包含人參皂苷Rg1的皮膚外用劑組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種包含人參皂苷Rg1的皮膚外用劑組合物，且上述人參皂苷Rg1能夠抑制牛皮癬素。本發(fā)明的皮膚外用劑組合物能夠用于預(yù)防及減輕皮膚疾病或皮膚保濕目的。其中，上述皮膚疾病包括特異性皮炎或牛皮癬。本發(fā)明的皮膚外用劑組合物，能夠阻止牛皮癬素所誘發(fā)的皮膚角質(zhì)形成異?，F(xiàn)象，預(yù)防及減輕皮膚疾病，提升皮膚的水分含量。
【專利說(shuō)明】
包含人參皂苷Rg1的皮膚外用劑組合物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及一種包含人參皂苷Rgl的皮膚外用劑組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 每個(gè)人都希望擁有嬰兒般晶瑩靚麗的皮膚，但皮膚在暴露于各種各樣的外部環(huán)境 以及年齡增長(zhǎng)的過(guò)程中，會(huì)逐漸失去彈性并受損。皮膚是人體中直接與外部環(huán)境接觸的第 一道屏障，需要始終直接承受外部環(huán)境所帶來(lái)的刺激，因此非常微小的刺激也有可能會(huì)導(dǎo) 致皮膚的敏感反應(yīng)和變化。這種皮膚的變化會(huì)導(dǎo)致與平時(shí)不同的物質(zhì)生成，且當(dāng)階段性及 持續(xù)性地暴露在刺激環(huán)境中時(shí)，甚至有可能導(dǎo)致不可逆的損傷。
[0003] 近來(lái)，人們正在積極開(kāi)展很多關(guān)于皮膚內(nèi)的一種抗菌肽物質(zhì)即牛皮癬素的研究。 尤其是在人們發(fā)現(xiàn)牛皮癬素除了目前已知的抗菌作用之外，還有可能誘發(fā)皮膚角質(zhì)細(xì)胞分 化異常并由此導(dǎo)致皮膚屏障受損的作用之后，牛皮癬素(psoriasin)被認(rèn)為是與皮膚疾病 直接相關(guān)的重要物質(zhì)。根據(jù)實(shí)際的一項(xiàng)研究結(jié)果（Regine Glaser，The Journal of investigative dermatology(2009)，ν· 129no · 3，p· 641~649)可以得知，在代表性的皮膚 疾病即特異性皮炎或牛皮癬患者的表皮中，能夠檢測(cè)出極高濃度的牛皮癬素。這種牛皮癬 素濃度過(guò)高的皮膚，會(huì)呈現(xiàn)出結(jié)構(gòu)不致密、稀疏受損的形態(tài)，同時(shí)還會(huì)出現(xiàn)表皮厚度異常增 厚的現(xiàn)象。
[0004] 此外，本發(fā)明人通過(guò)有關(guān)牛皮癬素的持續(xù)性研究發(fā)現(xiàn)，在施加如紫外線、葡萄球 菌、視黃酸等外部刺激時(shí)，也會(huì)導(dǎo)致牛皮癬素濃度的提升。此外還可以確認(rèn)牛皮癬素會(huì)表達(dá) 到表皮細(xì)胞外，從而對(duì)正常表皮結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)中的角蛋白1或角蛋白10的表達(dá)造成抑制作用， 同時(shí)對(duì)引起非正常表皮分化及增殖的蛋白質(zhì)即角蛋白6或角蛋白16的生成造成促進(jìn)作用。 因此通過(guò)有效抑制牛皮癬素，可以得到改善皮膚特性的效果。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0006] 專利文獻(xiàn)
[0007] (專利文獻(xiàn)1)包含人參皂苷Rg3的皮膚外用劑組合物(大韓民國(guó)公開(kāi)專利10-2014-0126892)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種包含人參皂苷Rgl的皮膚外用劑組合物，從而對(duì)存在 于皮膚內(nèi)的牛皮癬素作用進(jìn)行抑制。
[0009] 本發(fā)明的另一目的在于，通過(guò)上述牛皮癬作用的抑制效果，預(yù)防并減輕特異性皮 炎或牛皮癬等皮膚疾病，并提升皮膚的保濕力和恢復(fù)力。
[0010] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種皮膚外用劑組合物，其有效成分中包含人參 皂苷Rgl，且上述人參皂苷Rgl能夠抑制牛皮癬素。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例，上述人參皂苷Rgl的結(jié)構(gòu)如下述化學(xué)式1所示：
