專利名稱：用作人類cd23產(chǎn)生及tnf釋放抑制劑的異羥肟酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及形成可溶性人類CD23的新型抑制劑，及其在治療自身免疫疾病和變態(tài)反應(yīng)等與可溶性CD23(s-CD23)過量生成有關(guān)的疾病中的應(yīng)用。本發(fā)明化合物也是腫瘤壞死因子(TNF)釋放的抑制劑。
CD23(低親和力的IgE受體FceRⅡ,Blast2)，是一種分子量為45kDa的在各種成熟細胞表面上表達的Ⅱ型膜內(nèi)在蛋白質(zhì)，這些成熟細胞包括B和T淋巴細胞、巨嗜細胞、自然殺傷細胞、郎格罕斯細胞、單核細胞及血小板(Delespesse等，《免疫學(xué)進展》(Adv Immunol),49149-191)。在嗜酸性細胞上也有類似CD23的分子(Grangette等，《免疫學(xué)雜志》(J Immunol),1433580-3588)。CD23與免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)有關(guān)(Delespesse等，《免疫學(xué)回顧》(Immunol Rev),12577-97)。人類CD23存在二種不同的調(diào)節(jié)同種型，即a和b，其不同之處僅在于細胞內(nèi)N-末端的氨基酸不同(Yokota等，《細胞》(Cell),55611-618)。在人體中，a組成型同種型僅發(fā)現(xiàn)于B-淋巴細胞上，而由IL-4誘導(dǎo)的b型卻發(fā)現(xiàn)在所有能表達CD23的細胞上。
已知完整的細胞結(jié)合的CD23(i-CD23)從細胞表面進行裂解，導(dǎo)致大量有明確定義的可溶片段(s-CD23)形成，它們是作為蛋白水解的復(fù)雜序列的結(jié)果產(chǎn)生的，其機理仍然不清楚(Bourget等《生物化學(xué)雜志》(J Biol Chem.)2696927-6930)。雖然未經(jīng)證實，但可假定這些蛋白水解產(chǎn)生的大部分可溶片段(分子量為37、33、29和25kDa)是通過最初形成37kDa片段而有序發(fā)生的，其所有片段都保留著與i-CD23相同的C-末端凝集素區(qū)(Letellier等，《實驗藥物雜志》(J Exp Med),172693-700)。另一胞內(nèi)裂解途徑導(dǎo)致穩(wěn)定的16kDa片段形成，它不同于來自i-CD23的C-末端區(qū)(Grenier-Brosette等，《歐洲免疫學(xué)雜志》(Eur J Immunol),221573-1577)。
幾種活性已歸因于證明在IgE調(diào)節(jié)中起作用的膜結(jié)合的人類i-CD23。特殊活性包括a)抗原呈遞b)IgE介導(dǎo)的嗜酸性細胞毒性，c)B細胞回至淋巴結(jié)和脾的生發(fā)中心，及d)IgE合成的下調(diào)節(jié)(Delespesse等，《免疫學(xué)進展》(Adv Immunol),49149-191)。三種有較高分子量的可溶性CD23片段(分子量為37、33和29kDa)具有多功能細胞因子性質(zhì)，其在IgE形成中可能起主要作用。這樣，過量形成的s-CD23與過量產(chǎn)生IgE有關(guān)，典型的過敏性疾病如外源性哮喘、鼻炎、變應(yīng)性結(jié)膜炎、濕疹、特應(yīng)性皮炎和過敏癥(Sutton和Gould，《自然》(Nature),366421-428)。其它歸因于s-CD23的生物活性包括刺激B細胞生長和誘導(dǎo)介體從單核細胞中的釋放。這樣，在患有B-慢性淋巴細胞白血病患者的血清中(Sarfati等，《血液》(Blood),7194-98)和在患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的滑液中(Chomarat等，《關(guān)節(jié)炎和風(fēng)濕病》(Arthritis and Rheumatism),36234-242)可以觀察到s-CD23水平的升高。許多資料提到CD23在炎癥中有作用。首先，有報道s-CD23結(jié)合到細胞外受體上，激活的受體與細胞介導(dǎo)的炎癥有關(guān)。因此，據(jù)報道，s-CD23直接激活單核細胞TNF、IL-1和IL-6的釋放(Armant等，第180卷，《實驗藥物雜志》(J.Exp.Med.)1005-1011)。有報道CD23與單核細胞/巨嗜細胞上B2-整合蛋白粘附分子CD11b和CD11c互相作用(S.Lecoanet-Henchoz等，《免疫》(Immunity)，第3卷.119-125)，它們引發(fā)NO2-、過氧化氫和細胞因子(IL-1、IL-6和TNF)的釋放。最終，IL-4或TNF誘導(dǎo)CD23的表達并作為s-CD23由人單核細胞釋放。膜結(jié)合的CD23受體與IgE/抗-IgE免疫復(fù)合物或抗CD23mAb的結(jié)合激活了cAMP和IL-6產(chǎn)生及血栓烷B2形成，這證明CD23在炎癥中的受體介導(dǎo)作用。
由于CD23這些不同性質(zhì)，抑制s-CD23形成的化合物應(yīng)具有雙重作用a)在B細胞表面上通過保持i-CD23的水平來增強IgE合成的負反饋抑制，和b)抑制s-CD23的較高分子量的可溶性片段(分子量為37、33和29kDa)的免疫刺激細胞因子的活性。另外，抑制CD23裂解能減緩sCD23誘導(dǎo)的單核細胞活化和介體形成，因此減少炎性反應(yīng)。
TNFα是在無活性前體中通過特異性裂解76-氨基酸信號序列以產(chǎn)生成熟形式而從刺激細胞中釋放的前炎性細胞因子。有報道TNFα的裂解是通過金屬蛋白酶進行的(Gearing.A.J.H等，《自然》(Nature)370,555-557,Mc Geehan,G.M等，《自然》(Nature)370,558-561,Mohler,K.M等,《自然》(Nature)370,218-220)。已報道的通過TNF加工酶抑制TNFα裂解的化合物特別是異羥肟酸類被普遍描述為基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。
由于TNFα在各種細胞類型中對細菌、內(nèi)毒素、各種病毒和寄生蟲的應(yīng)答被誘導(dǎo)，以致于歸因于TNFα的一種生理功能是其對由細菌、寄生蟲等引起急性感染的炎性反應(yīng)有關(guān)(Dinarello,C.A.《免疫學(xué)》(Immunol)4,133-145)。過量產(chǎn)生的TNFα與疾病狀況如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒性休克、局限性回腸炎和惡病質(zhì)有關(guān)(Dinarello,1992)。抑制TNFα的成熟和活性形式過程將利于治療這些炎癥疾病。雖然TNFα不是這些疾病的引發(fā)因素，但它與自身免疫疾病中組織的破壞有關(guān)。為了證實TNFα在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中的重要性，TNFα抗體在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型的短期研究中已顯示可減輕疾病的嚴重性(Elliott,M.J等《關(guān)節(jié)炎和風(fēng)濕病》(Arthrit,Rheum.)12,1681-1690,Elliott等《柳葉刀》(Lancet)344,1125-1127)。
國際專利申請WO96/02240(Smithkline Beecham plc)公開了抑制基質(zhì)金屬蛋白酶(如膠原酶、溶基質(zhì)素和明膠酶)作用的化合物是釋放轉(zhuǎn)染入哺乳動物細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的人可溶性CD23的有效抑制劑。
UK9601041.8(Smithkline Beecham plc)報道，式(Ⅰ)中的一些化合物是轉(zhuǎn)染給哺乳動物細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的人可溶性CD23釋放的有效抑制劑。
根據(jù)本發(fā)明，可提供上述式(Ⅰ)化合物，其中n是0或1；R是被1-3個選自烷基，芳基，鏈烯基和炔基的基團取代的甲基；R1是芳甲基或雜環(huán)甲基；
R2是烷基，鏈烯基，芳基，環(huán)烷基或環(huán)烯基；且R3是氫，烷基，鏈烯基，炔基或芳基。
在此所指的烷基、鏈烯基和炔基包括有多至6個碳原子的直鏈和支鏈基團，并由任選下列一個或多個基團取代芳基，雜環(huán)基，(C1-6)烷硫基，(C1-6)烷氧基，芳基(C1-6)，烷氧基，芳基(C1-6)烷硫基，氨基，單-或雙-(C1-6)烷氨基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，羧基和其酯，羥基和鹵素。
在此所指的環(huán)烷基和環(huán)烯基包括具有3至8環(huán)碳原子的基團并由如上述的烷基、烯基和炔基任選取代。
在此所用的術(shù)語“芳基”表示為在每個環(huán)中適當含有4至7個，優(yōu)選5至6個環(huán)原子的單和稠環(huán)，其環(huán)可各自是未取代的或由例如多至3個取代基取代的。稠環(huán)系可包括脂環(huán)和需要僅包括一個芳環(huán)。
適合的芳基包括苯基和萘基諸如1-萘基或2-萘基。
適合的任何芳基包括苯基和萘基可以由多至5個，優(yōu)選多至3個取代基任選取代。適合的取代基包括鹵素、(C1-6)烷基、芳基、芳基(C1-6)烷基、(C1-6)烷氧基、(C1-6)烷氧基(C1-6)烷基、鹵代(C1-6)烷基、芳基(C1-6)烷氧基、羥基、硝基、氰基、疊氮基、氨基、單-和雙-N-(C1-6)烷氨基、酰胺基、芳基羰基氨基、酰氧基、羧基、羧酸鹽、羧酸酯、氨基甲?；?、單-和雙-N-(C1-6)烷氨基甲?；?、(C1-6)烷氧羰基、芳氧羰基、脲基、胍基、磺酰氨基、氨基磺?；?、(C1-6)烷硫基、(C1-6)烷基亞磺酰基、(C1-6)烷基磺?；㈦s環(huán)基和雜環(huán)基(C1-6)烷基。另外，兩個相鄰環(huán)碳原子可由(C3-5)烯鏈連接形成碳環(huán)。
除另有定義外，在此所用的術(shù)語“雜環(huán)基”和“雜環(huán)的”適當?shù)陌ǚ甲搴头欠甲?、單和稠環(huán)，每環(huán)中適當?shù)睾卸嘀?個雜原子，其中每個雜原子各自選自氧、氮和硫，其中環(huán)可以是未取代的或由例如多至3個取代基取代。每個雜環(huán)的環(huán)適當有從4至7個，優(yōu)選5或6個環(huán)原子。稠雜環(huán)的環(huán)系包括碳環(huán)和需要僅包括一個雜環(huán)。
雜環(huán)基的優(yōu)選取代基選自鹵素、(C1-6)烷基、芳基(C1-6)烷基、(C1-6)烷氧基、(C1-6)烷氧基(C1-6)烷基、鹵代(C1-6)烷基、羥基、氨基、單-和雙-N-(C1-6)烷氨基、酰胺基、羧酸鹽、羧酸酯、氨基甲?；?、單-和雙-N-(C1-6)烷羰基、芳氧羰基、(C1-6)烷氧羰基(C1-6)烷基、芳基、氧基、脲基、胍基、磺酰氨基、氨基磺?；?、(C1-6)烷硫基、(C1-6)烷基亞磺?；?C1-6)烷基磺?；?、雜環(huán)基和雜環(huán)基(C1-6)烷基。
在本發(fā)明的特別方面中，R是烯丙基，丙基，乙基或異丙基；和/或R1是1-或2-萘甲基；和/或R2是叔-丁基；和/或R3是氫或甲基。在本發(fā)明的又一個方面中，R至R3各自選自歸于以下實例中所定義的基團。本發(fā)明的式(Ⅰ)化合物優(yōu)選選自下述實例中所描述的化合物。
根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供式(Ⅰ)化合物在生產(chǎn)治療或預(yù)防與過量產(chǎn)生s-CD23有關(guān)的如過敏性疾病、炎癥疾病和自身免疫疾病的藥物中的應(yīng)用。
在另一方面，本發(fā)明提供治療或預(yù)防與過量產(chǎn)生s-CD23有關(guān)的過敏性疾病、炎癥疾病和自身免疫疾病的方法，其方法包括將式(Ⅰ)化合物給予對此有需要的人或非人哺乳動物。
本發(fā)明還提供了一種用于治療或預(yù)防與過量產(chǎn)生s-CD有關(guān)的諸如過敏性疾病、炎癥疾病和自身免疫疾病這樣疾病的藥物組合物，它包括式(Ⅰ)的化合物及基任選的可藥用載體。
根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供式(Ⅰ)化合物在生產(chǎn)治療或預(yù)防由TNF介導(dǎo)的疾病的藥物中的應(yīng)用，這些疾病包括(但不限于)炎癥、發(fā)熱、心血管反應(yīng)、出血、凝血和急性期反應(yīng)、惡病質(zhì)和厭食、急性感染、休克狀態(tài)、移植對宿主反應(yīng)和自身性免疫疾病。
在另一方面中，本發(fā)明提供治療或預(yù)防由TNF介導(dǎo)疾病的方法，其方法包括將式(Ⅰ)化合物給予需要的人或非人哺乳動物。
本發(fā)明也提供治療或預(yù)防由TNF介導(dǎo)疾病的藥物組合物，其包括式(Ⅰ)化合物和其任選的可藥用載體。
特殊的炎癥疾病包括CNS疾病如阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥和多梗死性癡呆，以及炎癥介導(dǎo)的中風(fēng)和腦損傷后遺癥。
可理解的是，可藥用的鹽、溶劑化物和式(Ⅰ)化合物的其它可藥用衍生物也包括在本發(fā)明中。
式(Ⅰ)化合物的鹽包括例如衍生于無機或有機的酸加成鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽、和苯甲酸鹽。
與堿也可形成鹽。這樣的鹽包括衍生于無機或有機堿的鹽，例如堿金屬鹽如鈉或鉀鹽和有機胺鹽如嗎啉、哌啶、二甲胺或二乙胺鹽。
驚奇地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物是CD23形成和TNF釋放的有效的和選擇的抑制劑，而與上述現(xiàn)有技術(shù)化合物比較顯示出減少膠原酶抑制的活性。本發(fā)明化合物經(jīng)口服途徑也顯示了利于體內(nèi)吸收的性質(zhì)。
通過應(yīng)用任何適當常規(guī)方法可以制備本發(fā)明的化合物，例如類似于專利公開號WO97/02239(BBL)中公開的方法。
因此，本發(fā)明的另一方面提供制備如上述定義的式(Ⅰ)化合物的方法，其方法包括a)使式(Ⅱ)化合物脫保護 其中n和R至R3如上述定義，和X是保護基如芐基或三甲代甲硅烷基或b)使式(Ⅲ)化合物與羥胺或其鹽反應(yīng) 其中n和R至R3如上述定義，和任選保護任何羥基，或c)式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)化成上述定義的不同的式(Ⅰ)化合物。
式(Ⅱ)和(Ⅲ)化合物是新的且形成本發(fā)明的另一個方面。
由式(Ⅲ)化合物與保護的羥胺反應(yīng)可制備式(Ⅱ)化合物。具有一個或多個保護羥基的式(Ⅲ)化合物通過水解轉(zhuǎn)化成相應(yīng)未保護的式(Ⅲ)化合物。
并羥肟酸的適合保護基是本領(lǐng)域熟知的，其包括芐基、三甲代甲硅烷基、叔-丁基和叔-丁基二甲基甲硅烷基。
羧酸的適合保護基是本領(lǐng)域熟知的，其包括叔-丁基、芐基和甲基。
通過式(Ⅳ)或(Ⅳa)化合物與式(Ⅴ)化合物反應(yīng)可以制備式(Ⅲ)化合物 其中R、R1如上述定義，Y是羧基的保護基；通過 其中n,R2和R3如上述定義，或是其活化的衍生物。如果使用(Ⅳa)化合物，則需要對羥基烷基化或?；?。
通過保護一個Y是氫的相應(yīng)化合物可以制得式(Ⅳ)化合物，依次按下述制備(a)使式(Ⅵ)化合物與一種烷基化試劑反應(yīng) 其中R1如上述定義并且Z是羧基的一個保護基，和(b)除去保護基。
Z是氫的式(Ⅵ)化合物可由2-羥基琥珀酸二酯(例如二甲或二乙酯)與式R1X’化合物在強堿(例如二異丙基酰胺鋰)存在的條件下反應(yīng)制備，其中X’是一個離去基團如溴或碘，然后水解生成的化合物以除去酯基。
本發(fā)明化合物的異構(gòu)體包括立體異構(gòu)體可以被制備成這樣異構(gòu)體的混合物或者各自的異構(gòu)體。各自的異構(gòu)體可由任何適宜的方法制得，例如通過從手性原料的立體有擇合成或者用已知方法分離非對映異構(gòu)體混合物而獲得。在優(yōu)選方面，本發(fā)明提供式(ⅠA)化合物 優(yōu)選以基本純形式分離化合物。
正如本文所述，可溶性人CD23形成的抑制劑具有有效的治療性質(zhì)。優(yōu)選活性化合物作為可接受的組合物給藥。
組合物優(yōu)選適用于口服給藥。然而，也適用于其它方式的給藥，例如以噴霧劑、氣溶膠形式或其它用于吸入劑的常用方法用于治療呼吸道疾?。换?qū)夹乃サ幕颊叩姆俏改c道給藥。其它的替代給藥方式包括舌下或經(jīng)皮給藥。
組合物可以是片劑、膠囊、粉劑、顆粒劑、錠劑、栓劑、再溶解型粉劑的形式或液體制劑，如口服或無菌非胃腸道溶液或混懸液。
為了獲得給藥的一致性，優(yōu)選本發(fā)明的組合物為單位劑量的形式。
口服給藥的單位劑量代表形式可以是片劑和膠囊及可以含有常用的賦形劑如粘合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、西黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨醇或甘氨酸；片劑潤滑劑，例如硬脂酸鎂；崩解劑，例如淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羥基乙酸淀粉鈉或微晶纖維素；或可藥用的潤濕劑如月桂基硫酸鈉。
通過混合、填充或壓片的常用方法可以制備固體口服組合物?？梢允褂梅磸?fù)混合操作將活性劑完全分散于含大量填充劑的組合物中。當然這樣的操作在本領(lǐng)域是常用的。根據(jù)通常制藥學(xué)方法可以將片劑包衣，特別是腸溶包衣。
口服液體制劑可以是如乳劑、糖漿劑或酏劑的形式，或以干品形式存在，使用前用水或其它適合載體再溶解。這樣的液體制劑可以含有常用的添加劑例如混懸劑如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁膠、氫化食用脂肪；乳化劑如卵磷脂、單油酸脫水山梨醇或阿拉伯膠；非水性載體(包括食用油)如杏仁油、精餾椰子油、油酯如甘油酯、丙二醇酯或乙醇酯；防腐劑如對-羥基苯甲酯或丙酯或山梨酸；和若需要的常用的矯味劑或著色劑。
對非腸道給藥而言，使用化合物和無菌載體制備液體單位劑型。所述液體劑型取決于所使用的濃度，并可混懸或溶解在載體中。在制備溶液劑時，將化合物溶解在注射用水注入到適當?shù)娜萜骰虬财恐腥缓鬅o菌過濾并密封。有利的是可以將輔劑如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑溶解在載體中。為增強穩(wěn)定性，注入至容器后可以冷凍組合物并在真空下除去水分。除了將化合物混懸于載體中替代于溶解外，以基本相同的方法制備非腸道混懸劑，但不能用過濾除菌。化合物可在分散于無菌載體之前暴露于環(huán)氧乙烷中滅菌。有利的是，組合物中包含表面活性劑或潤濕劑有助于化合物分散均勻。
也可以將本發(fā)明組合物制備成嗅劑或用于噴霧器的氣霧劑或溶液劑等經(jīng)呼吸道給藥的方式，或用于吸入劑的微細粉劑，其可單獨或與惰性載體如乳糖組合。在這樣的情況中，活性化合物的粒度小于50微米，優(yōu)選小于10微米例如1-50微米，1-10微米或1-5微米范圍的粒徑。適當?shù)臈l件下，也可以包括小量其它止喘藥和支氣管擴張藥如擬交感神經(jīng)胺類如喘息定、乙基喘息定、舒喘靈、苯福林和麻黃堿；黃嘌呤衍生物如茶堿和氨茶堿和皮質(zhì)類甾醇如強的松龍和腎上腺興奮劑如ACTH。
根據(jù)不同給藥方法，組合物可以含有0.1％-99％(重量)，優(yōu)選10-60％(重量)的活性物質(zhì)。吸入給藥的優(yōu)選范圍是10-99％，特別是60-99％，例如90、95或99％。
以氣霧劑計量劑量或借助適當?shù)幕罨粑b置可以適當?shù)亟o予微細粉劑。
