熊果酸在制備抗血栓藥物方面的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥或/和保健品領(lǐng)域，具體地說涉及熊果酸的新用途，確切地說是熊 果酸在抗血栓方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 熊果酸(ursolic acid)又名烏索酸(烏蘇酸），屬五環(huán)三萜類化合物。它在自然界 分布很廣，如存在于杜鵑花科植物熊果的葉、果實(shí)中，玄參科植物毛泡桐的葉中，以及木樨 科植物女貞的葉中。熊果酸具有廣泛的生物活性，包括抗癌、對肝損傷的保護(hù)、抗菌消炎和 抗病毒等作用。近年來發(fā)現(xiàn):熊果酸不僅對多種致癌、促癌物有抵抗作用，而且能抑制多種 惡性腫瘤細(xì)胞的生長。它對中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)有明顯的安定和降溫作用，能抑制CCl 4誘 導(dǎo)的肝損傷，體外對G+和（Γ菌及酵母菌等都具有抑制活性，同時(shí)熊果酸及其衍生物還對病 毒具有抑制活性。但未見有關(guān)于抗血栓反方面的報(bào)道。
[0003] 血液中存在著互相拮抗的凝血系統(tǒng)和抗血栓系統(tǒng)(纖維蛋白溶解系統(tǒng)）。在生理情 況下血液中的凝血因子不斷地被激活，從而產(chǎn)生凝血酶，形成微量的纖維蛋白，沉著于血管 內(nèi)膜上。但這些微量的纖維蛋白又不斷地被激活了的纖維蛋白溶解系統(tǒng)所溶解，同時(shí)被激 活的凝血因子也不斷地被單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)所吞噬。凝血系統(tǒng)和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的動(dòng)態(tài) 平衡，既保證了血液有潛在的可凝固性又始終保證了血液的流體狀態(tài)。然而，有時(shí)在某些能 促進(jìn)凝固過程的因素的作用下，打破了上述的動(dòng)態(tài)平衡，觸發(fā)了凝血過程，便形成血栓。
[0004] 血栓形成是許多疾病如心肌梗死、缺血性猝死、深靜脈血栓等的基本病理過程，它 嚴(yán)重地危害著人類的健康，它的形成與血小板的聚集、粘附，內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)以及 纖維蛋白的形成密切相關(guān)。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的調(diào)查報(bào)告，由于動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的血栓 疾病引起的死亡已經(jīng)排到了第一位。動(dòng)脈血栓是由于動(dòng)脈粥樣硬化，斑塊不穩(wěn)定發(fā)生了斑 塊的破裂，使血液里的血小板發(fā)生聚集，激活了體內(nèi)的凝血系統(tǒng)，最后導(dǎo)致血栓形成。一旦 堵塞以后就會發(fā)生組織的缺血和壞死，產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。在動(dòng)脈血栓性疾病的急性或特殊 狀態(tài)下，需要輔助使用抗血栓藥物，才能達(dá)到更好的抗血栓效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種熊果酸在制備抗血栓藥物方面的新 應(yīng)用。
[0006] 其中，所述的新應(yīng)用是抗血栓作用。
[0007] 熊果酸可購買普通市售產(chǎn)品，也可以自制，從植物中提取獲得。
[0008] 熊果酸(ursolic acid)別名烏索酸，分子式:C3〇H48〇3,結(jié)構(gòu)式如下：

