專利名稱：用于治療惡性腫瘤的硫化砷化合物及其衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及硫化砷化合物。本發(fā)明還涉及含有硫化砷化合物的用于治療癌癥、優(yōu)選治療血癌、更優(yōu)選治療白血病或淋巴瘤的藥物組合物。本發(fā)明還涉及用硫化砷化合物治療癌癥、優(yōu)選治療血癌、更優(yōu)選治療白血病或淋巴瘤的方法。本發(fā)明還涉及制備二硫化二砷(As4S4)的方法。
背景技術(shù)：
2.1．癌癥癌癥的主要特征是自正常組織衍化的異常細(xì)胞的數(shù)目增長，這些異常細(xì)胞侵入相鄰組織，并且惡變細(xì)胞通過淋巴和血液擴(kuò)散到淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處位點(diǎn)(轉(zhuǎn)移)。臨床數(shù)據(jù)和分子生物學(xué)研究指出，癌癥是多步驟發(fā)展過程，其開始時具有很小的癌前病變，在一定條件下癌前病變可發(fā)展成腫瘤。
白血病是指生血組織的惡性腫瘤。在單個細(xì)胞中，向惡性的轉(zhuǎn)化一般是經(jīng)過兩個或多個步驟，隨后發(fā)生增殖和克隆表達(dá)。在一些白血病中，已經(jīng)用一致的白血病細(xì)胞形態(tài)學(xué)和特殊臨床特征鑒定了特異性染色體易位(例如，在慢性粒細(xì)胞性白血病中，9和22位的易位；在急性早幼粒細(xì)胞白血病中，15和17位的易位)。急性白血病主要是未分化細(xì)胞群體，慢性白血病主要是成熟細(xì)胞形式。
急性白血病分為成淋巴細(xì)胞(ALL)型和非成淋巴細(xì)胞(ANLL或AML)型。可依據(jù)法國-美國-英國(FAB)分類法則或依據(jù)它們的類型和分化程度，通過其形態(tài)和細(xì)胞化學(xué)外觀將它們進(jìn)一步細(xì)分。使用特異性B-細(xì)胞和T-細(xì)胞以及骨髓抗原單克隆抗體對于分類是最有幫助的。ALL主要是兒童期疾病，其是通過實(shí)驗(yàn)檢測和骨髓測定確立的。在所有年齡段都有可能發(fā)生的ANLL或AML是在成人中更常見的急性白血??；其通常與作為致病因素的輻射有關(guān)。
一類急性白血病-急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)與t(15；17)易位有關(guān)，該易位發(fā)生在PML-位于核基質(zhì)相關(guān)小體上的生長抑制因子和RARα-視黃酸的(RA)核受體之間的PML/RARα融合蛋白。有人提出PML/RARα能通過抑制核受體反應(yīng)來阻斷骨髓分化，就像發(fā)生顯性失活RARα突變一樣。此外，在APL細(xì)胞中，PML/RARα將PML和其它核小體(NB)抗原替換到核微斑上，同樣導(dǎo)致PML和/或NB功能損失。急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)的診斷最主要是通過血液和骨髓中APL細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征而明確的。染色體易位t(15；17)也是APL的典型特征，并且可通過顯帶或熒光原位雜交(FISH)染色技術(shù)來顯示。這種易位可經(jīng)常在APL患者中發(fā)現(xiàn)，尤其是可在疾病完全緩解之前的APL中發(fā)現(xiàn)?；颊吖撬璧木酆厦告?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)也可顯示PML/RARαmRNA。此外，一些免疫標(biāo)記物例如CD33+、CD13+、CD9+、CD34-和HLA-DR-主要存在于骨髓細(xì)胞中。
慢性白血病是以慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)或慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)來描述的。CLL是通過血液、骨髓、和淋巴器官中的成熟淋巴細(xì)胞的外觀來顯示其特征的。CLL的標(biāo)記是持續(xù)的、絕對的淋巴細(xì)胞增多(＞5000/μL)和骨髓中淋巴細(xì)胞增多。大多數(shù)CLL患者都發(fā)生具有B-細(xì)胞特征的淋巴細(xì)胞的克隆擴(kuò)充。CLL是年齡較大人群所患的疾病。在CML(慢性粒細(xì)胞性白血病或慢性骨髓性白血病)中，疾病特征是在血液、骨髓、肝臟、脾、和其它器官中所有分化階段的粒細(xì)胞占主導(dǎo)地位。在表現(xiàn)出癥狀的患者的診斷中，總WBC數(shù)目一般為約200000/μL，但是也可達(dá)到1000000/μL。CML相對易于診斷，這是因?yàn)榇嬖谫M(fèi)氏(philadelphia)染色體的緣故。
在美國，惡性淋巴瘤的發(fā)病率是每年59000例，它是第6位最常見的癌癥。惡性淋巴瘤是多相群(heterogeneous group)疾?。患s15％惡性淋巴瘤患者患有何杰金氏病，其余患者患有非何杰金氏病淋巴瘤中的一種。Maiignant Lymphomas中公開了淋巴瘤的病因?qū)W、流行病學(xué)、病理學(xué)、臨床特征、診斷評價(jià)和進(jìn)展、治療以及控制，該文獻(xiàn)引入本發(fā)明以作參考。已經(jīng)依據(jù)臨床病程將CML進(jìn)行了分類，例如重度、中度或輕度CML?；蛘?，也依據(jù)免疫表型例(如T-細(xì)胞、B-細(xì)胞)或細(xì)胞遺傳學(xué)(染色體)畸變將CML進(jìn)行了分類。在CML的分類中，組織病理學(xué)和形態(tài)學(xué)變化非常重要。依據(jù)當(dāng)前的分類體系，非何杰金氏病淋巴瘤又分為濾泡性小核裂細(xì)胞和濾泡性混合性小核裂和大細(xì)胞淋巴瘤，小淋巴細(xì)胞淋巴瘤，外膜細(xì)胞淋巴瘤，粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤，單核B細(xì)胞淋巴瘤，濾泡性大細(xì)胞淋巴瘤，擴(kuò)散性小核裂細(xì)胞淋巴瘤，擴(kuò)散性混合性小核裂和大細(xì)胞淋巴瘤，擴(kuò)散性大細(xì)胞淋巴瘤，成免疫淋巴瘤，胸腺B細(xì)胞淋巴瘤，擴(kuò)散性小非核裂細(xì)胞淋巴瘤，成淋巴細(xì)胞淋巴瘤，外周T細(xì)胞淋巴瘤，大細(xì)胞退行發(fā)育淋巴瘤，和在獲得性免疫缺陷綜合征中的非何杰金氏病淋巴瘤。
血癌的特有性質(zhì)使得人們需要使用系統(tǒng)化療來作為基本治療手段。依據(jù)具體白血病和淋巴瘤的敏感性所選的藥物通常是以聯(lián)合方式用藥。可使用放射治療作為輔助手段來治療局部集中的白血病細(xì)胞。手術(shù)很少用作基本治療手段，但是可用來控制一些并發(fā)癥。有時采取從HLA匹配的同胞中進(jìn)行骨髓移植。
