專利名稱：：利用電打孔給藥和傳送基因的治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及治療人和其它動物中的疾病，具體地說，涉及一種改進(jìn)的方法和設(shè)備，該方法和設(shè)備在患者體內(nèi)施加受控電場借助電打孔將基因和藥物化合物送入患者的活細(xì)胞。本發(fā)明的技術(shù)背景在70年代，人們發(fā)現(xiàn)電場能夠在細(xì)胞上打孔且不給細(xì)胞帶來永久損傷。這項發(fā)現(xiàn)使大分子注入細(xì)胞質(zhì)成為可能。人們知道可以通過所謂的電打孔方法將基因和其它分子(如藥物化合物)并入活細(xì)胞。將基因或其它分子與活細(xì)胞在緩沖介質(zhì)中混合并且施加強(qiáng)電場。細(xì)胞膜瞬時變成多孔的，于是基因或分子進(jìn)入細(xì)胞。在那里它們能夠改善細(xì)胞的基因組。最近已經(jīng)有人提出將電打孔作為治療某些疾病(如癌)的一種途徑。例如，在用化療治療某些類型的癌癥時，必要的是使用足夠劑量的藥物殺死癌細(xì)胞且被殺死的正常細(xì)胞的數(shù)量又是可以接受的。如果化療藥物能夠直接注入癌細(xì)胞內(nèi)部，那么這個目標(biāo)將能實(shí)現(xiàn)。某些最好的抗癌藥(如平陽酶素)通常不能穿越某些癌細(xì)胞的細(xì)胞壁。但是，電打孔使平陽酶素進(jìn)入細(xì)胞成為可能。電打孔的醫(yī)療應(yīng)用之一是用于治療癌癥。實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的哺乳動物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)完成，并且有下述報告Okino，M.，E.Kensuke，1990，“TheeffectsofaSingleHighVoltageElectricalStimulationwithanAnticancerDrugoninvivoGrowingMalignantTumors”，Jan.JournalofSurgery.20197-204、Mir.L.M.，S.Orlowski，J.BelehradekJr.，以及C.Paoletti，1991，“ElectrochemotherapyPotentiationofAntitumorEffectofBlomycinbyLocalElectricPulses“，Eur.J.Cancer，2768-72。臨床試驗(yàn)已經(jīng)由Mir.L.M.，M.Belehradek，C.Domenge，S.Orlowski，以及B.Poddevin等人完成，并且于1991年發(fā)表報告“Electrochemotherapy，anovelantitumortreatmentfirstclinicaltrials”，C.R.Acad.Sci.Paris，313613-618。這種治療是借助直接將抗癌藥物注入腫瘤并且將電場施加給一對電極之間的腫瘤完成的。必須合理地精確地調(diào)整電場強(qiáng)度，以使腫瘤細(xì)胞發(fā)生電打孔而且不損傷任何正常細(xì)胞(即健康細(xì)胞)，至少將損傷正常細(xì)胞(即健康細(xì)胞)的數(shù)量降到最低。對于外部的腫瘤在正常情況下這種治療容易完成。將電極置于腫瘤的對置的兩側(cè)，使電場位于電極之間，然后測量電極之間的距離并且按照公式E＝V/d將適當(dāng)?shù)碾妷菏┘咏o電極(公式中E是電場強(qiáng)度，單位是V/cm；V是電壓，單位是V；d是距離，單位是cm)。在需要處理內(nèi)部腫瘤時，適當(dāng)?shù)拇_定電極位置和測量電極間距離就不容易了。在上述發(fā)明應(yīng)用中，揭示了一種適合體內(nèi)電打孔的電極系統(tǒng)，其中電極可以插入體腔。在相關(guān)的美國專利5,273,525中，用于電打孔注入分子和大分子的注射器是同時起電極作用的注射針。這種結(jié)構(gòu)使電極在皮下的部位起作用。實(shí)際需要的是有一個電極裝置，該裝置具有能夠插入腫瘤或接近腫瘤的電極，以致能夠在該組織中產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞電打孔所需的預(yù)定的電場。研究工作業(yè)已表明大型核苷酸序列(高達(dá)630kb)能夠經(jīng)電打孔導(dǎo)入哺乳動物的細(xì)胞，并借此提供一種基因治療方法。(參閱下述文獻(xiàn)Eanault等人，Gene(Amsterdam)，Vol.144(2)p305，1994；NucleicAcidsResearch，Vol.15(3)p1311，1987；Knutson等人，Anal.Biochem.，Vol.164p44，1987；Gibson等人，EMBOJ.Vol.6(8)p2457，1987；Dower等人，GeneticEngineering，Vol.12p275，1990；Mozo等人，PlantMolecularBiology，Vol.16p917，1991)本發(fā)明概述因此，本發(fā)明的首要目標(biāo)是提供一種改進(jìn)設(shè)備，該設(shè)備能夠方便有效地定位，以便在組織中產(chǎn)生預(yù)定的電場。本發(fā)明另一個主要目標(biāo)是一種改進(jìn)設(shè)備，該設(shè)備提供一種方便有效的裝置，該裝置適合將電極定位到組織中以便將治療藥物注入該組織并將電場施加給該組織。依據(jù)本發(fā)明的首要方面適合將電打孔應(yīng)用于患者身體某個部分的電極設(shè)備包括支撐部件；許多針狀電極，該組針狀電極可調(diào)地安裝在所述支撐部件上，適合按照選定的的位置和間隔距離插入組織；以及一套裝置，該裝置包括一臺信號發(fā)生器，該信號發(fā)生器能夠?qū)λ鼍嚯x作出響應(yīng)，將與所述電極間的距離成正比的電信號施加給電極，以便產(chǎn)生預(yù)定強(qiáng)度的電場。本發(fā)明的另一個方面包括一些針，這些針的作用是將治療藥物注入組織并且作為電極產(chǎn)生適合部分組織細(xì)胞的電場。本發(fā)明的另一方面是提供一種治療方法，該方法利用針陣列裝置處理細(xì)胞，特別是腫瘤細(xì)胞。