修飾SiO2納米載體的制備設(shè)備及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及修飾SiO2納米載體的制備設(shè)備及制備方法;其制備設(shè)備包括陶瓷材料制成的反應(yīng)容器本體、超聲波換能器、轉(zhuǎn)子攪拌槳和高頻電磁線圈;制備方法是將SiO2納米粒投入反應(yīng)容器的雙蒸水中;電磁攪拌混勻,重懸,加入十八烷基三甲基溴化銨(OTAB),室溫電磁攪拌,離心,靜置陳化去上清,雙蒸水洗滌,再次重懸,離心,冷凍干燥,即可制成修飾SiO2納米載體;本發(fā)明具有良好生物相容性、無免疫原性。所制備的修飾SiO2納米載體可有效解決現(xiàn)有腫瘤治療藥物副作用大,不能很好的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的問題。
【專利說明】
修飾S i 〇2納米載體的制備設(shè)備及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[00〇1]本發(fā)明涉及Si〇2納米粒載體的制備技術(shù),特別涉及修飾Si〇2納米載體的制備設(shè)備和一種用十八烷基三甲基溴化銨修飾的Si02納米粒的制備方法;使用該制備設(shè)備可以方便制備修飾si〇2納米載體(OTAB-Si〇2_NP);用該方法制得的修飾Si〇2納米載體,可以用于對(duì)癌癥基因治療?!颈尘凹夹g(shù)】
[0002]近年來,隨著基因轉(zhuǎn)移技術(shù)的日趨成熟,癌癥的基因治療已成為生物科學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。目前,基因治療研究和臨床應(yīng)用中常用的病毒載體和非病毒載體,都存在無法克服的局限性。隨著納米技術(shù)的出現(xiàn),納米粒載體以其高轉(zhuǎn)染效率、低毒性、無免疫原性等特點(diǎn)正引起越來越多的關(guān)注。癌癥和腫瘤已經(jīng)成為威脅人類健康的殺手,但是目前還沒有一種藥物可以治愈癌癥和腫瘤,所用的治療癌癥的藥物多含有毒性,其對(duì)癌細(xì)胞有抑制作用的同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞也有毒害作用。尋找或開發(fā)一種可以將抑制癌細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的藥物定向運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞的納米粒載體,且實(shí)現(xiàn)藥物的緩釋是目前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。在納米材料中,Si02具有良好的生物相容性、高反應(yīng)活性表面、獨(dú)特的跨膜能力、大離域鍵及無免疫原性等優(yōu)點(diǎn),可以與許多生物醫(yī)藥分子之間形成較強(qiáng)的鍵相互作用,使其在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的藥物傳遞和基因載體方面具有巨大的應(yīng)用潛力。但是,Si02納米粒(參見附圖3)的表面能高,在使用中極易團(tuán)聚,并且Si02納米粒與大多數(shù)聚合物材料相容性差,此夕卜,Si02納米粒表面電位為負(fù)值,不能攜帶負(fù)電荷的DNA分子。
[0003]因而十八烷基三甲基溴化銨修飾的Si〇2納米粒的制備和應(yīng)用尚未有報(bào)道。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的,是要提供一種修飾Si02納米載體的制備設(shè)備;使用該制備設(shè)備可以在制備工藝中方便地操作制備修飾S i 〇2納米載體。
[0005]本發(fā)明的另一目的,是還要提供一種具有良好生物相容性、無免疫原性的修飾 Si〇2納米載體的制備方法。所制備的修飾Si〇2納米載體的應(yīng)用,可有效解決現(xiàn)有腫瘤治療藥物副作用大,不能很好的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的問題。