2.2．砷及其醫(yī)藥應(yīng)用長期以來，在西醫(yī)和中醫(yī)中，砷既被認(rèn)為是毒物，也被認(rèn)為是藥物。十九世紀(jì)后葉，在西方國家砷經(jīng)常被用于治療血液疾病。在1878年，有人報(bào)道使用福勒氏溶液(含有亞砷酸鉀(砷的化合價(jià)是+5)的溶液)進(jìn)行治療顯著地減少了白細(xì)胞的數(shù)量(Culter and Bradford,Am.J.Med.Sci.,January 1878,81-84)。Forkner和Scott于1931年提出福勒氏溶液作為姑息劑在治療慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)中的應(yīng)用(J.Am.Med.Assoc.,1931,iii,97)，后來Stephes和Lawrence在1936年證實(shí)了該應(yīng)用(Ann.Intern.Med.9,1488-1502)。然而，雖然福勒氏溶液的活性化學(xué)組分沒有被確定，但是其毒性是眾所周知的。福勒氏溶液是作為口服組合物嚴(yán)格地給藥的，并且是作為溶液給予白血病患者直至白細(xì)胞水平降至可接受水平或直至產(chǎn)生毒性(例如皮膚角化和色素沉著過度)，雖然患者喜歡改變緩解周期。在二十世紀(jì)六十年代，仍不時使用福勒氏溶液來治療CML，但是大多數(shù)CML患者是使用其它化療劑例如白消安和/或放療來進(jìn)行治療(Monfardini等人，Cancer,1973,31492-501)。JP 51-88,620公開了一種方法，包括將Fe、As和FeS壓碎并氧化，在水中攪拌，靜置，收集含有鐵、砷和硫酸鹽離子的所得上清液，然后過濾。JP51-88,620還公開，通過上述方法制得的產(chǎn)物可治愈胃癌、十二指腸癌、子宮癌、肺癌、胰腺癌等；并且能有效地治療糖尿病、心臟病、高血壓、哮喘、神經(jīng)痛、風(fēng)濕病等。
自相矛盾的是，無論砷來源自環(huán)境還是藥用，暴露于砷中的一個已長期認(rèn)識到的作用是導(dǎo)致皮膚癌(Hutchinson,1888,Trans.Path.Soc.Lond.,39352；Neubauer,1947,Br.J.Cancer,1192)。甚至還有流行病學(xué)數(shù)據(jù)表明在內(nèi)部場所長期使用福勒氏溶液可導(dǎo)致癌癥發(fā)生率增加(Cuzock等人，Br.J.Cancer,1982,45904-911；Kaspar等人，J.Am.Med.Assoc.,1984,2523407-3408)。砷的致癌作用已經(jīng)被下述事實(shí)證實(shí)，即砷可誘導(dǎo)染色體畸變、基因擴(kuò)增、姐妹染色單體交換、以及細(xì)胞轉(zhuǎn)化(參見例如Lee等人，1988,Science,24179-81；和Germolec等人，Toxicol.AppliedPharmacol.,1996,141308-318)。在雄黃和錫礦對于癌癥的質(zhì)量篩選中，在肺癌的癌前期損傷中發(fā)現(xiàn)了一些流行性特征(Wang,ChungHua Chung Liu Tsa Chih,1989,11(3)207-210)。Pershagen和Bjorklund在Cancer Lett.,1985,27(1)99-104中指出，砷酸鈣是致腫瘤物，雖然有證據(jù)表明三硫化二砷致腫瘤作用是不確定的(還參見Yamamoto等人，Int.J.Cancer,1987,40(2)220-223)。EPA/600/8-91/061(OHEA-C-073-005)報(bào)道，砷以及包括特別是二硫化二砷和三硫化二砷在內(nèi)的無機(jī)砷化合物是人致癌物。其還公開，“因?yàn)樯榛衔镌隗w外和體內(nèi)都能通過化學(xué)作用轉(zhuǎn)化成致癌物，并且在人體內(nèi)直接致癌的無機(jī)砷的確切種類是未知的，所以所有上述無機(jī)砷化合物均一視同仁”。由于砷的已知致癌作用，因此當(dāng)今在西醫(yī)中，其在人類中僅有的治療應(yīng)用是治療局部病，例如非洲人錐蟲病(有機(jī)砷劑，美拉胂醇；參見Goodman和Gilman的The PharmacologicalBasis of Therapeutics，第9版，第66章，1659-1662,1997)。
在傳統(tǒng)中醫(yī)中，已經(jīng)使用亞砷酸和三氧化二砷糊劑來治療牙髓疾病、牛皮癬、梅毒和風(fēng)濕病(Chen等人，1995，《臨床藥物手冊》，中國，上海科學(xué)和技術(shù)協(xié)會，p.830)。在二十世紀(jì)七十年代，在中國已實(shí)驗(yàn)性地使用三氧化二砷來治療急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)(Mervis備注，1996,Science,273578)。最近，已經(jīng)在15名難治性APL患者中的14名患者中重新研究了三氧化二砷的臨床效力，據(jù)報(bào)道以10mg/天的劑量靜脈內(nèi)給藥4-9周使得在形態(tài)學(xué)方面完全緩解，同時沒有出現(xiàn)相關(guān)的骨髓抑制(Shen等人，1997,Blood,893354-3360)。還有人報(bào)道，三氧化二砷在NB4細(xì)胞(一種APL細(xì)胞系)中體外誘導(dǎo)細(xì)胞程序死亡(編程性細(xì)胞死亡)，并且該細(xì)胞程序死亡顯然與癌基因bc1-2的下調(diào)有關(guān)，嵌合PML/RARα蛋白的細(xì)胞內(nèi)再分布對于APL細(xì)胞是唯一的(Chen等人，1996,Blood,881052-1061；Andre等人，1996,Exp.Cell.Res.229253-260)。據(jù)報(bào)道，砷的生物活性是由于砷能指導(dǎo)PML核質(zhì)破碎成用于降解的核體所致(Zhu等人，1997,Proc.Natl.Acad.Sci.,943978-3983)。
雄黃(Xiong-Huang)-主要含有二硫化二砷的礦石晶體在中國的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中用作藥物已有幾百年歷史，并且將外行的中傷置之度外。CN1133725公開，由包括特別是雄黃在內(nèi)的26種中藥材制得的外用硬膏劑可用于治療肝癌。CN1131037公開了適于治療暴露癌的新抗致癌物可由包括特別是雄黃在內(nèi)的21種中藥材制得。CN1122700公開，包含藤黃、雄黃、乳香、沒藥、一枝蒿、松香、馬錢子、催吐堅(jiān)果和明礬的藥物粉劑可用于治療乳腺病、乳房結(jié)核瘡和腫瘤。CN1119113公開，含有包括雄黃在內(nèi)的24種中藥材的復(fù)合膠囊可用于預(yù)防和治療各種癌癥。CN1081104公開，由包括特別是雄黃在內(nèi)的多種中藥材制得的硬膏劑具有長效止痛作用，尤其是可緩解癌癥疼痛。CN1061908公開，由砒霜、明礬、雄黃和沒藥制得的組合物可用于治療癌癥。
雖然雄黃已經(jīng)作為一種組分用于形成可用來治療或預(yù)防不同類型癌癥的組合物，但是從來沒有人提出單獨(dú)使用雄黃來治療癌癥，尤其是白血病或淋巴瘤。此外，無論是單獨(dú)使用還是聯(lián)合使用，從來沒有人提出使用硫化砷化合物來治療包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的任一類型癌癥。相反，在醫(yī)藥領(lǐng)域內(nèi)，雄黃或一些硫化砷化合物例如二硫化二砷和三硫化二砷被認(rèn)為是人致癌物。
Qi和Bi,Chung_Yao Tung Pao,1983,8(5)21公開了使用1％鹽酸從雄黃礦中除去As2O3的方法。Yuan等人，Chung Yao Tung Pao,1988,13(8)17-21公開，用鹽酸或醋處理雄黃礦可減少雄黃礦中As2O3的含量。Yuan等人，Chung Yao Tung Pao,1988,13(8)17-21還公開，除了As4S4和As2O3以外，雄黃還含有10種以上微量元素，并且因?yàn)樾埸S的效力取決于所有這些微量元素，所以擔(dān)心用鹽酸處理雄黃將會除去大多數(shù)微量元素。Zhang等人，《中國中藥雜志》，1995,20(9)537公開，用酸乳(酸奶)處理雄黃礦可降低雄黃的毒性。
人們強(qiáng)烈地需要能有效地治療癌癥、特別是包括白血病和淋巴瘤在內(nèi)的血癌。此外，也非常需要口服活性抗癌劑。本發(fā)明滿足了本領(lǐng)域內(nèi)的這些和其它需求。
3．發(fā)明簡述雖然有關(guān)于對患者施用硫化砷化合物的危險(xiǎn)性的報(bào)道，但是本申請人已經(jīng)驚奇地發(fā)現(xiàn)，一些硫化砷化合物在不同類型癌癥、尤其是包括白血病和淋巴瘤在內(nèi)的血癌的治療中有廣泛應(yīng)用。硫化砷化合物可安全有效地在哺乳動物中使用。因此，本發(fā)明包括硫化砷化合物、這些化合物的制備、含有它們的藥物組合物、以及它們在治療癌癥中的應(yīng)用。
