yàn)呈陽性，氧化酶、脲酶、V-P、明膠液化、檸檬酸鹽利用、丙二酸利用、淀粉水解、反硝化 等試驗(yàn)結(jié)果呈陰性。在一周培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，在2%、5%和7%氯化鈉條件下有生長(zhǎng)，但在10% 氯化鈉條件下無生長(zhǎng)；在30°C和37°C時(shí)有生長(zhǎng)，在4°C和42°C時(shí)無生長(zhǎng)。根據(jù)上述鑒定確定該菌株LUl為微桿菌(Microbacterium sp.)，并于2010年1月 18日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCCJia 北京市 朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101)，保藏編號(hào)為CGMCC No.3581。實(shí)施例2、去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的菌劑的制備將上述微桿菌(Microbacterium sp. ) LUl接種到實(shí)施例1所述液體培養(yǎng)基中(以
2.5L三角瓶為培養(yǎng)容器，內(nèi)盛IL培養(yǎng)液，用無菌棉花塞住瓶口 )，在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中以 300r/min轉(zhuǎn)速振蕩培養(yǎng)兩周，培養(yǎng)溫度為30°C。收集培養(yǎng)容器中的所有物質(zhì)即為去除多環(huán) 芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的菌劑。實(shí)施例3、去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的菌株的應(yīng)用1、菌株對(duì)混合多環(huán)芳烴的去除通過序批實(shí)驗(yàn)，研究由實(shí)施例1獲得的微桿菌(Microbacterium sp. ) LUl CGMCCNo. 3581對(duì)16種多環(huán)芳烴的降解情況。采用氣相色譜_質(zhì)譜儀檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)在20ml頂 空瓶中進(jìn)行，時(shí)間為三周，每三天取一次樣(用相同體積正己烷從培養(yǎng)液中提取多環(huán)芳烴， 取Iml提取液在氣相色譜_質(zhì)譜儀上進(jìn)行檢測(cè))。將由實(shí)施例1 中獲得的微桿菌(Microbacterium sp.)LUl CGMCC No. 3581 按 IO7CFU的量接種到含有IOml培養(yǎng)液1的20ml頂空瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，1升所述培養(yǎng)液1為將 實(shí)施例1所述液體培養(yǎng)基中的Img苯并[k]熒蒽更換為人工配制16種多環(huán)芳烴混合物， 其中各多環(huán)芳烴在所述培養(yǎng)液1中的濃度為萘5. 90mg/L、苊烯0. 01mg/L、苊5. 06mg/L、
5芴 3. 19mg/L、菲 0. 77mg/L、蒽 0. 13mg/L、熒蒽 0. 43mg/L、芘 0. 68mg/L、苯并蒽 0. 01mg/L、屈 0. 02mg/L、苯并(b)熒蒽 0. 67mg/L、苯并(k)熒蒽 0. 23mg/L、苯并(a)芘 0. 03mg/L、茚并(1， 2,3-cd)芘0. 14mg/L、二苯并蒽0.03mg/L、苯并(ghi)茈mg/L。制備多環(huán)芳烴混合物時(shí)，將 溶解在正己烷中濃度為lppm(mg/L)的各種多環(huán)芳烴，取不同量混合在一起，然后加入培養(yǎng) 液。為防止多環(huán)芳烴揮發(fā)，封閉瓶口，每周向瓶中加一次氧氣(空氣)。每個(gè)瓶分三次共加入15mL正己烷，每次在搖床上以180r/min震蕩萃取半小時(shí)，將 三次的萃取液轉(zhuǎn)移至同一瓶中，混合均勻后，取875yL萃取液加125yL 2ppm(mg/L)內(nèi)標(biāo) 2-氟聯(lián)苯和對(duì)_三聯(lián)苯于棕色上樣品中，采用氣相色譜_質(zhì)譜儀(安捷倫GC6890/5973MSD， HP-5石英毛細(xì)管色譜柱30m X0. 32mm, ID 0. 25 μ m液膜厚)測(cè)定。測(cè)定條件為載氣為 高純He，柱前壓0.03MPa，線速度37cm/s.進(jìn)樣口溫度30(TC，不分流進(jìn)樣方式。初始溫度 60°C，以5°C/min速度升溫至300°C，保留20min至樣品完全流出。質(zhì)譜條件為EI電離 源70eV，質(zhì)量范圍45 600amu，倍增器電壓1288V，離子源溫度230°C，采用選擇離子模式 (SIM)。在該檢測(cè)條件下，16種多環(huán)芳烴的保留時(shí)間分別為(分鐘)萘8. 67、苊烯15. 23、 苊 16. 04、芴 18. 42、菲 22. 81、蒽 23. 04、熒蒽 28. 35、芘 29. 34、苯并蒽 35. 06、屈 35. 21、苯并 (b)熒蒽 39. 8、苯并(k)熒蒽 39. 93、苯并(a)芘 41. 28、茚并(1, 2,3-cd)芘 46. 78、二苯并 蒽47. 06、苯并(ghi)茈)47. 96。采用內(nèi)標(biāo)法定量。每三天取一次樣，經(jīng)計(jì)算，將每次取樣后檢測(cè)的各多環(huán)芳烴的濃度做圖，如圖1所 示，縱坐標(biāo)的單位PPb表示yg/L，圖1中每一組柱狀圖從左到右依次代表對(duì)應(yīng)的一種多環(huán) 芳烴在0、3、6、9、12、15、21天的濃度。