專利名稱：協(xié)同穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物中包含的至少一種酶的新配方。這些穩(wěn)定化配方的組分的獨(dú)特的液流學(xué)性質(zhì)，即使在溫和至高熱以及寬的pH范圍條件下，也可使配方對其它以水為基質(zhì)的酶分散體混合物很好地具有協(xié)同的穩(wěn)定化能力。因此，本發(fā)明也涉及穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物。此外，本發(fā)明還涉及制備穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的新方法，以及在液態(tài)酶組合物中使用所述穩(wěn)定化配方的方法。
最近幾年中，工業(yè)上和商業(yè)上酶和液態(tài)酶組合物的使用迅速增長。眾所周知，酶可以是酸性的、堿性的或中性的，這取決于它們具有活性的PH值范圍。所有這些類型的酶預(yù)期都可用于本發(fā)明。
許多酶和液態(tài)酶組合物業(yè)已與液態(tài)去污劑組合，并已顯示出作為增溶和洗滌配方的實(shí)用性。除了其與液態(tài)去污劑組合外，酶和液態(tài)酶組合物在許多目前使用多種酶類的許多商業(yè)和工業(yè)領(lǐng)域中也已顯示出實(shí)用性。
蛋白酶是一類公知的以多種工業(yè)用途經(jīng)常被使用的酶。在這些工業(yè)用途中，它們靠水解蛋白質(zhì)和蛋白類底物中的肽鍵而起作用。商業(yè)上，蛋白酶在洗衣工業(yè)(其中，蛋白酶幫助除去以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的污漬，例如血或蛋污漬)和奶酪制造工業(yè)(其中，蛋白酶幫助凝結(jié)牛奶)上具有最大用途。蛋白酶也用作肉類柔嫩劑、用于軟化皮革、改善食物配料和風(fēng)味開發(fā)。包含堿性蛋白酶的液態(tài)酶組合物也可用作冷卻塔水和金屬制造液體保存池中細(xì)菌結(jié)膜和藻類和真菌凝塊的分散劑。
基于其活性pH值范圍，蛋白酶可分為酸性、中性或堿性蛋白酶。酸性蛋白酶包括微生物粗制凝乳酶、凝乳酶、胃蛋白酶和真菌酸性蛋白酶。中性蛋白酶包括胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶/無花果蛋白酶和細(xì)菌中性蛋白酶。堿性蛋白酶包括枯草桿菌蛋白酶和相關(guān)的蛋白酶。市售的含有蛋白酶的液態(tài)酶組合物可以RennilaseR、“PTN”(胰腺胰蛋白酶NOVO)、“PEM”(蛋白水解酶混合物)、Neu-traseR、AlcalaseR、EsperaseR和SavinaseR商品名購得，這些組合物都由Danbury，CT的Novo Nordisk Bio-industials，Inc提供。另一種市售的蛋白酶可以HT-Proteolyti商品名購得，由SolvayEnzyme Products提供。
另一類酶即淀粉酶也已在許多工業(yè)和商業(yè)工藝中被采用，在這些工藝中，淀粉酶用于催化或加速淀粉的水解。淀粉酶大量用于生產(chǎn)葡萄糖漿、麥芽糖漿和各種其它更精制的淀粉水解末端產(chǎn)品(例如高果糖漿)的玉米漿工業(yè)。作為一個種類，它們包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、淀粉葡萄糖苷酶(葡萄糖淀粉酶)、真菌淀粉酶和支鏈淀粉酶。市售的含有淀粉酶的液態(tài)酶組合物可以BAN，TermamylR，AMG，F(xiàn)ungamylR和PromozymeTM商品名(由Novo Nordisk提供)和Dia-zyme L-200商品名(Solvay Enzyme Products產(chǎn)品)購得。
其它有商業(yè)價值的酶類是那些影響纖維水解的酶。這些酶包括纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和β-葡聚糖酶。纖維素酶是降解纖維素(一種存在于植物細(xì)胞壁中的線性葡萄糖聚合物)的酶。半纖維素酶涉及到半纖維素(與纖維素相似，是一種在植物中發(fā)現(xiàn)的多糖)的水解。果膠酶是與果膠(一種主要成分為糖酸的碳水化合物)降解有關(guān)的酶。β-葡聚糖酶是與β-葡聚糖(與纖維素類似之處也在于它們是葡萄糖的線性聚合物)水解有關(guān)的酶。就商業(yè)用途來說，這些酶基于其對纖維的降解，在制造工藝中具有或多或少的實(shí)用性。
據(jù)報道，纖維素酶可用于廢舊新聞紙(ONP)的脫墨過程，從而不需用任何表面活化劑和堿性化學(xué)品。該酶從纖維表面除去油墨并且使油墨粒子以一定的大小分散開。參見S.Say-Kyoun Ow，Biol-ogical De-Inking Methods of Newsprint Wastepaper，Wordpulp and paper Technology，PP.63，64(1992)。總的來說，纖維素酶包括內(nèi)纖維素酶、外纖維素酶、外纖維-生物水解酶、甘露聚糖酶和纖維二糖酶。包含纖維素酶的市售的液態(tài)酶組合物可以Cellu-clastR和NovozymR188商品名(兩者均由Novo Nordisk提供)購得。
半纖維素酶也用于脫墨過程以從ONP纖維表面除去墨粒子。參見D.Y.Prasad et al.，Enzyme Deinking of Black and White Le-tterpress Printed Newsprint Waste，Progress in Paper Recyc-ling，May 1992，PP.21，22。此外，半纖維素酶(例如木聚糖酶)被用于紙漿漂白工藝。用木聚糖酶預(yù)處理牛皮紙漿可使漂白化學(xué)品(例如分子態(tài)氯)的用量大大降低，也可改進(jìn)紙漿的質(zhì)量，這一點(diǎn)由較高的白度極限值反映出來。參見D.J.Senior et al.，Reductionin Chlorine Use During Bleaching of Kraft pulp FollowingXylanase Treatment，Tappi Journal(印刷中，其內(nèi)容披露于1991年Stockholm舉行的國際紙漿漂白會議)?？蓮腘ovo Nordisk獲得的PULPZYMR產(chǎn)品和可從Alko Biotechnology獲得的ECOPULPR產(chǎn)品是市售的含有基于木聚糖酶漂白酶的液態(tài)酶組合物的兩個例子。
