一種紅樹莓提取物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及保健食品加工領(lǐng)域，尤其是從紅樹莓中提取得到提取物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 樹莓（raspberry)為薔薇科懸鉤子屬（Rubus L.)的多年生落葉性灌木型果樹，果 實又稱覆盆子、托盤、馬林等，風(fēng)味獨特，在國際上被譽為"黃金水果"。據(jù)分析，樹莓果實含 豐富的有機酸，維生素 A、維生素 C、維生素 B1、維生素 B2、煙酸等多種維生素及人體必需的8 種氨基酸；還有豐富的礦物質(zhì)、黃酮、花青素及揮發(fā)油、酚類、萜類等有效成分；樹莓果實還 含大量的天然SOD(超氧化物歧化酶）、鞣花酸、樹莓酮、水楊酸（天然阿司匹林）、維生素 E等物質(zhì)，具有壯陽、美容、抗癌、抗衰老、降脂、降血壓、預(yù)防心腦血管疾病等功效，是一種極 具生物學(xué)功能和營養(yǎng)價值的天然水果，其抗氧化、抗衰老功能居于各種漿果之首。
[0003] 我國紅樹莓資源豐富，近年來栽培面積不斷擴大；但由于紅樹莓鮮果柔嫩多汁，保 藏時間短，只能季節(jié)性消費，國內(nèi)大量鮮果冷凍后出口，經(jīng)濟附加值低。目前國內(nèi)市場已經(jīng) 開始開發(fā)紅樹莓產(chǎn)品，主要以紅樹莓果酒、紅樹莓飲品為主，同時也進(jìn)行了樹莓多種生物學(xué) 功效的宣傳工作。但是樹莓的生物學(xué)功效并未得到充分的開發(fā)與利用，市場上也很少見以 紅樹莓作為原料開發(fā)的保健型功能產(chǎn)品。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供一種從紅樹莓果實中提取活性物質(zhì)，并進(jìn)行分離純化，得到紅樹莓提 取物的方法。同時，本發(fā)明的應(yīng)用研究表明，所得到的紅樹莓提取物具有良好的降血脂、降 血糖、降血壓、減輕脂肪肝、提高機體免疫力、補腎、固精縮尿、控制體重、調(diào)節(jié)代謝等功能。
[0005] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：
[0006] 1、紅樹莓選果，預(yù)處理，得到紅樹莓鹽制干果實；2、紅樹莓鹽制干果實粉碎，過篩， 得到紅樹莓果實粉；3、紅樹莓果實粉經(jīng)乙醇提取以及后處理，得到紅樹莓粗提物；4、紅樹 莓粗提物用大孔樹脂層析法進(jìn)行分離純化，得到紅樹莓粗提物一純物；5、紅樹莓粗提物一 純物用凝膠層析法進(jìn)行分離純化，冷凍干燥，得到紅樹莓提取物。
[0007] 具體操作如下：
[0008] 1、紅樹莓選果，預(yù)處理，得到紅樹莓鹽制干果實；其中，預(yù)處理包括兩級烘干、食鹽 水浸泡、再次烘干。選取新鮮、成熟度適中的紅樹莓鮮果，去除生果、過熟果，去除雜質(zhì)及果 梗等異物，置于鼓風(fēng)干燥箱中，每層鮮果堆積的厚度在2-5cm，在70-90°C下鼓風(fēng)烘干1-2小 時，至紅樹莓鮮果半干；將溫度調(diào)至50-60°C繼續(xù)鼓風(fēng)烘干，直至紅樹莓鮮果變干，干燥過 程中要適度翻動紅樹莓鮮果，使其干燥均勻，得到紅樹莓干果實；冷卻至室溫，加入一定量 的食鹽水，浸泡兩級烘干后的紅樹莓干果實，室溫保持24小時，待食鹽水被所述的紅樹莓 干果實充分吸入后，將吸入食鹽水的所述的紅樹莓干果實置于60-80°C鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)再次 烘干，再次烘干的過程需要時常翻動吸入食鹽水的所述的紅樹莓干果實，至吸入食鹽水的 所述的紅樹莓干果實接近干燥，取出，冷卻至室溫，晾干，得到紅樹莓鹽制干果實。
[0009] 在紅樹莓鮮果實兩級烘干的過程中，溫度控制至關(guān)重要；前2個小時溫度不能 超過90°C，溫度太高，會導(dǎo)致紅樹莓鮮果實中活性物質(zhì)的喪失；作為優(yōu)選，溫度控制在 75-80°C。2小時后的烘干過程溫度不宜超過60°C，防止紅樹莓鮮果實內(nèi)的活性物質(zhì)遭到破 壞。
[0010] 所述的食鹽水是質(zhì)量百分比濃度為20-40%的食鹽水，每100g兩級烘干后的紅樹 莓干果實加入50mL所述的食鹽水。作為優(yōu)選，所述的食鹽水的質(zhì)量百分比濃度為25-30%。