其中萘(NAP)在0、3、6、9、12、15、21天的濃度分別 為 5. 90,6. 04,5. 78,5. 16,4. 04,3. 19 和 1. 44 μ g/L ；苊烯(ANY)在 0、3、6、9、12、15、21 天 的濃度分別為 0. 012,0. 014,0. 016,0. 013,0. 010,0. 008 和 0. 005 μ g/L ；苊(ANE)在 0、3、 6、9、12、15、21 天的濃度分別為 5. 06,5. 05,4. 75,4. 29,3. 95,3. 24 和 2. 12 μ g/L ；芴(FLE) 在 0、3、6、9、12、15、21 天的濃度分別為 3. 19,3. 16,2. 98,2. 71,2. 57,2. 14 和 1. 62 μ g/ L;菲(PHE)在 0、3、6、9、12、15、21 天的濃度分別為 0. 77、0. 75、0. 71、0. 64、0. 76、0. 66 和 0. 57 μ g/L ；蒽(ANT)在 0、3、6、9、12、15、21 天的濃度分別為 0. 13,0. 10,0. 08,0. 08,0. 06、 0. 04 和 0. 03 μ g/L ；苯并[k]熒蒽(BkF)在 0、3、6、9、12、15、21 天的濃度分別為 0. 23,0. 52、 0. 50,0. 50,0. 23,0. 02和0. 01 μ g/L。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，微桿菌對(duì)低環(huán)的多環(huán)芳烴如萘(NAP)、 苊烯(ANY)、苊(ANE)、芴(FLE)及蒽(ANT)和高環(huán)的多環(huán)芳烴苯并[k]熒蒽(BkF)的去除 明顯。觀察發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)期間，培養(yǎng)液逐漸變得渾濁，可以判斷微桿菌在培養(yǎng)液中不斷生長(zhǎng)。2、菌株對(duì)菲的降解以14C標(biāo)記的菲(Sigma，美國(guó))為代表，研究了微桿菌對(duì)低分子量多環(huán)芳烴的礦 化。實(shí)驗(yàn)在根據(jù)已有研究設(shè)計(jì)制作的呼吸測(cè)定器中進(jìn)行。使用40mL安培瓶上，在瓶蓋內(nèi)下 方固定一個(gè)2mL的GC樣品瓶，內(nèi)裝ImL左右lmol/L的氫氧化鈉溶液，以吸收在降解過程中 產(chǎn)生的14C02。將由實(shí)施例1中獲得的微桿菌(Microbacterium sp. )LU1 CGMCC No. 3581按 IO7CFU接種到含有20ml培養(yǎng)液2的40ml安培瓶中。1升所述培養(yǎng)液2成分為Ig NH4Cl, 0. Ig MgS04 · 7Η20、0· 05g CaCl2 · 2Η20、1· 86g KH2PO4U. 69g Na2HPO4Uml 微量金屬混合液、 0. 2mg菲和0. 03mg 14C菲(即菲中14C的濃度)。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行兩周，每天從呼吸測(cè)定器中取一 次樣(取樣后，添加新鮮氫氧化鈉)。樣品溶液與4ml 14C閃爍液混合，然后在閃爍計(jì)數(shù)儀 (Liquid Scintillation Counter LS 6500，Beckman，美國(guó))上測(cè)定，所得結(jié)果按公式換算成14C的濃度值(二氧化碳中14C的濃度)。設(shè)置不加微桿菌的對(duì)照。圖2顯示14C菲礦化 累積14C 二氧化碳隨時(shí)間的變化。〇代表對(duì)照組， 代表微桿菌組，按照一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)計(jì) 算(C = Cc^kt)，微桿菌對(duì)菲的礦化速率約為0. 3/天。
權(quán)利要求
微桿菌(Microbacterium sp.)LU1，其保藏號(hào)為CGMCC No.3581。
2.—種去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的菌劑，其活性成分為權(quán)利要求1中的微桿 菌(Microbacterium sp.)LUl CGMCC No. 3581。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的菌劑，其特征在于所述菌劑的制備方法為將微桿菌 (Microbacterium sp. )LU1 CGMCC No. 3581在如下培養(yǎng)基中在30°C進(jìn)行培養(yǎng)，收集培養(yǎng)容 器內(nèi)的所有物質(zhì)獲得菌劑；1 升所述培養(yǎng)基的組成如下0. 5-1. 5g NH4CUO. 05-0. 15g MgSO4 · 7H20、 0· 01-0. IgCaCl2 · 2Η20、0· 05-0. 15g 酵母膏、1.5-2· Og KH2PO4U. 5-2. Og Na2HPO4, 0. 05-0. 15ml維生素混合液、0. 5-1. 5ml微量金屬混合液、以及0. 5-1. 5mg苯并[b]熒蒽， 其余為水；所述維生素混合液的組成為50-150yg/L對(duì)氨基苯酸、10-100yg/L葉酸、 50-150 μ g/L 硫辛酸、150-250 μ g/L 煙酸、50-150 μ g/L 維生素 B2、150-250 μ g/L 硫胺素、 50-150 μ g/L 泛酸、450-550 μ g/L 維生素 Β6、50_150 μ g/L 維生素 B12、以及 15-25 μ g/L 生 物素，其余為水；所述微量金屬混合液的組成為1. 