[0006]本發(fā)明所述一種修飾Si02納米載體的制備設(shè)備,包括陶瓷材料制成的反應(yīng)容器本體、超聲波換能器、轉(zhuǎn)子攪拌槳和高頻電磁線圈;反應(yīng)容器本體為有底的圓筒體,內(nèi)底面正中央設(shè)置豎直向上的支撐軸;圓筒體上口有容器蓋;所述支撐軸下部分是軸座,上部分是軸桿,軸座和軸桿兩者之間有一軸臺(tái)階過度連接,且軸座直徑大于軸桿直徑;上述超聲波換能器固定在反應(yīng)容器本體的外底面;上述轉(zhuǎn)子攪拌槳為金屬導(dǎo)體方框架和槳葉組成,方框架上下兩框邊的中部上下對(duì)稱地設(shè)有軸孔,左右兩框邊均分別固定有槳葉,方框架表面襯耐腐蝕材料;所述轉(zhuǎn)子攪拌槳放置在反應(yīng)容器本體的容腔內(nèi),其方框架通過軸孔套在支撐軸的軸桿上可以自由旋轉(zhuǎn);上述高頻電磁線圈由帶磁極靴的環(huán)形磁芯和線圈所組成;磁極靴有四個(gè),對(duì)稱地分布在環(huán)形磁芯的內(nèi)環(huán);四個(gè)磁極靴上均纏繞有線圈,并緊貼在反應(yīng)容器本體外筒壁上。
[0007]本發(fā)明修飾S12納米載體的制備方法是:將S12納米粒投入反應(yīng)容器的雙蒸水中;電磁攪拌混勻,超聲波振動(dòng)使S12納米粒重懸于雙蒸水中;加入十八烷基三甲基溴化銨(OTAB),室溫電磁攪拌3h;離心30min,靜置陳化12?20h去上清;沉淀物用雙蒸水洗滌三次,返回反應(yīng)容器再次重懸,離心;所得離心沉淀物冷凍干燥,即可制成修飾S12納米載體;所述修飾Si02納米載體顆粒的平均直徑為20?50nm。
[0008]所述十八烷基三甲基溴化銨(別名OTAB或STAB;硬脂基三甲基溴化銨;溴化三甲基十八烷基錢;三甲基十八烷基溴化銨)是一種化學(xué)物質(zhì),分子式是C21H46BrN;原料為白色或微黃色固體;凝固點(diǎn)32°C,HLB值15.8;溶于水,穩(wěn)定性好,耐熱,耐光,耐強(qiáng)酸、強(qiáng)堿,可微生物降解;一般用作表面活性劑,還應(yīng)用于催化劑,乳化劑,消毒劑,殺菌基,抗靜電劑。
[0009]所述的雙蒸水是重蒸水的一種,重蒸水是將經(jīng)過一次蒸餾后的水,再次蒸餾所得到的水。
[0010]本發(fā)明利用專門的修飾S12納米載體的制備設(shè)備;使比重與水相差較大的S12納米粒在充滿微泡且高速旋轉(zhuǎn)的雙蒸水中得以懸浮;提高了 S12納米粒的表面活性,利于十八烷基三甲基溴化銨中的氨基結(jié)合。當(dāng)十八烷基三甲基溴化銨(OTAB)修飾S12納米粒后所形成的沉淀物,其修飾層并不是理想的均勻包裹海綿層,而是處于大小不一、部分殘缺粘連的團(tuán)聚體;為了對(duì)該沉淀物整形,本發(fā)明設(shè)計(jì)了返回反應(yīng)容器再次重懸工序;此時(shí),開啟變頻器將高頻電流工作頻率調(diào)整為1000Hz,使轉(zhuǎn)子攪拌槳以28000r/min的旋轉(zhuǎn)速度攪拌雙蒸水;同時(shí)調(diào)整變頻器的高頻電流強(qiáng)度,使反應(yīng)容器外加高頻電磁線圈所產(chǎn)生的磁場(chǎng)強(qiáng)度達(dá)5-8T;經(jīng)高頻磁場(chǎng)中高速旋轉(zhuǎn)的雙蒸水吹打產(chǎn)生分散團(tuán)聚體的剪切力,S12納米顆粒中和S12納米顆粒表面海綿層中所攜帶互異的電荷,在強(qiáng)交變磁場(chǎng)的洛倫茲力作用下,按照變頻器的電流頻率產(chǎn)生強(qiáng)力振動(dòng);兩力共同作用的結(jié)果,修飾S12納米團(tuán)聚體迅速瓦解,變成一個(gè)個(gè)的S12納米顆粒表面均包裹特殊官能基團(tuán)海綿體的球體。由此,可見,本發(fā)明使用專用的修飾S12納米載體的制備設(shè)備,不但能夠?qū)崿F(xiàn)利用電磁攪拌和超聲波振動(dòng),使得S12納米顆粒重懸和修飾S12納米載體顆粒再次重懸;還可以利用攪拌雙蒸水的剪切力和強(qiáng)交變磁場(chǎng)的洛倫茲力實(shí)現(xiàn)修飾Si02納米團(tuán)聚體瓦解,變成一個(gè)個(gè)的修飾Si02納米顆粒的球體。
