本發(fā)明涉及一種治療癌癥的藥物組合物、試劑盒及其應(yīng)用，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤已經(jīng)成為影響人類健康的主要疾病之一，目前惡性腫瘤的治療很大程度上仍以化療為主，但是化療藥物已經(jīng)從傳統(tǒng)的細(xì)胞毒性藥物逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂邪邢蛐郧覍?duì)腫瘤細(xì)胞具有高選擇性的靶向小分子藥物。5-氟尿嘧啶(5-FU)是最早廣泛應(yīng)用于治療惡性腫瘤的抗代謝類藥物之一，是胸腺嘧啶合成酶抑制劑。5-氟尿嘧啶抗腫瘤作用療效確切，但是其在體內(nèi)半衰期短，臨床使用一般需要靜脈持續(xù)灌注給藥，毒性和不良反應(yīng)較高，因而限制了其在臨床上的應(yīng)用。為了克服上述缺陷，科研工作者開(kāi)發(fā)了5-氟尿嘧啶的前藥以及與其他藥物的組合從而增加其療效并降低其副作用。

1、替加氟

化學(xué)名稱：1-(四氫-2-呋喃基)-5-氟-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮，屬于嘧啶類抗癌藥之一，它是5-氟尿嘧啶(5-FU)的前體藥物，對(duì)多數(shù)實(shí)體瘤有抑制作用。其在體內(nèi)能干擾阻斷DNA、RNA及蛋白質(zhì)的生物合成，從而產(chǎn)生其抗癌作用。但由于存在比較嚴(yán)重的骨髓抑制，腸胃道反應(yīng)和肝腎損傷等副作用，故在臨床上已很少單獨(dú)使用，常常需要和其他藥物配合使用來(lái)減小其嚴(yán)重的副作用。

替加氟的結(jié)構(gòu)式如下：

2、卡培他濱

化學(xué)名為5’-脫氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞嘧啶核苷，是由瑞士羅氏公司研制的新型抗腫瘤藥物，于1998年被FDA批準(zhǔn)在美國(guó)上市，商品名為XELODA(希羅達(dá))；目前我國(guó)已批準(zhǔn)進(jìn)口該產(chǎn)品?？ㄅ嗨麨I臨床用于晚期轉(zhuǎn)移性乳腺癌，結(jié)、直腸癌以及其他實(shí)體瘤的治療，具有良好的抗腫瘤作用和極少的不良反應(yīng)。

卡培他濱(capecitabine)是一種極具潛力的選擇性腫瘤內(nèi)激活的口服氟尿嘧啶氨基甲酸酯類抗腫瘤藥物，它通過(guò)肝臟和腫瘤內(nèi)的3種酶轉(zhuǎn)化為氟尿嘧啶(FU)。其口服后完整地通過(guò)胃腸壁，首先經(jīng)肝臟羧酸酯酶催化代謝為5'-脫氧-5-氟胞苷(5'-DFCR)，然后經(jīng)肝臟和腫瘤細(xì)胞中的胞苷脫氨酶催化轉(zhuǎn)化為5'-脫氧-氟尿嘧啶(5'-DFUR)，最后經(jīng)胸苷磷酸化酶(TP)催化轉(zhuǎn)化為氟尿嘧啶(FU)而發(fā)揮細(xì)胞毒作用?？ㄅ嗨麨I和替加氟雖然都是5-氟尿嘧啶的前藥，但卡培他濱對(duì)腫瘤的高度選擇性和特異性明顯優(yōu)于替加氟，卡培他濱在抗腫瘤活性增強(qiáng)的同時(shí)毒副作用大大減少，因此在臨床上應(yīng)用廣泛。

卡培他濱結(jié)構(gòu)式如下:

相對(duì)于替加氟，卡培他濱無(wú)論在分子結(jié)構(gòu)還是在體內(nèi)代謝方式上均顯著不同。由于副作用大且效果存在局限，替加氟在臨床上已經(jīng)很少單獨(dú)使用。而卡培他濱由于其優(yōu)異的靶向性，較低的副作用已成為臨床上治療腫瘤的抗代謝類藥物的首選。氟尿嘧啶(5-FU)、替加氟(FT-207)、卡培他濱三者的對(duì)比如表1所示。

表1

3、TS-1：

商標(biāo)：TS-1，Taiho Pharmaceutical Co.，Ltd.制造，含有作為活性成分的替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸或其鹽的三組分抗腫瘤劑。