本發(fā)明包括具有下述作用的所有硫化砷化合物、或其衍生物、或者其與其它砷化合物的混合物可緩解、減輕、改善、或預(yù)防癌癥，或者將與癌癥、尤其是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌有關(guān)的臨床癥狀或診斷指標(biāo)保持或維持在緩解狀態(tài)。
本發(fā)明還包括用于治療癌癥、尤其是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的藥物組合物，所述組合物包含硫化砷化合物或雄黃，優(yōu)選還包含可藥用載體或賦形劑。在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明包括適于口服給藥的組合物，其中在片劑、膠囊劑或其它單位劑型中包含一種或多種硫化砷化合物和可藥用載體或賦形劑。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明包括適于局部、透皮或非胃腸道給藥的組合物。本發(fā)明還提供了特定治療方案、藥物組合物、和藥盒。
本發(fā)明還包括治療癌癥、尤其是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的方法，包括將治療有效且非致死量的硫化砷化合物優(yōu)選與可藥用載體或賦形劑一起對需要這種治療的患者給藥。
本發(fā)明還包括使用聯(lián)合療法來治療癌癥，尤其對于其它類型的治療是難治性的癌癥。依據(jù)本發(fā)明，硫化砷化合物可單獨(dú)使用，或與其它已知治療劑(包括化療劑、輻射防護(hù)劑和放射治療劑)或技術(shù)聯(lián)合使用，以改善患者的生命質(zhì)量或治療癌癥，尤其是治療血癌例如白血病或淋巴瘤?？稍谝环N或多種已知化療劑給藥前、給藥期間或給藥后使用硫化砷化合物。此外，可在放射治療前、期間或之后使用硫化砷化合物。最優(yōu)選的聯(lián)合治療是將硫化砷化合物與三氧化二砷同時或順序使用。
最后，本發(fā)明包括制備基本上不含三氧化二砷(As2O3)的二硫化二砷(As4S4)的方法。
在下述部分和小節(jié)中描述特定的本發(fā)明組合物及其應(yīng)用。
4．附圖的簡要說明附

圖1是表明病例實(shí)驗(yàn)1(用二硫化二砷治療新診斷的APL患者)中血紅蛋白和血小板數(shù)目的變化的曲線圖。
附圖2是表明病例實(shí)驗(yàn)1(用二硫化二砷治療新診斷的APL患者)中原始細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)目的變化的曲線圖。
附圖3是表明病例實(shí)驗(yàn)2(用二硫化二砷治療處于復(fù)發(fā)階段的APL患者)中血紅蛋白和血小板數(shù)目的變化的曲線圖。
附圖4是表明病例實(shí)驗(yàn)2(用二硫化二砷治療處于復(fù)發(fā)階段的APL患者)中原始細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)目的變化的曲線圖。
5．發(fā)明詳述下面描述用于治療癌癥、特別是包括白血病和淋巴瘤在內(nèi)的血癌的化合物、組合物以及方法。
本發(fā)明包括用于治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的藥物組合物，其中包含硫化砷化合物或雄黃，并且優(yōu)選還含有可藥用載體或賦形劑。在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明包括適于口服給藥的組合物，其中在片劑、膠囊劑或其它單位劑型中包含一種或多種硫化砷化合物、以及優(yōu)選還包含可藥用載體或賦形劑。
本發(fā)明還包括在包括人在內(nèi)的哺乳動物中治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的方法，包括將治療有效且非致死量的一種或多種硫化砷化合物，例如二硫化二砷或三硫化二砷，優(yōu)選與可藥用載體或賦形劑一起對需要這種治療的個體給藥。
本發(fā)明還包括使用聯(lián)合療法來治療癌癥，尤其對于其它類型治療是難治性的癌癥。為了治療白血病或淋巴瘤，最優(yōu)選的聯(lián)合療法是將硫化砷化合物與三氧化二砷同時或順序使用。
最后，本發(fā)明包括制備基本上不含三氧化二砷(As2O3)的二硫化二砷(As4S4)的方法。
為了使本發(fā)明的公開更清楚，但不是為了限制本發(fā)明，將本發(fā)明的發(fā)明詳述分成下述小節(jié)。
5.1．硫化砷化合物本說明書中使用的“硫化砷化合物”是指包含砷和硫的可藥用形式的化合物。本發(fā)明包括所有種類的有藥理活性的硫化砷，無論該硫化砷種類是有機(jī)分子還是無機(jī)分子、是其鹽還是溶液、或是其混合物。術(shù)語“硫化砷化合物”還包括水合類型，例如這些化合物的水溶液、水解產(chǎn)物或電離產(chǎn)物；這些化合物可含有不同數(shù)目的附加水分子。當(dāng)單獨(dú)使用或與其它化合物聯(lián)合使用時，可緩解、減輕、改善、或預(yù)防癌癥，或者將與癌癥、尤其是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌有關(guān)的臨床癥狀或診斷指標(biāo)保持或維持在緩解狀態(tài)的任一硫化砷化合物都可用于本發(fā)明。
“硫化砷化合物”的實(shí)例包括但不限于分子式為(ASnSm)x的化合物，其中m、n和x是相同或不同的交替整數(shù)。這種化合物的實(shí)例包括但不限于二硫化二砷(As4S4)、五硫化二砷(As2S3)、和三硫化二砷(As2S3)。在一些文獻(xiàn)中，二硫化二砷、硫化砷或四硫化四砷(TATS)是As4S4的可互換名稱。為了一致，在本申請中僅使用“二硫化二砷”作為As4S4的名稱。二硫化二砷(As4S4)可依據(jù)ξ5.4中描述的方法由雄黃制得?；蛘撸珹s4S4可依據(jù)在Gmelin′s Arsenic(第8版)17417-422(1952)或Schenk in Handbook of PreparativeInorganic Chemistry 1603(G.Brauer,Ed.,Academic press,NewYork,2nd Ed.1963)中描述的方法制得。五硫化二砷(As2S5)可依據(jù)在Schenk in Handbook of Preparative Inorganic Chemistry1603(G.Brauer,Ed.,Academic press,New York,2nd Ed.1963)中描述的方法制得。三硫化二砷(As2S3)可依據(jù)在Gmelin′s Arsenic(第8版)17422-433(1952)中描述的方法制得。
5.2．藥物組合物及其給藥方式本發(fā)明提供了用于在哺乳動物中治療癌癥、尤其是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的藥物組合物，其中包含有效量的硫化砷化合物，并且優(yōu)選還包含可藥用載體或賦形劑。在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明包括適于口服給藥的組合物，其中在片劑、膠囊劑或其它單位劑型中包含一種或多種硫化砷化合物、以及優(yōu)選還包含可藥用載體或賦形劑。
在具體實(shí)施方案中，硫化砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5和As4S4。硫化砷化合物優(yōu)選為As4S4。更優(yōu)選的是，As4S4是依據(jù)ξ5.4中公開的方法制得的。也可以使用這些化合物的混合物。