[0012] 〈化學(xué)式1>
[0013]
[0014] 根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例，上述人參皂苷Rgl的含量為組合物整體重量的0.001~5重 量％。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例，上述組合物包含皮膚科用組合物、清洗劑組合物以及化妝品 組合物中的一種以上。
[0016] 本發(fā)明的組合物能夠用于預(yù)防及減輕皮膚疾病或皮膚保濕目的。此時(shí)，上述皮膚 疾病包括特異性皮炎或牛皮癬。
[0017] 本發(fā)明的包含人參皂苷Rgl的皮膚外用劑組合物，能夠?qū)Υ嬖谟谄つw內(nèi)的牛皮癬 素作用進(jìn)行抑制。
[0018] 因此，本發(fā)明的皮膚外用劑組合物能夠抑制因?yàn)榕Ｆぐ_素而誘發(fā)的皮膚角質(zhì)細(xì)胞 異常現(xiàn)象，恢復(fù)已受損的皮膚屏障，預(yù)防并減輕皮膚疾病，同時(shí)提升皮膚的保濕力和恢復(fù) 力。
【附圖說(shuō)明】
[0019] 圖1是顯示在紫外線B、葡萄球菌、視黃酸等外部刺激下牛皮癬素的mRNA表達(dá)量的 圖表。
[0020] 圖2a是顯示在紫外線A及紫外線B外部刺激下角蛋白1以及角蛋白10的mRNA表達(dá)量 的圖表。
[0021 ]圖2b是顯示在葡萄球菌外部刺激下角蛋白1以及角蛋白10的mRNA表達(dá)量的圖表。 [0022]圖2c是顯示在視黃酸外部刺激下角蛋白1以及角蛋白10的mRNA表達(dá)量的圖表。 [0023]圖3a是顯不在牛皮癖素作用下角蛋白1的mRNA表達(dá)量的圖表以及顯不蛋白質(zhì)表達(dá) 量的蛋白質(zhì)印跡結(jié)果。
[0024]圖3b是顯不在牛皮癖素作用下角蛋白10的mRNA表達(dá)量的圖表以及顯不蛋白質(zhì)表 達(dá)量的蛋白質(zhì)印跡結(jié)果。
[0025]圖4是顯示在白細(xì)胞介素-6(IL-6)、人參皂苷Rgl、IL-6+人參皂苷Rgl作用下分別 表達(dá)出的牛皮癬素的mRNA量的圖表。
[0026]圖5a是顯示在牛皮癬素、牛皮癬素+人參皂苷Rgl作用下分別表達(dá)出的角蛋白1的 mRNA量的圖表。
[0027]圖5b是顯示在牛皮癬素、牛皮癬素+人參皂苷Rgl作用下分別表達(dá)出的角蛋白10的 mRNA量的圖表。
[0028] 圖6是人造皮膚在牛皮癬素、牛皮癬素+人參皂苷Rgl作用下分別表達(dá)出的角蛋白1 的觀察照片。
[0029] 圖7是在使用包含或未包含人參皂苷Rgl的皮膚外用劑和使用一般皮膚外用劑的 情況下，皮膚水分含量的對(duì)比圖表。
【具體實(shí)施方式】
[0030] 本發(fā)明人考慮到當(dāng)使用能夠抑制牛皮癬素作用的物質(zhì)制造皮膚外用劑組合物時(shí)， 將不僅能夠預(yù)防并減輕各種皮膚疾病，還能夠進(jìn)一步提升皮膚自身的恢復(fù)力和保濕力，從 而保持更加靚麗的皮膚。因此，通過(guò)對(duì)各種候選物質(zhì)進(jìn)行篩選并經(jīng)過(guò)了多次的失敗和不懈 的努力之后，終于發(fā)現(xiàn)了人參皂苷Rgl能夠?qū)εＦぐ_素作用起到非常良好的抑制效果。
[0031] 上述人參皂苷Rgl是下述化學(xué)式1所示結(jié)構(gòu)的人參萃取物中所包含的皂苷成分中 的一種：
[0032]〈化學(xué)式1>
[0033]
[0034]人參皂苷不僅與750多種其他植物中所包含的皂苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)及藥理效能不同， 其藥性也非常溫和且過(guò)量使用時(shí)也不會(huì)有任何毒性，而且?guī)缀醪粫?huì)導(dǎo)致任何溶血作用的發(fā) 生，因此本發(fā)明的包含人參皂苷Rgl的皮膚外用劑組合物有望能夠被非常安全且有效地使 用。
[0035]上述人參皂苷Rgl能夠從植物中萃取，也可以利用相應(yīng)行業(yè)公知的方法進(jìn)行合成 使用，也可以購(gòu)買商業(yè)市售產(chǎn)品使用。通常能夠從人參進(jìn)行萃取和采集，此時(shí)所使用的人參 種類并無(wú)特殊限制，使用鮮人參、紅參、白參、太極參、尾參等為宜。此外，在上述萃取過(guò)程 中，能夠使用人參的莖、根、葉、花、果實(shí)等人參的所有部分，并不限定于某個(gè)特定部分的萃 取物。