適合的計量劑量氣霧劑配方包括常用的拋射劑，助溶劑如乙醇，表面活性劑如油醇，潤滑劑如油醇，干燥劑如硫酸鈣和密度調(diào)節(jié)劑如氯化鈉。
用于噴霧劑的適當溶液是等滲的無菌溶液，任選緩沖的如PH4-7之間，含有多至20mg/ml的化合物，但更常用0.1-10mg/ml，使用標準噴霧設(shè)備。
有效劑量將取決于本發(fā)明化合物的相對有效性、所治療疾病的嚴重程度和患者體重。適合的是，本發(fā)明組合物的單位劑型可含有0.1-1000mg的本發(fā)明的化合物(經(jīng)吸入0.001-10mg)和更常用1-500mg，例如1-25或5-500mg。這樣的組合物可以每日給藥1-6次，通常是每日2-4次，對于70kg成人而言以這樣方式給藥的日劑量為1mg-1g和更具體為5-500mg。即是在約1.4×10-2mg/kg/天-14mg/kg/天的范圍和更特別在約7×10-2mg/kg/天-7mg/kg/天的范圍。
下列實施例說明本發(fā)明但不以任何方式限制于此。
生物實驗方法步驟1．采用下列步驟研究試驗化合物抑制可溶性CD23釋放的能力RPMI8866細胞膜CD23裂解活性試驗使用水溶液提取方法，純化來自RPMI8866細胞的漿膜的、表達高水平CD23的一種人Epstein-Barr病毒轉(zhuǎn)化的B-細胞系(Sarfati等，《免疫學(xué)》(Immunology)60{1987}539-547)。重新混懸在均化緩沖液(20mM HEPES PH7.4,150mM NaCl,1.5mM MgCl2,1mM DTT)中的細胞被帕爾罐中的N2氣流擊碎，和其它膜混合的漿膜部分經(jīng)10,000Xg離心回收。每1-3g濕細胞使用2ml 0.2M磷酸鉀(PH7.2)重新混懸輕的小團并且棄去帶核的小團。在每10-15mg膜蛋白的總重為16g的0.25M蔗糖中，通過在右旋糖酐500(6.4％W/W)和聚乙二醇(PEG)5000(6.4％W/W)(參考)之間分配對膜進一步分級分離[Morre和Morre《生物技術(shù)》(BioTechniques)7,946-957(1989)]。主要通過1000Xg離心分離各相并收集PEG相(上層)，用20mM磷酸鉀緩沖液(PH7.4)稀釋3-5倍并在100,000Xg離心獲得所述相中回收的膜。將小團重新混懸于磷酸緩沖鹽溶液中并且由3-4倍富集的漿膜以及一些其它細胞膜(如溶酶體，Golgi)組成。將膜等分并在-80℃保存。經(jīng)6.6％右旋糖酐/PEG分級分離得到富集10倍的漿膜。
將所分級分離的膜在37℃下培養(yǎng)4小時產(chǎn)生CD23片段，在用來自P30994的5μm制備物1使試驗體系驟冷后，通過0.2微米Durapore濾膜(Millipore)過濾從膜中分離出該片段。使用The Binding Site(Birmingham,UK)的EIA試劑盒或采用在夾層EIA中以MHM6抗-CD23[Rowe等，Int.J.Cancer,29,373-382(1982)]或另一個抗-CD23mAb作為捕捉抗體的類似裝置測定從膜中釋放的sCD23。通過EIA測得在總體積為50μl磷酸緩沖鹽中由0.5μg膜蛋白所制得的可溶性CD23含量，并與在各種濃度的抑制劑存在下所產(chǎn)生的含量作比較。在水溶液或二甲亞砜(DMSO)中配制抑制劑并且DMSO最終濃度不大于2％。通過50％抑制sCD23產(chǎn)生的濃度曲線測得IC50s，可觀察到sCD23在無抑制劑培養(yǎng)對照品之間的差異。
步驟2使用下列步驟研究試驗化合物抑制膠原酶的能力。
膠原酶抑制試驗采用Cawston和Barrett(《生物化學(xué)年鑒》(Anal.Biochem.)99,340-345,1979)的方法測定作為膠原酶抑制劑起作用的化合物的效力，在此引入本發(fā)明作參考。用膠原和來自從大腸桿菌中克隆、表達和純化的滑液成纖維細胞的人重組膠原酶在37℃培養(yǎng)1mM待試抑制劑溶液或其稀釋液18小時(用150mM Tris PH7.6緩沖，含有15mM氯化鈣，0.05％Brij 35200mM氯化鈉和0.02％疊氮化鈉)。所述膠原為用Cawston和Murphy方法(《酶學(xué)方法》(Enzymology)80,711,1981中的方法)制備的乙?；?H1型牛膠原。樣品經(jīng)離心以沉淀未消化的膠原和移出等份有放射活性的上清液，用閃爍計數(shù)器檢驗其水解。比較在1mM抑制劑或其稀釋液存在下的膠原酶活性與無抑制劑的對照品活性，并以膠原酶的50％有效濃度(IC50)作為結(jié)果報告。
步驟3使用下列步驟研究試驗化合物抑制TNF釋放的能力檢驗由脂多糖(IPS)內(nèi)毒素刺激人單核細胞釋放TNFα的抑制能力將在10％胎牛血清補充的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)的人單核細胞以1000Xg離心5分鐘，然后以2×106細胞/毫升在培養(yǎng)基中重新混懸。每孔1ml，在24孔板中對細胞混懸液進行等分。將代試化合物溶解于無水二甲亞砜(DMSO)并加入到最終DMSO濃度為0.1％的培養(yǎng)基中。將化合物一式三份加入細胞中。通過加入LPS至最終濃度200ng/ml的細胞中刺激TNFα釋放。適當?shù)膶φ张囵B(yǎng)物也按一式三份設(shè)置。在37℃下、5％CO2中將平板培養(yǎng)18-20小時，然后以1000Xg離心5分鐘。使用對人TNFα(Smithkline Beecham)的特異性ELISA測定沒有細胞的培養(yǎng)物上清液中的TNF水平。
制備N-[4-t-丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺a)3S-t-丁氧基羰基-2R-(2-萘基甲基)丙內(nèi)酯 將(叔丁氧基-(3R)-羧基-4-(2-萘基甲基)丁酸酯(10g,31.9mmol)的THF溶液(160ml)于氬氣-70℃攪拌，滴加雙(三甲基硅)酰胺鋰(THF中的1M溶液63.7ml,63.7mmol)?；旌衔镉?60℃至-70℃下攪拌1小時后冷卻至-80℃，通過套管加入琥珀酰胺碘化物(7.17g,31.9mmol)的THF溶液(20ml)。混合物加熱到約-30℃1小時，然后用飽和氯化銨溶液猝冷。加入乙酸乙酯后二相混合物于室溫下攪拌1.5小時。分離各層并且水層用乙酸乙酯提取(2×)，用5％的硫代硫酸鈉溶液和鹽水洗滌合并的有機層，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。經(jīng)硅膠色譜分離(10％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)并用己烷研磨回收的產(chǎn)物得到5.70g的白色固體(63％)。
MS(AP+ve)M+Na=3351H NMR(CDCl3):1.31(9H,s),3.29(1H,dd,J=8.5,14.6Hz),3.38(1H,dd,J=6.1,14.6Hz),4.06(1H,m),4.45(1H,d,J=4.4Hz),7.34(1H,dd,J=1.7,8.5Hz),7.48(2H,m),7.68(1H,s),7.82(3H,m).
b)N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 將THF(10ml)中的3S-叔丁氧基羰基-2R-(2-萘基甲基)丙內(nèi)酯(5.0g,16.0mmol)和(S)-叔-亮氨酰胺(2.47g,19.2mmol)于室溫下攪拌48小時。蒸發(fā)TNF，加入乙酸乙酯后用2N HCl、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。生成的固體用己烷研磨并干燥得到6.373g產(chǎn)品(90％)。
MS(ES+ve)M+Na=465,M+H=4431H NMR(DMSO-d6):0.91(9H,s),1.39(9H,s),2.85-3.20(3H,m),3.85(1H,dd,J=5.0,7.4Hz),4.17(1H,d,J=9.3Hz),5.65(1H,d,J=7.4Hz),6.91(1H,s),7.29(1H,s),7.38-7.48(3H,m),7.69(1H,s),7.80-7.87(4H,m).
制備N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基-S-叔-亮氨酸甲酰胺
與上述b)類似，用叔-亮氨酸甲酰胺斷開3S-叔丁氧基羰基-2R-(2-萘基甲基)丙內(nèi)酯得到一白色固體產(chǎn)物。
MS(AP+ve)M+H=457,M+Na=4791H NMR(DMSO-d6):0.85(9H,s),1.41(9H,s),2.32(3H,d,J=4.6Hz),2.90(1H,dd,J=6.5,13.5Hz),3.03(1H,dd,J=8.6,13.5Hz),3.14(1H,m),3.88(1H,dd,5.7,7.3Hz),4.12(1H,d,J=9.3Hz),5.62(1H,d,J=7.5Hz),7.36(1H,m),7.45(2H,m),7.60(1H,m),7.65(1H,s),7.77-7.90(4H,m).
制備N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 與上述b)類似，用叔-亮氨酸乙酰胺斷開3S-叔丁氧基羰基-2R-(2-萘基甲基)丙內(nèi)酯得到一白色固體產(chǎn)物。
MS(ES+ve)M+H=471,M+Na=4931H NMR(DMSO-d6):0.84(3H,t,J=7.3Hz),0.86(9H,s),1.41(9H,s),2.80-2.92(3H,m),3.03(1H,dd,J=8.5,13.6Hz),3.16(1H,m),3,88(1H,dd,J=5.8,7.3Hz),4.12(1H,d,J=9.4Hz),5.63(1H,d,J=7.4Hz),7.37(1H,dd,J=1.5,8Hz),7.44-7.47(2H,m),7.65(1H,m),7.70(1H,m),7.77-7.81(4H,m).
制備3S-羥基-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)琥珀酸二乙酯a)2-溴甲基-6-氟萘 將6-氟-2-甲基萘(20.5g,128mmol,用Wolinska-Mocydlarz等的方法2制備)和NBS(22.8g,128mmol)于CCL4(210ml)中加熱回流16小時，同時分次加入過氧化苯甲酰(2.5g)。溶液冷卻后過濾并蒸發(fā)，殘余物用己烷(4×250ml)充分提取。從焦油狀物中傾出提取物，合并后蒸發(fā)得到一黃色固體產(chǎn)物29.8g(97％)。
1H NMR(CDCl3):4.65(2H,s),7.27(1H,dt,J=9,3Hz),7.43(1H,dd,J=10,2Hz),7.53(1H,dd,J=9,1Hz),7.74-7.85(3H,m).
b)3S-羥基-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)琥珀酸二乙酯 將LHMDS溶液(THF中的1M溶液262ml)和THF(80ml)的混合物冷卻到-72℃，滴入S-蘋果酸二乙酯(23.7g,124.6mmol)的THF(100ml)溶液并保持反應(yīng)在低于-68℃條件下進行?；旌衔锟杉訜岬?40℃15分鐘，然后再冷至-72℃。滴加2-溴甲基-6-氟萘(29.8g,124.7mmol)的THF溶液180ml，混合物在緩慢升溫至室溫的同時攪拌過夜。將該混合物傾入0.5M HCl并用Et2O(2×)提取，合并提取物用0.5MHCl、NaHCO3溶液、水和鹽水洗滌；干燥(MgSO4)并蒸發(fā)成一油狀物，經(jīng)硅膠色譜(己烷/Et2O,0至35％)分離得到一樹膠狀物、隨后固化17.3g(40％)。
1H NMR(CDCl3):1.20(3H,t,J=7Hz),1.27(3H,t,J=7Hz),3.14(1H,dd,J=12,9Hz),3.20-3.42(3H,m),4.09-4.29(5H,m),7.25(1H,dt.J=9,2.5Hz),7.43(2H,m),7.73(1H,s),7.75-7.89(2H,m).
參考文獻1．GM Carrera和D Garvey，《雜環(huán)化學(xué)雜志》(J heterocyclicChem),1992,29,847.
2．J Wolinska-Mocydlarz.P Canonne和LC Leitch，《合成》(Synthesis),1974,566.
實施例1N’-[3S-(烯丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺a)N-[4-叔丁氧基-3S-(烯丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)丁二酰]-S-叔-亮氨酰胺 向N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺(221mg,0.5mmol)的tBuOH(10ml)溶液中加入烯丙基溴(0.4ml,5mmol)，隨后加入NaH(60％分散于礦物油中，22mg)。攪拌1小時后倒入稀HCl中并用乙醚提取。提取物用水洗滌，干燥(MgSO4)和蒸發(fā)。殘留物經(jīng)色譜分離(50％乙酸乙酯/己烷)獲得一白色泡沫產(chǎn)物。
MS(ES+ve)M+Na=505,M+H=4831H NMR(DMSO-d6):0.75(9H,s),1.30(9H,s),2.64(1H,dd,J=14,4.5Hz),2.90(1H.dd,J=14,10Hz),3.06-3.2(1H,m),3.69-3.75(1H,obs),3.74(1H,d,J=8Hz),3.89(1H,d,J=8Hz),4.03(1H,d,J=9Hz),5.02(1H,dd,J=10.2Hz),5.14(1H,dd,J=17,2Hz),5.64-5.75(1H,m),6.71(1H,br),7.03(1H,br),7.16(1H,dd,J=8.5,1.5Hz),7.28-7.33(2H,m),7.48(1H,s),7.62-7.71(4H,m).
b)N-[3S-(烯丙氧基)-4-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 將N-[4-叔丁氧基-3S-(烯丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺(0.18g,0.4mmol)的二氯甲烷/三氟乙酸(5/2)溶液攪拌18小時。經(jīng)濃縮得一白色固體產(chǎn)物。
MS(ES+ve)M+Na=449,M+H=4271H NMR(DMSO-d6):0.9(9H,s),2.85(1H,dd,J=14,4.5Hz),3.05(1H,dd,J=14,10Hz),3.22-3.31(1H,m),3.85(1H,dd,J=12.5,5.5),3.94(1H,d,J=8Hz),4.08(1H,dd,J=12.5,5Hz),4.17(1H,d,J=9Hz),5.15(1H,d,J=10Hz),5.41(1H,d,J=17),5.87-5.90(1H,m),6.87(1H,br),7.17(1H,br),7.33(1H,d,J=8.5Hz),7.43-7.47(2H,m),7.65(1H,s),7.62-7.71(4H,m).
c)N’-[3S-(烯丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 將無水DMF(10ml)中的N-[3S-(烯丙氧基)-4-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺(0.96g,2.25mmol)溶液用HOAT(0.613g,4.50mmol)和EDC(0.846g,4.50mmol)處理，反應(yīng)液于室溫下攪拌0.25小時。然后加入鹽酸羥基胺(0.47g,6.75mmol)和N-甲基嗎啉(0.682g,6.75mmol)并于室溫下將反應(yīng)混合物攪拌16小時。反應(yīng)液蒸發(fā)干燥后將殘余物分配于乙酸乙酯和10％檸檬酸中。分離各相并將有機相用10％檸檬酸(×2)和飽和碳酸氫鈉溶液(×3)洗滌。濾出得沉淀，用水和乙酸乙酯洗滌后于真空下干燥，獲得如標題所示的白色固體化合物(0.22g,22％)。將來自濾液的有機相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)和蒸發(fā)，殘留物經(jīng)甲醇/乙醚中重結(jié)晶后得如標題所示的化合物(0.26g,26％)。
MS(ES-ve)M-H=4401H NMR(DMSO-d6):0.97(9H,s),2.64(1H,m),2.93(1H,m),3.23(1H,m),3.81(2H,m),3.95(1H,m),4.12(1H,d,J=9.4Hz),5.11(1H,d,J=10.6Hz),5.23(1H,d,J=17.3Hz),5.78(1H,m),6.75(1H,s),6.96(1H,s),7.25(1H,d,J=8.7Hz),7.43(2H,m),7.59(1H,s),7.65-7.83(4H,m),9.12(1H,s),10.95(1H,s).
N-[3S-(烯丙氧基)-4-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺也可經(jīng)(3R-萘基甲基)-2S-羥基-琥珀酸二乙酯按下述制備d)3S-烯丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酸二乙酯 向(3R-萘基甲基)-2S-羥基-琥珀酸二乙酯(4.0g,12mmol)的苯(80ml)的攪拌液中加入乙醇鉈(Ⅰ)(2.99g,12mmol)并于室溫下攪拌該混合物。形成一膠凝狀沉淀，1小時后真空除去溶劑。沉淀混懸于DMF(120ml)中，然后向混合物中加入烯丙基溴(1.45g,1.04ml,12mmol)?；旌衔镉谑覝叵聰嚢柽^夜?；旌衔锝?jīng)過濾除去鉈鹽，加入水和乙酸乙酯，產(chǎn)品被提取到乙酸乙酯中。提取物用水和鹽水依次洗滌后干燥(MgSO4)和濃縮。經(jīng)硅膠色譜純化(用40-60-石油醚中的5％乙酸乙酯洗脫)得到一油狀物(1.40g,32％)。
MS(ES+ve)M+Na=3931H NMR(CDCl3):1.10(3H,t,J=7.2Hz),1.29(3H,t,J=7.2Hz),3.03(1H,dd,J=6.9,13.5Hz),3.16-3.33(2H,m),3.91(1H,dd,J=6.1,12.6Hz),4.02-4.30(6H,m),5.20(1H,dd,J=1.3,10.3Hz),5.28(1H,dd,J=1.6,17.2Hz),5.91(1H,m),7.33(1H,dd,J=1.7,8.4Hz),7.45(2H,m),7.64(1H,s),7.78(3H,m).
e)用已知的方法例如WO9702239,3S-烯丙氧基-2R-(2-萘基甲基)丁二酸二乙酯可被水解，用三氟乙酸酐然后用甲醇處理，與(S)-叔-亮氨酰胺偶合并水解得到N-[3S-(烯丙氧基)-4-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺光譜數(shù)據(jù)同上述實施例1的b)。
實施例2N’-[3S-(烯丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲基酰胺 與實施例1的b)+e)類似，由3S-烯丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酸二乙酯制備，但是與N-甲基-(S)-叔-亮氨酰胺替代(S)-叔-亮氨酸酰胺偶合。
MS(ES+ve)M+H=456,M+Na=4781H NMR(DMSO-d6):0.81(9H,s),2.05(3H,d,J=4.4Hz),2.65和2.80(2H,m),3.25(1H,m),3.78和3.93(2H,dd,J=12.7,5.4Hz),3.85(1H,d,J=9.7Hz),4.05(1H,d,J=9.5Hz),5,09(1H,dd,J=10.4,1.6Hz),5.22(1H,dd,J=17.3,1.6Hz),5.75(1H,m),7.12(1H,d,J=4.4Hz),7.24(1H,m),7.46(2H,m),7.57(1H,s),7.75(4H,m),9.14(1H,s),10.99(1H,s).