在另一具體實(shí)施方案中，硫化砷化合物例如As4S4的量為約100mg-約2g/單位劑型。
在另一具體實(shí)施方案中，可藥用載體是植物種子。所述植物種子優(yōu)選為側(cè)柏子(seman platycladi)。
在另一具體實(shí)施方案中，按重量計(jì)，硫化砷化合物的含量與可藥用載體的含量在比例上大約相等。優(yōu)選的是，硫化砷化合物是As4S4，并且可藥用載體是側(cè)柏子。
本發(fā)明還提供了用于在哺乳動物中治療癌癥、尤其是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的藥物組合物，其中包含有效量的硫化砷化合物，優(yōu)選包含可藥用載體或賦形劑，并且還包含有效量的砷化合物，其中所述硫化砷化合物與砷化合物不是相同化合物。在具體實(shí)施方案中，砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5、As4S4和As2O3。硫化砷化合物優(yōu)選為As4S4。
雖然ξ5.4.公開了制備基本上不含有As2O3的As4S4的方法，但是這兩種化合物可聯(lián)合使用。實(shí)際上，在其中一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于在人中治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的藥物組合物，其中含有有效量的As4S4、As2O3和可藥用載體；或同時使用As4S4和As2O3的治療方法。
本發(fā)明還提供了用于在人中治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的藥物組合物，其中包含有效量的硫化砷化合物、和優(yōu)選包含的可藥用載體或賦形劑，并且還包含有效量的治療劑，所述治療劑包括但不限于芥子化合物、氮芥、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、環(huán)磷酰胺、白消安、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、阿糖孢苷、阿糖胞嘧啶、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、甲氨蝶呤、長春新堿、長春堿、紫杉醇、依托泊苷、temiposide、更生霉素、柔紅霉素、阿霉素、表阿霉素、米托蒽醌、博萊霉素、絲裂霉素、順鉑、卡鉑、磷酸雌莫司汀、羥基脲、BCNU、丙卡巴肼、VM-26(替尼泊苷)、干擾素、以及所有反式視黃酸。
本發(fā)明提供了用于在人中治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的藥物組合物，其中包含有效量的雄黃和可藥用載體或賦形劑。
依據(jù)本發(fā)明，可將硫化砷化合物及其生理上可接受的鹽或溶劑化物配制成口服或非胃腸道給藥制劑。
對于口服給藥，藥物制劑可以是液體劑型，例如溶液劑、糖漿劑或懸浮劑，或者可以是在使用前用水或其它合適載體重新配制的藥物產(chǎn)品。這種液體制劑可通過常規(guī)方法用可藥用添加劑制得，所述添加劑有例如懸浮劑(例如山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化食用脂肪)；乳化劑(例如卵磷脂或阿拉伯膠)；非水載體(例如杏仁油、油性酯、或分餾植物油)；和防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸)。藥物組合物可以是例如片劑或膠囊劑，所述片劑或膠囊劑可通過常規(guī)方法用可藥用賦形劑制得，所述賦形劑有例如粘合劑(例如預(yù)凝膠化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)；填充劑(例如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)；潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石或二氧化硅)；崩解劑(例如土豆淀粉或羥乙酸淀粉鈉)；或濕潤劑(例如十二烷基硫酸鈉)。可通過本領(lǐng)域眾所周知的方法將片劑包衣。
為了通過吸入給藥，可使用合適的推進(jìn)劑例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯三氟乙烷、二氧化碳或其它合適氣體將本發(fā)明使用的化合物以氣霧劑形式從加壓包裝或噴霧器中遞送。對于加壓氣霧劑，可通過提供遞送計(jì)量劑量的閥門來決定劑量單位。對于用在吸入器或吹入器中的膠囊和藥筒例如明膠膠囊和藥筒，可將其配制成含有化合物和適當(dāng)粉末基質(zhì)例如乳糖或淀粉的粉狀混合物。
可將化合物配制成用于通過注射、例如通過快速濃注或連續(xù)輸注來進(jìn)行非胃腸道給藥的制劑。注射劑可以以單位劑型提供，例如在加入防腐劑的安瓿或多劑量容器中提供。組合物可以是在油或水載體中的懸浮劑、溶液劑或乳劑，并且可含有配制試劑例如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。或者，活性組分可在粉劑中，該粉劑在使用前用合適載體例如無菌不含熱源的水或其它溶劑重新配制。
本發(fā)明還提供了實(shí)施本發(fā)明治療方案的藥盒。所述藥盒在一個或多個容器中包含可藥用形式的治療有效量的硫化砷化合物。在本發(fā)明藥盒的瓶子中的硫化砷化合物可以是在可藥用溶液中的劑型，例如與無菌鹽水、葡萄糖溶液、緩沖液或其它可藥用無菌液體的溶液?；蛘?，可將復(fù)合物冷凍干燥或干燥；在這種情況下，藥盒還在容器中任選包含可藥用溶液(例如鹽水、葡萄糖溶液等)、優(yōu)選無菌可藥用溶液，以將復(fù)合物重新配制成注射液。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明藥盒還包含用于注射該復(fù)合物的、優(yōu)選以無菌形式包裝的注射用針或注射器，和/或包裝的酒精墊。藥盒中任選包含用于指導(dǎo)臨床醫(yī)師或患者施用硫化砷化合物的指示說明。
在包括白血病或淋巴瘤的癌癥的急性或慢性治療中，硫化砷化合物治療劑量的大小將隨欲治療病癥的嚴(yán)重程度以及給藥途徑的不同而不同。劑量以及也許給藥頻率將隨患者的年齡、體重、病癥和反應(yīng)的不同而不同。例如，對于本說明書中描述的病癥，二硫化二砷的總?cè)談┝客ǔ榧s100mg-約2g，該日劑量通過非胃腸道給藥或口服給藥或局部給藥途徑以均分劑量給藥。
通過連續(xù)輸注硫化砷化合物可維持通過血漿水平確定的所需血液水平。應(yīng)當(dāng)指出，當(dāng)出現(xiàn)毒性或者骨髓、肝臟或腎臟機(jī)能障礙時，臨床醫(yī)師懂得如何以及何時中止、中斷治療或?qū)⒅委熣{(diào)節(jié)至較低水平。相反，如果臨床反應(yīng)不充分(不包括毒性副作用)時，臨床醫(yī)師也懂得如何以及何時將治療調(diào)節(jié)至較高水平。
同樣，為了給患者提供有效劑量的硫化砷化合物，可采用任一適當(dāng)?shù)慕o藥途徑。例如，可采用口服給藥、透皮給藥、電離子滲入給藥、非胃腸道給藥(皮下給藥、肌內(nèi)給藥、鞘內(nèi)給藥等)。劑型包括片劑、錠劑、扁囊劑、分散劑、懸浮劑、溶液劑、膠囊劑、貼劑等(參見Remington′s Pharmaceutical Science)。