[0036]本發(fā)明中人參皂苷Rgl的含量比例為，皮膚外用劑組合物整體重量的0.001~5重 量％。
[0037]如上所述的包含人參皂苷Rgl的皮膚外用劑組合物通過(guò)對(duì)存在于皮膚內(nèi)的抗菌肽 中的一種即牛皮癬素進(jìn)行抑制，有效防止因?yàn)樯鲜雠Ｆぐ_素而引發(fā)的皮膚角質(zhì)細(xì)胞形成異 ?，F(xiàn)象，并借此預(yù)防或緩解皮膚疾病，提升皮膚中的水分含量。
[0038]此時(shí)，上述皮膚外用劑組合物還可以包含類黃酮物質(zhì)(flavonoid)。
[0039] 本發(fā)明的組合物，可為皮膚科用組合物、清洗劑組合物以及化妝品組合物中的一 種以上為宜。此外，本發(fā)明的組合物可包含人參皂苷Rgl或包含人參皂苷Rgl的萃取物以及 其他添加劑等，還包含允許在皮膚科和/或化妝品中使用的載體為宜。
[0040] 在適用本發(fā)明的另一實(shí)施例中，人參皂苷Rgl或包含人參皂苷Rgl的萃取物，還可 以轉(zhuǎn)換為食品補(bǔ)充劑組合物等制劑。
[0041] 對(duì)于適用本發(fā)明的組合物的劑型并無(wú)特別限制，可以適用包含化妝品學(xué)或皮膚科 學(xué)所允許使用的媒介或基材的劑型。這包含適合于局部使用的所有劑型，例如溶液、凝膠、 固體、糊狀無(wú)水生成物、將油狀物分散到水狀物中所得到的乳劑、懸浮液、微型乳劑、微型膠 囊、微型顆?；螂x子型（脂質(zhì)體）以及非離子型小囊分散劑形態(tài)、或面霜、潤(rùn)膚露、乳液、粉、 軟膏、噴劑或遮瑕棒等形態(tài)。而且，還可以采取泡沫(foam)形態(tài)或包含壓縮促進(jìn)劑的氣霧劑 (aerosol)組合物形態(tài)。
[0042] 這些組合物可按照對(duì)應(yīng)領(lǐng)域的常規(guī)方法進(jìn)行制造。更詳細(xì)地說(shuō)，可以采取軟膏、面 霜、凝膠、藥膏(sal ves )、精華液(serums )、乳劑、水溶液、粉末、棒狀等形態(tài)。
[0043] 此外，本發(fā)明的組合物可以包括脂肪物質(zhì)、有機(jī)溶媒、溶解劑、濃縮劑、膠凝劑、軟 化劑、抗氧化劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、發(fā)泡劑(foaming agent )、芳香劑、表面活性劑、水、離子型 或非離子型乳化劑、填充劑、金屬離子封鎖劑(metal ion blocking agent)例如乙二胺四 乙酸（EDTA;ethylenediaminetetraacetic acid)、螯合劑（chelating agent)、保存劑、維 生素、阻滯劑(blocker)、濕潤(rùn)劑、所需油分、染料、顏料、親水性或親油性活性劑、脂質(zhì)小囊 或化妝品中經(jīng)常使用的任意其他成分等在化妝品學(xué)或皮膚科學(xué)領(lǐng)域常規(guī)使用的輔助劑。上 述輔助劑的添加量為化妝品學(xué)或皮膚科學(xué)領(lǐng)域常規(guī)使用的量。
[0044] 此外，本發(fā)明的組合物為了提升其皮膚改善效果，還可以包含皮膚吸收促進(jìn)物質(zhì)。
[0045] 下面為了幫助對(duì)本發(fā)明的理解，將對(duì)最具代表性的實(shí)施例等進(jìn)行說(shuō)明。本發(fā)明的 權(quán)利范圍并不限定于此，包含所有等同范圍。
[0046] 在本說(shuō)明書中所使用的所有附圖中，人參皂苷RGl(Ginsenoside Rgl)表示為G_ Rgl、牛皮癬素(psoriasin，S100A7)表示為S100A7、角蛋白l(keratin 1)表示為KRT 1、角蛋 白10(keratin 10)表不為KRT 10、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)表不為 S.aureus、視黃酸(retinoic acid)表示為RA、紫外線A表示為UVA、紫外線B顯示為UVB、逆轉(zhuǎn) 錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR)的補(bǔ)正基準(zhǔn)mRNA(control)或蛋白質(zhì)印跡的補(bǔ)正基準(zhǔn)蛋白質(zhì) (control)表不為con。
