一種生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及皮膚護(hù)理及皮炎藥物領(lǐng)域，具體地，涉及一種生物活性透明質(zhì)酸凝膠 制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 皮膚炎癥性疾病即皮膚炎癥引起的皮膚疾病，包括簡單的皮膚紅斑、皮膚過敏等 肉眼可見的皮膚紅腫癢痛。皮膚炎癥性疾?。ㄆぱ祝┖蜐癔}常作為同義詞用來指一種皮膚 炎癥，代表皮膚對于化學(xué)制劑、蛋白、細(xì)菌與真菌等種種物質(zhì)的變應(yīng)性反應(yīng)。例如，陰囊皮炎 的發(fā)病原因非常復(fù)雜，簡單的分為內(nèi)在因素和外在因素，外因如化學(xué)制劑、化妝品、動物毒 素、魚蝦、花粉、塵埃、日曬、搔抓等，內(nèi)因包括遺傳因素、精神因素、機(jī)體的免疫因素、代謝因 素，以及越來越受到重視的心理因素。在目前治療皮膚炎癥的藥物中，含皮質(zhì)激素的藥物對 多種皮炎的療效是肯定的，但如果長期頻繁或大量使用含皮質(zhì)類激素藥物，將產(chǎn)生一些不 良的副作用。
[0003] 最近國外的研宄表明，細(xì)胞外基質(zhì)大分子透明質(zhì)酸被透明質(zhì)酸酶活化成生物活性 透明質(zhì)酸，生物活性透明質(zhì)酸與細(xì)胞外CD44和TLR4受體結(jié)合，可以促進(jìn)皮膚粘膜分泌防衛(wèi) 素2,進(jìn)而抑制炎癥和拮抗內(nèi)毒素的炎癥刺激作用，因此，發(fā)展一種安全有效的生物活性透 明質(zhì)酸，并將其制成皮膚外用制劑，可望提供一種促進(jìn)皮膚保健、緩解或治療皮膚炎癥性疾 病的途徑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，具有高效的抗炎活性，可 有效促進(jìn)皮膚健康、防治皮膚炎癥。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0006] 一種生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，包括具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸，以及 與所述生物活性透明質(zhì)酸有增效協(xié)同作用的卡波姆。
[0007] 進(jìn)一步地，所述具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸是分子量為0. 7KD-100KD的生 物活性透明質(zhì)酸片段。
[0008] 進(jìn)一步地，所述生物活性透明質(zhì)酸片段是使用CHO細(xì)胞生產(chǎn)的有糖化的重組人透 明質(zhì)酸酶PH20切割大分子透明質(zhì)酸獲得，且所述透明質(zhì)酸片段至少有一端是使用能識別 透明質(zhì)酸正常結(jié)構(gòu)的重組人透明質(zhì)酸酶切割的末端。
[0009] 進(jìn)一步地，所述生物活性透明質(zhì)酸的重量百分含量為0. 6-3%、所述卡波姆的重量 百分含量為1. 5-3%。
[0010] 進(jìn)一步地，所述生物活性透明質(zhì)酸的重量百分含量為3%、所述卡波姆的重量百分 含量為2%。
[0011] 進(jìn)一步地，所述凝膠制劑還包括：水、甘油、氯化鈉、香精、苯氧乙醇、羥苯甲酯、羥 苯乙酯、乙基己基甘油。
[0012] 由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明至少具有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0013] 本發(fā)明的凝膠制劑可有效促進(jìn)皮膚健康和防治皮膚炎癥，是安全有效的皮膚炎癥 控制手段。
[0014] 本發(fā)明的凝膠輔料卡波姆與生物活性透明質(zhì)酸具有協(xié)同增效作用，能夠增加生物 活性透明質(zhì)酸的的生物活性和人體治療效果。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 凝膠劑指藥物與能形成凝膠的輔料制成的混懸或乳狀液型的稠厚液體或半固體 制劑，凝膠劑主要用于皮膚及體腔如鼻腔、陰道，凝膠輔料包括羥丙甲纖維素、甲基纖維素、 羧甲基纖維素鈉、殼聚糖、聚乙二醇、海藻酸鈉等。發(fā)明人通過大量的實(shí)驗(yàn)研宄發(fā)現(xiàn)，有些輔 料不僅不會增加生物活性透明質(zhì)酸的人體生物活性，甚至?xí)档蜕锘钚酝该髻|(zhì)酸的人體 生物活性，抑制治療療效。而凝膠輔料卡波姆不但沒有降低生物活性透明質(zhì)酸的人體治療 活性，反而促進(jìn)了生物活性透明質(zhì)酸的抗炎活性，具有與生物活性透明質(zhì)酸的協(xié)同作用。這 種協(xié)同作用增強(qiáng)了生物活性透明質(zhì)酸的抗炎效果，因此，卡波姆作為凝膠輔料的同時也是 一種協(xié)同增效劑。