實施例3N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(丙氧基琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲基酰胺 與實施例2類似，由3S-烯丙氧基-2R-萘基甲基琥珀酸二乙酯制備，但是化合物優(yōu)選用Pd/BaSO4氫化得到異羥肟酸。
MS(ES+ve)M+H=458,M+Na=4801H NMR(DMSO-d6):0.82(12H,m),1.43(2H,m),2.04(3H,d,J=4.4Hz),2.64和2.81(2H,m),3.25(3H,m),3.78(1H,d,J=9.6Hz),4.03(1H,d,J=9.4Hz),7.06(1H,d,J=4.4Hz),7.25(1H,d,J=8.5Hz),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.62(1H,d,J=9.4Hz),7.80(3H,m),9.14(1H,s),10.95(1H,s).
實施例4N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(丙氧基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的b)+e)類似，由3S-烯丙氧基-2R-萘基甲基琥珀酸二乙酯制備，但是化合物優(yōu)選用Pd/BaSO4氫化得到異羥肟酸。
MS(ES+ve)M+H=444,M+Na=4661H NMR(DMSO-d6):0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.89(9H,s),1.45(2H,m),2.64和2.91(2H,m),3.12-3.40(3H,m),3.75(1H,d,J=9.5Hz),4.11(1H,d,J=9.5Hz),6.79(1H,s),6.97(1H,s),7.25(1H,m),7.44(2H,m),7.59(1H,s),7.73(4H,m),9.10(1H,brs)和10.95(1H,s).
實施例5
N’-[3S-(烯丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的b)+e)類似，由3S-烯丙氧基-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)琥珀酸二乙酯制備。
MS(ES-ve)M-H=4581H NMR(DMSO-d6):0.89(9H,s),2.69(1H,dd,J=14,4Hz),2.95(1H,dd,J=14,10Hz),3.11-3.19(1H,m),3.74-3.81(2H,m),3.96(1H,dd,J=12.5,5Hz),4.07(1H,d,J=9.5Hz),5.10(1H,dd,J=10,1Hz),5.22(1H,dd,J=16,1Hz),5.75-5.86(1H,m),6.69(1H,s),7.11(1H,s),7.24(1H,d,J=9.5Hz),7.33(1H,dd,J=9,2.5Hz),7.54(1H,dd,J=10.5,2.5Hz),7.59(1H,s),7.77(1H,d,J=8.5Hz),7.77-7.82(1H,obs),7.89(1H,dd,J=8.5,6Hz),9.12(1H,s),10.91(1H,s).
實施例6N’-[3S-(乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的b)+e)類似，由3S-羥基-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)琥珀酸二乙酯制備，用碘乙烷替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=4461H NMR(DMSO-d6):0.89(9H,s),1.05(3H,t,J=7Hz),2.63(1H,dd,J=14,3Hz),2.90(1H,dd,J=14,10.5Hz),3.17(1H,dd,J=9,3Hz),3.23-3.27(1H,m),3.31-3.47(1H,m),3.75(1H,d,J=9Hz),4.11(1H,d,J=9.5Hz),6.76(1H,s),6.93(1H,s),7,22(1H,dd,J=8.5,1Hz),7.32(1H,dt,J=8.5,2.5Hz),7.53-7.58(1H,obs),7.58(1H,s),7.65(1H,d,J=9Hz),7.78(1H,d,J=8.5Hz),7.90(1H,dd,J=9,6Hz),9.11(1H,s),10.94(1H,s).
實施例7N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)-3S-(丙氧基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例5類似，由3S-羥基-2R-(2-(7-氟)萘基甲基)琥珀酸二乙酯制備，但是化合物優(yōu)選用Pd/C氫化得到異羥肟酸。
MS(ES-ve)M-H=4601H NMR(DMSO-d6):0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.89(9H,s),1.40-1.52(2H,m),2.63(1H,dd,J=14,3.5Hz),2.89(1H,dd,J=14,10Hz),3.15-3.37(3H,m),3.75(1H,d,J=9.5Hz),4.09(1H,d,J=9.5Hz),6.75(1H,s),6.91(1H,s),7.23(1H,dd,J=8,1Hz),7.32(1H,dt,J=8.5,2),7.58(1H,s),7.49-7.60(2H,m),7.78(1H,d,J=8.5),7.90(1H,dd,J=9,8Hz),9.10(1H,br)和10.91(1H,br).
實施例8N’-[3S-(乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺，其中用碘乙烷替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=4601H NMR(DMSO-d6):0.94(9H,s),1.06(3H,t,J=7Hz),2.68(1H,dd,J=14,4Hz),2.94(1H,dd,J=24,11Hz),3.05-3.19(1H,m),3.22-3.29(1H,m),3.36-3.47(1H,m),3.70(1H,d,J=8.5Hz),4.09(1H,d,J=9.5Hz),6.78(1H,s),7.22(1H,s),7.28(1H,d,J=8.5Hz),7.42-7.48(2H,m),7.61(1H,s),7.76(1H,d,J=8.5Hz),7.80-7.87(3H,m),8.97(1H,s),10.92(1H,s).
實施例9N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(丙氧基琥珀?；鵠-S-(β,β-二甲基-Nε-甲基賴氨酰胺)TFA鹽 與實施例1的d)+e)類似，由3S-烯丙氧基-2R-萘基甲基琥珀酸二乙酯制備，但是化合物用β,β-二甲基-Nε-甲基-賴氨酰胺(替代(S)-叔-亮氨酰胺)偶合，并且優(yōu)選用Pd/BaSO4氫化得到異羥肟酸。
MS(ES-ve)M-H=499,MS(ES+ve)M+H=5011H NMR(DMSO-d6):0.84(3H,t,J=7.4Hz),0.86(6H,s),1.22(2H,m),1.48(2H,m),1.55(2H,m),2.55(3H,s),2.70(3H,m),2.93(1H,m),3.21(2H,m),3.35(1H,m,部分被水遮蔽),3.76(1H,d,J=8.9Hz),4.17(1H,d,J=9.5Hz),6.82(1H,s),6.95(1H,s),7.27(1H,m),7.43(2H,m),7.59(1H,s),7.76(4H,m),8.25(2H,brs),9.12(1H,s),10.91(1H,s).
實施例10N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-(6-氟)萘基甲基)-3S-(丙氧基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的d)+e)類似，由2R-(2-(6-氟)萘基甲基)-3S-羥基琥珀酸二乙酯制備，但是化合物優(yōu)選用Pd/C氫化得到異羥肟酸。
MS(ES-ve)M-H=460,MS(ES+ve)M+H=4621H NMR(DMSO-d6):0.82(3H,t,J=7Hz),0.88(9H,s),1.45(2H,m),2.63(1H,brd,J≈12Hz),2.89(1H,brt),3.20(2H,m),ca3.3(1H,m,部分被水的信號遮蔽),3.76(1H,d,J=9Hz),4.08(1H,d,J=9Hz),6.71(1H,brs),6.89(1H,brs),7.28-7.36(2H,m),7.58-7.63(3H,m),7.74(1H,d,J=8Hz),7.86-7.89(1H,m),9.09(1H,brs),10.90(1H,brs).
實施例11N’-[3S-(烯丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-(6-氟)萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的d)+e)類似，由2R-(2-(6-氟)萘基甲基)3S-羥基琥珀酸二乙酯制備。
MS(ES-ve)M-H=458,MS(ES+ve)M+H=4601H NMR(DMSO-d6):0.87(9H,s),2.64(1H,dd,J=14,3Hz),2.90(1H,dd,J≈14,14Hz),3.22(1H,m),3.78(1H,dd,J=13,6Hz),3.82(1H,d,J=10Hz),3.95(1H,dd,J=13,5Hz),4.10(1H,d,J=9Hz),5.10(1H,d,J=10Hz),5.22(1H,dd,J=17,1Hz),5.73-5.83(1H,m),6.71(1H,brs),6.92(1H,br.
s),7.29(1H,d,J=8Hz),7.34(1H,m),7.58-7.67(3H,m),7.74(1H,d,J=8Hz),7.88 1H,m),9.10(1H,brs),10.95(1H,brs).
實施例12N’-[3S-(己氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-(6-氟)萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的d)+e)類似，由2R-(2-(6-氟)萘基甲基)-3S-羥基琥珀酸二乙酯制備，用碘己烷替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=502,MS(ES+ve)M+H=504,M+Na=5261H NMR(DMSO-d6):0.85(3H,t,J=7Hz),0.88(9H,s),1.22(6H,brm),1.43(2H,m),2.64(1H,m),2.90(1H,m),3.20(2H,m),3.35(1H,m),3.75(1H,d,J=9Hz),4.08(1H,d,J=9Hz),6.72(1H,b.s),6.90(1H,brs),7.27-7.39(2H,m),7.57-7.65(3H,m),7.74(1H,d,J=9Hz),7.87(1H,m),9.10(1H,brs),10.90(1H,brs).
實施例13N’-[3S-((4-氟)芐氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用4-氟芐基溴替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=508,MS(ES+ve)M+H=510,M+Na=5321H NMR(DMSO-d6):0.76(9H,s),2.69(1H,m),2.95(1H,m),3.25(1H,m),3.94(1H,d,J=9Hz),4.09(1H,d,J=9Hz),4.30(1H,Abq的A,J=11Hz),4.46(1H,Abq的B,J=11Hz),6.75(1H,brs),6.98(1H,brs),7.13(2H,m),7.24-7.35(3H,m),7.42-7.46(2H,m),7.60(1H,brs),7.66(1H,d,J≈10Hz),7.74(1H,d,J=8Hz),7.81(2H,m),9.17(1H,brs),11.00(1H brs).
實施例14N’-[3S((4-氟)芐氧基)-4(N-羥氨基)-2R-(2-(6-氟)萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的d)+e)類似，由2R-(2-(6-氟)萘基甲基)-3S-羥基琥珀酸二乙酯制備，用4-氟芐基溴替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=526,MS(ES+ve)M+H=5281H NMR(DMSO-d6):0.76(9H,s),2.68(1H,m),2.93(1H,m),3.27(1H,m),3.95(1H,d,J=10Hz),4.08(1H,d,J=8Hz),4.28(1H,Abq的A,J=11Hz),4.46(1H,Abq的B,J=11Hz),6.73(1H,brs),6.93(1H,brs),7.12(2H,m),7.29-7.39(4H,m),7.57-7.68(3H,m),7.74(1H,d,J=9Hz),7.89(1H,m),9.17(1H,brs),11.00(1H,brs).
實施例15N’-[3S-苯甲酰氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用苯甲酰氯?；娲┍暹M行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=504,MS(ES+ve)M+H=506,M+Na=5281H NMR(DMSO-d6):0.73(9H,s),2.73-2.89(1H,m),3.00-3.10(1H,m),3.58-3.67(1H,m),4.10(1H,d,J=9Hz),5.21(1H,d,J=10Hz),6.73(1H,brs),7.10(1H,brs),7.31(1H,d,J=9Hz),7.43-7.52(4H,m),7.65(2H,m),7.74-7.85(3H,m),8.04(3H,m),9.15(1H,s),11.22(1H,s).
實施例16N’-[3S-(2-(N,N-二甲基乙酰氨基氧基))-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用2-溴-N,N-二甲基乙酰胺替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=485,MS(ES+ve)M+H=487,M+Na=5091H NMR(DMSO-d6):0.85(9H,s),ca 2.75-2.83(1H,m),2.79(3H,s),2.91(3H,s),3.01(1H,dd,J=14,10Hz),ca3.3(1H,m),3.94(1H,d,J=8Hz),4.06-4.15(3H,m),6.78(1H,s),7.03(1H,s),7.29(1H,d,J=8Hz),7.39-7.46(2H,m),7.63(1H,s),ca7.64(1H,d,J=8Hz),7.75(1H,d,J=8Hz),7.79-7.83(2H,m),9.09(1H,s),11.18(1H,brm).
實施例17N’-[3S-(2-(N-叔丁基乙酰氨基氧基))-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用溴乙腈替代烯丙基溴進行烷基化，然后優(yōu)選用TFA處理得到異羥肟酸。
MS(ES-ve)M-H=508,MS(ES+ve)M+H=510,M+Na=5321H NMR(DMSO-d6):0.89(9H,s),1.29(9H,s),2.67-2.75(1H,m),2.90-2.96(1H,m),ca3.33(1H,m),3.62 & 3.78(2×1H,Abq,J≈15Hz),3.93(1H,d,J=9Hz),4.22(1H,d,J=10Hz),6.82(1H,s),7.04(1H,s),7.11(1H,s),7.27(1H,d,J=8Hz),7.41-7.47(2H,m),7.60(1H,s),7.75(1H,d,J=9Hz),7.81-7.84(2H,m),7.90(1H,d,J=8Hz),9.19(1H,s),11.13(1H,brs).
實施例18N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(N-苯基氨基甲?；趸?-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用異氰酸苯酯酰化/DMAP?；娲孟┍暹M行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=519,MS(ES+ve)M+H=3211H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),2.76(1H,dd,J=12,4Hz),2.95-3.08(1H,m),3.36-3.41(1H,m),4.17(1H,d,J=9.5Hz),5.17(1H,d,J=9.5 Hz),6.78(1H,br),6.91-7.00(1H,m),7.19(1H,br),7.22-7.32(3H,m),7.41-7.45(4H,m),7.6-7.7(1H,obs),7.61(1H,s),7.75(1H,d,J=9.5Hz),7.76-7.82(2H,m),9.08(1H,s),9.62(1H,br),11.09(1H,br).
實施例19N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(N-甲基-N-苯基氨基甲?；趸?-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺制備，用N-甲基-N-苯基氨基甲酰基氯/NaH?；娲孟┍暹M行烷基化(參見實施例27)。
MS(ES-ve)M-H=533,MS(ES+ve)M+H=5351H NMR(DMSO-d6):0.78(9H,s),2.76(1H,dd,J=14,4Hz),2.98(1H,dd,J=14,10.5Hz),3.26(3H,s),3.35-3.41(1H,m),4.10(1H,d,J=9Hz),5.03(1H,d,J=9Hz),6.72(1H,s),7.06(1H,s),7.18(1H,t,J=6Hz),7.25-7.38(5H,m),7.38-7.46(3H,m),7.60(1H,s),7.74(1H,d,J=9Hz),7.79-7.90(2H,m),9.08(1H,s),11.02(1H,br.).
實施例20N’-[3S-(環(huán)己基氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺 a)N’-[4-叔丁氧基-3S-(環(huán)己基氧基)-2R-(2-萘基甲基)-丁二酰]-S-叔-亮氨酰胺 將N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺(1.0g,2.26mmol)和3-溴代環(huán)己烯(2.60ml,22.6mmol)的N-甲基吡咯烷酮(18ml)置于氬氣下0℃攪拌，滴加雙(三甲基硅)酰胺鋰(THF中1M溶液2.50ml,2.50mmol)?；旌衔镉?℃攪拌10分鐘后室溫下2.5小時?；旌衔镉靡宜嵋阴?1N HCl稀釋并且產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中。有機提取物用飽和碳酸氫鈉溶液、水(3×)和鹽水洗滌后干燥(Na2SO4)和濃縮。用己烷研磨除去過量的烷基化試劑，經(jīng)硅膠色譜分離(用1∶1的乙酸乙酯/己烷洗脫)得到一泡沫物(378mg)MS(ES+ve)M+H=523。
將該產(chǎn)物(340mg)、環(huán)己烯(1.5ml)和10％Pd-C(30mg)于甲醇(15ml)中在氬氣下回流過夜。冷卻后，混合物用C鹽過濾并濃縮得到一白色固體(310mg)。
MS(ES+ve)M+H=525.
1H NMR(CDCl3):1.09(9H,s),1.15-2.0(10H,m),1.42(9H,s),3.0-3.10(2H,m).3.20-3.30(2H,m),3.86(1H,d,J=3.0Hz),4.10(1H,d,J=8.5Hz),5.06(1H,s),6.55(1H,s),7.36-7.50(4H,m),7.67(1H,s),7.70-7.85(3H,m).
b)N’-[3S-(環(huán)己基氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 將N-[4-叔丁氧基-3S(環(huán)己基氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺(310mg)的二氯甲烷(5ml)/三氟乙酸(2ml)溶液于室溫下攪拌4小時。蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)物由甲苯(3×)中重蒸發(fā)得到無色玻璃狀固體羧酸。
將DMF(10ml)中的產(chǎn)物用EDC(0.23g,1.18mmol)和HOAT(0.16g,1.18mmol)處理，加入鹽酸羥基胺(0.12g,1.77mmol)和N-甲基嗎啉(0.20ml,1.77mmol)的DMF(5ml)溶液。混合物于室溫下攪拌過夜后于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)。將殘余物分配于乙酸乙酯/1N HCl中，產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中。提取物用1N HCl、水和鹽水洗滌后干燥(MgSO4)和蒸發(fā)。經(jīng)乙醚研磨獲得一白色固體(94mg)。
MS(ES-ve)M-H=4821H NMR(DMSO-d6):0.90(9H,s),1.0-1.95(10H,m),2.68(1H,dd,J=3.9,13.8Hz),2.92(1H,dd,J=10.6,13.8Hz),3.10-3.20(2H,m),3.95(1H,d,J=9.0Hz),4.04(1H,d,J=9.3Hz),6.72(1H,s),6.88(1H,s),7.27(1H,d,J=9Hz),7.43(2H,m),7.60(2H,m),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.81(2H,m),9.04(1H,s),10.86(1H,s).
實施例21N’-[3S-(環(huán)己基氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺
與實施例20類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺經(jīng)烷基化、氫化、叔丁酯裂解和異羥肟酸形成而制得N’-[3S-(環(huán)己基氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺。
MS(ES-ve)M-H=5101H NMR(DMSO-d6):0.65(3H,t,J=7.2Hz),0.85(9H,s),1.0-1.25(5H,m),1.47(1H,m),1.65(2H,m),1.75(1H,m),1.85(1H,m),2.45-2.69(3H,m),2.83(1H,m),3.20(2H,m),3.96(1H,d,J=9.2Hz),3.98(1H,d,J=9.1Hz),7.12(1H,m),7.26(1H,dd,J=1.1,8.3Hz),7.43(2H,m),7.53(1H,d,J=10Hz),7.58(1H,s),7.72-7.85(3H,m),9.07(1H,s),10.85(1H,s).
實施例22N’-[3S-(乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用碘乙烷替代烯丙基溴進行烷基化MS(ES-ve)M-H=4421H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.04(3H,t,J=7.0Hz),2.07(3H,d,J=4.5Hz),2.64(1H,dd,J=3.8,13.6Hz),2.83(1H,m),3.20-3.27(2H,m),3.44(1H,m),3.77(1H,d,J=9.6Hz),4.05(1H,d,J=9.8Hz),7.06(1H,m),7.24(1H,dd,J=1.5,8.4Hz),7.44(2H,m),7.56(1H,s),7.59(1H,d,J=10Hz),7.72-7.85(3H,m),9.08(1H,s),10.92(1H,s).
實施例23
N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-((3-苯基)丙氧基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺制備，用肉桂酰溴烷基化，還原、脫保護和異羥肟酸形成。
MS(ES+ve)M+H=520,MS(ES-ve)M-H=5181H NMR(DMSO-d6):0.9(9H,s),1.70-1.80(2H,m),2.50-2.70(3H,m),2.85-2.95(1H,m),3.18-3.3(2H,m),3.35-3.45(1H,m),3.75(1H,d,J=9.4 Hz),4.10(1H,d,J=9.5Hz),6.75(1H,s),6.95(1H,s),7.10-7.20(3H,m),7.25-7.30(3H,m),7.35-7.45(2H,m),7.60(1H,s),7.68-7.85(4H,m),9.10(1H,s),10.9(1H,s).