[0047] 確認(rèn)牛皮癬素是否會(huì)誘發(fā)皮膚角質(zhì)形成異常
[0048] 因?yàn)榭紤]到在特異性皮炎及牛皮癬等皮膚疾病中皮膚內(nèi)的牛皮癬素保持較高濃 度的現(xiàn)象，在實(shí)驗(yàn)例1至3中確認(rèn)了外部刺激是否會(huì)同樣導(dǎo)致一般皮膚內(nèi)牛皮癬濃度的增 加，并觀察了在形成上述牛皮癬素時(shí)所出現(xiàn)的與皮膚角質(zhì)的形成相關(guān)的各種變化。
[0049] 上述外部刺激的類型為，紫外線A或B、葡萄球菌以及視黃酸。
[0050] [實(shí)驗(yàn)例1]在外部刺激下的牛皮癬素表達(dá)量變化確認(rèn)
[0051] 為了對(duì)在外部刺激下的牛皮癬素表達(dá)量的變化進(jìn)行確認(rèn)，首先對(duì)皮膚角質(zhì)細(xì)胞進(jìn) 行培養(yǎng)。作為第一步驟，將從新生兒的表皮中分離出的角質(zhì)形成細(xì)胞以1.25 X 106個(gè)細(xì)胞/ 培養(yǎng)皿的密度接種到直徑為60mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿(cell culture dish)的KGM培養(yǎng)基中。接下 來(lái)利用C02培養(yǎng)箱將上述細(xì)胞培養(yǎng)皿在37°C、5%C02條件下進(jìn)行保管，將角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng) 至80%左右的覆蓋密度（confluency)。
[0052]接下來(lái)，將所培養(yǎng)出的上述角質(zhì)形成細(xì)胞分成三個(gè)實(shí)驗(yàn)組，然后作為外部刺激手 段分別利用紫外線B 25mJ/cm2、葡萄球菌6μg/ml、視黃酸ΙμΜ進(jìn)行處理之后，再進(jìn)行2天的培 養(yǎng)。接下來(lái)，分離出沒(méi)有細(xì)胞的培養(yǎng)液，然后利用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA assay)對(duì)牛皮癬 素的mRNA表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定及定量化。作為補(bǔ)正基準(zhǔn)mRNA，使用持家基因 （housekeeping gene)RPL13A。
[0053]上述測(cè)定結(jié)果如圖1所示。在上述經(jīng)過(guò)外部刺激處理的所有實(shí)驗(yàn)組中，其牛皮癬素 的mRNA表達(dá)量均有所增加。
[0054][實(shí)驗(yàn)例2]確認(rèn)外部刺激是否會(huì)誘發(fā)皮膚角質(zhì)形成異常
[0055] 為了確認(rèn)外部刺激是否會(huì)誘發(fā)皮膚角質(zhì)形成異常，對(duì)表皮分化蛋白質(zhì)中代表性的 角蛋白1和角蛋白10的mRNA以及蛋白質(zhì)表達(dá)量變化進(jìn)行了分析。上述角蛋白1以及角蛋白10 用作角質(zhì)形成的指標(biāo)。
[0056] 對(duì)皮膚角質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的階段與上述實(shí)施例1相同。接下來(lái)，將所培養(yǎng)出的上述 角質(zhì)形成細(xì)胞分成若干個(gè)實(shí)驗(yàn)組，然后作為外部刺激手段分別利用紫外線、葡萄球菌、視黃 酸對(duì)其進(jìn)行處理。具體來(lái)講，在利用紫外線A 10mJ/cm2、紫外線B 20mJ/cm2、葡萄球菌3yg/ ml、葡萄球菌6μg/ml、視黃酸ΙμΜ進(jìn)行處理之后，再進(jìn)行2天的培養(yǎng)。
[0057] 接下來(lái)，進(jìn)行mRNA分析或蛋白質(zhì)分析。詳細(xì)說(shuō)明如下。
[0058] l)mRNA 分析