作為一個種類，半纖維素酶包括半纖維素酶混合物和半乳糖甘露聚糖酶。市售的含有半纖維素酶的液態(tài)酶組合物可以以PULPZYMR(Novo產(chǎn)品)、ECOPULPR(Alko Biotechnology產(chǎn)品)以及NovozymR280和GamanaseTM(Novo Nordisk產(chǎn)品)商品名購得。
果膠酶在商業(yè)上用于削弱細(xì)胞壁和提高果汁的提取，以及降低粘度和阻止這些提取物中的膠凝作用。果膠酶由內(nèi)聚半乳糖醛酸酶外聚半乳糖醛酸酶、內(nèi)果膠酸鹽裂合酶(反式消除酶(transelimin-ase))、外果膠酸鹽裂合酶(反式消除酶)、和內(nèi)果膠裂解酶(反式消除酶)組成。市售的含有果膠酶的液態(tài)酶組合物可以PectinexTMUltra SP和PectinexTM*(兩者均由Novo Nordisk提供)商品名購得。
β-葡聚糖酶在麥芽制造和釀造工業(yè)中具有重要作用，在麥芽制造和釀造工業(yè)中必須對含有β-葡聚糖的大麥細(xì)胞壁進(jìn)行處理。β-葡聚糖酶由地衣多糖酶、昆布多糖酶和外葡聚糖酶組成。市售的含有β-葡聚糖酶的液態(tài)酶組合物可以NovozymR234，CerefloR，BAN，F(xiàn)inizymR和CeremixR商品名(所有這些均由Novo Nordisk提供購得。
工業(yè)和商業(yè)上使用的另外兩類酶是脂酶和磷脂酶。脂酶和磷脂酶是通過作用于脂肪和油中的酯鍵來水解這些化合物的酯酶。脂酶作用于甘油三酯，而磷脂酶作用于磷脂。在工業(yè)部門中，脂酶和磷脂酶代表商業(yè)上可獲得的酯酶，且兩者目前都有很多工業(yè)和商業(yè)用途。
在紙漿和造紙工業(yè)中，含有脂酶的液態(tài)酶制劑已被證明在生產(chǎn)過程中降低滾筒和其它設(shè)備上的樹脂沉積方面特別有用。例如，已報道在用氯漂白之前用脂酶處理未漂白的亞硫酸紙漿來降低氯化甘油三酯的含量，在紙制造過程中它被認(rèn)為是樹脂沉積的原因。參見K.Fischer and K.Messner，Reducing Troublesome Pitch in Pu-lp Mills By Lipolytic Enzymes，Tappi Journal，F(xiàn)eb.1995，P.130。Novo Nordisk以ResinaseTMA和ResinaseTMA 2X商品名將兩種液態(tài)脂酶制劑投放市場。據(jù)報道，這兩種制劑在一定條件下，通過分解紙漿中的樹脂明顯降低樹脂沉積。
脂酶的另一個重要用途是在皮革制作過程中去除生皮和毛皮的油污。堿性脂酶與特定的蛋白酶和乳化系統(tǒng)結(jié)合使用來幫助去除油污以及改進(jìn)皮革制作中的浸泡和加灰澄清作用。參見J.Christner，The Use of Lipases in the Beamhouse Processes，87 J.A.L.C.A.128(1992)。
脂酶也已用于開發(fā)奶酪中的調(diào)味劑和改進(jìn)牛肉脂對狗的適口性。在非水系統(tǒng)中，脂酶用于從羧酸和醇合成酯。
含有脂酶的商品液態(tài)酶組合物已可購得。例如，這些組合物可以Lipolase 100，Greasex 5OL，PalataseTMA，PalataseTMM和LipozymeTM商品名(所有這些均由Novo Nordisk提供)購得。
就用于工業(yè)的磷脂酶來說，胰磷脂酶A2已用于轉(zhuǎn)化卵磷脂成溶血卵磷脂。據(jù)報道，溶血卵磷脂在生產(chǎn)蛋黃醬和烤制面包中是良好的乳化劑。磷脂酶A2可以液態(tài)酶組合物的形式通過商業(yè)途徑獲得，該組合物由Novo Nordisk以LECITASETM名稱出售。
另一類有商業(yè)價值的酶類是異構(gòu)酶，該酶催化有機(jī)化合物異構(gòu)體之間的轉(zhuǎn)化反應(yīng)。異構(gòu)酶在高果糖玉米漿工業(yè)中特別重要。例如由葡萄糖異構(gòu)酶催化的醛糖-酮糖異構(gòu)酶反應(yīng)涉及到葡萄糖向果糖的轉(zhuǎn)化，并且正是該工業(yè)中三步關(guān)鍵的酶反應(yīng)之一。SweetzymeR產(chǎn)品是由Novo Nordisk提供的含有葡萄糖異構(gòu)酶的液態(tài)酶組合物。
氧化還原酶是在化學(xué)氧化/還原反應(yīng)中用作催化劑且相應(yīng)地涉及許多生化物質(zhì)的分解和合成的酶。目前，因大多數(shù)氧化還原酶需要輔助因子的存在，許多氧化還原酶在工業(yè)上還沒有獲得顯著的位置。然而，當(dāng)輔助因子是酶的一個組成部分或者不是必須提供時，氧化還原酶在工業(yè)上是有用的，特別是在食品加工業(yè)中。
一種氧化還原酶，葡萄糖氧化酶，被用于阻止影響食品顏色和味道的不期望的變褐反應(yīng)。葡萄糖氧化酶也用作“氧清除劑”防止果汁中嗅味的加重和保持某些敏感食品配料的顏色和穩(wěn)定性。另一種氧化還原酶，過氧化氫酶已用于分解殘存的用作滅菌劑的過氧化氫。第三種氧化還原酶，脂肪氧合酶(天然存在于大豆粉中，通常不將其純化用于工業(yè))用于烘烤中，不僅可獲得較白的面包，也可防止由某些因子引起的生面團(tuán)軟化作用。其它氧化還原酶具有從類固醇衍生物的酶法合成到診斷試驗(yàn)的可能的用途。這些氧化還原酶包括過氧化物酶、超氧化物岐化酶、醇氧化酶、多酚氧化酶、黃嘌呤氧化酶、巰基氧化酶、羥化酶(hydroxylase)、膽甾醇氧化酶、漆酶、乙醇脫氫酶和類固醇脫氫酶。
當(dāng)酶(例如以上描述的那些酶)為用于工業(yè)過程而制備或銷售時，它們一般配制成為用于特定工藝的水基質(zhì)的或含水的液態(tài)酶組合物。水基的液態(tài)酶組合物根據(jù)特定的酶或該組合物的用途可以含有另外的溶劑。然而，這些液態(tài)酶組合物歷來存在難以解決的問題，例如，導(dǎo)致酶活性喪失(特別是貯存時)的化學(xué)不穩(wěn)定性。貯存時酶活性損失的這一關(guān)健問題特別影響液態(tài)去污劑工業(yè)。
