Nadph在制備抗血小板凝集藥物中的應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，具體涉及NADPH在制備抗血小板凝集藥物中的應用。
【背景技術(shù)】
[0002]血小板聚集是血栓形成的主要步驟。正常循環(huán)血液中，血小板處于靜息狀態(tài)。當血管壁受損如動脈硬化斑塊破裂暴露血管內(nèi)皮下基質(zhì)，血小板就會通過其表面膜糖蛋白(GP)lb與vorl Willebrand因子(VWF)結(jié)合而黏附于內(nèi)皮下的膠原組織，同時通過其表面的膠原受體GP I a-1I a和GPVI直接與膠原結(jié)合，從而牢固地黏附于內(nèi)皮下膠原組織。黏附的血小板或受到血小板激活劑(如膠原、凝血酶等)作用的血小板會發(fā)生一系列反應，包括花生四烯酸代謝，產(chǎn)生血栓烷A2(TXA2)和釋放出細胞內(nèi)顆粒內(nèi)容物二磷酸腺苷(ADP)，最后導致血小板GP II b-1lia復合物的構(gòu)型改變，形成黏附分子受體，并通過與纖維蛋白原的結(jié)合而使血小板之間相互黏附、聚集成團，在血管破損處形成早期止血血栓。此外通過血小板的釋放產(chǎn)物，可進一步引起血管收縮，刺激白細胞，損傷內(nèi)皮細胞，促進血液凝固，有利于血栓形成。
[0003]抗血小板聚集藥物能預防或者逆轉(zhuǎn)血小板聚集，在抗動脈血栓形成、尤其是手術(shù)和血管支架植入后、冠脈搭橋、心肌梗死以及心肌缺血中應用最為廣泛。根據(jù)血小板發(fā)生聚集的機制，目前抗血小板聚集藥物主要有:(1)抑制血栓燒A2 (thromboxane A2，TXA2)誘導的血小板聚集，以阿司匹林(aspirin)為代表；(2)抑制二磷酸腺苷(adenosine diphosphate，ADP)誘導的血小板聚集，以噻氯匹定(ticlop1-dine)、氯P比格雷(clopidogrel)為代表；(3)血小板糖蛋白II b/III a受體措抗藥，抑制血小板聚集的最終共同途徑，代表藥物為阿昔單抗(abciximab)、替羅非班(tirofiban)、依替巴肽(eptifibatide)。此夕卜，血小板激活因子(PAF)受體措抗劑、凝血酶和凝血因子Xa(FXa)抑制劑，鈣離子(Ca2+)通道拮抗劑、5-HT2受體拮抗劑等均有抑制血小板聚集作用。
[0004]還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(triphosphopyridine nucleotide,NADPH)由葡萄糖經(jīng)過磷酸戊糖途徑(PPP)代謝產(chǎn)生，作為細胞內(nèi)最為重要的電子供體和生物合成的還原劑，可為還原性生物合成提供氫離子。NADPH是谷胱甘肽(GSH)的還原酶的輔酶，可使氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成還原型GSH，維持還原型的GSH的正常含量。GSH是細胞內(nèi)重要的抗氧化劑，可保護一些含巰基的蛋白質(zhì)、脂肪和蛋白酶類免受氧化劑的破壞，特別在維持紅細胞膜的完整性方面起著重要作用。NADPH除了參與膽固醇、脂肪酸、單加氧酶系、類固醇激素等的生物合成，還參與體內(nèi)羥化反應和藥物、毒物及某些激素的生物轉(zhuǎn)化。例如，NADPH可利用解毒細胞的電子供體，通過體內(nèi)代謝減少生物體氧化型化合物，維持其氧化還原的平衡，在氧化防御系統(tǒng)發(fā)揮重要作用。NADPH也可以借助于異檸檬酸穿梭作用進入呼吸鏈產(chǎn)生ATP:由于線粒體內(nèi)膜對物質(zhì)的通透性很低，線粒體外產(chǎn)生的NADPH不能直接進入呼吸鏈被氧化。NADPH上的Η可以在異檸檬酸脫氫酶的作用下被交給NAD+，然后由NAD+進入呼吸鏈產(chǎn)生能量。細胞能量代謝的維持和減少R0S (活性氧簇)對細胞生存，特別對缺血缺氧的組織至關(guān)重要，普遍認為能量代謝障礙和氧化應激是心腦缺血疾病的重要機制，研究表明增加細胞能量代謝能力，降低細胞ROS產(chǎn)生可減輕缺血缺氧引起的細胞損傷。
[0005]目前，尚無NADPH用于血小板凝集治療的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]因此，本發(fā)明提供NADPH在制備抗血小板凝集藥物中的應用。
[0007]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