[0059] 在去除所培養(yǎng)出的上述細(xì)胞的培養(yǎng)基之后，通過(guò)添加 lml的Trizol試劑(Trizol， invitrogen)對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞的mRNA進(jìn)行分離，然后利用紫外線檢測(cè)儀(HEWLLETT PACKARD)在 260nm條件下對(duì)上述膠質(zhì)細(xì)胞的mRNA進(jìn)行定量。接下來(lái)，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR; reverse transcription-polymerase chain reaction)對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞的mRNA中的角蛋白 1 以 及角蛋白1 〇的mRNA表達(dá)量進(jìn)行了確認(rèn)。此時(shí)作為補(bǔ)正基準(zhǔn)mRNA，使用持家基因 RPL13A。
[0060] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2a、圖2b以及圖2c所示。在經(jīng)過(guò)外部刺激處理后的實(shí)驗(yàn)組中，角蛋白 1以及角蛋白10的基因表達(dá)有所減少。
[0061] 2)蛋白質(zhì)分析
[0062] 通過(guò)向所培養(yǎng)出的上述細(xì)胞添加 RIPA緩沖液（Radio-immunoprecipitation assay buffer)，使蛋白質(zhì)溶出。接下來(lái)，利用SDS-PAGE對(duì)上述蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，然后通過(guò)蛋 白質(zhì)印跡(Western blot)對(duì)角蛋白1以及角蛋白10進(jìn)行確認(rèn)及定量化。此時(shí)作為補(bǔ)正基準(zhǔn) 蛋白質(zhì)，使用從持家基因表達(dá)出的甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH;Gly Ceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase)。
[0063] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在經(jīng)過(guò)外部刺激處理之后，角蛋白1以及角蛋白10的蛋白質(zhì)表達(dá)量 呈現(xiàn)出與mRNA表達(dá)量相同的減少現(xiàn)象。
[0064][實(shí)驗(yàn)例3]確認(rèn)牛皮癬素是否會(huì)誘發(fā)皮膚角質(zhì)形成異常
[0065] 綜合上述實(shí)施例1和實(shí)施例2的結(jié)果，為了檢討牛皮癬素是否會(huì)誘發(fā)皮膚角質(zhì)形成 異常，實(shí)施了實(shí)驗(yàn)例3。
[0066] 本實(shí)施例3的實(shí)施過(guò)程與上述實(shí)施例2相同，只是將上述實(shí)施例2中對(duì)所培養(yǎng)的角 質(zhì)形成細(xì)胞進(jìn)行處理的外部刺激，替換成添加〇. 25μg/ml、lμg/ml的牛皮癬素之后再進(jìn)行4 天的培養(yǎng)。
[0067]實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3a以及圖3b所示。在牛皮癬素處理實(shí)驗(yàn)組中，角蛋白1以及角蛋白10 的mRNA以及蛋白質(zhì)表達(dá)量有所減少。
[0068] 人參皂苷Rgl的牛皮癬素抑制效果確認(rèn)
[0069]通過(guò)上述實(shí)施例1至3,已確認(rèn)牛皮癬素是皮膚角質(zhì)形成異常的誘發(fā)物質(zhì)之一。下 面，對(duì)用于確認(rèn)人參皂苷Rgl的牛皮癬素抑制作用的實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明。
[0070] [實(shí)施例1]人參皂苷Rgl的牛皮癬素抑制效果-1
[0071] 對(duì)皮膚角質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的階段與上述實(shí)施例1相同。接下來(lái)，將所培養(yǎng)出的上述 細(xì)胞分成兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組，然后利用lμg/ml的已知的牛皮癬素表達(dá)誘導(dǎo)物質(zhì)即白細(xì)胞介素（IL-6; Interlukine-6)對(duì)其中的一個(gè)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行處理，再同時(shí)利用lyg的IL-6以及l(fā)Oppm的人參 皂苷Rgl對(duì)另一個(gè)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行處理，然后再進(jìn)行2天的培養(yǎng)。其中，上述人參皂苷Rgl是IL-6 所誘發(fā)的牛皮癬素表達(dá)抑制的候選物質(zhì)。