在世界各地，使工業(yè)產(chǎn)品(例如，液態(tài)酶組合物)貯存于各種氣候條件下的倉庫中(產(chǎn)品長期經(jīng)受從冰點(diǎn)到高于50℃范圍內(nèi)的溫度)并不罕見。在0℃到50℃范圍的極端溫度下貯存許多個月后，由于酶的不穩(wěn)定性，大多數(shù)液態(tài)酶組合物喪失其酶活性的20％到100％。
已進(jìn)行了各種嘗試，以穩(wěn)定包含在液態(tài)酶組合物中的酶。使用含有醇類、甘油類、二烷基甘油醚類和它們與其它化合物的混合物的配方以增加液態(tài)酶組合物穩(wěn)定性的努力，即使在溫和的貯存溫度范圍內(nèi)，也僅勉強(qiáng)取得成功。
在美國專利No.4,801,544中，乙二醇和乙氧基化直鏈醇非離子表面活性劑以及碳?xì)浠衔锶軇┫到y(tǒng)被用作穩(wěn)定劑，并描述了將存在于溶劑/表面活性劑混合物內(nèi)的酶包裹于膠囊中的方法。組合物中水的含量保持在5％以下，在35°、70°和100°F下檢查酶的穩(wěn)定性。
美國專利No.4,548,727描述了將某些酯用于酶水溶液制劑的穩(wěn)定化。用作穩(wěn)定劑的酯具有通式RcooR′，其中R是從1到3個碳原子的烷基或者氫，R′是從1到6個碳原子的烷基。所述酯以0.1到約2.5％(重量)的量存在于含水酶制劑中。
美國專利No.4,318,818描述了一種用于酶水溶液組合物的穩(wěn)定化系統(tǒng)，該穩(wěn)定化系統(tǒng)包括鈣離子和低分子量的羧酸或其鹽。穩(wěn)定化系統(tǒng)的PH值從約6.5到10。
美國專利No.4,243,543描述了液態(tài)含蛋白質(zhì)水解酶的去污劑組合物的穩(wěn)定化方法。該去污劑組合物通過在其中加入抗氧化劑和親水多羥基化合物，同時穩(wěn)定組合物的PH值來使其穩(wěn)定化。
美國專利No.4,169,817描述了一種含有穩(wěn)定化酶的液態(tài)清潔劑組合物。該組合物是含有從10％到50％(重量)固體物質(zhì)的水溶液，含有去污劑增潔劑、表面活性劑、得自枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)的酶系統(tǒng)和酶穩(wěn)定化劑。該穩(wěn)定化劑包含高度水溶性的鈉或鉀鹽和/或水溶性的羥基醇，且能使所述溶液長期貯存而不發(fā)生酶的失活。
歐洲專利No.0 352 244 A2描述了使用兩性表面活性劑的穩(wěn)定化液態(tài)去污劑組合物。
本發(fā)明提供了一種能夠協(xié)同穩(wěn)定化包含在液態(tài)酶組合物中的一種或多種酶的配方。
由此，本發(fā)明也提供了穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物。
此外，本發(fā)明還提供了制備穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物的方法。
使用用于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的配方可以廣泛地完成本發(fā)明的各個方面的目的，所述配方包括(a)選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物、聚酰胺的至少一種聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇，和(c)水，其中，組分(a)和(b)以有效地穩(wěn)定化至少一種包含在液態(tài)酶組合物中的酶的量存在。優(yōu)選地，聚合物(a)和C2-C6多羥基醇(b)以協(xié)同有效地穩(wěn)定化包含在液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的組合量存在。
本發(fā)明的穩(wěn)定化配方可與用于具有多種功能的液態(tài)酶組合物中的多種酶一起使用?？膳c這一穩(wěn)定化配方一起使用的酶和酶類包括(但不限于)以上討論的那些。
本發(fā)明也涉及到穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物，該組合物包括
(a)選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的至少一種聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇，(c)水，和(d)至少一種酶，其中，組分(a)和(b)以有效地穩(wěn)定化包含在液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的量存在。優(yōu)選地，聚合物(a)和C2-C6多羥基醇(b)以協(xié)同有效地穩(wěn)定化包含在液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的組合量存在。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及通過將酶與上述穩(wěn)定化配方組合，制備穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的方法。此外，本發(fā)明還涉及使用穩(wěn)定化配方穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的方法，該方法包括將穩(wěn)定化配方與液態(tài)酶組合物組合的步驟。
在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種用于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的配方，該配方包括(a)選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的至少一種聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇，和(c)水，其中，組分(a)和(b)以協(xié)同有效地穩(wěn)定化包含在液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的組合量存在。