[0008]本發(fā)明提供NADPH在制備抗血小板凝集藥物中的應用。
[0009]優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述藥物包括藥學上有效量的NADPH和藥學上可接受的載體。
[0010]進一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述載體選自常用的藥用輔料、或者生理鹽水、或者蒸餾水。
[0011 ] 進一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述藥物為NADPH按照常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
[0012]所述藥學上可接受的輔料為:填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括:淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括:淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素納等；潤滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括:甜味劑及各種香精；防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括:PEG6000、PEG4000、蟲蠟等。
[0013]進一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述藥物的給藥方式選自口服給藥、注射給藥、舌下給藥、直腸給藥、經(jīng)皮給藥、噴霧吸入中的至少一種。
[0014]本發(fā)明的技術(shù)方案具有如下優(yōu)點:
[0015]本發(fā)明通過研究發(fā)現(xiàn)，體外給予外源性NADPH以劑量依賴的方式抑制ADP誘導的大鼠血小板聚集；體外給予外源性NADPH以劑量依賴的方式抑制Thrombin誘導的大鼠血小板聚集；體內(nèi)預防性給予NADPH可顯著地抑制ADP誘導的大鼠血小板聚集；體內(nèi)預防性給予NADPH可顯著地抑制Thrombin誘導的大鼠血小板聚集。這表明，NADPH具有抗血小板聚集的作用，可以作為潛在的抗血小板凝集藥物。
【附圖說明】
[0016]為了更清楚地說明本發(fā)明【具體實施方式】或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對【具體實施方式】或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。顯而易見地，下面描述中的附圖是本發(fā)明的一些實施方式，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0017]圖1為本發(fā)明實驗例1中體外給予外源性NADPH對腺苷二磷酸(ADP)誘導的大鼠血小板聚集的影響，其中*表示Ρ〈0.05，**表示Ρ〈0.01 ；
[0018]圖2為本發(fā)明實驗例2中體外給予外源性NADPH對凝血酶(Thrombin)誘導的大鼠血小板聚集的影響，其中*表示P〈0.05，***表示P〈0.001 ；
[0019]圖3為本發(fā)明實驗例3中體內(nèi)預防性給予NADPH對ADP誘導的大鼠血小板聚集的影響，其中**表示P〈0.01 ；
[0020]圖4為本發(fā)明實驗例4中體內(nèi)預防性給予NADPH對Thrombin誘導的大鼠血小板聚集的影響，其中**表示P〈0.01。
【具體實施方式】
[0021]下面將結(jié)合附圖對本發(fā)明的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0022]實施例1NADPH膠囊劑的制備
[0023]本實施例NADPH膠囊劑的組成為:
[0024]NADPH 20g，助懸劑微晶纖維素60g，防腐劑叔丁基_4_羥基苯甲醚0.04g，潤滑劑硬脂酸鎂2g，填充劑乳糖加至200g。
[0025]其制備方法包括以下步驟:
[0026]分別稱取上述處方量的NADPH和各藥用輔料，混合均勻，60目篩過篩3次，裝入膠囊殼，即得。
[0027]實驗例
[0028]實驗例1體外給予外源性NADPH對腺苷二磷酸(ADP)誘導的大鼠血小板聚集的影響
[0029](1)實驗材料
[0030]腺苷二磷酸(ADP)和凝血酶(Thrombin)試劑購自生