附圖的簡要說明結(jié)合附圖閱讀下面的詳細(xì)說明將更容易體會本發(fā)明的目標(biāo)、優(yōu)點(diǎn)和特征?，F(xiàn)將附圖簡要說明如下圖1是依據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中針組合件的剖面圖。圖2是圖1所示實(shí)施方案的仰視圖。圖3是本發(fā)明另一個實(shí)施方案中組合件的立體圖。圖4是圖3所示實(shí)施方案組裝后的立體圖。圖5是適合圖4電極組合件的選擇開關(guān)的立體圖。圖6a-6b是圖5中的開關(guān)選擇接觸位置的圖解說明。圖7是本發(fā)明第三個實(shí)施方案的立體圖。圖8是本發(fā)明第四個實(shí)施方案的立體圖。圖9a-9d是俯視圖，說明優(yōu)先選擇的電極形式以及使用順序。圖10a和10b說明異種移植Panc-3的裸鼠體內(nèi)的腫瘤用平陽酶素進(jìn)行ECT治療43天后的體積(圖中D表示藥物，E表示電打孔)。圖11圖解說明在裸鼠體內(nèi)Panc-3細(xì)胞瘤在用平陽酶素進(jìn)行ECT治療后的增長。圖12a和12b分別說明異種移植非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的裸鼠體內(nèi)的腫瘤用平陽酶素進(jìn)行ECT治療20和34天后的體積(圖中D表示藥物，E表示電打孔)。圖13說明異種移植非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的裸鼠體內(nèi)的腫瘤用平陽酶素進(jìn)行ECT治療34天后的體積。箭頭表示在第27天給一只鼠再次進(jìn)行處理(圖中D表示藥物，E表示電打孔)。圖14a和14b說明在分別異種移植Panc-3和NSCLC的裸鼠試樣中在施加脈沖前用新制癌菌素定量給藥的效果。圖14c和14d說明在異種移植Panc-3的裸鼠試樣中在施加脈沖后用新制癌菌素定量給藥的效果。本發(fā)明的最佳實(shí)施例在本文中術(shù)語“分子”包括藥劑、基因、抗體或其他的蛋白。電打孔在人體治療應(yīng)用由兩部分組成，包括將抗癌藥物注入腫瘤，以及將電極置于腫瘤對置的兩側(cè)并在電極之間施加電壓脈沖通過電打孔將藥物導(dǎo)入腫瘤，這種治療方法被稱為電化學(xué)療法(ECT)。本發(fā)明設(shè)計的主要目的是為了使如Okino和Mir等人報告的ECT療法能夠在非體表腫瘤(如體內(nèi)腫瘤)中得以實(shí)施。但是它也可以用于其他的治療應(yīng)用。參照圖1，該圖說明了一種針組合件，該組合件是依據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選的實(shí)施方案設(shè)計的并且用數(shù)字10代表它。這個針組合件包括一個細(xì)長的管狀支撐體12，該支撐體最好是不銹鋼的空心軸。中心針座14安裝在軸12的下端并且有一個中心孔16，中心針18在該孔中并可順著該孔滑動。軸12包括針的出口槽20，通過該槽針狀電極18從槽內(nèi)延伸到槽外，在槽外它借助接線端子22緊固在管12的外面。電極18的上端可以緊固到螺釘24上，以便與電路連接。管座12的下端包括螺紋26，安裝了許多顆針的針環(huán)28和制動環(huán)30被安裝在該螺紋上，制動環(huán)的作用是制止針環(huán)28移動位置，即將針環(huán)28鎖定在某個位置。許多針32安裝在沿著針環(huán)28的外表面等間隔排列的槽34中。這樣提供了一個等間隔排列的針的環(huán)形陣列，在所示的實(shí)施方案中為8個。借助帶形接線端子36這些針保持在適當(dāng)?shù)奈恢蒙?，帶形接線端子36的兩端借助螺釘螺母38緊固在一起，該帶形接線端子還起著這些針的電連接作用。帶形接線端子36直接將這些針固定并保持在適當(dāng)?shù)奈恢蒙?。這個電極組合件是為了在將這些針插入組織時將電能施加給活組織而設(shè)計的。中心針18作為一個電極，正極或負(fù)極，其他的針即環(huán)形排列的針32作相反的電極。當(dāng)接線端子安裝好并緊固時，所有這些針都保持在固定的位置上。這些針當(dāng)中有一顆或多顆針可以是筒形或管形的，以便將基因、藥物、或其它物質(zhì)的分子注入該組織。在操作時，應(yīng)當(dāng)調(diào)整中心針，使它刺入組織達(dá)到符合需要的深度。為了做到這一點(diǎn)，松開中心針的接線端子22，讓中心針18向內(nèi)或向外滑動，象在圖1中所見到的那樣，以使它從中心針導(dǎo)座14中伸出，達(dá)到符合需要的刺入距離。然后在該位置將該針夾緊。然后調(diào)整環(huán)形分布的針32，使它刺入組織達(dá)到符合需要的深度。這可以借助松開帶形接線端子36并使這些針滑到符合需要的位置?？梢越柚苿俞槶h(huán)28使它向軸12的末端移動或遠(yuǎn)離該末端上下移動完成輔助調(diào)整。治療物質(zhì)可以通過這些針當(dāng)中的一顆或多顆針注入該組織，或者借助單獨(dú)的設(shè)備注入該組織。在所有的針都調(diào)整到適當(dāng)?shù)拇倘肷疃戎?，握緊軸12把針插入組織達(dá)到符合需要的深度。然后，將適當(dāng)?shù)拿}沖發(fā)生器與電極組合件連接起來并且將適當(dāng)?shù)碾妷菏┘咏o電極。在施加電壓之前，將適量的治療物質(zhì)，如基因或用于處理該組織的適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)物質(zhì)或藥物的分子注入組織。這種電極組合件的改進(jìn)方案可以包括一個在中心電極位置上的實(shí)心的非刺入電極(未示出)。非剌入的中心電極可以是任何適當(dāng)形狀的導(dǎo)體，例如鈕扣形或平板形，它安裝在軸12的末端并且與組織表面接觸。應(yīng)當(dāng)調(diào)整環(huán)形排列的針，使它們在中心電極被支撐在組織表面上時刺入組織并達(dá)到符合需要的深度。電能從刺入的針經(jīng)過組織流向表面上的中心電極。為了治療接近表面的腫瘤可以采用這些安排，在這種場合電極的環(huán)形陣列是為包圍腫瘤而設(shè)計的。中心電極的定位使得電能通過組織流向中心電極。這種電極組合件的其它優(yōu)點(diǎn)包括所有的針18和32都能夠獨(dú)立地調(diào)整，以達(dá)到符合需要的刺入深度。