在本發(fā)明的用于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的配方中或本發(fā)明的穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物中使用了水溶性的，或者至少是部分水溶性的聚合物。即，該聚合物必須有足夠的可溶性，以便易于與水混合并形成單一相。具有這一可溶性，該聚合物在與穩(wěn)定化配方中的C2-C6多羥基醇和水或者與液態(tài)酶組合物組合時不會發(fā)生分離。該配方不必是清澈的溶液。優(yōu)選地，該配方是具有明顯均一組成的乳濁液。
在本發(fā)明的用于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的配方或穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物中，該聚合物的存在量視所使用的特定聚合物的分子量而定。所使用的聚合物的分子量越高，一般穩(wěn)定化酶所需聚合物的量越低。
該聚合物可優(yōu)選地以高達(dá)穩(wěn)定化配方重量的約50％的量使用。更優(yōu)選地，聚合物存在量為0.05到30％(重量)，最優(yōu)選地，為1％到10％(重量)。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，該聚合物當(dāng)然以在水基質(zhì)或含水配方中與多羥基醇組合時達(dá)到對液態(tài)酶組合物的所期望的協(xié)同穩(wěn)定化作用的量存在。
用于本發(fā)明中的聚合物選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺。該聚合物可以是取代的或非取代的。該聚合物可以具有微弱的離子電荷，但優(yōu)選非離子型。
當(dāng)使用的聚合物是聚(纖維素)醚時，該聚合物最好選自聚(羧甲基纖維素)醚、聚(羥丙基甲基纖維素)醚、聚(羥乙基甲基纖維素)醚、聚(羥丁基甲基纖維素)醚、聚(羥丙基纖維素)醚和聚(乙基羥乙基纖維素)醚。該聚合物更優(yōu)選地是聚(羧甲基纖維素)醚。某些用于本發(fā)明的聚(纖維素)醚，例如，聚(羧甲基纖維素)醚，是以鹽即鈉鹽形式出售的，并具有微弱的陰離子電荷。優(yōu)選的聚(纖維素)醚的分子量范圍是從15,000到100,000，但更優(yōu)選的分子量范圍是從20,000到75,000。
用于本發(fā)明的丙烯酸聚合物優(yōu)選是丙烯酸，甲基丙烯酸或其衍生物(例如丙烯酸酯或鹽)的聚合物或共聚物。優(yōu)選的丙烯酸聚合物的例子是Rohm和Haas聚合物Acrysol GS產(chǎn)品(一種聚丙烯酸鈉聚合物)、Acrysol TI-935產(chǎn)品(一種丙烯酸聚合物)和Acrylin 22產(chǎn)品(一種丙烯酸聚合物)。丙烯酸聚合物的分子量可以從約5,000到大于4,000,000。優(yōu)選的丙烯酸聚合物具有范圍從100,000到大于4,000,000的分子量，更優(yōu)選的是具有范圍從750,000到大于4,000,000的分子量的那些。特別優(yōu)選的是具有分子量1,250,000和4,000,000的丙烯酸聚合物。具有這些各種分子量的丙烯酸聚合物可以從Aldrich Chemical Company獲得。丙烯酸聚合物可以具有陰離子電荷。優(yōu)選的丙烯酸聚合物是僅具有微弱的陰離子電荷或不具有電荷的那些聚合物或其衍生物，最優(yōu)選的是無電荷的那些聚合物或其衍生物。
當(dāng)使用的聚合物是聚酰胺時，最優(yōu)選的聚酰胺是聚乙烯吡咯烷酮。優(yōu)選的聚乙烯吡咯烷酮是具有范圍從5,000到400,000的分子量的那些，但更優(yōu)選的是具有范圍從300,000到400,000的分子量的那些。優(yōu)選的是那些具有較高分子量的聚合物。
所述穩(wěn)定化配方也含有作為第二種組分的C2-C6多羥基醇。該C2-C6多羥基醇與以上描述的聚合物協(xié)同地發(fā)生作用，以穩(wěn)定液態(tài)酶組合物中的酶。該C2-C6多羥基醇最好選自二醇和三羥基醇。更優(yōu)選地，C2-C6多羥基醇是甘油、山梨醇、丙二醇、丁二醇、己二醇或乙二醇。最優(yōu)選的C2-C6多元醇是甘油。
所述穩(wěn)定化配方含有足夠量的C2-C6多元醇，與聚合物一起，以穩(wěn)定化在液態(tài)酶組合物中的至少一種酶。優(yōu)選地，C2-C6多元醇的使用量是穩(wěn)定化配方中總重量的約0.50到60％，更優(yōu)選地，是重量的約5到50％，更加優(yōu)選地，是在10到30％之間。最優(yōu)選地，穩(wěn)定化配方或酶組合物中C2-C6多羥基醇與聚合物的組合量使其具有協(xié)同穩(wěn)定化作用。
本發(fā)明的配方是以水為基質(zhì)的或者是含水的，水的含量足以使得聚合物與配方相混溶且不發(fā)生分離。一般來說，C2-C6多羥基醇是水溶性的，但必需存在足夠量的水，以使配方形成單相。如上所述，該配方不必是清澈的溶液，優(yōu)選地是具有明顯均質(zhì)特征的乳濁液。水基質(zhì)配方可以包含水以外的溶劑。
盡管可以通過以任何順序混合各組分來制備本發(fā)明的穩(wěn)定化配方，但優(yōu)選地是通過將所需量的聚合物加入到C2-C6多元醇/水混合物中來制備所述配方。C2-C6多元醇/水混合物可用本領(lǐng)域公知的方法制備。例如，該混合物可以通過將所需的多元醇與合適量的水簡單混合或者稀釋預(yù)先制備的混合物來制備。
優(yōu)選的C2-C6多羥基醇與水的混合物可以含有足以與上述聚合物一道穩(wěn)定化(優(yōu)選是協(xié)同穩(wěn)定化)液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的任何百分比的C2-C6醇。優(yōu)選地，所述混合物含有1-95％(重量)的多羥基醇或其水溶性聚合物；更優(yōu)選地含有10-50％(重量)；最優(yōu)選地是含有30-50％(重量)。當(dāng)多羥基醇是甘油時，該混合物優(yōu)選地是50％(重量)甘油/水混合物。本申請人沒有受特定理論的束縛，認(rèn)為，混合物的作用是潤濕用于本發(fā)明的聚合物和混合物中的C2-C6多羥基醇，從而協(xié)同地穩(wěn)定化酶。
