本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種以阿福特羅和格隆溴銨為活性成分的霧化劑及其制備方法。本發(fā)明還涉及格隆溴銨在提高阿福特羅水溶液穩(wěn)定性方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：近年來(lái)由于大氣污染、吸煙、人口老齡化及其它因素，慢性呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)病率、致死率明顯增加。常見(jiàn)慢性呼吸系統(tǒng)疾病包括慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease,copd，簡(jiǎn)稱(chēng)慢阻肺)、支氣管哮喘、肺部感染及肺癌等。其中慢阻肺在中國(guó)發(fā)病率高達(dá)8.2％，在美國(guó)發(fā)病率高達(dá)14％。慢阻肺是以慢性進(jìn)行性氣流阻塞為特征的疾病，主要包括慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺氣腫，其癥狀表現(xiàn)為咳嗽、咳痰、氣短或呼吸困難、喘息和胸悶等。作為致殘致死率極高的呼吸道疾病，慢阻肺往往會(huì)引起慢性肺源性心臟病和右心衰竭、呼吸衰竭、睡眠呼吸障礙等，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，危害患者生命安全。考慮到疾病的特殊性，copd患者需要長(zhǎng)期用藥。長(zhǎng)效制劑有助于減少用藥次數(shù)，提高患者的順應(yīng)性，改善生活質(zhì)量。在藥物的選擇方面，β受體激動(dòng)劑對(duì)慢阻肺有很大的改善作用。它們主要通過(guò)激動(dòng)呼吸道的β受體，激活腺苷酸環(huán)化酶，催化細(xì)胞內(nèi)的三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,atp形成環(huán)磷酸腺苷，激活蛋白激酶a，增加na+、k+、ca2+細(xì)胞內(nèi)外交換，減少細(xì)胞內(nèi)游離的ca2+，從而松弛、舒張支氣管平滑肌，發(fā)揮平喘作用。同時(shí)能減少過(guò)敏性介質(zhì)從細(xì)胞特別是肥大細(xì)胞中釋放。阿福特羅(arformoterol)，又稱(chēng)(r,r)-福莫特羅，是消旋福莫特羅的單一光學(xué)異構(gòu)體，其結(jié)構(gòu)式如下所示。阿福特羅屬長(zhǎng)效β2受體激動(dòng)劑，臨床可用于慢性肺阻塞的治療。目前上市的福莫特羅含有r,r和s,s兩種構(gòu)型。研究表明阿福特羅((r,r)-福莫特羅)的生物活性是(s,s)-福莫特羅構(gòu)型的1000倍以上，且阿福特羅無(wú)(s,s)-福莫特羅加強(qiáng)乙酰膽堿引起支氣管收縮反應(yīng)的副作用。阿福特羅國(guó)外上市產(chǎn)品為吸入液，商品名為brovana，但溶液的穩(wěn)定性差(hplc測(cè)定干粉吸入劑中的阿福特羅，繆旭華西藥學(xué)雜志，2011.03)。cn1333682a(發(fā)明名稱(chēng)為“可儲(chǔ)存的含福莫特羅的活性物質(zhì)濃縮液”)中指出福莫特羅不能在溶液中充分穩(wěn)定地儲(chǔ)存，以致無(wú)法確保制劑在長(zhǎng)期儲(chǔ)存過(guò)程中的藥物質(zhì)量，因此福莫特羅只限于以粉末實(shí)行用于吸入療法?；诖?，cn1333682a提供了一種含福莫特羅活性物質(zhì)的液體或懸浮液形式的濃縮液。然而，該濃縮液中活性物質(zhì)的濃度太高，以致對(duì)應(yīng)的溶液或懸浮液在未經(jīng)稀釋下，不能供吸入而用于治療。毒蕈堿型乙酰膽堿受體拮抗劑能夠通過(guò)阻斷乙酰膽堿與受體的結(jié)合而抑制其作用。格隆溴銨(glycopyrroniumbromide)是一種新型抗膽堿藥物，其結(jié)構(gòu)式如下所示。格隆溴銨能夠強(qiáng)有力地選擇性阻斷m3受體(毒蕈堿受體)，能產(chǎn)生更持久的支氣管保護(hù)和支氣管擴(kuò)張作用，起效迅速，支氣管擴(kuò)張作用持續(xù)24h以上。格隆溴銨起效速度較噻托溴銨起效快大約3-5倍，相對(duì)噻托溴銨有良好的耐受性。