針環(huán)28也可以調(diào)整，使它離開軸12的末端定位，以致能夠直接觀察中心針和環(huán)形排列的針的插入。此外，為了包圍待處理的組織區(qū)域，針環(huán)28可以具有任何尺寸和結(jié)構(gòu)。參照圖3和圖4，該圖說明了針狀電極環(huán)形陣列組合件的替代實(shí)施方案，并且通常用數(shù)字40代表。這種針組合件包括針42至52的環(huán)形陣列，這些針等間隔地安裝在轂盤54中，該轂盤安裝在細(xì)長的圓柱形軸56上。轂盤54最好有適當(dāng)選定的直徑，以便提供圍繞著腫瘤或其它待處理的組織定位所需要的陣列直徑。這些針當(dāng)中可以有一顆或多顆針是空心針以便能夠注入治療物質(zhì)的分子，后面將更全面地敘述。電接線插座組合件包括座體58，座體有中心孔60，軸56將安裝在該中心孔內(nèi)，以及環(huán)形針座陣列62至72，針42至52的一端容納在針座中。針座62至72將實(shí)現(xiàn)針42至52與接線端子74至84的電連接，接線端子又與電流分配器連接，下面繼續(xù)介紹。電接線器插座組合件58裝配到軸56上，于是針的一端插入針座62至72，與接線端子74至84完成電連接。將安裝好針陣列轂盤54和插座58的軸56安裝到適合握持的手柄86上。手柄86呈長圓柱形狀，適合用手握持操作。手柄86上有一個朝前的插座，該插座有朝前延伸的管狀軸88，管狀軸上有孔90，當(dāng)軸88插入接線器部件58內(nèi)的孔(未示出)時，軸56插入孔90。軸56插入孔90并且軸56上有環(huán)形槽92，借助軸頸鎖定器將該槽鎖定，該軸頸鎖定器包括在橫置孔96中偏向一側(cè)的橫置銷94，并且有容納軸頸92并將它鎖定在手柄中的孔98。彈簧102安裝在孔96中使橫置銷94偏置到鎖定位置。按壓橫置銷94的一端100，可以松開軸56，將它取出。當(dāng)手柄如圖4所示裝配時，可以用手握緊手柄把針插入選定的組織區(qū)。優(yōu)先選擇調(diào)整針42至52的距離，使這些針定位在待治療的組織周圍。如上所述，這些針42至52當(dāng)中可以有一顆或多顆針是空心針，用于注入需要的治療藥物。然后，將電極接線端子74至84按優(yōu)先選擇的配置接到旋轉(zhuǎn)開關(guān)組合件上，如圖5所示，利用該旋轉(zhuǎn)開關(guān)選擇需要激活即需要施加電壓的對置的電極對。開關(guān)組合件通常用數(shù)字104表示，該組合件包括固定的圓柱形殼體106，在殼體中安裝著轉(zhuǎn)輪108，轉(zhuǎn)輪上有隔開的接觸片110和112，這一對接觸片通過一對接線器114和116與脈沖功率發(fā)生器115相連。旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)輪改變接觸片110和112在殼體106中的位置，使它們與環(huán)形排列的與接線端子74至84連通的觸點(diǎn)118、120、122、124、126、和128接觸。參照圖6a至圖6c，轉(zhuǎn)輪108上有內(nèi)部的接觸片110和112，每個接觸片可以在觸點(diǎn)118至128中橋接兩個觸點(diǎn)，這些觸點(diǎn)又通過接線端子74至84與脈沖源連通。內(nèi)部的接觸片110和112隨著轉(zhuǎn)輪108旋轉(zhuǎn)，選擇接觸位置，確定與內(nèi)部觸點(diǎn)118至128當(dāng)中哪些觸點(diǎn)對連通，借此確定激活哪對對置的針狀電極。這樣使操作者能夠依據(jù)最佳治療方案圍繞著選定的組織選擇電極位置和電場方向。轉(zhuǎn)輪108使操作者能夠選擇如何產(chǎn)生電場，是從各個方向包圍組織還是穿越組織。參照圖7，它說明本發(fā)明另一個實(shí)施方案，在這個方案中產(chǎn)生電場的電極陣列平行設(shè)置并且相對位置可以調(diào)整。電極組合件以數(shù)字130表示，該組合件包括一對針狀電極陣列132和134，這對陣列包括安裝在絕緣的支撐零件140上的導(dǎo)電的針狀電極136和138。針陣列132保持在固定夾具142中，允許以支撐為基準(zhǔn)調(diào)整針136的深度。針138安裝在活動夾具146中，借助緊固螺釘148可以調(diào)整該夾具的位置。在針136和138中，每根針上都有限制刺入深度的制動環(huán)144。在設(shè)置間距的緊固螺釘148將夾具146按照選定的位置固定在支撐140上。間距傳感器150感受針陣列132和134之間的距離并產(chǎn)生一個信號，通過電纜152將該信號傳送給脈沖發(fā)生器。脈沖發(fā)生器借助電纜154和156與針狀電極相連。參照圖8，它說明針座的詳細(xì)結(jié)構(gòu)，該針座通過各種排列方式建立不同形態(tài)的針陣列，即拉開距離的一對針，或平行的針陣列。這個實(shí)施方案包括一個底座158，該底座上有許多毗鄰的平行槽160，針162和164可以按照選定的相對位置固定在該平行槽中。如圖所示，這個針座可以用于安裝一對極性相反的針狀電極162和164?？梢赃x擇這些針的相對位置，使它們定位于選定組織的兩側(cè)。借助夾板159將針鎖定在槽中。此外，該針座可以與附加針座結(jié)合使用，以便在選定組織的對置的側(cè)面提供多重陣列。圖示的針可以經(jīng)接線端子166和168與適當(dāng)?shù)拿}沖發(fā)生器連接。參照圖9a至圖9d，這些圖對本發(fā)明做了補(bǔ)充說明。正象清楚的圖解說明那樣，組合電極可以采取多個單針170和172形式，使用時首先將針插入選定的組織區(qū)，或插在選定組織區(qū)的側(cè)面，例如插在圖示的腫瘤194的兩側(cè)。然后，將針與注射管或其他的分子源連接起來，將選定的分子溶液注入組織區(qū)。這些針可以是不導(dǎo)電的，將一對電極176和178通過相應(yīng)的針孔腔送入該組織，如圖9b所示，然后將針拔出，如圖9c所示。每個電極176或178備有一段絕緣導(dǎo)線180或182以及一個電極引出頭184或186。然后，可以用小型接線夾192和194將來自適當(dāng)?shù)墓β拾l(fā)生器的一對導(dǎo)線188和190與電極引出頭連接起來，在電極之間施加電壓，如圖9d所示。這樣在組織中產(chǎn)生電場，并用電場在選定的組織如腫瘤等中的細(xì)胞上開孔。