在實(shí)際應(yīng)用中，可依據(jù)常規(guī)藥物混合技術(shù)將硫化砷化合物作為活性組分與可藥用載體或賦形劑混合成緊密混合物。根據(jù)給藥所需的劑型例如口服劑型或非胃腸道給藥劑型(包括片劑、膠囊劑、粉劑、靜脈內(nèi)注射劑或輸注劑)，載體可呈多種形式。在口服劑型組合物的制備中，可使用任意常用藥物介質(zhì)，例如，對于口服液體制劑例如懸浮劑、溶液劑、酏劑、脂質(zhì)體和氣霧劑，可使用水、二醇、油、醇、矯味劑、防腐劑、著色劑等；對于口服固體制劑例如粉劑、膠囊劑、和片劑，可使用例如淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。在非胃腸道給藥劑型組合物的制備中，可使用類似藥物介質(zhì)，例如水、二醇、油、緩沖劑、糖、防腐劑、脂質(zhì)體等本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的藥物介質(zhì)。非胃腸道給藥組合物的實(shí)例包括但不限于5％w/v葡萄糖、生理鹽水或其它溶液。可將硫化砷化合物的總劑量放入裝有靜脈內(nèi)給藥用液體的瓶子中進(jìn)行給藥，例如約2ml-約2000ml的瓶子。稀釋液體的體積將隨總給藥劑量的不同而不同。
5.3．治療方法本說明書所用術(shù)語“治療癌癥方法”是指，與癌癥有關(guān)的疾病和癥狀被緩解、減輕、改善、預(yù)防、保持在緩解狀態(tài)、或維持在緩解狀態(tài)。例如，當(dāng)所治療的癌癥是白血病時，本發(fā)明治療方法可在治療的患者中降低白細(xì)胞數(shù)目，或減輕淋巴細(xì)胞增多。
在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在哺乳動物中治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的方法，包括將有效量的硫化砷化合物和優(yōu)選與可藥用載體或賦形劑一起對需要這種治療的哺乳動物給藥。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在哺乳動物中治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的方法，包括將有效量的硫化砷化合物、砷化合物及優(yōu)選與可藥用載體或賦形劑一起對需要這種治療的哺乳動物給藥，其中所述硫化砷化合物與所述砷化合物不是相同化合物。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在哺乳動物中治療癌癥、特別是包括白血病或淋巴瘤在內(nèi)的血癌的方法，包括將有效量的在ξ5.2中公開的藥物組合物對需要這種治療的哺乳動物給藥。
可通過本發(fā)明方法治療的血癌的實(shí)例包括但不限于急性成淋巴細(xì)胞白血病(ALL)、急性成淋巴細(xì)胞B-細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞T-細(xì)胞白血病、急性非淋巴細(xì)胞白血病(ANLL)、急性原始粒細(xì)胞白血病(AML)、急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、急性成單核細(xì)胞白血病、急性紅白血病性白血病、急性成巨核細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)、多發(fā)性骨髓瘤、脊髓增生異常綜合征(MDS)例如難治性貧血伴幼稚細(xì)胞增多(RAEB)和在轉(zhuǎn)化為白血病過程中的RAEB(RAEB-T)、慢性粒-單細(xì)胞性白血病(CMML)。可通過本發(fā)明方法治療的血癌優(yōu)選為急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)和多發(fā)性骨髓瘤。
可通過本發(fā)明方法治療的淋巴瘤包括但不限于重度淋巴瘤、中度淋巴瘤和輕度淋巴瘤?？赏ㄟ^本發(fā)明方法治療的淋巴瘤優(yōu)選為非何杰金氏淋巴瘤。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，其它癌癥、尤其是血癌可依據(jù)本發(fā)明治療。
在具體實(shí)施方案中，硫化砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5和As4S4。硫化砷化合物優(yōu)選為As4S4。更優(yōu)選的是，As4S4是依據(jù)ξ5.4中公開的方法制得的。在另一具體實(shí)施方案中，砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5、As4S4和As2O3。在其中所用硫化砷化合物是As4S4的方法中，砷化合物優(yōu)選為As2O3。
本發(fā)明還提供了治療新近診斷出患有白血病或淋巴瘤、優(yōu)選急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、非何杰金氏淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)或多發(fā)性骨髓瘤或者處于所述疾病復(fù)發(fā)階段的患者的方法，包括a)在第一個治療階段，將有效量的硫化砷化合物對所述患者給藥多次；和b)在第二個治療階段，將有效量的硫化砷化合物對所述患者給藥，其中該治療階段的給藥次數(shù)比在第一個治療階段的給藥次數(shù)少，第一個治療階段和第二個治療階段合起來不超過100天。在一個具體實(shí)施方案中，在第一個治療階段，硫化砷化合物例如As4S4每天給藥4次。在另一實(shí)施方案中，在第二個治療階段，硫化砷化合物例如As4S4每天給藥3-4次。
本發(fā)明還提供了將患者維持在白血病、優(yōu)選急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、非何杰金氏淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)或多發(fā)性骨髓瘤的完全緩解階段的方法，包括a)在第一個治療階段，對處于所述白血病或淋巴瘤緩解階段的患者給予有效量的硫化砷化合物；b)對患有所述白血病或淋巴瘤的患者進(jìn)行臨床檢驗(yàn)；和c)如果步驟(b)中臨床檢驗(yàn)的結(jié)果表明需要給藥將患者完全維持在所述白血病或淋巴瘤的緩解階段，則對患者給予有效量的硫化砷化合物。在一個具體實(shí)施方案中，在第一個治療階段，硫化砷化合物例如As4S4每天給藥3-4次。在另一實(shí)施方案中，第二個治療階段為大約2周-大約數(shù)年。
本說明書所用術(shù)語“完全緩解”是指，具有低于5％的原始細(xì)胞和白血病早幼粒細(xì)胞，并具有不伴有任何白血病臨床表現(xiàn)的正常血像。用于APL的臨床檢驗(yàn)以及其它檢驗(yàn)包括但不限于血液和骨髓中APL細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征、染色體易位例如t(15；17)，表明APL的PML/RARαmRNA和其它免疫標(biāo)記物的存在。
依據(jù)本發(fā)明，硫化砷化合物可單獨(dú)使用，或與其它已知治療劑(包括化療劑、輻射防護(hù)劑和放射治療劑)或技術(shù)聯(lián)合使用，以改善患者的生命質(zhì)量或治療白血病或淋巴瘤。例如，可在一種或多種已知抗腫瘤劑給藥前、給藥期間或給藥后使用硫化砷化合物，所述已知抗腫瘤劑包括但不限于芥子化合物、氮芥、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、環(huán)磷酰胺、白消安、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、阿糖孢苷、阿糖胞嘧啶、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、甲氨蝶呤、長春新堿、長春堿、紫杉醇、依托泊苷、temiposide、更生霉素、柔紅霉素、阿霉素、表阿霉素、米托蒽醌、博萊霉素、絲裂霉素、順鉑、卡鉑、磷酸雌莫司汀、羥基脲、BCNU、丙卡巴肼、VM-26(替尼泊苷)、干擾素、以及所有反式視黃酸(ATRA)(參見例如the Physician Desk References 1997)。此外，可在放射治療前、期間或之后使用硫化砷化合物。