[0072] 在2天之后去除培養(yǎng)基，然后利用與上述實(shí)施例2中的mRNA分析相同的方法對(duì)其進(jìn) 行mRNA分析，然后對(duì)上述兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組中的牛皮癬素的mRNA表達(dá)量差異進(jìn)行了確認(rèn)。
[0073] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4所示。相對(duì)于僅添加 IL-6的實(shí)驗(yàn)組，在同時(shí)利用IL-6以及人參皂苷 Rgl進(jìn)行處理的實(shí)驗(yàn)組中，牛皮癬素的mRNA表達(dá)量有所減少。
[0074][實(shí)施例2]人參皂苷Rgl的牛皮癬素抑制效果_2(體外）
[0075]對(duì)皮膚角質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的階段與上述實(shí)施例1相同。接下來(lái)，將所培養(yǎng)出的上述 細(xì)胞分成兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組，然后利用lμg/ml的牛皮癬素對(duì)其中的一個(gè)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行處理，再同時(shí) 利用lμg/ml的牛皮癬素和lOppm的人參皂苷Rgl對(duì)另一個(gè)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行處理，然后再進(jìn)行4天 的培養(yǎng)。在培養(yǎng)后按照上述實(shí)施例2中的mRNA分析以及蛋白質(zhì)分析方法，對(duì)角蛋白1以及角 蛋白10的mRNA以及蛋白質(zhì)表達(dá)量進(jìn)彳丁確認(rèn)。
[0076]實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5a以及圖5b所示。如上述圖5a以及圖5b所示，在僅利用牛皮癬素進(jìn) 行處理的實(shí)驗(yàn)組中，角蛋白1(KRT 1)以及角蛋白10(KRT 10)的表達(dá)量有所減少，但在同時(shí) 利用人參皂苷Rgl和牛皮癬素進(jìn)行處理的實(shí)驗(yàn)組中，呈現(xiàn)出較高的KRT 1以及KRT 10的mRNA 表達(dá)量。此外，在同時(shí)利用人參皂苷Rgl和牛皮癬素進(jìn)行處理的實(shí)驗(yàn)組中，其KRT 1的mRNA表 達(dá)量水平與未經(jīng)處理的實(shí)驗(yàn)組類似，但KRT 10的mRNA表達(dá)量反而高于未經(jīng)處理的實(shí)驗(yàn)組。 [0077][實(shí)施例3]人參皂苷Rgl的牛皮癬素抑制效果_3(人造皮膚）
[0078]為了對(duì)與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)類似環(huán)境下的效果進(jìn)行確認(rèn)，利用人造皮膚(MaTack公司)進(jìn)行 了實(shí)驗(yàn)。
[0079]利用2μg/ml的牛皮癬素對(duì)其中一個(gè)實(shí)驗(yàn)組的表皮上層部進(jìn)行處理，并利用2μg/ml 的牛皮癬素和lOppm的人參皂苷Rgl對(duì)另一個(gè)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行處理，在1個(gè)星期之內(nèi)每隔2天進(jìn)行 了共計(jì)3次處理。接下來(lái)，利用甲醛溶液對(duì)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行固定，并對(duì)角蛋白1進(jìn)行了免疫染 色處理。