這種電打孔可以使選定的分子進(jìn)入組織細(xì)胞，可以象希望的那樣更有效地殺死該細(xì)胞或改變該細(xì)胞。這種形式的針還可以在上述的任何組合件或全部組合件中使用。上述的各種針狀電極組合件使電極能夠定位在體內(nèi)的腫瘤或其它組織中，或者定位在體內(nèi)的腫瘤或其它組織附近。雖然本發(fā)明應(yīng)用的核心是電化學(xué)療法，但是，本發(fā)明的各種實(shí)施方案可以用于其它治療，如某些身體器官的基因治療。待產(chǎn)生的電場性質(zhì)由組織的性質(zhì)、選定組織的大小和位置確定。符合需要的電場是幅度正確并且盡可能均勻的電場。電場強(qiáng)度過大將導(dǎo)致細(xì)胞溶解，電場強(qiáng)度過低將導(dǎo)致降低效力。電極可以有許多種安裝和操作方式，包括但不限于在原始應(yīng)用中采用的那些方式?？梢园凑粘Ｒ?guī)用手術(shù)鉗在體內(nèi)操作電極。由脈沖發(fā)生器提供的電信號波形可以是指數(shù)衰減型脈沖、方波脈沖、單極性振蕩脈沖串、或雙極性振蕩脈沖串。電場強(qiáng)度可以是0.2kV/cm至20kV/cm。脈沖持續(xù)時間可以是10μsec.至100msec.。脈沖個數(shù)可以從1個至100個。當(dāng)然，波形、電場強(qiáng)度和脈沖持續(xù)時間都還要取決于細(xì)胞的類型和需要通過電打孔進(jìn)入細(xì)胞的分子類型。包括給已知的細(xì)胞電打孔需要的電場強(qiáng)度在內(nèi)的各種參數(shù)可以從許多相關(guān)的研究報告中獲得，也可以從Genetronics有限公司(SanDiego，Califonia，本申請的受讓人)保存的數(shù)據(jù)庫中獲得。體內(nèi)細(xì)胞電打孔，如電化學(xué)療法(ECT)需要的電場在幅度上與該細(xì)胞在體外的需要的電場相似。這個幅度在100V/cm至每厘米若干千伏范圍內(nèi)。這已經(jīng)通過發(fā)明人自己的實(shí)驗(yàn)以及其他人在科學(xué)出版物中報告的實(shí)驗(yàn)得到證實(shí)。在電化學(xué)療法領(lǐng)域中首次給活體施加脈沖電場治療腫瘤是1987年由Okino在日本報告的。多年來，用于完成文中所述程序的脈沖發(fā)生器可以按照牌號在市場上購買。一種適用的信號發(fā)生器是ECM600型細(xì)胞電控器(ELECTROCELLMANIPULATOR)，可以從Genetronics有限公司(SanDiego，Califonia，U.S.A.)購買。ECM600型信號發(fā)生器通過電容完全放電產(chǎn)生脈沖，結(jié)果是指數(shù)衰減型波形。這種信號發(fā)生器產(chǎn)生的電信號可以用短暫的躍升時間和指數(shù)型衰減表示其特征。在該信號發(fā)生器中，電打孔脈沖持續(xù)時間可以通過在10個時間寄存器中選擇一個來設(shè)定，用R1至R10標(biāo)明該組時間寄存器?？梢圆捎脙煞N模式操作它們，高壓模式(采用50微法的電容器)和低壓模式(采用25微法至3,175微法的電容器)。ECM600型信號發(fā)生器有一個控制按鈕，該控制按鈕允許調(diào)整給電容器充電的電壓幅度，在低壓模式中該電壓在50V至500V之間，在高壓模式中該電壓在0.05kV至2.5kV之間。電信號的幅度顯示在ECM600型信號發(fā)生器的顯示器上。這臺裝置進(jìn)一步包括許多在低壓模式中控制脈沖持續(xù)時間的按鈕開關(guān)，借助將輸出和由7個供選擇的附加電容器與一些電阻同時并聯(lián)來控制脈沖持續(xù)時間。ECM600型信號發(fā)生器還包括一次性自動充放電的脈沖控制按鈕。按下這個按鈕啟動一個自動循環(huán)，該循環(huán)包括給內(nèi)部電容器充電至設(shè)定電壓，然后將脈沖提供給外部的電極，每個循環(huán)所需時間不足5sec.?？梢赃B續(xù)地按壓手動按鈕，重復(fù)施加預(yù)定的電場。本發(fā)明的治療方法優(yōu)先選擇利用方波脈沖電打孔系統(tǒng)。例如，可以使用從Genetronics有限公司購買的T820型方波電打孔器(ElectroSquarePorator(T820))。方波電打孔系統(tǒng)提供受控的電脈沖，該脈沖迅速地躍升到設(shè)定電壓，在該電壓停留至設(shè)定的時間長度(脈寬)，然后迅速跌落至零。就給植物原生質(zhì)體和哺乳動物細(xì)胞系列電打孔而論，這種類型系統(tǒng)的轉(zhuǎn)化效率優(yōu)于指數(shù)衰減型系統(tǒng)。T820型方波電打孔器是市場上第一個市售的能夠產(chǎn)生高達(dá)3000V電壓的方波電打孔系統(tǒng)。其脈寬可以在5μsec.至99msec.之間調(diào)整。方波電打孔脈沖對細(xì)胞的影響比較溫和，使細(xì)胞有較高的存活能力。T820型方波電打孔器可以在高壓模式(100至3000V)和低壓模式(50至500V)兩種模式下發(fā)揮作用。對于低壓模式脈寬大約是0.3至99msec，對于高壓模式脈寬大約是5至99μsec.。T820具有提供多次脈沖的能力，脈沖次數(shù)大約在1次至99次之間。Mir和另一些人已經(jīng)將方波脈沖用于電化學(xué)療法，這種方法允許將治療藥物注入惡性腫瘤。曾經(jīng)給實(shí)驗(yàn)鼠注射低劑量的平陽酶素。然后，給惡性腫瘤電打孔，結(jié)果導(dǎo)致腫瘤減小或完全消失(參閱Mir，L.M.，Eur.J.Cancer，Vol.27(1)，p68，1991)。Saunder已經(jīng)在植物的原生質(zhì)體的電打孔方面對方波脈沖和指數(shù)衰減型脈沖做了比較。與指數(shù)衰減型脈沖相比，方波電打孔產(chǎn)生更高的轉(zhuǎn)化效率。他還報告說，采用方波脈沖在優(yōu)化電打孔參數(shù)時更容易，因?yàn)樵诟蟮碾妷悍秶鷥?nèi)能夠產(chǎn)生充分的轉(zhuǎn)化效率(參閱Saunder的“GuidetoElectroporationandElectrofusion”，pp227-247，1991)。本發(fā)明的治療方法包括電療(也叫做電打孔施藥療法)，它利用本發(fā)明的裝置將大分子提供給細(xì)胞或組織。如前所述，文中所用術(shù)語“大分子”或“分子”指的是藥物(例如化療制劑)、核酸(例如聚核苷酸)、包括抗體的肽和多肽。聚核苷酸包括DNA、cDNA和RNA序列。