為了足以穩(wěn)定化按照本發(fā)明的液態(tài)酶組合物中的酶，所述酶在25℃下30天后應(yīng)具有至少90％的活性。下面的實(shí)施例說明在50℃下30天后各種酶的優(yōu)選的協(xié)同穩(wěn)定化作用。
本文描述的穩(wěn)定化配方可與多種酶和工業(yè)方法或商業(yè)產(chǎn)品一起使用?？膳c這一穩(wěn)定化配方一起使用的酶、工業(yè)方法或商業(yè)產(chǎn)品包括但不限于以上討論的那些。
穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的穩(wěn)定化配方的使用形成了本發(fā)明的第二個實(shí)施方案，即一種穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物。這樣本發(fā)明也涉及到穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物，該組合物包括至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物；C2-C6多羥基醇；水和至少一種酶。該聚合物和C2-C6多羥基醇以有效穩(wěn)定化(最好是協(xié)同穩(wěn)定化)包含在液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的組合量存在。按照本發(fā)明的優(yōu)選的組合物能夠比數(shù)量上相當(dāng)?shù)暮邢嗤酆衔锏暮旌衔锉憩F(xiàn)出更大的粘度。
有關(guān)存在于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物中的聚合物、C2-C6多羥基醇和水的期望的和優(yōu)選的實(shí)施方案與以上有關(guān)本發(fā)明的穩(wěn)定化配方中討論的那些相同。
與穩(wěn)定化配方一樣，本發(fā)明的液態(tài)酶組合物可以施用于多種酶。這些酶包括(但不限于)在此之前討論過的酶類和特定的酶?？梢允褂玫拿甘堑米詣游?、植物、真菌、細(xì)菌和合成的酶。用于這一系統(tǒng)的優(yōu)選的可水分散的酶是廣泛用于洗衣去污劑和奶酪制造工業(yè)的蛋白酶，包括酸性、堿性和中性蛋白酶；用于例如玉米漿工業(yè)的淀粉酶，包括酸性、堿性和中性淀粉酶；用于開發(fā)奶酪風(fēng)味和用于紙漿、紙以及皮革制作工業(yè)的脂酶；纖維素酶和木聚糖酶(Xylase)。
基于所期望的用途，通常將酶以濃縮液態(tài)酶組合物的形式包裝和銷售，使用前再進(jìn)行稀釋。也可將酶以粉末或干燥的形式提供。濃縮酶稀釋后的酶的含量隨酶供給的形式而定。一般來說，優(yōu)選的酶的含量可以從濃縮液態(tài)酶組合物重量的0.05％到40％，更優(yōu)選地是0.5％到25％，最優(yōu)選地是10％到20％。本發(fā)明的穩(wěn)定化配方是特別為了用于濃縮液態(tài)酶組合物中以及為了使用已稀釋過的組合物中而設(shè)計的。需要用來穩(wěn)定化或者用于協(xié)同穩(wěn)定化濃縮溶液的穩(wěn)定化配方的量可以并很可能不同于用于稀釋過的組合物的量。穩(wěn)定化配方或其組分的合適的量可容易地根據(jù)本領(lǐng)域的普通技術(shù)，采用以下實(shí)施例提出的方法來確定。然而，眾所周知，酶的含量依賴于特定的酶的活性和所期望的最終用途。
依據(jù)所包含的酶和預(yù)期的用途，最終穩(wěn)定化了的液態(tài)酶組合物的pH值最好是從5.0到10.0，但更優(yōu)選的是在7.0左右。最優(yōu)選地，該系統(tǒng)應(yīng)被允許采用其自身pH值，一般在中性左右。眾所周知，可能需用少量酸性或堿性物質(zhì)來調(diào)節(jié)pH值。
該穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物可以是以水為基質(zhì)的或者含水的，并且可以含有與該組合物在特定工業(yè)過程中的使用有關(guān)的溶劑或添加劑。如，該穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物可以含有一些添加劑，如本領(lǐng)域公知的表面活性劑、消沫劑等。就協(xié)同穩(wěn)定化作用來說，這些添加劑可以以不干擾液態(tài)酶組合物的協(xié)同穩(wěn)定化作用的量加入。本領(lǐng)域技術(shù)人員很容易確定這一用量。有利地是，當(dāng)使用本發(fā)明的穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物時，穩(wěn)定化制劑也可用作工業(yè)過程水中酶的分散助劑。
本發(fā)明也涉及制備穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的方法，該方法包括將至少一種酶與本發(fā)明的穩(wěn)定化配方組合的步驟。本發(fā)明進(jìn)一步涉及使用穩(wěn)定化配方穩(wěn)定液態(tài)酶組合物的方法，該方法包括將液態(tài)酶組合物與穩(wěn)定化配方相組合的步驟。用于所述方法的例證性的和優(yōu)選的組分以及這些組分的用量與以上討論的相同。
普通技術(shù)人員會理解，可以以任意順序或者甚至同時將用于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物配方的組分或者穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的各組分相組合。然而，最好使用下列順序(a)將C2-C6多羥基醇與水混合，(b)將至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物加入到步驟(a)制備的混合物中；和(c)將含有至少一種酶的液態(tài)酶組合物加入到步驟(a)和步驟(b)形成的混合物中。所述聚合物和C2-C6多羥基醇最好以協(xié)同有效地穩(wěn)定化所形成的液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的組合量存在。