[0011]本發(fā)明利用十八烷基三甲基溴化銨(OTAB)修飾S12納米粒,使S12納米粒的Zeta電位變?yōu)檎?,S12納米粒因此可以通過靜電作用結(jié)合DNA,大大提高治療基因的轉(zhuǎn)染效率。
[0012]上述的Zeta電位又叫電動(dòng)電位或電動(dòng)電勢(shì),是指剪切面的電位,是表征膠體分散系穩(wěn)定性的重要指標(biāo)。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在:用本發(fā)明獲得的修飾S12納米載體,平均直徑為20?50nm,Zeta電位變?yōu)檎?,親水性強(qiáng);通過修飾賦予了 S12納米粒表面特殊的官能基團(tuán);參見附圖4,該特殊的官能基團(tuán)是帶正電荷的氨基;在水介質(zhì)中負(fù)載含羰基的抗腫瘤藥物或腫瘤新生血管抑制劑具有兩親性質(zhì),不僅可有效結(jié)合DNA,而且可保護(hù)DNA免受破壞,并具有較高的體外基因轉(zhuǎn)運(yùn)效率;本發(fā)明使用專用的修飾S12納米載體的制備設(shè)備操作簡單,無須加熱,成本低,易于規(guī)模生產(chǎn),可以應(yīng)用于對(duì)癌癥基因治療,它作為DNA結(jié)合載體材料安全,不存在毒性的風(fēng)險(xiǎn),可有效解決現(xiàn)有腫瘤治療藥物副作用大,不能很好的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的問題。【附圖說明】
[0014]圖1為本發(fā)明修飾Si〇2納米載體的制備設(shè)備示意圖。[0〇15]圖2為圖1的A-A剖視不意圖。[〇〇16] 圖3為Si02納米粒透視電鏡圖。[0〇17]圖4為本發(fā)明修飾Si〇2納米載體示意圖。
[0018]圖5為本發(fā)明修飾Si〇2納米載體材料透視電鏡圖。[0〇19]圖6為圖5局部放大不意圖。
[0020]圖7為實(shí)施例2合成的修飾Si02納米載體加入抗腫瘤LivinlshRNA質(zhì)粒后的顯微鏡成像示意圖。[0021 ]附圖標(biāo)記是:1反應(yīng)容器本體;2超聲波換能器;3轉(zhuǎn)子攪拌槳;4高頻電磁線圈;5容器蓋;6軸座;7軸桿;8方框架;9槳葉;10軸孔;11磁極靴;12環(huán)形磁芯;13線圈?!揪唧w實(shí)施方式】[〇〇22]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此。[〇〇23] 實(shí)施例1一種修飾Si02納米載體的制備設(shè)備,包括陶瓷材料制成的反應(yīng)容器本體1、超聲波換能器2、轉(zhuǎn)子攪拌槳3和高頻電磁線圈4;反應(yīng)容器本體1為有底的圓筒體,內(nèi)底面正中央設(shè)置有豎直向上的支撐軸;圓筒體上口有容器蓋5;所述支撐軸下部分是軸座6,上部分是軸桿7,軸座6和軸桿7兩者之間有一個(gè)軸臺(tái)階過渡連接,且軸座6直徑大于軸桿7直徑;上述超聲波換能器2固定在反應(yīng)容器本體1的外底面;上述轉(zhuǎn)子攪拌槳3為金屬導(dǎo)體方框架8和槳葉9所組成,方框架8表面襯耐腐蝕材料;方框架8上下兩框邊的中部分別設(shè)有上下對(duì)稱的軸孔10,左右兩框邊分別固定有槳葉9;所述轉(zhuǎn)子攪拌槳3放置在反應(yīng)容器本體1的容腔內(nèi),其方框架8 通過軸孔10套在支撐軸的軸桿7上,由軸座6支撐可以自由旋轉(zhuǎn);上述高頻電磁線圈4由帶磁極靴11的環(huán)形磁芯12和線圈13所組成;磁極靴11有四個(gè),中心對(duì)稱地分布在環(huán)形磁芯12的內(nèi)環(huán);四個(gè)磁極靴11上均纏繞有線圈13,并緊貼在反應(yīng)容器本體1外筒壁上。