實施例24N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(噻唑-2-基甲氧基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用2-溴代甲基噻唑替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=499,MS(ES-ve)M-H=4971H NMR(DMSO-d6):0.80(9H,s),2.65-2.70(1H,m),2.88-2.97(1H,m),3.30-3.50(1H,m),4.05(1H,d,J=9.6Hz),4.10(1H,d,J=9.3Hz),4.65(1H,d,J=12.9Hz),4.75(1H,d,J=12.94Hz),6.70(1H,s),6.95(1H,s),7.25(1H,d,J=8.6Hz),7.40-7.50(2H,m),7.60(1H,s)7.70-7.80(4H,m),7.80-7.88(2H,m),9.20(1H,s),11.05(1H,s).
實施例25N’-[3S-(環(huán)己基羰基氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用環(huán)己酰氯?；娲孟┍暹M行烷基化(見實施例27)。
MS(ES+ve)M+H=5121H NMR(DMSO-d6):0.88(9H,s),1.10-1.38(5H,m),1.50-1.88(5H,m),2.22(1H,m),2.80(1H,dd,J=4,14Hz),2.97(1H,dd,J=10,14Hz),3.41(1H,m),4.09(1H,d,J=9Hz),4.90(1H,d,J=10Hz),6.76(1H,s),7.01(1H,s),7.28(1H,d),7.47(2H,m),7.61(1H,s),7.74(1H,d,J=9Hz),7.82(3H,m),9.07(1H,s),11.01(1H,s).
實施例26N’-[3S-(叔丁基羰基氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備，用新戊酰氯?；娲孟┍暹M行烷基化(見實施例27)。MS(ES+ve)M+H=4861H NMR(DMSO-d6):0.87(9H,s),1.11(9H,s),2.84(1H,dd,J=5,14Hz),2.93(1H,dd,J=9,14Hz),4.03(1H,d,J=9Hz),4.95(1H,d,9Hz),6.73(1H,s),6.99(1H,s),7.31(1H,d,J=8Hz),7.44(2H,m),7.64(1H,s),7.75(1H,d,J=9Hz),7.81(3H,m),9.05(1H,s),11.00(1H,s).
實施例27N’-[3S-苯甲酰氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺a)N-[3S-苯甲酰氧基-4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 向N-[4-叔丁氧基-3S-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺(0.3g,0.678mmol)的DME(5ml)溶液中加入苯甲酰氯(0.087ml,0.075mmol)，30秒后再加入NaH(60％懸浮于礦物油中，0.03g,0.75mmol)。混合物于室溫下攪拌1小時后傾入0.5M HCl中并用乙酸乙酯提取(2×)。提取物用碳酸氫鈉溶液、水和鹽水洗滌；干燥(MgSO4)和蒸發(fā)得一泡沫，泡沫經(jīng)醚結(jié)晶獲得白色晶體產(chǎn)物0.33g(89％)。
MS(ES+ve)M+H=547,(M+Na)=5691H NMR(DMSO-d6):0.85(9H,s),1.40(9H,s),3.00(1H,m),3.18(1H,m),3.65(1H,m),4.20(1H,d,J=8Hz),5.04(1H,d,J=7Hz),6.89(1H,br.s),7.34(1H,br.s),7.38-7.53(5H,m),7.67-7.72(2H,m),7.78-7.88(3H,m),7.98(2H,d,J=8Hz),8.06(1H,d,J=8Hz).
b)N’-[3S-苯甲酰氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 與實施例1的b)+c)類似，由N-[3S-苯甲酸基-4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺制備。
MS(ES-ve)M-H=504,MS(ES+ve)M+H=506,M+Na=5281H NMR(DMSO-d6):0.73(9H,s),2.73-2.89(1H,m),3.00-3.10(1H,m),3.58-3.67(1H,m),4.10(1H,d,J=9Hz),5.21(1H,d,J=10Hz),6.73(1H,brs),7.10(1H,brs),7.31(1H,d,J=9Hz),7.43-7.52(4H,m),7.65(2H,m),7.74-7.85(3H,m),8.04(3H,m),9.15(1H,s),11.22(1H,s).
實施例28N’-[3S-(乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-喹啉基甲基)琥珀酰基]-S叔-亮氨酸甲基酰胺
將無水DMF(5ml)中的N’-[3S-(乙氧基)-4-(N-羥基)-2R-(2-喹啉基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺鹽酸鹽(與實施例1b類似，由3-(3-喹啉)丙酸制備，0.19g,0.42mmol)依次用HOAT(0.11g,0.84mmol)和EDC(0.16g,0.84mmol)處理，反應(yīng)液于室溫下攪拌0.25小時。然后加入鹽酸羥基胺(0.09g,1.26mmol)和N-甲基嗎啉(0.18g,1.35mmol)并于室溫下將該溶液攪拌3小時。反應(yīng)液蒸發(fā)干燥后將殘余物分配于乙酸乙酯和水中。分離各相并將有機相用水和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌后用鹽水和硫酸鎂干燥。有機相經(jīng)蒸發(fā)和在50℃干燥槍中干燥3小時，最終獲得如標題所示的白色固體化合物(0.01g,5％)。
MS(ES+ve)M+H=4451H NMR(DMSO-d6):0.82(9H,s),1.04(3H,t,J=6.9Hz),2.06(3H,d,J=4.5),2.72(1H,m),2.75(1H,m),3.26(1H,m),3.31(1H,m),3.44(1H,m),3.80(1H,d,J=9.7Hz),4.05(1H,d,J=9.6Hz),7.22(1H,q,J=5.6Hz),7.53(1H,t,J=6.0Hz),7.66(1H,d,J=6.6Hz),7.70(1H,t,J=7.3Hz),7.84(1H,d,J=6.7Hz),7.94(1H,d,7.9Hz),7.97(1H,s),8.60(1H,d,H=2Hz),9.11(1H,s),10.96(1H,s).
實施例29N’-[4-(N-羥氨基)-3S-甲氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用碘甲烷替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=4301H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),2.10(3H,d,J=4.5Hz),2.63(1H,dd,J=4,14Hz),2.84(1H,dd,J=11,14Hz),3.17(3H,s),3.20(1H,m),3.67(1H,d,J=10Hz),4.08(1H,d,J=10Hz),7.14(1H,q,J=4.5Hz),7.25(1H,m),7.43(2H,m),7.56(1H,s),7.61(1H,dJ=10Hz),7.80(3H,m),9.09(1H,s),10.94(1H,s).
實施例30N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；?3S-丙酰氧基]-s-叔-亮氨酸甲酰胺 實施例27類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用丙酰氯替代苯甲酰氯進行烷基化MS(APCI+ve)M+Na=4941H NMR(DMSO-d6):0.82(9H,s),0.99(3H,t,J=7.5Hz),2.07(3H,d,J=4.5Hz),2.22(2H,m),2.78(1H,dd,J=4,13.5Hz),2.88(1H,dd,J=11,14Hz),3.42(1H,m),4.03(1H,d,J=9Hz),4.96(1H,d,J=10Hz),7.16(1H,q,J=4.5Hz),7.25(1H,m),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.80(4H,m),9.09(1H,s),11.07(1H,s).
實施例31N’-[3S-(乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 與實施例1)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺制備，用碘乙烷替代烯丙基溴進行烷基化，然后裂解叔-丁基酯和形成異羥肟酸。
MS(ES-ve)M-H=4561H NMR(DMSO-d6):0.67(3H,t,J=7.0Hz),0.84(9H,s),1.05(3H,t,J=7.0Hz),2.55(1H,m),2.65(2H,m),2.82(1H,t,J=11.0Hz),3.17-3.30(2H,m,部分不可見),3.44(1H,m),3.77(1H,d,J=9.5Hz),4.05(1H,d,J=9.5Hz),7.23-7.25(2H,m),7.38-7.48(2H,m),7.56-7.59(2H,m),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.76-7.83(2H,m),9.08(1H,s),10.93(1H,s).
實施例32N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(2-甲基丙氧基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用甲代烯丙基溴烷基化，氫化，叔-丁基酯裂解和異羥肟酸形成。
MS(ES-ve)M-H=470
1H NMR(DMSO-d6):0.79-0.83(6H,m),0.83(9H,s),1.72(1H,m),2.04(3H,d,J=4.5Hz),2.65(1H,dd,J=4.0,13.5Hz),2.82(1H,dd,J=11.0,13.5Hz),3.04(1H,dd,6.5,9.0Hz),3.12(1H,dd,J=7.5,9.0Hz),3.26(1H,m),3.78(1H,d,J=9.5Hz),4.00(1H,d,J=9.3Hz),6.99(1H,m),7.27(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.44(2H,m),7.55(1H,d,J=10.5Hz),7.57(1H,s),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.77-7.85(2H,m),9.09(1H,s),10.88(1H,s).
實施例33N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-丙氧基琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 采用標準方法，將無水DMF(4.3ml)中的N’-[4-羥基-2R-(2-萘基甲基)-3S-丙氧基琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺(0.17g,0.372mmol)(與實施例1類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺制備，用烯丙基溴烷基化，氫化，叔-丁基酯裂解)用HOAT(0.1g,0.735mmol)、EDC(0.142g,0.74mmol)和鹽酸羥基胺(0.078g,1.12mmol)和N-甲基嗎啉(0.123ml,1.12mmol)處理。經(jīng)標準操作程序獲得白色固體化合物0.1g(57％)MS(ES+ve)M+H=472,M+Na=494.
1H NMR(DMSO-d6):0.66(3H,t,J=7Hz),0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.84(9H,s),1.45(2H,六重峰,J=7Hz),2.53(1H,m),2.65(2H,m),2.84(1H,m),3.20(2H,m)ca.3.30(1H,m,部分不可見),3.77(1H,d,J=9.5Hz),4.03(1H,d,J=9.5Hz),7.21(1H,br.t,J≈4Hz),7.25(1H,dd,J=8.5,1.5Hz),7.43(2H,m),7.56(1H,d,J=8.5Hz),7.57(1H,s),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.75-7.83(2H,m),9.10(1H,s),10.89(1H,br.s).
實施例34N’-[3S-叔丁氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺a)N’-[4-(N-芐氧基氨基)3S-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 將無水DMF(25ml)中的N-[3S,4-二羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(1.5g,3.75mmol)用HOBT(1.15g,7.51mmol)和EDC(1.44g,7.51mmol)處理?；旌衔飻嚢?0分鐘，然后加入O-芐基羥基胺(0.92ml)。反應(yīng)液于室溫下攪拌6小時，真空下除去DMF。向殘余物中加入飽和碳酸氫鈉溶液；將該混合物用EtOAC提取(2X)。將合并的提取物用NaHCO3溶液、水和鹽水洗滌；干燥(MgSO4)和蒸發(fā)成一樹膠狀物，經(jīng)硅膠柱色譜(己烷/乙酸乙酯；0-100％)純化后得一白色泡沫產(chǎn)物0.73g(39％)。
MS(ES+ve)M+H=506,M+Na=528.
1H NMR(DMSO-d6):0.85(9H,s),2.29(3H,d,J=4.5Hz),2.74(1H,dd,J=13.5,6Hz),2.93(1H,dd,J=13.5,9.5Hz),3.13(1H,m),3.86(1H,t,J=7.5Hz),4.11(1H,d,J=9.5Hz),4.80(2H,s),5.71(1H,d,J=7.5Hz),7.29-7.48(8H,m),7.53-7.58(2H,m),7.61(1H,s),7.76-7.80(2H,m),7.85(1H,d,J=7Hz),11.27(1H,s).
b)N’-[4-(N-芐氧基氨基)-3S-叔-丁氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 將N’-[4-(N-芐氧基氨基)-3S-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(0.69g,1.36mmol)溶解于DCM(30ml)中，溶液置于冰-鹽浴中冷卻。通過cardice-丙酮冷凝器向冷卻的溶液加入冷凝的異丁烯(約30ml)。加入濃硫酸(12滴)后，混合物加熱至室溫并攪拌過夜?；旌衔镉?-4倍于其體積的乙酸乙酯稀釋并且用飽和碳酸氫鈉、水和鹽水洗滌；干燥(MgSO4)和蒸發(fā)成一樹膠狀物，經(jīng)硅膠柱色譜(己烷/乙酸乙酯；0-100％)純化后得一白色泡沫產(chǎn)物0.31g(41％)。
MS(ES+ve)M+H=562,M+Na=584.
1H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.10(9H,s),1.98(3H,d,J=4.5Hz),2.65(1H,dd,J=11,4Hz),2.76(1H,dd,J=11,11Hz),3.08(1H,m),3.94(1H,d,J=9Hz),4.02(1H,d,J=9Hz),4.81(d,J=13.5Hz)和4.86(d,J=13.5Hz)(Abq),6.93(1H,br.q,J=4.5Hz),7.22(1H,d,J=8.5Hz),7.30-7.47(8H,m).7.53(1H,s),7.73(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=8Hz),7.84(1H,d,J=8Hz),11.35(1H,s).
c)N’-[3S-叔-丁氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 將N’-[4-(N-芐氧基氨基)-3S-叔-丁氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(0.305g,0.54mmol)在Pd-BaSO4(0.31g)存在的條件下，于室溫常壓下氫化4小時。過濾除去催化劑并蒸發(fā)濾液。殘余物用醚研磨得一灰白色固體產(chǎn)物0.152g(59％)MS(ES+ve)M+H=472,M+Na=494.
1H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.11(9H,s),1.93(3H,d,J=4.5Hz),2.70(1H.dd,J≈11,4Hz),2.80(1H,dd,J=11,11Hz),3.11(1H,m),3.93(1H,d,J=9Hz),4.02(1H,d,J=9Hz),6.84(1H,br.q,J=4.5Hz),7.25(1H,d,J=8.5Hz),7.40-7.46(3H,m),7.56(1H,s),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J≈8Hz),7.84(1H,d,J≈8Hz),8.96(1H,s),10.74(1H,br.s).
實施例35N’-[3S-叔-丁氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 N’-[4-(N-芐氧基氨基)-3S-叔-丁氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺按實施例34操作制得并氫解，得一淺灰色固體產(chǎn)物0.224g(88％)。
MS(ES+ve)M+H=486,M+Na=508.
1H NMR(DMSO-d6):0.63(3H,t,J=7Hz),0.85(9H,s),1.12(9H,s),2.39(1H,m),2.55(1H,m),2.70(1H,dd,J≈11,4Hz),2.81(1H,dd,J≈11,11Hz),3.11(1H,m),3.92(1H,d.J=9Hz),4.02(1H,d,J=9Hz),7.05(1H,br.t,J=4.5Hz),7.26(1H,dd,J=8.5,1.5Hz),7.40-7.46(3H,m),7.57(1H,s),7.73(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J≈8Hz),7.82(1H,d,J≈8Hz),8.95(1H,s),10.73(1H,br.s).
實施例36N”-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-氧代-N-(N’,N’-2-二甲氨基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺
a)N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-氧基乙酸芐酯)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 通過于乙腈中用2-溴代芐基乙酸酯烷基化N-4-叔-丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺來制備標題所述化合物(參見實施例1a)。
MS(ES+ve)M+H=605,M+Na=6291H NMR(CDCl3):1.02(9H,s),1.42(9H,s),2.59(3H,d,J=5Hz),3.07-3.30(3H,m),3.77(1H,d,J=3.5Hz),3.98(1H,d,J=16Hz),4.12(1H,d,J=9Hz),4.35(1H,d,J=16Hz),5.26(2H,s),6.23(1H,q,J=4Hz),7.04(1H,d,J=9Hz),7.29-7.48(8H,m),7.64(1H,s),7.68-7.83(3H,m).
b)N’-[4-t-丁氧基-3S-(2-氧基乙酸)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 將N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-氧基乙酸芐酯)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(2.71g,4.49mmol)的甲醇液(70ml)用在Pd-BaSO4(0.51g)于室溫常壓下氫解4小時。溶液經(jīng)C鹽過濾并濃縮，得一白色固體2.30g(100％)
MS(ES+ve)M+H=515MS(ES-ve)M-H=5131H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.44(9H,s),2.25(3H,d,J=7.2Hz),2.75-3.03(2H,m),3.27(1H,m),3.96-4.13(4H,m),7.30(1H,dd,J=1.4,8.4Hz),7.44(3H,m),7.74(1H,s),7.74-7.88(4H,m),12.65(1H,s).
c)N”-[4-丁氧基-3S-(2-氧代-N-(N’,N’-2-二甲氨基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥乙酸)-4-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(0.6g,1.16mmol)、EDC(0.25g,1.28mmol)和HOAT(0.17g,1.28mmol)的DMF(11ml)液于室溫氬氣下攪拌10分鐘，然后加入2-(二甲氨基)乙胺(0.15ml,1.40mmol)并于室溫氬氣下攪拌過夜。蒸發(fā)掉DMF后將殘余物分配于乙酸乙酯和水中。有機層用水(×2)、碳酸氫鈉溶液(×2)和鹽水洗滌后干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。硅膠色譜(二氯甲烷-甲醇)分離后得標題所示的化合物(62％)。
MS(ES+ve)M+H=5851H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),1.45(9H,s),2.18(6H,s),2.30(3H,d,J=4.5Hz),2.36(2H,t,J=6.8Hz),2.82-3.05(2H,m),3.19-3.40(4H,m),3.77(1H,d,J=15.5Hz),3.94(1H,d,J=17.0Hz),4.15(1H,d,J=9.5Hz),7.29(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.46(2H,m),7.59(1H,s),7.67(1H,m),7.75-7.86(5H,m).
d)N”-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-氧代-N-(N’,N’-2-二甲氨基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 裂解叔-丁基酯，用O-芐基羥胺偶合羧酸形成異羥肟酸，用Pd-BaSO4氫解得標題所示的化合物。
MS(ES+ve)M+Na=556,M+H=544MS(ES-ve)M-H=5421H NMR(DMSO-d6):0.81(9H,s),2.20(3H,d,J=4.5Hz),2.74(1H,dd,J=3.7,13.6Hz),2.82(3H,s),2.83(3H,s),2.89(1H,d,J=13.7Hz),3.14(2H,d,J=5.2Hz),3.33(1H,td,J=4.0,10.2Hz),3.43(2H,m),3.82(1H,d,J=15.5Hz),3.93(1H,d,J=15.5Hz),3.97(1H,d,J=9.6Hz),4.11(1H,d,J=9.5Hz),7.22(1H,dd,J=1.2,8.4Hz),7.45(3H,m),7.54(1H,s),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.77(1H,d,J=7.5Hz),7.84(2H,d,J=8.7Hz),8.00(1H,t,J=5.7Hz),9.29(1H,s),11.09(1H,s).
實施例37N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-氧代-N-(2’-乙酰氧基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺
a)N’-[4-丁氧基-3S-(2-氧代-N-(2-羥乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 按實施例36c，2-氨基乙醇與N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥乙酸)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺反應(yīng)，制得標題所示的化合物。
MS(ES+ve)M+Na=580,M+H=5581H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),1.45(9H,s),2.29(3H,d,J=4.5Hz),2.85(1H,m),2.95(1H,m),3.20(2H,m),3.32(1H,m),3.42(2H,m),3.78(1H,d,J=15.3Hz),3.94(1H,d,J=15.3Hz),3.98(1H,d,J=8.1Hz),4.15(1H,d,J=9.60Hz),4.68(1H,t,J=5.6Hz),7.28(1H,dd,J=1.6,8.4Hz),7.45(2H,m),7.59(1H,s),7.68(2H,m),7.77(2H,m).
b)N’-[4-丁氧基-3S-(2-氧代-N-(2-乙酰氧基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 0℃下，向N’-[4-丁氧基-3S-(2-氧代-N-(2-羥乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(0.8g,1.05mmol)、吡啶(0.25ml,3.15mmol)和DMAP(少許晶體)的二氯甲烷液(8.5ml)中加入乙酸酐?；旌衔镉?℃下攪拌1小時，然后加入乙酸乙酯稀釋，用稀HCl(×2)、碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)和濃縮。經(jīng)硅膠色譜(己烷/乙酸乙酯-1∶4)分離得0.56g產(chǎn)品(88％)。
MS(ES+ve),M+H=6001H NMR(DMSO-d6):0.82(9H,s),1.45(9H,s),1.99(3H,s),2.31(3H,d,J=4.5Hz),2.82-3.05(2H,m),3.31-3.40(3H,m),3.79(1H,d,J=15.5Hz),3.95(1H,d,J=6.3Hz),4.02(1H,d,J=16.4Hz),4.16(1H,d,J=9.6Hz),7.28(1H,dd,J=1.3,8.3Hz),7.46(2H,m),7.59(1H,s),7.70-7.93(6H,m).
c)N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-氧代-N-(2’-乙酰氧基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 用TFA從N’-[4-丁氧基-3S-(2-氧代-N-(2-乙酰氧基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺中除去叔-丁基酯，同前述的羥基胺偶和，得標題所示的化合物。
MS(ES+ve)M+Na=581,M+H=5591H NMR(DMSO-d6):0.80(9H,s),2.01(3H,s),2.17(3H,d,J=4.5Hz),2.75(1H,m),2.88(1H,m),3.32(3H,m),3.70(1H,d,J=15.6Hz),3.90(1H,d,J=16.0Hz),3.94(1H,d,J=9.9Hz),4.03(2H,t,J=5.7Hz),4.13(1H,d,J=9.6Hz),7.22(1H,dd,J=1.3,8.3Hz),7.43(3H,m),7.54(1H,s),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.76(1H,d,J=9.0Hz),7.83(2H,m),7.86(1H,d,J=9.7Hz),9.19(1H,s),11.07(1H,s).