本說明書所用術(shù)語“治療劑”、“治療方案”、“輻射防護(hù)劑”、“化療劑”包括用于治療癌癥、病毒感染和其它惡性腫瘤的本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的疫苗。“放射治療劑”在本領(lǐng)域內(nèi)是眾所周知的。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，在進(jìn)行其它類型化療或放射治療之前、期間或之后將本發(fā)明硫化砷化合物給藥。
5.4．制備二硫化二砷的方法本說明提供了制備二硫化二砷(As4S4)的方法，所述As4S4基本上不含有三氧化二砷(As2O3)，其中包括(a)將雄黃懸浮在pH約為6-7的水溶液中；(b)將該雄黃懸浮液的pH調(diào)節(jié)至約4-4.5；(c)棄去所得上清液，把剩余沉積物重懸在pH約為4-4.5的溶液中；(d)重復(fù)步驟(c)，直至所述上清液中的砷濃度低于20mg/L；(e)用pH約為6-7的水溶液洗滌步驟(d)所得剩余沉積物；(f)在非氧化條件下將所得粉末干燥。
在本說明書中使用的“基本上不含有三氧化二砷(As2O3)”是表示，按重量計(jì)，在制得的As4S4中，As2O3的含量低于0.15％。As2O3的含量優(yōu)選低于0.1％。
雄黃廣泛存在于自然界中。例如，已經(jīng)在南斯拉夫的Sb礦石、前USSR的溫泉沉積物、土耳其的硼酸鹽礦石、以及蒙大拿州和美國的金礦中發(fā)現(xiàn)了雄黃(Dictionary of Inorganic Compounds(Ed.Macintyre等人，Chapman＆Hall 1992)Vol.1,p119)。在本發(fā)明方法中，自然界中存在的雄黃可用作制備As4S4的原料。
在具體實(shí)施方案中，在步驟(a)和(e)中用于懸浮開采的雄黃和洗滌雄黃沉積物的水溶液是去離子雙重蒸餾水。
在具體實(shí)施方案中，在步驟(b)和(c)中用于調(diào)節(jié)重懸的雄黃沉積物的pH的酸溶液是鹽酸或乙酸溶液。在該方法中，HCl和HAc可互換使用。優(yōu)選使用0.1M鹽酸或0.1M乙酸溶液。
可通過本領(lǐng)域已知方法在非氧化條件下干燥二硫化二砷粉末。優(yōu)選在低溫下干燥二硫化二砷粉末。
本發(fā)明還提供了依據(jù)上述方法制得的二硫化二砷。
6．實(shí)施例6.1制備基本上不含三氧化二砷的二硫化二砷由技術(shù)熟練人員小心地從混合原料中手工挑選雄黃晶體。一般情況下，從大量含有石頭和有毒物例如As2O3、(CaMg)3(AsO3)和(CaMg)(AsO4)2的未純化雄黃中僅能得到非常少量的純化產(chǎn)物。在本實(shí)施例中，雄黃礦石含有＞98％的As4S4。雄黃礦石的其余部分含有水和其它雜質(zhì)。
將石頭從雄黃礦石中除去。將重50-100g的所得雄黃晶體置于裝有0.5升去離子雙重蒸餾水(DD水)的大研缽中。把雄黃晶體破碎，用研棒研磨，并懸浮在DD水中。通過加入0.12M鹽酸將該懸浮液的pH調(diào)節(jié)至4.5。通過手工或者在具有自動研棒的研缽中將該研磨操作繼續(xù)2小時。將該沉積物沉降，棄去或虹吸出上清液。用鹽酸(pH4.5)把上述洗滌和研磨操作重復(fù)3次，每次2小時。用磁攪拌器在大燒杯中攪拌過夜完成第4個操作。棄去上清液，用自動吸收分光計(jì)檢測砷。上清液中的砷不應(yīng)當(dāng)超過20mg/L。否則的話，應(yīng)當(dāng)在燒杯中用磁攪拌器繼續(xù)進(jìn)行3-4小時上述洗滌操作直至上清液中砷濃度低于20mg/L。棄去上清液。用1升DD水在具有磁攪拌的燒杯中將剩余二硫化二砷沉積物洗滌2次，每次2小時。把所得細(xì)粉末在4℃干燥。
6.2制備二硫化二砷制劑在適于口服給藥的含二硫化二砷的組合物的配制中，使用側(cè)柏子-一種側(cè)柏植物作為載體。所用側(cè)柏子得自中藥市場。將通過上述方法獲得的As4S4與0.25g側(cè)柏子混合并研磨。然后將所得混合物置于膠囊中，使每一膠囊的總重量為0.5g。這種膠囊特別適于口服給藥。
在另一實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)了多種溶劑例如聚乙烯吡咯烷酮、吡咯烷酮、乙醇、乙醚、磷酸氫二鈉、巰基嘌呤和碳酸氫鈉來增加As4S4的溶解度。結(jié)果表明，As4S4能溶于不同濃度的上述溶劑中。因此，溶于上述溶劑的As4S4可用于靜脈內(nèi)給藥。
6.3臨床治療6.3.1治療方案對新近診斷出或復(fù)發(fā)的患者給予和目前正處于緩解期的患者不同的治療方案。為了實(shí)現(xiàn)完全緩解，將確定劑量的含有二硫化二砷的化合物對患者給藥，每天給藥4次，共給藥3天。給藥劑量優(yōu)選為約0.5-約0.75g二硫化二砷。每一口服劑量相當(dāng)于依據(jù)上述制劑的2-3粒膠囊。3天的初始治療后，將該組合物以每天3次的頻率對患者給藥直至實(shí)現(xiàn)緩解。為了預(yù)防由于體內(nèi)砷的堆積所致的并發(fā)癥，治療不應(yīng)當(dāng)超過100天。在大多數(shù)情況下，應(yīng)當(dāng)在治療進(jìn)行49天以前誘導(dǎo)出良好反應(yīng)。隨后的給藥劑量可以比最初3天的給藥劑量少一些。如果100天后對患者的治療仍沒產(chǎn)生良好反應(yīng)，則應(yīng)當(dāng)停止治療。這樣的話，應(yīng)當(dāng)通過檢驗(yàn)重新評估患者，在開始另一依據(jù)該方案的治療之前，讓患者休息。
用于將患者維持在完全緩解狀態(tài)，或治療處于緩解期、并具有殘余白血病遺傳標(biāo)記的治療方案與上述治療方案不同。為了維持完全緩解，用依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)節(jié)的、確定量的含有二硫化二砷的組合物對患者給藥，每天給藥3-4次，給藥14天。然后將治療停止一段時間。在該期間，檢測患者。依據(jù)檢測結(jié)果調(diào)整治療，并根據(jù)結(jié)果暫停治療2周-100天。維持的時間根據(jù)患者的狀況而定，并且可維持長達(dá)3年(包括治療和休息時間)。在該治療時期，每次劑量優(yōu)選含有包含約0.50-0.75g二硫化二砷。再一次優(yōu)選的給藥方法是通過使用上述膠囊來口服給藥。維持治療通常分成兩個階段。
6.3.2病例研究構(gòu)成該病例研究一部分的所有患者都已診斷出患有APL，其中診斷是依據(jù)AML-M3，即根據(jù)多顆粒早幼粒細(xì)胞白血病的細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫細(xì)胞標(biāo)記物、表明易位(15；17)的染色體分析、和陽性PML/RARαmRNA表達(dá)進(jìn)行的。有些患者參見僅基于細(xì)胞形態(tài)學(xué)病理改變即作業(yè)診斷的研究；追蹤這些患者的診斷并通過本項(xiàng)研究來確認(rèn)。如病例研究3和4所示，慢性粒細(xì)胞性白血病和淋巴瘤患者也受益于二硫化二砷治療。
該研究的包含標(biāo)準(zhǔn)包括處于APL復(fù)發(fā)的患者、用ATRA或細(xì)胞毒性劑不能達(dá)到完全緩解的患者、常規(guī)治療后通過PCR分析表現(xiàn)出殘余白血病細(xì)胞(表示有可能復(fù)發(fā))的處于完全緩解狀態(tài)的患者。51個患者達(dá)到該研究的包含標(biāo)準(zhǔn)。
該研究的排除標(biāo)準(zhǔn)包括對砷化合物有過敏史，以前用含有砷的藥物進(jìn)行過治療，處于危象狀態(tài)的患者，過低或過高的白細(xì)胞數(shù)目，目前心臟、肝臟或腎臟有病癥，以及嚴(yán)重感染。有3個患者被這些標(biāo)準(zhǔn)排除，在本項(xiàng)研究中僅剩下48名患者。依據(jù)上述治療方案用二硫化二砷對所有48名患者進(jìn)行治療。所有48名患者都活著，并在1998年解除了白血病。
