一種泰樂菌素脂質(zhì)體制劑及其制備方法
【專利摘要】一種泰樂菌素脂質(zhì)體制劑，以重量份計(jì)，所述脂質(zhì)體由10-90份膜材和5-40份脂相構(gòu)成，脂質(zhì)體內(nèi)含有1份泰樂菌素內(nèi)液。所述膜材為大豆磷脂或卵磷脂，所述脂相為大豆油、橄欖油、菜籽油或膽固醇。所述泰樂菌素脂質(zhì)體制劑粒度小于10納米。本發(fā)明的藥品可有效降低在組織中擴(kuò)散速度，緩慢向血液中釋放藥物，從而延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間。本發(fā)明所使用的脂質(zhì)體脂材毒性小，生物相溶性好，沒有免疫反應(yīng)。在進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)之后，由于脂質(zhì)體膜的保護(hù)，藥物可以免受機(jī)體酶系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)的降解。另經(jīng)八批兩萬只雞的使用實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)雞的氣囊炎療效較好。
【專利說明】一種泰樂菌素脂質(zhì)體制劑及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及脂質(zhì)體制劑領(lǐng)域，具體涉及一種泰樂菌素脂質(zhì)體制劑及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 泰樂菌素，亦稱泰農(nóng)、泰樂霉素，是美國(guó)于1959年從弗氏鏈霉菌的培養(yǎng)液中獲得 的一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。泰樂菌素為一種白色板狀結(jié)晶，微溶于水，呈堿性。是一種廣譜 抗生素，對(duì)支原體有特效，對(duì)多種G+菌具有很強(qiáng)的抗菌作用，還對(duì)部分G-菌、彎桿菌、螺 旋體及球蟲具有抑制作用。作為畜禽專用抗生素，泰樂菌素不會(huì)給人類帶來交叉耐藥性問 題。在使用中，添加劑量小，吸收快，一般經(jīng)2-3小時(shí)即可達(dá)到最高血藥濃度；組織內(nèi)分布 廣，保持有效抑菌濃度時(shí)間長(zhǎng)，排泄也徹底。
[0003] 脂質(zhì)體是一種定向藥物載體，屬于靶向給藥系統(tǒng)的一種新劑型。它可以將藥物粉 末或溶液包埋在直徑為納米級(jí)的微粒中，這種微粒具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入人或動(dòng)物體內(nèi)主 要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，使藥 物主要在肺、脾、肝和骨髓等組織器官中積蓄，從而提高藥物的治療指數(shù)，減少藥物的治療 劑量和降低藥物的毒性。
[0004] 因此，我們希望將泰樂菌素制備成脂質(zhì)體制劑，使其更進(jìn)一步地發(fā)揮其藥效。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供一種泰樂菌素脂質(zhì)體制劑及其制備方法，解決傳統(tǒng)的泰樂菌素直接給 藥，藥效較短、藥物靶向性相對(duì)較弱的問題。
[0006] 本發(fā)明的目的是以下述方式實(shí)現(xiàn)的： 一種泰樂菌素脂質(zhì)體制劑，其特征在于：以重量份計(jì)，所述脂質(zhì)體由10-90份膜材和 5-40份脂相構(gòu)成，脂質(zhì)體內(nèi)含有1份泰樂菌素內(nèi)液。
[0007] 所述膜材為大豆磷脂或卵磷脂，所述脂相為大豆油、橄欖油、菜籽油或膽固醇。
[0008] 所述泰樂菌素脂質(zhì)體制劑粒度小于10納米。
[0009] 制備步驟如下：（1)將所述膜材和脂相混合；（2)以重量份計(jì)，取2-6份防腐劑； 以體積計(jì)，取1-5份潤(rùn)濕劑、10-80份溶劑，加入（1)中攪拌溶解，減壓除去溶劑，制備脂質(zhì)體 薄膜；其中1份重量份原料和1份體積份原料的關(guān)系是以Img重量原料對(duì)應(yīng)Iml體積原料 為基準(zhǔn)；（3)將0. 2-0. 4mol/l的硫酸銨水溶液加入（2)中，水化和洗脫脂質(zhì)體薄膜，超聲 處理，得到硫酸銨空白脂質(zhì)體；（4)將（3)中的脂質(zhì)體通過微孔濾膜進(jìn)行整粒；（5)將（4) 中的脂質(zhì)體加入到生理鹽水中進(jìn)行恒溫透析；（6)向（5)中的脂質(zhì)體加入所述泰樂菌素， 進(jìn)行孵化；（7)充氮?dú)?，灌裝。
[0010] 所述潤(rùn)濕劑為乙醇、丙二醇、聚乙二醇或異丙醇；所述防腐劑為苯甲酸鈉，所述溶 劑為氯仿。
[0011] 所述生理鹽水為質(zhì)量濃度為〇? 9-1. 2%。
[0012] 超聲處理時(shí)間為5-30min ;恒溫透析時(shí)間為2-8h，溫度為20-40°C ;孵化時(shí)間為 5-30min，溫度為 30-80°C。