[0016] 因此，利用安全有效的生物活性透明質(zhì)酸，結(jié)合具有協(xié)同增效作用的凝膠輔料，可 生產(chǎn)有效促進(jìn)皮膚健康和防治皮膚炎癥的護(hù)膚品凝膠、化妝品凝膠、醫(yī)療藥物凝膠產(chǎn)品。
[0017] 本發(fā)明利用上述發(fā)現(xiàn)提供了具有高效的抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑， 包括具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸，以及與所述生物活性透明質(zhì)酸有增效協(xié)同作用的 卡波姆。
[0018] 優(yōu)選地，所述具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸是分子量為0. 7KD-100KD的生物 活性透明質(zhì)酸片段。所述生物活性透明質(zhì)酸片段可采用CHO細(xì)胞生產(chǎn)的有糖化的重組人透 明質(zhì)酸酶PH20切割大分子透明質(zhì)酸的方式獲得，且所述透明質(zhì)酸片段至少有一端是使用 能識別透明質(zhì)酸正常結(jié)構(gòu)的重組人透明質(zhì)酸酶切割的末端。采用該方式獲得的生物活性透 明質(zhì)酸具有安全性高、生物活性高的特點(diǎn)。
[0019] 優(yōu)選地，所述生物活性透明質(zhì)酸片段在凝膠制劑中的重量百分含量為0. 6-3%，所 述卡波姆的重量百分含量為1. 5-3%。
[0020] 上述僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，以下 結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0021] 實(shí)施例1
[0022] 目的：生物活性透明質(zhì)酸片段的生產(chǎn)方法。
[0023] 方法：原料為純度90. 0% -99. 9%的200-600KD的大分子透明質(zhì)酸，使用CHO細(xì)胞 生產(chǎn)的重組人透明質(zhì)酸酶PH20切割，每克透明質(zhì)酸使用透明質(zhì)酸酶1000-2000單位，37度 消化4-6小時，ρΗ5· 0-5. 5,130-160mM NaCl，0. 5-1. OmMMgSO4,1. 5-2. 5mM CaCl2，最終制成的 分子量為〇. 7KD-100KD透明質(zhì)酸片段。
[0024] 所述的分子量為0. 7KD-100KD透明質(zhì)酸片段至少有一端是使用CHO細(xì)胞生產(chǎn)的不 引起人類過敏反應(yīng)的有糖化的能識別透明質(zhì)酸正常結(jié)構(gòu)的重組人透明質(zhì)酸酶PH20切割的 末端，具有促進(jìn)細(xì)胞分泌防衛(wèi)素2、殺滅微生物和和抑制皮膚粘膜炎癥的生物活性，所述的 生物活性既取決于透明質(zhì)酸酶切割的透明質(zhì)酸片段末端，也取決于透明質(zhì)酸片段的分子量 大小，透明質(zhì)酸片段的分子量越小，所含重組人透明質(zhì)酸酶PH20切割的末端越多，生物活 性越好。
[0025] 實(shí)施例2
[0026] 目的：研宄不同凝膠劑輔料對生物活性透明質(zhì)酸的人體生物活性的影響。
[0027] 方法：本實(shí)驗(yàn)采用人體實(shí)驗(yàn)的方法檢測生物活性透明質(zhì)酸的人體生物活性，即不 同凝膠劑輔料對生物活性透明質(zhì)酸治療皮膚炎癥性疾病效果的影響。本實(shí)驗(yàn)的小動物預(yù) 實(shí)驗(yàn)已發(fā)現(xiàn)凝膠劑輔料羥丙甲纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、殼聚糖、聚乙二醇、海 藻酸鈉均降低或不增加生物活性透明質(zhì)酸的人體生物活性。本實(shí)驗(yàn)所有病例均為皮膚炎 癥性疾病患者，實(shí)驗(yàn)組1 (卡波姆）采用2%卡波姆+3%生物活性透明質(zhì)酸凝膠每天涂抹6 次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；實(shí)驗(yàn)組2(羧甲基纖維素鈉）采用 2%羧甲基纖維素鈉+3%生物活性透明質(zhì)酸膠（膏）每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體 癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；實(shí)驗(yàn)組3 (海藻酸鈉）采用2%海藻酸鈉+3%生物活性透明 