在本發(fā)明中試圖使用的藥物通常是具有抗癌或溶解細(xì)胞作用的化療藥物。這類藥物或制劑包括平陽酶素、新制癌菌素、蘇拉明、和二氨二氯絡(luò)鉑。其他的化療制劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的抗癌藥物(實(shí)例見“TheMerckIndex”)。制劑的化學(xué)組成將確定與施加電脈沖相關(guān)的適當(dāng)?shù)慕o藥時間。例如在不受具體的理論約束的同時，據(jù)信，為了避免在電場內(nèi)攜帶較多電荷的藥物的靜電相互作用，如果采用電打孔后給藥，等電(離)點(diǎn)(isoeletricpoint)低的藥物(例如，新制癌菌素，IEP＝3.78)可能更有效。此外，象平陽酶素這樣的藥物，它們有非常負(fù)的logP值(P是辛醇與水之間的分配系數(shù))，非常大的尺寸(MW＝1400)，而且它們是親水的，借此與脂質(zhì)薄膜緊密結(jié)合，所以，它們擴(kuò)散進(jìn)入腫瘤細(xì)胞非常緩慢，通常在施加電脈沖之前或基本上與施加電脈沖同時給藥。電打孔借助在細(xì)胞膜上打孔促進(jìn)平陽酶素或其它類似的藥物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞。借助本發(fā)明的方法將分子導(dǎo)入細(xì)胞調(diào)整基因表達(dá)是符合需要的。術(shù)語“調(diào)整”是一種設(shè)想，即在基因表達(dá)過分表達(dá)時，壓縮基因表達(dá)；在基因表達(dá)欠表達(dá)時，擴(kuò)展基因表達(dá)。在細(xì)胞增生機(jī)能失調(diào)與基因表達(dá)相關(guān)的場合，可以采用在轉(zhuǎn)譯級干擾基因表達(dá)的核酸序列。例如，這種途徑利用反義核酸(antisensenucleicacid)、核酶、或三倍體(triplex)制劑阻斷特異的mRNA的轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)譯，或者借助反義核酸或三倍體制劑遮蔽mRNA，或者借助核酶剪切mRNA。反義核酸是DNA或RNA分子，它至少與部分的特異性mRNA是互補(bǔ)的(見Weintraub，ScientificAmerican，Vol.262，p40，1990)。在細(xì)胞中，反義核酸與相應(yīng)的mRNA雜交，形成雙鏈分子(double-strandedmolecule)。因?yàn)榧?xì)胞不轉(zhuǎn)譯雙鏈的mRNA，所以，反義核酸干擾mRNA的轉(zhuǎn)譯。優(yōu)先選擇大約15個核苷酸的反義寡聚物，因?yàn)樗鼈內(nèi)菀缀铣啥以趯?dǎo)入目標(biāo)細(xì)胞時出現(xiàn)的問題可能比大分子要少。使用反義方法抑制體外基因的轉(zhuǎn)譯在技術(shù)上是已知的(Marcus-Sakura，Anal.Biochem.，Vol.172，p289，1988)。作為三倍體策略，運(yùn)用寡聚核苷酸阻止轉(zhuǎn)錄是已知的，因?yàn)楣丫畚锢p繞雙螺旋的DNA，形成三股螺旋體。所以，為了識別在選定基因上的特征位(auniquesite)可以設(shè)計這些三倍體化合物(Maher等人，AntisenseRes.andDev.，Vol.1(3)，p227，1991；Helene，C.，AnticanerDrugDesign，Vol.6(6)，p569，1991)。核酶是一類RNA分子，它們擁有剪切單股的RNA的能力，與DNA限制性核酸內(nèi)切酶的方式類似。通過修飾給RNA編碼的核苷酸序列，就可以設(shè)計能識別RNA分子中特異的核苷酸序列并剪切它的分子(Cech，J.Amer.Med.Assn.，Vol.260，p3030，1988)。這種途徑的優(yōu)點(diǎn)是，因?yàn)樗鼈兊男蛄刑禺愋?，所以只有具有特異序列的mRNA失去活性。有兩種基本型的核酶，四膜蟲屬型(Hasselhoff，Nature，Vol.334，p585，1988)和“雙髻鯊”型。四膜蟲屬型核酶識別長度是四個堿基的序列，而雙髻鯊型核酶識別長度是11至18個堿基的序列。識別的序列越長，在目標(biāo)mRNA中排他地發(fā)生該序列的或然率就越大。因此，在兩種類型的核酶中，優(yōu)先選擇用雙髻鯊型核酶去除特異的mRNA的活性，并且為了較短的識別序列，優(yōu)先選擇18個堿基的識別序列。本發(fā)明還提供基因療法，用于治療由于特異的基因或由于缺乏基因引起的細(xì)胞增生機(jī)能失調(diào)或免疫機(jī)能失調(diào)。這種療法將借助將特異性有義或反義的多核苷酸導(dǎo)入機(jī)能失調(diào)的細(xì)胞達(dá)到它的治療效果。利用重組諸如嵌合病毒(achimericvirus)類的表達(dá)載體能夠?qū)崿F(xiàn)多核苷酸的供給，或者象實(shí)例中“裸露的”DNA那樣提供多核苷酸。諸如文中所述的可用于基因療法的各種病毒的載體包括腺病毒、皰疹病毒、牛痘、或優(yōu)先選擇的RNA病毒(如逆病毒(retrovirus))。逆病毒的載體最好是鼠型或鳥型逆病毒的衍生物。能夠插入單一異體基因(asingleforeigngene)逆病毒的載體包括但不限于Moloney鼠型白血病病毒(MoMuLV)、Harvey鼠型肉瘤病毒(HaMuSV)、鼠型乳房腫瘤病毒(MuMTV)、以及勞氏肉瘤病毒(RSV)。當(dāng)對象是人時，可以利用諸如長臂猿白血病病毒(GaLV)那樣的載體。許多補(bǔ)充的逆病毒載體能夠合并多種基因。所有這些載體都能轉(zhuǎn)移或合并有可選擇標(biāo)記的基因，以致能夠識別和產(chǎn)生轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞。治療用的肽或多肽也可以被包括在本發(fā)明的治療方法之內(nèi)。例如，可以提供免疫調(diào)節(jié)劑和生物學(xué)反應(yīng)修飾劑，以被細(xì)胞攝入。術(shù)語“生物學(xué)反應(yīng)修飾劑”指的是涉及改善免疫反應(yīng)的物質(zhì)。免疫反應(yīng)修飾劑的實(shí)例包括淋巴細(xì)胞因子之類的化合物。