然而，格隆溴銨不能與堿性藥物混合、ph>6時(shí)酯基易發(fā)生水解，且格隆溴銨中高度極化的氨基限制其透過(guò)脂質(zhì)膜，不利于與肺細(xì)胞膜表面受體結(jié)合發(fā)揮藥效，這也在一定程度上限制了格隆溴銨藥效的發(fā)揮。wo2016/170518a1公開(kāi)了一種包括阿福特羅或其鹽和格隆溴銨的藥物組合物，該藥物組合物為混懸液或溶液形式，其中包含拋射劑，以氣霧劑形式進(jìn)行給藥。us2011/0150782a1公開(kāi)了一種適用于通過(guò)加壓定量器對(duì)copd患者給藥的氣霧劑，包含格隆溴銨和福莫特羅。us2011/0150784a1和cn102665678公開(kāi)了包含格隆氯銨和福莫特羅的氣霧劑，其中拋射劑為氫氟烷烴(hydrofluoroalkane，hfa)。wo2013/021199a2公開(kāi)了一種用于copd的兩類(lèi)藥理學(xué)活性成分的藥物組合物，具體采用了共晶體的技術(shù)。cn104257610公開(kāi)了一種用于制備可吸入干粉所用的載體顆粒的方法，也涉及通過(guò)所述方法可得到的載體顆粒及其粉末藥物制劑，包含了福莫特羅或者格隆溴銨。文獻(xiàn)aclidiniumbromideandformoterolfumarateasafixed-dosecombinationincopd:pooledanalysisofsymptomsandexacerbationsfromtwosix-month,multicentre,randomisedstudies(acliformandaugment)公開(kāi)了一種阿地溴銨和富馬酸福莫特羅的固定劑量組合，重點(diǎn)在于考察該組合的藥理學(xué)指標(biāo)。目前市場(chǎng)上治療慢阻肺的藥物劑型多為干粉劑或氣霧劑。然而，由于氣霧劑的特殊性，給藥過(guò)程中對(duì)患者的配合度要求很高，需要專(zhuān)業(yè)醫(yī)護(hù)人員對(duì)用藥方式進(jìn)行指導(dǎo)，要求患者同步吸入，否則會(huì)很大程度上影響治療效果，尤其是對(duì)于接受能力稍弱的老人和小孩，有可能給藥效果并不理想。此外，氣霧劑或者干粉劑這類(lèi)劑型要求患者在使用時(shí)用力吸氣、屏氣，這對(duì)于本身患有肺部疾病的患者而言，其肺功能已經(jīng)受到影響，很難達(dá)到該類(lèi)劑型藥物發(fā)揮理想藥效所需的氣流量。而且，ep1157689和cn102665679提到富馬酸福莫特羅氣霧劑是相對(duì)不穩(wěn)定的，在高溫、高濕條件下顯著降解。此外，有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，在長(zhǎng)期給予胰島素干粉劑用藥后，肺癌的發(fā)病率顯著增加。盡管目前還不能確定是由藥物引起的，還是肺部給藥的劑型本身引起的(崔穎.胰島素干粉吸入劑exubera文獻(xiàn)的回顧分析[j].中南藥學(xué),2009:7(10).)。相比之下，霧化劑無(wú)需微粉化步驟，避開(kāi)可能帶來(lái)的負(fù)面影響；無(wú)需患者特殊配合，操作較為簡(jiǎn)單，保持正常的呼吸狀態(tài)即可，進(jìn)而避免呼吸啟動(dòng)不協(xié)調(diào)的問(wèn)題；并且還可避免藥物和氣霧劑中的拋射劑不相容等問(wèn)題。然而，阿福特羅水溶液較不穩(wěn)定，例如，酒石酸阿福特羅在酸、堿、高溫、光照、氧化條件下均產(chǎn)生明顯降解，出現(xiàn)明顯的降解產(chǎn)物。因此，現(xiàn)有技術(shù)中鮮有涉及阿福特羅的以水為溶劑的霧化劑。鑒于此，對(duì)開(kāi)發(fā)操作簡(jiǎn)單的、使用方面的、穩(wěn)定的阿福特羅的霧化劑存在需求。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決阿福特羅在水溶液中穩(wěn)定性差、易降解的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種霧化劑，其以阿福特羅和格隆溴銨為活性成分，以水為溶劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的阿福特羅是以鹽的形式存在，包括但不限于酒石酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、苯磺酸鹽、琥珀酸鹽，優(yōu)選酒石酸鹽。