[0013] 所述微孔濾膜為CL I U m-1. 2 ii m。
[0014] 本發(fā)明采用了硫酸銨梯度法制備，通過游離氨擴(kuò)散到脂質(zhì)體外，間接形成pH梯 度，使藥物積聚到脂質(zhì)體內(nèi)。其方法為先將硫酸銨包與脂質(zhì)體內(nèi)水相，然后通過透析、凝膠 色譜或超濾的方法除去脂質(zhì)體外水相的硫酸銨。由于離子對(duì)雙分子層滲透系數(shù)的不同，氨 分子滲透系數(shù)較高，為〇. 13 cm/s，能很快擴(kuò)散到外水相中；H+的滲透系數(shù)遠(yuǎn)小于氨分子，因 此會(huì)使脂質(zhì)體內(nèi)水相呈酸性，形成pH梯度，梯度大小由[NH4+]外水相/ [NH4+]內(nèi)水相比較 決定，這樣使藥物逆硫酸銨梯度載入脂質(zhì)體。藥物與S042-形成的硫酸鹽，對(duì)雙分子層有很 低滲透系數(shù)，因而使藥物具有很高的包封率。硫酸銨梯度法制備泰樂菌素脂質(zhì)體，以提高 包封率和穩(wěn)定性。
[0015] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于： 1、良好的制劑性質(zhì)：制備脂質(zhì)體所用到的脂材毒性小，生物相溶性好，沒有免疫反應(yīng)。
[0016] 2、提高療效：泰樂菌素納米脂質(zhì)體乳液，經(jīng)八批兩萬只雞使用證明，對(duì)雞的氣囊炎 療效較好。
[0017] 3、具有良好的靶向性：脂質(zhì)體的靶向性有四種類型： 1)被動(dòng)（天然）靶向性：天然靶向性是脂質(zhì)體靜脈給藥的基本特征。是由于脂質(zhì)體倍 巨噬細(xì)胞作為體外異物吞噬而產(chǎn)生的體內(nèi)分布特征。脂質(zhì)體的這種特征被廣泛應(yīng)用與肺、 肝腫瘤等的治療和防止淋巴系統(tǒng)腫瘤等的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。
[0018] 2)隔室靶向性：隔室靶向性指的是脂質(zhì)體通過不同給藥方式進(jìn)入人體之后可以 對(duì)不同部位具有靶向性。
[0019] 3)物理靶向性：在脂質(zhì)體的設(shè)計(jì)過程中，利用作用部位的物理因素或化學(xué)因素的 改變而改變脂膜的通透性，引起脂質(zhì)體選擇性釋放藥物，從而達(dá)到靶向給藥之目的。這種物 理或化學(xué)的因素包括局部pH變化，病變部位溫度變化，磁場(chǎng)的變化等。目前物理靶向脂質(zhì) 體設(shè)計(jì)最為成功的例子是溫度敏感脂質(zhì)體。
[0020] 4)主動(dòng)靶向性：這種靶向性是在脂質(zhì)體上連接某種識(shí)別分子，即所謂的配體通過 配體分子特異性專一地與靶細(xì)胞表面的相應(yīng)分子作用，使得脂質(zhì)體在靶區(qū)域釋藥。常見的 配體有：糖、植物凝血素、膚類激素、小半抗原、抗體和其他蛋白質(zhì)。
[0021] 4、長(zhǎng)效作用：藥物包裹于脂質(zhì)體內(nèi)，可降低在組織中擴(kuò)散而緩慢向血液中釋放藥 物，從而延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間。
[0022] 5、減低藥物毒性：脂質(zhì)體能選擇性地分布于某些組織和器官，增加藥物對(duì)淋巴系 統(tǒng)的定向性，提高藥物在靶部位的治療濃度。尤其對(duì)抗癌藥物，能使之選擇性地殺傷癌細(xì)胞 或抑制癌細(xì)胞，對(duì)正常組織、細(xì)胞的毒性明顯降低或無損害作用。對(duì)脂質(zhì)體表面性質(zhì)進(jìn)行改 變，如粒徑大小、表面電荷、組織特異性抗體等，可提高藥物對(duì)靶區(qū)的選擇性，從而也降低了 毒性，減少了不良反應(yīng)。
[0023] 6、提高藥物穩(wěn)定性：脂質(zhì)體制劑不沉淀，穩(wěn)定性好，可以與水任意比例混溶。將一 些不穩(wěn)定的易氧化的藥物制成脂質(zhì)體之后，由于藥物包封在脂質(zhì)體中，受到類脂雙分子層 膜的保護(hù)，可以顯著提高其穩(wěn)定性。同時(shí)在進(jìn)入體內(nèi)之后，由于脂質(zhì)體膜的保護(hù)，藥物可以 免受機(jī)體酶系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)的降解。

【具體實(shí)施方式】
[0024] 以下以具體實(shí)施例進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明做出說明： 實(shí)施例1 : 泰樂菌素脂質(zhì)體制劑的原料配方及制備步驟如下： 稱取大豆卵磷脂200mg和膽固醇50mg混合，再加入2ml乙醇，4ml苯甲酸鈉，加20ml 氯仿溶解，減壓除去溶劑，制備磷脂膜后，加入〇. 2mol/L的硫酸銨水溶液20ml，水化和洗 脫脂質(zhì)薄膜，超聲處理20min，得到硫酸銨空白脂質(zhì)體。將空白脂質(zhì)體依次通過 微孔濾膜，進(jìn)行整粒。整粒后的脂質(zhì)體裝入透析袋中，加入IOOOmlO. 9%的生理鹽水中， 30°C恒溫透析5h。透析后的脂質(zhì)體中加入泰樂菌素5mg于50 °C孵化20min，取出，充氮?dú)?并灌封于IOml安瓿4°C保存。