淋巴因子包括腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素2和白細(xì)胞介素3、淋巴細(xì)胞毒素、巨噬細(xì)胞活化因子、遷移抑制因子、群落刺激因子、以及α干擾素、β干擾素、γ干擾素和它們的子型。還包括多核苷酸，它為新陳代謝酶和蛋白質(zhì)編碼，包括給抗血管形成化合物，如因子VIII和因子IX編碼。本發(fā)明的大分子還包括抗體分子。文中所用術(shù)語“抗體”意思是完整的分子以及它們的碎片，如Fab和F(ab’)2。按照本發(fā)明，提供多核苷酸或多肽的給藥可以是多種方式的，例如，胃腸外注射、快速輸液、鼻咽吸收、皮膚吸收、或口服。例如，在治療腫瘤時，電化學(xué)療法制劑或其它制劑可以局部給藥、有計劃地注射或直接注入腫瘤。舉例說，在直接將藥物供給腫瘤時，按“扇面”方式注射藥物是有利的。術(shù)語“扇面”指的是為了使藥物更好地散布到腫瘤的各個部分，注射時，改變針的方向，或者按多個方向多次注射，就象打開的折扇一樣多方向給藥，而不是集中在一處。與在這項技術(shù)中通常使用的藥物體積相比，為了使藥物適當(dāng)?shù)厣⒉嫉侥[瘤的各個部分，在向腫瘤給藥(如注射)時，增加藥物溶液的體積是符合需要的。例如在文中的實(shí)施例中，熟悉這項技術(shù)的人通常注射50μl藥物溶液，但是，將藥物溶液體積增加到150μl結(jié)果得到更大改進(jìn)。優(yōu)先選擇非常緩慢地在腫瘤的周圍注射藥物，而不是在潮間壓力非常高的腫瘤中心注射藥物。優(yōu)先選擇給藥與電打孔處理基本同時進(jìn)行。術(shù)語“基本同時進(jìn)行”意思是提供分子和電打孔處理的時間適當(dāng)?shù)亟咏Ｌ峁┓肿?即治療藥物)的時間間隔是任意的，這取決于諸如腫瘤的性質(zhì)、患者的狀況、分子的大小、化學(xué)特性以及半衰期。胃腸外給藥的制劑包括無菌水、水性溶液和非水性的溶液、懸浮液和乳濁液。非水性溶劑的實(shí)例是丙二醇、聚乙烯醇、植物油(如橄欖油)、以及可注射的有機(jī)酯(如乙基油酸酯)。咬合整飾的載體可以用于增加皮膚的滲透性和提高抗原的吸收。適合口服給藥的液體制劑形式通?？梢园ò后w制劑形式的微脂粒溶液。適當(dāng)?shù)奈⒅腋⌒问桨òㄓ孟♂寗?如純水)的乳濁液、懸浮液、溶液、糖漿、以及酏劑。除稀釋劑之外，這些組合物還包括輔劑、潤濕劑、乳化劑和懸浮劑。進(jìn)而可以采用血管收縮藥劑，以使治療藥物在施加脈沖前保持在指定位置。任何細(xì)胞都可以用本發(fā)明的方法處理。文中提出的實(shí)施例說明本發(fā)明方法在處理腫瘤細(xì)胞，如胰和肺中的癌細(xì)胞中的運(yùn)用。其它細(xì)胞增生機(jī)能失調(diào)也可以借助本發(fā)明的電打孔方法處理。術(shù)語“細(xì)胞增生機(jī)能失調(diào)”指的是惡性的以及良性的細(xì)胞群體，該群體往往在形態(tài)上和遺傳基因上不同于周圍組織。惡性細(xì)胞(即腫瘤或癌)的發(fā)展是多個步驟的結(jié)果。本發(fā)明的方法在處理惡性腫瘤或各種器官系統(tǒng)的機(jī)能失調(diào)當(dāng)中是有用的，例如，在處理胰和肺中的細(xì)胞時特別有用，也還包括心臟、腎、肌肉、乳腺、結(jié)腸、前列腺、胸腺、睪丸以及卵巢中的細(xì)胞。優(yōu)先選擇的對象是人的細(xì)胞。下面的實(shí)施例旨在說明但不是限制本發(fā)明。這些實(shí)施例是可能使用的范圍中典型的實(shí)例，對于熟悉這項技術(shù)的人可以采用其它已知的替代方法。本發(fā)明的最佳實(shí)施例下述實(shí)施例說明電化學(xué)療法(ECT)的運(yùn)用，將分化不充分的人體胰腺腫瘤(Panc-3)皮下異種移植到裸鼠的左肋部，并用ECT處理。單一處理程序涉及將平陽酶素(在0.15ml鹽水中0.5個單位)按前述用“扇形”方式注射到腫瘤內(nèi)部，接下來，在10分鐘之后，利用本發(fā)明的沿著1cm直徑的圓周排列的針陣列電極施加6個方波電脈沖。為了適應(yīng)大小各異的腫瘤，還可以使用各種直徑的針陣列(例如，0.5cm、0.75cm、和1.5cm)。各種高度的止動器可以插在陣列的中心，以使針刺入腫瘤的深度可以變化。內(nèi)藏的機(jī)構(gòu)允許切換電極，以使脈沖電場最大限度地覆蓋腫瘤。電參數(shù)是1300V/cm和6×99μsec的脈沖，間隔1sec.。結(jié)果表明在處理現(xiàn)場幾乎所有實(shí)驗(yàn)鼠都有嚴(yán)重壞死和水腫。在處理之后，處理組(D+E+；D代表藥物，E代表電場)的實(shí)驗(yàn)鼠腫瘤體積都大幅度減小，而對照組(D+E-)的實(shí)驗(yàn)鼠腫瘤體積都顯著增加。我們觀察到在ETC處理28天后90％的實(shí)驗(yàn)鼠腫瘤幾乎完全退化，10％的實(shí)驗(yàn)鼠沒有反應(yīng)。在最初處理77天后，觀察到處理組中60％的實(shí)驗(yàn)鼠已經(jīng)完全退化，沒有可觸摸的腫瘤。但是，在處理35天后，有20％的實(shí)驗(yàn)鼠腫瘤再次增長，但增長速度比對照組要小得多。這個觀察結(jié)果與針的深度小于腫瘤的尺寸Z造成的原始大腫瘤的處理不完全有關(guān)。腫瘤樣品的組織學(xué)分析表示在D+E+組中壞死的腫瘤細(xì)胞的空胞與D+E-組中有生命力的細(xì)胞和壞死細(xì)胞混合物的對比。利用異種移植非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)腫瘤的裸鼠進(jìn)行的初步研究也已表明采用平陽酶素和ECT處理取得了非常令人鼓舞的結(jié)果。實(shí)施例1腫瘤細(xì)胞系列Panc-3，一種分化不完全的胰腺癌細(xì)胞系，由抗癌有限公司(AntiCancerInc.，San.Diego)提供。為了進(jìn)行ECT實(shí)驗(yàn)，取自保留腫瘤細(xì)胞系的鼠的組織解凍后切成非常小的片，每片大約1mm，然后用外科手術(shù)將8至10片異種移植到在裸鼠左肋制作的皮下氣囊中，再外科縫合6.0針。在腫瘤平均尺寸達(dá)到大約5mm之后，有可觸摸腫瘤的實(shí)驗(yàn)鼠隨機(jī)的分成兩組，10只作對照組(D+E-；D代表藥物，E代表電場)，10只作ECT處理組(D+E+)，即在注射平陽酶素之后用BTXT820型方波發(fā)生器施加脈沖。測量腫瘤的尺寸，并用下式計算腫瘤體積(II/6)×a×b×c其中a，b，c分別是腫瘤的長度、寬度和厚度。