實施例38N’-[4-(N-羥氨基)-3S-N-(2-羥乙基)氨基甲?；籽趸?2R-(2-萘基甲基)丁二?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 室溫下，將N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-氧代-N-(2’-乙酰氧基乙基)乙酰氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺(0.27g,0.49mmol)的二噁烷(4.4ml)/水(3ml)溶液與LiOH.H2O(0.062g,1.47mmol)攪拌2小時。加入Amberlite IR-120樹脂(陽離子交換樹脂)至pH=4，然后將混合物過濾，濃縮，與甲苯共沸并且真空下干燥得一白色固體。經(jīng)制備HPLC純化得到標題所示的化合物。
MS(ES+ve)M+Na=539,M+H=517MS(ES-ve)M-H=5151H NMR(DMSO-d6):0.81(9H,s),2.15(3H,d,J=4.5Hz),2.72(1H,dd,J=3.9,13.5Hz),2.85(1H,dd,J=10.7,13.5Hz),3.12(1H,m),3.21(1H,m),3.34(1H,m),3.42(2H,t,J=6.5Hz),3.69(1H,d,J=15.4Hz),3.87(1H,d,J=15.4Hz),3.93(1H,d,J=9.7Hz),4.12(1H,d,J=9.7Hz),7.23(1H,dd,J=1.5,8.4Hz),7.45(3H,m),7.54(1H,s),7.61(1H,t,J=5.8Hz),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.77(1H,d,J=7.5Hz),7.82(1H,d,J=8.1Hz),7.89(1H,d,J=9.6Hz),9.30(1H,s),11.09(1H,s).
實施例39N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；?3S(2-氧代苯甲酰甲基)]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用苯甲酰甲基溴替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES-ve)M-H=5321H NMR(DMSO-d6):0.89(9H,s),2.5-2.53(3H,obs),3.20(2H,d,J=8Hz),3.50-3.60(1H,m),3.83(1H,d,J=15Hz),3.91(1H,d,J=15),4.19(1H,d,J=9Hz),4.21(1H,d,J=5Hz),6.89(1H,s),7.3-7.49(8H,m),7.76(1H,s),7.8-7.9(4H,m),7.97(1H,brd,J=9),9.39(1H,s).
N’-[4-叔丁氧基-3S-(2RS-羥基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺(A)和N’-[4-叔丁氧基-3S-(3-羥基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(B) 將N’-[3S-烯丙氧基-4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(4.0g,8.05mmol)和Wilkinson’s催化劑(225mg)的THF溶液(70ml)冷卻至0℃，然后通過注射器加入兒茶酚甲硼烷(2.58ml,24.2mmol)?；旌衔镉?℃下攪拌30分鐘后室溫下攪拌1小時，然后加入1∶1的THF/乙醇(25ml)、pH7的磷酸緩沖鹽(25ml)和27.5％的過氧化氫溶液(25ml)，將該混合物于室溫下攪拌24小時。蒸發(fā)除去THF后加入鹽水和乙酸乙酯。產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中，用碳酸鈉溶液和鹽水洗滌提取物后干燥(Na2SO4)并濃縮。經(jīng)硅膠柱色譜(乙酸乙酯/己烷)純化得A)0.627g(15％)和B)1.958g(47％)。
A)MS ES+ve M+H=5151H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.04和1.05(3H,2×d,J=6.0Hz),1.44(9H,s),2.24和2.26(3H,2×d,J=4.5Hz),2.84(1H,dd,J=5.0,14.0Hz),2.96(1H,m),3.10-3.38(3H,m),3.69(1H,m),3.85和3.87(1H,2×d,J=8.0Hz),4.09(1H,d,J=9.5Hz),4.48和4.53(1H,2×d,J=4.5Hz),7.30(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.44(3H,m),7.61(1H,s),7.69-7.86(4H,m).
B)MS ES+ve M+H=515,M+Na=5371H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.45(9H,s),1.63(2H,m),2.20(3H,d,J=4.5Hz),2.76(1H,dd,J=5.0,13.5Hz),2.95(1H,dd,J=10.0,13.5Hz),3.20(1H,m),3.32-3.55(4H,m),3.79(1H,d,J=8.5Hz),4.08(1H,d,J=9.5Hz),4.35(1H,t,J=5.0Hz),7.29(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.32(1H,m),7.44(2H,m),7.60(1H,s),7.70(1H,d,J=9.5Hz),7.74-7.84(3H,m).
實施例40N’-[3S-(3-乙酰氧基丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 a)N’-[3S-(3-乙酰氧基丙氧基)-4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 0℃下，向N’-[4-丁氧基-3S-(3-羥基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(193mg,0.38mmol)、吡啶(0.092ml,1.14mmol)和DMAP(少許晶體)的二氯甲烷液(3ml)中加入乙酸酐(0.053ml,0.56mmol)?；旌衔镉谑覝叵聰嚢?小時，然后加入乙酸乙酯稀釋，用1N HCl(2×)、碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，干燥和濃縮，得207mg產(chǎn)品。
1H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),1.45(9H,s),1.78(2H,m),1.99(3H,s),2.20(3H,d,J=4.5Hz),2.76(1H,dd.J=5.0,14.0Hz),2.95(1H,dd,J=10.0,14.0Hz),3.21(1H,m),3.39(1H,m),3.50(1H,m),3.82(1H,d,J=8.5Hz),4.05(2H,m),4.08(1H,d,J=9.5Hz),7.28(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.33(1H,m),7.44(2H,m),7.59(1H,s),7.71(1H,d,J=9.5Hz),7.75-7.85(3H,m).
b)N’-[3S-(3-乙酰氧基丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺
由N’-[3S-(3-乙酰氧基丙氧基)-4-叔丁氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺，經(jīng)TFA對酯脫保護和用羥基胺偶合生成的酸得到標題所示的化合物。
MS ES-ve M-H=514MS ES+ve M+H=5161H NMR(DMSO-d6):0.82(9H,s),1.74(2H,m),1.99(3H,s),2.05(3H,d,J=4.5Hz),2.65(1H,dd,J=3.0,13.5Hz),2.82(1H,dd,J=11.0,13.5Hz),3.23(1H,m),3.29(1H,m,部分不可見),3.45(1H,m),3.79(1H,d,J=9.5Hz),3.96-4.04(3H,m),7.01(1H,m),7.25(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.61(1H,d,J=8.5Hz),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=7.5Hz),7.84(1H,d,J=7.5Hz),9.12(1H,s),10.91(1H,s).
實施例41N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(3-羥基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 室溫下，將N’-[3S-(3-乙酰氧基丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(115mg,0.223mmol)與LiOH·H2O(28mg,0.67mmol)的1,4-二噁烷(2ml)/水(1.5ml)溶液攪拌1小時。加入Amberlite樹脂-IR120(陽離子交換樹脂)降低pH值至3-4。產(chǎn)物與甲苯共沸，用醚研磨并且真空下干燥，得一白色固體產(chǎn)物(89mg)。
MS ES-ve M-H=472MS ES+ve M+H=4741H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),1.59(2H,m),2.06(3H,d,J=4.5Hz),2.66(1H,dd,J=4.0,13.5Hz),2.83(1H,dd,J=11.0,13.5Hz),3.20(1H,m),3.24(1H,m.部分不可見),3.36-3.48(3H,m),3.76(1H,d,J=9.5Hz),4.02(1H,d,J=9.5Hz),4.35(1H,brs,用D2O交換),7.04(1H,m),7.25(1H,d,J=8.5Hz),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.58(1H,d,J=8.5Hz),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=7.5Hz),7.83(1H,d,J=7.5Hz),9.08(1H,s),10.91(1H,s).
實施例42N’-[3S-(3-二甲氨基丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 a)N’-[4-叔丁氧基-3S-(3-二甲氨基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 0℃下，向N’-[4-丁氧基-3S-(3-羥基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(800mg,1.56mmol)和三乙胺(0.326ml,2.34mmol)的二氯甲烷液(8ml)中加入甲磺酰氯(0.145ml,1.87mmol)。將混合物攪拌40分鐘，然后加入二氯甲烷稀釋，用2N HCl和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)和濃縮，得到白色泡沫狀甲磺酰酸酯(895mg,97％)。
乙醇(6ml)中的甲磺酰酸酯(660mg)和二甲胺(3ml)于密封容器中攪拌20小時，蒸發(fā)溶劑后加入乙酸乙酯和飽和碳酸鈉溶液，產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中。提取物用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)和蒸發(fā)。過一短硅膠(用二氯甲烷/甲醇洗脫)得到白色泡沫(520mg,86％)。
MS ES+ve M+H=5421H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.44(9H,s),1.61(2H,m),2.11(6H,s),2.20(3H,d,J=4.5Hz),2.27(2H,m),2.76(1H,dd,J=4.5,13.5Hz),2.95(1H,dd,J=10.0,13.5Hz),3.19(1H,m),3.32(1H,m,部分不可見),3.46(1H,m),3.80(1H,d,J=8.5Hz),4.09(1H,d,J=9.5Hz),7.28(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.33(1H,m),7.44(2H,m),7.60(1H,s),7.69(1H,d,J=9.5Hz),7.75(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=7.5Hz),7.84(1H,d,J=7.5Hz).
b)N’-[3S-(3-二甲氨基丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 用TFA從N’-[4-叔丁氧基-3S-(3-二甲氨基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺中除去叔-丁基酯，將TFA鹽轉(zhuǎn)化為HCl鹽，用O-芐基羥基胺偶和，經(jīng)氫解除掉O-芐基，得標題所示的化合物。
MS ES-ve M-H=499MS ES+ve M+H=5011H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),1.59(2H,m),2.09(3H,d,J=4.5Hz),2.14(6H,s),2.27(2H,m),2.74(1H,dd,J=4.0,13.5Hz),2.85(1H,dd,J=11.0,13.5Hz),3.19(1H,m),3.37(2H,m,部分不可見),3.76(1H,d,J=9.0Hz),4.05(1H,d,J=9.5Hz),7.12(1H,m),7.26(1H,dd,J=1.0,8.5Hz),7.43(2H,m),7.56(1H,d,J=9.5Hz),7.57(1H,s),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=7.5Hz),7.83(1H,d,J=7.5Hz),9.03(1H,s),11.25(1H,寬s).
實施例43N’-[3S-(2-RS-乙酰氧基丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 按實施例40操作，由N’-[4-叔丁氧基-3S-(2RS-羥基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制得。
MS ES-ve M-H=514MS ES+ve M+H=5161H NMR(DMSO-d6):約2∶1的非對映異構(gòu)體混合物,0.82(9H,s),1.11和1.12(3H,2×d,J=6.5Hz),1.96和1.97(3H,2×s),2.02和2.05(3H,2×d,J=4.5Hz),2.68(1H,m),2.80(1H,m),3.23-3.50(3H,m),3.86(1H,m),4.00和4.01(1H,2×d,J=9.5Hz),4.80(1H,m),7.0(1H,m),7.25(1H,d,J=8.5Hz),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.61(1H,m),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.77-7.84(2H,m),9.12和9.14(1H,2×s),10.90(1H,s).
實施例44N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-RS-羥基丙氧基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 按實施例41操作，用氫氧化鋰裂解N’-[3S-(2-RS-乙酰氧基丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺中的乙酸酯而制得。
MS ES-ve M-H=472MS ES+ve M+H=4741H NMR(DMSO-d6): 約2∶1的非對映異構(gòu)體混合物,0.83(9H,s),0.98和1.00(3H,2×d,J=6.5Hz),2.09和2.11(3H,2×d,J=4.5Hz),2.67-2.89(2H,m),3.08-3.29(3H,m),3.65(1H,m),3.83和3.84(1H,2×d,J=9.5Hz),4.03(1H,d,J=9.5Hz),4.50和4.51(1H,2×d,J=4.5Hz),7.12和7.19(1H,2×m),7.25(1H,m),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.62(1H,m),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.77-7.84(2H,m),9.09和9.11(1H,2×s),10.86和10.90(1H,s).
N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 將丙酮(24ml)、叔丁醇(6ml)和水(6ml)中的N’-[3S-烯丙氧基-4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(2.0g,4.03mmol)、N-甲基嗎啉N-氧化物(520mg,4.43mmol)及四氧化鋨(t-丁醇中2.5％溶液0.8ml)于室溫下攪拌24小時。加入少許固體四氧化鋨晶體并將混合物再攪拌24小時。除去溶劑，用短硅膠柱(乙酸乙酯)過濾混合物得到白色泡沫狀中間體二醇(2.098g,98％)。
將二醇和高碘酸鈉(973mg,4.55mmol)的1,4-二噁烷(36ml)/水(12ml)溶液于室溫下攪拌5小時。再加入一批高碘酸鈉(90mg)繼續(xù)攪拌1小時。加入氫硼化鈉(757mg,20mmol)，攪拌30分鐘后將反應(yīng)用飽和氯化銨溶液驟冷并除去溶劑。加入乙酸乙酯和1N HCl，產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中。用碳酸氫鈉溶液、鹽水洗滌提取物，干燥(Na2SO4)和濃縮。經(jīng)硅膠色譜(80％己烷中的乙酸乙酯)分離得白色泡沫狀產(chǎn)物(1.63g,82％)。
MS ES+ve M+H=5011H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.44(9H,s),2.25(3H,d,J=4.5Hz),2.82(1H,dd,J=5.0,13.5Hz),2.96(1H,dd,J=10.0,13.5Hz),3.20(1H,m),3.36(1H,m),3.46-3.54(3H,m),3.88(1H,d,J=8.0Hz),4.10(1H,d,J=9.5Hz),4.51(1H,t,J=5.5Hz),7.30(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.44(3H,m),7.61(1H,s),7.72-7.86(4H,m).
實施例45N’-[3S-(2-乙酰氧基乙氧基)4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 按實施例40操作，由N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制得。
MS ES-ve M-H=500MS ES+ve M+H=5021H NMR(DMSO-d6):0.82(9H,s),1.99(3H,s),2.05(3H,d,J=4.5Hz),2.67(1H,m).2.82(1H,dd,J=11.0,13.0Hz),3.26(1H,m,部分不可見),3.46(1H,m),3.59(1H,m),3.85(1H,d,J=9.5Hz),4.00-4.04(3H,m),7.02(1H,m),7.24(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.63(1H,d,J=9.5Hz),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.77(1H,d,J=7.5Hz),7.83(1H,d,J=7.5Hz),9.14(1H,s),10.92(1H,s).
實施例46N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 用氫氧化鋰裂解乙酸酯由N’-[3S-(2-乙酰氧基乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制得。
MS ES-ve M-H=458MS ES+ve M+H=4601H NMR(DMSO-d6):0.83(9H,s),2.12(3H,d,J=4.5Hz),2.74(1H,dd,J=4.0,13.5 Hz),2.85(1H,dd,J=10.5,13.5Hz),3.19(1H,m),3.29-3.43(4H,m),3.83(1H,d,J=9.0Hz),4.05(1H,d,J=9.5Hz),4.51(1H,寬s,用D2O交換),7.19(1H,m),7.25(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.43(2H,m),7.57(1H,s),7.62(1H,d,J=9.5Hz),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=7.5Hz),7.83(1H,d,J=7.5Hz),9.07(1H,s),10.96(1H,寬s).
實施例47N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S(2-N-琥珀酰亞胺基乙氧基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 a)N’-[4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)-3S-(2-N-琥珀酰亞胺基乙氧基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 室溫下，將N’-[4-丁氧基-3S-(3-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺(320mg,0.64mmol)、三苯膦(336mg,1.28mmol)、DEAD(0.202ml,1.28mmol)和琥珀酰亞胺(127mg,1.28mmol)的THF液(4ml)攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)硅膠色譜(用乙酸乙酯/己烷洗脫)分離得到標題所示的化合物，產(chǎn)物中的少量雜質(zhì)三苯膦氧化物在下一步驟除去。
MS ES+ve M+H=582,M+Na=604b)N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(2-N-琥珀酰亞胺基乙氧基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 用TFA從N’-[4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)-3S-(2-N-琥珀酰亞胺乙氧基)-琥珀?；鵠-S-叔亮氨酸甲酰胺裂解叔-丁基酯，經(jīng)色譜分離(除去三苯膦氧化物)，用標準條件將羧酸轉(zhuǎn)化為異羥肟酸，得標題所示的化合物。
MS ES-ve M-H=539MS ES+ve M+H=541,M+Na=5631H NMR(DMSO-d6):0.85(9H,s),2.06(3H,d,J=4.5Hz),2.60(4H,s),2.64(1H,dd,J=3.5,13.5Hz),2.82(1H,dd,J=11.0,13.5Hz),3.22(1H,m),3.27-3.50(4H,m,部分不可見),3.81(1H,d,J=9.5Hz),4.04(1H,d,J=9.5Hz),7.04(1H,m),7.23(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.61(1H,d,J=9.5Hz),7.73(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=7.5Hz),7.84(1H,d,J=7.5Hz),9.13(1H,s),10.92(1H,s).
實施例48N’-[3S-(2-二甲氨基乙氧基)4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 按與實施例42類似方式操作，由N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺制得。
MS ES-ve M-H=485MS ES+ve M+H=4871H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),2.10(3H,d,J=4.5Hz),2.14(6H,s),2.35(2H,m),2.74(1H,dd,J=4.0,13.5Hz),2.86(1H,dd,J=10.5,13.5Hz),3.22(1H,m),3.30-3.50(2H,m,部分不可見),3.80(1H,d,J=9.0Hz),4.04(1H,d,J=9.5Hz),7.12(1H,m),7.25(1H,dd,J=1.0,8.5Hz),7.44(2H,m),7.56(1H,d,J=9.5Hz),7.58(1H,s),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=7.5Hz),7.84(1H,d,J=7.5Hz),9.06(1H,s),11.08(1H,寬s).
實施例49N’-[3S-(2-乙酰氧基乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 按與實施例40類似方式操作，由N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺制得。
MS ES-ve M-H=514MS ES+ve M+H=516,M+Na=5381H NMR(DMSO-d6):0.66(3H,t,J=7.0Hz),0.83(9H,s),1.99(3H,s),2.50-2.70(3H,m,部分不可見),2.84(1H,m),3.28(1H,m,部分不可見),3.47(1H,m),3.60(1H,m),3.85(1H,d,J=9.5Hz),4.01-4.04(3H,m),7.21(1H,m),7.25(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.43(2H,m),7.57(1H,s),7.63(1H,d,J=8.5Hz),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.75-7.85(2H,m),9.14(1H,s),10.93(1H,s).