質(zhì)酸膠（膏）每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；實(shí)驗(yàn)組 4 (酵母蛋白水解物）采用2 %酵母蛋白水解物+3 %生物活性透明質(zhì)酸膠（膏）每天涂抹6 次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況；陽性對照采用已知有效的3%生 物活性透明質(zhì)酸噴劑每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀的情況； 陰性對照采用2%卡波姆凝膠每天涂抹6次，觀察治療后皮膚炎癥體癥紅、破損和瘙癢癥狀 的情況；比較五組治療5天后癥狀和體征改善情況。
[0028] 瘙癢不適癥狀療效評價：顯效：癥狀顯著改善或消失，患者滿意；有效：癥狀有改 善或減輕，患者仍有不適，要求繼續(xù)治療；無效：癥狀無明顯減輕，患者不滿意。
[0029] 體征療效評價：顯效：紅色明顯變淺，破損明顯減輕；有效：紅色開始變淺，破損減 輕；無效：紅色沒有變淺，破損沒有減輕。
[0030] 統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS12. 0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量和計數(shù)資料組間比 較采用t檢驗(yàn)和X2檢驗(yàn)，以p〈0. 05為有統(tǒng)計學(xué)意義差異。
[0031] 結(jié)果：
[0032] 如表1所示，第5天癥狀改善情況：實(shí)驗(yàn)組1顯效8例，有效2例，總有效率100%; 實(shí)驗(yàn)組2有效8例，無效2例，總有效率80%，顯效率與實(shí)驗(yàn)組1比較P〈0. 01 ;實(shí)驗(yàn)組3有 效7例，無效3例，總有效率70%，顯效率與實(shí)驗(yàn)組1比較P〈0. 01 ;實(shí)驗(yàn)組4有效6例，無效 4例，總有效率60%，顯效率與實(shí)驗(yàn)組1比較P〈0. 01。
[0033] 表1第5天兩組患者癥狀改善情況比較
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，其特征在于，包括具有抗炎活性的生物活性透明 質(zhì)酸，以及與所述生物活性透明質(zhì)酸有增效協(xié)同作用的卡波姆。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，其特征在于，所述具有抗炎活 性的生物活性透明質(zhì)酸是分子量為0. 7KD-100KD的生物活性透明質(zhì)酸片段。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，其特征在于，所述生物活性透 明質(zhì)酸片段是使用CHO細(xì)胞生產(chǎn)的有糖化的重組人透明質(zhì)酸酶PH20切割大分子透明質(zhì)酸 獲得，且所述透明質(zhì)酸片段至少有一端是使用能識別透明質(zhì)酸正常結(jié)構(gòu)的重組人透明質(zhì)酸 酶切割的末端。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，其特征在于，所述生物活性透 明質(zhì)酸的重量百分含量為〇. 6-3%，所述卡波姆的重量百分含量為1. 5-3. 0%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，其特征在于，所述生物活性透 明質(zhì)酸的重量百分含量為3%，所述卡波姆的重量百分含量為2%。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，其特征在于，所述凝膠制劑還 包括：水、甘油、氯化鈉、香精、苯氧乙醇、羥苯甲酯、羥苯乙酯、乙基己基甘油。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種生物活性透明質(zhì)酸凝膠制劑，包括具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸，以及與所述生物活性透明質(zhì)酸有增效協(xié)同作用的卡波姆。發(fā)明的凝膠制劑可促進(jìn)皮膚健康、防治皮膚炎癥。
【IPC分類】A61P17-00, A61Q19-00, A61P29-00, A61K8-73, A61K9-06, A61K8-81, A61K31-728, A61K31-78, A61K47-32
【公開號】CN104546896
【申請?zhí)枴緾N201510065499
【發(fā)明人】惠覓宙
【申請人】惠覓宙
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年2月9日