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的阿福特羅與格隆溴銨的摩爾比為1:10-10:1，優(yōu)選摩爾比為1:2。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的阿福特羅的用量為0.17-22.98μg/ml，優(yōu)選為7.66μg/ml。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的格隆溴銨的用量為0.4-54μg/ml，優(yōu)選為18μg/ml。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，本發(fā)明霧化劑中的阿福特羅是以酒石酸鹽的形式存在，其中酒石酸阿福特羅的用量為0.25-33μg/ml，優(yōu)選為11μg/ml。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，本發(fā)明的霧化劑中還包含非離子型表面活性劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的非離子型表面活性劑包括但不限于吐溫、司盤(pán)、多元醇、泊洛沙姆，優(yōu)選吐溫80。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的非離子型表面活性劑的用量為50-400mg/l，優(yōu)選100mg/l。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，本發(fā)明的霧化劑中還包含ph緩沖液。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的ph緩沖液包括醋酸-醋酸鈉、磷酸-磷酸鈉、枸櫞酸-枸櫞酸鈉，優(yōu)選枸櫞酸-枸櫞酸鈉。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，本發(fā)明的霧化劑的ph值為4.0-6.0，優(yōu)選4.5。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，本發(fā)明的霧化劑中還包含滲透壓調(diào)節(jié)劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的滲透壓調(diào)節(jié)劑包括氯化鈉、葡萄糖、丙二醇、甘油，優(yōu)選氯化鈉。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的滲透壓調(diào)節(jié)劑的用量為8-10mg/ml，優(yōu)選9mg/ml。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，本發(fā)明的霧化劑中還包含絡(luò)合劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的絡(luò)合劑為edta或其鹽，優(yōu)選edta-2na。進(jìn)一步地，本發(fā)明霧化劑中的絡(luò)合劑的用量為50-500mg/l，優(yōu)選300mg/l。本發(fā)明還提供了制備本發(fā)明所述的霧化劑的方法，所述方法包括：將滲透壓調(diào)節(jié)劑溶解于適當(dāng)體積的水中，攪拌溶解后，加入酒石酸阿福特羅和格隆溴銨，攪拌至溶解，再加水至全量，加入ph緩沖液調(diào)節(jié)ph，即得。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，所述制備霧化劑的方法包括：將滲透壓調(diào)節(jié)劑、絡(luò)合劑溶解于適當(dāng)體積的水中，攪拌溶解后，加入酒石酸阿福特羅和格隆溴銨，攪拌至溶解；向非離子型表面活性劑中加入適當(dāng)體積的水，靜置至分散均勻，加入到上述溶液中，充分?jǐn)嚢?，再加水至全量，加入ph緩沖液調(diào)節(jié)ph，即得。本發(fā)明還提供了阿福特羅和格隆溴銨的組合在制備用于治療慢性呼吸系統(tǒng)疾病的霧化劑中的用途。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，所述慢性呼吸系統(tǒng)疾病包括慢性阻塞性肺疾病、支氣管哮喘、肺部感染。