在依據(jù)本治療方案進(jìn)行治療之前，這些患者中有10名是新近診斷出患病或處于復(fù)發(fā)期(即不在緩解期)。在達(dá)到完全緩解之前，給8名患者進(jìn)行一個療程的治療，給余下2名患者分別進(jìn)行2個和3個療程的治療。所有這10名患者都活著，并保持完全緩解，即不表現(xiàn)出白血病。
在本項(xiàng)研究中，在治療前處于完全緩解狀態(tài)的許多患者對于指示殘余白血病細(xì)胞的標(biāo)記物表現(xiàn)出陽性結(jié)果。依據(jù)上述維持治療方案進(jìn)行治療后，當(dāng)再測試時，所有這些患者都表現(xiàn)出持續(xù)的陰性結(jié)果。
與其它抗癌劑相比，用二硫化二砷進(jìn)行治療的副作用非常小?？赡艿母弊饔冒ㄊ秤陆怠⑤p微腹瀉、和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)短暫的可逆增加。少數(shù)患者經(jīng)歷了皮膚瘙癢或眼瞼浮腫，并且在34％患者中緩慢地發(fā)生了輕度白細(xì)胞減少。1名患者發(fā)生了血小板減少，但是沒有出血。沒有與使用硫化砷有關(guān)的死亡。病例研究1一名在1997年6月覺察出初始癥狀的35歲男性患者于1997年7月22日被診斷出患有APL。該患者的白細(xì)胞數(shù)目為7.0×109/L，血紅蛋白為9gm％，血小板水平為34.0×109/L。細(xì)胞遺傳分析表明發(fā)生了(15；17)易位，PCR表現(xiàn)出PML-RARα(+)。在開始二硫化二砷治療之前用ATRA治療1天。在1997年7月22日依據(jù)上述治療方案開始進(jìn)行治療。治療25天后，在1997年8月19日停止治療。在1997年8月28日，檢驗(yàn)表明患者病情已完全緩解，并且原始細(xì)胞和白血病早幼粒細(xì)胞低于5％。依據(jù)上述治療方案治療僅36天后就達(dá)到了該水平。如附圖1所示，患者的血紅蛋白和血小板水平有顯著增加。附圖2表明，用二硫化二砷治療后，原始細(xì)胞和白細(xì)胞顯著減少。病例研究2一名32歲女性患者在1996年5月24日被診斷出患有APL。她用ATRA治療了40天，隨后用高三尖杉酯堿/Ara-C治療了4個療程。對該患者的治療取得了一些成功，并且她休息了6個月。該患者在1997年6月6日復(fù)發(fā)。她的白細(xì)胞數(shù)目為2.2×109/L，血紅蛋白為10.7gm％，血小板數(shù)目為1.5×109/L。在1997年7月9日開始用二硫化二砷治療。依據(jù)上述治療方案對該患者治療21天。該患者的病情在1997年7月28日完全緩解。附圖3表明患者的血紅蛋白和血小板水平發(fā)生了變化。附圖4表明，用二硫化二砷治療后，原始細(xì)胞和白細(xì)胞顯著減少。病例研究3一名40歲男性患者在1959年2月被診斷出患有慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)。在當(dāng)時，其白細(xì)胞數(shù)目為1.5×105/mm3，血小板水平為1.4×105/mm3。起初他是用二甲磺酸丁酯進(jìn)行治療。在1960年1月20日，其白細(xì)胞數(shù)目為3.15×106/mm3，早幼粒細(xì)胞和中幼粒細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)為11％。骨髓照片表明細(xì)胞構(gòu)成提高了，髓系細(xì)胞占多數(shù)，且中幼粒細(xì)胞占21％。將0.6g二硫化二砷對患者給藥，每天給藥2次。在治療時，控制血液和骨髓照片。1965年9月5日，患者由于和硫化砷治療無關(guān)的感染而死亡。病例實(shí)驗(yàn)4一名15歲女性患者在1996年9月被診斷出患有非何杰金氏淋巴瘤，采用聯(lián)合化療方案對其進(jìn)行治療，并采用顱側(cè)輻射治療腦膜淋巴瘤。還對她采用高劑量的化學(xué)放射治療來防止自體干細(xì)胞遷移。該患者復(fù)發(fā)過數(shù)次，包括顱內(nèi)復(fù)發(fā)，并且在周圍血液中有大量淋巴瘤細(xì)胞，表現(xiàn)出淋巴瘤/白血病的典型臨床和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)特征。在1998年3月，她接受了依據(jù)上述治療方案的二硫化二砷治療。從那時起，她的病情已經(jīng)緩解了。
本發(fā)明并不限于本說明書中描述的具體實(shí)施方案的范圍。實(shí)際上，除了所述實(shí)施方案以外，通過前面的描述、本發(fā)明的各種變型對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。這些變型也落在本發(fā)明權(quán)利要求書所限定的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1．用于在哺乳動物中治療血癌的藥物組合物，其中包含有效量的硫化砷化合物。
2．權(quán)利要求1的藥物組合物，其中還包含可藥用載體或賦形劑。
3．適于對人口服給藥的藥物組合物，其中包含有效量的硫化砷化合物。
4．權(quán)利要求3的藥物組合物，其中還包含可藥用載體或賦形劑。
5．權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述哺乳動物是人。
6．權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述硫化砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5和As4S4。
7．權(quán)利要求6的藥物組合物，其中所述硫化砷化合物是As4S4。
8．權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述硫化砷化合物的量為約100mg-約2g。
9．權(quán)利要求2的藥物組合物，其中可藥用載體或賦形劑是植物種子。
10．權(quán)利要求9的藥物組合物，其中所述植物種子是側(cè)柏子。
11．權(quán)利要求1的藥物組合物，其中還包含有效量的砷化合物，所述硫化砷化合物與砷化合物不是相同化合物。
12．權(quán)利要求11的藥物組合物，其中所述砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5、As4S4和As2O3。
13．權(quán)利要求1的藥物組合物，其中還包含有效量的治療劑，所述治療劑選自芥子化合物、氮芥、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、環(huán)磷酰胺、白消安、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、阿糖孢苷、阿糖胞嘧啶、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、甲氨蝶呤、長春新堿、長春堿、紫杉醇、依托泊苷、temiposide、更生霉素、柔紅霉素、阿霉素、表阿霉素、米托蒽醌、博萊霉素、絲裂霉素、順鉑、卡鉑、磷酸雌莫司汀、羥基脲、BCNU、丙卡巴肼、VM-26(替尼泊苷)、干擾素、以及所有反式視黃酸。
14．用于在哺乳動物中治療血癌的藥物組合物，其中包含有效量的雄黃和可藥用載體或賦形劑。
15．治療人血癌的方法，包括將有效量的硫化砷化合物對需要這種治療的人給藥。
16．權(quán)利要求15的方法，其中還包括可藥用載體或賦形劑。