[〇〇24] 所述高頻電磁線圈4外接高頻移相電容和變頻器;變頻器輸出頻率1000-1200HZ可調(diào)的高頻電流;所述超聲波換能器2外接輸出功率60w的超聲波發(fā)生器;超聲波發(fā)生器工作頻率45-50kHz。[〇〇25]本發(fā)明修飾Si02納米載體的制備方法是:將Si02納米粒lg投入反應(yīng)容器的雙蒸水中;電磁攪拌混勻,超聲波振動(dòng)使Si02納米粒重懸于雙蒸水中;加入0.lg十八烷基三甲基溴化銨(0TAB),室溫電磁攪拌3h,離心30min,靜置陳化12?20h去上清;沉淀物用雙蒸水洗三次,返回反應(yīng)容器再次重懸,離心,所得離心沉淀物冷凍干燥,即可制成修飾Si02納米載體; 并進(jìn)行透射電鏡掃描(JEOL JEM-1200EX),結(jié)果見圖5、圖6;所述修飾Si02納米載體顆粒的平均直徑為20?50nm〇
[0026]上述的將Si02納米粒投入反應(yīng)容器的雙蒸水中,Si02納米粒與雙蒸水的固液質(zhì)量體積比為1:4?8g/L。[〇〇27]上述的重懸是使用修飾Si02納米載體的制備設(shè)備;開啟變頻器將高頻電流工作頻率調(diào)整為1100Hz,使轉(zhuǎn)子攪拌槳3以30000r/min的旋轉(zhuǎn)速度攪拌雙蒸水;開啟超聲波發(fā)生器產(chǎn)生超聲波振打,將S12納米粒分散均勻;所述的超聲波振動(dòng)時(shí)間30min。
[0028]上述室溫?cái)嚢柁D(zhuǎn)速30000r/min。
[0029]上述的再次重懸是將洗滌收集的沉淀物返回修飾S12納米載體的制備設(shè)備中,開啟變頻器將高頻電流工作頻率調(diào)整為1000Hz,使轉(zhuǎn)子攪拌槳3以28000r/min的旋轉(zhuǎn)速度攪拌雙蒸水;同時(shí)調(diào)整變頻器的高頻電流強(qiáng)度,使反應(yīng)容器外加高頻電磁線圈4所產(chǎn)生的磁場(chǎng)強(qiáng)度達(dá)5-8T;經(jīng)高頻磁場(chǎng)中高速旋轉(zhuǎn)的雙蒸水吹打分散,使沉淀物顆粒表面形成特殊的官能基團(tuán)海綿體。
[0030]上述的冷凍干燥是先將離心沉淀物在-60°C下凍結(jié);然后將凍結(jié)的離心沉淀物在
0.9?I帕的真空下,再高速離心干燥;高速離心的轉(zhuǎn)速為30000-36000r/ min;干燥時(shí)間2-4h0
[0031]實(shí)施例2
將所得修飾S12納米載體可以進(jìn)一步通過化學(xué)偶聯(lián)交聯(lián)攜帶負(fù)電荷的DNA分子、或攜帶含羰基的抗腫瘤藥物或腫瘤新生血管抑制劑,從而應(yīng)用于腫瘤分子成像診斷和siRNA干擾治療見圖7 ;具體步驟是:將制備得到的修飾Si02納米載體30mg和抗腫瘤LivinlshRNA質(zhì)粒6mg在50mL雙蒸水中混合均勻,在室溫下,600r/min攪拌24-48h使其充分反應(yīng),經(jīng)靜置陳化8?1h沉淀后,再用雙蒸水洗凈后,在20-60°C,5?10帕的真空下,干燥12-20h,得到以修飾S12納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)。
[0032]所述抗腫瘤LivinlshRNA質(zhì)粒和修飾Si02納米載體的質(zhì)量含量比為1:3。
[0033]以修飾S12納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)的體內(nèi)抗腫瘤活性測(cè)定:取小鼠S180腹水瘤細(xì)胞,用注射用生理鹽水以3:1比例稀釋后,每只小鼠于腹腔注射0.3 mL,小鼠喂養(yǎng)7天后,抽取小鼠S180腹水瘤細(xì)胞,計(jì)數(shù)后以注射用生理鹽水稀釋成濃度為2X 16個(gè)/mL的細(xì)胞懸液,皮下接種與小鼠右前肢上部。小鼠接種腫瘤7d后,取其中24只腫瘤體積多100 mm3昆明小鼠,隨機(jī)分為3組,每組8只。具體分組如下:(I)對(duì)照組(NS組):生理鹽水;(2)未修飾S12納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)治療組;(3)修飾S12納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)治療組;3組均采用靜脈給藥的方式。