5-2. 5mg/L FeSO4 · 7H20、0. 01-0. 05mg/ LMnCl2 · 4Η20、0· 15-0. 25mg/L CaCl2 · 6Η20、0· 01-0. 03mg/L NiCl2 · 6Η20、0· 02-0. 03mg/ LNa2SeO3 · 5Η20、0· 5-1. 5mg/L EDTA、0. 05-0. 15mg/L ZnSO4 · 7Η20、0· 1-0. 5mg/L H3BO3, 0. 005-0. 015mg/L CuCl2 · 2H20、0. 01-0. 05mg/L NaMoO4 · 2H20、0. 01-0. 05mg/LNa2Mo04 · 2H20 和 0. 15-0. 25mg/L CoCl2 · 6H20，其余為水。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的菌劑，其特征在于1升所述培養(yǎng)基的組成如下 IgNH4CUO. Ig MgSO4 · 7Η20、0· 05g CaCl2 · 2Η20、0· Ig 酵母膏、1. 86g KH2PO4U. 69gNa2HP04、 0. Iml維生素混合液、Iml微量金屬混合液、以及Img苯并[b]熒蒽，其余為水；所述維生 素混合液的組成為100 μ g/L對(duì)氨基苯酸、50 μ g/L葉酸、100 μ g/L硫辛酸、200 μ g/L煙 酸、100 μ g/L 維生素 Β2、200 μ g/L 硫胺素、100 μ g/L 泛酸、500 μ g/L 維生素 B6、100 μ g/ L維生素B12、以及20 μ g/L生物素，其余為水；所述微量金屬混合液的組分為2. 0mg/L FeSO4 · 7Η20、0· 03mg/L MnCl2 · 4Η20、0· 2mg/LCaCl2 · 6Η20、0· 02mg/L NiCl2 · 6Η20、0· 026mg/L Na2SeO3 · 5Η20、1· 0mg/L EDTA、0. lmg/LZnS04 · 7Η20、0· 3mg/L Η3Β03、0· Olmg/L CuCl2 · 2H20、 0. 03mg/L NaMoO4 · 2H20、0. 033mg/L Na2MoO4 · 2H20 禾口 0. 2mg/L CoCl2 · 6H20，其余為水。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中任一所述的菌劑，其特征在于所述培養(yǎng)的條件為培養(yǎng)溫度為 30°C，培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為300r/min，培養(yǎng)時(shí)間為兩周。
6.權(quán)利要求1所述的菌株在去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的應(yīng)用，所述多環(huán)芳烴 選自下述16種中的至少一種萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、熒蒽、芘、苯并蒽、屈、苯并[b]熒蒽、 苯并[k]熒蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并蒽和苯并[ghi]茈。
7.權(quán)利要求2-5中任一所述的菌劑在去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴的應(yīng)用，所述 多環(huán)芳烴選自下述16種中的至少一種萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、熒蒽、芘、苯并蒽、屈、苯并 [b]熒蒽、苯并[k]熒蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并蒽和苯并[ghi]茈。
8.權(quán)利要求1所述的菌株在礦化低分子量多環(huán)芳烴的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求2-5中所述的菌劑在礦化低分子量多環(huán)芳烴的應(yīng)用
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于所述低分子量多環(huán)芳烴為菲。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種去除多環(huán)芳烴和/或降解多環(huán)芳烴菌株及其應(yīng)用。本發(fā)明提供了微桿菌(Microbacterium sp.)LU1，其保藏號(hào)為CGMCC No.3581，本發(fā)明提供了一種菌劑，其活性成分為微桿菌(Microbacterium sp.)LU1 CGMCC No.3581。本發(fā)明提供的菌株去除多環(huán)芳烴的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，微桿菌對(duì)低環(huán)的多環(huán)芳烴如萘(NAP)、苊烯(ANY)、苊(ANE)、芴(FLE)、菲(PHE)及蒽(ANT)和高環(huán)的多環(huán)芳烴苯并[k]熒蒽的去除明顯；微桿菌還可以礦化低分子量多環(huán)芳烴，如菲，微桿菌對(duì)菲的礦化速率約為0.3/天。
文檔編號(hào)A62D3/02GK101899406SQ20101016191
公開日2010年12月1日 申請(qǐng)日期2010年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月27日
發(fā)明者盧曉霞, 吳淑可, 吳蔚, 廖曉勇, 李秀利, 陳超琪, 馬杰 申請(qǐng)人:北京大學(xué)