發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的霧化劑中加入格隆溴銨，不僅從理化性質(zhì)角度增強(qiáng)了阿福特羅的穩(wěn)定性，而且二者在藥理學(xué)上具有協(xié)同作用，有助于提高阿福特羅的治療效果。本發(fā)明的霧化劑以水為溶劑，無(wú)需稀釋?zhuān)芍苯永每諝鈮嚎s、超聲霧化、振動(dòng)篩等技術(shù)實(shí)現(xiàn)霧化給藥。另外，本發(fā)明的霧化劑中加入非離子型表面活性劑克服了格隆溴銨極性強(qiáng)而帶來(lái)的不易進(jìn)入肺泡細(xì)胞的缺陷，選用合適的非離子型表面活性劑延長(zhǎng)肺部滯留時(shí)間、促進(jìn)藥物的肺部吸收，進(jìn)而提高肺部局部治療作用。本發(fā)明通過(guò)選擇合適的ph范圍以及絡(luò)合劑進(jìn)一步提升阿福特羅的穩(wěn)定性。通過(guò)加入滲透壓調(diào)節(jié)劑，調(diào)整霧化劑的滲透壓，使其霧化進(jìn)入肺部后減少對(duì)肺組織的刺激。附圖說(shuō)明圖1為實(shí)施例4中酒石酸阿福特羅對(duì)照溶液的hplc譜圖。圖2為實(shí)施例4中酒石酸阿福特羅在酸性條件下降解后的hplc譜圖。圖3為實(shí)施例4中酒石酸阿福特羅在堿性條件下降解后的hplc譜圖。圖4為實(shí)施例4中酒石酸阿福特羅在高溫條件下降解后的hplc譜圖。圖5為實(shí)施例4中酒石酸阿福特羅在光照性條件下降解后的hplc譜圖。圖6為實(shí)施例4中酒石酸阿福特羅在氧化條件下降解后的hplc譜圖。具體實(shí)施方式以下將結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。然而本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此。實(shí)施例本發(fā)明實(shí)施例中使用的原料酒石酸阿福特羅(af)廠家為msnlaboratoriesprivatelimited，批號(hào)為afs/c062/3/01；格隆溴銨(gb)廠家為m/s.harmanfinochemltd，批號(hào)為gcp/006/2014-2015。實(shí)施例1酒石酸阿福特羅單方霧化劑和格隆溴銨單方霧化劑的制備按表1分別制備酒石酸阿福特羅單方霧化劑和格隆溴銨單方霧化劑。表1制備方法：稱(chēng)取處方量氯化鈉溶解于適當(dāng)體積的水中(約700ml)，攪拌溶解后，加入處方量酒石酸阿福特羅或格隆溴銨，攪拌至溶解，再加水至全量，加入枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)ph，即得。實(shí)施例2酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑的制備按表2制備酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑。表2制備方法：稱(chēng)取處方量氯化鈉溶解于適當(dāng)體積的水中(約700ml)，攪拌溶解后，加入處方量酒石酸阿福特羅和格隆溴銨，攪拌至溶解，再加水至全量，加入枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)ph，即得。實(shí)施例3復(fù)方霧化劑中酒石酸阿福特羅與格隆溴銨的用量考察按照實(shí)施例2的制備方法制備以下表3中的酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑。表3分別取按表3制備的五種酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑于40℃±2℃/75％rh±5％rh條件下放置1個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。40℃±2℃/75％rh±5％rh條件加速試驗(yàn)1個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表4所示。表4結(jié)果顯示，本發(fā)明的酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑中，酒石酸阿福特羅的優(yōu)選用量為11μg/ml，格隆溴銨的優(yōu)選用量為18μg/ml。