0.5個單位的平陽酶素溶解在0.15ml的0.9％氯化鈉水溶液中，然后用扇面方式注射到對照組(D+E-)和處理組(D+E+)中每只實(shí)驗(yàn)鼠的腫瘤中。在注射藥物10分鐘后，(D+E+)組的每只實(shí)驗(yàn)鼠都用配備本發(fā)明介紹的針陣列電極的T820型方波電打孔器進(jìn)行電脈沖處理。使用的電參數(shù)如下電場強(qiáng)度1300V/cm；6個脈沖，每個脈沖99μsec.，間隔1sec。每天監(jiān)視實(shí)驗(yàn)鼠的死亡率并且記錄病情的任何變化。有規(guī)律地定時測量腫瘤尺寸，監(jiān)視腫瘤的生長情況，退化和(或)增大。另外一組異種移植非小細(xì)胞肺癌系列的裸鼠也用相同于Panc-3腫瘤的方法進(jìn)行處理。圖10a和圖10b表示對于Panc-3腫瘤在使用平陽酶素并作ECT處理后的43天周期內(nèi)確定的腫瘤體積的分析結(jié)果。在經(jīng)過處理和沒有經(jīng)過處理的實(shí)驗(yàn)鼠之間腫瘤體積有顯著的差別。在處理24天后基本上沒有可探測的腫瘤。圖10的結(jié)果還總結(jié)于表1。腫瘤實(shí)際退化的圖示說明示于圖11。表1裸鼠體內(nèi)Panc-3腫瘤的電化學(xué)療法治療處理后的腫瘤體積腫瘤體積腫瘤體積腫瘤體積天數(shù)(mm3)C1(mm3)C2(mm3)T1(mm3)T20138.746148.94123.11178.371206.979179.82210.95252.728394.786451.787104.55211.1115557.349798.919113.21226.96618939.582881.752161.73246.91241391.0571406.9841.5647.2228281628.6311474.2100352619.7652330.3100382908.9122333.96700433708.5715381.75900細(xì)胞系人體的分化不充分的胰腺腫瘤(Panc-3)鼠型裸鼠；移植皮下異種移植對照組C1和C2；處理組T1和T2利用抗癌公司提供的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系177(NSCLC，177(AntiCancer，SanDiego，CA))作了Panc-3實(shí)驗(yàn)的重復(fù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果示于圖12a和圖12b，并且與用平陽酶素和Panc-3的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。在一個實(shí)驗(yàn)中，在第27天對一個復(fù)發(fā)的腫瘤重新作了處理(圖13)，并且在7天后腫瘤的跡象消失。按照前面強(qiáng)調(diào)的程序，用新制癌菌素(NCS)模擬上述的Panc-3和NSCLC實(shí)驗(yàn)。如圖14a和14b所示，與研究平陽酶素時所用的給藥方式類似，在施加脈沖前用NCS給藥，結(jié)果表明在減小腫瘤尺寸方面全然沒有效果。我們認(rèn)為這是由于NCS的等電(離)點(diǎn)低，靜電相互作用阻礙了藥物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞。所以，采用先加脈沖并且在施加脈沖后注射NCS的辦法作了重復(fù)實(shí)驗(yàn)。圖14c表示經(jīng)過處理的7只實(shí)驗(yàn)鼠(代號ID1-7)的腫瘤初始體積(I)和第13天腫瘤最終體積的比較。我們觀察到其中有幾只實(shí)驗(yàn)鼠(ID1，2，4，和7)的腫瘤體積有所增加，但這種增加似乎是水腫的結(jié)果。但是，如圖14d所示，在研究另一組5只實(shí)驗(yàn)鼠時，在第23天所有的實(shí)驗(yàn)鼠的腫瘤體積都明顯地減小。比較圖14a，14b和圖14c，14d表明在施加脈沖后注射NCS比在施加脈沖前注射NCS更有效。結(jié)論這些實(shí)施例說明利用平陽酶素或NCS和針陣列電極借助電化學(xué)療法能夠有效地處理異種移植到裸鼠身上的分化不充分的胰腺癌(Panc-3)和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)。其它類似的化療制劑利用本發(fā)明的方法可能也是有效的。結(jié)果表明經(jīng)過一次處理77天后處理組中有60％達(dá)到完全退化，沒有可觸摸的腫瘤。觀察到部分退化的(腫瘤體積減少80％)占30％，而只有10％沒有反應(yīng)(表2)。表2用平陽酶素和電化學(xué)療法治療Panc-3</tables>經(jīng)過處理的實(shí)驗(yàn)鼠數(shù)10CR完全退化；PR部分退化；NR沒有反應(yīng)*1只實(shí)驗(yàn)鼠在重新處理后死亡；1只實(shí)驗(yàn)鼠生存64天后死亡組織學(xué)研究清楚地表明對于經(jīng)受ECT處理的一組腫瘤區(qū)出現(xiàn)嚴(yán)重的壞死，反之在對照組中沒有出現(xiàn)壞死。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，與施加脈沖前按常規(guī)方法注射藥物相比，為了使藥物最大限度地均勻分布在整個腫瘤中，以扇面方式將體積更大的平陽酶素注射到腫瘤內(nèi)部是非常有效的方法。盡管已經(jīng)結(jié)合優(yōu)選的實(shí)施方案介紹了本發(fā)明，但是應(yīng)當(dāng)理解，不脫離本發(fā)明的精髓可以作出各種修改方案。因此，本發(fā)明只受權(quán)利要求書的限制。權(quán)利要求1.一種給選定的活體組織的一部分施加電場的電極設(shè)備，該設(shè)備包括支撐裝置，電極陣列，該陣列安裝在所述支撐裝置上，并彼此保留間隔，其中至少所述電極之一具有適合刺入組織給體內(nèi)組織細(xì)胞電打孔的針形結(jié)構(gòu)；以及電脈沖發(fā)生器，該發(fā)生器適合將與所述電極間的距離成正比的大振幅電信號施加給電極，以便完成所述電極之間細(xì)胞的電打孔。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的設(shè)備，其中所述針形電極具有適合將分子注入所述組織的空心針。