實施例50N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 通過用氫氧化鋰從N’-[3S-(2-乙酰氧基乙基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺裂解掉乙酸酯而制得。
MS ES-ve M-H=472MS ES+ve M+H=4741H NMR(DMSO-d6):0.71(3H,t,J=7.0Hz),0.84(9H,s),2.58-2.76(3H,m),2.86(1H,m),3.20(1H,m),3.29-3.44(4H,m),3.82(1H,d,J=9.5Hz),4.05(1H,d,9.5Hz),4.53(1H,t,J=5.5Hz),7.25(1H,dd,J=1.5,8.5Hz),7.35(1H,m),7.43(2H,t),7.57(1H,s),7.61(1H,d,J=9.5Hz),7.73(1H,d,J=8.5Hz),7.77(1H,d,J=7.5Hz),7.83(1H,d,J=7.5Hz),9.09(1H,s),10.88(1H,s).
實施例51N’-[3S-(2-二甲氨基乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 按與實施例42類似方式操作，由N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺制得。
MS ES-ve M-H=499ES+ve M+H=5011H NMR(DMSO-d6):0.70(3H,t,J=7.0Hz),0.85(9H,s),2.22(6H,s),2.45(2H,m,部分不可見),2.60-2.76(3H,m),2.87(1H,dd,J=10.5,13.0Hz),2.24(1H,m),3.41(1H,m),3.49(1H,m),3.81(1H,d,J=9.0Hz),4.04(1H,d,J=9.5Hz),7.26(1H,dd,J=1.0,8.5Hz),7.30(1H,s),7.44(2H,m),7.56(2H,m),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.77(1H,d,J=7.5Hz),7.80(1H,m),9.08(1H,s),11.10(1H,brs).
實施例52N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-(1-咪唑基)乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 a)N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-(1-咪唑基)乙氧基)2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 將N-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺(按與實施例42類似操作)和咪唑(115mg,1.69mmol)的DMF(10ml)溶液100℃加熱7小時制得甲磺酰酸酯(456g,0.770mmol)。蒸發(fā)除去DMF后加入乙酸乙酯和碳酸鈉溶液。產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中，提取物用鹽水洗滌后干燥(Na2SO4)和蒸發(fā)。經(jīng)硅膠色譜(用二氯甲烷/甲醇洗脫)分離得到標題所示的白色泡沫化合物(44％)。
MS ES+ve M+H=5651H NMR(DMSO-d6):0.80(3H,t,J=7.0Hz),0.86(9H,s),1.37(9H,s),2.70-2.85(3H,m),2.96(1H,dd,J=9.5,13.0Hz),3.25(1H,m),3.57(1H,m),3.70(1H,m),3.80(1H,d,J=7.5Hz),4.04-4.20(3H,m,包括4.12處的d,J=9.5Hz),6.90(1H,s),7.23(1H,m),7.26(1H,s),7.40-7.48(3H,m),7.62(1H,m),7.70(1H,s),7.74-7.85(4H,m).
b)N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-(1-咪唑基)乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 用TFA從N’-[4-丁氧基-3S-(2-(1-咪唑基)乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺中除去叔-丁基酯，將TFA鹽轉(zhuǎn)化為HCl鹽，用O-芐基羥基胺偶和，通過氫解除掉O-芐基，得標題所示的化合物。
MS ES-ve M-H=522MS ES+ve M+H=524,1H NMR(DMSO-d6):0.67(3H,t,J=7.0Hz),0.82(9H,s),2.50-2.68(3H,m),2.84(1H,dd,J=11.0,13.5Hz),3.32(1H,m,部分不可見),3.55(1H,m),3.65(1H,m),3.88(1H,d,J=9.5Hz),4.01-4.11(3H,m),6.87(1H,s),7.18(1H,s),7.19-7.26(2H,m),7.43(2H,m),7.55(1H,s),7.62(1H,s),7.71(1H,d,J=9.5Hz),7.73(1H,d,J=8.5Hz),7.77(1H,d,J=7.5Hz),7.80(1H,d,J=7.SHz),9.15(1H,s),10.93(1H,s).
實施例53
N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-甲氧基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 a)N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-甲氧基乙氧基)2R-(2-萘基甲基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 向N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺(617mg,1.2mmol)和質(zhì)子海綿狀物(514mg,2.4mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入四氟硼酸三甲氧鎓(355mg,2.4mmol)。室溫下攪拌3小時后再加入一定量的質(zhì)子海綿狀物(130mg)和四氟硼酸三甲氧鎓(90mg)繼續(xù)攪拌2小時。加入乙酸乙酯和2N HCl，產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中。用碳酸氫鈉溶液、鹽水洗滌提取物，干燥(MgSO4)和濃縮。經(jīng)硅膠色譜(乙酸乙酯/己烷洗脫)分離得白色泡沫狀產(chǎn)物(88％產(chǎn)率)。
MS ES+ve M+H=529,M+Na=5511H NMR(DMSO-d6):0.77(3H,t,J=7.2Hz),0.86(9H,s),1.44(9H,s),2.72-2.81(3H,m),2.97(1H,dd,J=10.0,14.0Hz),3.22(1H,m),3.24(3H,s),3.41-3.47(3H,m),3.60(1H,m),3.86(1H,d,J=8.0Hz),4.09(1H,d,J=9.5Hz),7.29(1H,dd,J=8.5,10.0Hz),7.40-7.55(3H,m),7.60(1H,s),7.70(1H,d,J=9.5Hz),7.75(1H,d,J=8.5Hz),7.77-7.85(2H,m).
b)N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-甲氧基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 用TFA除去N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-甲氧基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺中的叔-丁基酯，如上所述將生成的羧酸轉(zhuǎn)化為異羥肟酸得標題所示的化合物。
MS ES-ve M-H=486MS ES+ve M+H=488,M+Na=5101H NMR(DMSO-d6):0.67(3H,t,J=7.5Hz),0.85(9H,s),2.50-2.69(3H,m,部分不可見),2.84(1H,m),3.20(3H,s),3.24(1H,m),3.39(3H,m),3.52(1H,m),3.80(1H,d,J=9.5Hz),4.03(1H,d,J=9.5Hz),7.24(2H,m),7.43(2H,m),7.58(2H,m),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.75-7.85(2H,m),9.10(1H,s),10.90(1H,s).
實施例54N’-[3S-乙氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-苯并噻吩基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-3S-羥基-2R-4-甲氧基-(2-苯并噻吩基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用碘甲烷替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=4501H NMR(DMSO-d6):0.87(9H,s),1.04(3H,t,J=6.9Hz),2.23(3H,d,J=4.5Hz),2.71(1H,td,J=1.8Hz,15.6Hz),2.99(1H,t,J=15.6Hz),3.21(2H,m),3.43(1H,m),3.74(1H,d,J=9.5Hz),4.14(1H,d,J=9.5Hz),7.07(1H,s),7.28(2H,m),7.40(1H,q,J=4.6Hz),7.65(1H,d,J=7.3Hz),7.82(2H,m),9.10(1H,s),10.90(1H,s).
實施例55N’-[4-(N-羥氨基)-3S-環(huán)己基氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用環(huán)己烯基溴替代烯丙基溴烷基化，然后氫化。
MS(ES+ve)M+H=4981H NMR(DMSO-d6)0.84(9H,s),1.10(5H,m),1.45(1H,m),1.64(2H,m),1.75(1H,m),1.84(1H,m),2.01(3H,d,J=4.5Hz),2.67(1H,J=4,13.5Hz),2.82(1H,dd,J=13.5,11Hz),3.19(2H,m),3.97(2H,m),6.91(1H,q,J=4.5Hz),7.28(1H,m),7.43(2H,m),7.52(1H,d,J=9Hz),7.59(1H,s),7.79(3H,m),9.07(1H,s),10.87(1H,s).
實施例56N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-羥基-2-苯基乙氧基)-2R(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用苯甲酰甲基溴替代烯丙基溴進行烷基化，用三乙基硅和TFA還原。
MS(ES+ve)M+H=5361H NMR(DMSO-d6)0.88(9H,s),2.19(3H,d,J=4.5Hz),2.82(2H,m),3.23(1H,m),3.40(2H,d),3.89(1H,d,J=9Hz),4.09(1H,d,J=9Hz),4.70(1H,m),5.32(1H,br.s),7.28(7H,m),7.43(2H,m),7.54(1H,s),7.66(1H,d),7.78(3H,m),9.11(1H,s),10.86(1H,s).
實施例57N’-[4-(N-羥氨基)-3S-[2-(嗎啉-4-基)-2-氧代乙氧基]-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用N-(2-溴乙?；?嗎啉酰胺替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=5431H NMR(DMSO-d6)0.80(9H,s),2.11(3H,d,J=4.5Hz),2.71(1H,dd,J=4,14Hz),2.87(1H,dd,J=11,14Hz),3.27-3.64(9H,m),3.91(1H,d,J=9Hz),3.96(1H,d J=12.5Hz),4.03(1H,d,J=9.5Hz),4.13(1H,d,J=12.5Hz),7.19(1H,q,J=4.5Hz),7.26(1H,m),7.45(2H,m),7.58(1H,s),7.75(4H,m),9.14(1H,s),11.08(1H,s).
實施例58N’-[4-(N-羥氨基)-3S-乙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-(N,N二甲基賴氨酸)甲酰胺 MS(ES+ve)M+H=4871H NMR(DMSO-d6)1.06(3H,t,J=7Hz),1.13(1H,m),1,30(4H,m),1.59(1H,m),1.84(3h,d,J=4.5Hz),2.08(8H,m),2.65(1H,dd),2.81(1H,dd),3.16(1H,m),3.30(1H,m,部分被水遮蔽),3.45(1H,m),3.78(1H,d,J=9.5Hz),4.00(1H,m),5.86(1H,m),7.29(1H,m),7.45(2H,m),7.64(1H,s),7.85(3H,m),7.98(1H,d),9.02(1H,br.s),11.00(1H,br.s).
實施例59N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-(N,N二甲基-β,β-二甲基-賴氨酸)乙酰胺 MS (ES+ve)M+H=5431H NMR(DMSO-d6)0.66(3H,t,J=7Hz),0.84(9H,m),1.15(2H,m),1.35(2H,m),1.47(2H,m),2.07(8H,m),2.63(2H.m),2.84(1H,dd,J=11,14Hz),3.16-3.40(m,被水遮蔽),3.76(1H,d,J=9.5Hz),4.08(1H,d,J=9.5Hz),7.26(2H,m),7.43(2H,m),7.52(1H,d.J=9.5Hz),7.57(1H,s),7.75(3H,m),9.14(1H,v.br.s),10.87(1H,v.br.s).
實施例60N’-[4-(N-羥氨基)-3S-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基]-2R-(2-萘基甲基基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺制備，用N-(2-溴乙?；?-N’-甲基哌嗪酰胺替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=5561H NMR(DMSO-d6)0.81(9H,s),2.11(3H,d,J=4.5Hz),2.17(3H,s),2.18-2.35(4H,m),2.72(1H,dd,J=4,14Hz),2.88(1H,dd,J=11,14Hz),3.27-3.52(m,部分被水遮蔽),3.91(1H,d,J=9.0Hz),3.96(1H,d,J=12.5Hz),4.03(1H,d,J=9.5Hz),4.13(1H,d,J=12.5Hz),7.16(1H,q,J=4.5Hz),7.26(1H,m),7.44(2H,m),7.58(1H,s),7.65(1H,d,J=9.5Hz),7.70-7.86(3H,m),9.12(1H,s),11.09(1H,s).
實施例61N’-[4-(N-羥氨基)-3S-乙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸叔丁酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸叔-丁酰胺制備，用碘乙烷替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=4861H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),0.92(9H,s),1.05(3H,t,J=7Hz),2.62(1H,dd,J=3,13.5Hz),2.85(1H,dd,J=13,11.5Hz),3.19(1H,m),3.29(1H,m被水遮蔽),3.44(1H,m),3.75(1H,d,J=10Hz),4.08(1H,d,J=9.5Hz),7.07(1H,s),7.25(1H,d,J=8.5Hz),7.41(2H,m),7.48(1H,d,J=9.5Hz),7.56(1H,s),7.71(1H,d,J=8.5Hz),7.77(2H,d,J=8.5Hz),9.10(1H,s),10.92(1H,s).
實施例62N’-[4-(N-羥氨基)-3S-烯丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸叔丁酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸叔-丁酰胺制備，用烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=4981H NMR(DMSO-d6)0.82(9H,s),0.92(9H,s),2.63(1H,dd),2.86(1H,dd),3.24(1H,m),3.79(1H,dd),3.82(1H,d,J=10Hz),3.94(1H,dd),4.07(1H,d,不可見),5.10(1H,dd),5.22(1H,dd,J=1.5,17.5Hz),5.77(1H,m),7.07(1H,s),7.25(1H,dd),7.41(2H,m),7.54(2H,m),7.71(1H,d,J=8.5Hz),7.78(2H,dd,J=8.5Hz),9.10(1H,s),10.93(1H,s).
實施例63N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸叔丁酰胺 與實施例1的a)+b)+c)類似，由N-4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸叔-丁酰胺制備，用碘丙烷替代烯丙基溴進行烷基化。
MS(ES+ve)M+H=5001H NMR(DMSO-d6)0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.84(9H,s),0.97(9H,s),1.45(2H,m),2.63(1H,dd,J=3.5,13.5Hz),2.85(1H,dd,J=11.5Hz),3.18(2H,m),3.11(1H,m,被水遮蔽),3.75(1H,d,J=9.5Hz),4.07(1H,m),7.06(1H,s),7.25(1H,d,J=8.5Hz),7.44(3H,m),7.56(1H,s),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.78(2H,d,8.5Hz),9.09(1H,s),10.88(1H,s).
實施例64N’-[4-(N-羥氨基)-3S-烯丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸芐基酯 MS(ES+ve)M+H=5331H NMR(DMSO-d6)0.81(9H,s),2.63(1H,dd,J=3.5,13.5Hz),2.82(1H,dd,J=13.5,8Hz),3.35(1H,m),3.76(1H,dd,J=5.5,13Hz),3.84(1H,d,J=10Hz),3.93(1H,dd,J=5,13Hz),4.18(1H,d,J=9Hz),4.42(1H,d,J=12Hz),4.59(1H,d,J=12.5Hz),5.08(1H,d,J=10.5Hz),5.20(1H,d,J=17Hz),5.74(1H,m),7.13(2H,m),7.23(1H,d,J=8.5Hz),7.29(2H,m),7.42(2H,m),7.57(1H,s),7.68(1H,d,J=8.5Hz),7.80(2H,m),8.05(1H,d),9.11(1H,s),10.98(1H,s).
實施例65N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 MS(ES+ve)M+H=4741H NMR(DMSO-d6)0.81(3H,t,J=7.5Hz),0.85(9H,s),1.44(2H,m),2.64(1H,dd,J=3.5,13.5Hz),2.85(1H,dd,J=13.5,11Hz),3.12(1H,s),3.20(3H,m),3.77(1H,d,J=9.5Hz),3.96(1H,d,J=9.5Hz),7.26(1H,d,J=8.5Hz),7.41(2H,m),7.56(1H,s),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.78(3H,m),9.09(1H,s),10.88(1H,s),10.94(1H,s).
實施例66N’-[4-(N-羥氨基)3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸(N,N-二甲氨基乙-2-基)酰胺 MS(ES+ve)M+H=5141H NMR(DMSO-d6)0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.84(9H,s),1.45(2H,m),2.01(6H,s),2.59(1H,m),2.64(1H,dd),2.74(1H,m),2.84(1H,dd),3.20(2H,m),3.77(1H,d,J=9.5Hz),4.05(1H,d,J=9.5Hz),7.23(2H,m),7.43(2H,m),7.58(2H,m),7.77(3H,m),9.10(1H,s),10.90(1H,s).
實施例67N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸(N,N-二甲氨基乙-2-基)酰胺 MS(ES+ve)M+H=5141H NMR(DMSO-d6)0.33(9H,s),0.76(3H,t,J=7.5Hz),1.37(2H,m),2.12(6H,s),2.70(1H,dd),2.77(1H,dd,J=13.5,12Hz),3.10(4H,m),3.51(1H,m),3.72(1H,d,J=10Hz),4.00(1H,d,J=9.5Hz),7.35(1H,d,J=8.5Hz),7.41(2H,m),7.64(1H,d,J=9.5Hz),7.70(1H,s),7.77(4H,m),9.09(1H,s),10.92(1H,s).
實施例68N’-[4-(N-羥氨基)-3S-乙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-(O-芐基)叔-亮氨醇 MS(ES+ve)M+H=5211H NMR(DMSO-d6)0.79(9H,s),0.82(3H,t),1.42(2H,m),2.63(2H,m),2.82(2H,m),3.19(2H,m),3.29(1H,t),3.64(1H,m),3.70(2H,d,J=7Hz),3.79(1H,d,J=10Hz),6.99(1H,d,J=6.5Hz),7.25(4H,m),7.42(3H,m),7.60(1H,s),7.68(1H,d,J=8.5Hz),7.79(2H,m),9.10(1H,s),10.97(1H,s).
實施例69N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-[S-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 ⅰ)2R-1,2,3,4-四氫化萘-2-甲基乙醇 于0-5℃下，用1M LiALH4的THF溶液(12.85ml)處理干THF(35ml)中的2R-1,2,3,4-四氫化萘甲酸(2.26g,12.84ml)(按Chariton等，《合成通訊》Synlett.(1990),333描述的方法制備)，將所得的混合物在0-5℃下攪拌0.25小時，隨后在室溫下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物用水(1ml)、2M NaOH溶液(1ml)處理后用C鹽過濾。蒸發(fā)濾液至干并且將其殘余物分配到乙醚和稀NaHCO3溶液中。醚層被分離，用稀NaHCO3溶液(×3)和鹽水(×1)洗滌后用MgSO4干燥。經(jīng)過濾和蒸發(fā)至干燥。粗產(chǎn)物用硅膠色譜分離得到標題所示化合物1.51g。
1H NMR(CDCl3)1.45(2H,m),1.97(2H,m),2.50(1H,dd,J=10.5,16.5Hz),2.87(3H,m),3.64(2H,br.s),7.09(4H,m). +88.2(c=0.53,CHCl3)ⅱ)三氟甲磺酸[(R)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]酯 于0-5℃下，將干二氯甲烷中(20ml)的乙醇(1.47g,9.07mmol)和吡啶(0.72g,9.07mmol)滴加到triflic酐(2.56g,9.07mmol)的二氯甲烷溶液中。將所得的混合物在用冷的稀H2SO4(×3)、用冷的稀NaHCO3溶液(×3)和鹽水(×1)洗滌前于同溫度下攪拌2小時。用MgSO4干燥有機溶液、經(jīng)過濾和蒸發(fā)得到標題所示的金黃色化合物(2.56g)。
1H NMR(CDCl3)1.55(1H,m),2.05(1H,m),2.35(1H,m),2.60(1H,dd,J=10.5,16.5Hz),2.88(3H,m),4.48(1H,d,J=9.5Hz),4.53(1H,d,J=9.5Hz),7.14(4H,m).
ⅲ)二乙基(2R,3S)-3-羥基-2-[(S)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]琥珀酸酯 于-70℃氬氣下，向1M LHMDS的THF溶液(33.7ml)中滴加干THF(25ml)中的S-二乙基蘋果酸酯(2.94g,15.3mmol)，加入過程中保持溫度低于-50℃。溶液于-70℃下攪拌2小時，然后在低于-60℃的溫度下緩慢滴加上述干THF(20ml)中的上述triflate(15.3mmol)。將反應(yīng)溶液在-70℃至室溫的溫度下攪拌18小時，然后傾入冷的稀HCl并且產(chǎn)物用乙醚(×3)提取。合并提取物用稀HCl(×1)、飽和NaHCO3溶液(×3)和鹽水(×1)洗滌后，經(jīng)MgSO4干燥、過濾和蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。用硅膠色譜分離得到標題所示的純化合物(2.11g)。
MS(ES+ve)M+Na=3571H NMR(CDCl3)1.24(3H,t,J=7.0Hz),1.32(3H,t,J=7.0Hz),1.45(1H,m),1.67(1H,m),1.83(1H,m),1.97(1H,m),2.45(1H,dd,J=10,16Hz),2.82(2H,m),2.93(1H,dd,J=4,16Hz),3.18(1H,d,J=7.5Hz),4.13(2H,m),4.27(3H,m),7.08(4H,m).