制備穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物的另一種方法包括以下步驟(a)將C2-C6多羥基醇與水混合，(b)將至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物加入到步驟(a)中制備的混合物中；和(c)將步驟(a)和(b)形成的制劑與含有至少一種酶的液態(tài)酶組合物組合。該聚合物和C2-C6多羥基醇優(yōu)選地以協(xié)同有效地穩(wěn)定化至少一種液態(tài)酶組合物中的酶的組合量存在。
在按照本發(fā)明的方法中，在步驟(b)加入的聚合物可以單獨(dú)地、或以一種水分散體或一種溶液(聚合物溶解在水或合適的有機(jī)溶劑中)加入。當(dāng)穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物中包含其它添加劑時，這些添加劑可以在任何時候加入，但優(yōu)選地是在步驟(c)前加入或者在酶加入之后以一個單獨(dú)的步驟加入。
給出下列實(shí)施例的目的是為了說明本發(fā)明。然而，需說明的是本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例中提出的特定條件或細(xì)節(jié)。
實(shí)施例1通過試驗(yàn)甘油(稱為化合物A)、分子量為250,000的聚(羧甲基纖維素)醚(CMC)(稱為化合物B)或分子量為360,000的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)(稱為化合物B′)說明協(xié)同作用。如表1和2所示，通過在一定濃度范圍內(nèi)變化化合物A對化合物B或B′的比率和試驗(yàn)各種類型的酶在50℃下30天酶活性的提高的穩(wěn)定化作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將可檢測到90％原始酶活性的每一化合物所需的濃度作為終點(diǎn)。濃度是用包括加入的酶和其中的水在內(nèi)的最終組合物中化合物的重量百分?jǐn)?shù)來表示。將水加入到化合物A、甘油中以形成甘油-水混合物。然后將含有化合物A和化合物B或B′的組合物的終點(diǎn)與單獨(dú)的化合物A以及單獨(dú)的化合物B或B′的終點(diǎn)相比較。
用Kull，F(xiàn).C，Eisman，P.C.，Sylwestrowicz，H.O.，andMayer，R.L.，Applied Microbiology 9538-541(1961)描述的使用由下式確定的比率的方法來確定協(xié)同作用QAQa+QBQb]]>其中，Qa＝單獨(dú)作用產(chǎn)生終點(diǎn)的化合物A的含水混合物的百分比(重量)。
Qb＝單獨(dú)作用產(chǎn)生終點(diǎn)的化合物B的含水混合物的百分比(重量)。
QA＝產(chǎn)生終點(diǎn)的化合物A對化合物B的含水混合物的百分比(重量)。
QB＝產(chǎn)生終點(diǎn)的化合物B對化合物A的含水混合物的百分比(重量)。當(dāng)QA/Qa和QB/Qb之和大于1時，表明有拮抗作用。如果該和等于1，表明為加合作用。如果該和小于1，說明為協(xié)同作用。
用于說明本發(fā)明的化合物的協(xié)同作用的方法是一種廣泛使用和被接受的方法。Kull等的文章中給出了更詳細(xì)的內(nèi)容。美國專利No.3,231,509載有這一方法的更詳細(xì)的內(nèi)容，其內(nèi)容引入本文作為參考。
表1和表2所示的所獲得的結(jié)果說明了HT-Proteolytic L-175酶(一種由Solvay Enzymes，Inc.出售的堿性蛋白酶)的提高的穩(wěn)定化作用。采用Kull等描述的方法，計算所有包含甘油(化合物A)和CMC(化合物B)的組合物的QA/Qa＋QB/Qb之和。下文給出了針對一些終點(diǎn)的計算實(shí)例，這一實(shí)例中具有明顯的協(xié)同作用。如表1和計算實(shí)例所示，這些終點(diǎn)值分別是0.58，0.67，0.67和0.67，表明存在協(xié)同作用。類似地，計算所有含有甘油(化合物A)和PVP(化合物B′)的組合物的QA/Qa＋QB′/Qb′之和。如表1和計算實(shí)例所示，這些終點(diǎn)分別是0.85，0.95，0.65，0.85，再次表明存在協(xié)同作用。
表1化合物A(％重量)6030201050化合物B(％重量)6 + + + + ++*3 + + + +*+*-2 + + +*- --1 + +*- - --0 +*- - - --(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)
(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性(4)化合物A＝甘油(5)化合物B＝CMC計算QaQbQAQBQA/Qa＋QB/Qb(％)606 5 3 5/60＋3/6＝0.58103 10/60＋3/6＝0.67202 20/60＋2/6＝0.67301 30/60＋1/6＝0.67表2化合物A(％重量)50302010 5 0化合物B′(％重量)40+ + + + + +*30+ + + +*+*-20+ + + - - -10+ +*+*- - -5 + - - - - -0 +*- -- - -(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性