[0025] 以下實(shí)施例配方及工藝參數(shù)如表1所示(見下頁(yè))，制備步驟同實(shí)施例1。
[0026] 以上原料均來自市售產(chǎn)品。其中，大豆磷脂購(gòu)自江蘇曼氏生物科技有限公司，PC含 量為72%;卵磷脂購(gòu)自上海太偉藥業(yè)有限公司，PC含量85%。經(jīng)分光光度法檢測(cè)，以上所制 得的特樂菌素脂質(zhì)體制劑粒度均小于10納米。 試驗(yàn)例： 分別取實(shí)施例1的泰樂菌素脂質(zhì)體制劑和對(duì)照組制劑分別給雞口服，口服量為40mg有 效成分量/kg體重，對(duì)照組制劑為普通市售泰樂菌素預(yù)混劑。在不同時(shí)間對(duì)雞抽取血樣，以 微生物效價(jià)法測(cè)定血漿抗菌活性，以泰樂菌素標(biāo)準(zhǔn)品為參照，計(jì)算出用藥后不同時(shí)間的血 藥濃度（ug/ml)。結(jié)果如表2: 表2試驗(yàn)例實(shí)驗(yàn)結(jié)果

【權(quán)利要求】
1. 一種泰樂菌素脂質(zhì)體制劑，其特征在于：以重量份計(jì)，所述脂質(zhì)體由10-90份膜材和 5-40份脂相構(gòu)成，脂質(zhì)體內(nèi)含有1份泰樂菌素內(nèi)液。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的泰樂菌素脂質(zhì)體制劑，其特征在于：所述膜材為大豆磷脂或 卵磷脂，所述脂相為大豆油、橄欖油、菜籽油或膽固醇。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的泰樂菌素脂質(zhì)體制劑，其特征在于：所述泰樂菌素脂質(zhì) 體制劑粒度小于10納米。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述泰樂菌素脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于制備步 驟如下：（1)將所述膜材和脂相混合；（2)以重量份計(jì)，取2-6份防腐劑；以體積計(jì)，取1-5 份潤(rùn)濕劑、10-80份溶劑，加入（1)中攪拌溶解，減壓除去溶劑，制備脂質(zhì)體薄膜；其中1份 重量份原料和1份體積份原料的關(guān)系是以lmg重量原料對(duì)應(yīng)lml體積原料為基準(zhǔn)；（3)將 0. 2-0. 4mol/l的硫酸銨水溶液加入（2)中，水化和洗脫脂質(zhì)體薄膜，超聲處理，得到硫酸銨 空白脂質(zhì)體；（4)將（3)中的脂質(zhì)體通過微孔濾膜進(jìn)行整粒；（5)將（4)中的脂質(zhì)體加 入到生理鹽水中進(jìn)行恒溫透析；（6)向（5)中的脂質(zhì)體加入所述泰樂菌素，進(jìn)行孵化；（7) 充氮?dú)猓嘌b。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的泰樂菌素脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于：所述潤(rùn)濕劑 為乙醇、丙二醇、聚乙二醇或異丙醇；所述防腐劑為苯甲酸鈉，所述溶劑為氯仿。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的泰樂菌素脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于：所述生理鹽 水為質(zhì)量濃度為〇. 9-1. 2%。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的泰樂菌素脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于：超聲處理 時(shí)間為5-30min ;恒溫透析時(shí)間為2-8h，溫度為20-40°C ;孵化時(shí)間為5-30min，溫度為 30-80。。。
8. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的泰樂菌素脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于：所述微孔濾 膜為 〇? 1 U m-1. 2 u m。
【文檔編號(hào)】A61P31/04GK104382855SQ201410579030
【公開日】2015年3月4日 申請(qǐng)日期:2014年10月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月27日
【發(fā)明者】李亞娥, 劉應(yīng)鵬, 張聽盼, 史亞林 申請(qǐng)人:鄭州后羿制藥有限公司