17．權(quán)利要求15的方法，其中所述血癌選自急性成淋巴細(xì)胞白血病(ALL)、急性成淋巴細(xì)胞B-細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞T-細(xì)胞白血病、急性非淋巴細(xì)胞白血病(ANLL)、急性原始粒細(xì)胞白血病(AML)、急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、急性成單核細(xì)胞白血病、急性紅白血病性白血病、急性成巨核細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)、多發(fā)性骨髓瘤、脊髓增生異常綜合征(MDS)例如難治性貧血伴幼稚細(xì)胞增多(RAEB)和在轉(zhuǎn)化為白血病的過程中的難治性貧血(RAEB-T)、和慢性粒-單細(xì)胞性白血病(CMML)。
18．權(quán)利要求17的方法，其中所述血癌是急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)。
19．權(quán)利要求17的方法，其中所述血癌是慢性粒細(xì)胞性白血病或慢性骨髓性白血病(CML)。
20．權(quán)利要求17的方法，其中所述血癌是慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)。
21．權(quán)利要求17的方法，其中所述血癌是多發(fā)性骨髓瘤。
22．權(quán)利要求15的方法，其中所述血癌選自重度淋巴瘤、中度淋巴瘤和輕度淋巴瘤。
23．權(quán)利要求15的方法，其中所述血癌是非何杰金氏淋巴瘤。
24．權(quán)利要求15的方法，其中所述硫化砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5和As4S4。
25．權(quán)利要求24的方法，其中所述硫化砷化合物是As4S4。
26．權(quán)利要求15的方法，其中所述硫化砷化合物的量為100mg-2g。
27．治療人血癌的方法，包括將有效量的硫化砷化合物和有效量的砷化合物對需要這種治療的人給藥，其中所述硫化砷化合物與砷化合物不是相同化合物。
28．權(quán)利要求27的方法，其中還包括可藥用載體或賦形劑。
29．權(quán)利要求27的方法，其中所述血癌選自急性成淋巴細(xì)胞白血病(ALL)、急性成淋巴細(xì)胞B-細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞T-細(xì)胞白血病、急性非淋巴細(xì)胞白血病(ANLL)、急性原始粒細(xì)胞白血病(AML)、急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、急性成單核細(xì)胞白血病、急性紅白血病性白血病、急性成巨核細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)、多發(fā)性骨髓瘤、脊髓增生異常綜合征(MDS)例如難治性貧血伴幼稚細(xì)胞增多(RAEB)和在轉(zhuǎn)化為白血病過程中的難治性貧血(RAEB-T)、和慢性粒-單細(xì)胞性白血病(CMML)。
30．權(quán)利要求29的方法，其中所述血癌是急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)。
31．權(quán)利要求29的方法，其中所述血癌是慢性粒細(xì)胞性白血病或慢性骨髓性白血病(CML)。
32．權(quán)利要求29的方法，其中所述血癌是慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)。
33．權(quán)利要求29的方法，其中所述血癌是多發(fā)性骨髓瘤。
34．權(quán)利要求29的方法，其中所述血癌選自重度淋巴瘤、中度淋巴瘤和輕度淋巴瘤。
35．權(quán)利要求29的方法，其中所述血癌是非何杰金氏淋巴瘤。
36．權(quán)利要求27的方法，其中所述硫化砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5和As4S4。
37．權(quán)利要求36的方法，其中所述硫化砷化合物是As4S4。
38．權(quán)利要求27的方法，其中所述砷化合物選自As2S2、As2S3、As2S5、As4S4和As2O3。
39．權(quán)利要求27的方法，其中所述硫化砷化合物是As4S4，并且所述砷化合物是As2O3。
40．治療新近診斷出患有白血病或淋巴瘤或處于白血病或淋巴瘤復(fù)發(fā)階段的人的復(fù)發(fā)，包括a)在第一個治療階段，將有效量的硫化砷化合物對所述患者給藥多次；和b)在第二個治療階段，將有效量的硫化砷化合物對所述患者給藥，該治療階段的給藥次數(shù)比在第一個治療階段的給藥次數(shù)少，其中第一個治療階段和第二個治療階段合起來不超過100天。
41．權(quán)利要求40的方法，其中白血病或淋巴瘤選自急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)、非何杰金氏淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤。
42．權(quán)利要求40的方法，其中所述硫化砷化合物是As4S4。
43．權(quán)利要求42的方法，其中As4S4的量是約100mg-約2g。
44．權(quán)利要求40的方法，其中在第一個治療階段，所述硫化砷化合物每天給藥4次。
45．權(quán)利要求40的方法，其中在第二個治療階段，所述硫化砷化合物每天給藥3-4次。
46．將患者維持在白血病或淋巴瘤的完全緩解階段的方法，包括a)在第一個治療階段，對處于所述白血病或淋巴瘤緩解階段的患者給予有效量的硫化砷化合物；b)對患有所述白血病或淋巴瘤的患者進(jìn)行臨床檢驗(yàn)；和c)如果步驟(b)中臨床檢驗(yàn)的結(jié)果表明需要給藥將患者完全維持在所述白血病或淋巴瘤的完全緩解階段，則對患者給予有效量的硫化砷化合物。
47．權(quán)利要求46的方法，其中白血病或淋巴瘤選自急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)、非何杰金氏淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤。
48．權(quán)利要求46的方法，其中所述硫化砷化合物是As4S4。
49．權(quán)利要求46的方法，其中As4S4的量是約100mg-約2g。
50．權(quán)利要求46的方法，其中在第一個治療階段，所述硫化砷化合物每天給藥3-4次。
51．權(quán)利要求46的方法，其中在第二個治療階段為約2周-約100天。
52．制備二硫化二砷(As4S4)的方法，所述As4S4基本上不含有三氧化二砷(As2O3)，其中包括(a)將雄黃懸浮在pH約為6-7的水溶液中；(b)將該雄黃懸浮液的pH調(diào)節(jié)至約4-4.5；(c)棄去所得上清液，把剩余沉積物重懸在pH約為4-4.5的溶液中；(d)重復(fù)步驟(c)，直至所述上清液中的砷濃度低于20mg/L；(e)用pH約為6-7的水溶液洗滌步驟(d)所得剩余沉積物；和(f)在非氧化條件下將所得粉末干燥。
53．權(quán)利要求52的方法，其中在在步驟(a)和(e)中使用水溶液是去離子雙重蒸餾水。
54．權(quán)利要求52的方法，其中在在步驟(c)中使用溶液是鹽酸或乙酸溶液。
55．依據(jù)權(quán)利要求52的方法制得的二硫化二砷。
全文摘要
本發(fā)明涉及硫化砷化合物。本發(fā)明還涉及含有硫化砷化合物、用于治療癌癥例如白血病或淋巴瘤的藥物組合物。本發(fā)明還涉及用硫化砷化合物治療癌癥例如白血病或淋巴瘤的方法。本發(fā)明還涉及制備二硫化二砷(As
文檔編號A61P35/00GK1299284SQ98814131
公開日2001年6月13日 申請日期1998年7月6日 優(yōu)先權(quán)日1998年4月24日
發(fā)明者陸道培 申請人:陸道培