(4)化合物A＝甘油(5)化合物B′＝PVP計算QaQb′QAQB′QA/Qa＋QB′/Qb′(％)5040 5 30 5/50＋30/40＝0.851030 10/50＋30/40＝0.952010 20/50＋10/40＝0.653010 30/50＋10/40＝0.85實(shí)施例2用另一種酶，Diazyme L-200(一種Solvay Enzymes，Inc.出售的葡糖淀粉酶)檢測實(shí)施例1的本發(fā)明的穩(wěn)定化配方。表3和4所示的結(jié)果也顯示了對這種酶的穩(wěn)定的提高。計算所有含有甘油(化合物A)和CMC(化合物B)的組合物的QA/Qa＋QB/Qb之和。示出了針對這一實(shí)施例中協(xié)同作用明顯的某些終點(diǎn)的計算實(shí)例。如表3和計算實(shí)例所示，這些終點(diǎn)值分別為0.59，0.67，0.67和0.84，表明存在協(xié)同作用。類似地，計算所有包含甘油(化合物A)和PVP(化合物B′)的組合物的QA/Qa＋QB′/Qb′之和。如表4和計算實(shí)例所示，這些終點(diǎn)值分別為0.77，0.53，0.73和0.77，表明存在協(xié)同作用。
表3化合物A(％重量)60 30 20 10 50化合物B(％重量)6 ++++++3 ++++*+*-2 ++*+*---1 +-----0 +*-----(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性(4)化合物A＝甘油(5)化合物B＝CMC計算QaQbQAQBQA/Qa＋QB/Qb(％) 606 5 3 5/60＋3/6＝0.59103 10/60＋3/6＝0.67202 20/60＋2/6＝0.67302 30/60＋2/6＝0.84
表4化合物A(％重量)50 30 20 10 50化合物B′(％重量)30 ++++++*20 +++++*-10 +++*+*--5++*----0+*-----(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性(4)化合物A＝甘油(5)化合物B′＝PVP計算QaQb′QAQB′QA/Qa＋QB′/Qb′(％)5030 5 20 5/50＋20/30＝0.771010 10/50＋10/30＝0.532010 20/50＋10/30＝0.73305 30/50＋5/30＝0.77實(shí)施例3用本發(fā)明的實(shí)施例1中的穩(wěn)定化配方檢測具有酯酶活性的酶。表5和6給出了使用酶Lipolase(一種Novo Nordisk Bioindustries，Inc.出售的脂酶)獲得的結(jié)果，結(jié)果表明了這一酶的提高的穩(wěn)定化作用。計算所有含有甘油水溶液(化合物A)和CMC(化合物B)的組合物的QA/Qa＋QB/Qb之和。示出了在這一實(shí)施例中協(xié)同作用明顯的某些終點(diǎn)的計算實(shí)例。如表5和計算實(shí)例所示，這些終點(diǎn)值分別為0.43，0.37，0.57和0.77，表明存在協(xié)同作用。類似地，計算所有含有甘油(化合物A)和PVP(化合物B′)的組合物的QA/Qa＋QB′/Qb′之和。如表6和計算實(shí)例所示，這些終點(diǎn)值分別為0.60，0.70，0.65和0.85，表明存在協(xié)同作用。
表5化合物A(％重量)50 30 20 10 50化合物B(％重量)6 ++++++*3 +++++-2 +++++*-1 ++*+*+*--0 +*-----(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性(4)化合物A＝甘油(5)化合物B＝CMC計算
QaQbQAQBQA/Qa＋QB/Qb(％)5065 2 5/50＋2/6＝0.4310 1 10/50＋1/6＝0.3720 1 20/50＋1/6＝0.5630 1 30/50＋1/6＝0.76表6化合物A(％重量)50 30 20 10 50化合物B′(％重量)30 ++++++*20 ++++++10 ++++*+*-5++*+*---0+*-----(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性(4)化合物A＝甘油(5)化合物B′＝PVP計算QaQb′QA QB′QA/Qa＋QB′/Qb′(％)5020 510 5/50＋10/20＝0.6010 10 10/50＋10/20＝0.70
205 20/50＋5/20＝0.65305 30/50＋5/20＝0.85實(shí)施例4選用半纖維素酶Pulpzyme HB(一種Novo Nordisk Bioindustr-ials，Inc.出售的木聚糖酶)進(jìn)行如實(shí)施例1的提高的穩(wěn)定性配方的試驗(yàn)。下面獲得的這一實(shí)施例的結(jié)果示于表7和8。計算含有甘油(化合物A)和CMC(化合物B)的所有組合物的QA/Qa＋QB/Qb之和。示出了這一實(shí)施例中協(xié)同作用明顯的那些終點(diǎn)的計算實(shí)例。如表7和計算實(shí)例所示，這些終點(diǎn)值分別為0.43，0.53，0.57和0.77，表明存在協(xié)同作用。類似地，計算所有含有甘油(化合物A)和PVP(化合物B′)的組合物的QA/Qa＋QB/Qb之和。終點(diǎn)值分別為0.35，0.45，0.65和0.85，表明存在協(xié)同作用。
表7化合物A(％重量)50 30 20 10 50化合物B(％重量)6 ++++++*3 +++++-2 ++++*+*-1 ++*+*---0 +*-----(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性(4)化合物A＝甘油(5)化合物B＝CMC計算QaQbQAQBQA/Qa＋QB/Qb(％)506 5 2 5/50＋2/6＝0.43102 10/50＋2/6＝0.53201 20/50＋1/6＝0.57301 30/50＋1/6＝0.77表8化合物A(％重量)50 30 20 105 0化合物B′(％重量)40 ++++++*30 +++++-20 +++++-10 ++*+*+*+*-5 +-----0 +*-----(1)(*)＝50℃下30天后≥90％酶活性的終點(diǎn)(2)(+)＝50℃下30天后≥90％酶活性(3)(-)＝50℃下30天后保留了＜90％酶活性(4)化合物A＝甘油
(5)化合物B′＝PVP計算QaQb′QAQB′QA/Qa＋QB′/Qb′(％)5040 5 10 5/50＋10/40＝0.351010 10/50＋10/40＝0.452010 20/50＋10/40＝0.653010 30/50＋10/40＝0.8權(quán)利要求