每2 d給藥一次,每次對(duì)應(yīng)組分別注射生理鹽水lmL、2mg未修飾Si02納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)、2mg/ Si02納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)ImL;共給藥7次。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中每日觀察小鼠生活狀態(tài),每2 d稱其體重并使用游標(biāo)卡尺測(cè)量小鼠肉瘤的長徑(A)與短徑(B),按公式腫瘤體積V=1/2(AXB2)計(jì)算腫瘤體積。當(dāng)給藥以未修飾或修飾Si02納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)時(shí),小鼠的腫瘤體積的增加得到了明顯的抑制;與生理鹽水組和未修飾的納米載體組比較,修飾S12納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng)組的效果更好。
[0034]由上業(yè)已經(jīng)證實(shí),以修飾S12納米載體的抗腫瘤藥物傳遞系統(tǒng),提高了藥物的滲透性,可以作為抗腫瘤藥物的載體使用,能很好的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的問題。同時(shí)測(cè)試結(jié)果表明,本發(fā)明的新的以修飾S12納米載體的抗腫瘤藥物傳遞系統(tǒng),對(duì)生物體的毒性很低,物理以及化學(xué)穩(wěn)定性良好,質(zhì)量好,制備的條件容易滿足,原料來源豐富,成本低。
[0035]本發(fā)明預(yù)期可以用于治療腫瘤的一種良好的載體,還可以作為化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)、核酸的轉(zhuǎn)運(yùn)載體,是藥物制備上的一大創(chuàng)新。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種修飾Si〇2納米載體的制備設(shè)備,包括陶瓷材料制成的反應(yīng)容器本體(1);其特征 在于:還包括超聲波換能器(2)、轉(zhuǎn)子攪拌槳(3)和高頻電磁線圈(4);反應(yīng)容器本體(1)為有 底的圓筒體,內(nèi)底面正中央設(shè)置有豎直向上的支撐軸;圓筒體上口有容器蓋(5);所述支撐 軸下部分是軸座(6),上部分是軸桿(7),軸座(6)和軸桿(7)兩者之間有一個(gè)軸臺(tái)階過渡連 接,且軸座(6)直徑大于軸桿(7)直徑;上述超聲波換能器(2)固定在反應(yīng)容器本體(1)的外 底面;上述轉(zhuǎn)子攪拌槳(3)為金屬導(dǎo)體方框架(8)和槳葉(9)所組成,方框架(8)表面襯耐腐 蝕材料;方框架(8)上下兩框邊的中部分別設(shè)有上下對(duì)稱的軸孔(10),左右兩框邊分別固定 有槳葉(9);所述轉(zhuǎn)子攪拌槳(3)放置在反應(yīng)容器本體(1)的容腔內(nèi),其方框架(8)通過軸孔 (10)套在支撐軸的軸桿(7)上,由軸座(6)支撐可以自由旋轉(zhuǎn);上述高頻電磁線圈(4)由帶磁 極靴(11)的環(huán)形磁芯(12)和線圈(13)所組成;磁極靴(11)有四個(gè),中心對(duì)稱地分布在環(huán)形 磁芯(12)的內(nèi)環(huán);四個(gè)磁極靴(11)上均纏繞有線圈(13),并緊貼在反應(yīng)容器本體(1)外筒壁 上。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種修飾Si02納米載體的制備設(shè)備,其特征在于:所述高頻電 磁線圈(4 )外接高頻移相電容和變頻器;變頻器輸出頻率1000-1200Hz可調(diào)的高頻電流;所 述超聲波換能器(2)外接輸出功率60w的超聲波發(fā)生器;超聲波發(fā)生器工作頻率45-50kHz。