實(shí)施例4阿福特羅和格隆溴銨的穩(wěn)定性研究酒石酸阿福特羅強(qiáng)制降解的測(cè)定采用高效液相色譜儀agilent1100，hplc條件為：色譜柱：c18柱(150mm×4.6mm，5μm)流動(dòng)相：23.9mmol/l磷酸二氫鈉水溶液-乙腈，磷酸二氫鈉水溶液與乙腈的體積比為85:15流速：1ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：214nm柱溫：40℃進(jìn)樣體積：20μl。格隆溴銨強(qiáng)制降解的測(cè)定采用高效液相色譜儀agilent1100，hplc條件為：色譜柱：c18柱(150mm×4.6mm，5μm)流動(dòng)相：23.9mmol/l磷酸二氫鈉水溶液-乙腈，磷酸二氫鈉水溶液與乙腈的體積比為75:25流速：1ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：214nm柱溫：40℃進(jìn)樣體積：20μl。1.格隆溴銨的強(qiáng)制降解格隆溴銨(1mg/ml)在酸、高溫、氧化劇烈條件下24h未產(chǎn)生明顯降解物質(zhì)，在1mnaoh堿性條件下2h降解約28％。2.酒石酸阿福特羅的強(qiáng)制降解酒石酸阿福特羅(1mg/ml)在酸、堿、高溫、光照、氧化條件下均產(chǎn)生明顯降解，出現(xiàn)明顯的降解產(chǎn)物。具體見(jiàn)表5。表5未經(jīng)強(qiáng)制降解的酒石酸阿福特羅對(duì)照溶液的hplc譜圖參見(jiàn)圖1，酒石酸阿福特羅在上述強(qiáng)制降解條件下降解后的hplc譜圖參見(jiàn)圖2至圖6。實(shí)施例5酒石酸阿福特羅、格隆溴銨單復(fù)方霧化劑的比較通過(guò)單復(fù)方比較，考察酒石酸阿福特羅和格隆溴銨間可能存在的相互作用。分別取實(shí)施例2制備得到的酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑和實(shí)施例1制備得到的酒石酸阿福特羅單方霧化劑和格隆溴銨單方霧化劑于40℃±2℃/75％rh±5％rh條件下放置2個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。含量檢測(cè)采用高效液相色譜儀waters2690，hplc條件為：色譜柱：c18柱(150mm×4.6mm，5μm)流動(dòng)相：23.9mmol/l磷酸二氫鈉水溶液-乙腈，磷酸二氫鈉水溶液與乙腈的體積比為75:25流速：1ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：214nm柱溫：40℃進(jìn)樣體積：20μl。40℃±2℃/75％rh±5％rh條件加速試驗(yàn)2個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表6所示。表6af(％)gb(％)酒石酸阿福特羅(af)單方10.33n/a格隆溴銨(gb)單方n/a4.44酒石酸阿福特羅(af)與格隆溴銨(gb)復(fù)方29.7310.44結(jié)果顯示，酒石酸阿福特羅單方中酒石酸阿福特羅的含量為10.33％、格隆溴銨單方中格隆溴銨的含量為4.44％，而酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方中酒石酸阿福特羅和格隆溴銨的含量分別為29.73％和10.44％。與各自單方相比，具有顯著差異(p<0.05)。可見(jiàn)，相比于酒石酸阿福特羅單方霧化劑而言，格隆溴銨的加入顯著提高了酒石酸阿福特羅的穩(wěn)定性。從二者化學(xué)結(jié)構(gòu)分析，有可能是格隆溴銨分子中含有羥基和酯基，它們可以與酒石酸阿福特羅中的羥基、羧基等基團(tuán)形成氫鍵，使得酒石酸阿福特羅的穩(wěn)定性增強(qiáng)。實(shí)施例6考察ph對(duì)本發(fā)明霧化劑穩(wěn)定性的影響前期的強(qiáng)制降解實(shí)驗(yàn)(實(shí)施例4)顯示，酒石酸阿福特羅在酸性條件下會(huì)發(fā)生降解?；诖?，分別制備ph為4.5、5.0和5.5的復(fù)方霧化劑進(jìn)行研究。根據(jù)實(shí)施例2的制備方法按表7的原料用量制備酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑。表7分別取按表7制備的三種酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑于40℃±2℃/75％rh±5％rh條件下放置1個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。40℃±2℃/75％rh±5％rh條件加速試驗(yàn)1個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表8所示。表8af(％)gb(％)復(fù)方霧化劑1(ph4.5)48.1115.86復(fù)方霧化劑2(ph5.0)51.6430.32復(fù)方霧化劑3(ph5.5)40.1119.81酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑與酒石酸阿福特羅單方霧化劑的穩(wěn)定性對(duì)比研究為了進(jìn)行對(duì)比研究，分別制備ph為4.5、5.0和5.5的酒石酸阿福特羅單方霧化劑。根據(jù)實(shí)施例1的制備方法按表9的原料用量制備酒石酸阿福特羅單方霧化劑。表9分別取按表9制備的三種酒石酸阿福特羅單方霧化劑于40℃±2℃/75％rh±5％rh條件下放置1個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。40℃±2℃/75％rh±5％rh條件加速試驗(yàn)1個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表10所示。表10af(％)af單方霧化劑1(ph4.5)37.11af單方霧化劑2(ph5.0)50.04af單方霧化劑3(ph5.5)30.60結(jié)果顯示，本發(fā)明的復(fù)方霧化劑ph為4.5-5.0時(shí)，其中的酒石酸阿福特羅與格隆溴銨的含量均較高(p<0.05)，也就是說(shuō)，本發(fā)明的復(fù)方霧化劑ph為4.5-5.0時(shí)更加穩(wěn)定。另一方面，無(wú)論霧化劑的ph為4.5、5.0或5.5，復(fù)方霧化劑中的酒石酸阿福特羅的含量均高于酒石酸阿福特羅單方霧化劑中的酒石酸阿福特羅的含量，這說(shuō)明格隆溴銨的加入使得酒石酸阿福特羅的穩(wěn)定性增強(qiáng)。實(shí)施例7考察保護(hù)劑對(duì)本發(fā)明復(fù)方霧化劑穩(wěn)定性的影響本實(shí)施例中考察的保護(hù)劑為非離子表面活性劑和絡(luò)合劑。按表11的原料用量制備酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑。表11制備方法：稱(chēng)取處方量氯化鈉、edta-2na(針對(duì)復(fù)方霧化劑2和4的情況)溶解于適當(dāng)體積的水中(約700ml)，攪拌溶解后，加入處方量酒石酸阿福特羅、格隆溴銨，攪拌至溶解。另向處方量吐溫80(針對(duì)復(fù)方霧化劑3和4的情況)中加入適量水(約20ml)，靜置至分散均勻，加入到上述溶液中，充分?jǐn)嚢瑁偌铀寥?，加入枸櫞?枸櫞酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)ph，即得。分別取按表11制備的四種酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑于40℃±2℃/75％rh±5％rh條件下放置2個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。40℃±2℃/75％rh±5％rh條件加速試驗(yàn)2個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表12所示。表12af(％)gb(％)復(fù)方霧化劑1(ph4.5，無(wú)edta-2na/tween80)29.7310.44復(fù)方霧化劑2(ph4.5，有edta-2na)73.3477.58復(fù)方霧化劑3(ph4.5，有tween80)45.0628.74復(fù)方霧化劑4(ph4.5，有edta-2na/tween80)71.9675.25另外，分別取按表11制備的四種酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑于40℃±2℃/75％rh±5％rh條件下放置1個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。