吉莫斯特(CDHP)和氧嗪酸鉀(OXO)分別單獨(dú)使用沒(méi)有明顯的抗癌活性，他們與替加氟聯(lián)合使用是為了提高療效和降低毒性。

CDHP的作用是為了提高替加氟(FT-207)的抗癌療效，當(dāng)FT-207口服進(jìn)入體內(nèi)后，先在肝臟P450活化酶的催化下轉(zhuǎn)變成5-FU，之后除10％左右進(jìn)入腸道并在乳清酸核糖轉(zhuǎn)移酶(ORTC)催化下產(chǎn)生磷酸化外，其余90％左右的5-FU是在肝臟二氫嘧啶脫氫酶(DPD)的催化下，循5-FU的代謝途徑轉(zhuǎn)變成三磷酸氟尿苷(FUTP)和一磷酸去氧氟尿苷(FdUMP)兩個(gè)活性產(chǎn)物發(fā)揮抗癌作用。因此，DPD是5-FU降解的主要限速酶，其血漿5-FU水平的保持取決于DPD活性。CDHP是DPD的可逆性抑制劑，其抑制DPD活性的效果是尿嘧啶的180倍，因而能夠有效抑制5-FU的降解。

氧嗪酸鉀的主要作用是抑制小腸組織ORTC的活性。在替加氟的代謝過(guò)程中，有10％左右的5-FU進(jìn)入腸道組織，在乳清酸核糖轉(zhuǎn)移酶的催化下，產(chǎn)生磷酸化，這一過(guò)程被認(rèn)為是產(chǎn)生腸道毒副作用的主要原因。OXO的作用特點(diǎn)是能有效的抑制ORTC，進(jìn)而抑制腸道中5-FU的磷酸化。OXO的另外一個(gè)顯著的特點(diǎn)是口服進(jìn)入體內(nèi)后，絕大部分分布于小腸粘膜細(xì)胞表面，只有極少部分進(jìn)入血液循環(huán)、腫瘤組織及其他正常組織。

因?yàn)榧固氐脑鲂ё饔?，此抗腫瘤劑的抗腫瘤效果增大，吉莫斯特對(duì)5-FU的降解抑制效果是尿嘧啶的180倍。而且，當(dāng)替加氟和吉莫斯特結(jié)合使用時(shí)，氧嗪酸及其鹽尤其抑制可能伴隨著抗腫瘤效果增強(qiáng)的腸胃中毒性的增加，從而降低副作用。

4、DPD抑制劑+5-FU前藥組合

5-FU必須通過(guò)代謝轉(zhuǎn)化成偽尿苷核苷酸和偽脫氧尿苷核苷酸而被激活，所述偽核苷酸能干擾DNA合成和RNA功能，由于5-FU與它的天然對(duì)應(yīng)物尿嘧啶的不同僅在于5位的氟取代，它在癌癥患者體內(nèi)易被激活。但是，它與尿嘧啶的結(jié)構(gòu)相似性也導(dǎo)致它被快速和廣泛的轉(zhuǎn)化成沒(méi)有抗腫瘤活性的降解產(chǎn)物而失活。二氫嘧啶脫氫酶(DPD)是5-FU降解(失活)的第1個(gè)和限速的步驟。研究表明，抑制DPD能延長(zhǎng)5-FU在血漿中的半衰期。現(xiàn)已研究了若干種DPD抑制劑，包括不可逆地使DPD失活的抑制劑，以及可逆地抑制DPD的抑制劑。5-乙炔基尿嘧啶，又被稱作恩尿嘧啶，它是DPD的不可逆的滅活劑，能減少或消除5-FU的代謝失活，因此在存在極低量恩尿嘧啶的情況下，DPD被破壞，并且不再能夠使5-FU失活。鑒于此，專利CN101068549中提出將DPD抑制劑(恩尿嘧啶)+5-FU前藥(卡培他濱)聯(lián)用抗腫瘤。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的之一是提供一種用于治療癌癥的藥物組合物。特別是一種能夠增強(qiáng)卡培他濱的抗腫瘤效果，并且降低副作用的藥物組合物。

本發(fā)明的目的之二是提供一種臨床使用的，能夠增強(qiáng)卡培他濱的抗腫瘤效果，降低副作用的藥物試劑盒。

本發(fā)明的目的之三是提供一種哺乳動(dòng)物易感5-氟尿嘧啶的治療方法。

根據(jù)上述的現(xiàn)狀，本發(fā)明人進(jìn)行了廣泛的研究，結(jié)合TS-1的作用機(jī)理及效果，研究了增強(qiáng)卡培他濱的抗腫瘤作用的藥物組合。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)單獨(dú)治療無(wú)效劑量的卡培他濱在組合使用抗腫瘤增效效應(yīng)有效量的吉莫斯特以及降低副作用有效量的氧嗪酸鉀時(shí)，可以在降低副作用的基礎(chǔ)上顯著增加卡培他濱的抗腫瘤效果。