1.一種用于穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的配方，該配方包含(a)至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇，和(c)水，其中組分(a)和(b)以協(xié)同有效地穩(wěn)定化至少一種包含在液態(tài)酶組合物中的酶的組合量存在。
2.權(quán)利要求1的配方，其中所說的聚合物是選自聚(羧甲基纖維素)醚、聚(羥丙基甲基纖維素)醚、聚(羥乙基甲基纖維素)醚、聚(羥丁基甲基纖維素)醚、聚(羥丙基纖維素)醚和聚(乙基羥乙基纖維素)醚的聚(纖維素)醚。
3.權(quán)利要求1的配方，其中，所說的C2-C6多羥基醇是甘油、山梨醇、丙二醇、丁二醇、己二醇或乙二醇，且所說的組分(b)和(c)包含在1-95％(重量)的所說C2-C6多羥基醇和其余水的混合物中。
4.權(quán)利要求1的配方，其中，所說的聚合物是選自聚(羧甲基纖維素)醚的聚(纖維素)醚，且所說的C2-C6多羥基醇是甘油。
5.權(quán)利要求1的配方，其中所說的聚合物是選自聚乙烯吡咯烷酮的聚酰胺，且所說的C2-C6多羥基醇是甘油。
6.一種穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物，該組合物包括(a)至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇混合物，(c)水，和(d)至少一種酶，其中組分(a)和(b)以協(xié)同有效地穩(wěn)定化所說至少一種液態(tài)酶組合物中的酶的組合量存在。
7.權(quán)利要求6的組合物，其中所說的聚合物是選自聚(羧甲基纖維素)醚、聚(羥丙基甲基纖維素)醚、聚(羥乙基甲基纖維素)醚、聚(羥丁基甲基纖維素)醚、聚(羥丙基纖維素)醚和聚(乙基羥乙基纖維素)醚的聚(纖維素)醚。
8.權(quán)利要求6的組合物，其中所說的C2-C6多羥基醇是甘油、山梨醇、丙二醇、丁二醇、己二醇或乙二醇；所說的組分(b)和(c)包含在1-95％(重量)的所說C2-C6多羥基醇和其余水的混合物中；所說的酶選自蛋白酶、淀粉酶、脂酶、纖維素酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶(Xylase)。
9.權(quán)利要求6的組合物，其中所說的聚合物是選自聚(羧甲基纖維素)醚的聚(纖維素)醚，且所說的C2-C6多羥基醇是甘油。
10.權(quán)利要求6的組合物，其中所說的聚合物是選自聚乙烯吡咯烷酮的聚酰胺，且所說的C2-C6多羥基醇是甘油。
11.權(quán)利要求6的組合物，其中所說的組合物是乳濁劑。
12.一種穩(wěn)定化的液態(tài)酶組合物，該組合物包括(a)至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇混合物，(c)水，和(d)至少一種酶，其中組分(a)和(b)以有效地穩(wěn)定所說的液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的量存在。
13.一種制備液態(tài)穩(wěn)定化的酶組合物的方法，該方法包括將至少一種酶和包含以下組分的配方組合(a)至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇，和(c)水，其中，組分(a)和(b)以協(xié)同有效地穩(wěn)定化所說的組合物中的至少一種酶的組合量存在。
14.權(quán)利要求13的方法，該方法進(jìn)一步包括，在所說組合步驟之前的將所說C2-C6多羥基醇和所說水混合，和將選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物的聚酰胺的聚合物加入到所說C2-C6多羥基醇和水的混合物中的步驟。
15.權(quán)利要求13的方法，其中所說的C2-C6多羥基醇是甘油、山梨醇、丙二醇、丁二醇、己二醇或乙二醇；所說的混合物是1-95％(重量)的所說C2-C6多羥基醇和其余水的混合物；所說的至少一種酶選自蛋白酶、淀粉酶、脂酶、纖維素酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶(Xylase)。
16.權(quán)利要求13的方法，其中所說的聚合物是選自聚(羧甲基纖維素)醚的聚(纖維素)醚，且所說的C2-C6多羥基醇是甘油。
17.權(quán)利要求13的方法，其中所說的聚合物是選自聚乙烯吡咯烷酮的聚酰胺，且所說的C2-C6多羥基醇是甘油。
18.一種使用包含下列組分的配方穩(wěn)定化液態(tài)酶組合物的方法，該配方包括(a)至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物和聚酰胺的聚合物，(b)一種C2-C6多羥基醇，和(c)水，其中，組分(a)和(b)以協(xié)同有效地穩(wěn)定包含在液態(tài)酶組合物中的至少一種酶的組合量存在。該方法包括將含有至少一種酶的液態(tài)酶組合物與所說配方組合的步驟。
19.權(quán)利要求18的方法，其中所說的聚合物是選自聚(羧甲基纖維素)醚的聚(纖維素)醚，所說的C2-C6多羥基醇是甘油，且所說的至少一種酶選自蛋白酶、淀粉酶、脂酶、纖維素酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶(Xylase)。
20.權(quán)利要求18的方法，其中所說的聚合物是選自聚乙烯吡咯烷酮的聚酰胺，所說的C2-C6多羥基醇是甘油，且所說的至少一種酶選自蛋白酶、淀粉酶、脂酶、纖維素酶、甘露聚糖酶和水聚糖酶(Xylase)。
全文摘要
一種可提高液態(tài)酶組合物的耐貯性并可用作工業(yè)過程水中分散助劑的穩(wěn)定化配方。該穩(wěn)定化配方含有至少一種選自聚(纖維素)醚、丙烯酸聚合物、聚酰胺的聚合物，一種C
文檔編號C11D3/386GK1128543SQ94193012
公開日1996年8月7日 申請日期1994年6月6日 優(yōu)先權(quán)日1993年6月7日
發(fā)明者珀西·A·雅克 申請人:巴科曼實(shí)驗(yàn)室國際公司