ⅳ)二乙基(2R,3S)-3-烯丙氧基-2-[(S)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]琥珀酸酯 將干DMF(15ml)中的上述(ⅲ)乙醇(1.62g,4.85mmol)和烯丙基溴(5.87g,48.5mmol)用60％的NaH油(0.233g,5.82mmol)處理，混合物于室溫下攪拌1.25小時。加入飽和NH4Cl后蒸發(fā)混合物接近干燥。殘余物分配到乙醚和水中，分離有機層并用稀HCl(×4)和鹽水(×1)洗滌，溶液經(jīng)MgSO4干燥、過濾和蒸發(fā)得到一橙色油狀物。用硅膠純化得到標題所示化合物(1.61g)。
MS(ES+ve)M+H=3751H NMR(CDCl3)1.26(6H,m),1.38(2H,m),1.71(1H,m),1.86(2H,m),2.37(1H,dd),2.79(2H,m),2.96(1H,dd),3.07(1H,m),3.93(1H,dd,J=6,12.5Hz),4.07(1H,d,J=8Hz),4.17(5H,m),5.18(1H,dd,J=1,10.5Hz),5.25(1H,dd,J=1,15.5Hz),5.85(1H,m),7.07(4H,m).
ⅴ)二乙基(2R,3S)-3-丙氧基-2-[(S)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]琥珀酸酯 將甲醇(30ml)中的上述(ⅳ)O-烯丙基衍生物(1.61g,4.30mmol)于常壓下用10％的Pd/C(500mg)氫化2小時。濾除催化劑并將濾液蒸發(fā)直至干燥，得到標題所示無色油狀化合物(1.56g)。
MS(ES+ve)M+H=3771H NMR(CDCl3)0.89(3H,t,J=7.5Hz),1.26(6H,m),1.38(2H,m),1.58(2H,m),1.70(1H,m),1.83(2H,m),2.35(1H,dd),2.78(2H,m),2.95(1H,dd),3.03(1H,m),3.30(1H,m),3.53(1H,m),3.99(1H,d,J=8.5Hz),4.17(4H,m),7.06(4H,m).
ⅵ)(2R,3S)-3-丙氧基-2-[(S)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]琥珀酸 將二噁烷(12ml)中的上述(ⅴ)二乙酯(1.54g,4.1mmol)用2M的KOH溶液(6.15ml)處理，將該混合物在室溫下攪拌22.5小時，隨后在80℃下攪拌3小時。蒸發(fā)溶液至干并將殘余物溶解于水中再用乙酸乙酯洗滌。水溶液用NaCl飽和并用稀HCl將pH值調(diào)到1。產(chǎn)物用乙酸乙酯(×3)提取，用鹽水(×1)洗滌合并提取物，MgSO4干燥、過濾和蒸發(fā)得到標題所示的白色固體化合物(1.35g)。
MS(ES-ve)M-H=3191H NMR(DMSO-d6)0.84(3H,t,J=7.5Hz),1.33(2H,m),1.47(2H,m),1.67(2H,m),1.82(1H,m),2.30(1H,dd),2.67-2.91(4H,m),3.25(1H,m),3.48(1H,m),3.85(1H,d,J=8Hz),7.05(4H,m),12.20-13.00(2H,v.br.s).
ⅶ)(2R,3S)-3-丙氧基-2-[(S)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]琥珀酸4-甲基酯 將干二氯甲烷(15ml)中的上述(ⅵ)二酸(1.3g,4.1mmol)用冰浴冷卻并用三氟乙酐(8ml)處理?；旌衔镉谑覝叵聰嚢?小時后再于0-5℃下攪拌10分鐘。蒸發(fā)溶液至干燥得到一個相應(yīng)的無色油狀酐(vmax1788cm-1)。將其溶解于甲醇(20ml)并于室溫下攪拌16小時。中再用乙酸乙酯洗滌。水溶液用NaCl飽和并用稀HCl將pH值調(diào)到1。蒸發(fā)溶劑得到標題所示的淡黃色油狀化合物(1.43g)。
MS(ES-ve)M-H=3331H NMR(CDCl3)0.90(3H,t,J=7.5Hz),1.44(2H,m),1.62(2H,m),1.77-1.96(3H,m),2.40(1H,dd),2.80(2H,m),2.97(1H,dd),3.10(1H,m),3.34(1H,m),3.71(1H,m),3,76(3H,s),4.03(1H,d,J=7.5Hz),7.07(4H,m).
ⅷ)N’-[4-甲氧基-3S-丙氧基-2R-[S-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺
將無水DMF(15ml)中的上述(ⅶ)酸液(1.43g,4.28mmol)用HOBt(1.16g,8.56mmol)和EDC(1.64g,8.56mmol)處理，將所得溶液于室溫下攪拌10分鐘。加入S-叔-亮氨酸甲酰胺鹽酸鹽(0.85g,4.71mmol)，然后加入DIPEA(0.66g,5.14mmol)。反應(yīng)液于室溫下攪拌1.25小時。反應(yīng)液蒸發(fā)至干后將殘余物分配于乙酸乙酯和稀HCl中。分離有機層并用稀HCl(×3)、稀NaHCO3溶液(×3)和鹽水(×1)洗滌。經(jīng)MgSO4干燥、過濾和蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物，用硅膠純化得到標題所示的化合物(1.44g)。
MS(ES+ve)M+H=4611H NMR(CDCl3)0.96(3H,t,J=7.5Hz),1.03(9H,s),1.32-1.74(SH,m),1.88(2H,m),2.42(1H,dd),2.73(3H,d,J=5Hz),2.76-3.00(5H,m),3.33(1H,m),3.62(1H,m),3.77(3H,s),3.99(1H,d,J=5Hz),4.09(1H,d,J=9Hz),6.29(1H,m),7.03(5H,m).
ⅸ)N’-[4-羥基-3S-丙氧基-2R-[S-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 向二噁烷(12ml)中的上述(ⅷ)酯(0.68g)溶液中滴加LiOH·H2O(0.124g)的水溶液(5ml)處理。將所得混合物于室溫下攪拌1.75小時并蒸發(fā)接近干燥。將殘余物分配于水和乙酸乙酯中。分離水相乙酸乙酯(×1)洗滌后用NaCl飽和，經(jīng)酸化pH至1，用乙酸乙酯(×3)提取。合并提取物用鹽水(×1)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和蒸發(fā)得到白色固體(0.63g)。
MS(ES+ve)M+H=4471H NMR(DMSO-d6)0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.90(9H,s),1.22(2H,m),1.40-1.61(4H,m),1.73(1H,m),2.24(1H,dd,J=10,16Hz),2.40(3H,d,J=4.5Hz),2.67(2H,m),2.95(2H,m),3.21(1H,m),3.38(1H,m,被水遮蔽),3.78(1H,d,J=9Hz),4.18(1H,d,J=9.5Hz),7.01(4H,m),7.71(1H,q,J=4.5Hz),7.90(1H,d,J=9.5Hz),12.84(1H,br.s).
ⅹ)N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-[S-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 將無水DMF(10ml)中的上述(ⅶ)酸液(0.61g)用HOAt(0.372g)和EDC(0.524g)處理，反應(yīng)液于室溫下攪拌10分鐘。然后加入羥基胺鹽酸鹽(0.285g)和NMM(0.414g)后反應(yīng)液于室溫下攪拌2小時。反應(yīng)液蒸發(fā)至干后將殘余物分配于乙酸乙酯和稀HCl中。分離有機相并用稀HCl、稀NaHCO3溶液和水洗滌。經(jīng)蒸發(fā)至干得到白色固體。用二乙醚研磨后過濾和真空干燥得到標題所示的化合物(0.434g)。
MS(ES+ve)M+H=4621H NMR(DMSO-d6)0.80(3H,t,J=7.5Hz),0.90(9H,s),1.08(1H,m),1.23(1H,m),1.45(4H,m),1.70(1H,m),2.19(1H,dd),2,35(3H,d,J=4.5Hz),2.65(2H,m),2.97(2H,m),3.14(1H,m),3.27(1H,m),3.63(1H,d,J=9.5Hz),4.18(1H,d,J=9.5Hz),7.02(4H,m),7.59(1H,q,J=4.5Hz),7.83(1H,d,J=9.5Hz),9.02(1H,s),10.78(1H,s).
實施例70N’-[3S-(乙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-喹啉基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 于氬氣中，向N’-[4-(N-芐氧基氨基)-3S-(乙氧基)-2R-(2-喹啉基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺(0.17g,0.3mmol)的甲醇(15ml)和環(huán)己烯(5ml)溶液中加入5％Pd-BaSO4(50mg)?；旌衔锛訜峄亓?小時后冷卻，溶液經(jīng)C鹽管塞過濾。蒸發(fā)濾液得一固體，用醚研磨(3×2ml)得到標題所示的白色固體化合物(0.13g,0.28mol,92％)。
MS(ES+ve)[M+H]+=4591H NMR(DMSO-d6):0.66(3H,t J=7.2Hz),0.83(9H,s),1.04(3H,t,J=7.0Hz),2.58(2H,m),2.70(1H,m),2.84(2H,m),3.39(2H,m),3.81(1H,d,J=9.7Hz),4.05(1H,d,J=9.6Hz),7.35(1H,t,J=5.3Hz),7.55(1H,t,J=7.4Hz),7.68(1H,d,J=8.5Hz),7.70(1H,d,J=10.4Hz),7.83(1H,d,J=7.6Hz),7.94(1H,d,7.9Hz),7.97(1H,s),8.60(1H,d,H=2Hz),9.11(1H,s),10.96(1H,s).
實施例71N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(丙氧基)-2R-(2-喹啉基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 向N’-[4-(N-芐氧基氨基)-3S-(丙氧基)-2R-(2-喹啉基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺(0.12g,0.21mmol)的甲醇(15ml)溶液中加入5％Pd-BaSO4(50mg)?；旌衔锱c氫氣環(huán)境中攪拌48小時后經(jīng)C鹽管塞過濾。蒸發(fā)濾液得-固體，用醚研磨(3×2ml)得到標題所示的白色固體化合物(0.05g,0.11mmol,54％)。
MS(ES+ve)[M+H]+=4731H NMR(DMSO-d6):0.66(3H,t,J=7.2Hz),0.81(3H,t,J=7.0Hz),0.83(9H,s),1.43(2H,m),2.58(2H,m),2.70(1H,m),2.84 (2H,m),3.39(2H, m),3.81(1H,d,J=9.7Hz),4.05(1H,d,J=9.6Hz),7.35(1H,t,J=5.3Hz),7.55(1H,t,J=7.4Hz),7.68(1H,d,J=8.5Hz),7.70(1H,d,J=10.4Hz),7.83(1H,d,J=7.6Hz),7.94(1H,d,7.9Hz),7.97(1H,s),8.60(1H,d,H=2Hz),9.11(1H,s),10.96(1H,s).
實施例72N’-[3S-(乙氧基)-2R-(2-(6-氟-)萘基甲基-4-(N-羥氨基))琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 于氬氣中，向N’-[4-(N-芐氧基氨基)-3S-(乙氧基)-2R-(2-(6-氟-)萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺(2.71g,4.49mmol)的甲醇(15ml)和環(huán)己烯(5ml)溶液中加入5％Pd-BaSO4(50mg)?；旌衔锛訜峄亓?小時后冷卻，溶液經(jīng)C鹽管塞過濾。蒸發(fā)濾液得-固體，用醚研磨(3×2ml)得到一白色固體化合物(0.12g,0.26mmol,62％)。
MS(ES+ve)[M+H]+=4761H NMR(DMSO-d6):1.04(9H,s),1.21(3H,t,J=7.0Hz),1.43(3H,t,J=6.6Hz),3.08(2H,m),3.41(2H,m),3.48(2H,q,J=7.0Hz),3.64(1H,d,J=28Hz),3.82(1H,t,J=7.2Hz),4.00(1H,d,J=9.1Hz),7.14(1H,m),7.22(1H,m),7.43(2H,m),7.71(4H,m),7.96(1H,d,J=10.5Hz),9.51(1H,brs).
實施例73N’-[4-(N-羥氨基)-3S-烯丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲酯 按與實施例64類似方法制備。
MS(ES+ve)[M+H]+=4451H NMR(DMSO-d6):0.84(9H,s),1.01(3H,t,J=7Hz),2.68(1H,dd,J=13.5,4Hz),2.73-2.83(1H,m),3.20-3.79(3H,m),3.27(3H,s),3.77(1H,d,J=10Hz),4.15(1H,d,J=9Hz),7.21(1H,dd,J=8,1.5Hz),7.40-7.46(2H,m),7.55(1H,s),7.74(1H,d,J=9Hz),7.75-7.81(2H,m),7.90(1H,d,J=9Hz),9.09 1H,d,J=0.5Hz),10.96(1H,d,J=0.5Hz).
實施例74N’-[4(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-丙氧基琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸異丙基酰胺 與實施例1類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸異丙基酰胺經(jīng)烯丙基溴烷基化、氫化、叔丁酯裂解和異羥肟酸形成而制得。
MS(ES-ve)[M-H]+=4841H NMR(DMSO-d6):0.72(3H,d,J=6.5Hz),0.75(3H,d,J=6.5Hz),0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.84(9H,s),1.40-1.51(2H,m),2.64(1H,dd,J=13,3Hz),2.77-2.91(1H,m),3.18-3.37(3H,m),3.44-3.50(1H,m),3.77(1H,d,J=10Hz),4.06(1H,d,J=10Hz),7.24(1H,dd,J=8,1.5Hz),7.36-7.44(3H,m),7.53(1H,d,J=10Hz),7.55(1H,s),7.70(1H,d,J=8.5Hz),7.72-7.79(2H,m),9.09(1H,s),10.89(1H,s)實施例75N’-[3S-乙氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸異丙基酰胺 與實施例1類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸異丙基酰胺經(jīng)碘乙烷烷基化、氫化、叔丁酯裂解和并羥肟酸形成而制得。
MS(ES-ve)[M-H]+=4701H NMR(DMSO-d6):0.72(3H,d,J=6.5Hz),0.76(3H,d,J=6.5Hz),0.84(9H,s),1.05(3H,t,J=7Hz),2.63(1H,dd,J=13,3Hz),2.80-2.91(1H,m),3.17-3.27(2H,m),3.41-3.51(2H,m),3.76(1H,d,J=10Hz),4.08(1H,d,J=10Hz),7.24(1H,dd,J=8,1.5Hz),7.39-7.44(3H,m),7.53(1H,d,J=10Hz),7.55(1H,s),7.69(1H,d,J=8Hz),7.71-7.78(2H,m),9.08 1H,s),10.89(1H,s).
實施例76N’-[3S-乙氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸(2,2,2-三氟乙基)酰胺 與實施例1類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸(2,2,2-三氟乙基)酰胺經(jīng)烯丙基溴烷基化、氫化、叔丁酯裂解和異羥肟酸形成而制得。
MS(ES-ve)[M-H]+=5241H NMR(DMSO-d6):0.81(3H,t,J=7.5Hz),0.83(9H,s),1.41-1.47(2H,m),2.62-2.67(1H,m),2.81(1H,表觀t,J=13.5Hz),3.17-3.80(5H,m),3.79(1H,d,J=9.5Hz),4.17(1H,d,J=9.5Hz),7.22(1H,dd,J=10,1.5Hz),7.42-7.46(2H,m),7.53(1H,s),7.55(1H,s),7.63(1H,d,J=9.5Hz),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.76(1H,d,J=8.5Hz),7.83(1H,d,J=8.5Hz),8.06(1H,表觀t,J=6Hz),9.091H,s),10.92(1H,s).
實施例77N’-[3S-乙氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸(2,2,2-三氟乙基)酰胺 與實施例1類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸(2,2,2-三氟乙基)酰胺經(jīng)烯丙基溴烷基化、叔丁酯裂解和異羥肟酸形成而制得。
MS(ES-ve)[M-H]+=5221H NMR(DMSO-d6):0.81(9H,s),2.64-2.74(2H,m),3.24-3.31(3H,m),3.78(1H,dd,J=8,3.5Hz),3.86(1H,d,J=6Hz),3.95(1H,dd,J=8,3.5Hz),4.19(1H,d,J=6Hz),5.07-5.24(2H,m),5.74-5.81(1H,m),7.22(1H,d,J=5Hz),7.41-7.46(2H,m),7.53(1H,s),7.66-7.84(4H,m),8.12(1H,t,J=4Hz),9.111H,s),10.92(1H,s).
實施例78N’-[4-(N-羥氨基)-3-丙氧基-2R-[S或R-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 實施例79N’-[2R-2-(6-氟萘基)甲基-4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 與實施例1d)+e)類似，由2R-(6-氟)萘基甲基)-3S-羥基琥珀酸二乙酯經(jīng)烯丙基溴烷基化制得。
MS(ES+ve)M+H=490,M+Na=512.
1H NMR(DMSO-d6):0.67(3H,t,J=7Hz),0.81(3H,t,J=7.5Hz),0.84(9H,s),1.45(2H,六重峰,J=7Hz), 2.53-2.68(3H,m),2.82(1H,m),3.16-3.25(3H,m),3.77(1H,d,J=9.5Hz),4.02(1H,d,J=9.5Hz),7.26-7.30(2H,m),7.35(1H,m),7.55-7.62(2H,m),7.61(1H,s),7.72(1H,d,J=8.5 Hz),7.85(1H,m),9.09(1H,br.s),10.86(1H,br.s).
實施例80N’-[3S-乙氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸環(huán)丙基酰胺 與實施例1類似，由N-[4-叔丁氧基-3S-(羥基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸環(huán)丙基酰胺經(jīng)烯丙基溴烷基化、氫化、叔丁酯裂解和異羥肟酸形成而制得。
MS(ES+ve)M+H=470,M+Na=492.
1H NMR(DMSO-d6):0.06(2H,m),0.42(2H,m),0.83(9H,s),1.05(3H,t,J=7Hz),2.20(1H,m),2.63(1H,dd,J=14,3.5Hz),2.87(1H,dd,J=14,11Hz),3.19(1H,m),ca.3.28 & 3.44(2H,2×m,部分被H2O信號遮蔽),3.76(1H,d,J=9.5Hz),4.05(1H,d,J=9.5Hz),7.23(1H,dd,J=8.5,1.5Hz),7.42(2H,m),7.55(1H,s),7.59(1H,d,J=9.5Hz),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.80(2H,m),9.09(1H,br.s),10.88(1H,br.s).
實施例81N’-[3S-叔-丁氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 按與實施例34類似方法制備。
MS(ES+ve)M+H=458,M+Na=480.
1H NMR(DMSO-d6):0.90(9H,s),1.12(9H,s),2.73(1H,dd,J=14,3.5Hz),2.90(1H,dd,J=14,11Hz),3.04(1H,m),3.99(1H,d,J=9,5Hz),4.01(1H,d,J=9Hz),6.63(1H,br.s),6.83(1H,br.s),7.26(1H,dd,J=8.5,1.5Hz),7.43(2H,m),7.55(1H,d,J=9Hz),7.59(1H,s),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.81(2H,m),8.95(1H,br.s),10.71(1H,br.s).