本發(fā)明提供一種治療癌癥的藥物組合物，組合物中卡培他濱：吉莫斯特：氧嗪酸鉀＝1:0.1-3:0.5-4，其中三者的比值為摩爾比。

作為優(yōu)選，組合物中卡培他濱：吉莫斯特：氧嗪酸鉀＝1:0.4:1，其中三者的比值為摩爾比。

本發(fā)明的三個(gè)組分都是已知的化合物，均可以通過(guò)常規(guī)方法制備。

吉莫斯特包括其在藥學(xué)上可接受的鹽。其中吉莫斯特的氯離子可用鹵素離子代替，例如：氟、溴和碘原子等，優(yōu)選2,4-二羥基-5-氯吡啶、2,4-二羥基-5-氰基吡啶等。

氧嗪酸鉀包括其在藥學(xué)上可接受的鹽，包括酸加成鹽和堿性化合物的鹽。能夠形成酸加成鹽的有用的酸是鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸等無(wú)機(jī)酸，草酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、丙二酸酸、甲磺酸、苯甲酸和類似的有機(jī)酸。能夠形成藥學(xué)上可接受的堿性化合物的鹽的有用的堿性化合物的實(shí)例為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、碳酸鈉、碳酸氫鉀等。

需要特別說(shuō)明的是，本發(fā)明的重點(diǎn)技術(shù)特征在于發(fā)現(xiàn)吉莫斯特與氧嗪酸鉀聯(lián)合卡培他濱增強(qiáng)抗腫瘤效果，降低副作用，而上述各個(gè)組分之間的摩爾比不是本發(fā)明的重要技術(shù)特征，三者都是已知化合物，在哺乳動(dòng)物上用量均有具體的有效數(shù)值范圍，因此，本發(fā)明不局限于上述的摩爾比范圍值，包括能夠在哺乳動(dòng)物上安全使用的所有劑量范圍。

本發(fā)明的抗腫瘤增效作用的組合物是通過(guò)配制吉莫斯特和氧嗪酸鉀的化合物或其成單一制劑或成兩個(gè)相應(yīng)單獨(dú)的制劑獲得。在單一制劑或兩個(gè)單獨(dú)的制劑可以獨(dú)立地或與一個(gè)可選的劑型配制的卡培他濱同時(shí)給藥。

本發(fā)明還提供一種治療癌癥的藥物試劑盒一，用于增強(qiáng)卡培他濱的抗腫瘤效果并降低藥物聯(lián)用后卡培他濱的副作用，試劑盒一中包括組分(Ⅰ)以及組分(Ⅱ)，組分(Ⅰ)為抗腫瘤增效效應(yīng)有效量的吉莫斯特，組分(Ⅱ)為降低副作用有效量的氧嗪酸鉀。

優(yōu)選地，組分(Ⅰ)以及組分(Ⅱ)被容納在分開(kāi)的容器中。兩種組分可以分別與藥學(xué)上可接受的載體混合，以提供在一個(gè)可選的單位劑量形式，然后施用的制劑。

優(yōu)選地，組分(Ⅰ)以及組分(Ⅱ)被容納在同一容器中。兩種組分可以與藥學(xué)上可接受的載體相互混合，以提供在一個(gè)可選的單位劑量形式，然后施用的單一制劑。

上述試劑盒可以在卡培他濱施用時(shí)的任何時(shí)間給藥，也就是說(shuō)可以在卡培他濱施用前施用，或者與卡培他濱同時(shí)施用，或者在卡培他濱施用后再施用。

本發(fā)明還提供一種治療癌癥的藥物試劑盒二，試劑盒二包括三個(gè)組份，分別為組分(Ⅰ)、組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)，組分(Ⅰ)為抗腫瘤有效量的卡培他濱，組分(Ⅱ)為抗腫瘤增效效應(yīng)有效量的吉莫斯特，組分(Ⅲ)為降低副作用有效量的氧嗪酸鉀。

優(yōu)選地，三個(gè)組份分別容納在不同的容器中。三種組分(卡培他濱、吉莫斯特以及氧嗪酸鉀)都是已知化合物，可以與藥學(xué)上可接受的載體相互混合，以提供在一個(gè)可選的單位劑量形式，然后施用的單一制劑。

優(yōu)選地，組分(Ⅰ)容納在單獨(dú)的容器中，組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)容納在同一容器中。組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)可以與藥學(xué)上可接受的載體相互混合，以提供在一個(gè)可選的單位劑量形式，然后施用的單一制劑。

優(yōu)選地，組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)容納在不同的容器中，組分(Ⅰ)包含在含有組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)的不同容器中。組分(Ⅰ)和組分(Ⅱ)可以與藥學(xué)上可接受的載體相互混合，以提供在一個(gè)可選的單位劑量形式，然后施用的單一制劑。組分(Ⅰ)和組分(Ⅲ)可以與藥學(xué)上可接受的載體相互混合，以提供在一個(gè)可選的單位劑量形式，然后施用的單一制劑。