[0011] 作為優(yōu)選，所述紅樹莓鹽制干果實在鼓風(fēng)再次烘干過程中，溫度保持在65-70Γ， 再次烘干后期，采用室溫陰干的方式，利用余熱使所述紅樹莓鹽制干果實中的水分揮發(fā)掉。
[0012] 紅樹莓干果實進(jìn)行鹽制，有利于增強提取物的應(yīng)用效果，對于提取物在體內(nèi)的吸 收、發(fā)揮作用均具有增強的效果；對比鹽制與未鹽制的紅樹莓果實提取物，果實鹽制后再提 取純化，得到的提取物在補腎、固精縮尿、降血脂、降血糖等方面均顯著優(yōu)于未鹽制處理。
[0013] 食鹽水的濃度對于鹽制效果有很大影響，適當(dāng)?shù)氖雏}水濃度，有利于鹽制效果的 提高，在所述的食鹽水濃度范圍內(nèi)，經(jīng)過鹽制處理的紅樹莓鹽制干果實經(jīng)過后續(xù)工藝加工 處理，得到的紅樹莓提取物具有很好的功效，超出此范圍，雖然也是鹽制，但是獲得的紅樹 莓提取物功效會受到影響。
[0014] 2、紅樹莓鹽制干果實粉碎，過篩，得到紅樹莓果實粉：將所述的已經(jīng)干燥的紅樹莓 鹽制干果實粉碎，過80目篩，過篩后篩上的碎肩繼續(xù)粉碎過篩，保證原料得到充分地利用， 收集篩下的部分得到所述的紅樹莓果實粉。
[0015] 3、將紅樹莓果實粉經(jīng)乙醇提取以及后處理，得到紅樹莓粗提物；后處理為依次進(jìn) 行的一次減壓低溫濃縮、無水乙醇洗滌、低溫靜置、離心去掉沉淀、二次減壓低溫濃縮。
[0016] 采用兩次提取法；第一次提取，乙醇水溶液質(zhì)量百分比濃度為85-99%，以鹽 酸調(diào)節(jié)乙醇水溶液的pH為2. 5-6. 5,所述紅樹莓果實粉與乙醇水溶液的質(zhì)量體積比為 lg:5-20mL，提取溫度為50-75°C，提取時間為2-4小時；第二次提取，乙醇水溶液質(zhì)量百分 比濃度為30-70%，以鹽酸調(diào)節(jié)乙醇水溶液的pH為2. 5-6. 5,紅樹莓果實粉與乙醇水溶液的 質(zhì)量體積比為lg: 5-20mL，提取溫度為40-60°C，提取時間為2-6小時；合并兩次提取液，第 一次減壓低溫濃縮至乙醇揮發(fā)盡，用無水乙醇醇沉濃縮混合提取液，濃縮混合提取液與無 水乙醇的體積比例為1:1-3,將濃縮混合提取液與無水乙醇的混合物置于4°C下靜止放置 24小時后，離心，去掉沉淀，上層液體第二次減壓低溫濃縮至乙醇揮發(fā)盡，即得到紅樹莓粗 提物。
[0017] 作為優(yōu)選，第一次提取時乙醇水溶液質(zhì)量百分比濃度為90-95%，所述紅樹莓果實 粉與乙醇水溶液的質(zhì)量體積比優(yōu)選為lg: 10-12mL，提取溫度優(yōu)選為60-65°C，提取時間優(yōu) 選為3-3. 5小時。
[0018] 作為優(yōu)選，第二次提取時乙醇水溶液質(zhì)量百分比濃度為50-60%，所述紅樹莓果實 粉與乙醇水溶液的質(zhì)量體積比優(yōu)選為lg: 8-10mL，提取溫度優(yōu)選為50-55°C，提取時間優(yōu)選 為3-3. 5小時。
[0019] 作為優(yōu)選，用無水乙醇醇沉濃縮混合提取液，濃縮混合提取液與無水乙醇的體積 比例為1:1. 5。
[0020] 兩次減壓低溫濃縮的溫度均為35_50°C，作為優(yōu)選，溫度為40_45°C。
[0021] 采用兩次提取使得最終提取物得率提高了 12-35%，兩次提取分別采用較高濃度 乙醇溶液和較低濃度乙醇溶液，使得紅樹莓果實粉中的脂溶性及水溶性活性功能物質(zhì)均得 到充分的提取。相比單次提取及單一濃度提取，采用高、低濃度兩次提取結(jié)合，進(jìn)一步增強 提取物的得率及功效，同時有效提高原料利用率。
[0022] 提取過程中各項參數(shù)的選擇對提取效果也有很大影響，在所述的參數(shù)范圍內(nèi)，紅 樹莓果實粉中活性物質(zhì)得到很好的提取，提取得率也高。
[0023] 4、將紅樹莓粗提物用大孔樹脂層析法進(jìn)行分離純化，得到紅樹莓粗提物一純物。
[0024] 上述步驟得到的紅樹莓粗提物以水配制成濃度為50-80mg/mL的溶液，以鹽酸調(diào) 節(jié)pH到2. 0-5. 5,將2. 0-4. 0倍柱體積的紅樹莓粗提物溶液以I. 5-2. 5mL/min的流速通過 填充有大孔樹脂的分離柱；靜置吸附飽和后，用4. 0-6. 0倍柱體積的蒸餾水以I. 0-2. OmL/ min的流速淋洗吸附后的大孔樹脂，至流出液為無色；再用4. 0-6. 0倍柱體積的酸性乙醇水 溶液以I. 0-2. 5mL/min的流速洗脫吸附了紅樹莓粗提物的大孔樹脂，收集洗脫液，將收集 到的洗脫液減壓低溫濃縮，