實施例82N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 MS(ES+ve)M+Na=520,M+H=498MS(ES-ve)M-H=4961H NMR(DMSO-d6):0.70(9H,s),2.04(3H,d,J=4.5Hz),2.67(1H,m),2.84(1H,dd,J=11.2,13.6Hz),3.36(1H,m),3.98(1H,d,J=9.5Hz),4.04(1H,d,J=10.9Hz),4.48(1H,d,J=12.3Hz),4.63(1H,d,J=12.3Hz),6.99(1H,q,J=4.4Hz),7.24(1H,d,J=8.4Hz),7.44(2H,m),7.57(1H,s),7.63(1H,d,J=8.5Hz),7.73(1H,d,J=8.5Hz),7.78(1H,d,J=8.3Hz),7.84(1H,d,J=8.3Hz),9.20(1H,s),9.58(1H,s),11.05(1H,s).
實施例83N’-[4-(N-羥氨基)-3S-(2-噻唑基甲氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 MS(ES+ve)M+Na=535,M+H=512MS(ES-ve)M-H=5111H NMR(DMSO-d6):0.74(9H,s),2.04(3H,d,J=4.5Hz),2.70(1H,m),2.84(1H,t,J=13.5Hz),3.36(1H,m),4.01(1H,d,J=9.4Hz),4.07(1H,d,J=9.8Hz),4.65(1H,d,J=12.9Hz),4.77(1H,d,J=12.8Hz),7.04(1H,d,J=4.7Hz),7.27(1H,d,J=8.4Hz),7.44(2H,m),7.58(1H,s),7.74(4H,m),7.78(1H,d,J=8.3Hz),7.83(1H,d,J=8.3Hz),9.20(1H,s),11.05(1H,s).
實施例84N’-[2R-(4-苯并環(huán)庚基)-甲基4-(N-羥氨基)-3S-(丙氧基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 MS(ES+ve)M+H=476,M+Na=498MS(ES-ve)M-H=4741H NMR(DMSO-d6):0.79(3H,t,J=7.3Hz),0.93(9H,s),1.32-1.45(3H,m),1.70(1H,m),2.05(1H,m),2.45-2.56(4H,m),2.58-2.67(7H,m),2.91(1H,m),3.11(1H,m),3.26(1H,m),3.59.(1H,d,J=9.6Hz),4.24(1H,d,J=9.5Hz),7.04(4H,m),7.76(1H,d,J=9.5Hz),7.82(1H,d,J=4.5Hz),8.97(1H,s),10.72(1H,s).
實施例85N’-[2R-(3-苯并環(huán)戊基)甲基4-(N-羥氨基)-3S-(丙氧基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 MS(ES+ve)M+H=448,M+Na=470MS(ES-ve)M-H=4461H NMR(DMSO-d6):0.79(3H,t,J=7.4Hz),0.92(9H,s),1.25(1H,m),1.42(2H,m),1.56(1H,m),2.20(1H,m),2.34(1H,m),2.50(4H,m),2.88(2H,m),3.00(1H,m),3.13(1H,m),3.27(1H,m),3.63(1H,d,J=9.8Hz),4.23(1H,d,J=9.5Hz),7.06(3H,m),7.14(1H,d,J=3.6Hz),7.83(2H,m),9.00(1H,s),10.78(1H,s).
實施例86N’-[2R-(3-苯并環(huán)戊基)甲基4-(N-羥氨基)-3S-(丙氧基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 MS(ES+ve)M+H=464,M+Na=486MS(ES-ve)M-H=4621H NMR(DMSO-d6):0.78(3H,t,J=7.4Hz),0.94(9H,s),1.23(1H,m),1.41(2H,m),1.55(1H,m),2.20(1H,m),2.36(1H,m),2.47(1H,m),2.88(1H,m),2.93-3.08(2H,m),3.12(1H,m),3.26(1H,m),3.45(3H,s),3.63(1H,d,J=9.9Hz),4.09(1H,d,J=9.4Hz),7.05(3H,m),7.14(1H,m),8.01(1H,d,J=9.4Hz),9.00(1H,s),10.79(1H,s),11.23(1H,s).
實施例87N’-[3S-(烯丙氧基)-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-(S-甲氧基芐基)青霉酰胺 MS(ES+ve)M+H=580,M+Na=602MS(ES-ve)M-H=5781H NMR(DMSO-d6):1.28(3H,s),1.29(3H,s),2.67(2H,m),2.95(1H,m),3.24(1H,m),3.68-3.86(6H,m),3.95(1H,m),4.49(1H,d,J=9.4Hz),5.07(1H,dd,J=1.6Hz,10.5Hz),5.20(1H,dd,J=1.7Hz,17.4Hz),5.78(1H,m),6.82(2H,d,J=8.7Hz),6.93(1H,s),7.21(2H,d,J=8.6Hz),7.27(1H,d,J=8.7Hz),7.34(1H,s),7.45(2H,m),7.60(1H,s),7.74(1H,d,J=8.5Hz),7.81(2H,t,J=8.4Hz),7.90(1H,d,J=8.7Hz),9.10(1H,s),10.95(1H,s).
實施例88N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(2-異丙氧基乙氧基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 a)N’-[4-叔丁氧基-2R-(2-萘基甲基)-3S-(2-異丙氧基乙氧基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸乙酰胺 向N’-[4-叔丁氧基-3S-(2-羥基乙氧基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸-N-乙酰胺(220mg,0.428mmol)和質(zhì)子海綿狀物(128mg,0.600mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中加入四氟硼酸甲基三異丙氧基磷鎓(155mg,0.566mmol)。室溫下攪拌3天后加入一定量的質(zhì)子海綿狀物(128mg)和四氟硼酸甲基三異丙氧基磷鎓(155mg)繼續(xù)攪拌24小時，再加入一批質(zhì)子海綿狀物(128mg)和四氟硼酸甲基三異丙氧基磷鎓(155mg)。攪拌48小時后加入乙酸乙酯和2N HCl，產(chǎn)物被提取到乙酸乙酯中。用碳酸氫鈉溶液、鹽水洗滌提取物，干燥(MgSO4)和濃縮。經(jīng)硅膠色譜(乙酸乙酯/己烷洗脫)分離得-樹膠狀產(chǎn)物(141mg,59％產(chǎn)率)。
MS ES+ve M+H=557,M+Na=5791H NMR(DMSO-d6):0.77(3H,t,J=7.5Hz),0.86(9H,s),1.07(3H,d,J=6.0Hz),1.08(3H,d,J=6.0Hz),1.44(9H,s),2.71-2.83(3H,m),2.97(1H,dd,J=10.0,14.0Hz),3.22(1H,m),3.26-3.48(3H,m),3.53-3.62(2H,m),3.85(1H,d,J=8.0Hz),4.09(1H,d,J=9.5Hz),7.31(1H,dd,J=1.5,8.5,Hz),7.40-7.51(3H,m),7.63(1H,s),7.70(1H,d,J=9.5Hz),7.75(1H,d,J=8.5Hz),7.76-7.85(2H,m).
b)N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(2異丙氧基乙氧基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸乙酰胺 用TFA除去叔-丁酯，如上所述將生成的羧酸轉(zhuǎn)化為異羥肟酸，得標題所示的化合物。
MS ES-ve M-H=514MS ES+ve M+H=5161H NMR(DMSO-d6):0.68(3H,t,J=7.0Hz),0.85(9H,s),1.06(6H,d,J=6.0Hz),2.50-2.75(3H,m,部分不可見),2.85(1H,m),3.24(1H,m),3.39(3H,m),3.45-3.55(2H,m),3.80(1H,d,J=9.5Hz),4.03(1H,d,J=9.5Hz),7.26(2H,m),7.43(2H,m),7.58(2H,m),7.72(1H,d,J=8.5Hz),7.75-7.85(2H,m),9.09(1H,s),10.84(1H,s).
實施例89N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-〔(3R,S-苯并二氫吡喃-3-基)甲基〕琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸甲酰胺 MS(ES+ve)M+H=4641H NMR(DMSO-d6):0.79(3H,m),0.91(9H,s),1.08(1H,m),1.40(3H,m),1.77(1H,m),2.30(1H,m),2.39(1.5H,d),2.49(1.5H,d,被DMSO遮蔽),2.68(0.5H,m),2.98(1.5H,m),3.13(1H,m),3.28(1H,m),3.61(1.5H,m),4.01(0.5H,br.d),4.19(2H,m),6.66(1H,m),6.78(1H,m),7.00(2H,m),7.65(0.5H,m),7.76(0.5H,m),7.91(0.5H,d),7.99(0.5H,d),9.02(1H,s),10.80(1H,s).
實施例90N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-(丙氧基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸苯氧基酰胺 MS(ES-ve)M-H=5341H NMR(DMSO-d6):0.84(3H,t,J=7.4Hz),0.95(9H,s),1.46(2H,m),2.66(1H,m),2.96(1H,m),3.20(1H,m),3.34(2H,m),3.78(1H,d,J=9.6Hz),4.22(1H,d,J=8.8Hz),6.88(2H,d,J=8.0Hz),6.95(1H,m),7.16.(2H,t,J=7.8Hz),7.26(1H,d,J=8.4Hz),7.40(2H,m),7.58(1H,s),7.68(2H,m),7.80(1H,m),8.01(1H,d,J=9.5Hz),9.10(1H,s),10.92(1H,s),11.92(1H,s).
實施例91N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸N-乙氧基酰胺 MS(ES+ve)M+H=4881H NMR(DMSO-d6):0.83(15H,m),1.44(2H,m),2.63(1H,dd,J=3.5,13.5Hz),2.84(1H,dd,J=11,13.5Hz),3.25(5H,m),3.77(1H,d,J=6.5Hz),3.98(1H,d,J=9.5Hz),7.26(1H,dd,1.0,8.5Hz),7.42(2H,m),7.70(1H,s),7.75(4H,m),9.09(1H,s),10.78(1H,s),10.88(1H,s).
實施例92N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸N-異丙氧基酰胺 MS(ES+ve)M+H=5021H NMR(DMSO-d6)0.85(18H,m),1.45(2H,m),2.64(1H,dd,J=3,13.5Hz),2.87(1H,dd,J=11,13.5Hz),3.19(1H,m),3.30(2H,m),3.48(1H,m),3.76(1H,d,J=9.5Hz),4.03(1H,d,J=9.5Hz),7.26(1H,dd,J=1.5,8.4Hz),7.42(2H,m),7.57(1H,s),7.76(4H,m),9.09(1H,s),10.63(1H,s),10.90(1H,s).
實施例93N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-3S-丙氧基琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸N,N-二甲基酰肼 MS(ES+ve)M+H=487MS(ES-ve)M-H=485,M+TFA=5991H NMR(DMSO-d6):0.81(3H,t,J=7.4Hz),0.85(9H,s),1.45(2H,m),2.21(6H,s),2.66(1H,m),2.84(1H,s),3.19(1H,m),3.32(2H,m),3.76(1H,d,J=9.6Hz),3.99(1H,d,J=9.3Hz),7.26.(1H,d,J=8.4Hz),7.43(3H,m),7.56(1H,s),7.70(2H,m),7.78(2H,m),9.22(1H,s),10.88(1H,s).
實施例94N’-[3S-叔-丁氧基-4-(N-羥氨基)-2R-(2-萘基甲基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸環(huán)丙基酰胺 標題所示化合物按上述描述(例如實施例80)制備，并由Et2O/EtOAc/MeOH中結(jié)晶得一乳膏狀固體0.276g(76％)。
MS(ES+ve)M+H=498,M+Na=520.
1H NMR(DMSO-d6):0.05(2H,m),0.38(2H,m),0.83(9H,s),1.12(9H,s),2.10(1H,m),2.70(1H,dd,J=14,3.5Hz),2.84(1H,dd,J=14,11Hz),3.05(1H,m),3.94(1H,d,J=9.0Hz),4.01(1H,d,J=9.0Hz),7.24(1H,dd,J=8.5,1.5Hz),7.38-7.47(4H,m),7.55(1H,s),7.73(1H,d,J=8,5Hz),7.80(2H,m),8.94(1H,br.s),10.69(1H,br.s).
實施例95N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-[2R,S-1-(1,2,3,4-四氫化萘基)甲基)琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲氧基酰胺 標題所示化合物按類似于實施例10和65制備，由二乙基(2R,3S)-3-羥基2-[(2R/S)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]琥珀酸酯制得，將最終化合物用Et2O研磨得一暗黃色固體0.396g(83％)。
MS(ES+ve)M+H=478,M+Na=500.
實施例96N’-[4-(N-羥氨基)-3S-異丙氧基-2R-(2-萘基甲基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸甲氧基酰胺 標題所示化合物按類似于實施例65制備得一乳膏狀固體0.321g(69％)，(用iPrOTf對N’-[4-叔丁氧基-3S-羥基-2R-(2-萘基甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸芐酯進行烷基化)。
MS(ES+ve)M+H=474,M+Na=496.
1H NMR(DMSO-d6):0.86(9H,s),1.00(3H,d,J=6Hz),1.04(3H,d,J=6Hz),2.64(1H,dd,J=14,3.5Hz),2.86(1H,dd,J=14,11Hz),3.12(3H,s),3.22(1H,m),3.51(1H,m),3.89(1H,d,J=9.5Hz),3.96(1H,d,J=9.5Hz),7.27(1H,dd,J=8.5,1.5Hz),7.41(3H,m),7.56(1H,s),7.71(2H,m),7.78(2H,表觀d,J=9Hz),9.08(1H,s),10.89(1H,s),10.92(1H,s).
實施例97N’-[4-(N-羥氨基)-3S-丙氧基-2R-(2-萘基甲基)-琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酸N-叔-丁氧基酰胺 MS(ES+ve)M+H=5161H NMR(DMSO-d6):0.82(3H,t,J=7.5Hz),0.86(9H,s),0.87(9H,s),1.45(2H,m),2.62(1H,dd,J=3.5,13.5Hz),2.90(1H,dd,J=11,13.5Hz),3.26(3H,m),3.75(1H,d,J=9.5Hz),4.12(1H,d,J=9.5Hz),7.24(1H,m),7.41(2H,m),7.55(1H,s),7.71(2H,m),7.78(2H,m),9.08(1H,s),10.14(1H,s),10.89(1H,s).
實施例98N’-[3S-叔-丁氧基-4-(N-羥氨基)-2R-[2R,S-1-(1,2,3,4-四氫化萘基)甲基)琥珀?；鵠-S-叔-亮氨酰胺 標題所示化合物按類似于實施例10和81制備，由二乙基(2R,3S)-3-羥基2-[(2R,S)-1-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲基]琥珀酸酯制得。
MS(ES+ve)M+H=462,M+Na=484.
實施例99N’-[4-(N-羥氨基)-2R-(5-甲基苯并〔6〕噻吩)-3S-丙氧基)琥珀?；鵠-N-甲基-S-叔-亮氨酰胺 將無水DMF(5ml)中的N’-[4-羥基-2R-(5-甲基苯并〔6〕噻吩)-3S-丙氧基)琥珀?；鵠-N-甲基-S-叔-亮氨酰胺(60mg,0.13mmol)依次用HOAT(36mg,0.27mmol)和EDC(51mg,0.27mmol)處理，反應(yīng)液于室溫下攪拌0.25小時。然后加入鹽酸羥基胺(28mg,0.40mmol)和N-甲基嗎啉(0.04mg,0.40mmol)并于室溫下將該反應(yīng)溶液攪拌3小時。反應(yīng)液蒸發(fā)至干后將殘余物分配于乙酸乙酯和水中。分離各相并將有機相用水和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌后用鹽水和硫酸鎂干燥。蒸發(fā)有機相后用乙醚研磨得白色固體異羥肟酸(15mg,24％)。
MS(ES+ve)[M-H]+=4631H NMR(DMSO-d6):0.89(9H,s),0.91(3H,t,J=7.0Hz),1.57(2H,m),2.24(3H,d,J=4.9Hz),2.82(2H,m),3.07(1H,m),3.31(2H,m),3.84(1H,d,J=9.7Hz),4.05(1H,s),7.14(1H,d,J=5.3Hz),),7.22(1H,q,J=5.6Hz),7.27(1H,d,J=3.4Hz),7.50(1H,d,J=3.4Hz),7.53(1H,t,J=6.0Hz),7.59(1H,s),7.75(1H,d,J=5.3Hz),9.11(1H,s),10.96(1H,s).
實施例100N’-[4-(N-羥氨基)-3S-環(huán)己基氧基-2R-(2-萘基甲基)-琥珀酰基]-S-叔-亮氨酸N-甲氧基酰胺 MS(ES+ve)M+H=5141H NMR(DMSO-d6)0.86(9H,s),1.00-1.22(5H,m),1.45(1H,m),1.63(2H,m),1.76(1H,m),1.87(1H,m),2 67(1H,J=3.5,13.5Hz),2.85(1H,dd,J=13.5,11Hz),3.13(3H,s),3.21(2H,m),3.95(2H,m),7.28(1H,m),7.41(2H,m),7.56(1H,s),7.72(2H,m),7.78(2H,m),9.07(1H,s),10.84(1H,s),10.90(1H,s).
權(quán)利要求
1．式(Ⅰ)化合物 其中R是被1-3個選自烷基，芳基，鏈烯基和炔基取代的甲基；n是0或1；R1是芳甲基或雜環(huán)甲基；R2是烷基，鏈烯基，芳基，環(huán)烷基或環(huán)烯基；且；R3是氫，烷基，鏈烯基，炔基或芳基。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R是烯丙基，丙基，乙基或異丙基，和/或R1是1-或2-萘甲基；和/或R2是叔-丁基；和/或R3是氫或甲基。
3．根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中n和R至R3各自選自上述實例中所定義的基團。
4．根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，選自上述實例中所述的化合物。
5．根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，它是式(ⅠA)的化合物。
6．根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項的化合物在制備治療或預(yù)防與s-CD23過量產(chǎn)生有關(guān)的過敏性疾病、炎癥疾病和自身免疫疾病的藥物中的應(yīng)用。
7．治療或預(yù)防與s-CD23過量產(chǎn)生有關(guān)的過敏性疾病、炎癥疾病和自身免疫疾病的方法，其方法包括將權(quán)利要求1-5中任何一項的化合物給予對此有需要的人或非人哺乳動物。
8．治療或預(yù)防與s-CD23過量產(chǎn)生有關(guān)的過敏性疾病，炎癥疾病和自身免疫疾病的藥用組合物，其中包括權(quán)利要求1-5中任何一項的化合物和任選的可藥用載體。
9．根據(jù)權(quán)利要求1-5中的任何一項的化合物在制備治療或預(yù)防由TNF介導(dǎo)的病癥的藥物中的應(yīng)用，該癥狀包括但不限于炎癥，發(fā)熱，心血管反應(yīng)，出血，凝血和急性期反應(yīng)，惡病質(zhì)和厭食，急性感染，體克狀態(tài)，移植對宿主反應(yīng)和自身免疫疾病。
10．治療或預(yù)防由TNF介導(dǎo)的病癥的方法，其方法包括將權(quán)利要求1-5中任何一項的化合物給予對此有需要的人或非人哺乳動物。
11．制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任何一項的化合物的方法，其方法包括(a)對式(Ⅱ)化合物脫保護 其中n和R至R3如上述定義，且X是保護基如芐基或三甲代甲硅烷基，或(b)使式(Ⅲ)化合物與羥胺或其鹽反應(yīng) 其中n和R至R3如上述定義，且任選保護羥基；或(c)將式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)化成與上述定義的式(Ⅰ)化合物不同的化合物。
12．權(quán)利要求11中定義的式(Ⅱ)化合物。
13．權(quán)利要求11中定義的式(Ⅲ)化合物。
全文摘要
式(Ⅰ)化合物,其中:R是由1—3個選自烷基,芳基,鏈烯基和炔基的甲基取代基;n是0或1;R
文檔編號A61K31/16GK1306508SQ9980765
公開日2001年8月1日 申請日期1999年6月22日 優(yōu)先權(quán)日1998年6月22日
發(fā)明者A·法勒爾, D·T·麥菲爾森, P·H·米爾納, J·米斯特賴, J·G·瓦德 申請人:史密絲克萊恩比徹姆有限公司