上述試劑盒二、三種組分可以同時(shí)施用，也可以三種組分順序任意組合施用，不分先后順序。

本發(fā)明提供了用于治療哺乳動(dòng)物易感5-氟尿嘧啶疾病的癌癥藥物，通過(guò)向哺乳動(dòng)物施用抗腫瘤有效量的卡培他濱，抗腫瘤效果增效有效量的吉莫斯特，和降低副作用有效量的氧嗪酸鉀。

上述應(yīng)用中卡培他濱的劑量為0.05-800mg/kg，吉莫斯特的劑量為0.05-400mg/kg，氧嗪酸鉀的劑量為0.05-800mg/kg。

附圖說(shuō)明

圖1是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組給藥兩周后的瘤體重柱狀圖；

圖2是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組給藥兩周后的瘤體積柱狀圖；

圖3是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組給藥兩周后的瘤體積折線圖；

圖4是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+恩尿嘧啶組的存活率圖；

圖5是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+恩尿嘧啶組的瘤體積折線圖；

圖6是實(shí)施例1中溶劑組、5-FU+吉莫斯特組、卡培他濱+吉莫斯特組的生存率圖；

圖7是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組的瘤體積折線圖；

圖8是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組的體重折線圖；

圖9是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組、替加氟+吉莫斯特+氧嗪酸組的存活率圖；

圖10是實(shí)施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組、替加氟+吉莫斯特+氧嗪酸組的體重折線圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。以下實(shí)施例僅用于更加清楚地說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，而不能以此來(lái)限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

實(shí)施例1：

實(shí)驗(yàn)方案:

裸鼠植入結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116，待瘤體長(zhǎng)到200-300mm³，隨機(jī)分組，每組8只，給藥2周，給藥方案如下表2：

表2

注釋：卡：卡培他濱；吉：吉莫斯特；氧：氧嗪酸鉀；恩：恩尿嘧啶替：替加氟；溶劑：0.5％CMCNa。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：

1、目的：吉莫斯特對(duì)卡培他濱有協(xié)同增效的作用。

從圖1、圖2、圖3中可以看到，該劑量的卡培他濱組在2周時(shí)間內(nèi)無(wú)法縮小瘤的體積和重量，相對(duì)于溶劑組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而吉莫斯特+卡培他濱組對(duì)比卡培他濱組，明顯縮小了瘤的體積和重量，相對(duì)于溶劑組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2、目的：吉莫斯特與卡培他濱聯(lián)用增效作用比恩尿嘧啶與卡培他濱聯(lián)用的效果更優(yōu)。

從圖5的瘤體積折線圖中可以看到，卡培他濱+吉莫斯特組和卡培他濱+恩尿嘧啶組的療效相當(dāng)，但是從圖4的存活率圖可看出卡培他濱+恩尿嘧啶組比卡培他濱+吉莫斯特組毒副作用大。

3、目的：5-FU+DPD抑制劑作用差于5-FU前藥+DPD抑制劑

DPD抑制劑選用吉莫斯特，從圖6的生存率圖看出，5-FU+吉莫斯特組比卡培他濱+吉莫斯特組毒副作用大。

4、目的：氧嗪酸鉀能降低卡培他濱與吉莫斯特聯(lián)用后的副作用。

從圖7的瘤體積中可以看到，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組與卡培他濱+吉莫斯特組的療效相似，但是從圖8的體重折線圖上看，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組與對(duì)照組相比，體重基本無(wú)變化，而卡培他濱+吉莫斯特組與對(duì)照組相比，體重減少比較多，因此，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組相對(duì)于卡培他濱+吉莫斯特組明顯能夠減少副作用。

5、目的：卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組合優(yōu)于TS-1

從圖9的存活率來(lái)看，隨著時(shí)間的推移，TS-1的生存率明顯不如卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組。從圖10的體重圖來(lái)看，很明顯，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組的體重與對(duì)照組無(wú)明顯區(qū)別，而TS-1組的體重下降明顯，因此，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組相對(duì)于TS-1組，副作用更小。

實(shí)施例2：

實(shí)驗(yàn)方案：

裸鼠植入結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116，待瘤體長(zhǎng)到100-200mm³，隨機(jī)分組，每組8只，給藥19天，給藥方案如下表3：

表3

注釋：溶劑對(duì)照組：0.5％CMCNa卡吉氧：卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀

d1：開(kāi)始給藥第一天 d19：給藥結(jié)束時(shí)間

*p<0.05**p<0.01，vs溶劑對(duì)照組。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：

從表3中可以看到，三組不同摩爾比的組合物在19天的給藥時(shí)間均縮小瘤的體積和重量，其中卡吉氧2、3組相對(duì)于溶劑組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和變形，這些改進(jìn)和變形也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。