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的設(shè)備，其中所述電極陣列包括第一極性中心電極和圍繞著所述中心電極的許多第二極性電極。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的設(shè)備，其中所述支撐裝置包括空心中心軸，所述中心電極可調(diào)地安裝在所述軸內(nèi)，為了選擇刺入組織的深度該電極能夠調(diào)整從所述軸中伸出的長度。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的設(shè)備，其中所述支撐裝置包括軸環(huán)，該環(huán)安裝在所述軸上，并且所述電極是固定在所述環(huán)上的環(huán)形排列的許多針。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的設(shè)備，其中所述設(shè)備包括一個旋鈕開關(guān)，該開關(guān)能夠選擇切換位置，交替地將對置的各對電極連接到所述脈沖發(fā)生器上。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的設(shè)備，其中所述支撐裝置包括軸環(huán)，該環(huán)安裝在所述軸上，并且所述電極是固定在所述環(huán)上環(huán)形排列的針。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的設(shè)備，其中所述電極陣列包括針狀電極環(huán)形陣列和開關(guān)組合件，該組合件有選擇地改變所述電極中對置電極的極性。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的設(shè)備，其中至少有一個所述針狀電極具有空心針，適合將分子注入所述組織。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的設(shè)備，其中所述電極陣列包括針狀電極的直線陣列，并且為了調(diào)整刺入深度所述電極相對所述支撐設(shè)備是可調(diào)的。11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的設(shè)備，其中所述電極陣列包括一對隔開的直線針狀電極陣列，并且在所述支撐設(shè)備上能夠調(diào)整彼此的相對位置，該設(shè)備還包括感受所述陣列之間距離的裝置。12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的設(shè)備，其中所述支撐裝置包括一對適合插入選定組織的管形針，并且所述電極能夠通過所述管形針插入所述組織的導(dǎo)體。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，其中所述針可以從所述電極上拆卸下來。14.根據(jù)權(quán)利要求7所述的設(shè)備，其中電場發(fā)生器產(chǎn)生施加給組織的電場，該電場的電場強(qiáng)度在0.2V/cm至20kV/cm，脈沖數(shù)在1至100之間。15.一種使用電打孔將分子導(dǎo)入細(xì)胞的方法，該方法包括提供電極陣列，至少有一個所述電極具有適合刺入組織的針形結(jié)構(gòu)；將所述針狀電極插入選定的組織，將分子導(dǎo)入該組織；確定所述電極陣列中與所述組織導(dǎo)通的第二電極的位置，使所述組織位于第一和第二電極之間；提供電脈沖發(fā)生器；將所述電脈沖發(fā)生器與所述電極連接；以及操作所述電脈沖發(fā)生器，將與電極間距離成正比的高幅度電脈沖施加給電極，給組織細(xì)胞電打孔。16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的使用方法，其中所述提供所述電極陣列的步驟包括提供包括一對管狀針的第一和第二針狀電極，該管狀針適合插入選定組織，并且所述電極是可分開的導(dǎo)體，能夠通過所述針插入所述組織。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的使用方法，其中所述針可以從電極上拆卸下來。18.根據(jù)權(quán)利要求15所述的使用方法，其中所述提供所述電極陣列的步驟包括提供第一極性的中心電極和提供許多環(huán)繞在所述中心電極周圍的第二極性的電極。19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的使用方法，其中包括提供開關(guān)組合件的步驟，該組合件包括一個旋鈕開關(guān)，該開關(guān)能夠選擇切換位置，將對置的各對電極交替地連接到所述脈沖發(fā)生器上。20.根據(jù)權(quán)利要求15所述的使用方法，其中分子從包括化療藥物、多核苷酸以及多肽的一組物質(zhì)中選擇。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的使用方法，其中化療藥物是平陽酶素。22.根據(jù)權(quán)利要求15所述的使用方法，其中組織從包括胰臟、肺、心臟、腎、肌肉、乳腺、結(jié)腸、前列腺、胸腺、睪丸以及卵巢的一組組織中選擇。23.根據(jù)權(quán)利要求15所述的使用方法，其中所述提供所述電極陣列的步驟包括提供多針電極陣列，該電極陣列包括許多插入選定組織的對置電極對，并且所述將脈沖施加給所述電極的步驟包括有選擇地將脈沖施加給諸對置電極對。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的使用方法，其中所述將脈沖施加給所述電極陣列的步驟包括將所述脈沖依次施加給所述陣列中的各對電極。全文摘要本發(fā)明提出一種利用針陣列設(shè)備的體內(nèi)電療方法,即電打孔給藥療法。該方法利用本發(fā)明的設(shè)備將電打孔與化療藥物結(jié)合治療腫瘤,使體內(nèi)的腫瘤退化。文檔編號A61N1/32GK1187145SQ96194608公開日1998年7月8日申請日期1996年5月22日優(yōu)先權(quán)日1995年6月6日發(fā)明者S·B·德夫,岡特·A·霍夫曼,理查德·A·吉爾伯特,早川靖彥,理查德·和勒,馬克·J·雅羅哲斯基申請人:基因特倫尼克斯公司