[0080] 經(jīng)染色處理之后的角蛋白1呈現(xiàn)為紅色，其觀察結(jié)果如圖6所示。相對(duì)于未經(jīng)處理 的實(shí)驗(yàn)組，在僅利用牛皮癬素進(jìn)行處理的實(shí)驗(yàn)組中，角蛋白1的表達(dá)量有所減少，且皮膚屏 障崩潰導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)松散。但是在同時(shí)利用牛皮癬素和人參皂苷Rgl進(jìn)行處理的實(shí)驗(yàn)組中， 角蛋白1的表達(dá)量以及皮膚屏障的結(jié)構(gòu)恢復(fù)正常。
[0081] [實(shí)施例4]
[0082] 下面，以上述人參皂苷Rgl的牛皮癬素抑制效果為基礎(chǔ)，制備了如表1所示的本發(fā) 明的組合物。
[0083] 表 1
[0084]
[0085] *比較劑型例及實(shí)施劑型例的數(shù)值表示其含量，單位為重量％。
[0086]制造不包含人參皂苷Rgl的比較劑型例1和以0.1重量％包含人參皂苷Rgl的實(shí)施 劑型例1的皮膚外用劑，以30~49歲的40位女性(4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組10人)為對(duì)象，使其在8個(gè) 星期內(nèi)的每天早晨和晚上將上述皮膚外用劑涂抹在臉部。在實(shí)驗(yàn)前(〇周）、4周后、8周后，分 三次測(cè)定各個(gè)實(shí)驗(yàn)組的皮膚水分含量，上述測(cè)定的平均值對(duì)比結(jié)果如圖7所示。
[0087]在測(cè)定皮膚中的水分含量時(shí)，使用能夠?qū)Π殡S皮膚角質(zhì)層水分(hydrat ion)的介 電常數(shù)(dielectric constant)變化值進(jìn)行測(cè)定的皮膚水分測(cè)試儀(Corneometer)。
[0088]測(cè)定結(jié)果顯示，使用包含人參皂苷Rgl的皮膚外用劑時(shí)的皮膚保濕效果明顯高于 使用未包含人參皂苷Rg 1的皮膚外用劑的情況。
[0089]以上述實(shí)施例為基礎(chǔ)，可以確認(rèn)本發(fā)明的皮膚外用劑組合物有望能夠?qū)μ禺愋云?炎或牛皮癬等皮膚疾病提供皮膚保護(hù)以及恢復(fù)效果。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種皮膚外用劑組合物，其特征在于:有效成分中包含人參皂苷Rgl。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚外用劑組合物，其特征在于： 所述人參皂苷Rgl的結(jié)構(gòu)如下述化學(xué)式1所示： 〈化學(xué)式1>3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的皮膚外用劑組合物，其特征在于： 所述人參皂苷Rgl的含量為所述皮膚外用劑組合物整體重量的0.001~5重量％。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚外用劑組合物，其特征在于： 所述人參皂苷Rgl能夠抑制牛皮癬素的表達(dá)。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚外用劑組合物，其特征在于： 所述皮膚外用劑組合物用于預(yù)防或減輕皮膚疾病。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚外用劑組合物，其特征在于： 所述皮膚外用劑組合物用于皮膚保濕。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的皮膚外用劑組合物，其特征在于： 所述皮膚疾病包含特異性皮炎或牛皮癬。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚外用劑組合物，其特征在于： 所述皮膚外用劑組合物包含皮膚科用組合物、清洗劑組合物以及化妝品組合物中的一 種以上。
【文檔編號(hào)】A61K31/704GK105997842SQ201610195635
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年3月31日
【發(fā)明人】孫義東, 洪勇德, 李成訓(xùn), 裵日弘, 曺恩敬, 樸泌俊
【申請(qǐng)人】愛(ài)茉莉太平洋股份有限公司