40℃±2℃/75％rh±5％rh條件加速試驗(yàn)1個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表13所示。表13af(％)gb(％)復(fù)方霧化劑1(ph4.5，無(wú)edta-2na/tween80)48.1115.86復(fù)方霧化劑2(ph4.5，有edta-2na)93.3698.5復(fù)方霧化劑3(ph4.5，有tween80)69.0260.28復(fù)方霧化劑4(ph4.5，有edta-2na/tween80)90.5895.0酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑與酒石酸阿福特羅單方霧化劑的穩(wěn)定性對(duì)比研究為了進(jìn)行對(duì)比研究，按表14的原料用量制備酒石酸阿福特羅單方霧化劑。表14制備方法：稱(chēng)取處方量氯化鈉、edta-2na(針對(duì)單方霧化劑2和4的情況)溶解于適當(dāng)體積的水中(約700ml)，攪拌溶解后，加入處方量酒石酸阿福特羅，攪拌至溶解。另向處方量吐溫80(針對(duì)單方霧化劑3和4的情況)中加入適量水(約20ml)，靜置至分散均勻，加入到上述溶液中，充分?jǐn)嚢瑁偌铀寥?，加入枸櫞?枸櫞酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)ph，即得。分別取按表14制備的四種酒石酸阿福特羅單方霧化劑于40℃±2℃/75％rh±5％rh條件下放置1個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。40℃±2℃/75％rh±5％rh條件加速試驗(yàn)1個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表15所示。表15af(％)af單方霧化劑1(ph4.5，無(wú)edta-2na/tween80)37.11af單方霧化劑2(ph4.5，有edta-2na)95.94af單方霧化劑3(ph4.5，有tween80)60.78af單方霧化劑4(ph4.5，有edta-2na/tween80)93.72結(jié)果顯示，本發(fā)明的復(fù)方霧化劑中含有絡(luò)合劑或者含有絡(luò)合劑和非離子表面活性劑時(shí)，其中的酒石酸阿福特羅與格隆溴銨含量均非常高(p<0.05)。另一方面，加入格隆溴銨可提高酒石酸阿福特羅的含量，其穩(wěn)定性提升效果稍弱于加入保護(hù)劑，但相比于僅加入保護(hù)劑來(lái)提升酒石酸阿福特羅的穩(wěn)定性而言，格隆溴銨的加入使得在激動(dòng)β受體的同時(shí)，阻斷m受體，可發(fā)揮藥理上的協(xié)同作用，協(xié)同松弛氣道平滑肌，提高治療效果。實(shí)施例8對(duì)本發(fā)明的酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑的優(yōu)化研究按表16制備酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑。表16制備方法：稱(chēng)取處方量氯化鈉、edta-2na溶解于適當(dāng)體積的水中(約700ml)，攪拌溶解后，加入處方量酒石酸阿福特羅、格隆溴銨，攪拌至溶解；另向處方量吐溫80中加入適量水(約20ml)，靜置至分散均勻，加入到上述溶液中，充分?jǐn)嚢?，再加水至全量，加入枸櫞?枸櫞酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)ph，即得。取制備得到的酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑于4℃、25℃±2℃、40℃±2℃條件下放置2個(gè)月，取樣測(cè)定主藥含量(以t0含量作為100％)。4℃、25℃±2℃、40℃±2℃條件下放置2個(gè)月的測(cè)定結(jié)果如下表17所示。表17af(％)gb(％)4℃80.0778.4325℃±2℃77.4977.3940℃±2℃71.9675.25結(jié)果顯示，該酒石酸阿福特羅與格隆溴銨復(fù)方霧化劑于4℃、25℃±2℃、40℃±2℃條件下放置2個(gè)月之后酒石酸阿福特羅與格隆溴銨的含量均非常高，且于4℃放置2個(gè)月時(shí)酒石酸阿福特羅與格隆溴銨的含量均最高，均在80％左右。當(dāng)前第1頁(yè)12