3.—種修飾Si〇2納米載體的制備方法,其特征是將Si〇2納米粒投入反應(yīng)容器的雙蒸水 中;電磁攪拌混勻,超聲波振動(dòng)使Si02納米粒重懸于雙蒸水中;加入十八烷基三甲基溴化 銨,室溫?cái)嚢?h;離心30min,靜置陳化12?20h去上清;沉淀物用雙蒸水洗滌三次,返回反應(yīng) 容器再次重懸,離心;所得離心沉淀物冷凍干燥,即制成修飾Si02納米載體;所述修飾Si02納 米載體顆粒的平均直徑為20?50nm〇4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的修飾Si〇2納米載體的制備方法,其特征在于:所述的將Si〇2納 米粒投入反應(yīng)容器的雙蒸水中,Si02納米粒與雙蒸水的固液質(zhì)量體積比為1:4?8g/L。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的修飾Si02納米載體的制備方法,其特征在于:所述的重懸是使 用修飾Si02納米載體的制備設(shè)備;開啟變頻器將高頻電流工作頻率調(diào)整為1100Hz,使轉(zhuǎn)子 攪拌槳(3)以30000r/min的旋轉(zhuǎn)速度攪拌雙蒸水;開啟超聲波發(fā)生器產(chǎn)生超聲波振打,將 Si02納米粒分散均勻;所述的超聲波振動(dòng)時(shí)間30min。6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的修飾Si〇2納米載體的制備方法,其特征在于:所述室溫?cái)嚢柁D(zhuǎn) 速30000r/min。7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的修飾Si02納米載體的制備方法,其特征在于:所述的再次重懸 是將洗滌收集的沉淀物返回修飾Si02納米載體的制備設(shè)備中,開啟變頻器將高頻電流工作 頻率調(diào)整為1000Hz,使轉(zhuǎn)子攪拌槳(3)以28000r/min的旋轉(zhuǎn)速度攪拌雙蒸水;同時(shí)調(diào)整變頻 器的高頻電流強(qiáng)度,使反應(yīng)容器外加高頻電磁線圈(4)所產(chǎn)生的磁場(chǎng)強(qiáng)度達(dá)5-8T;經(jīng)高頻磁 場(chǎng)中高速旋轉(zhuǎn)的雙蒸水吹打分散,使沉淀物顆粒表面形成特殊的官能基團(tuán)海面體。8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的修飾Si〇2納米載體的制備方法,其特征在于:所述的冷凍干燥 是先將離心沉淀物在-60 °C下凍結(jié);然后將凍結(jié)的離心沉淀物在0.9?1帕的真空下,再高速 離心干燥;高速離心的轉(zhuǎn)速為30000_36000r/ min;干燥時(shí)間2_4h。9.一種修飾Si〇2納米載體的應(yīng)用,其特征在于:將制備的修飾Si〇2納米載體進(jìn)一步通過 化學(xué)偶聯(lián)交聯(lián)攜帶負(fù)電荷的DNA分子、或攜帶含羰基的抗腫瘤藥物或腫瘤新生血管抑制劑, 從而應(yīng)用于腫瘤分子成像診斷和siRNA干擾治療;具體步驟是:將制備得到的修飾Si02納米載體30mg和抗腫瘤LivinlshRNA質(zhì)粒6mg在50mL雙蒸水中混合均勾,在室溫下,600r/min攪拌24-48h使其充分反應(yīng),經(jīng)靜置陳化8?1h沉淀后,再用雙蒸水洗凈后,在20-60°C,5?10帕的真空下,干燥12-20h,得到以修飾S12納米載體介導(dǎo)的抗腫瘤基因治療系統(tǒng);所述抗腫瘤LivinlshRNA質(zhì)粒和修飾S12納米載體的質(zhì)量含量比為1:3。
【文檔編號(hào)】A61K47/48GK105944116SQ201610518509
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年7月5日
【發(fā)明人】雷世澤
【申請(qǐng)人】雷世澤