[0009] 本發(fā)明對熊果酸的體內(nèi)抗血栓作用進(jìn)行考察，結(jié)果表明：熊果酸具有良好的抗血 栓作用，可單獨(dú)用于制備抗血栓藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 以下通過實(shí)施例形式對本發(fā)明的上述內(nèi)容再做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0011] 實(shí)施例1熊果酸抗血栓作用實(shí)驗(yàn) 方法:采用皮下注射鹽酸腎上腺素和冰水浴的方法制備大鼠的急性血瘀模型。大鼠連 續(xù)灌胃7次，考察熊果酸對急性血瘀模型大鼠血液流變性和凝血四項(xiàng)的影響。
[0012] 儀器和材料:HF6000-4半自動(dòng)凝血分析儀、HT-100C血流變粘度測試儀、TGL-16gR 高速臺式冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠）；凝血酶原時(shí)間（PT)測定試劑盒（105262);活 化部分凝血酶時(shí)間(APTT)測定試劑盒（1121781);凝血酶時(shí)間（TT)測定試劑盒（121151);纖 維蛋白原(FIB)含量測定試劑盒（132079)均由上海太陽生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。
[0013] 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:SPF級的SD大鼠，雌雄各半，體重250~300 g，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提 供，許可證號：SCXK(豫)2010-0002。
[0014]實(shí)驗(yàn)方法： 樣品溶液的配置:熊果酸用5%的羧甲基纖維素鈉溶解。
[0015] 雌雄各半的SD大鼠，隨機(jī)分為4組，每組7只。分別為空白組、模型組、陽性對照組和 熊果酸給藥組。連續(xù)灌胃給藥7次，早晚各一次(每次間隔12h)，空白對照組和模型組給予相 應(yīng)的空白溶劑(5%的羧甲基纖維素鈉），陽性對照組給予阿司匹林（100 mg/kg)，給藥組給予 相應(yīng)的藥物，于第5次給藥后開始造模，方法如下： 大鼠皮下注射鹽酸腎上腺素注射液(〇. 8 mg/kg )2次，間隔時(shí)間為4 h。第1次皮下 給予鹽酸腎上腺素后2 h，將大鼠置于0~2 °C冰水中游泳5 min，造成大鼠急性血瘀模 型。最后一次皮下注射鹽酸腎上腺素后大鼠禁食不禁水飼養(yǎng)，在相應(yīng)的時(shí)間給第六次藥。最 后一次注射鹽酸腎上腺素16 h進(jìn)行最后一次藥，給藥30 min后用10 %水合氯醛（300 mg/ kg)麻醉大鼠，于腹主動(dòng)脈取血，測量相應(yīng)的指標(biāo)。
[0016] 數(shù)據(jù)處理:結(jié)果采用算術(shù)平均值和標(biāo)準(zhǔn)差表示，數(shù)值統(tǒng)計(jì)采用SPSS19.0軟件單因 素方差分析法(One-Way AN0VA)比較其顯著性差異。測定結(jié)果如下： 表1熊果酸對急性血瘀模型大鼠全血粘度的影響

Data represent mean土SD· n=7； 與空白組相比，*#P〈〇. OOI; 與模型組相比，###Ρ〈〇·〇〇1 ; 與陽性對照相比，^P〈〇 · 001 or，0 · 001 <^卩〈0 · 01。
[0017] 由表1可知，模型組與空白組相比，高、中、低切變頻率下的全血粘度均極顯著升高 (P〈0.001 )，說明大鼠的急性血瘀模型造模成功。與模型組相比，熊果酸給藥組各切變頻率 下的全血粘度均極顯著降低(P〈〇.001)，且在各切變頻率下熊果酸降低全血粘度的效果與 陽性對照阿司匹林相當(dāng)(P>〇.05)，說明熊果酸具有良好的抗血栓活性。
[0018] 表2熊果酸對急性血瘀模型大鼠血漿粘度的影響

Data represent mean±SD. n=7； 與空白組相比，*#P〈〇. 001; 與模型組相比，###P〈〇 · 001，or，0 · 001<##P〈0 · 01，#P〈0 · 05; 與陽性對照相比，^P〈〇 · 001 or，0 · 001 <^卩〈0 · 01。
[0019] 由表2可知：模型組與空白組相比，在中切變率下的血漿粘度極顯著升高（P〈 0.001)，說明大鼠急性血瘀模型造模成功。與模型組相比，熊果酸給藥組可極顯著降低血漿 粘度(P〈0.001 )，且其效果與陽性對照相當(dāng)(P>0.05 )，說明熊果酸具有良好的抗血栓活性。
[0020] 表3熊果酸對急性血瘀模型大鼠凝血四項(xiàng)的影響

Data represent mean±SD. n=7； 與空白組相比，*#P〈〇. 001; 與模型組相比，###P〈〇 · OOI，or，O · OOI<##P〈0 · OI，#P〈0 · 05; 與陽性對照相比，^P〈〇. 001。
[0021]由表3可知：模型組與空白組相比，TT、APTT和PT均極顯著地降低，而FIB極顯著地 升高(P〈0.001)，說明大鼠的急性血瘀模型造模成功。與模型組相比，熊果酸給藥組可極顯 著地延長TT、APTT和PT，且能極顯著地降低FIB(P〈0.001 )，且熊果酸給藥組延長TT和APTT 的效果與陽性對照阿司匹林相當(dāng)(P>〇.05)。說明各個(gè)給藥組可以通過內(nèi)源性凝血途徑和外 源性凝血途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而來抑制血栓的形 成。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.熊果酸在制備抗血栓藥物方面的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物領(lǐng)域，具體涉及熊果酸的新用途。通過體內(nèi)抗血栓活性進(jìn)行考察，結(jié)果表明，熊果酸具有良好的抗血栓活性，可以用于制備抗血栓藥物。
【IPC分類】A61K31/56, A01P7/02
【公開號】CN105708841
【申請?zhí)枴緾N201610047586
【發(fā)明人】康文藝, 郭秀春, 余琦, 謝平耀, 王學(xué)標(biāo)
【申請人】河南大學(xué)